第一篇：微生物活菌制剂范文
活菌微生态制剂降低养殖肉鸡抗生素使用量
活菌中药微生态制剂降低肉鸡养殖抗生素量
养殖业是一个高风险行业，俗话有“家有万贯，带毛的不算”的说法。不仅如此，养殖业带来的高污染也已严重危害到人的生存环境和健康。臭味难闻，粪污遍地，连地下水也受到污染，引发了人们的担忧。而因违规大剂量使用抗生素的“速成鸡”事件更是让整个养殖业蒙上了一层阴影。
如何能让养殖业少用或不用抗生素?如何能让养殖场无污染无臭味?如何保证养殖的品质和稳定收益„„这些都已成为养殖业亟待破解的难关。就此，记者采访了多位专家和业内人士，在众多的方法和观点中，哈尔滨中科生物工程有限公司生产的活菌中药微生态制剂生态养殖解决方案让人耳目一新。利用活性乳酸菌和发酵中药介入养殖的各个环节，实现了养殖无污染，无臭味，减少或替抗生素用量，产品品质提升，养殖成本下降，无疑让人看到了现代养殖业发展的前景，成为破解养殖难题的“密钥”。
五十年年磨一剑，活菌中药微生态制剂显身手
2012年4月14日，在湖北省大冶市某一规模化养殖场内，工人们正在忙着堆积养鸡大棚内的垫料。整个养殖场内没有一点臭味，场区内外也不见粪污遍地流的情形。工人开玩笑说，这儿夏天都不生苍蝇。这是哈尔滨中科生物工程有限公司的产品使用
的忠实客户，为了推出成熟的“活菌中药微生态制剂养殖方案”，该公司潜心研究活菌发酵中药11年。
目前这一技术的应用已经得到广大养殖户的认可，3年来这场子一滴污水都没排，不仅不排污，抗生素也比规定量减少约80%，效益很不错。利用活菌中药微生态制剂不仅能解决养殖存在的难题，还能有效降低很多成本。
但在3年前，这儿与其它传统养鸡的地方一样，老远就能闻到随风飘来的臭味，场区内污水横流，直接排到场外，为此，生活受到影响的当地农民，多次上访反映环境污染问题，但最终都没能解决好。当时检测地下水大肠杆菌数，超标50-200倍不等。
“过去养鸡完了要靠水冲洗鸡舍，污水都随着渗入地下或排到附近的河流中，鸡粪的运输和处理也造成很大的污染。鸡发病率很高，为了预防，抗生素用量都很大。”该场负责人说，现在这些问题都没有了，养殖场真正成了生态绿色养殖。
活菌中药微生态制剂，立体介入肉鸡养殖
所谓活菌中药微生态制剂，是指用活性乳酸菌对精选中药进行发酵，经特殊生产工艺进行生产和包装的微生态制剂产品。在饮水、空气喷雾消毒中使用活菌微生态制剂产品“活菌剂”，从而给鸡舍营造出一个活菌微生态环境，促进活性乳酸菌的繁殖，抑制有害菌毒的生长，并在全国得到大量推广应用。
活菌中药微生态制剂的作用是多方面的，作用方式主要包括：①维持肠道菌群正常化;②维持瘤胃功能正常化;③提高消化道的吸收功能;④抑制毒素的产生;⑤提高动物的免疫功能;⑥分解氨气等有毒有害气体浓度。其效果主要表现在营养功效和疗效两大方面，包括提高饲料利用率，降低料肉比;促进畜禽增长，提高日增重;缩短饲养周期，提早出栏，降低管理成本;提高畜禽的品质;降低环境污染的程度;减少病害发生，提高存活率等。
减替抗生素，鸡肉安全收益高
从理论上，达到一定条件，鸡舍内的有益微生物形成良性循环后，除正常疫苗防疫外，生长过程可以不用抗生素，能够实现无抗养殖，对于一些消化道和呼吸道问题，产品中的发酵中药代替治疗。在现实生产中，由于老鸡场的有害菌在空气和土壤中积累太多，需要缓慢改善，疫苗要正常使用，病情严重时还要用一定量的抗生素。但使用活菌中药微生态制剂后，抗生素用量明显减少75%以上。
据了解，目前传统养鸡法中，抗生素用量每只鸡最少要1.2元，利用活菌中药微生态制剂，提高了成活率，节约了饲料，大大减少了抗生素用量，鸡肉品质明显改善，每只鸡至少增收1.5元，一个大棚1万只鸡，一年按4批算，也要多收入6万多元。
降低养殖业抗生素使用 中草药入《饲料原料目录》
从省畜牧局了解到，新《饲料原料目录》于今年起正式实施。有关人员表示，天然中草药没有列入到农业部饲料添加剂目录里，但是新出台的原料目录，有些中草药的成分列入其中，有关工作人员介绍，“目录里像当归、黄芪等中药成分都有，对于已经作好的中草药成品，可以以饲料添加剂来申报，只要这个添加剂的成分在原料目录里有，就可以按相关规定进行申报。”
对于养殖业抗生素滥用的问题，有多位专家表示，用活性乳酸菌发酵天然中草药等饲料添加剂可以避免抗生素残留问题，但因为中草药一直未列入农业部饲料添加目录，使得推广存在阻力。中药材此次进入目录也引起争议。
饲料行业以往也经常把中药材作为原料。多年来，为克服现代化学合成饲料添加剂与抗生素药物的滥用，畜牧专家与养殖企业一直在探索运用中草药解决抗生素污染问题。但有些人并不认同将中药材列进去:“因为中药材成分复杂，在检测方法方面还不够完善。”
在实际采购中，有人会利用中药材检测方法不完善的缺陷，在中药材原料中添加一些违法的原料也有可能。饲料企业在使用中药材过程中，一旦不小心采购到添加有违法成分的中药材，最后也会出现质量问题。
同时，新目录剔除了皮革蛋白粉、饲料级混合油，规范原料包装标识，被行业认为有利于控制原料来源安全，保证饲料质量。
活菌中药发酵微生态制剂又称第四代益生素，该系列产品由哈尔滨中科生物工程有限公司于2002年首创研发，活菌中药微生态制剂采用活性乳酸菌对精选中药进行发酵，并使用特殊包装工艺进行保湿包装，既保持了乳酸菌的活性，又提高中药功效4-28倍。主要产品有“猪源康”、“冠菌道”、“肠速康”、“本草倍利康”。大家购买时一定要认清厂家和品牌，市场上目前出现许多干粉制剂，由于生产时需要经过高温，活菌都变成死菌，出售时却宣传是活性乳酸菌，使用后一点效果也没有。使用活菌中药微生态制剂按治疗剂量进行拌料或饮水，可以迅速控制由以上原因引起的腹泻，连续使用3天，不仅见效快(24小时见效)，而且以其高效、广谱、绿色无公害、无药残等特点被广大养殖户所认可。
第二篇：农业微生物制剂生产与运用论文
农业微生物制剂的活性菌分离与鉴定
学生姓名： 学 号： 指导教师： 所在学院： 专 业：
中国·大庆 2013 年 6 月
农业微生物制剂的活性菌分离与鉴定
摘要：微生物制剂是以自然界中分离的有益菌为主体开发的产品，在健康、环保及农业生产上应用广泛。某农业微生物制剂在海南的热带农业生产中能显著增产和增强作物抗性，为了了解该微生物制剂的作用机制，本研究采用平板划线法对活性菌进行分离和纯化，对分离菌株进行生长、形态及显微观察，对16S rDNA 进行序列PCR 扩增、测序及生物信息学分析，鉴定活性菌的种属。结果表明，分离得到2个形态不同的细菌菌株，通过形态观察及16S rDNA 序列的分子鉴定，发现这2个菌株与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有99.9%的同源性;2 个菌株的16S rDNA 序列的比较结果发现它们有7个碱基的差别，说明这2个菌株可能是不同的生理小种。
关键词：农业微生物制剂;活性菌分离;16S rDNA;分子鉴定
Isolation and identification of active bacteria from agricultural
microbial agents Abstract：Microbial agents are useful products made of beneficial bacteria that isolated from nature environment, and it was extensively applied to healthcare, environment protection and agricultural production. A microbial agent has significant effects on increasing yield and improving disease resistance for Hainan tropical agriculture. In order to discover the activity mechanism of this microbial agent, it was necessary to isolate and identify its active bacteria. In this research, the following methods were applied, including active bacteria isolating and purifying, growth observation, morphological and microscopic observation, PCR amplification of 16S rDNA, sequencing and bioinformatic analysis. The results showed that two bacterial strains with different morphological character were isolated,16S rDNA sequences were amplified and sequenced，bioinformatic analysis indicated that 16S rDNA sequences of the two strains had 99.9% identities with that of Bacillus subtilis. Moreover, the 16S rDNA sequences of the two strains were compared with each other, and 7 base differences were found, it indicated that the two strains were different physiological races of Bacillus subtilis. Key words： agricultural microbial agents; isolation of active bacteria; 16S rDNA; molecular identification
前言
随着科技进步， 发展有机农业和生态农业是大势所趋[1-2]，农业微生物制剂在农业生产中正发挥着越来越重要的作用。农业微生物制剂通常含有单一或多种特定的功能菌株，能为植物提供有效养分或防治植物病虫害，并在保持土壤肥力、提高化肥利用率、促进作物生长、拮抗土传病害、维持生态系统平衡等方面起重要作用[3-4]。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是微生物制剂中的常用菌类之一，为革兰氏阳性需氧菌，无荚膜，有鞭毛，能活动，芽孢位于菌体中央或稍偏，广泛分布在土壤及腐败的有机物中。枯草芽孢杆菌在农业病害的生物防治上具有很大的潜力，菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，对几十种真菌、细菌和病毒性病害有明显的抑制和杀灭作用， 具有净化土壤环境、保护作物根系、减轻土传病害的发生的作用[5-6]。枯草芽孢杆菌对外界有害因子的抵抗力强、分布广、耐热性好，是理想的生防菌对象，目前全世界收集保存了几百株野生型枯草芽孢杆菌菌株， 能够产生40 多种具有不同结构的抗菌物质。香蕉枯萎病影响全球香蕉种植业的发展，采用拮抗细菌来对香蕉枯萎病进行防治成为人们研究的热点，徐雪莲等[7]从红树林中分离得到2 株对香蕉枯萎病有抑制作用的内生芽孢杆菌菌株。
本研究对具有增产和抗病效果的某农业微生物制剂中的活性菌进行分离纯化、形态观察和分子鉴定，以研究微生物制剂中活性菌的组成情况。
1 材料与方法
1.1 试验材料
某农业微生物制剂、高压灭菌器、超净工作台、恒温培养箱、高速冷冻离心机、PCR 仪、各种型号移液器、电泳系统、凝胶成像系统。Taq DNA 聚合酶、dNTPs 等均购自上海生物工程有限公司。
1.2 试验方法
1.2.1 活性菌的分离与纯化
分离活性菌采用涂布分离法，LB 培养基配方参照《植病研究方法》[8]。将培养皿、蒸馏水、培养基等用品在0.103 Mpa、121℃条件下高压蒸气灭菌20 min;在超净工作台进行无菌操作，每皿约含15 mL培养基，待其冷却凝固。取约0.1 g 微生物制剂粉末放入1.5 mLEP 管中，加1 mL无菌水配成悬浮液，然后依次稀释成10-1 、10-
2、10-
3、10-4 的样液。取上述样液用涂布法分别划线接种到4 个培养皿中，用封口膜将培养皿密封，标注日期及对应编号，37℃恒温培养箱中培养观察。挑取单克隆进行纯化培养，并对纯化的菌落进行形态观察和显微观察。
1.2.2 CTAB 法提取细菌DNA及电泳检测
采用改良CTAB 法(1.7% CTAB，1.17 mmol/L NaCl，17.5 mmol/LEDTA，80 mmol/L Tris-HCl，pH8.0，1%β-巯基乙醇)，小量法提取细菌基因组DNA[9]。刮取纯化培养的菌体约0.2 g，收集在1.5 mL EP 管中，加入1 mL CTAB 抽提液，充分混匀，65℃温育30 min，中间摇匀2 次;加入等体积的V氯仿：V 异戊醇=24∶1 混匀，12 000 r/min 离心10 min，取上清，重复1 次;上清中加入等体积异丙醇，混匀静置5 min，12 000r/min 离心10 min;弃上清，得DNA 沉淀，用75%乙醇清洗2 次， 稍晾干后用TE 溶解。用1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA 完整性，用紫外分光光度计测定DNA 浓度，保存于-20℃备用。
1.2.3 PCR 扩增与电泳检测
以提取的细菌DNA 为模板，对16S rDNA 的基因进行扩增，引物序列为16S rDNAF(5’ATCGGAGAGTTTGATCCTGGCTCAG3’)、16S rDNA-R [10]。PCR 反应体系为20 μL，包括：2 μL 10×Buffer、0.3 μL dNTP (10 mmol/L)、Taq DNA 聚合酶1 U、0.8 μL 引物(10 μmol/L)、DNA 模板40 ng。PCR 反应程序为：95℃ 5 min，1 个循环;95℃ 40 s，55℃ 1 min，72℃ 1 min，35 个循环;72℃ 10 min，1 个循环;4℃保存终止反应。扩增产物用1%琼脂糖凝胶电泳检测，在Gel-2000 凝胶成像系统(Bio-Rad 公司)观察记录。
1.2.4 16S rDNA 序列的测序及生物信息分析
将PCR产物条带切胶回收纯化，与pGEM-T 载体连接，42℃热击法转化感受态细胞DH5α，通过蓝白斑筛选，挑取白斑菌落转化子， 通过菌落PCR 验证阳性克隆， 将阳性克隆摇菌，送上海生物工程公司测序。将测序结果通过BLASTn软件与GenBank 中的NR 核酸数据库进行序列相似性检索，通过比较与已知序列信息的同源程度，推测16S rDNA 序列代表的细菌种属。
2 结果与分析
2.1 活性菌的分离纯化与观察
通过分离纯化，从微生物制剂中分离得到2个菌株，2个菌株的共同点是菌落表面粗糙不透明、污白色或微黄色。2个菌株在菌落形态上也存在一些差异，1 号菌的菌斑边缘光滑，2 号菌的菌斑边缘呈锯齿状(图1)。对2个菌株进行革兰氏染色观察，发现革兰氏染色为阳性，菌体为杆状，染色时着色均匀，能活动。2 个菌株在显微镜下没有观察到形态上的显著差异。
2.2 16S rDNA 序列的PCR 扩增
分别提取2个菌株DNA，对16S rDNA 序列进行PCR扩增，产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，结果如图2 所示，可见1 号菌株(K01)和2号菌株(K02)的PCR 产物都在1 500 bp 左右，条带清晰唯一，可进行后续试验。
2.3 重组子的菌液PCR 鉴定
将1号和2号菌株的16S rDNA 的PCR 产物切胶回收，与T 载体连接，转化大肠杆菌DH5α，经过蓝白斑筛选，挑取阳性克隆，摇菌，用16S rDNA 的引物对菌液重新进行PCR扩增，电泳检测结果如图3所示。结果表明，阳性克隆的PCR 产物大小在1500bp左右，与预期的结果相符。
2.4 测序及生物信息学分析
将阳性克隆的菌液送到上海生物工程公司测序。测序得到1 号菌的序列全长1 518 bp，通过NCBI 网站进行生物信息学分析，通过BLASTn 检索，得知1 号菌的16SrDNA 序列与枯草芽孢杆菌基因组(AL009126.3，Bacillus subtilis supsp ste.168 complete genome) 的相似程度为99.67%。测序得到的2 号菌株的序列全长1 519 bp，通过NCBI 网站进行生物信息学分析，通过BLASTn 检索，得知1 号菌的16S rDNA 序列与枯草芽孢杆菌基因组(AL009126.3，Bacillus subtilis supsp ste.168 complete genome)的相似程度为99.87%。
2.5 菌株之间16S rDNA 序列的比较
通过NCBI 网站BLASTn 平台的bl2seq 程序，对1 号菌株和2 号菌株的16S rDNA 序列进行双序列比较，结果表明，两个菌株的16S rDNA 序列，有1 512 个碱基是一致的，有7 个碱基位点存在差异(图4)。由于这2 个菌株在菌落形态方面有差异，16S rDNA 的序列从分子水平进一步验证了这种差异， 说明这2 个菌株可能是枯草芽孢杆菌的两个不同生理小种。
3 结论与讨论
16S rDNA 是编码原核生物核糖体小亚基16S rRNA的基因，长度约为1 500 bp，是细菌分类学研究中最常用、最有用的“分子钟”， 其序列包含10 个可变区(variable region)和11 个恒定区(constant region)。可变区因细菌种类而异，且变异程度与细菌的系统发育密切相关，现代细菌分类学以此作为重要的分类依据[10]。16S rDNA 的保守性使应用单一方法进行细菌的统一检测成为可能， 基因诊断的灵敏度高、快速准确。
参考文献
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第三篇：《生物药物制剂学》实习报告
药物制剂实习-乳剂和固体制剂的制备
乳剂的制备以及鉴别
一、乳剂定义以及特点
(一)、定义：乳剂是指互不相溶的两相液体经 乳化而形成的非均相液体分散体系。
(二)、特点：分散度大、药物吸收快、起效快，有利于提高生物利用度
二、目的：掌握乳剂的一般制备方法和乳剂类型的鉴别方法
三、实验材料：乳钵、试管、电子天平、量筒、鱼肝油、麻油、氢氧化钙、阿拉伯胶等
四、实验方法
1、鱼肝油乳的制备
(1)、直接混合法
将油、水和乳化剂加在一起，搅拌制成乳剂
(2)、处方：鱼肝油 10ml ;阿拉伯胶 3.5g ; 蒸馏水 制成50ml
(3)、制法：将阿拉伯胶研细后，加入鱼肝油研均匀后，加蒸馏水6.3ml后，迅速同向研磨，研出有劈裂声，油色即黄色变成乳白色，加蒸馏水适量转移至量杯至50ml，即得。
(4)、处方分析：鱼肝油 主药和油相;阿拉伯胶 乳化剂 ;蒸馏水 水相
(5)、注意：研钵应为干燥钵;加蒸馏水6.3ml后，应迅速同方向研磨
2、石灰擦剂的制备
(1)、新生皂法
在油、水两相界面上发生化学反应生成新生皂乳化剂，经搅拌即形成乳剂
(2)、处方：氢氧化钙饱和溶液上清液 6ml ;麻油 6ml
(3)、制法：将两者混合、强力振摇，即得。
(4)、处方分析：氢氧化钙主药;麻油油相;新生皂 乳化剂
(5)、注意：化学方应生成乳化剂钙肥皂;石灰水别搅拌，取上清液
3、鉴别乳剂
(1)、颜色：
(2)、皮肤触觉：是否有油腻感
(3)、稀释法：取试管两只，分别加入鱼肝油乳和石灰擦剂1ml，加入蒸馏水5ml，振摇翻转数次，观察是否均匀混合
(4)、滴在滤纸现象：是否快速扩散
4、结果附表
固体制剂的制备-益元散的制备
一、散剂定义以及特点
(一)、定义：散剂是指一种或数种药物经粉碎、混匀而制成的粉末状制剂。
(二)、特点：散剂比表面积较大，因而具有易于分散，利于敷布吸收，奏效快;制备方法简便，剂量容易控制，药质比较稳定;适于小儿服用;运输携带比较方便。
二、目的：掌握一般散剂的制备方法;熟悉“等量递增法”
三、实验材料：朱砂 滑石粉 甘草 电子天平
四、实验方法：
1、处方 滑石粉12g;甘草 2g;朱砂 0.6g
2、制法
(1)、粉碎将甘草粉碎
(2)、混合
A 取量大、色浅的滑石粉置乳钵中研磨，使之充分饱和表面后，将其倒出
B 将量少、色深朱砂放入乳钵中研磨
C 加入与朱砂等量的滑石粉，同一方向轻研至均匀
D 将剩余滑石粉按等量递增法加入至完全，充分混合
E 将甘草加入混合物中，轻研至完全混合
3、质量检查
(1)、性状： 颜色以及手捻感觉
(2)、均匀度检查
肉眼检查法：取适当的散剂置于光滑的纸上，用适量的工具将其压平，在光亮处观察，应呈现均匀的
色泽，若有色斑或条纹则说明尚未混匀。
4、注意：饱和研钵;等量递增法
固体制剂的制备-硬胶囊剂的制备
一、硬胶囊剂定义以及特点
(一)、定义：硬胶囊剂系指将一定量的药物加辅料制成均匀的粉末或颗粒充填于空心胶囊中制成.或将药物直接分装于空心胶囊中制成.
(二)、特点：主要是口服。硬胶囊外观整洁美观，易于吞服，可掩盖药物的不良嗅味，崩解快，吸收好。适用于对光敏感、不稳定或遇湿、热不稳定的药物，或有特异气味的药物，或需要定时定位释放的药物。
二、目的：掌握硬胶囊剂的一般制备方法;熟悉硬胶囊剂的重量差异检查
三、实验材料：益元散
四、实验方法：
1、制法
(1)、胶囊壳拆开
(2)、将胶囊壳下半部分放入胶囊板中
(3)、将益元散放在胶囊板上，用刮板刮平
(4)、最后将胶囊帽口紧，即得胶囊剂
(5)、取出胶囊剂，用纱布擦拭胶囊剂，除去胶囊剂表面残留粉末
2、检查
(1)、外观：是否光滑，粘连
(2)、重量差异：取10粒，测定平均粒重和每一粒重量，计算重量差异限度，要求在±5%之间。0.3g以下±10%之间
0.3g及以上±7.5%之间
3、结果附表
固体制剂的制备-片剂的制备
一、片剂定义以及特点
(一)、定义：片剂是药物与辅料均匀混合后压制而成的片状制剂。
(二)、特点：通常片剂的溶出度及生物利用度较丸剂好;剂量准确，片剂内药物含量差异较小;质量稳定，片剂为干燥固体，且某些易氧化变质及易潮解的药物可借包衣加以保护，光线、空气、水分等对其影响较小;服用、携带、运输等较方便;机械化生产，产量大，成本低，卫生标准容易达到。
二、目的：掌握湿颗粒制备片剂的基本工艺
三、实验材料：碳酸氢钠、淀粉、硬脂酸镁、压片机、药典筛
四、实验方法：
1、处方 碳酸氢钠 120g;淀粉 6.0g;10%淀粉浆 适量;硬脂酸镁 0.6g
2、制法
(1)、取碳酸氢钠和淀粉放入乳钵，研匀研细
(2)、10%淀粉浆制备：煮浆法和冲浆法制备，本实验采用冲浆法制备。
(3)、制软材 ：握之成团，轻压即散
(4)、制粒：用16目筛或18目筛制粒
(5)、干燥：将制得的颗粒，放置在烘箱中，干燥15min
(6)、整粒：用20目筛挤压过筛，整粒
(7)、加入硬脂酸镁，过20目筛混合
(8)、压片
3、质量检查
(1)、外观：颜色
(2)、质量差异限度检查：取20片，测定平均片重和每一片重量，计算重量差异限度。
0.3g以下±7.5%之间
0.3g及以上±5%之间
4、结果附表
第四篇：易健兴农(大连)生物制剂发展有限公司简介
公司简介
易健兴农(大连)生物制剂发展有限公司(以下简称“易健兴农”)是易健集团的子公司，是从事绿色农业生物产品——生物肥料、生物农药、农用微生态制剂的研发、生产、销售和技术服务的综合性生物科技公司。2009年5月，在马来西亚政府总理那吉布、中国国际商会会长万季飞的见证下，易健集团与大连市政府的有关领导在京签署了生物肥项目合作协议书。易健兴农已在大连市花园口国家级经济区开工建设生产线，总投资1亿美元，设计生产能力为年产值20亿元。
易健兴农立足于高起点，以高新技术为根本，以服务“三农”为宗旨，将绿色农业科技产品市场化、大众化，引导绿色农业生产发展，为农民朋友提供最好的产品、最佳的服务。易健兴农把发展经济与保护生态环境、保证食品安全、节约资源和能源相结合，实现经济效益、生态效益、社会效益统筹兼顾，促进农业经济可持续发展，不断增进人类健康与社会和谐。
公司研发中心由国内外具有丰富经验的专家和一批具有专业水准的研究生组成，技术实力雄厚。公司首先推出的易健生物肥属纳米化复合型微生物肥料，是经引进、吸收、转化、再创新而形成的具有国际先进水平的专利产品。其特点是多菌种、复合型、纳米化、高浓缩和系列化。一年来，先后在全国13个省、市、自治区进行了示范种植，示范种植的作物包括水稻、棉花等数十种。示范种植结果表明，易健生物肥与常规肥料科学配比使用后，不仅能改良土壤，提高农产品产量，改善农产品品质，使农产品符合国家绿色食品标准，还能显著提高作物抗逆性和抗病性，减少化肥和农药使用量，降低种植成本。实践证明，易健复合生物肥不愧为深受农民和农业专家欢迎的、与众不同的好产品。
第五篇：10灭菌制剂和无菌制剂课件
第十章
灭菌制剂和无菌制剂
第一节
概述
灭菌(sterilization)：系指用物理或化学等方法杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的手段。 灭菌法(the technique of sterilization) ：系指杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的方法或技术 无菌(sterility)：系指在人一指定物体、介质或环境中，不得存在任何活的微生物。
无菌操作(asepic technique)：系指在整个操作过程中利用和控制一定条件，使产品避免被微生物污染的一种操作方法或技术。
防腐(antisepsis)：系指用物理或化学方法抑制微生物的生长与繁殖的手段，亦称抑菌。对微生物的生长与繁殖具有抑制作用的物质称抑菌剂或防腐剂。
消毒(disinfection)：系指用物理或化学方法杀灭或除去病原微生物的手段。对病原微生物具有杀灭或除去作用的物质称消毒剂。
一、灭菌制剂与无菌制剂的定义与分类
限菌制剂： 是指允许一定限量的微生物存在，但不得有规定控制菌存在的药物制剂。如口服制剂不得含大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等有害菌。
灭菌制剂：系指采用某一物理、化学方法杀灭或除去所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。 无菌制剂：系指采用某一操作方法或技术制备的不含任何活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。 无菌制剂包括注射用制剂、眼用制剂、植入型制剂、创伤用制剂、手术用制剂
二、灭菌与无菌技术
目的：提高药物制剂的安全性、保护制剂的稳定性、保证制剂的临床疗效 灭菌法：物理灭菌法、化学灭菌法、无菌操作法
(一)物理灭菌技术
利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和过滤方法，杀灭或除去微生物的技术称为物理灭菌法，亦称物理灭菌技术。包括：1. 干热灭菌法2. 湿热灭菌法3. 过滤灭菌法4. 射线灭菌法
1. 干热灭菌法
系指在干燥环境中进行灭菌的技术。包括：火焰灭菌法、干热空气灭菌法 灭菌温度和时间：
135 ~ 145℃灭菌 3 ~ 5h; 160 ~ 170℃灭菌 2 ~ 4h; 180 ~ 200℃灭菌 0.5 ~ 1h 火焰灭菌法
系指用火焰直接灼烧灭菌的方法。该法适用于耐火焰材质(如金属、玻璃及瓷器等)的物品与用具的灭菌，不适合药品的灭菌。
干热空气灭菌法
系指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿气穿透的油脂类(如油性软膏基质、注射用油等)和耐高温的粉末化学药品的灭菌，不适于橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。 2. 湿热灭菌法
系指用饱和蒸气 、沸水或流通蒸气进行进行灭菌的方法。包括：热压灭菌法、流通蒸气灭菌法、煮沸灭菌法、低温间歇灭菌法
热压灭菌法 系指用高压饱和水蒸气加热杀灭微生物的方法。能杀灭所有细菌繁殖体和芽孢，适用于耐高温和耐高压蒸汽的所有药物制剂 、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡胶塞、滤膜过滤器等。
影响湿热灭菌因素
微生物的种类和数量(耐热、压次序：芽孢>繁殖体>衰老体)、蒸气性质、药物性质和灭菌时间、其他 如介质pH(一般情况下，在中性环境下微生物的耐热性最强，碱性环境次之，酸性环境则不利于微生物的生长和发育)和介质的营养成分(营养高 ，抗热性强)等
湿热灭菌原则：在达到有效灭菌的前提下，尽可能降低灭菌温度和缩短灭菌时间。
流通蒸气灭菌法
系指在常压下，采用100℃流通蒸气加热杀灭微生物的方法。灭菌时间通常为30~60min。该法适用于消毒及不耐高热制剂的灭菌。但不能保证杀灭所有的芽孢，不是可靠的灭菌法。
煮沸灭菌法
系指将待灭菌物品置沸水中加热灭菌的方法。煮沸 时间通常为30~60min。该法灭菌效果较差，常用于注射剂、注射针等器皿的消毒。必要时加入适量的抑菌剂，如三氯叔丁醇、甲酚、氯甲酚等，以提高灭菌效果。 低温间歇灭菌法
系指将待灭菌物置60~80℃的水或流通蒸气中加热60min，杀灭微生物繁殖体后，在室温条件下放置24h，让待灭菌物中的芽孢发育成繁殖体，再次加热灭菌、放置，反复多次，直至杀灭所有芽孢。 该法适用于不
耐高温、热敏感物料和制剂的灭菌。
缺点是费时、工效低、灭菌效果差，加入适量抑菌剂可提高灭菌效率。
3. 过滤灭菌法
系指采用过滤法除去微生物的方法。该法属于机械除菌方法，该机械称为除菌过滤器。该法适用于对热不稳定的药液、气体、水等物品的灭菌。 4. 射线灭菌法
系指采用辐射、微波和紫外线杀灭微生物和芽孢的方法。包括：(1)辐射灭菌法(2)微波灭菌法(3)紫外线灭菌法
(1)辐射灭菌法 系指采用放射线同位素(60Co和137Cs)放射的 γ 射线杀灭微生物和芽孢的方法。
本品适用于热敏物料和制剂的灭菌
优点：不升高产品温度，穿透力强，灭菌效率高。
缺点：设备费用较高，对操作人员存在潜在的危险性，对某些药物(特别是溶液型)可能产生药效降低或产生毒性物质和发热物质等。
(2)微波灭菌法
采用微波(频率为300MHz~300kMHz)照射产生的热能杀灭微生物和芽孢的方法。该法适用于液体和固体物料的灭菌，且对固体物料具有干燥作用。
特点：微波能穿透到介质和物料的深部，可使介质和物料表里一致地加热;且具有低温、常压、高效、快速、低能耗、无污染、易操作、易维护、产品保质期长等特点。
微波杀菌机理：热效应—使微生物中蛋白质变性而失活。非热效应—干扰了微生物正常的新陈代谢，破坏微生物的生长环境。
低温(70~80℃)即可杀灭微生物，不影响药物的稳定性。 (3)紫外线灭菌法
系指用用紫外线(能量)照射杀灭微生物和芽孢的方法。用于紫外灭菌的波长一般为200~300nm，最强灭菌力的波长为254nm。该法适用于照射物表面灭菌、无菌室空气及蒸馏水的灭菌。不适合于药液的灭菌及固体物料深部的灭菌。
灭菌机理：紫外线可导致核酸蛋白变性，又能使空气中氧气产生微量臭氧。
特点：紫外线穿透能力弱，并能被普通玻璃吸收，装于容器中的药物不能用紫外线灭菌。紫外线对人体有一定的伤害
(二) 化学灭菌法
系指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭的方法。
气体灭菌法
该法适用于环境消毒和不耐热的医用器具、设备和设施等的消毒，亦用于粉末注射剂的消毒。常用的气态杀菌剂：环氧乙烷、甲醛、丙二醇、甘油和过氧乙酸。
药液灭菌法
该法常作为其他灭菌法的辅助措施，适用于皮肤、无菌器具和设备的消毒。常用的消毒液有：75%乙醇、1%聚维酮碘溶液、0.1~0.2%新洁尔灭溶液、酚或煤酚皂溶液等。
(三)无菌操作法
系指整个过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法。
该法适用于一些不耐热药物的注射液、眼用制剂、皮试液、海绵剂和创伤制剂的制备.无菌操作法包括无菌操作室的灭菌和无菌操作两个环节。 1. 无菌操作室的灭菌
常采用紫外线、液体和气体灭菌法对无菌操作室环境进行灭菌。常用甲醛溶液加热熏蒸法。 2. 无菌操作
(四)灭菌参数(F值和F0值)
1. D值
在一定温度下，杀灭90%位身无(或残存率为10%)所需的灭菌时间。lgN0-lgNt=kt/2.303
D = t = 2.303/k(lg100-lg10) D值为降低被灭菌物品中微生物数至原来1/10或降低一个对数单位(lg100降至lg10)所需的时间。
2. Z值
降低一个lgD值所需升高的温度,即灭菌时间减少到原来的1/10所需升高的温度或在相同灭菌时间内,杀灭99%的微生物所需提高的温度. Z=T2-T1/logD2-logD1 3.F值
在一定灭菌温度(T)下给定的Z值所产生的灭菌效果与在参比温度( To)下给定的F值所产生的灭菌效果相同时所相当的时间。常用于干热灭菌，单位：min。
F = △t ∑10
4.F0值
在一定灭菌温度(T)、Z值为10℃所产生的灭菌效果与121 ℃、 Z值为10℃所
产生的灭菌效果相同时所相当的时间。
F0 = △t ∑10
F0=D121℃×(lgN0-lgNt) F0值仅限于热压灭菌，生物F0值相当于121℃热压灭菌时，杀灭容器中全部微生物所需要的时间。F0值体现了灭菌温度与时间对灭菌效果的统一，数值更为精确、实用。
为了确保灭菌效果，应适当增加安全系数，一般增加理论值 的50%。 影响F0值的主要因素
三、空气净化技术
空气净化系指创造洁净空气为目的的空气调节措施。
空气净化技术系指为达到毛中净化要求所采用的净化方法。分为工业净化和生物净化。 空气净化标准
1.含尘浓度
是指单位体积空气中所含粉尘的个数(计数浓度)或毫克量(重量浓度)。 2.净化方法(1)一般净化 (2)中等净化 (3)超净净化 浮沉浓度测定方法
无菌检查法
空气净化技术 1. 过滤方式：(1)表面过滤
(2)深层过滤 2. 过滤机理：(1)拦截作用
(2)吸附作用
3. 影响因素：粒径、过滤风速、介质纤维直径和密实性、附尘。
空气过滤器的特性
1)过滤效率
2)穿透率和净化系数
3)容尘量
四、冷冻干燥技术
是指将含有大量水分的物料预先进行降温，冻结成冰点以下的固体。在真空条件下使冰直接升华，以水蒸气形式除去，得到干燥产品的一种技术。亦称升华干燥。 第二节
注射剂
一、注射剂的定义
注射剂(Injection) 俗称针剂，系指药物制成的供注入机体内的一种制剂。包括灭菌或 无菌溶液、乳状液和混悬液以及供临用前配成溶液或混悬液的无菌粉末。由药物、溶剂、附加剂及特制容器所组成。 注射剂的分类 (1) 溶液型注射剂
(2) 混悬型注射剂
水难溶性药物或注射后要求延长药效作用的药物，可制成水或油的混悬液，如醋酸可的松注射液、喜树碱静脉注射液。这类注射剂一般仅供肌内注射。
(3) 乳剂型注射剂
水不溶性液体药物，根据医疗需要可以制成乳剂型注射剂，例如胶丁钙注射液和静脉营养脂肪乳注射剂等。
(4) 注射用无菌粉末
注射用无菌粉剂亦称粉针，是指采用无菌操作法或冻干技术制成的注射用无菌粉末或块状制剂，制剂需用用适当的溶剂溶解或使其混悬而应用。 注射剂的给药途径
(1) 皮内注射[intradermal (ID) route] (2)皮下注射[subcutaneous (SC) route] 由于人体皮下感觉比肌肉敏感;故具有刺激性的药物混悬液一般不作皮下注射。
(3)肌内注射[intramuscular (IM) route]
注射肌肉组织中，一次剂量一般在5ml以下，除水溶液外，油溶液、混悬液、乳浊液均可作肌内注射。
(4) 静脉注射[intravenous (IV) route]
油溶液和一般混悬型注射液不能作静脉注射。凡能导致红血球溶解或使蛋白质沉淀的药物，均不宜静脉给药。
(5) 脊椎腔注射[vertebro caval route] (6)动脉内注射 (intra-arterial route) (7 )其他
包括心内注射、关节内注射、滑膜腔注射、穴位注射以及鞘内注射等。 注射剂的特点
(1) 药效迅速，作用可靠 (2) 适用于不能口服给药的患者 (3) 适用于不宜口服的药物(4) 发挥局部定位作用 (5) 注射给药不方便且注射时疼痛 (6) 制造过程复杂，生产费用较大，价格 较高。 注射剂的质量要求
(1) 无菌 (2) 无热原 (3) 澄明度 (4) 安全性 (5) 渗透压 (6) pH (7) 稳定性 (8) 降压物质
二、注射剂的处方组成
注射液用原料、注射用溶剂、注射用附加剂、注射剂的等渗与等张调节、注射用原料 注射用原料必须符合药典或国家质量药品质量标准。
注射用溶剂 包括：注射用水、注射用油、其他注射用非水溶剂。 1. 注射用水
制药用水包括纯化水、注射用水与灭菌注射用水。
纯化水用原水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其它适宜的制得的供药用的水，可作为配制普通药物制剂的溶剂或试验用水，不得用于注射剂的配制。
注射用水为纯化水经蒸馏所得的蒸馏水，作为配制注射剂用的溶剂。
灭菌注射用水为灭菌后的注射用水，主要用于注射用灭菌粉末的溶剂或注射液的稀释剂。 纯化水可作为
2.注射用油
包括：植物油(主要为大豆油)、油酸乙酯、苯甲酸苄酯 碘值为79～128;皂化值为185～200;酸值不大于0.56 。
碘值说明油中不饱和键的多少，碘值高，则不饱和键多，油易氧化酸败 ，不适合注射用。皂化值表示油中游离脂肪酸和结合成酯的脂肪酸的总量多少，可看出油的种类和纯度。酸值说明油中游离脂肪酸的多少，酸值高质量差，也可以看出酸败的程度。
矿物油和碳氢化合物不能被机体吸收，故不能被注射用。油性注射剂只能供肌肉注射。
3、其他注射用溶剂
(1) 乙醇 (2) 甘油 (3) 丙二醇 (4) 二甲基乙酰胺(Dimethylacetamide, DMA)
(三)注射剂的附加剂
为了提高注射剂的有效性、安全性与稳定性，注射剂中除主药外还可添加其它物质，这些物质统称为“附加剂”。 附加剂在注射液中的主要作用：(1)增加药物的理化稳定性(2)增加主药的溶解度(3)抑制微生物生长，尤其对多剂量注射剂更要注意(4)减轻疼痛或对组织的刺激性。
注射剂常用的附加剂有：pH和等渗调节剂、增溶剂、麻醉剂、抑菌剂、抗氧剂等。另外还有湿润剂、乳化剂、缓冲剂、助悬剂、螯合剂、稳定剂等
(四)注射剂的等渗与等张调节 (1)冰点降低数据法：
血浆的冰点为-52℃，因此任何溶液，只要其冰点降低为0.52℃,即与血浆等渗
W =( 0.52-a )/b 。
W：配成等渗溶液所需加入药物的量(%, g/ml) a: 未经调整的药物溶液的冰点下降度
b: 用以调整等渗的药物1%(g/ml)溶液的冰点下降度。
(2)氯化钠等渗当量，即与1g药物呈等渗效应的氯化钠量。
公式：
例如头孢噻吩钠(cephalotin sodium)的氯化钠等渗当量为0.24，若配制2%的头孢噻吩钠溶液100ml，欲使其等渗，需加入氯化钠为0.9 0.242 = 0.42g氯化钠。 渗透压调节剂常用氯化钠与葡萄糖。 3)等渗溶液与等张溶液：
等渗溶液(Iso-osmotic solution)是指渗透压与血浆相等的溶液，
所谓等张溶液(Isotonic solution)是指与红细胞膜张力相等的溶液，在等张溶液中既不会发生红细胞体积改变，更不会发生溶血，所以等张是个生物学概念。 第三节 注射剂的制备
注射剂一般生产过程包括： 注射用水为 注射用水的制备
原水处理 原水处理方法有离子交换法与电渗析法及反渗透法。离子交换法制得的离子交换水主要供蒸馏法制备注射
用水使用，也可用于洗瓶，但不得用来配制注射液，因其在除热原方面还不如蒸馏法那样可靠，有时还带有乳光。电渗析法与反渗透法广泛用于原水预处理，供离子交换法使用，以减轻离子交换树脂的负担。
(三) 热原
热原(Pyrogens) 注射后能引起人体致热反应的物质称为热原。它是微生的代谢产物。大多数细菌都能产生，致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌所产生的热原。
1. 热原的组成
热原是微生物的一种内毒素，它存在于细菌的细胞膜和固体膜之间。是由磷脂、脂多糖和蛋白质所组成的复合物，其中脂多糖(lipopolysaccharide)是内毒素的主要成分，具有特别强的热原活性，因而大致可以认为内毒素=热原=脂多糖。
2. 热原的性质
(1) 耐热性 (2) 滤过性 (3) 水溶性 (4) 不挥发性 (5) 其它
热原能被强酸、强碱破坏，也能被强氧化剂如高锰酸钾或过氧化氢所钝化，超声波也能破坏热原。(活性炭可以吸附热原)
3 热原的主要污染途径
(1) 从溶剂中带入(主要途径) (2) 从原料中带入 (3) 从容器、用具、管道和装置等带入 (4) 制备过程与生产环境中的污染 (5) 从输液器带入 4. 热原的除去方法
(1) 高温法
对于注射用的针筒或其他玻璃器皿，在洗涤干燥后，于250℃加热30分钟以上，可以破坏热原; (2) 酸碱法
玻璃容器、用具还可用重铬酸钾硫酸清洁液或稀氢氧化钠处理，可将热原破坏;
(3) 吸附法
常用的吸附剂有活性炭，活性炭对热原有较强的吸附作用，同时有助滤脱色作用，所以在注射剂中使用较广。
(4) 离子交换法
(5) 凝胶滤过去
(6) 反渗透法 (7) 超滤法 (8) 其他方法：
第三节
注射剂的制备
1. 原辅料的准备 2. 注射容器的处理 3. 注射液的配制与过滤 4. 注射液的灌封
5. 注射剂的灭菌和检漏
3、注射液的配制与滤过
配制方法
配液方式有两种，一种是将原料加入所需的溶剂中一次配成所需的浓度即所谓稀配法，原料质量好的可用此法。另外还有全部原料药物加入部分溶剂中配成浓溶液，加热过滤，必要时也可冷藏后再滤过，然后稀释至所需浓度，此法叫浓配法，溶解度小的杂质在浓配时可以滤过除去。 影响过滤的因素：P80
(一) 注射剂的灭菌
对热不稳定的产品，在避菌条件较好的情况下生产的注射剂，一般1～5ml安瓿可用流通蒸气灭菌100℃30分钟，10～20ml安瓿使用100℃45分钟。灭菌时间还可根据情况延长或缩短。要求按灭菌效果F0值大于8进行验证。凡能耐热的产品，宜采用115℃30分钟灭菌。
六、注射剂的质量检查 (一) 澄明度检查(可见异物)
(二) 热原检查
热原检查目前各国药典法定的方法仍为家兔法。选用家兔作试验动物，是因为家兔对热原的反应和人是相同的。
鲎试验法：鉴于家兔法费时较长，操作繁琐，近年来发展了体外热原试验法即鲎试验法，其原理是利用鲎(Limus polyphemus)的变形细胞溶解物(amebecyte lysate)与内毒素之间的凝集反应。 (三) 无菌检查 (四) 降压物质检查
(五)不溶性颗粒检查
八、注射剂的举例
(一) 盐酸普鲁卡因注射液(procaine hydrochloride injection)
处方
0.5%
2% ：盐酸普鲁卡因
5.0g
20.0g
氯化钠
8.0g
4.0g 0.1 mol/L盐酸
适量
适量 注射用水加到 1000ml
1000ml 制法
取注射用水约800ml，加入氯化钠，搅拌溶解，再加盐酸普鲁卡因使之溶解，加入0.1mol/L的盐酸溶液调节pH，再加水至足量，搅匀，过滤分装于中性玻璃容器中，用流通蒸气100℃30分钟灭菌，瓶装者可适当延长灭菌时间(100℃45分钟)。
作用与用途
本品为局部麻醉药，用于封闭疗法、浸润麻醉和传导麻醉。
注解
(1) 本品为酯类药物故易水解。影响本品稳定性的因素及解决办法参看第五章有关部分。保证本品稳定性的关键是调节pH，本品pH应控制在3.5～5.0。灭菌温度不宜过高，时间不宜过长。
(2) 氯化钠用于调节等渗，实验表明还有稳定本品的作用。未加氯化钠的处方，一个月分解1.23%，加0.85%氧化钠的仅分解0.4%。
(3) 极少数病人对本品有过敏反应，故用药前询问病人过敏史或做皮内试验(0.25% 普鲁卡因溶液 0.1ml)。 维生素C注射液(抗坏血酸)(Vitamin C injection 处方
维生素C
104g 依地酸二钠
0.05g 碳酸氢钠
49g 亚硫酸氢钠
2g 注射用水加到
1000ml 制法
在配制容器中，加配制量80%的注射用水，通二氧化碳饱和，加维生素C溶解后，分次缓缓加入碳酸氢钠，搅拌使完全溶解，加入预先配制好的依地酸二钠溶液和亚硫酸氢钠溶液，搅拌均匀，调节药液pH 6.0～6.2，添加二氧化碳饱和的注射用水至足量，用垂熔玻璃漏斗与膜滤器滤过，溶液中通二氧化碳，并在二氧化碳或氮气流下灌封，最后用100℃流通蒸气15分钟灭菌。
注释(1) 维生素C分子中有烯二醇式结构，故显强酸性。加入碳酸氢钠(或碳酸钠)，使维生素C部分地中和成钠盐，以避免疼痛。同时碳酸氢钠起调节pH的作用，以增强本品的稳定性。 (2) 维生素C的水溶液与空气接触，自动氧化成脱氢抗坏血酸。。 (3) 本品稳定性与温度有关。，故以100℃15分钟灭菌为好。但操作过程应尽量在避菌条件下进行，以防污染。
第四节
输 液
输液(infusion solution)是指由静脉滴注输入体内的大剂量注射液，它是注射剂一个分支。 (一) 输液的种类
1. 电解质输液
用以补充体内水份、电解质，纠正体内酸碱平衡等。如氯化钠注射液、复方氯化钠注射液、乳酸钠注射液等。
2. 营养输液
营养输液有糖类输液、氨基酸输液、脂肪乳剂输液等。 3. 胶体输液
胶体输液有多糖类、明胶类、高分子聚合物等，
(二) 输液的质量要求
输液的质量要求与注射剂基本上是一致的，但由于这类产品注射量较大，故对无菌、无热原及澄明度这三项，更应特别注意。渗透压可为等渗或偏高渗，不能引起血象的任何异常变化。此外输液要求不能有产生过敏反应的异性蛋白及降压物质。输液中不得添加任何抑菌剂，并在贮存过程中质量稳定。
二、输液的生产工艺
输液的配制
输液配制通常加入0.01%～0.5%的针用活性炭，具体用量，视品种而异，活性炭有吸附热原、杂质和色素的作用，并可作助滤剂。
(七) 输液的质量检查
1. 澄明度与微粒检查
2. 热原无菌检查
3. 酸碱度及含量测定
三、输液存在的问题及解决方法
(一)染菌
根本办法是尽量减少生产过程中的污染，同时还要严格灭菌，严密包装。 (二)热原反应
尽量使用全套或一次性的输液器，为避免热原污染创造有利条件。
(三)澄明度与微粒的问题
微粒产生的原因是多方面的。如工艺操作中的问题原辅料质量问题等。解决办法除了加强
工艺过程管理，制订了输液用的原辅料质量标准。
五、营养输液
由于某种原因，患者一切所需营养完全由非胃肠途径输入体内，这种疗法称为胃肠外的全营养液(total parenteral nutrition)，这种营养方法一般是将营养输液通过静脉给药，所以又叫全静脉营养。
糖、脂肪、蛋白质是人的三大营养成份，而营养输液就是根据这种需要考虑的，主要有碳水化合物的输液、静脉注射脂肪乳剂、复方氨基酸输液。
(一)复方氨基酸注射液(输液) 1. 处方设计
必需氨基酸，这类氨基酸有异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、蛋氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸。 2. 生产中的问题
复方氨基酸注射液的生产，主要存在二个问题，一是澄明度，影响澄明度的关键是原料纯度，一般均需反复精制。其次是稳定性，主要表现为含量下降色泽变深，其中以变色最为明显。
影响稳定性的因素有氧气、光、温度、金属离子、pH等，故输液要通氮气，调节pH，加入抗氧剂等措施，并避免金属离子混入，避光保存。
(二)静脉注射脂肪乳剂
静脉注射脂肪乳剂输液是以植物油脂为主要成份，加乳化剂与注射用水而制成的水包油型乳剂。
制备静脉注射脂肪乳剂的关键是选用高纯度原料、毒性低、乳化力强的乳化剂，
第五节
注射用无菌粉末
注射用无菌粉末简称粉针。凡是在水溶液中不稳定的药物，如青霉素G、先锋霉素类及一些医用酶制剂(胰蛋白酶、辅酶A)及血浆等生物制剂，均需制成注射用无菌粉末。
分类将冷冻干燥法制得的粉末，称为注射用冷冻干燥制品，而用其它方法如灭菌溶剂结晶法、喷雾干燥法制得的称为注射用无菌分装产品。
二、注射用冷冻干燥制品
冷冻干燥是将需要干燥的药物溶液预先冻结成固体，然后在低温低压条件下，从冻结状态不经过液态而直接升华除去水分的一种干燥方法。凡是对热敏感在水溶液中不稳定的药物，可采用此法制备。
冷冻干燥的优点是：①可避免药品因高热而分解变质，如产品中的蛋白质则不致变性;②所得产品质地疏松，加水后迅速溶解恢复药液原有的特性;③含水量低，一般在1～3%范围内，同时干燥在真空中进行，故不易氧化，有利于产品长期贮存;④产品中的微粒物质比用其它方法生产者少，因为污染机会相对减少;⑤产品剂量准确，外观优良。
(二)冷冻干燥制品的工艺
冷冻干燥工艺过程
(1) 预冻(2)减压 (3)升华干燥
(4)再干燥
升华干燥法有两种，一种是一次升华法，另一种是反复预冻升华法。 (三) 冷冻干燥过程中常出现的异常现象及处理方法 1.含水量偏高
原因：装入容器液层过厚，超过10 ～15mm ; 干燥过程中热量供给不足，使蒸发量减少;真空度不够，冷凝器温度偏高等，均可造成含水量偏高。 方法： 可采用旋转冷冻机及其它相应的办法解决。
2. 喷瓶
原因： 主要预冻温度过高，产品冻结不实;
升华时供热过快，局部过热，部分制品熔化为液体，在高真空条件下，少量液体从已干燥的固体界面下喷出而形成喷瓶。 方法： 为了防止喷瓶，必须控制预冻温度在低共熔点以下10 ～20℃ ，同时加热升华，温度不要超过共熔点。
3. 产品外形不饱满或萎缩成团粒
原因，可能是冻干时，开始形成的已干外壳结构致密，升华的水蒸气穿过阻力很大，水蒸汽在已干层停滞时间较长，使部分药品逐渐潮解，以致体积收缩，外形不饱满或成团粒。粘度较大的样品更易出现这类现象。解决办法主要从配制处方和冻干工艺两方面考虑，可以加入适量甘露醇、氯化钠等填充剂，或采用反复预冷升华法，改善结晶状态和制品的通气性，使水蒸气顺利逸出，产品外观就可得到改善。
三、注射用无菌分装产品
(一) 注射用无菌粉末物理化学性质的测定
为了制订合理的生产工艺，首先对药物的物理化学性质进行研究，主
要测定物料的热稳定性，临界相对湿度、粉末的晶形和粉末松密度( 比容) 。
第七节
眼用制剂
滴眼剂(英: Eye-drop)：
眼用液体药剂按用法可分为滴眼剂及洗眼剂。工业生产只有滴眼剂。
滴眼剂的质量要求1. pH值2. 渗透压3. 无菌4. 澄明度5. 粘度6. 稳定性
(一)吸收途径： 主要经过角膜和结膜两条途径吸收 (二) 影响吸收的因素：1. 药物从眼睑缝隙的损失 2. 药物外周血管消除 3. pH与pKa
4. 刺激性 5. 表面张力 6. 粘度
三、滴眼剂的生产工艺
滴眼剂的处方设计与附加剂选用
(一) pH值的调整 (二) 渗透压的调整
(三) 无菌度的保持
(四) 粘度的调整
(五) 稳定剂、增溶剂、助溶剂等的添加
第七节
其他灭菌与无菌制剂