马来酸依那普利片有关物质的测定及其稳定性的研究

2022-09-11

马来酸依那普利是第Ⅱ代长效血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI) , 该药降压疗效显著, 且对合并外周动脉病变有较高的疗效。马来酸依那普利片是由马来酸依那普利和适量辅料制成的片剂。本文建立了HPLC法测定该品的有关物质, 并考察了稳定性, 确保了该产品的质量稳定。

1 仪器与试药

Lab Alliance系列HPLC系统。检测器:包括Model500紫外检测器。马来酸依那普利片, 本公司自制:批号:070329、070330、070331规格:5mg。对照品:依那普利对照品 (100705-200401) , 依那普利拉对照品 (100706-200401) , 依那普利双酮对照品 (100707-200401) 均由中国药品生物制品检定所提供。试剂:甲醇为色谱纯, 水为纯化水, 其他的试剂为分析纯。

2 色谱条件与系统适用性试验

用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂, 以乙腈-磷酸盐缓冲溶液 (0.01mol/L磷酸二氢钾溶液, 用磷酸调p H为2.2) (25:75) 为流动相, 检测波长为215nm, 柱温为50℃, 取系统适用性试验用溶液 (分别取马来酸依那普利、依那普利拉适量, 精密称定, 加水使溶解制成每lml中各含0.1mg的溶液;取依那普利双酮对照品适量, 精密称定, 加流动相超声使溶解制成每lml含0.1mg的溶液。取上述三种溶液各2ml, 置10ml量瓶中, 加水稀释至刻度, 混匀) 20μl, 注入液相色谱仪, 记录色谱图。理论板数按依那普利峰计算应不低于300, 拖尾因子应不大于2.0。马来酸峰与依那普利拉峰之间的分离度应符合规定, 依那普利拉与依那普利、依那普利双酮各峰之间的分离度应不低于4.0。

3 线性范围

精密称取马来酸依那普利对照品20.44mg, 于50ml量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品储备液;分别精密量取上述对照品储备液3m L (60%) 、4m L (80%) 、5 m L (1 0 0%) 、6 m L (1 2 0%) 、7 m L (1 4 0%) 于10m L量瓶中, 加流动相稀释至刻度, 摇匀, 即得, 取上述溶液各20?l注入液相色谱仪, 记录色谱图, 得线性回归方程为A=1 7 3 5 6.0 2 1*C-9 7 4 9 5.7 0 0 r=0.9 9 9 7 (n=9) 。结果表明:马来酸依那普利在122.64μg/m L~286.16μg/m L浓度范围内, 线性关系良好。

4 进样精密度

取标准曲线试验下浓度为 (204.40μg m L) 的溶液20μL, 连续进样6次, 记录色谱图峰面积RSD=0.44% (≤2.0%) , 说明进样精密度良好。

5 回收率

取马来酸依那普利对照品适量, 分别按处方比例的80%、100%、120%精密称定, 置100ml量瓶中, 再加入同比例的辅料适量, 每个浓度各三份, 共九份, 加水适量, 振摇使马来酸依那普利溶解, 用水稀释至刻度, 摇匀, 滤过, 取续滤液作为供试品溶液;另取标准曲线下中间浓度的溶液为 (204.40μg ml) 作为对照品溶液, 精密量取上述溶液20μl注入液相色谱仪, 按外标法以峰面积计算回收率, 回收率=99.07%RSD%=1.02% (n=9) 。结果表明:该方法的加样回收率符合要求。

6 酸破坏试验、碱破坏试验、氧化破坏试验

取样品三份 (0.9g/份) , 各置25m L量瓶中, 用流动相适量溶解后, 第一份加0.5mo L/L盐酸溶液5m L, 第二份加0.5mo L/L氢氧化钠溶液5m L, 第三份加30%过氧化氢溶液1m L, 三份样品均置水浴加热30min, 放冷, 第一份及第二份分别用0.5mo L/L氢氧化钠溶液、0.5mo L/L盐酸溶液调p H至中性。三份样品加流动相定容至25m L, 摇匀, 滤过, 取续滤液20μL注入色谱仪, 记录色谱图至主峰保留时间的三倍。从色谱图看, 杂峰与主峰能较好地分离。

7 样品中有关物质测定

在上述色谱系统条件下, 本品经酸、碱、氧化破坏后, 马来酸依那普利与空白、分降解产物实现了基线分离, 溶剂峰对本品测定也无干扰, 满足有关物质检查的要求。

8 稳定性试验

8.1 影响因素试验

取样品 (0703290) 除去外包装, 分别放置于高温 (60℃的恒温箱) , 高湿 (在25℃于相对湿度90%±5%) 光照 (强度为4500Lx±500Lx) 环境下考察, 于第5天和第10天取样检测, 结果表明本品有关物质、含量等基本无明显变化, 说明本品在上述条件下较稳定, 但在高湿条件下有关物质略有增加, 含量略有下降, 提示本品要遮光密封处保存。

8.2 加速试验和长期试验

取本品三批, 按市售包装在40℃±2℃相对湿度75%±5%条件下进行加速留样考察, 于第0月、一月、二月、三月、六月分别取样测定。同样包装在25℃±2℃相对湿度60%±10%条件下进行长期留样考察, 于第三月、六月分别取样测定。

本品经加速及长期留样试验6个月, 有关物质、含量等没有明显变化, 属基本稳定。

9 讨论

(1) 强破坏试验发现:马来酸依那普利经酸、碱、氧化破坏后, 与空白、分解产物实现了基线分离, 溶剂峰对本品测定也无干扰, 满足有关物质检查的要求。 (2) 马来酸依那普利对碱比较稳定;强酸破坏时有关物质增加。 (3) 由影响因素试验和稳定性试验看出, 马来酸依那普利的化学性质比较稳定, 模拟的上市包装适合长期放置。

摘要：目的:建立HPLC法测定国产马来酸依那普利片的有关物质, 并考察其稳定性。方法:C8色谱柱 (4.6mm ID×25cm, 5μ) ;线性梯度洗脱, 以乙腈-磷酸盐缓冲溶液 (0.01mol/L磷酸二氢钾溶液, 用磷酸调pH为2.2) (25:75) 为流动相, 流速为1.0ml·min1检测波长为215nm;柱温为50℃;进样量为20μl。结果:HPLC法测定国产马来酸依那普利片有关物质项的回归方程为A=17356.021*C-97495.700r=0.9997 (n=9) , 最小检测限为0.4ng, 回收率=99.07%RSD%=1.02% (n=9) 。对本品进行了稳定性考察, 在光照、高湿、高温条件下加速试验了 (6个月) , 结果证明高湿使有关物质增加、含量等没有明显变化, 属基本稳定。

关键词：马来酸依那普利,有关物质,HPLC法,稳定性