220株铜绿假单孢菌的临床分布及耐药性分析

铜绿假单孢菌 (Pseudomonas aeruginosa, PA) 是普遍存在于水, 土壤和动植物的革兰氏阴性菌。铜绿假单孢菌极少对健康人致病, 通常在人体防御机制受到损伤的情况下 (如中性粒细胞减少症、医源性免疫抑制) 变成病原菌[1]。通过对全球不同地区大量菌株进行分析, 许多研究显示铜绿假单孢菌是最常见的医源性感染的致病菌之一[2]。由于环境、感染控制等诸多方面的原因, 铜绿假单孢菌造成的院内感染在亚太地区尤为普遍。近年来, 由铜绿假单孢菌引起的肺炎、脑膜炎、败血症等重症感染日益增多, 而临床对抗菌药的不合理应用使铜绿假单胞菌的耐药性日趋严重, 导致临床实践中对铜绿假单孢菌引起的感染治疗起来常常十分困难。因此对铜绿假单孢菌的分布和耐药性进行系统分析, 对于监测和控制铜绿假单孢菌引起的院内感染、指导临床治疗铜绿假单孢菌感染时选择有效的抗菌药有重要意义。本文分析了永州市人民医院在2009年7月至2010年1月期间采集的临床标本中分离出来的220株铜绿假单孢菌的临床分布情况及其对多种抗菌药的耐药性, 现报道如下。

1 临床资料

1.1 菌株来源

本调查中选用的220株铜绿假单孢菌分离自2009年7月至2010年1月期间, 我们从永州市人民医院各科室的135例住院病人的临床标本。菌株的临床标本来源见表1。来自同一病人相同部位多次分离的菌株以单株计算。

1.2 仪器和试剂

VITEK-32全自动微生物鉴定仪、ID-GNB鉴定卡和GNS-142卡购自法国Bio Mérieux Vitek公司。铜绿假单孢菌ATCC 27853标准菌株购自上海Tocan生物信息有限公司。13种抗菌药的药敏试纸, 包括阿米卡星 (amikacin) 、氨苄西林 (ampicillin) 、头孢唑林 (cefazolin) 、头孢噻肟 (cefotaxime) 、头孢他啶 (ceftazidime) 、头孢曲松 (ceftriaxone) 、环丙沙星 (ciprofloxacin) 、庆大霉素 (gentamicin) 、左氧氟沙星 (levofloxacin) 、呋喃坦啶 (nitrofurantoin) 、哌拉西林 (piperacillin) 、复方新诺明 (SMZ) 和妥布霉素 (tobramycin) , 均购自上海欧韦达仪器科技有限公司。

1.3 菌株鉴定

铜绿假单孢菌菌株鉴定使用VITEK-32全自动微生物鉴定仪和ID-GNB鉴定卡。同时使用了包括菌落形态、革兰氏染色、细胞色素氧化酶反应、绿脓素合成、葡萄糖氧化、精氨酸水解酶活性和42℃培养在内的鉴定方法。

1.4 药敏试验

药敏试验使用GNS-142卡测定220株铜绿假单孢菌对13种抗菌药的敏感性。药敏质控使用铜绿假单孢菌ATCC 27853标准菌株 (上海Tocan生物信息有限公司) 。

2 结果

2.1 220株铜绿假单孢菌在临床标本中的分布

220株铜绿假单孢菌均从永州市人民医院在2009年7月至2010年1月期间收治的住院病人临床标本中分离, 其临床标本来源的构成见表1。

2.2 220株铜绿假单孢菌在临床科室中的分布

在本文中被检测的220株铜绿假单孢菌广泛分布于临床各科室见表2, 其中呼吸内科所占比例最高 (23.2%) , 其次是外科ICU (20.5%) 和肿瘤内科 (13.2%) 。

2.3 220株铜绿假单孢菌的耐药性

对220株铜绿假单孢菌的药敏试验结果显示, 氨苄西林的耐药率最高 (100%) , 其次为呋喃坦啶 (99.5%) 、复方新诺明 (97.7%) 、头孢唑林 (91.8%) 。敏感率最高为阿米卡星 (81.4%) 、妥布霉素 (77.7%) 和左氧氟沙星 (70.9%) 。药敏试验结果详见表3。

3 讨论

铜绿假单孢菌在自然界分布广泛、对营养要求低、且能耐受多种生长环境。本次调查表明铜绿假单孢菌可以在一定条件下引起多部位感染。在检测的220株中来源于呼吸道分泌物 (痰液和咽拭) 的菌株占全部菌株的64.1%, 说明呼吸道是铜绿假单孢菌引起的院内感染主要部位。之前的国内外的相关报道[3]中呼吸道感染均占铜绿假单孢菌感染的50%以上, 本文的结果与其它国家和地区的调查结果基本一致。同时铜绿假单孢菌感染主要发生在呼吸内科、外科ICU和肿瘤内科, 共占全部菌株的56.9%, 表明免疫功能受损、医疗器械和抗菌药大量应用会增加铜绿假单孢菌成为致病菌的机会。

研究表明铜绿假单胞菌可以通过多种复杂机制 (包括降低外膜通透性、通过表达外输泵蛋白形成主动外排系统、外膜微孔蛋白表达缺失和产生β-内酰胺酶) 产生多重耐药[4]。本次对220株铜绿假单孢菌的耐药性调查显示铜绿假单孢菌可以对多种抗菌药产生耐药性。被检菌株对传统抗菌药 (氨苄西林、呋喃坦啶、庆大霉素和复方新诺明) 表现出高耐药率, 说明这些传统抗菌药已不适合用来治疗铜绿假单孢菌感染。值得注意的是, 对于临床常用的头孢类抗菌素, 被检菌株也表现出超过50%的耐药率 (头孢唑林最高91.8%, 头孢噻肟最低51.4%) , 高过先前国内外的类似调查结果[5]。笔者认为这可能与近年来临床大量使用头孢类抗菌药有关。在临床常被用来治疗铜绿假单孢菌感染的哌拉西林在本调查中显示出较高的耐药率 (48.2%) 。作为β-内酰胺类抗菌药, 哌拉西林易被β-内酰胺酶水解, 所以本文中对哌拉西林的耐药性很可能是因为铜绿假单孢菌产生的β-内酰胺酶[2]。在临床治疗中, 常将哌拉西林与舒巴坦 (sulbactam) 合用, 通过舒巴坦对β-内酰胺酶的不可逆抑制作用来增高铜绿假单孢菌对哌拉西林的敏感度。与β-内酰胺类、氨基糖苷类和头孢类抗菌药相比, 本调查被检菌株对奎诺酮类抗菌药左氧氟沙星表现出较高的敏感度 (70.9%) 。而被检菌株对阿米卡星和妥布霉素表现出的高敏感性 (分别为81.4%和77.7%) 对于临床治疗对其它药物耐药的多重敏感铜绿假单孢菌感染时的药物选择有指导意义。

本文通过对220株铜绿假单孢菌的临床分布和耐药性分析, 显示铜绿假单孢菌可以在临床多科室引起院内感染, 其对多种抗菌药的耐药性说明治疗铜绿假单孢菌感染仍然是临床实践中的一大挑战, 而减少抗菌药的不合理应用对于控制铜绿假单孢菌院内感染至关重要。

摘要：目的本调查试图通过分析220株铜绿假单孢菌的来源和耐药性来了解铜绿假单孢菌的流行和耐药情况。方法选用220株来自永州市人民医院2009年7月至2010年1月临床标本的铜绿假单孢菌, 分析其临床分布情况并用药敏试验测定其对13种抗菌药的耐药性。结果菌株来源分析显示铜绿假单孢菌可以在人体不同部位、临床不同科室引起院内感染, 而感染率最高的是呼吸道和抗菌药被大量使用的呼吸内科和外科ICU。药敏试验结果显示铜绿假单孢菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类和头孢类抗菌药不敏感, 而敏感度最高的是阿米卡星 (81.4%) 和妥布霉素 (77.7%) 。结论本次调查结果可以指导临床治疗铜绿假单孢菌感染的药物选择, 同时有助于了解和控制铜绿假单孢菌引起的院内感染的流行情况。

关键词：铜绿假单孢杆菌,临床分布,耐药性

参考文献

[1] 沈彩红, 张春花.240株铜绿假单胞菌的感染分布及耐药性分析[J].广西医学, 2008, 30 (11) :1743～1744.

[2] Bonomo R, Szabo D.Mechanisms of multi～drug resistance in acinetobacter species and Pseudomonas aeruginosa[J].Clin Infect Dis, 2006, 43 (4) :S49～S56.

[3] 周齐艳.265株铜绿假单胞菌临床感染的分布与耐药性分析[J].中国实用医药, 2008, 3 (27) :40～41.

[4] Cunha BA.Pseudomonas aeruginosa:resistance and therapy[J].Semin Respir Infect, 2002, 17 (3) :231～239.

[5] 王华生, 孙雪莹, 梁树森, 等.362株铜绿假单胞茵的感染分布及耐药性分析[J].湖南师范大学学报 (医学版) , 2007, 4 (3) :41～43.