复方柏椒提取液抗炎止痛效果的动物实验研究

口腔溃疡是一种常见病症, 疼痛是其主要症状, 目前在治疗口腔溃疡疼痛方面尚没有特效药, 临床上常用口服止痛药物种类较多, 但对胃肠道的副作用明显, 而局部止痛药物特别是中药的类型甚少。本研究采用中药提取液-复方柏椒液通过动物实验来探讨其止痛、抗炎作用, 拟为其临床应用提供实验基础。

1 实验材料

1.1 动物及饲养

昆明种小鼠, SPF级, 17~20g, 由山东泰邦生物制品有限公司提供;合格证号:SCXK鲁20030011;雌雄分笼饲养, 每笼10只。短毛豚鼠, 清洁级, 280~330g, 雌雄各半, 由山东泰邦生物制品有限公司提供;合格证号:SCXK鲁20030011;雌雄分笼饲养, 每笼5只。

1.2 仪器与试剂

复方柏椒液: (山东美林制药有限公司提供) 。二甲苯:莱阳市康德化工有限公司, 批号:20080814。扶他林乳膏:山东鲁抗辰欣药业有限公司, 批号:1002192013。磷酸组织胺:中国药品生物制品检验所, 批号:150510~200412。电子天平:赛多利斯科学仪器 (北京) 有限公司。

2 实验方法

2.1 复方柏椒液对小鼠二甲苯耳肿胀的影响

昆明小鼠50只, 雌雄各半, 随机分5组, 10只/组。分别为空白对照组, 扶他林乳膏组, 及复方柏椒液组, 用20μL二甲苯涂于小鼠右耳两面致炎, 致炎后15min在小鼠右耳分别涂抹蒸馏水, 扶他林乳膏, 复方柏椒液。

2.2 复方柏椒液单次用药对小鼠热板法所致疼痛的影响

将室温控制在20~23℃, 对雌性小鼠进行筛选。将热板水温恒温至 (55±0.5) ℃, 小鼠放在热板上5~30s内出现舔后足反应者为合格小鼠, 将入选小鼠挑出, 分别为空白对照组, 扶他林乳膏组、复方柏椒液组, 测定各组小鼠的痛觉潜伏期前, 统计小鼠的痛觉潜伏期。

2.3 复方柏椒液多次用药对小鼠热板法所致疼痛的影响

将室温控制在 (20~23) ℃, 对雌性小鼠进行筛选。将热板水温恒温至 (55±0.5) ℃, 小鼠放在热板上5~30s内出现舔后足反应者为合格小鼠, 将入选小鼠挑出, 分别为空白对照组, 扶他林乳膏组。复方柏椒液组潜伏期按60s计。统计小鼠的痛觉潜伏期。

2.4 复方柏椒液对磷酸组织胺致痒作用的影响

将豚鼠随机分为5组, 每组8只。各组分别为:阴性对照组;扶他林乳膏;复方柏椒液高、中、低剂量组。试验前剪去豚鼠右后足背毛并用砂纸擦伤皮肤, 各组均匀涂抹相应药物或蒸馏水。最后一次给药30min后, 用0.1%磷酸组织胺0.05m L, 分别涂在各组豚鼠的创面处。记录并比较各组涂抹组织胺次数及致痒阈 (最后出现豚鼠回头舔右后足时所给予的磷酸组织胺累积用量) 。

2.5 统计学分析

采用SPSS 11.0软件包对数据进行统计学处理, 测量数据结果用 (x-±s) 表示, 2组比较采用t检验。

3 实验结果

3.1 复方柏椒液对小鼠耳肿胀的影响

小鼠耳肿胀实验结果表明:阳性对照组扶他林乳膏对小鼠耳肿胀有明显的抑制作用;与空白对照组相比, 复方柏椒液组均对小鼠耳肿胀有显著性抑制作用, 且随着剂量的增加其作用越强。

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3.2 复方柏椒液一次用药对小鼠热板致痛的影响

热板模型可反应动物对热刺激的耐受性和其痛觉敏感性。复方柏椒液在给药40min后显示出镇痛效果。通过对复方柏椒液对镇痛的时效曲线, 可以发现在用药60min时, 镇痛作用最强。

3.3 复方柏椒液多次用药对小鼠热板致痛的影响

小鼠热板实验结果表明:阳性对照组扶他林乳膏对小鼠热板致痛有明显的抑制作用;与空白对照组相比, 复方柏椒液组均对小鼠热板致痛有显著性抑制作用, 且随着剂量的增加其作用越强。

3.4 复方柏椒液对磷酸组织胺致痒作用的影响

豚鼠对磷酸组织胺致痒作用实验结果表明:阳性对照组扶他林乳膏对豚鼠有明显的止痒作用;与空白对照组相比, 复方柏椒液组均对磷酸组织胺致痒有显著性抑制作用, 且随着剂量的增加其作用增强。

4 讨论

复方柏椒提取液的组成及提取:本中药制剂的配方组成:黄柏、花椒、枯矾、苦参、乳化碘。将上述中药按一定比例经过煎煮、醇沉、浓缩、过滤、净化后与乳化碘混合取得提取液。 (中药配方及提取液均由山东美林制药有限公司提供) 花椒是传统中药, 具有“温中止痛, 杀虫止痒”的药效。现代研究成果显示国内外花椒属植物的化学成分主要有生物碱、酰胺、木脂素、香豆素、挥发油和脂肪酸等, 具有镇痛、镇静、抗炎、局部麻醉、抑菌作用;对免疫机能、凝血功能等均有较强的药理活性。另外, 研究发现花椒的水煎剂、醚提取物和水提取物都能减少酒石酸锑钾或乙酸引起的小鼠扭体反应次数, 延长热痛反应的潜伏。

花椒稀醇浸液也有局部麻醉作用。在家兔角膜的表面麻醉中, 效力较地卡因稍弱。在豚鼠的浸液麻醉中, 效力强于普鲁卡因。黄柏治疗口舌生疮颇具良效。

通过本文实验结果, 复方柏椒液其抗炎作用明显, 镇痛作用起效快, 作用时间长, 止痒作用显著。可以做为治疗口腔溃疡疼痛的一种较理想的中药方剂, 虽然本研究证实复方柏椒液具有较强的抗炎作用, 但其能否加速口腔溃疡面愈合尚待进一步研究和探讨。

摘要：目的 探讨复方柏椒提取液的止痛抗炎效果。方法 建立小鼠热板及致炎模型, 采用复方柏椒液局部涂抹, 观察其抗炎止痛效果。结果 小鼠耳肿胀实验表明:阳性对照组扶他林乳膏对小鼠耳肿胀有明显的抑制作用;与空白对照组相比, 复方柏椒液组对小鼠耳肿胀有显著性抑制作用;复方柏椒液在给药40min后显示出镇痛效果。用药60min时, 镇痛作用最强, 复方柏椒液组对小鼠热板致痛有显著性抑制作用。结论 复方柏椒提取液能有较强的止痛抗炎效果。

关键词：复方柏椒提取液,动物实验,止痛

参考文献

[1] 凌智群, 魏居国, 程宝宏, 等.花椒功效的初步考证[J].陕西中医学院学报, 2008.

[2] 张明发.花椒温经止痛和温中止泻药理研究[J].中药材, 1994.

[3] 孙洪范, 吴明燊.花椒对蟾蜍离体神经的作用[J].贵州医药, 1990.