长期食入浸酒精食品对雄性灰兔胰腺的损害

糖尿病、胰腺炎的发病率随着人民物质生活的不断提高也成逐年上升趋势, 尤其糖尿病呈现处更加年轻化, 更加个体化;其常见的1型与胰腺B细胞损害直接相关, 2型中胰岛素分泌不足更是得病的重要因素;近年来临床发现39~40岁酗酒男性糖尿病、急慢性胰腺炎的发病率越来越高, 其血清血糖、胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白、淀粉酶、脂肪酶均明显增高, 成为心血管疾病的一个重要危险因素;严重影响了患者的生活质量

1 资料与方法

1.1 一般资料

动物健康成熟灰兔36只 (体质量2~2.5kg) 。

1.2 试剂和仪器

BT-3000意大利全自动生化分析仪, 电热恒温干燥箱、苏木精—伊红染色剂1盒, B160A型医用低速离心机, 恒温箱 (中国白洋公司出品) 1604型精密电子天平 (上海试验仪器厂、中国) SPOT及IPP图像采集分析系统 (日本) 。

1.3 方法

1.3.1 动物分组及模型制备

雄性灰兔饲养于标准动物房 (22度) 给予充分光照, 随机分试验组 (浸酒精饲料-50mL/500g) 和对照组 (均衡饲料) , 每组18只, 所有灰兔在试验前禁食12h, 自由饮水, 2组分别喂养160d后, 测血糖 (BS) 、淀粉酶 (AMS) 和脂肪酶 (LPS) , 再用L-Arg溶液先于腹腔内注射2mg/g, 1h后再次腹腔内注射2mg/g。

注:“+”表示死亡或检验结果超出正常值;“-”表示存活或检验结果在正常值范围;对照组48h内无一只死亡, 检验结果在正常值范围内

1.3.2 标本制备

2组分别于末次注射上L-A r g溶液后, 0、6、1 2、2 4、各取4只处死, 切取灰兔胰腺组织一分为二, 1份用于胰腺湿/干比重测定;另1份用多聚甲荃固定石腊包埋, 各用于病理学检查。

1.4 观察指标

1.4.1 2组死亡率观察2组在用药后各时间点的死亡情况并计算死亡率。

1.4.2血清胆固醇、油三脂、血糖、低密度脂蛋白、淀粉酶、脂肪酶用BT-3000意大利全自动生化分析仪测定。

1.4.3胰腺湿/干比重2组雄性灰兔切取灰兔胰腺组织用电子天平称重, 再将切取的胰腺组织于60℃烘干24h, 至质量不变, 计算比重。

1.4.4石腊切片, 苏木精-伊红染色, 光镜下观察其病理变化, 并按照Schmidt镜下评分标准, 有病理科医生双育评分。

1.5 统计学分析

全部数据以标示, 计量资料结果采用SPSS软件进行方差分析, 组织病理学评级采用秩和检验, 检验水准A=0.05。

2 结果

2.1 由表格得出2组死亡比较情况

试验组12~24h死亡1只, 24至48h死亡2只, 总死亡率11.1%, 对照组48h内无死亡。

2.2 由表格得出2组血清胆固醇、油三脂、淀粉酶、脂肪酶

比较结果在相同时间点试验组比对照组血清胆固醇、油三脂、淀粉酶、脂肪酶升高, 见表1。

2.3 胰腺湿/干比重2组相同时间点, 试验组比对照组湿/干比重升高 (P<0.05) , 见表1。

2.4 胰腺组织病理

实验组胰腺血管内充血、中性粒细胞侵润;而对照组基本上无变化。

3 讨论

长期酗酒成年男性和并糖尿病、胰腺炎及心血管病症比不酗酒者相比, 其临床指标和生化指标血糖、油三脂、淀粉酶、脂肪酶变化明显。试验组明显升高正常的2.4倍左右, 说明酒精饲料喂养能够引发雄性灰兔血糖、油三脂、淀粉酶、脂肪酶, 通常在L-Arg溶液注射后发现胰腺病理变化, 只有血管内充血, 中性粒细胞浸润, 没有出现细胞消肿情况, 说明酒精饲料能引起胰腺病理的轻微变化, 从而使胰腺酶、胰岛素分泌失调, 继而引发血糖, 淀粉酶变化。通常胰腺腺泡的受损, 是糖尿病、胰腺炎的初始病理变化。

研究发现, 胰腺腺泡的凋亡程度与糖尿病的轻重程度呈正比, 与急性胰腺炎进展期病情程度成反比, 诱导凋亡明显加重糖尿病病情。其机制是酒精本身及其代谢产物的细胞毒作用导致胰腺实质进行性损害和纤维化, 胰液粘稠及蛋白质沉淀加重钙化;初期刺激使胰腺分泌大量胰岛素, 长期刺激使胰蛋白酶、脂肪酶释放增多, 胰蛋白酶原激活加速, 产生对胰腺直接损伤;微循环障碍, 细胞因子炎性介质的参与也加深了对胰腺血管的损害;同时脂肪酶的释放对腺泡泡膜造成了不可逆的损害;从而B-胰腺细胞出现坏死现象, 胰岛素释放量减少, 引起血糖升高, 继发血脂增高。随着时间的推移, 血糖有低变高, 而淀粉酶由高变低。总之, 长期食用酒精饲料对灰兔的胰腺的叠加损害作用更强后果更加严重。

摘要：目的 长期食入浸酒精食品对雄性灰兔胰腺的损害。方法 20只灰兔随机分为试验组 (食用浸酒精饲料) 和对照组 (均衡饲料) 分别喂养90d后, 检查和血糖 (BS) 、淀粉酶 (AMS) 和脂肪酶 (LPS) 计算胰腺湿/干比重, 观察胰腺组织的病理变化。结果 试验组血糖较对照组明显升高 (P<0.05) , 淀粉酶和脂肪酶较对照组明显升高 (P<0.05〉;试验组胰腺湿/干比重较对照组升高 (P<0.05) ;胰腺水肿、出血、炎症浸润较对照组重, 病理评分更高 (P<0.05) 。结论 长期使用酒精饲料对灰兔的胰腺的叠加损害作用加强, 后果更严重。

关键词：酒精食品,淀粉酶,脂肪酶,血糖,胰岛素

参考文献

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