妊高症高蛋白饮食

第一篇：妊高症高蛋白饮食

产科测试题-妊高症(含答案)

产科测试--妊高症

得分：

一、单项选择题：

1.与发生妊娠期高血压疾病无关的是( C ) A. 糖尿病 B. 胎儿窘迫 C. 前置胎盘 D. 羊水过多 E.双胎妊娠

2. 30岁初孕妇，现妊娠39周。妊娠中期产前检查未见异常。妊娠38周时自觉头痛、眼花。查血压160/110mmHg，尿蛋白(++)，宫缩不规律，胎心134次/分。此时首先处理应是( B ) A.门诊治疗并注意随访 B. 静脉滴注硫酸镁 C. 肥皂水灌肠引产 D. 人工破膜并静滴缩宫素 E.行剖宫产术 3. 25岁初孕妇，孕31周产前检查正常，孕34周出现头晕、眼花症状。检查血压180/110mmHg，尿蛋白(++)，浮肿(++)，眼底A:V=1:2，视网膜水肿。本例应诊断为( B )

A. 轻度子痫前期 B.重度子痫前期 C. 妊娠期高血压 D. 妊娠合并原发性高血压 E.妊肾炎娠合并慢性

4. 25岁初产妇，妊娠38周，自觉头痛、眼花4日来门诊就诊。与妊娠期高血压疾病分类无关的项目是( D ) A. 自觉症状

B. 血压数值

C.检查尿常规 D. 检查水肿程度

E.有无抽搐

5.24岁初孕妇。在门诊确诊为妊娠33周，妊娠期高血压。属于不适当的处置是( B ) A.间断吸氧 B.严格限制食盐摄入量 C.休息和睡眠时取左侧卧位

D.保证充足的蛋白和营养

E.适当服用镇静药物

2、B型选择题

A.硫酸镁

B.哌替啶肌注

C.肼屈嗪静脉滴注 D.甘露醇快速静脉滴注

E.冬眠1号肌注 6.子痫病人首选( A )

7.妊娠期高血压疾病合并肺水肿者用( D ) 8.降低颅压应用( D ) 9.对于妊娠期高血压病的镇静应用( B )

3、多选题

10.妊娠期高血压疾病时，需要做下列哪些生化检查( ABD ) A.尿酸

B.红细胞比容

C.二氧化碳结合力

D.肝功能

第二篇：我战胜了恐高症

五年级

洋 珏

我从小就有恐高症，所以很少登上高楼，就连观光电梯都很害怕，可是那天，我终于战胜了恐高症。

那时我只有八岁，妈妈带我来到新秀公园玩，公园里琳琅满目的游乐设施让我身心大悦。妈妈把我带到了一个儿童过山车前，亲切地问我﹕“女儿，你要不要玩这个?”我刚想点头，可是一看到高高的过山车，我就胆怯地说﹕“我不玩。”妈妈马上看出了我的心思，她对我说﹕“别害怕，这种儿童过山车很安全，上面还有安全带保护你呢。”听了妈妈的话，我才战战兢兢走上了儿童过山车。过了一会儿，过山车上人齐了，过山也就启动了。儿童过山车开得不是很快，但我依然感到耳边呼呼的冷风，我害怕极了，手心也沁出了汗。我握住扶手，抬头看了一下前方，前面居然要拐弯，我吞了口口水，对自己说﹕“别害怕，别害怕。”于是我咬咬牙，没有叫出来。两分钟后，我从儿童过山车上下来，给了妈妈一个大大的笑脸，高兴的对妈妈说﹕“太好了，我终于战胜恐高症了!”

这件事让我明白了，这世上有许许多多的困难，你只有努力才能攻克它。

第三篇：BugBuster Master Mix预混蛋白抽提试剂抽提可溶蛋白

BugBuster Master Mix预混蛋白抽提试剂抽提可溶蛋白

1. 用经预先称重的离心管10,000g离心10分钟从液体培养体系收集细胞。如果是小规模培养(如1.5ml或更少)，可以用1.5ml离心管14,000–16,000g离心。尽量倾去液体，称量细胞沉淀湿重。

2. 室温下用吸打或温和涡旋使BugBuster Master Mix与细胞沉淀混匀，每克细胞糊需要5ml抽提试剂。

这相当于50ml培养液采用2.5ml抽提试剂。如果是小规模培养，则采用约1/5培养体积的抽提试剂重悬

沉淀(例如，1.5ml培养液采用300μl抽提试剂)。如果抽提试剂过量也没有什么副作用。

选做：加蛋白酶抑制剂。BugBuster Master Mix与蛋白酶抑制剂兼容。如果目的蛋白后续要用凝血酶

(货号69671)，Xa因子(货号69036)或重组肠激酶(货号69066)处理，就应该避免使用丝氨酸蛋

白酶抑制剂。尽管纯化过程可能去除活性抑制剂，建议在酶切前最好做透析或凝胶过滤。

3. 室温下将重悬的细胞液在摇板或低速转动搅拌器上孵育10-20分钟。 注意：孵育后获得的抽提物不是粘稠的。

4. 4℃下16,000g离心20分钟以去除不溶的细胞碎片。如果需要，沉淀可以留作“包涵体纯化”(见以

下说明)的材料。 5. 将上清转入另一个新试管。这样抽提得到的可溶蛋白溶液可以直接上样于Novagen的纯化树脂(以

及其它很多类似纯化系统)。蛋白溶液在冰上可以短时存放(2-3小时)，也可在-20℃长时间存放直至

下步分析。蛋白抽提液应该根据目的蛋白的活性要求的温度存放，有些蛋白经冻融会失活。

第四篇：膜蛋白抽提

二、蛋白抽提

谈及蛋白分离，我们想到：超速离心，盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法……有时这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化。由于蛋白质种类繁多，不同的蛋白质由于结构和组成的差异，其溶解度也各不相同.根据蛋白质的溶解特性，同时可选择不同的溶剂提取，分为水溶液提取和有机溶剂提取. 但是针对膜蛋白的提取与细胞质蛋白，核蛋白提取不同之处在于它是嵌在膜中的，水溶性不好，基本方法就是用不同的离心速度去掉胞质蛋白等，最后用去污剂把蛋白从膜中释放出来。膜蛋白分离纯化的重要步骤是选择适当的增溶用表面活性剂，一般常用的有胆酸盐，CHAPS(一种离子去污剂)，Emulgen和Lubrol等表面活性剂。

1、分离膜蛋白的方法(原则性)：

1) 先分离膜，然后提取;如选用冷热交替法、反复冻融法、超声破碎法、玻璃匀浆法、自溶法和酶处理法使得细胞破碎，然后通过剃度离心得到含有膜蛋白的粗组分。(例如：michael11液氮研磨组织，加入匀浆缓冲液及蛋白酶抑制剂。差速离心。蔗糖密度梯度离心。收集37%与41%间的成分，即为质膜部分。裂解即可收集膜蛋白 )

2 )用特殊的去污剂选择性的分离。 从膜上提取蛋白有许多困难.在多数情况下，都是采用去垢剂将疏水蛋白从其膜结构中溶解下来，然后将蛋白质稳定.去垢剂的选择通常是依据他对所需要蛋白质的提取效率来确定，但在某些情况下，还要考虑到以后的纯化步骤.虽然许多膜蛋白必须在去垢剂存在的情况下进行纯化，但最终仍可能需要除去去垢剂.这常常会引起蛋白质失活，但如果蛋白质是用于测序的，他将不是一个问题.如果不是用于测序的，可考虑使用能够黏附去垢剂的疏水珠.许多文献和生化试剂供应商的产品目录中，都介绍有许多种不同的可用来溶解膜蛋白的去垢剂.然而，他们并不是普遍适用的.在设计膜蛋白溶解方案时，必须考虑某一去垢剂的特殊性质.如 triton X-100在280nm处有吸收，如果某蛋白质的测试与280nm处的吸收有关，就应避免使用这类去垢剂. 将膜制剂与胞质蛋白及细胞核分离后，再进一步从细胞膜制剂中将所需的膜蛋白增溶下来.这种做法的好处是可以用强烈的去垢剂提取细胞骨架的相关蛋白，而无需考虑胞质蛋白、细胞核成分或染色质成分的混入.使用这种方法所获得的膜蛋白，无论在种类上还是数量上，都比酸溶解法所得到的蛋白(<5000Da)要多.一般提取的膜蛋白量往往只占膜蛋白总量的不足0.1%，所以充分的膜蛋白的提取，无疑对于研究膜蛋白的结构和功能都是非常重要的. 第二种方法简单，可靠，但有时含有其他蛋白。一般的都是利用4度时所有的蛋白质原则上都溶于TritonX114水溶液，在温度超过20度时，此溶液分为水相和去污相;此时亲水性蛋白溶于水相，疏水的膜蛋白溶于去污剂相中。利用此性质可提取膜蛋白。

3 )膜蛋白色谱(Chromatography of Membrane Protein,CMP)CMP+分离强疏水性蛋白、多肽混合物的层析系统，一般有去垢剂(如SDS)溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白，并由羟基磷灰石为固定相的柱子分离纯化。羟基磷灰石柱具有阴离子磷酸基团(P-端)，又具有阳离子钙(C-端)，与固定相结合主要决定于膜蛋白的大小、SDS结合量有关。利用原子散射法研究cAMP的分离机制发现，样品与SDS结合后在离子交换柱上存在SDS分子、带电荷氨基酸与固定相中带电离子间的交换，从而达到分级分离的目的。 层析柱提取 http:/// (参步骤)

4) 顺序抽提法：根据细胞蛋白溶解性的差异，用具有不同溶解能力的蛋白溶解液进行抽提的方法。用Tris碱溶液裂解细胞提取高溶解性蛋白;把未溶解的pellet用标准液溶解提取高疏水性蛋白;最后用含复合表面活性剂的蛋白溶解液，最后可以再次抽提前两次抽提后不能溶解的膜蛋白。 5)centrifugal protein extraction

原理：高渗的蛋白裂解液让细胞溶涨破裂后，超高速离心

评价：尽管分级(胞浆和胞膜)之间有清洗的步骤,但是可溶蛋白组分和膜蛋白组分之间仍然有不少重复的点.该方法相较MOLLOY MP教授在1998年electrophoresis上发表的分级抽提法减去了第一步(用tris抽提水溶性蛋白)和最后一步(极难溶蛋白),在操作上也作了简化,总而言之是一种不错的方法。(codegreen) 6)detergent- based：提取时先裂解液裂胞膜(选用不同的去污试剂是关键)，梯度离心分离细胞器(ER)，然后分级抽提方法。例如，去掉细胞器之后的DEBRIS就是核膜，再裂解得到核膜蛋白。而膜蛋白是裂胞膜时不溶的部分。

总的感受：细胞的量要很充足。之后的定性鉴定常用的方法有双向免疫扩散、免疫电泳及聚丙稀酰胺凝胶电泳等。纯化蛋白质浓度的定量测定可用双缩脲法、酚试剂法或紫外光吸收法定量鉴定膜蛋白，方便迅速。 到目前为止，提取膜蛋白仍然是蛋白学的一个瓶颈。

2、分离膜蛋白的方法(操作) 1)分离细胞膜蛋白的方法：

1 冰上刮下细胞后将细胞溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液A中，于室温与液氮罐中反复冻融2次。 2 5000转4度离心，驱除核及未裂解的细胞。

3 取上清12000转4度离心10分钟取沉淀溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液B中。

4 12000转4度离心10分钟取沉淀溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液C中提取后测蛋白浓度,SDS-PAGE电泳，分装后-20度保存备用。

buffer A : 1mMkcl,5mMNacl,3mM Mgcl2,50mM Hepes,1mM DTT,0.5ug/ml Leupeptin,20uM pmsf(PH=7.4) buffer B : 1mMkcl,5mMNacl,3mM Mgcl2,50mM Hepes,1mM DTT,0.5ug/ml Leupeptin,20uM pmsf(PH=7.4) 1mM EGTA buffer C : 0.5ug/ml Leupeptin,20uM pmsf,50mMTris-cl(PH=7.0),

2)分离细胞膜蛋白的方法：

1、细胞放在冰上，去除上清，用pH7。4的冷磷酸盐缓冲液洗涤单层细胞两次

2、加入1ml2%TritonX溶液冰浴15min

3、刮下单层细胞，4度下10 000g 5min离心

4、溶液37度水浴 10min以分离水相和去污剂相，然后37度下2 000g离心5min

5、收集水相留作分析

6、用500ul冰冷的buffer C溶解去污剂相沉淀，冰浴2min后加温，在按步骤6再次离心

7、按步骤8再次抽提去污剂相，用buffer C将洗涤后的去污剂相稀释到初始体积

8、用等量的buffer A分别稀释水相与去污相，并进行免疫沉淀实验 试剂：

1、2%tritonX114:2%TritonX1

14、50mmol/L Tris HCl(pH7。5)、蛋白酶抑制剂

2、缓冲液A(含0。5mol/LNaCl的RIPA buffer)

3、buffer C 10mmol/L Tris HCl(pH7.5) 150mmol/L NaCl 5mmol/L EDTA(PH7.5)

3)分离细胞膜蛋白的方法： 7M urea 2M thiourea 4%chaps 2.5%sb3-10 1000000个细胞，可用此 buffer 1ml。 冰浴匀浆。冰上置30分钟。 4度高速低温离心30min。 取上清-20保存。 4)分离组织膜蛋白的方法：

1、取组织，加入10ml Buffer A 于冰上充分匀浆。

2、J6-HC离心机800rpm，4℃离心10min后，所得上清液转入超速离心管。

3、100000g，4℃离心1hr。弃去上清，沉淀用适量的 Buffer B重悬，冰上孵育2hr后分装至EP管， Eppendorf台式离心机10000rpm，4℃离心30min。

4、收集所得上清液即为膜组份。

Buffer A：0.32M 蔗糖，5mM Tris-HCl(PH 7.5)，120mM KCl，1mM EDTA,1mM EDTA, 0.2mM PMSF, 1ug/ml Leupeptin, 1ug/ml Pepstatin A, 1ug/ml Aprotinin。冰上预冷。

Buffer B：20mM HEPES(PH 7.5)，10%甘油，2% Triton X-100, 1mM EDTA, 1mM EDTA, 0.2mM PMSF, 1ug/ml Leupeptin, 1ug/ml Pepstatin A, 1ug/ml Aprotinin。 冰上预冷。

5)分离组织膜蛋白的方法： RIPA 1XPBS 1%NP40 0.5去氧胆酸钠 0.1%SDS 以下用时加入

10mg/ml PMSF异丙醇(终浓度10ul/ml) Aprotinin(30ul/ml)

1000mM Sodium Orthovandate(10ul/ml)

冰冻组织100mg/细胞1000000个，可用RIPA buffer 1ml。 冰浴匀浆。冰上置30分钟。 4度高速离心30min，20000转低温离心最佳。 取上清-20保存。

6)分离细菌膜蛋白的方法：

① 于20ml 营养肉汤中过夜培养细菌，37℃，200rpm。 ② 10000g、20min、4℃离心，去上清。

③ 20ml预冷的Tris-Mg缓冲液重悬，同样条件离心，再重悬于预冷的Tris-Mg缓冲液。 ④ 超声波破碎细菌。

⑤ 3000g，10min、室温下离心去除未破碎细菌。小心吸取上清(含有胞质成分和细菌外被成分)。 ⑥ 超速离心I：100,000g，60min，4℃，去除上清(胞质成分)，收集细菌外被成分。 ⑦ 用10ml含2%的SLS的Tris-Mg 缓冲液重悬沉淀物，室温温育20-30min。

⑧ 超速离心II：70,000g，60min，室温沉淀收集外膜蛋白，去除上清(含细胞质膜)。重复⑦、⑧两步。 ⑨ 充分吸除上清，并根据沉淀体积大小用0.1-0.2 ml的ddH2O重悬沉淀物。根据公式：蛋白浓度(mg/ml)=1.450 D280-0.740 D260测定外膜蛋白浓度，调节蛋白浓度至40ug/ul，该蛋白质样品-70℃贮存。 试剂

① Tris-Mg 缓冲液 10mM Tris-Cl 5mM MgCl2 pH 7.3，4℃保存

② 2%(w/v)十二烷基肌氨酸钠 (SLS) 7)来源于Methods Enzymology (1974) 1.取一定量酶处理的细胞，用匀浆器破碎，操作要温和，使细胞膜保持完整。由于水与膜的疏水部分之间有反应，因此要精确掌握分离介质中的离心强度和渗透压，以每克细胞湿重加40ml介质。

2.用Potter-Elvehiem匀浆器，杆与壁间间隙0.5～0.6μm,14.4kr/min上下匀浆4～6次，每次5S。 3.过滤匀浆液，150g离心10min，保留上清，沉淀部分加入50μl介质，用匀浆器1kr/min匀浆3次，150g离心10min，沉淀部分再加入上次匀浆的上清液。

4.合并3次上清液，2kg离心10min，弃上清，沉淀部分溶于100μl介质，离心10min，弃上清，留沉淀。 5.将沉淀部分加入70%蔗糖15份，然后分别置于三个离心管中，上面依次叠加54%、49%、45%，41%，37%蔗糖溶液各

2、

2、

5、

5、3份。

6.700kg离心90min，分离介质在1.16～1.18之间形成介面。

7.收集d为1.16～1.18g/ml之间的细胞膜，加30倍的介质以2.5kg离心10min，洗涤2次。 8.保存于2.7mmol/L Tris-HCl pH7.5缓冲液中，用于细胞膜的研究分析

8)常用的制备粗制质膜组分的方法：(所有操作都在4摄氏度下进行)

1.在冰冷的匀浆缓冲液中切碎组织块，倒出血水。用匀浆缓冲液漂洗组织碎块，并将它们置于冰上，重复上述操作，直至组织碎成1mm3大小的碎片，且无可见的血。

2.加入5倍(体积比)与组织块体积的缓冲液，再置于冰浴的Dounce氏玻璃匀浆器中，抽研10-20次，匀浆组织。

3.匀浆4摄氏度600g离心10min，上清含细胞膜、线粒体和细胞溶胶。沉淀中有未破碎的细胞及细胞核。弃沉淀。

4.上清4摄氏度8000g离心10min，沉淀线粒体。弃沉淀。 5.上清4摄氏度10000g离心20min，弃上清。

6.用匀浆缓冲液重悬沉淀，继续匀浆，再次4摄氏度，10000g离心20min，弃上清。 7.用小体积的适宜缓冲液重新彻底匀浆沉淀。

8.粗制的样品可于干冰/乙醇中速冻，保存于-80摄氏度。

9)用特殊的去污剂选择性的分离。简单，可靠，但有时含有其他蛋白。

原理：4度时所有的蛋白质原则上都溶于TritonX114水溶液，但在37度时，此溶液分为水相和去污相;此时亲水性蛋白溶于水相，疏水的膜蛋白溶于去污剂相中。 方案

1、放射性标记受试细胞

2、将标记的细胞放在冰上

3、去除上清，用pH7。4的冷磷酸盐缓冲液洗涤单层细胞两次

4、加入1ml2%TritonX溶液冰浴15min

5、刮下单层细胞，4度下10 000g 5min离心

6、溶液37度水浴 10min以分离水相和去污剂相，然后37度下2 000g离心5min

7、收集水相留作分析

8、用500ul冰冷的buffer C溶解去污剂相沉淀，冰浴2min后加温，在按步骤6再次离心

9、按步骤8再次抽提去污剂相，用buffer C将洗涤后的去污剂相稀释到初始体积

10、用等量的buffer A分别稀释水相与去污相，并进行免疫沉淀实验 试剂：

1)2%tritonX114:2%TritonX1

14、50mmol/L Tris HCl(pH7。5)、蛋白酶抑制剂 2)缓冲液A(含0。5mol/LNaCl的RIPA buffer) 3)buffer C 10mmol/L Tris HCl(pH7.5) 150mmol/L NaCl 5mmol/L EDTA(PH7.5)

10)植物中：高度纯化的质膜是质膜蛋白研究的基础，制备纯化方法也很多，植物材料中以1蔗糖密度梯度离心、2水溶性双水相法、3自由流电泳等方法为主。前两种常用。1的产率较高但纯度不高，2是20世纪80年代发展起来的一种分离高纯度质膜的方法，经多次双水相分配即可得到高纯度质膜，近些年此方法广泛用于植物质膜的纯化。

第五篇：蛋白质含量

教学分析

《蛋白质含量》的主要内容就是“求一个数的百分之几是多少、把百分数化成小数、分数”，是在学生掌握了百分数意义的基础上进行教学的。重点是当学生面对百分数乘法的计算时，能够转化思想，江百分数转化成可以计算的数。

教学目标

1、 继续学习百分数的应用，掌握百分数、分数和小数间的互化方法。

2、 提高学生应用百分数、分数和小数的能力。

3、 在学习中体会成功的快乐，尝试合作的愉快。

教学重点

能解决“求一个数的百分之几是多少”的实际问题。 教学难点

学习怎样把百分数化成分数或者小数。 教学准备

课件 我的思考

本节课的教学重点需要着眼于如何引导学生的思维，遇到没有见过的情况(即：百分数乘法)，在这时想到可以把百分数转化成学过的小数或者分数来计算，那么问题就落在关键部分了。

教学过程

一、 创设情境，引入课题

出示学生日记，让学生确身体会百分数这个数学概念一直跟我们的生活息息相关。比如说日记的俗语中就有百分数，你能发现吗?

褒贬参半——50﹪

十二分满意——120﹪

三天打鱼两天晒网——40﹪、60﹪

我们的日常用语中也有百分数，比如在我们平时吃的食物中也有百分数。(出示教材情境)我们平时吃的黄豆中各种成分所占的百分数，你能提出什么数学问题? 100克黄豆里有多少克蛋白质? (如果有100克黄豆，那么蛋白质占36就应该有36克蛋白质。→如果“1”是100 的话，那么部分量就是对应的分子 →进一步引导百分数的“℅”其实就是一个分母，也就是100分之多少)

二、 深入探究，学习新知

1、 求一个数的百分之几是多少

如果不是100克，而是250克的话，怎样才能算数其中蛋白质的含量? (小组交流)→(

250× 36﹪

)

为什么用乘法计算? 总结归纳出：求一个数的几分之几是多少用乘法计算,所以求一个数的百分之几是多少也用乘法。

2、 百分数转化成分数或小数

(250× 36﹪)这是关于百分数的乘法算式，没法直接算，怎么办?

以250×36%为研究对象， 4人为一组交流，共同商量解决的办法，并将计算方法写在练习本上。(黑板展示两种方法学生说出转化方法)将新知识转化成我们学过的数学知识来解答，这是我们解决数学问题的好方法。

将百分数化成分数或小数，蛋白质的含量变化了吗?

369(36﹪= =0.36= )

10025说一说百分数怎样化成分数或小数?

三、拓展延伸

把下面的几个百分数按要求化成分数或小数(学生独立完成，个别指导，集体订正)

试总结，百分数要怎样化成分数?怎样化成小数?(小组讨论交流)

百分数化成小数:把百分号去掉，同时把小数点向左移动两位。 百分数化成分数:去掉百分号，把前面的整数写成分子，分母是100,能约分的要约成最简分数。

四、 巩固练习

五、 课堂小结