血小板假性减少原因分析及对策

2023-01-03

血细胞分析仪检测各种血细胞参数简单、快捷、重复性好, 但很多外界因素都会影响其检测的准确性。EDTA-K2抗凝可引起少数人血小板发生聚集导致EDTA依赖性的假性血小板减少[1], 同时还造成白细胞数计数的偏高, 引起临床误诊。

1 临床资料

1.1 检测对象

2007年1月至2009年6月EDTA-K2抗凝有血小板聚集的患者9例, 其中男4例, 女5例;年龄13~58岁, 平均为39岁。临床表现:均无皮肤粘膜出血点、紫癜等明显出血征象。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 血细胞分析仪为雅培CD--37005分类血细胞分析仪;Olympus公司生产的双目显微镜BH-2。

1.2.2 试剂 (溶血剂、稀释液、清洗液)

为仪器配套试剂, EDTA-K2真空抗凝管 (沧州永康医药用品有限公司) , 盐酸稀释液、草酸铵血小板稀释液及瑞氏染液。全血校准液及全血质控物由四川迈克科技有限公司提供。

2 方法

标本用CD---3700血液分析仪检测, 对血小板计数值低于50×109/L的418例患者的标本, 经仪器初检同时取同份血进行血涂片观察血小板分布情况, 发现明显不符的9例, 征得患者同意复检:手工血小板计数、血涂片观察血小板数量、形态及血小板聚集情况。同时取血检测其它有关检验如凝血功能、纤维蛋白溶解试验等。统计学处理数据以 (x-±s) 表示, 应用配对t检验。

3 结果

EDTA-K2抗凝血用CD-3700血细胞分析仪计数, 血小板计数值明显降低, 仅8×109~45×109/L, 手工血小板计数复查结果为135×109~268×109/L;仪器法血小板计数明显低于手工法, 差异均有显著性 (P<0.01) 。血涂片镜检对照分析:末梢血直接涂片显示血小板数量不少, 分布无明显异常, EDTA抗凝血涂片显示血小板明显聚集成簇 (每簇中血小板数大于15个) 甚至成片 (血小板数约50~100个) , 且多分布在片尾部, 极少见血小板单独存在。二者差异有显著性 (P<0.05) 。其它相关项目正常。

4 结语

CD-3700血细胞分析仪的检测原理是电阻抗法:当有血小板聚集或存在大血小板且不被溶血素溶解时, 仪器可误将聚集成团的血小板当作白细胞计数, 引起血小板的假性偏低。EDTA-K2偶尔会引起血小板的聚集, 可能与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关。Bragnani G等认为, EDTA可导致血小板活化, 因而改变血小板膜表面某种隐匿性抗原构象, 促使血小板与纤维蛋白原聚集成团, 出现使血小板互相凝集现象[2]。EDTA致血小板假性减少发生率极低, 约为0.07%~1%, 但一旦发生, 会导致临床进行大量的进一步检查, 甚至可能引起临床误诊、误治。血液放置时间不同也会引起血小板数量变化, 仪器法测定血小板数在采血后60min计数结果最准[3]。另外, 采血的过程及血液和抗凝剂的比例都很重要, 采血速度慢、多次穿刺和血液比例过高都可能引起血小板凝集, 堵塞仪器而无法测得真实的结果。对于血小板计数值有疑问的标本, 直接用EDTA抗凝血标本进行血涂片经瑞氏染色后, 显微镜下观察血小板分布情况, 如见血小板大量聚集或血小板分布并不减少者, 可视为可疑病例并进一步复检确诊。当出现PTCP (抗凝剂依赖的假性血小板减少症患者, 可在血常规样品抽血后1H内加入6.5mg/m L丁安卡那霉素能有效解离凝集的血小板, 作用机制可能与抑制患者血小板膜表面CD62P、PAC—1和Ig G的表达有关, 此法有助于解决EDTA所致的血小板计数的假性减少[4]。

摘要：目的探讨EDTA-K2抗凝血致血小板计数假性减少原因分析及避免措施。方法采用CD—3700血细胞计数仪检测EDTA-K2抗凝血, 对血小板计数值异常偏低的418例标本, 血涂片观察血小板分布情况, 对其中发现的涂片与计数明显不符的9例患者再次抽血进行手工血小板计数、末梢血涂片。结果EDTA-K2抗凝血用CD-3700血细胞分析仪血小板计数为8×109～45×109/L, 手工血小板计数复查结果为135×109～268×109/L;仪器法血小板计数明显低于手工法, 差异均有显著性 (P<0.01) 。血涂片镜检对照分析抗凝血涂片显示血小板明显聚集成簇。结论EDTA-K2抗凝血个别患者可能会发生血小板聚集引起血小板假性减少, 应引起同行们的高度重视, 做好复检工作。

关键词：EDTA-K2,血小板聚集,假性减少,对策