蠲痹汤家兔颈椎间盘突出模型细胞因子TNF-α的影响

蠲痹汤出自《杨氏家藏方》, 原方功效:益气和营, 祛风除湿。主治风寒湿痹, 肢体关节疼痛肩臂痛重, 举动艰难, 项背拘急等症。此方用黄芪益卫气, 而以防风、羌活之善走者辅之使之补而不滞, 行而不泄, 且两功并进, 相得益彰;归、芍和营血, 而以姜黄之走血行气, 除寒而燥湿者佐之。该试验为证明蠲痹汤在临床治疗神经根颈椎病中的作用, 试验时间为2012年7月—2012年12月, 对健康清洁级大白兔40只进行分析, 现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将健康清洁级大白兔40只, 雌雄不分, 体重2.13~3.05 kg左右, 随机分为正常组 (A组) 、造模组 (B组) 、蠲痹汤组 (c组) 和地塞米松组 (D组) , 每组10只。

1.2 造模方法

氯胺酮腹腔麻醉 (0.1 g/kg) 麻醉成功后, 术区备皮, 固定实验动物。常规碘酒及酒精消毒后, 铺无菌单, 以颈椎后路4-5棘突间隙为中心, 取颈椎后路正中直切口长约8 cm, 切开皮肤, 皮下组织, 钝性分离椎旁肌肉, 自动拉钩牵开, 咬除T4~5棘突双侧椎板和关节突, 在手术放大镜下充分暴露双侧颈椎神经根, 将20mg左右的硅胶片置于双侧颈4神经根出硬膜囊的腋部, 缝扎固定, 逐层缝合。

1.3 实验药物及给药途径

蠲痹汤主要成分当归10 g, 黄芪30 g, 羌活10 g, 姜黄10 g, 白芍20 g, 防风15 g, 甘草5 g, 红花10 g, 玄胡15 g与地塞米松注射液分别于术后7 d, 地塞米松组, 每只以颈椎4和5间隙为中心外敷地塞米松溶液, 蠲痹汤组每只以颈椎4和5间隙为中心外敷蠲痹汤, 绷带包扎固定, 隔天换药1次。

1.4 实验所用主要试剂及设备

人TNF-ct试剂盒由大连泛邦生物试剂有限责任公司提供, 抗CIM、CD8单隆抗体 (美国DKO公司) , 酶标仪 (Clini Bio 128, 奥地利) , 流式细胞仪 (EPICSXI, 4CLR FLOWCENTRE, 美国BECK-MAN COULTER公司) 。

1.5 观测指标

该实验通过双抗体夹心ABC-ELISA法测定正常家兔颈椎椎间盘组织和突出椎间盘组织中的肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 含量并进行比较。

1.6 统计方法

应用SPSS17.0软件对数据进行分析, 计量资料采用均数加减标准差 (±s) 表示, 。

2 取材方法

于用药后7、14、21 d, 每组随机取5只家兔, 氯胺酮腹腔麻醉 (0.1 g/kg) 满意后, 固定在操作台上, 消毒取材部位后, 取神经根周围局部组织在4 c条件下取材称重, 以不锈钢电动匀浆器制备组织匀浆4 000 r离心5 min, 取上清液作样本内含物测定。

3 结果

该实验证明蠲痹汤可以有效减少患病家兔神经根周围的TNF-α含量, TNF-α测定:如表1所示, 造模组较正常组TNF-α测定含量升高明显, 说明其是神经根型颈椎病的重要介质。C、D组随治疗时间的延长而TNF-α有所下降, 差异有统计学意义 (P<0.01, t=2.74) 而C组的TNF-α含量较D组的含量低, 差异有统计学意义 (P<0.05, t=3.97) , 表明地塞米松的作用优于蠲痹汤。

3 讨论

颈椎病是骨科常见病, 多发病, 是颈肩部痛的常见原因。颈椎间盘退行性的改变是其发病的和发展的最基本原因。颈椎间盘退变使得椎间隙狭窄, 关节囊和韧带松弛, 脊柱活动时稳定性明显的下降, 进而出现椎体, 关节突关节, 钩椎关节, 前后纵韧带, 黄韧带及项韧带等变性及增生, 钙化。目前, 大量的实验数据显示[8]TNFα与神经根型颈椎病的发病有着十分密切的关系。TNFα的生物学活性占TNF总活性的70%~95%[8], TNFα在颈椎病中的影响已经被广大学者认识。本试验中的数据表明, 在造模组中TNFα高表达, 这一点与原有的TNFα是致病因素的观点相吻合, 正常的颈椎神经根周围的TNFα检出量极少。通过使用蠲痹汤药液进行外敷后, 造模的颈椎神经根周围的TNFα的检出量明显减少, 并且P<0.01, 这说明了蠲痹汤对于减少TNFα是有临床意义的, 这样可以推断出可以减轻神经根型颈椎病的临床症状。但是实验数据表明, 地塞米松组的TNFα检出量较蠲痹汤组较少更为明显。同样说明, 地塞米松对于神经根型颈椎病同样有效, 并且疗效会优于蠲痹汤, 在临床的实际工作中, 这样的结论同样被证实。但是糖皮质激素的并发症较多, 限制了地塞米松的长期和大剂量的使用。而蠲痹汤属于中药制剂, 对于患者长期服用无临床不良反应发生。

临床上对于神经根型颈椎病的治疗主要有颌枕带牵引, 颈托和围领固定, 推拿按摩和理疗。手术治疗虽然对于重症的神经根型颈椎病有效, 但是手术创伤大, 对术者要求较高, 故手术还没有被绝大多数患者接受。因而怎样解除患者的痛苦, 是广大医务工作者为之奋斗的目标。药物治疗有着明显的局限性, 本病系慢性疾病, 所使用非甾体抗炎药, 肌肉松弛剂及镇静剂均属对证治疗, 长期使用上述药物会出现副作用。当局部有明显固定压痛点时可以注射皮质类固醇制剂。祖国医学认为神经根型颈椎病与老年体虚, 长期劳损, 外感风寒湿邪有关。肾主骨, 肝主筋, 中年以后, 肝肾渐衰, 肾虚不能主骨, 肝虚无以养肝, 筋骨失养, 长期劳损, 气血运行不畅, 血淤气滞。风寒湿邪痹阻经络等因素杂至而引起颈椎间盘突出的发生发展。神经根型颈椎病的主要症状为疼痛、麻木, 当属中医痹证范畴。本病发病多由于长期低头伏案工作, 气机不畅, 致使痰瘀凝于项背, 经脉不通, 不通则痛, 从而导致颈椎病。治疗当以化痰通络为大法, 不论哪一种因素引起的颈椎间盘突出的病理, 结果是一致的。即为血淤气滞, 不通则痛。本方功效:益气和营, 祛风除湿。主治风寒湿痹, 肢体关节疼痛肩臂痛重, 举动艰难, 项背拘急等症。然邪之所入, 无不先自营卫、经络、肌肉而及筋骨。此方用黄芪益卫气, 而以防风、羌活之善走者辅之使之补而不滞, 行而不泄, 且两功并进, 相得益彰;归、芍和营血, 而以姜黄之走血行气, 除寒而燥湿者佐之。通过该组实验表明, TNFα是神经根型颈椎病的发病的诱发因素, 在神经根型颈椎病中出现高表达, 蠲痹汤在该组实验中证明可以明显地降低TNFα含量, 所以我们有理由相信, 通过坚持使用蠲痹汤加减, 可以明显减轻临床上神经根型颈椎病的症状, 对神经根型颈椎病所致的肩背部疼痛, 上肢无力症状会有缓解。

摘要：目的 探讨TNF-α在家兔颈椎间盘突出模型中的作用及蠲痹汤对其的影响。方法 将4只家兔随机分为正常组 (A组) 、造模组 (B组) , 蠲痹汤组 (C组) 和地塞米松组 (D组) , 观察神经根周围局部组织中TNF-α的含量。结果 模组中的TNF-α含量较正常组明显增加 (P<0.01) , C组、D组较B组含量显著下降 (P<0.01) 。表明家兔颈椎间盘突出模型细胞因子TNF-α明显增加, 可能是神经根型颈椎病中的潜在始动或促进因素, 而D组能显著降低神经根局部中TNF-α的含量, 说明蠲痹汤作用部分是通过抑制炎性细胞因子的活性实现的。结论 TNFα是神经根型颈椎病的发病的诱发因素, 在神经根型颈椎病中出现高表达, 蠲痹汤可以明显地降低TNFα含量。

关键词：神经根型颈椎病/中医药疗法,蠲痹汤,肿瘤坏死因子

参考文献

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