甘草质量评价论文提纲

论文题目：甘草新品种“国甘1号”的质量评价研究

摘要：甘草（RADIX GLYCYRRHIZAE）系指豆科植物甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch.）、胀果甘草（G.inflata Batal.）、光果甘草（G.glabra Linn.）的干燥根及根茎（中华人民共和国药典,2015）。其中甘草应用最为广泛,为常用中药材,素有“十方九草”之称。近几十年来,由于人们大量的采挖,野生甘草资源越来越少。面对巨大的市场需求和即将枯竭的野生资源现状,为保障市场供应,国家开始大力提倡发展甘草种植业。随着各地人工栽培甘草规模的不断扩大,甘草种子的供应与质量也相应降低,成为制约甘草产业发展的限制因素。因此,选育甘草优良品种并推广应用,是当前发展高产优质甘草迫切需要解决的关键技术问题。为此,中国中药有限公司经过十余年的研究,在国家经费和自筹经费的支持下,选育出甘草新品种“国甘1号”,甘草产量提高15%以上,已于2014年通过甘肃省种子管理局的认定,成为国内第一个通过认定的甘草高产新品种。但目前对于新品种“国甘1号”的研究仅限于对药材产量和有效化学含量的研究,在一定范围内证明甘草药材的产量和含量上的优势,并未对这一新品种药用植物进行全面的研究。本课题从种子质量、农艺性状、药材性状、有效化学成分含量以及遗传学差异等五个方面对“国甘1号”进行全面研究,并以多批次不同来源甘草作为比较对象,探究其在各个方面的质量差异与评价。（1）“国甘1号”与不同来源甘草种子的比较。以种子皮色、千粒重、长宽厚、发芽率作为观察指标,比较各种子样品的质量。（2）“国甘1号”与不同来源甘草的农艺性状比较。将10批不同甘草种子种植于同一环境下,以一年生甘草植株作为观察对象,对植株样品的10个数量性状和7个质量性状进行方差分析、聚类分析等,比较“国甘1号”与其他来源甘草农艺性状的差异。（3）“国甘1号”与不同来源甘草药材性状指标的比较。对达到生长年限的甘草药材,测定外皮颜色、根长、芦头直径、单株根鲜重、药材产量,并进行方差分析和聚类分析。（4）“国甘1号”与不同来源甘草药材指标成分含量检测。采用2015版《中国药典》项下规定的甘草酸和甘草苷含量检测方法,对不同来源甘草药材进行分析,综合评价其内在质量的品质差异。（5）“国甘1号”与不同来源甘草遗传差异分析。基于DNA条形码技术的甘草属鉴别。使用ITS、ITS2、psbA-trnH、matK和rbcL序列对甘草属样本进行扩增与测序,找出鉴别甘草的最佳序列。采用SSR分子标记方法,对“国甘1号”和不同来源甘草进行分子鉴定探索性研究,以期发现新品种和不同来源甘草遗传特性方面的差异。本论文初步取得如下研究结果:（1）“国甘1号”种子与不同来源甘草种子形态不同,具有较明显的鉴别特征,发芽率最高为85.25%,平均值为59.19%。与6批不同来源甘草种子相比较,“国甘1号”种子的千粒重、长宽高等性状指标数据偏低,可以作为性状鉴别特征。（2）“国甘1号”的一年生植株整齐度较高,长势旺盛。与其他来源甘草植株相比,“国甘1号”的株高、株幅、叶柄长、叶长、叶宽均为最大,且聚类分析将“国甘1号”单独聚为一组。因此,“国甘1号”甘草地上部分长势较突出,优于其他来源甘草。（3）“国甘1号”甘草药材性状一致性较高。通过测定19批“国甘1号”与不同来甘草药材性状指标,结果显示“国甘1号”的产量排第4,为1.8kg,根长排第2为65.35cm,平均值为58.58cm,芦头直径排第3为16.3cm,平均值为14.6cm,一致性较高。（4）“国甘1号”药材指标成分含量较高。通过检测三年生“国甘1号”成熟甘草药材与不同来源甘草的甘草酸和甘草苷含量,结果显示“国甘1号”甘草酸含量排第1为3.88%,平均值为3.00%,甘草苷含量排第四为1.12%,平均值为1.00%。（5）找出鉴别甘草的较理想DNA条形码序列为psbA-trnH与ITS序列。设计并筛选20对SSR引物,未找到理想的可区分“国甘1号”的特异性引物。按照农作物新品种鉴定要求必须做DUS（Distinctness,Uniformity,Stability）检测,但药材新品种鉴定目前为止没有任何一个品种做出了DUS鉴定,还需逐步开展新品种选育遗传差异分析方面的研究。

关键词：甘草;“国甘1号”;种子;农艺性状;有效成分含量;SSR

学科专业：药学（专业学位）

致谢

中文摘要

Abstract

前言

1 立题依据

2 研究目标和技术路线

2.1 研究目标

2.2 技术路线

文献综述

1 甘草资源及市场发展现状

1.1 甘草资源现状

1.2 甘草市场现状

2 甘草新品种选育研究进展

3 甘草品质评价研究进展

3.1 传统评价

3.2 现代生物技术评价

第一章 “国甘1号”与不同来源种子质量评价

1 实验材料

1.1 种子材料

1.2 实验工具

2 实验方法

2.1 千粒重测定法

2.2 长宽高测定法

2.3 发芽率测定

3 结果与分析

3.1 种子质量指标数据分析

3.2 种子质量指标相关性分析

3.3 种子质量指标聚类分析

4 小结与讨论

第二章 “国甘1号”与不同来源甘草地上部分农艺性状比较

1 实验材料

1.1 样品材料

1.2 实验仪器

2 实验方法

2.1 实验田方法

2.2 测定方法

2.3 统计方法

3 结果与分析

3.1 各不同来源甘草植株整齐度分析

3.2 甘草地上部分农艺性状指标的分析

4 小结与讨论

第三章 “国甘1号”与不同来源甘草药材性状比较

1 实验材料

1.1 样品材料

1.2 仪器材料

2 实验方法

2.1 数据收集与测定方法

2.2 统计方法

3 结果与分析

3.1 甘草药材性状指标方差分析

3.2 甘草药材性状指标聚类分析

4 小结与讨论

第四章 “国甘1号”与不同来源甘草化学成分含量比较

1 实验材料

1.1 样品材料

1.2 仪器与试剂

2 实验方法

2.1 含量测定方法

2.2 统计方法

3 实验结果与分析

3.1 数据分析

3.2 相关性分析

4 小结与讨论

第五章 基于DNA条形码的甘草属分子鉴别

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果与分析

2.1 序列信息及鉴定成功率

2.2 不同序列种内及种间差异分析

2.3 不同序列barcoding gap检验

2.4 NJ树分析

3 小结与讨论

第六章 “国甘1号”与其他来源甘草遗传差异分析

1 实验材料

1.1 样品材料

1.2 实验试剂

1.3 实验仪器和耗材

2 实验方法

2.1 DNA的提取

2.2 DNA浓度及纯度检测

2.3 引物设计

2.4 扩增与检测

2.5 结果与分析

3 小结与讨论

第七章 总结与展望

1 总结

2 展望

参考文献