术中冰冻切片结合印片细胞学病理诊断的应用

1 资料与方法

1.1 一般资料

我科1998年1月至2004年6月期间, 将印片法组织细胞学诊断技术应用在术中快速诊断上, 并与冰冻切片诊断, 石蜡切片对照, 取得满意效果。现分析报道:300例印片诊断与冰冻切片, 石蜡切片诊断对照结果。

1.2 方法

新鲜标本。标本送检后马上在选好病灶上用锐刀切开, 用载玻片在不同切面上轻轻触片, 制成印片3~5张。注意印片时不要擦片以免破坏组织结构。一半组织做冰冻切片, 一半组织做石蜡切片诊断作对照。印片制成后, 吹干, 按顺序 (无水乙醇→95%乙醇→90%乙醇) 快速处理。

先用低倍镜观察, 发现可疑肿瘤细胞, 换用高倍镜观察。在确诊为肿瘤细胞后, 根据细胞学形态结构, 再结合冰冻切片镜下形态, 初步报告肿瘤性质与类型。20min即可报告结果。

2 结果

300例冰冻切片结合印片细胞学病理诊断结果与石蜡切片比较。冰冻切片结合印片细胞学诊断恶性肿瘤, 准确率达95%以上。

3 讨论

术中冰冻切片与印片细胞学诊断结合起来应用于术中, 其准确性和可行性已被众多的学者所肯定。手术中细胞学检查有其优点, 也有局限性。细胞学观察对鉴别良性与恶性细胞有帮助, 但是缺乏组织结构, 对于肿瘤细胞的分型和确定恶性肿瘤是原发还是转移有一定困难。细胞学检查必须结合手术中冰冻切片, 细胞学与组织学结合起来, 互相补充, 才能避免局限性, 从而做出正确的病理诊断。

(1) 恶性肿瘤细胞大小差异悬殊, 绝大多数恶性肿瘤细胞比正常细胞大20~30μm, 有的甚至可增大10多倍, 一般10~60μm。特大者130μm, 如肺燕麦癌细胞比正常淋巴细胞稍大, 鳞状上皮癌是未分化癌10倍。胞浆量异常, 形态畸形, 如纤维形、蛇形、蝌蚪形。黏液腺癌胞浆偏酸, 有黏液空泡。偶见胞浆内封入另一个癌细胞, 被称鸟眼状细胞。鳞癌早熟角化, 胞浆可呈粉红色, 橘黄色;高度角化者可出现癌珠。

(2) 印片诊断由于是细胞学与组织学相互结合观察的病理结果, 故能对组织类型进行了判断。下列情况利于肿瘤类型判断: (1) 细胞印片结构清晰; (2) 能找到特征性病变组织。如为腺癌, 则具有腺癌的一般特征, 可见癌细胞呈腺样结构, 或呈小片块, 或有一定的排列, 癌细胞胞浆淡染, 或有小空泡。有时可见核仁。如为典癌, 成堆的瘤细胞可清楚显示具有类癌瘤细胞的特征, 即细胞呈圆形, 卵圆形或梭形, 大小形状一致, 中等量嗜酸性胞浆, 核染色质呈细颗粒状, 可见小核仁。瘤细胞可单个或松散, 或紧密集聚, 可呈菌形团样排列。背影干净, 无坏死细胞碎片。如为小细胞癌, 癌细胞较小, 呈圆形或燕麦形, 核深染, 呈裸核状, 常呈小簇弥散分布。如为支气管肺泡癌, 则可见有具有特征性的细胞学或组织学结构。Clara细胞型者, 瘤细胞立方状, 呈单层片状或呈柱状。胞核轻度异型, 大小稍不等, 胞浆有的有些小空泡。粘液型者, 肺泡内常充满粘液, 瘤细胞衬覆在肺泡表面, 具有粘液细胞特征, 胞浆丰富透亮或呈细空泡状, 核偏位, 轻度异型, 有的可见核沟。 (3) 出现特殊排列结构 (如菌形团, 栅栏状, 或腺管状结构) 。 (4) 结合送检组织组织病变部位, 器官以及石蜡切片诊断经验, 先确定肿瘤细胞来源, 后进行了组织类型鉴别。但有时印片诊断对其结构了解甚少, 故对肿瘤类型判断较为困难, 如未分化癌, 转移癌等。只要印片得当, 肿瘤细胞排列接近组织结构, 经认真全面分析, 再与冰冻切片结合起来, 一般均能得到明确的诊断。

(3) 细胞坏死, 癌肿细胞特别是较大的恶性肿瘤细胞, 常因癌肿细胞生长迅速, 血液供应不足, 或癌肿细胞浸润血管或形成血栓而发生坏死。因而, 在针诶涂片中, 出现大量坏死细胞时, 应考虑恶性肿瘤可能。这种坏死多呈凝固性坏死。

细胞学特点:大量坏死细胞轮廓和细胞碎屑, 有时可见核固缩的细胞和残核碎影, 常在大的癌细胞群中间发生坏死, 而边缘的癌细胞仍然存活。如乳腺导管癌, 或某些较大癌肿, 如鳞癌交多见。同时伴角化鳞状上皮细胞, 这种坏死常伴有退化变性癌肿细胞及裸核癌肿细胞出现, 与结核病是的干酪样坏死不完全相同, 后者干酪样坏死是彻底坏死, 看不到坏死细胞轮廓, 而且可见着色较淡残碎不全的类上皮细胞轮廓, 此时可找到较多的抗酸菌。

摘要：术中冰冻切片由于组织未固定, 切片质量差, 染色欠佳, 细胞结构模糊, 辨认病变较困难。而细胞学印片对细胞观察比较清楚, 对鉴别良性与恶性肿瘤有帮助。把冰冻切片与印片细胞学结合起来, 对术中病理诊断的准确性有很大帮助。

关键词：印片诊断,快速诊断,石蜡切片诊断,病理学