肝细胞生物学论文

[摘要]目的探讨醛糖还原酶（AKR1B10蛋白）在肝癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化技术检测89例肝细胞癌组织及26例肝良性病变组织的AKR1B10蛋白表达，并检测89例肝癌患者的术前AFP、AFU水平，分析AKR1B10蛋白在肝细胞癌组织中的表达及与患者术前血清AFP、AFU水平的关系。今天小编给大家找来了《肝细胞生物学论文(精选3篇)》的文章，希望能够很好的帮助到大家，谢谢大家对小编的支持和鼓励。

肝细胞生物学论文 篇1：

LPS诱导肝细胞L02释放HMGB1蛋白的研究

人单核巨噬细胞系u937细胞购自中科院上海细胞生物学研究所细胞库，非致瘤性人源性肝细胞系L02细胞由本室保存。

作者：戴霞红 赵树山 萧梅芳等

肝细胞生物学论文 篇2：

AKR1B10 蛋白在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

[摘要] 目的 探讨醛糖还原酶（AKR1B10 蛋白）在肝癌组织中的表达及临床意义。 方法 采用免疫组化技术检测89例肝细胞癌组织及26例肝良性病变组织的AKR1B10 蛋白表达，并检测89例肝癌患者的术前AFP、AFU水平，分析AKR1B10 蛋白在肝细胞癌组织中的表达及与患者术前血清AFP、AFU水平的关系。 结果 AKR1B10 蛋白在肝细胞癌组织中的阳性表达率显著高于肝良性病变组织中的阳性表达率（P<0.05）。在肝细胞癌组织中，AKR1B10 蛋白阳性表达率为84.3%，显著高于患者术前血清AFP的阳性率（68.5%）和血清AFU的阳性率（70.8%）。 结论 AKR1B10 蛋白在肝细胞癌组织中的表达率显著高于肝良性病变组织，在肝细胞癌组织中的阳性率显著高于患者术前血清AFP、AFU的阳性率，为肝细胞癌的早期诊断提供了一个好的指标。

[关键词] AKR1B10 蛋白；肝细胞癌；临床意义

Expression and its clinical significance of AKR1B10 protein in hepatocellular carcinoma

ZHAO Jinqiang1 ZHANG Weiqin2 LIU Anding3

1.Clinical Laboratory， Central Hospital of Huzhou in Zhejiang Province， Huzhou 313000， China； 2.Department of 11 Wards， Central Hospital of Huzhou in Zhejiang Province， Huzhou 313000， China； 3.Experimental Medicine Center， Tongji Hospital， Tongji Medical College， Huazhong Universiy of Science and Technology， Wuhan 430074， China

[Key words] AKR1B10 protein； Hepatocellular carcinoma； Clinical significance

肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一，具有恶性程度高、病情发展快、预后差及死亡率高的特点，早发现、早诊断、早治疗是提高肝细胞癌治疗效果的关键。目前，主要依靠血清AFP、AFU指标及影像学检查对该病诊断，但有学者指出部分肝癌患者血清AFP、AFU检测值呈阴性或低值[1]，1998 年曹德良博士等在原发性肝癌组织中分离出AKR1B10蛋白[2]。Penning 和Fukumoto 等研究发现，AKR1B10 蛋白在肝细胞癌和肺癌组织中过度表达[3，4]，提示该蛋白可能作为肝细胞癌诊断的又一标记物。为探讨AKR1B10 蛋白在肝细胞癌早期诊断中的意义，本文分析比较了AKR1B10 蛋白在肝细胞癌组织和肝良性病变组织中的表达，并分析其在肝细胞癌组织中的阳性表达率和患者术前血清AFP、AFU水平的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2013年3月～2014年5月在我院普外科住院治疗的89例肝细胞癌患者，所有患者均经病理组织切片找到癌细胞确诊，其中男52例，女37例，年龄21～73岁。26例肝良性病变患者为同期住院治疗患者，其中肝血管瘤12例，肝脓肿7例，肝囊肿5例，肝细胞腺瘤2例，男14例，女12例，年龄19～69岁。

1.2 方法

采用免疫组化技术检测89例肝细胞癌组织及26例肝良性病变组织的AKR1B10 蛋白表达，并检测89例肝细胞癌患者的术前AFP、AFU水平。所有操作按照实验室SOP标准进行。

1.3 仪器与试剂

AFP检测仪器为美国雅培公司生产的ARCHITECT-i2000，试剂由美国Abbott Laboratories公司提供。AFU检测仪器为日本日立公司生产的HITACHI 7600-120，试剂由北京利德曼生化股份有限公司提供。采用EnVision法免疫组织化学染色法，鼠抗人AKR1B10单克隆抗体一抗购自美国Abcam公司，采用EnVision法进行AKR1B10免疫组织化学染色法。

1.4 统计学分析

数据分析使用SPSS 16.0软件包。计量资料以（x±s）表示，组间比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AKR1B10 蛋白在肝细胞癌和肝良性病变中的表达

免疫组化检查结果显示，89例肝细胞癌组织中75例AKR1B10蛋白表达阳性，阳性率为84.3%。26例肝良性病变组织中2例AKR1B10 蛋白表达阳性，阳性率为7.7%。肝细胞癌组织AKR1B10阳性表达率显著高于肝良性病变组织（χ2=6.87，P<0.05）。

2.2 肝细胞癌患者术前血清AFP、AFU水平与肝良性病变患者血清AFP、AFU水平的比较

见表1。肝细胞癌术前组AFP水平显著高于肝良性病变组（t=43.97，P<0.05）；肝细胞癌术前组AFU水平显著高于肝良性病变组（t=23.01，P<0.05）。

表1 肝细胞癌组术前血清AFP、AFU水平与肝良性病变组比较（x±s）

2.3 AFP（μg/L）与AFU（U/L）阳性标准

根据Gambarin-Gelwanen等[5]文献，本文以AFP>20 μg/L为阳性，AFU>40 U/L为阳性。肝细胞癌患者肝组织AKR1B10 蛋白表达阳性率和术前血清AFP、AFU阳性率的比较，见表2、表3。89例肝细胞癌患者中有75例肝组织AKR1B10 蛋白表达阳性，阳性率为84.3%。有61例患者术前血清AFP阳性，阳性率68.5%，差异有统计学意义（χ2=5.08，P<0.05）。89例肝细胞癌患者中有75例肝组织AKR1B10 蛋白表达阳性，阳性率为84.3%。有63例患者术前血清AFU阳性，阳性率70.8%，χ2检验二者有显著性差异（χ2=6.27，P<0.05）。

表2 肝细胞癌患者肝组织AKR1B10 蛋白表达阳性率和术前血清AFP阳性率的比较

表3 肝细胞癌患者肝组织AKR1B10 蛋白表达阳性率和术前血清AFU阳性率的比较

3讨论

目前，肝细胞癌的早期临床诊断的主要血清标志物是AFP和AFU。其中AFP是目前公认早期诊断和筛选肝癌的指标，成人合成很低，原发性肝细胞癌时，其合成升高，高水平的AFP和AFP持续增高常常作为诊断肝细胞癌的有力证据之一。但是它在小肝细胞癌和低水平AFP的肝细胞癌患者血清中几乎全部是阴性。而在慢性肝炎、肝硬化、胃癌和胚胎性癌等患者血清中也非特异性地升高[6]。AFU在肝细胞癌时增高，诊断敏感性为75%，特异性为90%。对AFP阴性的肝细胞癌及小肝细胞癌，AFU的阳性率均在70%以上[7]。所以需要发现更有前途的手段包括分子生物学标记方法以助该疾病的早期诊断[8]。

AKR1B10是细胞质内的可溶性单体氧化还原酶，能催化多种外源性和内源性的醛和酮依赖NADH的还原反应，属于醛酮还原酶超家族的一员[9]。国外文献研究表明，AKR1B10蛋白主要存在于胚胎肝组织和肝细胞癌组织中，在正常成年肝脏组织中不表达[10]。近年来，又有相当多的国外文献研究显示，AKR1B10在肺癌、胰腺癌等多种癌组织中高表达[11～13]。

本文实验数据表明，89例肝细胞癌组织中有75例AKR1B10 蛋白表达阳性，阳性率为84.3%。26例肝良性病变组织中有2例AKR1B10 蛋白表达阳性，阳性率为7.7%。表明AKR1B10 蛋白在肝细胞癌组织中的阳性表达率显著高于肝良性病变组织。这和国内学者相关研究报道基本一致[14]。AKR1B10 蛋白表达阳性可作为诊断肝细胞癌的一个有力依据。

本文以AFP>20 μg/L为阳性，AFU>40 U/L为阳性，89例肝细胞癌患者中有61例术前AFP阳性，占68.5%。与徐桂秋等[15]研究结果相近。有63例患者术前血清AFU阳性，阳性率70.8%；有75例 AKR1B10蛋白表达阳性，阳性率为84.3%，在肝细胞癌时，AKR1B10蛋白阳性率要显著高于患者术前血清AFP、AFU的阳性率。这提示AKR1B10蛋白在诊断肝细胞癌时要优于血清AFP和AFU。

依据本文的实验数据，作者认为医师可以把AKR1B10 蛋白作为诊断肝细胞癌的一个有力依据，尤其是在患者血清AFP、AFU都是阴性，而AKR1B10 蛋白表达阳性，医师应做更进一步的检查和密切关注患者的病情进展，及时确定或排除肝细胞癌的诊断，采取有效措施处理病情。

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[15] 徐桂秋，林伟. 血清AFU、AFP、GGT联合检测在原发性肝癌诊断中的意义[J]. 齐齐哈尔医学院学报，2012，33（15）：2008-2009.

（收稿日期：2014-06-20）

作者：赵金强 张卫琴 刘安定

肝细胞生物学论文 篇3：

JNK信号通路胞外生长因子途径在肝再生中作用研究

摘要：为了研究JNK信号通路对肝再生过程的影响，本文选取该信号通路中胞外生长因子与RTKs结合激活CRK/CRKL或RAS途径对大鼠再生肝的肝细胞影响变化做进一步研究。通过基因芯片检测和基因表达谱分析，发现胞外生长因子途径中途径1-3促进肝细胞的增殖、分化，途径4-10促进肝再生进展和终止阶段肝细胞有丝分裂和生存，而途径11-17可能抑制进展和终止阶段肝细胞的生长和增殖。

关键词：JNK信号通路 胞外生长因子 肝再生 肝细胞

1 前言

根据JNK信号通路各途径的作用和相关性，将该信号通路分为42条途径、5大类：生长因子与RTKs结合激活CRK/CRKL或RAS，炎性介质、激素等激活G蛋白，紫外放射等刺激，炎性细胞因子与其受体结合。本文选取胞外生长因子与RTKs结合激活CRK/CRKL或RAS途径（图1途径1-17）对大鼠再生肝的肝细胞影响变化做进一步研究。

2 材料和方法

大鼠2/3肝切除模型制备和肝细胞的分离、鉴定，芯片检测、数据分析和大鼠肝细胞的JNK信号通路相关基因及肝再生相关基因确认参考Li等[1]方法进行。RT-PCR方法参考Wang等[2]方法进行。

3 结果

查相关生理活动途径资料表明，302个基因参与JNK信号通路，大鼠Rat Genome 230 2.0基因芯片检测得知，JNK信号通路中胞外生长因子通过RTKs介导17条途径中有52个基因在再生肝的肝细胞中发生了有意义表达变化即肝再生相关基因，其中表达上调基因42个，表达下调基因8个，表达上/下调基因2个（至少在大鼠肝再生的10个时间点的一个时间点表达上调、一个时间点表达下调，简称上/下调）。

4 讨论

JNK信号通路分为42条途径，其中胞外生长因子通过RTKs介导17条途径。一方面，RTKs活化后通过募集受体蛋白CRK和CRKL的SH3结构域激活HPK1，构成途径1-3。通常认为，大鼠肝再生手术后2-6h为启动阶段、6-72h为进展阶段、72-168h为终止阶段。肝切除手术后，肝细胞特异性生长因子受体水平的升高会增强cyclin D1的表达和G1/S过渡，促进肝细胞增殖。本文检测到，28个编码胞外生长因子的基因中，FGF7等12个基因发生上调，FGF22和FGF10发生下调。56个编码RTKs的基因中，EPHB2等23个基因发生上调，LIFR和KDR发生上下调，MET和EGF发生下调。编码HPK1的基因MAP4K1在整个肝再生上调。提示大鼠肝再生中，途径1-3主要通过FAS等36个表达上调的基因促进肝细胞的增殖、分化。

另一方面，活化的RTKs磷酸化SHC，将胞外信号传递到Ras。Ras激活Rac1和CDC42，后者通过SH3结构域的POSH蛋白结合，激活MKK4/7，活化JNK（途径4）。活化的Rac1和CDC42也可分别激活MLK3、MEKK1、MEKK4，后三者均可激活MKK4/7→JNK（途径5，7，8）。Rac1和CDC42激活后，还可活化PAK，后者通过磷酸化MEKK1激活MKK4/7→JNK（途径6）。Ras也可直接活化MEKK1，激活MKK4/7→JNK（途径9）。此外，Ras通过激活GCKR，后者激活MEKK1，进入途径6，构成途径10。活化的RTKs还能通过PI3K激活Ras，激活MKK4/7→JNK，接入途径4-10，构成途径11-17。PI3K活化后能够促进细胞生长和增殖，对构建细胞骨架十分重要。PAK活化后主要参与细胞骨架调节、有丝分裂、细胞生存和血管生成等生物学功能，JNK激活后能通过影响PAK的表达调控人肝细胞的增殖[3]。本文研究表明，3个编码SHC的基因中，SHC2发生上调。6个编码Ras的基因中，MRAS发生下调。4个编码PAK的基因中，PAK1、PAK3和PAK4表达上调。12个编码PI3K的基因中，PIK3C2G和PIK3R1表达下调，PIK3R3表达上调。编码GCKR的基因MAP4K5在进展阶段下调。推测在大鼠肝再生中，途径4-10通过SHC2等4个表达上调的基因促进进展和终止阶段肝细胞有丝分裂和生存。而途径11-17可能通过PIK3C2G、PIK3R1和MRAS等三个表达下调的基因抑制进展和终止阶段肝细胞的生长和增殖。

参考文献

[1]Li JW，Wang GP，Fan JY，et a1.Eight paths of ERK1/2 signalling pathway regulating hepatocyte proliferation in rat liver regeneration[J].J Genet.2011，90（3）：435-442.

[2]Wang GP，Xu CS.Reference gene selection for real-time RT-PCR in eight kinds of rat regenerating hepatic cells[J].Mol Biotechnol，2010，46（1）：49-57.

[3]Hui L，Zatloukal K，Scheuch H，et al.Proliferation of human HCC cells and chemically induced mouse liver cancers requires JNK1-dependent p21 downregulation[J].J Clin Invest.2008，118（12）： 3943-3953.

作者：陆琼　马玲