血细胞分析仪简介

2024-04-19

血细胞分析仪简介(精选8篇)

篇1:血细胞分析仪简介

血细胞分析仪简介

血细胞分析仪又叫血液细胞分析仪、血球仪、血球计数仪等,是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,随着近几年计算机技术的日新月异的发展,血细胞分析的技术也从三分群转向五分群,从二维空间进而转向三维空间,而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术,如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。

一、发展历史

20世纪初期,莫尔德兰采用光电器进行血细胞计数;1947年拉格克兰茨采用高效光电倍增管加上光电扫描技术及暗视野照明法进行学习吧检测分析,克服了莫尔德兰光电法中存在的问题,可试用于临床;1958年,库尔特在前人的基础上,采用电阻率变化与电子技术相结合的方法,研制出性能比较稳定、操作比较方便的血液分析仪,称为库尔特电子血球计数器。20世纪60年代,以库尔特原理为基础的各种类型血液分析仪应运而生并广泛应用,逐步替代了传统的显微镜常规操作。70年代,在库尔特原理上开发出了以激光鞘流技术为基础的各类血液分析仪。80年代初推出了双通道仪器,除可直接计数血小板外,还能得到淋巴细胞总数和百分数等14个参数。90年代以来,有的学者根据幼稚细胞和成熟细胞膜的结构差异进行细胞分类,特别是对幼稚细胞的检测,为血细胞计数仪开创了新的领域。基本原理

根据血细胞信号的获取方式不同,其原理可以归纳为5种:光电式、电容式、电阻式、离心式和激光散射式。

二、检测方法

1.体积、电导、激光散射法(VCS)

这是Beckman-Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法,它集三种物理学检测技术于一体,在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞,然后加入稳定剂来中和红细胞溶解剂的作用,使白细胞表面、胞浆和细胞体积保持稳定不变。然后应用鞘流技术将细胞推进到流动细胞计数池(Flowcell)中,接受仪器VCS三种技术的检测。

V代表体积(Volume)测量法,是采用经典的库尔特专利技术,用低频电流准确分析细胞体积。体积是区分白细胞亚群的一个重要的参数,它可有效区分体积大小差异显著的淋巴细胞和单核细胞。

C代表高频电导性(Conductivity),采用高频电磁探针原理测量细胞内部结构间的差异,也是该公司的专利技术。细胞膜对高频电流具有传导性,当电流通过细胞时,细胞核的化学组份可使电流的传导性产生变化,其变化量可以反映出细胞内含物的信息。该参数可用来区分体积相近而内部性质不同的细胞群体,如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞,由于它们的细胞核特性不同而在传导性参数上有所区别。

S代表激光散射(Scatter)测量技术,采用氦氖激光源发出的单色激光扫描每个细胞,收集细胞在10°~70°角度内出现的散射光(MALS)信号。该激光束可穿透细胞,探测细胞内核分叶状况和胞浆中的颗粒情况,提供有关细胞颗粒性的信息,可以区分出颗粒特性不同的细胞群体。例如细胞内颗粒粗的要比颗粒细的散射光更强,因此可以用于区分粒细胞中的嗜中性、嗜酸性和嗜碱性三种细胞。

2.电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术

典型机型如SysmexSE-9000/SE-9500/XE-2100等。这类仪器共有四个不同的检测系统,将标本用特殊细胞染色技术处理后再应用RF和DC技术对白细胞进行分类和计数。其共采用如下四个检测系统:

嗜酸性粒细胞检测系统:该系统是利用电阻抗方式计数。血液经分血器分血后部分与嗜酸性粒细胞计数溶血剂混合,特异的溶血剂使嗜酸性粒细胞以外的所有细胞均溶解或萎缩,这种含完整嗜酸性粒细胞的液体经阻抗电路计数。

嗜碱性粒细胞系统:该系统检测原理与嗜酸性粒细胞相同,不同的是其溶血剂只能保留血液中的嗜碱性粒细胞。

淋巴、单核、粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)检测系统:该系统采用电阻抗与射频联合检测方式,使用作用较温和的溶血剂,对核及细胞型态影响不大。在内外电极上存在直流和高频两个发射器。由于直流电不能达到细胞质及核质,而射频电能透入胞内测量核大小和颗粒多少,因此这两种不同的脉冲信号的个数及高低综合反映了细胞数量、大小(DC)和核及颗粒密度(RF)。由于淋巴细胞、单核细胞及粒细胞的大小、细胞质含量、核形态与密度均有较大差异,故可通过扫描得出其比例。幼稚细胞检测系统:该系统也是利用电阻抗方式计数。其原理是由于幼稚细胞上的脂质较成熟细胞少,在细胞悬液中加入硫化氨基酸后,由于脂质占位不同,结合在幼稚细胞上的硫化氨基酸较成熟细胞多,且对溶血剂有抵抗作用,故能保持幼稚细胞的形态完整而溶解成熟细胞,即可通过阻抗法检测。3.激光散射和细胞化学染色技术

在白细胞分类上,仪器采用两个通道进行,一个为过氧化酶检测通道,另一个为嗜碱细胞检测通道。

过氧化酶反应(peroxidase,POX)是血涂片染色的一个常用细胞化学染色方法,用于鉴别原始细胞与成熟的粒细胞,鉴别粒细胞与非粒细胞。染色后的细胞内无蓝黑色颗粒出现为阴性反应,出现细小颗粒或稀疏样分布的黑色颗粒为弱阳性反应,出现黑色粗大而密集的颗粒为强阳性反应。过氧化物酶主要存在于粒细胞系和单核细胞系中,各类白细胞对过氧化物酶的反应是这样的:早期的原始粒细胞为阴性,早幼粒以后的各阶段都含有过氧化物酶,并随着细胞的成熟过氧化酶含量逐渐增强,中性分叶核粒细胞会出现强阳性反应,嗜酸性粒细胞具有最强的过氧化物酶反应,嗜碱粒细胞不含此酶呈阴性反应。在单核细胞系统,除早期原始阶段外,幼稚单核和单核细胞会出现较弱的过氧化物酶反应。淋巴细胞、幼稚红细胞、巨核细胞等都为过氧化物酶阴性反应。过氧化酶检测通道就是根据这个原理设计的,它检测每一个通过流动计数池中的白细胞,经过激光照射所产生的过氧化酶散射光吸收率,来当然试剂和辅助试剂均进行了改良。1)过氧化酶最强阳性的嗜酸性粒细胞; 2)过氧化酶强阳性的嗜中性分叶核粒细胞; 3)体积较大、过氧化酶弱阳性的单核细胞; 4)体积较小、过氧化物酶阴性的淋巴细胞;

5)体积大于淋巴细胞且过氧化物酶阴性的未染色大细胞,此类细胞增加提示幼稚或原始的各类细胞可能出现。

在嗜碱细胞通道中采用的检测原理是:专用的嗜碱细胞试剂将除了嗜碱细胞以外的白细胞除去细胞膜,使其裸核化并体积变小,仅将嗜碱性粒细胞保持原有状态,体积明显大于其他类的白细胞。4.多角度偏振光激光散射技术

美国雅培公司(ABBOTT)推出的血细胞分析仪,在白细胞分类中采用独特的多角度偏振光散射(MAPSS)技术,其所生产的血细胞计数仪从CELL-DYN 3000,3200,3500,3700,4000,以及Sapphire(蓝宝石),在白细胞分类上均采用了MAPSS技术。该技术基本原理是细胞在激光束的照射下,在多个角度都产生散射光,仪器在四个角度的四个检测器将接收到的相应的散射光信号,然后经过微处理器分析处理,将各类细胞安置在散点图上的相应位置,并计算出白细胞分类结果。

多角度偏振光散射白细胞分类技术(Multi—Angle Polatised Scatter Separation of white cell,MAPSS)其原理是一定体积的全血标本用鞘流液按适当比例稀释。其白细胞内部结构近似于自然状态,因嗜碱性粒细胞颗粒具有吸湿的特性,所以嗜碱性粒细胞的结构有轻微改变。红细胞内部的渗透压高于鞘液渗透压而发生改变,红细胞内的血红蛋白从细胞内游离出来,而鞘液内的水分进入红细胞中,细胞膜的结构仍然完整,但此时的红细胞折光指数与鞘液的相同,故红细胞不干扰白细胞检测。在鞘流系统的作用下,样本被集中为一个直径30μm的小股液流,该液流将稀释的血细胞单个排列,然后通过激光束,激光照射于细胞上,在各个方向都有其散射光出现。

1)0°为前向角散射光,可粗略地测定细胞大小;

2)10°为狭角散射光,可测细胞结构及其复杂性的相对特征; 3)90°垂直光散射,主要对细胞内部颗粒和细胞成分进行测量。4)90°为消偏振光散射,基于颗粒可以将垂直角度的偏振激光消偏振的特性,将嗜酸细胞从中性粒细胞和其它细胞中分离出来。

5)这四个角度同时对单个白细胞进行测量和分析后,即可将白细胞划分为嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞5种。ABBOTT的五分类法定量很有意思,不用传统的体积定量,而是采用数量定量,每次计数时完成10000个细胞测定即停止。

三、分类结构 1.分类

⒈)按自动化程度分:半自动血细胞分析仪、全自动血细胞分析仪和血细胞分析工作站、血细胞分析流水线;

⒉)按检测原理分:自动化血液细胞分析仪按其工作原理主要可分为电阻型、激光型和运用多项高新技术的综合运用型(应用流式细胞术,细胞化学染色,特殊细跑质去除法等)。电阻型血液分析仪

血液按一定比例稀释后经负压吸引通过仪器的一个微孔小管,由于血细胞与稀释液相比是相对不良导体,当每个血细跑通过微孔时均挤代等体积的稀释液在电路上形成一短暂的电阻而导致电压的变化,产生相应的脉冲信号并经放大、甄别后被累加记录。脉冲数被转换为细胞数量;脉冲的高低与细胞体积大小成正比,经计算机处理得出各种血细胞的数量、血细胞体积大小的平均数、变异系数、占全血体积的百分比和体积大小分布直方图等。一般仪器分为红细胞/血小板和白细胞/血红蛋白两个通道,白细胞/血红蛋白通道需加入溶血剂使红细胞破坏后测定血红蛋白、白细胞数量和粗略分类(按溶血后白细胞体积大小分出两类或三类白细胞)。

由于电阻型血液细胞分析仪操作简便、快速、分析参数较多、价格便宜,目前已在国内普遍使用。激光型血液分析仪

血液按一定比例稀释后形成一个极细的液流穿过激光束,每个血细胞被激光照射后产生光散射并被光电倍增管接收。细胞的前向角散射与细胞的体积大小有关、侧向角(或高角)散射与细胞的内部结构、颗粒性质等有关,细胞数量则与细胞通过激光束时光散射的脉冲次数相同。各种检测信号被放大、甄别后经计算机处理可得到各种血细胞的数量和体积大小的平均数、变异系数、占全血体积的百分比及体积大小分布直方图等.血红蛋白测定同电阻型仪器.白细胞可分为三类细胞。

激光型比电阻型仪器稳定,不易受外电场的干扰,但激光管寿命有限。

综合型血液分析仪

此类仪器是多种先进的细胞分析技术的高度综合应用,对血细胞的分析参数更多,结果也更准确。如Coulter VCS血细胞分析仪就采用了体积分析、高频传导和激光散射等多项技术,Technicon H*3血细胞分析仪则采用了激光流式细胞分析、细胞化学染色、细胞分光光度术等多项技术。Technicon H*3的分析参数可达四十余项,对红细胞除可作一般分析外尚可对单个细胞内血红蛋白含量、浓度、细胞大小不等、高低色素性变化做出定量描述,而且可测定网织红细胞的数量、形态、体积、血红蛋白含量及浓度等.对白细胞可分出三类5种并提示幼稚细胞数量,还可对核象左移、核象右移、过氧化物酶染色强度作定量描述,而且还能分析淋巴细胞亚群等。

此类综合型仪器的性能代表了当今血液细胞分析仪的最新发展趋势,但价格昂贯,在临床常规血液学检查方面尚难普及。

⒊按仪器分类白细胞的水平分:二分群、三分群、五分群、五分群+网织红血细胞分析仪。2.基本结构

各类型血细胞分析仪结构各不同。但大都由机械系统、电学系统、血细胞检测系统、血红蛋白测定系统、计算机和键盘控制系统等,以不同的形式组成。3.机械系统

各类型的血细胞分析仪虽结构各有差异,但均有机械装置(如全自动进样针、分血器、稀释器、混匀器、定量装置等)和真空泵,以完成样品的吸取、稀释、传送、混匀,以及将样品移入各种参数的检测区。此外,机械系统还发挥清洗管道和排除废液的功能。电学系统

电路中主电源、电压元器件、控温装置、自动真空泵电子控制系统以及仪器的自动监控、故障报警和排除等。4.血细胞检测系统

国内常用的血细胞分析仪,使用的检测技术可分为电阻抗检测和光散射检测两大类。

⑴电阻抗检测技术:由信号发生器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成。这类主要用在二分类或三分类仪器中。

⑵光散射检测技术:主要由激光光源、检测区域装置和检测器组成。

⑶激光源:多采用氩离子激光器,以提供单色光。

⑷监测区域装置:主要由鞘流形式的装置构成,以保证细胞混悬液在检测液流中形成单个排列的细胞流。

⑸检测器:散射光检测器系光电二极管,用以收集激光照射细胞后产生的散射光信号;荧光检测器系光电倍增管,用以接受激光照射荧光染色后细胞产生的荧光信号。这类检测技术主要应用于“五分类、五分类+网织红”的仪器中。5.血红蛋白测定系统

由光源(一般为540nm波长)、透镜、滤光片、流动比色池和光电传感器组成。6.计算机和键盘控制系统

使检测过程更加快捷、方便。

四、注意事项

为了保证使用血细胞分析仪得出的结果能够尽量反映病人的真实情况,在使用时必须注意以下几方面:

1.血样:由于静脉血受外界因素影响较小,成份比较稳定,检测结果准确度高重复性好,因此除婴儿外,建议取血者均应采用静脉血。如果采集未梢血时,注意不可局部过度挤压,避免血液中混入大量的组织液,而且易激活凝血系统产生局部凝血,导致检测结果的误差;第一滴血由于细胞成分不稳定应弃掉,用第二滴血进行检测。

2.抗凝:使用拘橼酸盐抗凝剂时间过长易结晶,细胞形态易发生变化,影响计数结果的准确性;草酸盐易使血小板产生凝集,并可使白细胞形态发生变化,影响计数结果及分类;而肝素抗凝过量易引起白细胞凝集和血小板减少;EDTA-2Na较EDTA-2K的可溶性低,血小板凝集的可能性大。因此国际血液学标准委员会(ICSH)1993年发表的文件中建议使用EDTA-2K作为血细胞分析仪的抗凝剂,用量为1.5~2.2mg/ml血。

3.采血后用塞子密闭,室温保存不超过6小时。4.稀释:稀释器、吸样管要经过校准。吸血后吸样管外的血液要完全擦干净。血液稀释后要尽快测定,否则易引起“稀释性溶血”。

5.混匀:检测前混匀很重要,如果无旋转式混匀器应颠倒混匀至少8次。

6.试剂:血细胞分析仪对试剂的要求非常严格,要求有严格的渗透压标准、稳定的导电率、高标准的纯净度以及对仪器管道和阀路无腐蚀作用。因此溶血剂、稀释液及清洗剂等最好选用原厂配套产品。

7.白细胞分类:首先必须明确,迄今为止,世界上无论多先进的血细胞分析仪,进行的白细胞分类都只是一种过筛手段,并不能完全取代人工镜检分类。要坚决纠正有些单位用了血细胞分析仪就丢掉镜检的错误思想。

8.质量控制:血液分析必须建立严格的质量控制制度,才能保证结果的可靠性。

篇2:血细胞分析仪简介

一般正常情况下,红细胞的数量和血红蛋白含量的比例大致是相对固定的。但在发生贫血的情况下,它们之间的比值就会发生变化,如发生低色素性贫血时,血红蛋白含量的降低就会十分明显,红细胞和血红蛋白的比例就会升高。所以在看化验单时,一定要首先注意这两项的数值。

白细胞计数(WBC)和白细胞分类计数(DC) :血液中的白细胞包括中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞。化验单中的白细胞计数(WBC)是指测定血液中白细胞的总数,而分类计数是指各种白细胞的百分比。由于各种白细胞的生理功能不同,所以在不同的病理情况下,可引起不同类型白细胞的数量发生变化。一般而言,我们只要掌握白细胞计数、中性粒细胞(N)和淋巴细胞(L)的分类就可以了,因为在平常的生活中,医生是根据白细胞的数量来判断身体是否有感染发生,然后再根据白细胞分类来判断是什么类型的感染,应该使用什么类型的药物。一般而言,如果中性粒细胞的数量增多是细菌性的感染,淋巴细胞数量增多是病毒性的感染。

血小板计数(PLT) :我们都知道,血小板的主要功能的凝血,如果没有它,我们就可能因一个小伤口而流血不止,甚至出现生命危险了。

篇3:血细胞分析仪校准系数变化分析

血细胞分析是临床最常用的检验项目之一, 检验科对血细胞分析仪依赖性越来越强, 其结果的准确性直接影响对患者的诊治。因此, 《医学实验室质量和能力认可准则 (ISO15189:2007) 》[1]和卫生部颁发的《医疗机构临床实验室管理办法》[2]两个文件, 要求对血细胞分析仪等设备进行校准。我院实验室自2008年购置了SYSMEX XT-1800i全自动血细胞分析仪后, 先后按照《血液分析仪校准规范化的建议》[3]和《血细胞分析的校准指南》[4]进行校准。本文介绍XT-1800i全自动血细胞分析仪2013年第1次校准的流程并对2008年~2013年共10次校准后各参数校准系数的变化进行回顾和分析, 供实验室工作人员了解仪器的状况。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

日本SYSMEX公司生产的XT-1800i血细胞分析仪, 厂家配套试剂, 具有溯源性的SYSMEX校准物SCS-1000[5], 每6个月校准1次。质控品分别为e-check (for XT) 高、中、低3个水平。

1.2 方法

1.2.1 校准前的准备

执行仪器保养和功能检查, 检查校准环境条件 (18~25℃) , 运行空白计数, 确认仪器的背景计数、精密度及携带污染均在说明书规定的范围内。

1.2.2 XT-1800i手动模式

使用SYSMEX配套校准物SCS-1000, 校准白细胞 (WBC) 、红细胞 (RBC) 、血红蛋白 (Hb) 、平均红细胞体积 (MCV) 和血小板 (Pl T) 。

1.2.3 校准品的准备

(1) 从冰箱中取出2瓶SCS-1000, 放置30 min, 恢复室温 (18~25℃) 。

(2) 保持瓶子直立状态, 用双手轻轻搓动20 s, 然后将其颠倒后再搓动20 s以上。

(3) 轻轻来回倒转12次使其充分混合均匀, 确保所有细胞都已悬浮起来。

(4) 进行分析前在平面上静置15 s, 使泡沫散去。

(5) 将2管校准物合在一起, 混匀后再分装于2个管内, 其中一管用于校准物的检测, 另一管用于校准结果的验证。

1.2.4 校准物的检测

手动模式, 使用仪器维修菜单中模式选项的“质控血模式”, 连续测定11次, 第1次检测结果不用, 以防止携带污染。将第2~11次的各项检测结果记录于EXCEL表格中。计算均值、均值与校准物定值间的偏差 (偏差= (均值-定值) /定值×100%) 。其偏差与血细胞分析校准的判定标准 (表1) 数据进行比较, 再依据《血细胞分析的校准指南》[4]判定标准进行判定。2013年第1次校准发现Plt偏差>3.0%, 需要调整校准系数 (表2) , 其余项目校准系数不需调整。

1.2.5 校准结果的验证

将用于校准验证的校准物充分混匀, 在仪器上重复检测11次, 去除第1次结果, 计算第2次~11次检测结果的均值及均值与校准物定值间的偏差, 再次与表1中的数值对照。如各参数的差异全部≤第1列数值, 证明校准合格。如达不到要求, 须请维修人员进行检修。本次校准各参数的差异全部<第1列数据, 证明校准合格 (表3) 。

1.2.6 自动模式的校准

(1) 确认XT-1800i手动模式得到正确校准。

(2) 取新鲜血在手动模式状态下检测11次, 去除第1次结果, 计算第2次~11次检测结果的均值, 计算均值, 然后在自动模式下检测11次, 计算均值, 计算自动模式和手动模式的偏差, 自动模式和手动模式结果偏差须小于仪器规定允许范围[6], 否则校准自动进样模式系数, 再做实验确认。本次校准自动模式和手动模式的偏差符合仪器规定允许范围, 无需调整校准系数 (表4) 。

1.3 校准系数变化分析

对2008年~2013年共10次手动模式校准后各参数校准系数的变化进行回顾和分析, 见图1。

2 讨论

由表2~4检测结果及图1各次校准系数变化图可知, 血细胞分析仪使用一段时间后各参数会发生漂移, 应按照中华人民共和国卫生行业标准《血细胞分析仪的校准指南》要求, 每半年正确校准1次[7]。我院实验室每年都严格按照要求进行校准, 但目前实验室血细胞分析仪的校准主要依赖于仪器制造厂商工程师, 因此今后要求设备负责人应当努力掌握规范化的血细胞分析校准方法。

通过对校准系数的变化进行分析, 2008年第1次校准为仪器安装完毕后进行的, 发现WBC校准系数发生变化, 表明新安装的仪器由于搬运、安装及检测环境的变化, 其校准系数也会发生变化, 因此使用前必须进行校准。5年间, 除RBC校准系数未发生变化, 其余项目校准系数均发生过变化, 变化较大的为MCV, 说明仪器在长期使用过程中, 其校准系数发生了变化, 需要定期校准。本实验室使用具有溯源性的SCS-1000校准物校准XT-1800i, 使血细胞分析仪的检测结果更加准确, 也更有临床诊断价值[8,9]。

摘要:目的 介绍XT-1800i全自动血细胞分析仪的校准流程, 并对校准系数的变化进行回顾性分析, 以了解仪器的状态。方法 按照《血细胞分析校准指南》对血细胞分析仪进行校准, 分析了2008年2013年共10次校准后各参数的变化。结果 2013年第1次校准发现血小板 (Plt) 偏差>3.0%, 需要调整校准系数, 其余项目校准系数不需调整。5年间, 除红细胞 (RBC) 校准系数未发生变化, 其余项目校准系数均发生过变化, 变化较大的为平均红细胞体积 (MCV) 。结论 血细胞分析仪使用一段时间后各参数会发生漂移, 需要定期进行校准。

关键词:血细胞分析仪,校准品,校准系数,血细胞

参考文献

[1]中国合格评定国家认可委员会.医学实验室质量和能力认可准则 (ISO15189:2007) [S].

[2]中华人民共和国卫生部.医疗机构临床实验室管理办法[S].2006-02-27.

[3]丛玉隆.中华医学会检验分会血液学、体液学专家委员会.血液分析仪校准规范化的建议.血液学体液学检验与临床释疑[M].北京:人民军医出版社, 2004:294-298.

[4]WS/T 347-2011, 血细胞分析的校准指南[S].

[5]Kutzner M.Metrological traceability of values assigned to Sysmex SCS-1000 haematology calibrator[J].Sysmex J Inter, 2002, 12:49-55.

[6]杨春英, 谭群英, 罗卫江.HORIBA ABX Pentra DF120五分类血液分析仪校准实例[J].贵州医药, 2013, 37 (3) :252-253.

[7]李芳文, 钟兰君.甘肃省血细胞分析仪校准情况调查分析[J].甘肃中医学院学报, 2012, 29 (6) :100-101.

[8]Kutzner M, Rowan RM.Traceability of haematology results-an industry view[J].Sysmex J Inter, 2001, 11:1-7.

篇4:血细胞分析仪的校准及质控

【关键词】血细胞分析仪;校准;误差

全自动血细胞分析仪快速、方便、精确度高,是人工无法替代的阻抗法三分群。血液分析原理是溶血素破坏RBC后,根据白细胞体积大小通过计数通道时所产生的脉冲大小来对WBC进行分类计数。显微镜下计数WBC是在油镜下通过观察细胞大小、形态、染色质的结构特点,胞浆的着色特点,有无核仁等对白细胞进行分类。不同的仪器直方图是不同的,但只要是白细胞直方图出现R1、R2、R3报警,都要进行形态学复检。异常白细胞直方图只是让检验者粗略判别各类白细胞比例或有无明显异常细胞,进而进行形态学复查时注意这些变化的真正意义,而不能仅凭白细胞直方图的变化来进行诊断。血液分析仪只对典型的血液病做出提示性诊断,以便作进一步检查。如果使用不配套的试剂导致直方图不典型或对报警掌握不够,就会忽视血涂片造成漏检甚至误检。

1资料与方法

1.1样本来源:健康人及临床患者新鲜抗凝全血(EDTA-K2,抗凝真空负压采血管采集)。

1.2方法:仪器校准:用校准参考仪器MEK7222-K型血细胞分析仪之进口原装配套校准品对其进行校准,再在该仪器上将健康人新鲜抗凝全血连续测定11次,弃去第1次结果,计算其余10次各指标之均值作为新鲜血参考定值。用此定值新鲜血代替校准品对BC-5500及ABX-60两台血细胞分析仪进行校准(样本采集到校准完成4小时内结束)。

1.3比对试验:选取临床患者高、中、低值5份新鲜抗凝全血在上述校准后的各台仪器上与其他样本一同测定(测平行样取均值)。以MEK7222-K型血细胞分析仪所测结果为标准,分别计算BC-5500及ABX-60两台血细胞分析仪所测结果之偏差(CV%)。

2结果

用新鲜血校准的BC-5500、ABX-60两台血细胞分析仪之检测结果与校准参考仪器MEK7222-K分析仪之检测结果配对比较t检验,均为P>0.05,表明差别无显著性意义;RDW最大CV值为3.8%,PLT最大CV值为6.9%,MPV最大CV值为14.6%,其余各项指标CV值均<3.0%,五项基础指标之偏差均小于卫生部临检中心允许的可接受范围:WBC<2.8%、RBC<2.5%、HGB<2.0%、HCT<2.6%、PLT<6.9%。

3讨论

血细胞分析是临床最常用的实验室检测指标,其结果的准确与否直接影响到多种疾病的诊疗。全自动血细胞分析仪由于计数准确,精密度高,操作简便、快速,因而发展迅速,已逐渐取代传统手工方法,成为临床实验室的主要检测手段。但由于生产血细胞分析仪的厂家多,各自使用的测定原理和方法不尽相同,导致其测定结果及参考范围有所差异。国内各医院使用不同厂家和型号的血细胞分析仪已成为普遍现象,致使分析结果呈现不同程度的差异,给临床跟踪观察与对比带来困难。

血细胞分析结果只有直接或間接地溯源至参考方法,才能保证检测结果的正确性和不同仪器间结果的可比性。血细胞分析仪校准品是权威部门认可的标准物质,只能用于与之配套的同一品牌型号的仪器,由于其价格昂贵、有效期短、进口入关手续复杂而不能及时获得等问题,使其难以在实验室推广。

所谓自动血细胞分析仪实际上就是一台比较器,它将实测数据与校准数据进行比较,继而得出检测标本的分析结果。由此可见,校准物在仪器测定结果的准确是否上起到决定性作用。最好的校准品是经ICSH推荐的参考方法定值的新鲜人体血液:①氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白(HGB)。②微量红细胞压积法测定红细胞比容(HCT)。微量计数板手工计数RBC和WBC。③相差显微镜计数血小板,该新鲜血适用于各种型号仪器的校准。有报道可购买一台性能最佳血细胞分析仪之配套校准品校准该仪器,再以该仪器作为校准参考仪器取得新鲜血各项参数用于其他多台仪器的校准。上述比对结果显示:用新鲜血校准的BC-5500及ABX-60两台血细胞分析仪与校准参考仪器MEK7222-K分析仪各参数间进行配对资料t检验,均为P>0.05,表明差别无显著性意义;五项基础指标之CV值均小于卫生部临检中心允许的可接受范围:尤以WBC、RBC、HGB、HCT四项指标的符合性最好。因EDTA-K 2抗凝血中,血小板体积不稳定,随时间延长而增大,可能是导致PLT、MPV偏差较大的主要原因。

实验结果证明,用配套校准品校准一台性能最佳血细胞分析仪,再用新鲜血在该仪器上取得参数后去校准其他多台分析仪可取得满意结果,该方法既简便易行又经济实用。

参考文献

[1]彭明婷,谷小林,等.不同方法校准血液分析仪结果比较.中华检验医学杂志,2000,23(1):35-37.

[2]叶应妩,王毓三,申子瑜,等.全国临床检验操作规程.南京:东南出版社,2006:47-81.

[3]顾可梁,陈军浩,谷俊侠,等.医学实验诊断学进展.南京:东南大学出版社,2000:47-53.

[4]展风霞,王谦,杨晓静,等.新鲜全血代替效准物在多系列血液分析仪上的应用.临床检验杂志,2003,21(3):167.

[5]彭明婷,申子瑜,等.血细胞分析溯源体系的建立及有关问题的探讨.中华检验医学杂志,2004,27(3):132-133.

篇5:血细胞分析仪

1. 奥巴克斯(Abacus) : Abacus、Abacus Junior

2. 雅培(Abbott) : CELL-DYN1200、CELL-DYN 1500、CELL-DYN 1600、CELL-DYN 1700、CELL-DYN 3000、CELL-DYN 3200、CELL-DYN 3500、CELL-DYN 3700、CELL-DYN 1800

3. ABX : Micros 60、Micros 45、Micros vit、Micros CRP、Pentra60、

Pentra120、Pentra80

4. 拜耳(Bayer) : Advia 60、Advia 70、Advia 120、Advia 2120

5. 倍爱康(Biochem) : Spirit

6. 百特(BT) : 2100

7. Careside : H

8. 库尔特(Coulter) : Act diff / diff II、Gens、Md2、Maxm、Stks、Act

5Diff、HmX

9. 丹能(Danam) : Excell 18、Excell 22

10. Hema : Screen 18、Star II、Star III、Hs Compact

11. HL : 2200、2400

12. 法国Hycel : Celly、Hemacell、Diana5

13. MC : 1200、1200-2

14.日本 光电(Mek) :Mek -5216K、Mek -6108K、Mek -6318K、Mek -8118K、Mek -7222

15. Medicon : 4000

16. 麦道尼克 (Medonic) : CA530、CA570

17. Melet : Ms4、Ms9、MS9-3H、Ms4-5、Ms9-3

18. 深圳迈瑞(Mindray) : Bc2000、Bc3000、Bc1800、Bc2200、Bc2800、Bc3200、Bc2300、Bc5500、Bc2600、Bc2900、Bc5100、Bc5500、Bc2100、Bc5380

19. 日本东亚(Sysmex) : F800、F820、K4500、Kx21、Poch-100i、Sf3000、Kx21N、Poch-80i、Xt1800i、Xt200i、Xs800i、Xs1000i

20. Swelab : Ac900Eo、Ac920Eo、Ac970Eo、Ac900Eo+、Ac920Eo+、Ac970Eo+

21. 日本CIS : F820、 FC-717、CA-800、FC-1000

22. 上海三科 : JXJ402

23. 吉泰(G.TEC) : CA-800、Ermax-18

24. 华亮: HA-618

25.深圳康尔特: KET-

26. 上海宁星: Mythic 18

27. 山东兰桥(Lanqiao): CA-500、CA-900、CA980

28.桂林 优利特(Uritest): 3000、3100

29. 特康(Tecom): Tek-II Mini、Tek3600、Tek-5000、Tek-II pius、Tek(五分类)

30. 爱尔玛(Erma):GT-1200

31. 深圳美思康(Maxcom): MC-600、MC-6200,MC-6500(三分类,自动进样)

32. 雷杜: RT-7600

33. 深圳桑瑞: KEK X0860

34. 深圳普康(Procan): PE6000、PE6300、PE6800

2. 35.南昌百特(HL):HL-1300plus、HL-2400plus、HL-3325plus/3325、HL-

篇6:血细胞分析仪的校准与质控

梅敏,帅 虎,李海珠,梁洁玲

随着血细胞分析仪越来越多的选择,同一实验室可能存在不同品牌的血细胞分析仪,由于各厂家采用的技术及标准均有一定的差异,因此为保证实验内部不同品牌的血细胞分析仪具有统一性,建立一套完善的校准与室内质控系统是一个重要的手段。1.材料与方法

1.1 仪器和试剂 ①美国贝克曼库尔特LH750全自动血细胞分析仪及配套试剂;② 美国雅培CD1700全自动血细胞分析仪及配套试剂;③ 美国贝克曼库尔特公司的S—Cal校准品及定值质控品。

1.2 新鲜全血校准品取同血型的常规体检的健康人的混合新鲜全血14毫升(EDTA-K 抗凝),先在显微镜下观察细胞均散在分布,在贝克曼库尔特LH750全自动血细胞分析仪上检测无任何警示,且结果均在正常人的结果范围之内。然后将其分装至三个无抗凝剂的试管中,其中第一管8毫升,其它两管各3毫升。在2小时内检测完毕。1.3 仪器准备

1.3.1 美国贝克曼库尔特公司工程师对LH750全自动血细胞分析仪进行全面保养及校准,校准后各参数CV值及定值质控均在允许范围之内,实验在校准当天进行。

1.3.2 美国雅培公司工程师对CD1700全自动血细胞分析仪进行全面保养,各参数CV值均在允许范围之内,实验在校准后第52天进行,进行前对仪器进行常规保养。1.4 校准质控判定标准

1.4.1 校准判断标准:根据中华医学会检验分会关于血液分析仪校准规范化的建议要求来判断(见表1),各项目参数均值与定值的差异全部等于或小于表中的第一列数值时,仪器不需进行调整,记录检测数据即可;若各参数均值与定值的差异大于表中的第二列数值时,不要对仪器进行调整,需请维修人员核查原因并进行处理;若各参数均值与定值的差异在表中第一列与第二列数值之间时,需对仪器进行调整。

1.4.2 失控判断标准:以1988年美国临床实验室改进修正案(CLIA’88)允许误差范围的1/4来确认两台细胞分析仪的精密度及偏差室内质控。CLIA’88允许误差范围:白细胞(WBC)为15%,红细胞(RBC)为6%,血红蛋白(HGB)为7%,血小板(PLT)为25%,平均红细胞体积(MCV)为6%。

1.5 溯源目标系统确定 以贝克曼库尔特LH750全自动血细胞分析仪为参考仪器(此仪器参加广东省室间质评评比为优秀,且每年参加贝克曼库尔特全球质控,可溯源至国际标准参考方法)。

1.6 操作步骤 ① 取第1管,在LH750血细胞分析仪上严格按仪器操作规程连续检测l1次,计算第2~l1次检测结果的均值(x靶1)、标准差(s1)及变异系数(CV1),以此均值为混合新鲜全血的定值(x1)。② 取第2管,在CD1700血细胞分析仪上严格按仪器操作规程连续检测l1次,计算第2~11次检测结果的均值(x靶2)、标准差(s2)及变异系数(CV2)。③ 根据公式,计算出WBC,RBC,HGB,PLT及MCV的偏差,以这些参数的偏差和CLIA’8允许误差的1/4比较,决定是否需要对CD1700血细胞分析仪某参数进行调整[

]。④调整后,取第3管,在CD1700血细胞分析仪上严格按仪器操作规程连续检测l1次,计算第2~l1次检测结果的均值(x3)再计算偏差,观察偏差是否在CLIA’88允许误差的1/4范围内,如不在此范围,再继续调整。⑤ 以校准的偏差作为CD1700比对室内质控的靶值,以CLIA’88允许范围的1/4作为CV值,每日选择一个正常标本进行比对试验,按以上方法进行计算出偏差,并以此偏差进行比对室内质控图绘制,观察CD1700每日是否存在偶然误差或系统误差,如存在系统误差应重新进行以上比对试验,如存在偶然误差应及时查找原因,并进行必要处理。2.结果

2.1 贝克曼库尔特LH750血细胞分析仪校准后精密度、准确度均在厂家允许范围之内,结果见表2。

2.2 两台血细胞分析仪各参数均值经公式计算出偏差,我们发现HGB,PLT偏差小于中华医学会检验分会校准判断标准表中的第一列数值,WBC,RBC和MCV均在表中第一列与第二列数值之间时,因此需对WBC,RBC和MCV进行校准,经校准后CD1700的WBC,RBC和MCV偏差均小于表中的第一列数值,结果见表3(各项目单位同表2)。

2.3 当月CD1700各参数比对室内质控的平均值与靶值较接近,变异系数均在CLIA’88允许误差的1/4范围之内,比对室内质控统计见表4(各项目单位同表2)。

3.讨论

血细胞分析仪的广泛应用显著地提高了血细胞及相关参数检测的精密度,由于不同的血细胞分析仪生产厂家各自使用的测定原理和方法不尽相同,使得测定结果及参考范围有所差异;同时,在国内、外众多的大、中型医院中,同一实验室拥有不同品牌、不同型号的血细胞分析仪已成为较普遍的现象,致使在同一实验室内同一标本在不同仪器上分析,可能出现测定值的偏差,给评估和解释结果以及给临床上依赖的实验室数据动态监测带来困难。因此有赖其校准的溯源体系的建立,保证校准品的定值溯源至参考方法,既可使检测结果准确,又可使不同检测原理的分析仪在不同时间、地点得出的检测结果具有可比性。ICSH 推荐参考方法为溯源链最高等级的参考检测方法,贝克曼库尔特使用参考方法对其校准实验室的校准品(新鲜全血)进行定值,定值后的校准品对其选择的系统进行校准,校准后的检测系统再对厂家的产品校准品进行定值,定值后的工作校准品再校准厂家的终端用户仪器,校准后的仪器再继续对新鲜全血定值,定值的新鲜全血再对其它型号的血细胞自动分析仪进行校准。这样,被校准的两种血细胞自动分析仪均具有同一溯源性。新鲜全血是最佳的比对试验标本及校准物,确立实验室内的标准参比仪器,再建立新鲜全血在多台仪器问的比对及校准体系在拥有多台不同品牌、不同型号的血细胞分析仪的大、中型医院实验室,不失为一种简便、经济的措施,每日进行比对室内质控并进行总结分析便于发现两台血细胞分析仪的偶然误差、系统误差,通过总结分析可评价仪器状态及或系统倾向,通过校准可使结果达到统。因此,通过本实验室的实践,我们认为此系统的建立和实施方案是行之有效的。

篇7:XN-L血细胞分析仪招标参数

1、*检测速度:CBC+DIFF≥70/小时,:CBC+DIFF+RET≥30/小时

2、检测参数:血液报告参数≥35个,体液报告参数≥6个

3、*用血量:全血进样量≤25ul;预稀释模式用血量≤20ul,进样量≤70ul;

4、白细胞计数:应采用先进的激光流式原理及核酸荧光染色技术,使白细胞计数免受难溶红细胞、巨大血小板、血小板簇及细胞碎片等的干扰

5、低值白细胞检测:当遇到低值白细胞样本时,仪器可自动或人工选择转换到低值白细胞检测模式,使白细胞检测颗粒数比普通检测模式增加2倍,结果更准确、可靠。

6、*血小板计数:具有两种方法进行血小板的定量计数

7、网织红细胞检测功能:使用核酸荧光染色及流式细胞技术,具有全自动网织红细胞定量计数和对网织红细胞成熟度的分类。

8、网织红细胞血红蛋白功能:具有定量报告检测网织红细胞血红蛋白含量的功能,为报告参数。

9、体液检测速度:≥30样本/小时;

10、可以对脑脊液、胸水、腹水、关节腔积液等体液进行红细胞和白细胞计数,并对白细胞进行分类;

11、体液检测中具有通过高荧光体液细胞参数对肿瘤细胞进行提示功能;

12、线性范围:全血检测要满足WBC:0-440×10^9/L;RBC:0-8.6×10^12/L;PLT:0-5000×10^9/L

13、*血液质控品:定期提供原厂配套的高、中、低三个水平的质控品,并通过FDA及CFDA注册。质控项目覆盖所有报告参数;

14、*体液质控品:定期提供原厂配套的高、低两个水平的质控品,并通过FDA及CFDA注册。质控项目覆盖所有报告参数;

15、*校准品:定期提供原厂配套的、在中国CFDA注册的校准品。校准品可校准项目包含RBC、WBC、HGB、PLT、HCT、MCV、RET。

16、实时网络通讯系统:具有实时在线网络质控功能,通过室内质控实现实时的室间质评,确保用户的结果质量达到国际质量水准。

17、正确度(静脉血):白细胞:≤3.0%;红细胞:≤2.0 %;血红蛋白:≤2.0%;血小板:≤5.0 %。

18、具有自动复检功能,并能自动追加自动检测项目;(限XN550)

篇8:血细胞分析仪简介

1 材料与方法

1.1 一般资料

仪器:血液细胞分析仪 (迈瑞BC300) , 为我国迈瑞产品。试剂:全部配套试剂和质控液。

1.3 方法

随机抽查患者150例, 静脉采血, EDTA-K2抗凝。室温放置15min后, 充分混匀上机测试。同时推血片一张, 室温干燥, 瑞氏染色, 目视显微镜下进行白细胞分类。对异常白细胞检出率进行对比分析。

2 结果

150例标本经血细胞分析仪检测, 白细胞分类结果, 出现疑有异常白细胞警告报警20例, 阳性率13.3%。目视显微镜复片, 发现有异常白细胞12例, 阳性率8.0%。20例阳性标本, 目视显微镜复片, 8例有不同程度异常白细胞 (幼稚细胞1例, 杆状核粒细胞增多1例, 嗜酸粒细胞增多2例, 嗜碱粒细胞增多1例, 异常淋巴细胞增多3例) , 占阳性标本的40%。130例阴性标本, 目视显微镜复片, 2例发现有不同程度的异常白细胞, 占阴性标本的1.5%。

3 讨论

以上结果, 可以看出患者全血做血细胞分析, 白细胞分类结果, 异常白细胞警告较高, 假阴性率虽然较低, 但也应引起重视。几年工作体会认为, 出现上述的主要原因:常规分类除细胞大小外, 还根据细胞染色反应, 核的形态及染色质的着色情况, 胞质的着色及颗粒才能确定为某种细胞。三分类血细胞分析仪法, 根据白细胞直方图分类法, 只能反映溶血剂处理后某种体积的颗粒, 对少见的正常白细胞和异常细胞不能准确识别, 不难看出电阻法白细胞分类只不过是粗筛。溶血剂是血细胞分析仪试剂中的主要试剂。实际工作中发现, 若溶血不完全, 由于红细胞碎片冲洗不彻底将引起白细胞计数假性增高。稀释液的渗透压、离子强度等也可影响检测结果。抗凝剂的种类对检测结果影响较大, 国际化学标准化委员会推荐用EDTA-K2。另外, 血液和抗凝剂比例也会影响检测质量。血液比例过高时抗凝剂相对不足, 血浆中出现微凝块的可能性增加, 微凝块可能堵塞仪器影响检测结果[1]。正常情况下, 血细胞分析仪对血细胞体积的识别有明显的体积界限:WBC35-450fl。根据Coulter原理, 仪器只识别颗粒大小而不能识别颗粒的性质。当其体积异常高于或低于仪器设定的阈值时, 往往会误判。此外, 标本采取后放置时间、温度及上机前标本混匀、振荡时间、力度等均可影响血细胞分析仪对白细胞分类的准确识别, 如采血后标本放置时间小于5min, 室温低于10℃等, 可使白细胞三分类不全及异常白细胞假报警率增高。

综上所述, 目视显微镜法分类, 应是一种重要的检测手段。血细胞分析仪法分类, 是当今技术的趋势, 其优点是速度快, 省时少力, 重复性及稳定性较高, 但易受很多因素的影响。为此, 最好每次标本都先涂一张血片, 以备必要时复检。

摘要:目的 探讨血细胞分析仪测定白细胞分类的影响因素, 必要时血片复核, 为临床诊治提供可靠依据。方法 使用血细胞分析仪及目视显微镜, 同时对150例标本进行检查, 对比分析。结果 操作不正确、标本采取方法不正确、放置时间、温度及上机前标本混匀、振荡时间、力度等均可影响血细胞分析仪对白细胞的正确分类。结论 血细胞分析仪并不能完全代替目视显微镜进行白细胞分类, 对出现疑有异常白细胞报警, 应分析原因, 目视显微镜下进行白细胞分类或重新采血对比复查。

关键词:血细胞分析仪,白细胞分类,影响因素

参考文献

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