术中冰冻切片检查

术中冰冻切片检查（精选6篇）

篇1：术中冰冻切片检查

病理报告与术中快速冰冻切片检查及术后

诊断不一致时的 追踪与讨论的规定与程序

在手术中快速冰冻病理诊断病例中，当出现术中快速冰冻切片检查病理报告与术后病理报告诊断不一致时，相关科室应开展追踪、讨论的程序。

一、病理科主任组织科内相关人员进行相关病例的讨论(2周内)，分析两者诊断报告不一致的原因和存在问题，主要从以下几方面查找原因并准确记录：

（一）术中快速冰冻切片送检标本手术医师取材是否准确;

（二）申请冰冻切片诊断的病例是否符合进行冰冻切片诊断的要求;

（三）病理取材是否规范，有无遗漏病变;

（四）病理技术员制片是否优良，有无影响切片诊断的因素；

（五）诊断中是否存在假阴性或假阳性；

（六）有无请高级职称病理医师复诊；

（七）术中病理医师与临床手术医师是否进行信息交流沟通等。

二、明确存在的问题后，对发生的原因进行讨论分析，提出针性的改进措施，同时针对相同科室、送检相同部位术中冰冻切片诊断的病例进行复查、追踪，落实改进措施，避免类似情况再次发生。

三、病理科应与临床科室进行交流，讨论出现诊断结果不一致的原因以后需要改进的地方。

四、出现术中快速冰冻切片检查病理报告与术后病理报告诊断不一致的病例，必须每月及时上报到院质管部，有原因分析和整改措施，追踪落实。

篇2：术中冰冻切片检查

手术中快速冷冻切片病理诊断（以下简称“冷冻”）是将手术切下的病变组织在冷冻切片机中迅速冷冻后制成切片，进行病理诊断。一般在30分钟左右得出诊断意见，为临床手术提供参考。冷冻是一种高技术、高难度、高风险的病理项目。其主要作用：⑴确定送检标本组织是否有病变存在；⑵确定病变或肿瘤的性质；⑶确定手术切缘有否肿瘤；⑷确定送检组织有否癌浸润或转移等。但由于取材局限、标本冰晶及时间短等问题，冷冻切片质量不能达到常规石蜡切片的精确度，诊断准确率受到影响。可以出现以下情况： ⑴只能做良、恶性鉴别，为临床提供一个参考性意见；（2）诊断困难，允许发延迟报告或等待石蜡切片诊断，发出最终报告；（3）冷冻诊断与常规石蜡诊断不符时，以石蜡切片报告为准。“三甲”医院要求冷冻诊断的准确率≥96%。为减少和防止医疗差错和纠纷，有利于此项工作的规范化开展，特制定该制度。

1.“冷冻”预约规定：需做术中快速冷冻病理诊断时，各手术科室提前1～2天详细填写冷冻申请单（可用普通病理申请单代替）送病理科。要求尽可能填全各项内容，注明做冷冻的具体年、月、日、时，以便病理科做好准备；除填临床诊断外，请提出要解决的问题，如确定“病变性质”、“切缘有否浸润”、”淋巴结有否转移“等等。一般不提倡急诊“冷冻”申请。如确需急诊冷冻时，要及时与病理科主任联系，说明情况。病理科尽量创造条件，满足临床需要。2.病理科实行“冷冻查房“制度：病理各级医师在手术前1日应下病房查病人、看病历或请病人来病理科接受查体，与主管医师交换意见，全面了解有关冷冻方面的病人情况。

3.实行“手术中快速冷冻病理诊断知情同意书”（样本附后）签字制度。术前由临床医师向病人及其家属谈话，交代冷冻有关事项，征得其理解、同意并签字。最后将知情同意书放入病历中。4.单件标本的冰冻切片制片应在15分钟内完成。

5.冷冻病理报告实行三级医师检诊及双签字制度。初级医师参与取材阅片、中级医师诊断、高级医师复诊。报告由中、高级医师双签字。一般30分钟左右发报告，遇特殊情况时间可以适当延长。6.遇到冷冻病理诊断中的交界性病变及“灰色病变”难以确诊时，首先在科内讨论，如意见仍难以统一，不能勉强发报告。要及时向手术医师通报情况，可向医务处报告，协助派车去外院会诊；或允许延缓出报告，必要时待常规石蜡切片后再诊断。临床医师和/或病理医师要向患者及家属讲明情况，取得理解并记录于病历中。

篇3：术中冰冻切片的应用价值浅探

1 资料与方法

1.1 临床资料

本研究选择的对象为2008年8月至2014年6月于我院病理科的67例冰冻切片, 患者年龄18~78岁, 平均年龄47岁, 其中男43例, 女24例, 上述切片包括肿瘤以及非肿瘤病变。

1.2 方法

术中冷冻切片:所取标本为术中所取病变部位的活体标本, 将其迅速冷冻, 用切片机切片制片, 在固定液中固定半分钟时间, 将固定液洗去, 经过HE常规染色, 脱水固封即得。石蜡切片:将切片用固定液进行固定, HE常规染色即得。观察两种切片的诊断有效率。

1.3 判定标准

主要包括确诊、基本肯定诊断、未确诊滞留诊断及误诊。确诊:冰冻切片的诊断结果与石蜡切片结果基本一致;基本肯定诊断:冰冻切片肯定良恶性, 但分级或分类有差别;未确诊:冰冻切片没有给出明确的诊断;误诊:冰冻切片诊断出现错误。

1.4 统计学方法

数据处理软件包为SPSS13.0, 计量的比较采用t检验, 计数的比较采用χ2检验, P<0.05表示有显著性差异。

2 结果

2.1 67例冰冻切片组织分布部位

67例冰冻切片中甲状腺的例数最高为39例, 比例58.20%;其次为乳腺16例, 比例23.88%;生殖系统5例, 比例7.46%, 其他7例, 比例10.45%, 见表1。

2.2 67例冰冻切片病变性质的分布

各种病变性质中良性肿瘤的比例最高, 为32例, 比例47.76%;恶性肿瘤18例, 比例26.87%, 非肿瘤性病变16例, 比例23.88%;交界性肿瘤较少为1例, 比例1.49%, 见表2。

2.3 2346例术中冰冻切片的诊断情况

67例术中冰冻切片中确诊例55数例, 占比例82.09%;基本肯定诊断4例, 占比例5.97%;未确诊滞留诊断8例, 占比例11.94%。确诊的比例要显著性的高于基本肯定诊断及未确诊所占的比例, 三组比较有显著性差异 (P<0.05) , 见表3。

3 讨论

近年来, 随着对术中冰冻切片研究的不断深入, 术中冰冻切片已经逐渐被应用到病理诊断中[2,3,4], 术中冰冻切片对于病理的诊断具有十分重要的应用价值:快速确定病变的性质, 术中送检的样本从送检到结果知晓大约需要半个小时的时间, 时间较快, 医师可以根据切片结果确定手术的方案;术中冰冻切片可以避免进行再次手术, 能够预防手术中切除过多或者切除不完全的现象。

本研究通过对我院67例冰冻切片进行研究, 治疗结果显示确诊率82.09%, 基本肯定诊断率5.97%, 未确诊率11.94%, 结果与文献报道基本一致[5], 冰冻切片技术的局限性导致了冰冻切片与石蜡切片相比还是存在许多不相符的情况。未确诊的原因[6]:部分病例属于诊断相对困难为避免误诊选择延迟诊断, 部分属于不适合做冰冻切片诊断该做常规。冰冻切片误诊是个需要特别注意预防的问题, 本组病例误诊率为0, 可能与所选取病例数目有关。冰冻切片中误诊的一个重要原因就是病理科的医师可能在取组织的过程中由于观察的不够细致导致诊断的一个错误。这种冰冻切片的误诊会导致外科医师在手术方案选择上的错误, 导致手术的失败, 最终导致医疗事故的发生, 因此病理医师一定要在具备一定专业知识的基础上, 具有一颗负责任的态度去工作, 提高诊断的水平, 从而更好的服务于广大的患者。

综上所述, 术中冰冻切片虽然取得了一定的进展, 确诊率较高, 但仍未完全排除其中的未确诊甚至误诊情况的发生, 因此我们要加强对病理人员的技能培训, 责任心教育, 从而提高术中切片诊断的有效率, 避免误诊情况的出现, 更好的服务于临床病理科的诊断应用。

摘要：目的 通过术中冰冻切片与常规石蜡切片诊断准确率的比较分析, 探讨术中冰冻切片应用价值。方法 本研究选择的对象为2012年1月至2014年6月于我院病理科的67例术中冰冻切片, 所取标本为术中所取病变部位的活体标本, 将其迅速冷冻, 用切片机切片制片, 在固定液中固定, 将固定液洗去, 经HE染色, 脱水固封即得, 观察术中冰冻切片的确诊率。结果 67例冰冻切片中甲状腺的例数最高为39例, 比例58.20%;其次为乳腺16例, 比例23.88%;生殖系统5例, 比例7.46%;各种病变性质中良性肿瘤的比例最高, 为32例, 比例47.76%;恶性肿瘤18例, 比例26.87%, 非肿瘤性病变16例, 比例23.88%;交界性肿瘤较少为1例, 比例1.49%;67例术中冰冻切片中确诊例55数例, 占比例82.09%;基本肯定诊断4例, 占比例5.97%;未确诊滞留诊断8例, 占比例11.94%。确诊的比例要显著性的高于基本肯定诊断及未确诊所占的比例, 三组比较有显著性差异 (P<0.05) 。结论 综上所述, 术中冰冻切片虽然取得了一定的进展, 确诊率较高, 但仍未完全排除其中的未确诊情况的发生, 因此我们要加强对病理人员的技能培训, 责任心教育, 从而提高术中切片诊断的有效率。

关键词：术中,冰冻切片,常规石蜡切片

参考文献

[1]Wu L L, Cheuk W, Poon M, et al.Dye-containing histiocytes in frozen section of sentinel lymph node:a potential mimicker of carcinoma[J].Int Surg Pathol, 2009, 17 (3) :262.

[2]Sala P1, Morotti M, Menada MVet al.Intraoperative frozen section risk assessment accurately tailors the surgical staging in patients affected by early-stage endometrial cancer:the application of 2 different risk algorithms[J].Int J Gynecol Cancer, 2014, 24 (6) :1021-1026.

[3]万春生, 何婷玉.甲状腺肿物637例术中冰冻切片诊断分析[J].中国社区医师?医学主要专业, 2012, 14 (306) :204.

[4]Wu C, Qu X, Mao Y, et al.Utility of Intraoperative Frozen Section in the Diagnosis of Periprosthetic Joint Infection[J].PLoS One, 2014, 19 (7) :e102346.

[5]刘艳丽, 聂增尧, 回允中.术中冷冻切片594例病理诊断分析[J].诊断病理学杂志, 2010, 17 (5) :382.

篇4：术中冰冻切片检查

关键词 诊断 冰冻切片 石蜡切片 甲状腺肿瘤

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.09.191

甲状腺肿瘤及瘤样病变虽然是头颈外科中常见病变，但它们在临床上缺乏特异性表现，各种实验室检查及影像学检查，均无法在术前做出明确诊断，因此术中冰冻组织快速病理诊断成为临床外科医生决定手术方式的主要依据。此时病理诊断医师肩负责任重大，因不恰当的诊断可能会导致严重的后果，并给临床治疗造成困难，所以提高冰冻切片的准确性非常重要。甲状腺疾病特别是乳头状癌亚型及少见的甲状腺恶性肿瘤由于其结构复杂加之取材局限，诊断限时等情况，有时能明确诊断报告确有相当大难度。2007年1月～2011年10月对637例甲状腺病变快速冰冻切片进行回顾性分析，以期总结经验，提高甲状腺切片术中冰冻切片病理诊断的准确率。

资料与方法

一般资料：2007年1月～2011年10月做甲状腺冰冻切片637例，其中男82例，女555例，年龄17～78岁，平均45岁；74例恶性，年龄17～73岁，其中女63例，男11例。

方法：全部标本均为术中送检未固定新鲜组织，选取可疑病变处进行取材，立即置LEICA CM1900恒冷切片机内，-23℃冰冻3分钟，甲醇固定，HE染色，光镜观察，剩余组织常规做石蜡切片诊断进行对比分析，结果分为三种：①符合：病变良恶性一致。②误诊：包括假阳性和假阴性，假阳性指将良性病变误诊为恶性，假阴性是将恶性病变误诊为良性。③延迟诊断：指冰冻不能确定病变性质，有待石蜡切片报告。

结果

637例冰冻切片共检出甲状腺癌54例，延迟诊断9例，冰冻与常规诊断符合612例，诊断准确率为96.075%；常规石蜡切片共检出甲状腺癌74例，其中乳头状癌70例，滤泡性癌1例，未分化癌1例，髓样癌1例，桥本甲状腺炎合并乳头状癌1例；良性病变以结节性甲状腺肿最多523例，甲状腺瘤16例，桥本氏甲状腺炎12例，亚急性甲状腺炎8例；延迟诊断9例中，6例为甲状腺乳头状癌，1例为非霍奇金淋巴瘤，1例为桥本氏甲状腺炎合并乳头状癌，1例为甲状腺滤泡癌，16例假性诊断，术后常规切片15例为乳头状癌，1例为滤泡癌；1例假阳性报告，冰冻切片报微小癌，常规报告为结节性甲状腺肿伴灶性滤泡上皮乳头状增生。

讨论

术中冰冻切片对于临床疑为甲状腺癌的病例诊断是目前最可靠的方法，外科医生常根据其诊断结果来决定手术切除范围，冰冻切片诊断是选择手术方式的前提。甲状腺手术冰冻切片过程中，因冰冻取材局限性、冰冻切片形态学特殊性、加之时间仓促、病理诊断医师的诊断局限性，因此冰冻切片会出现延迟诊断或误诊；鉴于上述困难，外科医生要接受这一现实：无论病理医生多么精明和富有经验，总会有相当比例的高分化癌冰冻切片不能作出正确诊断［1］。Emanuelle等［2］认为冰冻切片诊断包膜内癌和微小癌价值有限。国内陈乐真等［3］报道冰冻切片的诊断准确率为99.8%，在本组637例甲状腺疾病中，女性多于男性。男女比例为1:6.8；甲状腺乳头状癌是甲状腺恶性肿瘤中最常见类型，本组74例甲状腺癌中乳头状癌70例(10.98%)，乳头状癌分化较好时易误诊为良性肿瘤［4］；另外少数甲状腺微小癌、甲状腺滤泡性肿瘤及非典型桥本氏甲状腺炎由于取材局限或病理诊断医师经验局限性，冰冻切片时也易误诊，总之冰冻切片存在相当大的难度和局限性，不可能做到百分之百正确，但可以通过自身努力，在取材、制片、诊断三个环节上多下功夫，就能最大限度提高冰冻切片的准确率。

术前应全面了解病史，在接到甲状腺疾病冰冻切片申请单后，尤其是临床疑癌而未确诊者，病理科医生应于术前及时调取患者病历，详细了解患者基本情况，如病史、甲状腺病变位置及B超、T3、T4检测结果，甲状腺ECT检测情况、颈部淋巴结有无肿大等作为冰冻切片诊断参考依据。

仔细检查大体标本防止漏诊。当新鲜手术标本送达时，病理医生要注意观察包膜情况，沿最大面剖开，每隔0.3～0.5cm多做剖面，防止漏掉主要病变，观察病变颜色、质地、有无灰白、灰黄色及脆弱坏死区，乳头，切开时有无砂砾感；对上述区域重点取材，务必连同包膜一起取2～3块组织；良性病变切面多显红色、胶质状，乳头状癌切面呈乳头或颗粒状、或灰白似疤痕、结节、部分切割时有砂砾感，滤泡癌切面呈灰白色、包膜常不完整，桥本甲状腺炎和亚急性甲状腺炎质实、切面黄白或灰白色、橡皮样。

甲状腺癌各亚型病理特点：①乳头状癌：WHO(2004)甲状腺和甲状旁腺肿瘤分类［5］将乳头状癌分为经典型15种组织病理学变异型，将具有细胞核特征的各种变异型甲状腺癌均归为乳头状癌。使乳头状癌包括乳头状微小癌成為最常见的癌，占所有甲状腺癌的74%～80%［6］所以在冰冻切片中解决乳头状癌的诊断，在临床上有重要意义。典型的甲状腺乳头状癌较易诊断，但当其以乳头状癌变异形或微小癌形式出现则诊断可能会出现困难或误诊。有报道称冰冻切片乳头结构可表现多样，如树枝状、花瓣状、车轨状、脑回状、绒毛状，不如石蜡切片乳头那样清晰和形态多样，甚至局部乳头与乳头间的细胞似腺样或拥挤成实性片状，但这些结构对于鉴别良恶性增生性乳头具有实用价值，良性乳头状增生结节内乳头内一般可见继发性滤泡。乳头状癌诊断的重要意义，具有脉管轴心的乳头状分枝及级数；核的特征性改变如毛玻璃样核(冰冻切片中毛玻璃样核不如石蜡切片清楚)，核沟、核内假包涵体；是继发性改变，如间质的纤维化、钙化和砂砾体的出现。核沟和砂砾体是诊断乳头状癌的有力指标和依据。在显微镜下疤痕区乳头的出现是乳头状癌的一个重要指征，此时若病灶小应补取标本或深切组织，以免漏取。②滤泡癌：在诊断甲状腺滤泡癌时，要见到明确的瘤组织穿透包膜或侵犯血管，有时在甲状腺间质血窦内可能会见到一些滤泡上皮细胞，不要误认为癌细胞侵入血管。血管浸润的形态学标志是癌细胞团紧贴血管壁；癌细胞和红细胞混在一起；血管内细胞形态与血管外肿瘤细胞相同［7］。③髓样癌：除经典型外一般不见滤泡增生和腺管形成。尚有小梁/束状型、腺泡型、假乳头样型、类癌型，叶/岛状型、小细胞型、血管瘤型，淀粉样物质沉积是其诊断要点。④未分化癌：细胞短梭形成多形性，异型性明显，核分裂像多见，酷似肉瘤，相对而言较易诊断。

误诊原因分析：16例假阴性报告中，9例在冰冻切片检查中无法检出，在术后的石蜡切片中通过大量组织切片检查确诊；6例由于诊断经验不足或心理压力过大造成了过低诊断；1例由于制片质量不理想，影响了诊断结果。1例假阳性是由于滤泡上皮增生折叠很象肿瘤性乳头，细胞轻度异型性，仅少数细胞有核沟，术中报微小癌；石蜡切片经多次取材未能找到较多的核沟、明显的毛玻璃核及核内包涵体，加做免疫组化也未能证实乳头状癌，最后报告为结甲伴灶性滤泡上皮乳头状增生。在延迟诊断9例中3例是由于冰冻过程中组织出现了结晶，以致染色不良影响了诊断；3例为结甲伴区域性乳头状增生，不能排除乳头状癌；其中2例常规诊断为乳头状癌，另1例依为结甲伴灶性滤泡上皮乳头状增生；1例滤泡性肿瘤侵犯部分包膜但未穿透，因取材局限性未能定性，建议待石蜡、常规切片中找到明确的包膜穿透结构，诊断为滤泡性癌；1例在桥本氏甲状腺炎中见灶性增生性乳头，由于乳头数量少，未能定性，石蜡切片诊为桥本氏甲状腺炎合并乳头状癌；1例诊为桥本氏甲状腺炎、淋巴瘤待排，术后经免疫组化检查确定为甲状腺非霍奇金淋巴瘤。

总之，虽然甲状腺术中冰冻切片诊断还存在一定局限性，但在目前来说它仍是甲状腺病变的主要诊断方法之一。病理诊断医师应全面深入了解甲状腺病变的形态学特点，提高对甲状腺病变，特别是冰冻切片与石蜡切片异同的认识，与临床医师紧密配合，提高冰冻切片的准确率，减少误诊，保证医疗质量。

参考文献

1 Rossi J Ackerman.外科病理学［M］.北京:北京大学医学出版社,2006:562.

2 Emanuelle L,Xavier L,Francois P,et al.Why do frozen sections have Limited value in encapsulated or minimally invasive follicular carcinoma of the thyroid［J］.Am J Clin Pathol,2001,115(30):370-374.

3 陈乐真,于占洋.提高冰冻切片诊断准确性的经验和体会［J］.中华病理学杂志,2000,29(2):140-142.

4 洪声明.1663例甲状腺疾病的病理分类［J］.中国医科大学学报,1994,23(6):563-564.

5 Ronald AD,Ricardo VL,Philipp UH,et al.World Health Organization classification of tumoys:Pathology and genetics of tumors of endocrine organs United Kingdom Europe［J］.Oxford university Press,2004,20(1):57-66.

6 沈立红,李宁江,杜水清,等.甲状腺癌冰冻切片与组织病理切片的对照研究［J］.中国基层医药,2010,17(1):84.

7 陈乐真.手术病理诊断图鉴［M］.北京:科学技术文献出版社,2005:97.

甘肃：基本药物实现“电子身份证”

本刊讯（记者 王夏玲） 目前甘肃省对省内生产基本药物的企业实现了全品种覆盖抽验，所有在产的基本药物品种全部具备赋码条件，全面实现对基本药物的电子监管。

为进一步保障药品安全，甘肃省逐步对参加招标的基本药物实行电子监管，即使是售价0.1元的小包装基本药物中标品种，出厂前也要带上“电子身份证”，即统一的药品电子监管码。

截至目前，甘肃省各级食药监部门已对卫生部规定的307种国家基本药物及甘肃省增补的206种基本药物，涉及省内生产企业的，进行了全品种覆盖抽验，并加大了對流通环节的基本药物，特别是生物制品、注射剂、有特殊储存要求等品种药物的监督抽验力度。

同时，力争甘肃全省30%的零售企业在2012年年内开展全部药品电子监管试点工作。

篇5：手术中冰冻切片病理检查志愿书

门诊、住院科 室ID号住院号

姓名年龄性别职别单位

手术中冰冻切片病理检查是将切下的病变组织在冰冻切片机中迅速冷冻后制成病理切片，由病理医师即刻在显微镜下检查，做出病现诊断，主要目的是：（1）帮助判断病变的性质。如：炎症、肿瘤或其它性质的病变；如果是肿瘤，则需进一步判断是良性还是恶性肿瘤。（2）帮助判断切除肿瘤组织的边缘是否有残留的癌组织。（3）帮助辨认手术切除组织。

（4）判断手术切除的淋巴结中有无转移的癌细胞。冰冻切片病理诊断结果作为术中会诊意见提供给临床医生，临床医生将其作为重要的参考依据决定进一步手术的方式和范围。与常规石蜡包埋切片相比，冰冻切片诊断的局限性是：（1）冰冻切片质量较差，诊断准确率低于常规石蜡切片。（2）在做冰冻切片采取活检组织时，有造成肿瘤种植的可能，特别是在甲状腺和肺等实质器官。（3）术中冰冻切片技术不适用于脂肪组织和骨组织。（4）某些疑难病例和交界性病例有时在石蜡切片诊断都很困难，需要做免疫组化和电镜观察，仅凭冰冻切片难以确定诊断，因而要延缓病理诊断。（5）冰冻切片取材局限，有时局部的组织不能代表整个标本。因此，有的病例冰冻切片组织象和手术切除大标本的石蜡切片组织象相差很远，甚至造成假阴性诊断。（6）病变组织在冷冻过程中不可避免地形成冰晶，以及组织处理和诊断时间紧迫等技术因素所限，“冰冻”诊断的准确率有一定的局限性，有可能与最终的“常规”病理切片诊断不相符合，最后病理诊断应以“常规病理诊断为准”。

医师签名：年月日

我已仔细阅读并了解上述关于“冰冻”切片病理诊断的作用及其局限性，同意对实施手术中切除的病变组织进行冰冻切片快速病理检查。

患者本人签字：

代表签字：（与患者关系：）

年月日

篇6：冰冻切片中常见问题分析

郑则钦

庞瑾昱

陈斌

【摘要】 目的 探讨冰冻切片技术在临床病理诊断中的应用。方法 收集外科手术中冰冻诊断病例，应用快速冰冻切片法、快速冰冻染色法等对冰冻诊断病例进行分析。结论 冰冻切片技术中常见的问题及改进；影响冰冻切片质量的因素；冰冻切片在病理诊断中的作用。

【关键词】 冰冻切片； 病理诊断

冰冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度进行切片的一种方法，是手术过程中采取活体标本，进行快速的组织学诊断的方法，其便捷的优点，利于术中确诊病变性质，决定手术范围，但由于各种原因，影响冰冻切片的质量，拖延病理报告发出的时间，直接影响着病理诊断的及时性、准确性，间接影响病人的预后。

材料与方法

1.材料：收集外科手术中冰冻诊断病例

2.方法：应用快速冰冻切片法、快速冰冻染色法等

结

果 组织取材大小要适宜，约为1.5×1.5㎝,厚2㎜。2 坏死组织影响冰冻切片的完整性。3 冰冻时间根据组织的大小及性质所决定。4 冰冻温度一般设置在－18～－20℃。5 染液的酸碱度要适宜。1 组织取材对制片的影响 组织取材大小：组织块大小要适宜，冷冻切片机内切片刀移动的范围有一定的限制，超出其范围时，易致切片不全。一般情况下，冰冻切片的组织大小为1.5×1.5㎝,厚2㎜。但卵巢肿瘤及脂肪组织可稍微大些。组织块过大，切片时阻力过大，易产生皱折，刀痕，组织易崩碎，增加制片难度，影响诊断。如需在同一标本托上放大于两块组织时，应尽量冻成一个平面，与刀锋平齐，以防切片不完整，发生漏诊。若送检组织过小，请预先速冻一冷台面，再行包埋，利于制片。另外，包埋时，应将组织平放在冻头的中央。组织内含过多的脂肪或坏死组织：脂肪或坏死组织较一般的组织冷冻的温度要低些，当活组织达到所需的温度时，其还比较软，从而影响切片的完整性和拖延冷冻报告发出的时间。组织块过冷：组织冷冻过度易致切片破碎或呈粉沫状，不能制作一张完整的切片。组织块冷冻不均匀：在配合使用液氮时，组织块放入液氮时不能保持水平状态且液氮量不足的情况下，可产生此现象。冻头的温度不足：冷冻切片时要求冻头的温度保持在－25℃～－30℃左右，冻头的温度达不到要求时，组织很快回软，也不能保证切片的完整。冷冻时间对制片的影响：根据组织块的大小、性质，确定冷冻时间，一般13～17s（使用液氮者），若组织较大或脂肪组织时间可适当长些，而甲状腺、脑组织和淋巴组织等冷冻的时间相对要短些。冷冻时间要严格掌握，时间过长，切片易脆碎，其处理方法是：切出完整平面后用戴乳胶手套的拇指按压回温，直到切片完整为止，反之，时间过短，则需继续冷冻，直到组织不粘刀片出现完整切片为基准。冷冻箱体工作温度对制片的影响：一般组织设定为－18～－20℃。但对一些较特殊的组织标本，温度应适当调整，如脂肪成分较多的组织以－30～－35℃为宜，纤维腺瘤，子宫等为－20℃，淋巴结，甲状腺为－18℃，切片时，表面玻璃机器盖子不要打开过大，以免箱体回温过快，影响制片。保持冻箱的温度，做到每次做完冷冻切片应关好冷冻箱的盖子。染色对制片的影响：尤以细胞核的染色最为关键，在寒冷的冬季，室温过低时，影响核的着色，可适当加温，用以增色，苏木素的酸碱度应适宜，经常观察其染液的ph值，过碱时应及时更换，盐酸酒精分化适度，时间控制到位，否则易造成核着色不佳，染色质不清晰，影响诊断的准确性。冰晶的形成对制片的影响：此原因主要取决于组织含水量的大小，尤以组织细胞水肿，淋巴结，纵隔肿瘤，卵巢肿瘤为甚，送检取材过程中接触水源，速冻过程中使用的液氮时间尚未控制好，同是造成冰晶形成的原因，其解决方法为，使用液氮时间上控制到位，保证一次冻透标本，组织送检取材时，尽量避开水源，如遇含水量高的标本时，应尽量用干纱布吸干水分后再行冷冻，避免由于冰晶形成出现诊断上的失误。操作者的动作应迅速。6 切片皱缩或卷缩：这也是影响切片质量的重要因素之一。常见的原因有：①刀锋变钝。② 防卷板粘有异物，防卷板的作用是防止切片卷缩，但若粘有异物，切片时组织会被挤压而缩在一起。③ 防卷板与刀锋的位置不平行、不协调。④ 组织块包埋不完全，缺乏支撑作用。

预防与处理的方法：① 注意检查刀具，及时更换刀口，定期磨刀。② 保持防卷板的清洁，每做一例冷冻切片，均应将刀口及防卷板拭擦干净，防止切片的污染和切片皱缩。③ 调整刀、防卷板的位置，保证两者平行，且防卷板比刀锋前0.2㎜左右。④ 包埋组织应完全，没法切片者再滴加包埋胶。7 切片脱落：冷冻切片是利用温度差（即玻片与组织切片的温度差）将切片粘贴在玻片上，然后进行固定、染色。下面几种情况下可影响切片粘贴的牢固程度，而导致切片脱落：① 组织内含过多的坏死组织。组织细胞坏死崩解后，局部的渗透压升高，吸收水分，切片一经固定，水分逸出，坏死组织失去支撑作用，染色时组织容易脱落。② 固定液浓度过低，这是最常见的原因。③ 载玻片不干净。④ 切片太厚。

预防及处理方法：避免组织内带有坏死组织，条件允许者重新取材；若没有组织可代替，切片固定时间长些，经95％乙醇双重固定后，用电吹风将切片吹干（温度不能过高，以防破坏组织结构）然后再进行染色且动作应轻柔。② 定期更换固定液。一般每周更换一次，例数较多者，适当增加次数；另外，每次做完冷冻，应及时将盛固定液的瓶盖盖好，以防固定液挥发而降低其浓度。③ 保持载玻片干净，平时应将玻片盖好，防止灰尘或其它异物的污染。若新购买的玻片较脏，洗涤过后才使用。④ 调好切片的厚度，切片厚度以5～7um较为合适（脂肪组织可稍为厚些）。组织块脱落：冷冻切片一般要求在30min内发出病理报告，以便手术医生能尽快选择手术方式。但若组织块脱落，会拖延病理报告发出的时间，而耽误病人的手术时间。常见原因有：① 冻头在冷冻机内放置时间过长，致使包埋胶还来不及渗到冻头的底部便凝固了，导致包埋胶与冻头粘连不紧，稍受外力的作用便脱落；② 冻头上的包埋胶冲洗不干净。