雷公藤多甙片对Ig肾病模型大鼠血清中IL-2,IL-6及TNF-α含量的影响

2022-09-11

1 资料与方法

1.1 一般资料

健康的SD大鼠48只, 清洁级, 周龄为6~8周, 体重 (180±10) g。随机分为4组, 正常对照组、模型组、雷公藤小剂量组、雷公藤大剂量组。

1.2 药品和试剂

牛血清白蛋白 (BSA) 和脂多糖 (LPS) , 雷公藤多甙片。

1.3 模型的建立

运用脂多糖 (LPS) +四氯化碳 (CCL4) +牛血清白蛋白 (BSA) 联合造模, 具体如下:除正常对照组外, 其余3组运用:BSA (400mg/kg, 隔日灌胃) ×6周+LPS (0.05 rag/次/只, 第6、8周尾静脉注射各1次) +蓖麻油 (0.5m L/次/只+ccl4 0.10m L/次/只, 皮下注射/周) ×9周[3]。从第8州开始, 雷公藤小剂量组:每天灌胃给予雷公藤多甙片溶液625mg/kg (即1.25mg/d/只) ;共给药4周。空白组和模型组给予等容积的蒸馏水。

1.4 检测方法

1.4.1 检测指标在大鼠处死之前, 收集大鼠的尿液检测尿中蛋白含量, 红细胞;眼睛采血用来检测肌酐和尿素氮的含量。

1.4.2 组织处理

造模后12周取血处死, 4℃离心, 取血清-20℃保存待用。取部分肾组织保存于多聚甲醛液中, 用于HE染色和病理观察。

1.4.3 检测方法RIA检测血清中促炎细胞因子IL-2、TNF

α和IL-6的含量, 具体操作按试剂盒的说明书进行。

1.4.4 统计方法软件用SPSS 13.0, 用多因素方差分析, 实验结果以均数±标准差 (x-±s) 表示。

2 结果

(1) 雷公藤多甙片对大鼠Ig A肾病蛋白含量、血清肌酐和尿素氮的影响, 结果如下 (表1) 。模型组大鼠Ig A肾病中蛋白含量, 血清肌酐和尿素氮较正常组的显著升高 (P<0.001, P<0.05, P<0.05) ;与模型组比较, 雷公藤多甙片显著降低大鼠Ig A肾病中蛋白含量, 血清肌酐和尿素氮 (P<0.0 1, P<0.0 5, P<0.0 5) 。

(2) 雷公藤多甙片对大鼠Ig A肾病中IL-2, IL-6及TNF-α含量的影响, 结果如 (表2) 。与正常组比较, 模型组血清中细胞因子IL-2、TNF-α和IL-6含量显著升高 (P<0.05, P<0.05, P<0.01) ;而雷公藤多甙片显著降低了大鼠Ig A肾病血清中IL-2, IL-6及TNF-α的含量 (P<0.0 5, P<0.0 5, P<0.0 1) 。

3 结果

在我国, Ig A肾病的发病率已经占原发性肾小球疾病的26%~34%, 肾小球系膜细胞 (MC) 增殖及系膜区基, 严重威胁着人们的生命健康。从免疫学的角度治疗治疗Ig A肾病, 成为目前临床研究的方向之一。在本次实验中采用应用LPS+BSA+CCL联合造模.模型与正常组比较均出现了不同程度的蛋白尿、血尿和肾功损害;肾脏病理方面结果也较为理想, 模型对照组大鼠肾脏系膜区都有较强的Ig A沉积, 与文献报道相一致[1]。

表1雷公藤多甙片对大鼠Ig A肾病蛋白含量、血清肌酐和尿素氮的影响 (x-±s)

IL一6主要是由巨噬细胞、T细胞、B细胞等多种细胞产生的一种糖蛋白, 是众多细胞因子网络中的重要因子之一, 与自身免疫疾病发生和转归密切相关。在肾脏不仅肾小球系膜细胞产生IL一6[2], 其他一些固有细胞如内皮细胞、问质细胞等也可产生IL一6。在系膜增殖性的肾脏病变中, 免疫复合物的沉积刺激IL-6产生, IL一6又可进一步刺激细胞外基质的分泌, 成恶性循环, 加重肾脏病变[3]。白细胞介素-2 (IL-2) 是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子, 具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。IL-2在机体免疫应答、免疫调节中具有重要作用。近年研究表明, IL-2在免疫调节网络中处于中心地位。TNF-α参与了Ig A肾痛患者肉眼血尿、蛋白尿的发生, 并与肾组织病变程度相关, 是病情加重的一个重要因素[4]。

本次研究发现雷公藤多甙片在临床上作为免疫抑制剂的到广泛的应用。研究证明其对细胞免疫和体液免疫均有抑制作用, 具有抗炎、抑制免疫、抑制肾脏系膜细胞及基质增生, 能较好的控制肾炎蛋白尿。本次研究发现雷公藤多甙片能够显著的抑制大鼠Ig A肾病血清中IL-2, IL-6及TNF-α含量, 降低了蛋白含量, 血清肌酐和尿素氮的含量, 减轻了大鼠Ig A肾病的病理改变。雷公藤多甙片对促炎细胞因子的抑制作用可能是其治疗Ig A肾病作用机理之一。

摘要：IgA肾病是肾小球系膜区以IgA沉积为主的原发性肾小球疾病, 是一种自身免疫性疾病。大量的研究资料也表明, 本病与患者的免疫功能为乱关系密切, 但其发病机理还在进一步的研究中, 在机体的免疫应答及免疫调节中IL-2, IL-6及TNF-α的作用及其重要[1～2]。本次实验主要是观察雷公藤多甙片对IgA肾病患者血清中IL-2, IL-6及TNF-α的影响, 进一步探讨雷公藤多甙片治疗IgA肾病的发病机制。

关键词：IgA肾病,雷公藤多甙