复发性消化性溃疡患者98例HP检测及耐药性分析

幽门螺杆菌 (Hp) 是一种呈S形或弧形弯曲的革兰阴性杆菌, 是一种微需氧的革兰阴性杆菌, 是从胃黏膜中分离出来的一种弯曲样杆菌。大量研究证实该菌的感染是慢性胃炎和胃十二指肠溃疡的主要原因, 超过80%的带菌者并不会表露病征, 是胃黏膜相关淋巴组织 (MALT) 淋巴瘤和胃癌等疾病的主要致病因素。1994年世界卫生组织已将幽门螺杆菌定为胃癌的Ⅰ类致癌因子。因此, 控制Hp感染越来越受到临床医生的重视, 并且成为Hp研究领域的研究热点。近年临床采用质子泵抑制剂加上铋剂再加上一个或两个抗菌药的三联疗法或四联疗法, 治疗慢性胃炎、溃疡取得了满意效果。但是, 近几年来由于不断更新抗菌药的不合理应用以及用药的不规律性, 导致抗菌药耐药情况也十分显著。尽管控制Hp失败的原因有多种, 但是出现抗菌药耐药Hp菌株是导致其根除失败的主要原因[1,2]。该研究对3种常用抗菌药对Hp进行药敏试验, 并对其耐药特点加以分析, 期望了解抗菌药耐药更透彻, 确保临床合理用药减少耐药现象发生, 现选择该院2010年2月—2013年4月收治的复发性消化性溃疡患者进行分析, 报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择该院治疗的复发性消化性溃疡患者, 所有病例均经电子胃镜确诊, 男52例, 女46例, 患者年龄32~76 (45.6±12.4) 岁;病程10个该院12年, 平均病程 (3.65±1.24) 年;其中单纯消化性溃疡患者38例, 消化性溃疡合并胃炎患者60例。

1.2 HP菌株分离和鉴定

电子胃镜分别取胃窦部和体部黏膜的活检组织, 置于生理盐水中制成匀浆, 采用直接划线法接种于Skirrow选择性培养基上, 37℃微需氧 (5%O2, 10%CO2, 85%N2) 培养5 d, 对可疑菌落通过触酶试验、尿素酶试验、氧化酶试验进行鉴定, 阳性菌株-80℃保存。每次进行试验前复苏的HP菌株, 在布氏培养基上至少培养3代, 重新鉴定。

1.3 药敏试验

采用E-test法进行药敏试验, 拿灭菌接种环蹭取纯培养48~72 h的新鲜Hp菌株, 充分溶解在生理盐水中, 使HP菌液浓度为2×108 cfu/m L, 再使用无菌棉签沾取菌液, 均匀涂抹整个琼脂表面后静置, 等平板表面稍干后, 拿抗菌药E-test试条放置于琼脂表面, 保证试纸条与培养基充分接触, 确保该载体上的抗菌药立即且有效地释放入琼脂。最后将培养皿放回培养罐中, 湿度保持>95%, 温度保持在37℃, 微需氧环境下培养48~72 h后观察记录结果, 抑菌环、试纸条交界处的刻度即是MIC。

抗菌药敏感性判断标注依据中国药品生物制品鉴定所指定的抗菌药物试验判定标准及美国国家临床实验室标准化委员会 (NCCLS) 标准。

1.4 统计方法

采用SPSS 12.0统计软件进行统计分析, 计量数据以 (±s) 表示, 采用t检验。

2 结果

2.1 HP对抗菌药耐药率的比较

HP对甲硝唑、替硝唑、克拉霉素、阿莫西林的耐药率分别为39.3%、62.5%、12.5%和3.57%。Hp对替硝唑和甲硝唑的耐药率比较, 差异有统计学意义 (P<0.01) , Hp对甲硝唑和克拉霉素的耐药率比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。对阿莫西林耐药的Hp菌株仅培养出2株, 菌株较少, 未进行统计分析。见表1。

注:R-耐药S-敏感*P<0.05, #P<0.01。

3 讨论

幽门螺杆菌感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织 (MALT) 淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。流行病学调查, 在中国, 一般人群的HP总感染率高达56.22%[3]。青壮年的幽门螺杆菌感染率为30%左右, 50岁以上的人群中感染率为50%~80%, 在胃溃疡患者中幽门螺杆菌检出率高达80%;萎缩性胃炎患者检出率更高达90%。幽门螺杆菌感染使患胃癌的危险增加了2.7~12倍, 如果没有幽门螺杆菌感染, 至少有35%~89%的胃癌不会发生。因此, 抗HP治疗在临床工作中十分重要。抗Hp感染的一线方案中, 最常用的抗菌药有甲硝唑、替硝唑、克拉霉素、阿莫西林等。近些年来由于这些抗菌药物的广泛应用造成Hp耐药情况十分显著, 并有研究发现[4,5]HP耐药率有逐年上升的趋势。

该研究显示, 56株Hp临床分离株对甲硝唑、替硝唑、克拉霉素、阿莫西林的耐药率分别为39.3%、62.5%、12.5%和3.57%, 显示对阿莫西林较为敏感。与国内外文献报道相近。将Hp临床株对甲硝唑、替硝唑耐药率和对克拉霉素的耐药率进行比较, 发现差异有统计学意义。甲硝唑应被剔除抗Hp感染的一线方案中, 克拉霉素、阿莫西林应选为抗Hp的主要药物。不过, 近年来也有报道, Hp对这些抗菌药物出现耐药性。该组有5株克拉霉素耐药的菌株还同时表现为甲硝唑耐药, Hp对克拉霉素耐药及其对甲硝唑耐药性关系还要进一步研究。

总而言之, Hp菌株对常用抗菌药耐药性给临床抗Hp治疗带来了不小的困难。幽门螺杆菌穿透粘液层寄存胃上皮细胞表面, 对胃上皮细胞等起破坏作用, 有炎症细胞及炎症介质和免疫反应。提高疗效和防止菌株耐药产生已经成为临床研究和诊治中的重点。研制安全有效的抗HP疫苗、规范使用抗菌药, 制定合理的诊疗方案, 实施药敏试验等常规预防策略方法外, 不断发明新抗Hp的药物将是治疗Hp感染的重要方法。

摘要：目的 探讨复发性消化性溃疡患者幽门螺杆菌 (HP) 耐药规律, 为临床应用抗菌药提供依据。方法 选择该院2010年2月—2013年4月门诊及住院治疗的复发性消化性溃疡患者98例, 分别取胃窦部和体部黏膜的活检组织进行HP鉴定, 采用E-test法进行药敏试验。结果 复发性消化性溃疡患者分离鉴定出56株HP;HP对4种抗菌药的耐药性由强至弱依次为替硝唑、甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林。结论 复发性消化性溃疡患者HP感染率高, 且耐药性较高, 临床须严格掌握根除HP指征, 根据药敏试验结果选择抗菌药应用。

关键词：幽门螺杆菌,抗菌药,耐药

参考文献

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[3] 张万岱, 胡伏莲, 萧树东, 等.中国自然人群幽门螺杆菌感染的流行病学调查[J].现代消化及介入诊疗, 2010 (15) :265-270.

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