灵芝孢子粉治疗重症急性胰腺炎的研究

2022-09-10

重症急性胰腺炎 (severe acute pancreatitis, SAP) 是临床常见的危重病, 大量研究证实, 在急性胰腺炎发病早期即存在肠道屏障损伤、细菌易位、炎性细胞因子过度释放, 导致急性胰腺炎病情加重及诱发SIRS和MODS, 成为SAP死亡的主要原因。所以防止SAP患者肠道屏障损伤、从而降低细菌易位炎性细胞过度释放对SAP的治疗及降低患者的死亡率有重要意义。灵芝草是我国传统草药中的一枝瑰宝, 它能“益精气, 治虚劳”, 随着对灵芝孢子药理研究不断深入, 其临床应用也日益广泛。

1 临床资料

(1) 实验动物来源:实验动物SD大鼠84只由佳木斯大学动物实验室提供, 雌雄均可。体重250~300g。 (2) 实验动物分组:按照随机化原则将大鼠分成4组:A对照组 (n=12) ;B模型组 (n=24) ;C西医治疗组 (n=24) ;

2 结果

2.1 胰腺组织观察

(1) A组:向胰胆管内注入生理盐水后, 胰腺未见明显改变; (2) B、C、D组向胰胆管内注入牛磺胆酸钠后, 大鼠胰腺出现弥散性出血。

2.2 各组大鼠血清淀粉酶水平变化情况 (表1)

2.3 各组大鼠血浆内毒素水平测定结果 (表2)

2.4 各组大鼠不同时相血浆TNF-α水平测定结果 (表3)

2.5 各组大鼠不同时相生存率 (表4)

2.6 胰腺病理检查

A组:与正常胰腺组织无明显差异。B组:间质显著增宽, 小叶间间隔及腺泡间隔扩张腺叶结构破坏, 片状出血、坏死明显;间质、腺体间和血管周围有多量炎细胞浸润。C组:间质增宽, 小叶间间隔及腺泡间隔扩张腺叶结构破坏, 片状出血, 可见坏死病灶, 间质、腺体间和血管周围有炎细胞浸润。D组:间质略增宽, 小叶结构完整, 有少量出血、坏死改变, 无大量炎细胞浸润。

3 讨论

SAP时, 大量促炎性细胞因子的过度释放引起过度的全身性炎症反应, 造成MODS, 是SAP导致死亡的重要原因之一。所以促炎性细胞因子的过度释放是SAP的核心问题。目前对SAP的治疗主要为禁食、胃肠减压、抑制胰腺分泌药物等使胰腺休息, 并辅助抗生素的应用, 但目前尚无有效保护肠道屏障功能, 阻止细菌易位方法, 本实验发现, 造模成功后12、24、48h中西医结合治疗组大鼠血浆TNF-α水平比西医治疗组大鼠血浆TNF-α水平显著降低, 且P<0.05有统计学意义。其机制可能是灵芝孢子粉能够抑制巨噬细胞合成分泌IL-12、还能明显减少LPS诱导巨噬细胞分泌IL-I2及IFN-γ, 增加巨噬细胞分泌IL-4, 促进CD4+T淋巴细胞Th1向Th2的分化, 减少促炎因子的释放。这不仅从免疫方面调整了Th1/Th2的比例, 减少了TNF-α的产生, 避免了SIRS的发生, 而且减少了IFN-γ的生成, 降底了TNF-α对机体造成的损害。另外灵芝孢子粉还能明显降低血清中内毒素含量, 实验中造模成功后12、24、48h中西医结合治疗组大鼠血浆内毒素水平比西医治疗组大鼠血浆内毒素水平显著降低, 且P<0.05有统计学意义。重症胰腺炎时, 肠麻痹、肠胀气和胰酶的作用使组织胺5羟色胺等物质释放, 影响肠壁的血管通透性, 而且打破了正常菌群与致病菌群间的平衡, 削弱了正常菌群与黏膜表面的粘蛋白构成的肠道的黏膜屏障系统, 使内毒素吸收增加。灵芝孢子粉作为一种传统的治疗消化道感染的药物, 其不仅具有广谱抗病原菌作用, 如对肠道内多种致病菌有抑制或杀灭作用, 而且能够增强单核-巨噬细胞系统对异物或细菌的吞噬功能[5], 这不仅防止AP发病过程中内毒素大量入血直接造成的机体损害而且减少了由内毒素直接诱导巨嗜细胞产生TNF-α, 防止了SIRS的发生。

灵芝孢子粉通过降低血浆LPS及TNF-α可明显减轻SAP大鼠胰腺损伤。从大鼠胰腺病理图片来看, 中西医结合治疗组:间质略增宽小叶结构完整, 有少量出血、坏死改变, 无大量炎细胞浸润。西医治疗组:间质显著增宽, 小叶间间隔及腺泡间隔扩张腺叶结构破坏, 片状出血、坏死明显;间质、腺体间和血管周围有多量炎细胞浸润;而且造模后48h中西医结合治疗组大鼠血清淀粉酶下降速度明显快于西医治疗组大鼠 (P<0.05) , 这些都说明治疗组胰腺细胞损伤减轻。由于胰腺损伤减轻, 控制了全身炎症反应向SIRS发展, 这就会增加SAP大鼠生存率。本实验发现造模后48h中西医联合治疗组、西医组生存率分别为75%、46%, 即中西医联合治疗组在48h生存率明显高于西医组 (P<0.0 5) 。

注:48h与中西医联合治疗组比较▲P<0.05

以上这说明灵芝孢子粉通过降低SAP大鼠LPS和TNF-α水平, 防止了过度的全身炎症反应, 使胰腺病理改变明显减轻, 增加SAP大鼠生存率, 对SAP有治疗作用。

摘要：目的本实验通过采用灵芝孢子粉治疗重症急性胰腺炎大鼠, 以了解灵芝孢子粉对大鼠血淀粉酶、内毒素、肿瘤坏死因子的影响, 进而希望通过采取增加免疫调节治疗的角度来降低重症急性胰腺炎患者的死亡率, 提高治疗效果。方法选择大庆油田总医院中心实验室提供的SD大鼠84只, 均为雄性, 250～300g, 随机分成4组, A对照组;B模型组;C生长抑素治疗组;D生长抑素+灵芝孢子粉治疗组。B、C、D3组造成重症急性胰腺炎模型。造模成功后12、24、48h检测各组大鼠血浆内毒素、肿瘤坏死因子、及血清淀粉酶含量, 并记录各组死亡率;于48h对各组大鼠胰腺作病理检查。结果各时间点B、C、D组血清淀粉酶高于A组, 有显著差异 (P<0.05) ;各时间点B、C、D组血浆内毒素含量高于A组, 有显著差异 (P<0.05) ;各时间点B、C、D组肿瘤坏死因子含量高于A组, 有显著差异 (P<0.05) ;在12、24、48h各时间点C组血浆内毒素、肿瘤坏死因子含量均高于D组, 有显著差异 (P<0.05) ;造模后48hD组大鼠生存率高于C组 (P<0.05) , 胰腺损伤轻于C组。结论在生长抑素基础上加用灵芝孢子粉能明显降低重症急性胰腺炎大鼠血浆内毒素及肿瘤坏死因子水平, 降低血淀粉酶, 减轻大鼠胰腺损伤, 增加大鼠生存率, 对重症急性胰腺炎有治疗作用。

关键词：重症急性胰腺炎,灵芝孢子粉,内毒素,肿瘤坏死因子