基础生物学实验范文

第一篇：基础生物学实验范文

基础实验动物学期末考试题

动物实验从实验设计开始到最后的结果解读有诸多的因素决定其结果的科学性，主要有以下四方面：

一、实验设计是否科学

科学的实验设计是任何实验成功的第一步。如果没有严谨的设计，实验结果就是不可靠的。如：在动物实验中，对照是很重要的一种设计，如果忽视对照或错用对照，势必导致实验的失败。

二、实验动物的选择

1、遗传学背景是否明确。根据实验目的选用近交系、远交封闭群或杂交群的动物。其各有优缺点，如近交系动物的反应一致性优于封闭群或杂交群，使用近交系动物会使实验得出更准确的结果。但杂交群动物也有许多优点，在某些方面比近交系更适用于研究。但如果选用不当，可能得不出正确的实验结论。

2、根据不同的目的动物疾病模型，考虑动物的遗传特质、生物学特性、易感性等，选择相应品种、品系的动物。如：过去制作脊髓灰质炎的动物疾病模型时，其他动物不能复制该传染病，仅在猕猴中可以复制，所以该项研究仅能选用猕猴进行。当然，现在已经有了更为先进的细胞传代的技术解除了猴子们的噩运。另外，不同品系的小鼠对同一刺激的反应差异很大。如DBA小鼠听到电铃声后可出现明显的癫痫症状，甚至死亡，而C57BL根本不出现此反应。

3、根据实验目的的不同选用相应微生物和寄生虫控制等级的实验动物，即考虑选用普通级、清洁剂、无特定病原体动物(SPF动物)，还是无菌动物。

4、考虑年龄、体重、性别。不同的年龄阶段的动物所得到的实验数据不尽相同，应注意实验动物之间、实验动物与人之间的年龄对应;同一实验中，动物的体重要尽可能一致;实验动物对与药物的毒性反应有性别差异。

三、实验动物的饲养

饲养包括微生物的控制、饲料的配置、实验动物生活环境的控制等环节。饲养时根据不同品种、品系、生理状况，根据对营养和环境的不同需求，根据不同的实验目的合理调控以上项目。要注意的是，饲养中要注意许多细节，这些细节可能影响实验结果。如从运输抵达实验室开始就要注意减少环境改变引起的动物的应激反应;清洗笼子、换水和饲料、改变成员最好不要一次完成;喜群居的动物单独饲养时放置玩具等。总之，让动物在良好的环境中生活，和动物建立良好的合作伙伴关系，既符合伦理的要求，也有利于我们的实验结果。

四、实验人员的态度、认识与操作水平

首先，实验人员还应秉持科学的严谨的实验态度。如在对10只小鼠分别进行0.1ml的某药品的腹腔注射时，不应为了方便及节省时间就抽取1ml的药品进行一次性注射。这势必造成给药剂量的不准确，进而对实验结果造成直接的严重的影响。

其次，动物学实验的人员都应经过培训，掌握相关的实验动物学知识及相应技术。这不仅是伦理学的要求，也是我们实验结果科学可靠的要求。比如麻醉时，如果麻醉过深，动物处于重度抑制甚至濒死状态，各种正常反应受限，会直接影响实验结果;但如果麻醉过浅，引起动物的强烈疼痛，会影响呼吸、循环、消化等一些生理生化指标。再比如手术时，熟练的手术操作可以减少对动物的刺激，使动物创伤少，出血少，将会提高实验的成功率和实验结果的正确性。

综上所述，我认为实验设计的科学性、实验动物的选择、实验动物的饲养、研究人员的态度、认识与操作水平这四方面是动物实验结果科学性的决定因素。

第二篇：实验动物学实验

实验一 常用实验动物技术介绍

目的

了解并熟悉实验动物实验操作的基本方法和技术。 内容

注射方法;麻醉方法;动物编号的方法;采血;动物性别鉴定;动物的致死。学习打结、缝合、固定动物等。播放录像《太行山猕猴》、《动物的捉拿和给药途径》。 用品

大白鼠、小白鼠、蟾蜍、家兔，常用手术器械、注射器、小木锤、大小鼠固定器，戊巴比妥钠，乙醚、士的宁、乙醚、氯仿、氯化钾、一氧化碳、二氧化碳

常用实验动物性别鉴定

1、大、小鼠的性别鉴定

离乳仔鼠性别鉴定主要以生殖器与肛门之间的距离长短及肛门与生殖器有无被毛为标志。识别要点是：① 雄性的生殖器与肛门之间的距离较远，雌鼠较近;② 雄性的生殖器与肛门之间有毛;③ 雄性的生殖器突起较雌鼠大;④ 雌鼠乳头较雄鼠明显。成熟后，雄性可见阴囊,雌性乳头明显而易于区分。

2、豚鼠的性别鉴定

豚鼠的性别鉴定主要是通过生殖器形态来判断。雌性外生殖器阴蒂突起比较小，用拇指按住阴蒂突起，余指拨开大阴唇的皱褶，可见阴道口呈”V”形(注意发情间期的闭锁现象，即一种除了发情和分娩时外，关闭阴道口的细胞结构);雄性外生殖器有包皮覆盖的阴茎小隆起，用拇指按住其基部包皮，可见龟头向外突出。

3、兔子的性别鉴定

幼兔的性别鉴定主要以尿道开口部与肛门之间的距离及尿道开口部的形状来判别。哺乳期仔兔，雄性尿道开口部与肛门之间的距离较远，为雌性的1.5-2倍，雌性较近。雌性尿道开口扁形，大小与肛门同;雄性圆形，略小于肛门。1月龄仔兔，雄性生殖孔呈圆形，翻出可见呈圆柱体的突起;雌性生殖孔呈Y形，翻出仅见有裂缝，裂缝及于肛门。3月龄以上成年兔，雄性阴囊明显而雌性无阴囊;雄性头大短而圆而雌性头小略呈长形。

4、猫的性别鉴定

幼猫的性别是根据生殖器与肛门的距离来判断。距离远者为雄性，距离近者为雌性。

5、猴类的性别鉴定

猴类性别的区分较为困难。首先检查尿道开口，许多雌性动物有较大的阴蒂，其腹侧形成沟状通向尿道口，而雄性动物的尿道开口在阴茎头上。触摸阴囊内是否有睾丸是确定其雌雄的最可靠办法。

常用实验动物处死

大鼠和小鼠的处死方法

1、脊椎脱臼法

右手抓住鼠尾用力向后拉，同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头，将脊髓

1 与脑髓拉断，鼠便立即死亡。

2、断头法

实验者戴上棉纱手套，用右手握住大鼠头部，左手握住背部，露出颈部，助手用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉。小鼠处死法相同。

3、击打法

右手抓住鼠尾，提起，用力摔击其头部，鼠痉挛后立即死亡。用小木锤用力击打鼠头部也可致死。

4、急性大失血法

可采用鼠眼眶动脉和静脉急性大量失血方法使大小鼠立即死亡。

5、化学致死法

吸入一氧化碳，大、小鼠在一氧化碳浓度为0.2-0.5%环境中即可致死。 皮下注射士的宁，吸入乙醚、氯仿，均可致死。士的宁注射量，小鼠为0.76～2.0mg/kg体重，大鼠3.0-3.5ml/kg体重。氯化钾处死大鼠剂量：25%溶液0.6ml/只静脉注入。

实验动物的处死方法很多，应根据动物实验目的、实验动物品种(品系)、以及需要采集标本的部位等因素，选择不同的处死方法。无论采用哪一种方法，都应遵循安乐死的原则。安乐死是指在不影响动物实验结果的前提下，使实验动物短时间无痛苦地死亡。处死实验动物时应注意，首先要保证实验人员的安全;其次要确认实验动物已经死亡，通过对呼吸、心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察，对死亡作出综合判断;再者要注意环保，避免污染环境，还要妥善处理好尸体。

一、颈椎脱臼处死法

此法是将实验动物的颈椎脱臼，断离脊髓致死，为大、小鼠最常用的处死方法。操作时实验人员用右手抓住鼠尾根部并将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，用左手拇指、食指用力向下按压鼠头及颈部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方，造成颈椎脱臼，脊髓与脑干断离，实验动物立即死亡。

二、断头处死法

此法适用于鼠类等较小的实验动物。操作时，实验人员用左手按住实验动物的背部，拇指夹住实验动物右腋窝，食指和中指夹住左前肢，右手用剪刀在鼠颈部垂直将鼠头剪断，使实验动物因脑脊髓断离且大量出血死亡。

三、击打头盖骨处死法

主要用于豚鼠和兔的处死。操作时抓住实验动物尾部并提起，用木锤等硬物猛烈打击实验动物头部，使大脑中枢遭到破坏，实验动物痉挛并死亡。

四、放血处死法

此法适用于各种实验动物。具体做法是将实验动物的股动脉、颈动脉、腹主动脉剪断或剪破、刺穿实验动物的心脏放血，导致急性大出血、休克、死亡。

犬、猴等大动物应在轻度麻醉状态下，在股三角做横切口，将股动脉、股静脉全部暴露并切断，让血液流出。操作时用自来水不断冲洗切口及血液，既可保持血液畅流无阻，又可保持操作台清洁，使实验动物急性大出血死亡。

五、空气栓塞处死法

处死兔、猫、犬常用此法。向实验动物静脉内注入一定量的空气，形成肺动脉或冠状动脉空气栓塞，或导致心腔内充满气泡，心脏收缩时气泡变小，心脏舒张时气泡变大，从而影响回心血液量和心输出量，引起循环障碍、休克、死亡。空气栓塞处死法注入的空气量，猫和兔为20~50ml，犬为90~160ml。

六、过量麻醉处死法

此法多用于处死豚鼠和家兔。快速过量注射非挥发性麻醉药(投药量为深麻醉时的30倍)，或让动物吸入过量的乙醚，使实验动物中枢神经经过过度抑制，导致死亡。应用戊巴比妥钠注射麻醉致死。豚鼠可用其麻醉剂量3倍以上剂量腹腔注射。猫可采用本药麻醉量的2～3倍药量静脉注射或腹腔内注射。兔可用本药80～100ml/kg的剂量急速注入耳缘静脉内。狗可用本药100mg/kg静脉注射。

七、毒气处死法

让实验动物吸入大量CO2等气体而中毒死亡。吸入二氧化碳，此法安全、人道、迅速，被认为是处理啮齿类的理想方法，国外现多采用此法。可将多只动物同时置入一个大箱或塑料袋内，然后充入CO2，动物在充满CO2的容器内l～3min内死去。

人类为什么总拿小白鼠做实验?

原因一：

老鼠中的小白鼠的基因序列和人类的差不多，一些医学的科研和临床实验都是有小白鼠来完成的。当中以小白鼠做遗传学实验很好，因为它的全基因组和人类的相似度极高，很多人类难以治愈的疾病可以在小白鼠身上找到相似性状，从而加以实验发现治病基因。

原因二：

实验专用白鼠的生物学意义较大，纯系小鼠的培育方法经过百年探索已经形成固定流程，培育出的小鼠几乎完全没有个体差异(生理上)，而在一般的自然种群中,同种动物间的个体差异是很大的(尽管外表相同)，主要表现在先天的身体素质上。 生理上没有个体差异是否意味着气质上没有差异尚不明了，不过选择纯系实验白鼠主要还是为了尽可能的减少先天的个体差异。

原因三：

数量充足，许多实验需要统计学分析，这就要求一定的数量，大白鼠和小白鼠，特别是小白鼠，在人工繁殖条件下，能满足这一要求。种系纯，好的实验要对实验动物的品种严格控制，这用小白鼠就容易解决。

还有动物等级，小白鼠好歹也是哺乳动物，除了体形小，与其它哺乳动物的进化水平相比并不差。体形小反而成为人工繁殖喂养的有利条件。

原因四：

其实很多实验用猩猩等与人更近似的动物做最好，但使用猩猩太昂贵了。许多实验，比如认知类的，实验结束后时需要将动物杀死，来检查其内部变化的。这样，大量的实验肯定就不能用比较“贵重”的猩猩了。

实验

二、常用实验动物采血、血细胞计数

1、小白鼠的采血 目的：

了解并熟悉小白鼠的采血方法; 掌握小白鼠眼眶后静脉丛采血。

用品: 二甲苯棉球、1%肝素溶液、1%可卡因、乙醚、刀片、无钩弯镊子、弯止血钳、微量采血针、剪刀、剪毛剪、锋利刀片、注射器。 内容：

1、剪尾采血：需血量少时可用此方法。将动物固定，显露尾部，将尾尖剪去约5mm，从尾根部向尾端部按摩，血即从断端流出。若用二甲苯棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟，使尾部血管充盈，可采到较多的血，但注意二甲苯可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，止血。如将动物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血约0.1ml，大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。

2、摘眼球采血：此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球，立即将鼠倒置，头朝下，眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活，可采另一侧眼球取血。

3、眼眶后静脉丛采血：用7—10cm长的微量采血针。将取血管浸入1%肝素溶液，干燥后使用。采血时，左手拇指和食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定，并用中指配合，轻轻压迫颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提示眼眶后静脉丛充血。可用少量1%可卡因滴入动物眼内，使眼部局部麻醉。右手持取血管，将其尖端插入内眼角与眼球之间，轻轻向眼底方向刺入，小鼠刺入约2—3mm，大鼠刺入约4—5 mm，当感到有阻力时即停止刺入，旋转取血管以切开静脉丛，血液即流入取血管中，采血结束后，拔出取血管，放松左手，出血即停止。用本法短期内可重复采血。小鼠一次可采血0.2—0.3 ml，大鼠一次可采0.5—0.1ml。

4、颈静脉或颈动脉采血：将鼠麻醉，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离手术，用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。

5、断头采血：操作者左手拇指和食指握住鼠颈部，头朝下，用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部，提起动物，血液即可流入准备好的容器中。

6、心脏采血：将动物麻醉，使其仰位固定，剪去胸前区毛，消毒皮肤，在左侧第3—4肋间选择心博最强处穿刺，血液借心脏跳动的力量进入注射器。亦可在动物麻醉后，切开动物胸腔，直视心脏内抽血或剪破心脏，直接用注射器、吸管等吸血。

2、豚鼠的采血 目的

了解并熟悉豚鼠的采血方法; 用品

刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、20%的柠檬酸钠溶液、纱布、脱脂棉。

方法与步骤：

1、耳缘切口采血：先将豚鼠耳消毒，用刀片割破耳缘，在切口边缘涂上20%的柠檬酸钠溶液，防止血凝，则血可自切口处流出。此法采血每次可采0.5ml左右。

2、背中足静脉采血：固定豚鼠，将其右或左后肢膝关节伸直，脚背消毒，找出背中足静脉，左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手将注射针刺入静脉，拔针后立即出血。采血后用纱布或脱脂棉压迫止血。

3、心脏采血：选心跳最明显的部位把注射针刺入心脏，血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应细长些，以免发生采血后穿刺孔出血。

3、家兔的采血 目的

4 了解并熟悉家兔的采血方法; 掌握家兔的耳缘静脉采血方法。 用品

常用手术器械、玻璃取血管、计数板、注射器、显微镜。 内容

1、耳缘静脉采血：将兔固定，拔去耳缘静脉局部的被毛，消毒，用手指轻弹兔耳，使静脉扩张，用针头刺耳缘静脉末端，血液即流出。本法为兔最常用的采血方法，可多次重复使用。

2、耳中央动脉采血：在兔耳中央有一条较粗的、颜色较鲜红的中央动脉。用左手固定兔耳，右手持注射器，在中央动脉的末端，沿着与动脉平行的向心方向刺入动脉，即可见血液进入针管。由于兔耳中央动脉容易痉挛，故抽血前必须让兔耳充分充血，采血时动作要迅速。采血所用针头不要太细，一般用6号针头，针刺部位从中央动脉末端开始，不要在近耳根部采血。

3、颈静脉采血：将家兔麻醉，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离手术，用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。

4、心脏采血：穿刺部位在第三肋间胸骨左缘1mm处，选心跳最明显的部位把注射针刺入心脏，血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应细长些，以免发生采血后穿刺孔出血。

4、小白鼠RBC、WBC计数 目的

1、复习小白鼠眼眶后静脉丛采血;

2、学习微量采血法和红、白细胞计数法。 原理

用加有抗凝剂的溶液将定量的血液稀释，滴入血细胞计数室内，于显微镜下计数，求出一定容积的稀释血液中的RBC、WBC数，再将其换算成1L血液中的RBC、WBC个数。 用品

血细胞计数板、计数器、显微镜、微量吸血管、酒精棉球、消毒脱脂棉球、RBC稀释液(0.9%NaCl溶液)或RBC稀释液：NaCl(维持渗透压)0.5g，Na2SO4(使溶液比重增加，红细胞均匀分布不易下沉)2.5g，HgCl2(固定红细胞并防腐)0.25g，蒸馏水加至100ml。

WBC稀释液，其成分为：冰醋酸1ml(破坏红细胞)，1%龙胆紫1ml(染白细胞核，便于计数)，加蒸馏水至100ml。 方法与步骤

1、熟悉血细胞计数板和微量吸血管的构造

(1)计数板是一块厚厚的长方形玻璃板，板的中部有四条直槽，内侧两槽中间有一条横槽，把中部隔成两个长方型的平台。此平台比整个玻璃板的平台低0.1mm，当放上盖玻片后，平台与盖玻片之间的高度为0.1mm,平台中部有3mm×3mm精确划分的9个大方格，称为计数室,每个大方格的面积为1mm×1mm=1mm2, 体积为0.1mm3。中央的大方格则由双线精确划分为25个中方格，每个中方格的面积为0.2mm×0.2mm=0.04mm2,体积为0.004mm3,每个中方格又用单线精确划分成16个小方格。适用于RBC计数。

(2)微量吸血管 一次性玻璃细管，以防交叉感染。该管长12cm，在4.5cm处和9cm处各有一定量标记，分别10μl和20μl。在11cm处有一色标，为连

5 结橡胶吸头的标记。

2、微量采血和稀释

(1)先准确吸取3.98mlRBC稀释液于一洁净的试管内。

(2)手持微量吸血管，将其管口浸入血滴，缓缓吸入血液至20μl处，如吸入血液稍过量，可用手指或干棉球轻触管口，缓缓转动，可使血液吸出，至恰好与刻度相符。用干棉球将管口外面的血液擦拭干净。将血液加入到准备好的RBC稀释液中。注意，应将采血管垂直插入稀释液底部，缓缓挤出血液使之不扩散，轻吸上清液再挤出，使血液完全转入到试管中。

(3)将血液和稀释液混匀。

3、充液

取洁净计数板及盖玻片，将盖玻片平放在计数板的计数室上。用干净吸血管或小吸管吸少量混匀的RBC稀释液，然后将管口斜置于盖玻片边缘的计数板毛玻璃斜面上，挤出少量稀释液，此时液体即由于毛细管作用而进入计数室内。但须注意，如果计数室内留有气泡或稀释液过多以致溢出室外的凹沟中，都应该洗去，再重新充液。

4、计数

充液后应让计数板静置8min，待RBC充分下沉后方可进行计数。先在低倍显微镜下观察RBC分布是否均匀，如果分布很不均匀，应洗去重做。在低倍镜下找到中央大方格，看清其横、竖线后即可用高倍镜来计数。显微镜的光圈应缩小并降低聚光器使得视野较暗，这样RBC的轮廓可更清楚些。通常选择中央大方格四角的4个中格和中央的1个中格来计数。计数为了防止遗漏，应按一定的顺序：即第一行先从左向右数到最后一格，下一行则从右向左数，以此类推。对于分布在双线上的RBC，则可计数左侧和上方线上的RBC，即按照“数上不数下，数左不数右”的原则。计数时应将每个中格的RBC数记录下来，若发现各中格之间的RBC数相差超过15个时，表示其分布不均匀，应将计数室洗净，重新摇匀吸管中的稀释血液，再充液进行计数。

5、计算

RBC的稀释倍数为200倍：(0.02ml+3.98ml)/0.02ml=200 计数室5个中格的总容积为0.02mm3，设5个中格RBC总数为X，则1mm3稀释液RBC总数为X×50个。由此可知，每毫升血液中实际RBC数目：X×50×200个，即10000X，再乘以106得出每升血液中的RBC数。 WBC基本与RBC相同，不同之处：

1、WBC稀释液，其成分为：冰醋酸1ml(破坏红细胞)，1%龙胆紫1ml(染白细胞核，便于计数)，加蒸馏水至100ml。

2、计数板四角的四个大方格又各分为16个中方格，适用于WBC计数。

3、吸取WBC稀释液为0.38ml，血液稀释了20倍。

4、在计数WBC时，计数四角的4个大方格中的WBC总数。其总容积为0.4mm3,换算成每升血液中的WBC数时，4个大方格内WBC数×2.5×20×106=WBC数/L。

5、计数时，如发现大方格之间的WBC数相差超过10个时，表示WBC分布不均匀，应重新充液计数。 思考题：

1、在实际操作中，你认为哪种采血方法效果好?为什么?

2、小结在操作过程中，哪些因素可能影响计数的准确性?

6 实验

三、常用实验动物的给药、胰岛素惊厥

1、小白鼠的给药 目的：

1、了解并熟悉小白鼠、豚鼠、家兔的给药方法;

2、掌握小白鼠的皮下注射、腹腔注射。

3、了解胰岛素调节血糖水平的机能。

用品：小鼠专用灌胃针、注射器、75%酒精棉球。

内容：

1.灌胃给药

小鼠专用灌胃针由注射器和喂管组成，喂管长约1nm，喂管尖端焊有一金属小圆球，金属球中空，用途是防止喂管插入时造成损伤。金属球弯成20度角，以适应口腔与食道之间弯曲。将喂管插头紧紧连接在注射器的接口上，吸入定量的药液;左手捉住小鼠，右手拿起准备好的注射器。将喂管针头尖端防放进小鼠口咽部，顺咽后壁轻轻往下推，喂管会顺着食管滑入小鼠的胃，插入深度约3cm。用中指与拇指捏住针筒，食指按着针竿的头慢慢往下压，即可将注射器忠的药液灌入小鼠的胃中。在插入过程中如遇到阻力或可看见1/3的针管，则江喂管取出重新插入，因为这时灌胃并没有插入胃中。

2.注射给药

(1)皮下注射给药

皮下注射给药是将药液推入皮下结缔组织，经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环的过程。作皮下注射常选项背或大腿内侧的皮肤。操作时，常规消毒注射部位皮肤，然后将皮肤提起，注射针头取一钝角角度刺入皮下，把针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可缓慢地将药物注入皮下。拔针时左手拇、食指捏住进针部位片刻，以防止药物外漏。注射量约为0.1-0.3ml/10g体重。

(2)皮内注射给药

是将药液注入皮肤的表皮和真皮之间，观察皮肤血管的通透性变化或皮内反应，接种、过敏实验等一般作皮内注射。先将注射部位的被毛剪掉，局部常规消毒，左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注射器连接4.5针头穿刺，针头进入皮肤浅层，再向上挑起并梢刺入，将药液注入皮内。注射后皮肤出现一白色小皮丘，而皮肤上的毛孔极为明显。注射量为0.1ml/次。

(3)肌肉注射给药

小鼠体积小，肌肉少，很少采用肌肉注射。当给小鼠注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时，采用肌肉注射。操作时1人保定小鼠，另一人用左手抓住小鼠的1条后肢，右手拿注射器。将注射器与半腱肌呈60°角迅速插入1/4，注入药液。用药量：不超过0.1ml/10g体重。

(4)静脉注射给药

将小鼠放在金属笼或鼠夹中，通过金属笼或鼠夹的孔拉出尾巴，用左手抓住小鼠尾巴中部，小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉，2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面，3条静脉呈品字型分布，一般采用左右两侧的静脉。拔去沿尾部静脉走向的毛，置尾巴于45-50℃温水中浸泡几分钟或用75%酒精棉球反复擦拭尾部，以达到消毒和使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的。当尾部静脉注射时,以左手拇指和食指捏住鼠尾两恻，使静脉更为充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指夹住尾巴的末梢，右手持4号针头注射器，使针头与静脉平行(小于30°

7 角)，从尾巴的下1/4处进针，开始注入药物时应缓慢，仔细观察，如果无阻力，无白色皮丘出现，说明已刺入血管，可正式注入药物。有的实验需连日反复尾静脉注射给药，注射部位应尽可能从尾端开始，按次序向尾根部移动，更换血管位置注射给药。注射量为0.05-0.1ml/10g体重。拔出针头后，用拇指按住注射部位轻压1-2min，防止出血。

(5)腹腔注射

左手提起并固定小鼠，使鼠腹部朝上，鼠头略低于尾部，右手持注射器将针头在下腹部近腹白线的两侧进行穿刺，针头刺入皮肤后进针3nm左右，接着使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌，穿过腹肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失。固定针头，保持针尖不动，回抽针栓，如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。注射量为0.1-0.2ml/10g体重。

2、豚鼠的给药

1)皮下注射给药

皮下注射部位取颈背、腋下、侧腹或豚鼠后大腿的内侧，注射时以左手拇指和食指提起豚鼠皮肤，将连有5(1/2)号针头的注射器刺入皮下。

2)肌肉注射给药

选用大腿外侧肌肉进行注射。操作时1人保定豚鼠，另一人用左手抓住豚鼠的1条后肢，右手拿注射器。将注射器与半腱肌呈60°角迅速插入1/4，注入药液。用药量：不超过0.1ml/10g体重。

3、家兔的给药

1)静脉注射 兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动脉，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用。外缘静脉表浅易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。

2)皮下注射 注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有5(1/2)号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧，豚鼠在后大腿的内侧或小腹部;大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。

3)肌肉注射

肌肉注射应选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可进行注射。

4)腹腔注射

用家兔做实验时，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。

小白鼠胰岛素惊厥

基本原理

胰岛素是调节机体血糖的激素之一，当体内胰岛素含量增高时，便引起血糖下降，动物出现惊厥现象。 动物与器材

小白鼠数只、1ml注射器、鼠笼、胰岛素溶液(2μ/ml)、50%葡萄糖溶液、酸性生理盐水。 方法与步骤

1.取4只小白鼠称重后，分实验组和对照组，每组2只。 2.给实验组动物腹腔注射胰岛素溶液(0.1ml/10g体重)。 3.给对照组动物腹腔注射等量的酸性生理盐水。

8 4.将两组动物都放在30—37℃的环境中，并记下时间，注意观察并比较两组动物的神态、姿势及活动情况。

5.当动物出现角弓反张、乱滚等惊厥反应时，记下时间，并立即皮下注射葡萄糖溶液(0.1ml/10g体重)。

6.比较对照组动物、注射葡萄糖的动物、以及出现惊厥而未经抢救的动物的活动情况，并分析所得的结果。 注意事项

1.动物在实验前必须饥饿18—24h。 2.一定要用pH2.5—3.5的酸性生理盐水配制胰岛素溶液。因为胰岛素在酸性环境中才有效应。

3.酸性生理盐水的配制将10ml0.1mol/LHCl加入300ml生理盐水中，调整其pH值在2.5—3.5，如果偏碱，可加入同样浓度的盐酸调整。

4.注射了胰岛素的动物最好放在30—37℃环境中保温，夏天可为室温，冬天则应高些，可到36—37℃。因温度过低，反应出现较慢。 思考题

试分析糖尿病产生的原因及治疗方法。

实验

四、实验动物的全身麻醉、损毁小白鼠小脑的效应

1、实验动物的全身麻醉 目的：

了解影响实验动物麻醉的因素; 了解并熟悉实验动物的麻醉方法; 掌握大、小白鼠的吸入麻醉法。 原理：

麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。

全身麻醉方法：麻醉药经呼吸道吸入或静脉、肌肉注射，产生中枢神经系统抑制，呈现神志消失，全身不感疼痛，肌肉松弛和反射抑制等现象，这种方法称全身麻醉。其特点为抑制深浅与药物在血液内的浓度有关，当麻醉药从体内排出或在体内代谢破坏后，动物逐渐清醒，不留后遗症。

用品：注射器、乙醚、戊巴比妥钠、硫喷妥钠、氨基甲酸乙酯、

内容：实验动物的麻醉是一项复杂系统的工作。正确的麻醉处理，是动物实验成功的有力保障。而麻醉处理不当，会给实验结果带来难以分析的误差。要想获得良好的麻醉效果，除掌握实验动物麻醉的基本知识和技术、遵循科学的麻醉程序外，还应了解影响实验动物麻醉的各种因素，如动物因素、环境因素等。

1、动物因素

1、年龄和体重

动物对药物的反应随年龄的不同而有差异。有人将大鼠、小鼠按年龄分成幼年、成年和老年3组，观察年龄对乙醇、戊烷和二氯乙烷等急性毒性的影响。按LD50及麻醉浓度观察，敏感性显示为幼年>成年>老年。

体重小的动物每单位体重的基础代谢率较大动物高，因此，动物越小，每单位体重所需的麻醉药剂量越大。一些慢性实验，观察时间较长，可选择年幼、体重较小的动物做实验。

2、性别 实验证明，不同性别的动物对同一药物的敏感性不同，对各种刺激的反应也不尽一致，雌性动物性周期不同阶段和怀孕、授乳时的机体反应性有较大的改变，因此，一般情况优先选雄性动物或雌雄各半做实验。

3、生理和健康状况 体瘦、肌肉发达的动物较脂肪多的动物所需麻醉药量大，这是因为相对非代谢组织，其基础代谢率较低。活动可增加代谢率，因此，好动的动物所需的麻醉量大。身体状况差的动物，所需麻醉药量小耐受性降低。易发生中毒现象。

4、动物饲养

保证足够的营养供应是维持动物健康的重要因素，其中饲料对动物的关系更为密切。动物的生长、发育、繁殖、抵御疾病的能力及一切生命活动都依赖于营养丰富的饲料。动物在麻醉之前一周应提前到位，给于精心的饲养管理，使其处于良好的健康状态。

2、环境因素

1、温度

在一定范围内，温度缓慢的变化，机体可以进行自动调节与之相适应。但变化莫测过大或过急，对机体将产生行为和生理等不良影响。因此，实验环境温度过高或过低都能导致机体抵抗力下降，对麻醉药物的敏感性升高，易发生中毒现象。因此影响麻醉效果。

2、湿度;

3、空气的流速和清洁度 方法：

1. 吸入麻醉法 麻醉药以蒸气或气体状态经呼吸道吸入而产生麻醉者，称吸入麻醉，常用乙醚作麻醉药。吸入法对多数动物有良好的麻醉效果，其优点是易于调节麻醉的深度和较快的终止麻醉，缺点是中、小型动物较适用，对大型动物如狗的吸入麻醉操作复杂，通常不用。

具体方法是：使用乙醚麻醉兔及大小鼠时，可将动物放入玻璃麻醉箱内，把装有浸润乙醚棉球的小烧杯放入麻醉箱，然后观察动物。开始动物自主活动，不久动物出现异常兴奋，不停地挣扎，随后排出大小便。渐渐地动物由兴奋转为抑制，倒下不动，呼吸变慢。如动物四肢紧张度明显减低，角膜反射迟钝，皮肤痛觉消失，则表示动物已进入麻醉，可行手术和操作。在实验过程中应随时观察动物的变化，必要时把乙醚烧杯放在动物鼻部，以维持麻醉的时间与深度。 2. 注射麻醉法 常用的麻醉药有戊巴比妥钠、硫喷妥钠、氨基甲酸乙酯等。 大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法进行全身麻醉。狗、兔等动物既可腹腔注射给药，也可静脉注射给药。在麻醉兴奋期出现时，动物挣扎不安，为防止注射针滑脱，常用吸入麻醉法进行诱导，待动物安静后再行腹腔或静脉穿刺给药麻醉。 在注射麻醉药物时，先用麻醉药总量的三分之二，密切观察动物生命体征的变化，如已达到所需麻醉的程度，余下的麻醉药则不用，避免麻醉过深抑制延脑呼吸中枢导致动物死亡。 注意事项

1、麻醉剂的用量，除参照一般标准外，还应考虑个体对药物的耐受性不同，而且体重与所需剂量的关系也并不是绝对成正比的。一般说，衰弱和过胖的动物，其单位体重所需剂量较小，在使用麻醉剂过程中，随时检查动物的反应情况，尤其是采用静脉注射，绝不可将按体重计算出的用量匆忙进行注射。

2、动物在麻醉期体温容易下降，要采取保温措施。

3、静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，应立即停止注射。配制的药液浓度要适中不可过高，以免麻醉过急;但也不能过低，以减少注入溶液的体积。

4、作慢性实验时，在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平。 思考题

小结在操作过程中，哪些因素可能影响实验动物麻醉效果?

常用的麻醉剂

动物实验中常用的麻醉剂分为三类，即挥发性麻醉剂、非挥发性麻醉剂和中药麻醉剂。1.挥发性麻醉剂 这类麻药包括乙醚、氯仿等。乙醚是常用的吸入麻醉剂，乙醚挥发性很强，有特殊的气味，为易燃品，适用于各种动物(鸡除外)，乙醚的作用是抑制中枢神经系统。其特点是安全范围大，肌肉能完全松弛，对肝和肾的毒性较小，麻醉的诱导期和苏醒较短，动物麻醉深度容易掌握，而且麻醉后苏醒较快。其副作用是对呼吸道和结膜刺激性强，胃肠道反应增高，局部刺激作用大，可引起上呼吸道黏膜液体分泌增多，易发生呼吸道阻塞，使用时应小心。2.非挥发性麻醉剂 这类麻醉剂种类较多，包括苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物，氨基酸乙脂和水合氯醛。这些麻醉剂使用方便，一次给药可维持较长的麻醉时间，麻醉过程较平稳，动物无明显挣扎现象。但缺点是苏醒较慢。 (1)戊巴比妥钠：为中效巴比妥类药物。戊巴比妥钠，是常用的麻醉剂，有兽用、人兽共用的产品，使用时应注意药品质量。 (2)硫喷妥钠：硫喷妥钠为超速效巴比妥类药物，为淡黄色粉末，有硫臭，易吸水，装在安瓶中保存。其水溶液不稳定，故必须临时配制，常配浓度为1%~5%，在0～4℃冰箱中保存，置7天之内，其分解甚微;在室温中则只能保存24h。如见溶液色呈深黄、混浊，即表示已分解，不能使用。该药麻醉诱导和苏醒时间短，一次用药仅可维持数分钟。因此，一般用作为诱导麻醉或基础麻醉。其副作用：对呼吸系统有明显的抑制作用，不宜与吗啡合用。 (3)氯胺酮：为中效巴比妥药物，常用其盐酸盐。静脉或肌肉给药后，很快起到麻醉作用，但维持时间较短，一般仅10～20min。为了延长时间，可重复给药。其副作用是心率加快，血压升高，有时还可引起动物呕吐等。 (4)水合氯 11 醛：此药为无色透明棱状结晶，有穿透性的臭气及腐蚀性苦味。其溶解度较小，常配浓度为5%～10%。配制后的溶液易沉淀，用时先在水浴锅中适量加热，促其融解。作用特点与巴比妥类药物相似，似一种安全有效的镇静催眠药，能起到全身麻醉作用，其麻醉量与中毒量很接近，故安全范围小，使用时应注意。其副作用为对皮肤和粘膜有较强的刺激作用。 (5)氨基甲酸乙酯(乌拉坦)：此药是比较温和的麻醉药，安全度大。多数实验动物都可使用，更使用于小动物。一般用作基础麻醉，如实验全部过程都用此药麻醉时，动物保温尤为重要。使用时常配成20%～25%水溶液，犬、猫、兔直肠灌注1.5g/kg体重;皮下、静脉、腹腔注射0.75～1g/kg体重。当与水合氯醛按1：1比例合并麻醉时，效果更好。但在作静脉注射时必须溶在生理盐水中，配成5%或10%的溶液，即每千克体重注射10～20ml。蛙类：2g/kg体重，由背部淋巴囊注射。鸟类：1.25g/kg体重，由肌肉注入。鼠：1.5～2g/kg体重，由腹腔注射。 (6)异戊巴比妥钠：常配成5%～10%的水溶液，作用和戊巴比妥钠相似。使用剂量和方法：犬、猫、兔腹腔和肌肉注射80～100mg/kg体重;静脉注射40～50mg/kg体重;直肠灌注100mg/kg体重。鼠：腹腔注射100mg/kg体重。3.中药麻醉剂 动物实验时有时也用到象洋金花和氢溴酸东莨菪菅碱等中药麻醉剂，但由于其作用不够稳定，而且常需加佐剂麻醉效果才能理想，故在使用过程中不能得及普及，因而，多数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。

2、豚鼠的局部麻醉 目的

1、了解并熟悉豚鼠的局部麻醉方法

2、掌握局部浸润麻醉方法。 用品

刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、普鲁卡因、利多卡因。 原理

用局部麻醉药阻滞周围神经末梢或神经干、神经节、神经丛的冲动传导，产生局部性的麻醉区，称为局部麻醉。其特点是动物保持清醒，对重要器官功能干扰轻微，麻醉并发症少，是一种比较安全的麻醉方法。适用于大中型动物各种短时间内的实验。豚鼠对麻醉药物很敏感。 内容

1. 表面麻醉 利用局部麻醉药的组织穿透作用，透过粘膜，阻滞表面的神经末梢，称表面麻醉。在口腔及鼻腔粘膜、眼结膜、尿道等部位手术时，常把麻醉药涂敷、滴入、喷于表面上，或尿道灌注给药，使之麻醉。

2. 局部浸润麻醉：沿手术切口逐层注射麻醉药，靠药液的张力弥散，浸入组织,麻醉感觉神经末梢，称局部浸润麻醉。常用药为普鲁卡因。在施行局部浸

12 润麻醉时，先固定好动物，用0.5～1%盐酸普鲁卡因皮内注射，使局部皮肤表面呈现一桔皮样隆起，称皮丘，然后从皮丘进针，向皮下分层注射，在扩大浸润范围时，针尖应从已浸润过的部位刺入，直至要求麻醉区域的皮肤都浸润为止。每次注射时，必须先抽注射器，以免将麻醉药注入血管内引起中毒反应。 3. 区域阻滞麻醉：在手术区四周和底部注射麻醉药阻断疼痛的向心传导,称区域阻断麻醉。常用药为普鲁卡因。

4. 神经干(丛)阻滞麻醉：在神经干(丛)的周围注射麻醉药，阻滞其传导,使其所支配的区域无疼痛，称神经干(丛)阻滞麻醉。常用药为利多卡因。

3、损毁小白鼠小脑的效应 目的：

1、掌握小白鼠的麻醉方法;

2、了解小脑的机能。 基本原理

小脑具有维持身体平衡，调节肌紧张和协调肌肉运动等机能。当小脑损伤后，随着破坏程度的不同，可表现出不同程度的肌紧张失调及平衡失调。 动物与器材

小白鼠、常用手术器械、大头针、麻醉口罩、乙醚、棉花。 方法与步骤

1.用乙醚麻醉小鼠(注意仔细观察呼吸，若呼吸变慢时则表示动物已麻醉)。 2.自头顶部至耳后沿正中线剪开皮肤，将颈肌向下剥离。透过透明的颅骨即可看清小脑的位置(图9-6)用大头针刺穿颅骨，直达小脑(2—3mm)，搅毁该侧小脑(注意不可深刺，以免损伤脑干)。

3.待小鼠清醒后，可见其向一侧旋转或翻滚。如损伤较轻，小鼠向健侧旋转;当损伤重时，则向损伤侧翻滚。

4.将实验用完的小鼠拉断颈椎处死后弃之。 思考题

根据实验结果说明小脑的生理机能。

实验

五、家兔的热原实验

目的

1、练习家兔的各种注射方法;

2、了解家兔热源反应的基本原理。 原理

家兔体温变化十分灵敏，最易产生发热反应，发热反应典型、恒定，因此常选用家兔进行这方面的研究。 方法与步骤

1、用体温计测量实验前家兔的正常体温。

2、 采用以下方法进行热源实验：给家兔静脉注射伤寒一副伤寒四联菌苗0.5～2.0ml/kg，菌苗含量应不低于100亿/ml;皮下注射2%二硝基酚溶液(30毫克)15～20分钟后开始发热;肌注10%蛋白胨1.0g/Kg;皮下注射消毒脱脂牛奶3～5ml。

3、一至两小时后，用体温计再次测量家兔的体温，看其有何变化。

13 思考题

在热源实验操作过程中，你认为应注意哪些方面?

实验

六、动物体内常见寄生虫卵检查

目的

1、学习常见实验动物虫卵标本的采集和检查方法。

2、学会对不同虫卵进行鉴定。 用品

大鼠、小鼠、猕猴的粪便、示范片、盖玻片、载玻片、目镜测微尺、物镜测微尺 方法

1、直接涂片法

包括粪便、血液、肠内容物等直接涂片检查。取一载玻片,在其上加一滴生理盐水,取少许粪便或肠内容物与生理盐水混匀后于显微镜下观察。血液可直接滴于载玻片上，制成涂片，加盖玻片观察。

2、虫卵收集法

a.沉淀集卵法:取粪便加适量清水,混匀后过滤,重复数次至液体清亮为止,静止沉淀十分钟后,取底部沉淀物作镜检。此法适于检查血吸虫卵。

b.饱和盐水漂浮法:利用虫卵的比重小于饱和盐水的原理,使线虫卵和几种绦虫卵或包囊漂浮于液面上,提高检查效果。 实验步骤和内容：

1、自然感染蠕虫的调查

取猕猴粪便在盛有生理盐水的培养皿中漂洗,直接查找寄生虫虫体和虫卵,根据虫体和虫卵的形态,签别虫种。

2、直接涂片法或沉淀集卵法检查寄生虫卵。

3、观察蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵标本装片。

注意:观察各种虫卵的大小、形状、颜色、卵膜结构等以及各种虫卵的特征

A、蛔虫卵 (线虫纲一虫体线形或长圆柱形,雌雄异体) 受精卵为椭圆形,大小约40-60微米(35-50×45-76),卵壳的表面有一层凸凹不平的蛋白质膜,被胆汁染成棕黄色,整个虫卵呈棕黄色。卵壳厚而透明。卵内有一近圆形的卵细胞。

未受精卵多为长椭圆形,大小约40一60微米(39-40×88-94),卵壳与蛋白质膜较薄,卵内充满大小不等的屈光颗粒。

无论受精卵和未受精卵其蛋白质膜有时缺失,无蛋白质膜的受精卵是无色透明,请注意与其它虫卵的区别。

B、蛲虫(线虫纲：虫体细小,乳白色,似一白色线头。) 虫卵为椭圆形,两侧不对称,一侧扁平,一侧稍凸。大小约25-55微米(20-30×50-60),卵壳较厚,无色透明,内含幼虫。

C、绦虫(绦虫纲：腹背扁平、带状、分节,雌雄同体,常见的有链状带绦虫。) 虫卵近球形,较小,大小约45-70微米,虫卵自孕节排出时卵壳己脱落,镜下所见是具胚膜的六钩蚴,胚膜较厚,棕黄色有放射状的条纹。

D、血吸虫(吸虫纲一多有腹背扁平,舌状或叶状,有吸盘,雌雄异体,常见的有日本血吸虫等。) 虫卵为椭圆形,淡黄色。大小约74-106×55-80微米,卵壳较薄无盖,壳

14 的一侧有小棘,一般在镜下不易见到。成熟的卵内含有一个毛蚴。 注意事项

1.高倍镜下观察必须加盖玻片;

2.采用直接涂片法时，不要涂得太多，必须分散开，均匀; 3.观察寄生虫卵前，需在高倍镜下校对目镜每格的长度，才能算出虫卵大小; 4.先在低倍镜下观察，发现后换为高倍镜。 实验报告内容

1、绘出镜下观察到的蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵。

2、概括总结蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵的形态区别要点。

3、在整过操作过程中的注意事项。

实验

七、雌性小鼠动情周期的检查

目的

1、学习小鼠阴道内液体的采集方法;

2、了解在动情周期的不同阶段，小鼠阴道涂片的组织学变化。 原理

哺乳类的雌性动物在性成熟后，出现动情周期变化，其中啮齿类动物在动情周期不同阶段，阴道粘膜发生比较典型的变化。因此，根椐阴道涂片的细胞学改变，可以推断卵巢功能的周期性变化。

未成熟的大、小白鼠尚无自然的动情周期，但当注射绒毛膜促性腺激素后，则可使其提前出现。 用品

显微镜、棉签、载玻片、生理盐水、碱性美蓝溶液(配制：美蓝0.3g，溶于95%的乙醇30ml中，再加蒸馏水至100ml及10%NaOH溶液0.1ml)等。 动物

性成熟的雌性小白鼠。 方法与步骤

1、小鼠阴道内液体取法

取阴道内液体有下列三种方法：

(1)冲洗法 将装有消毒生理盐水的滴管轻轻插入动物阴道内，按压滴管橡皮头，将生理盐水打入阴道，然后吸出，如此2-3次。最后将滴管中的阴道冲洗液滴在载玻片上。

(2)沾取法 将消毒的细棉签用生理盐水润湿，轻轻插入动物阴道内0.5cm，慢慢转动一下取出。

(3)刮取法 用光滑的玻璃小勺或牛角制 小刮片慢慢插入阴道内，在阴道壁轻轻刮取一点阴道内含物。

2、涂片

将带有阴道内含物的细棉签等在载玻片上均匀的转动做成涂片，然后将涂片在空气中自然干燥。

3、染色

用碱性美蓝溶液染色5min左右，用蒸馏水冲洗剩余的美蓝溶液(注意：应从涂片边缘慢慢冲洗，切不要把细胞冲洗掉)，并使之干燥。

4、观察结果

在显微镜下观察阴道分泌物涂片的组织学变化，确定动情周期变化的不同阶

15 段。

阶段

表 小白鼠性周期阴道分泌物涂片变化 持续时卵巢变化 涂片可见 间/h 卵泡加速大量有核上皮细胞，少量角化

生长 细胞

卵泡成熟、满视野角化上皮细胞，少量有

排卵 核上皮细胞

黄体生成 角化上皮细胞及白细胞 动情前期

动情期

动情后期

动情 黄体退化 大量白细胞及少量黏液 间期

注意事项：

1.采取阴道(下口)内分泌物，不是肠道内容物(上口); 2.制作涂片要均匀;

3.自然干燥后，再染色8-10min;

4.用蒸馏水冲洗剩余的美蓝溶液时，应从涂片边缘慢慢冲洗; 5.在镜下镜检(如用高倍镜，必须加盖玻片)。

实验

八、小鼠下颌骨形态分析

目的与原理

小鼠的下颌骨形态有高度的遗传稳定性，不同品种或品系小鼠下颌骨的形态、大小不同，因此该项技术可以作为纯系小鼠、纯系大鼠遗传质量的检测方法之一。下颌骨形态分析是一种定量技术。可阐明许多遗传学差异。主要是对小鼠或大鼠右侧下颌骨形态做对比分析，通过多变量分析，建立判别函数进行性别判别。

常规标本制备方法

1.随机抽取小鼠数只(60日龄，体重相当)处死，取下头颅。

2.投入沸水中煮约10分钟，冷却后把头颅上的组织仔细剔除，放在含有木瓜蛋白酶的自来水中(下颌骨带的残肉与酶的比例为1:25)，水的PH为4.5，消化温度为40—60℃，最适温度为52 ℃，保温过夜，取出下颌骨，用小镊子去掉残肉和门齿，再用水洗净。

3.自然干燥，存放于塑料袋中。

4.制作坐标底片，用于测量下颌骨有关变量。

5.在坐标底片上用两个平直的玻璃细条粘成直角，成L型，与坐标的纵轴和横轴相吻合，压平待用。 动物

小白鼠 方法与步骤

1.下颌骨的11个测量点参见下图。

2.将待测标本平放在解剖镜载物台的标尺上，下颌骨前端和下部边缘与标尺上的L型玻璃条的X及Y轴分别贴紧放平，将每个标本11个变量的结果记录下来，交给老师，统一处理。

3、打开SPSS，输入数据;定义变量;

4、操作步骤：Analyze→Classify →Discriminant →open discriminant analyze;Gender →grouping variables(define range);all variables →independent; Method →enter independent together;open statistics →function coefficients →Fisher’s,unstandardized →continue;open classify →display→summary table,casewise results;prior probabilities →All groups equal → continue →OK。 结果分析：求出判别系数和判别函数;

2、得到判别代结果和判别率;

3、验证回代和新标本判别。 注意事项

1、标本要保证完整性;

2、小白鼠雌雄的体重要分别相近;

3、突变性的标本要舍去;

4、测量要注意准确;

5、每组标本的性别，不要混淆。

实验

九、家兔的神经分离、气管插管

目的

1、学习气管插管术;

2、学习分离及识别有关的血管和神经;

3、学习测定家兔呼吸运动的方法。 用品

常用手术器械、气体插管、玻璃分针、刺激器、张力换能器、铁夹台、25%氨基甲酸乙酯、3%乳酸。 动物

家兔 方法与步骤

1、麻醉并固定动物

每组取家兔一只,称重,按40mg/kg体重的剂量由耳缘静脉缓慢注射戊巴比妥钠溶液，将动物麻醉。当动物四肢松软,呼吸变深变慢,角膜反射迟钝时,表明动物己被麻醉，即可停止注射。将麻醉动物仰卧于兔体手术台上,固定好头部和四肢，将兔舌拉出以免阻塞呼吸道。注意：缓慢注射;兔舌拉出;颈部必须放正拉直。

2、颈部手术

用剪毛剪剪去颈部被毛,用手术刀切开颈部皮肤(5-7cm)长,分离皮下结缔组织和肌肉,暴露气管,分离气管和食管,在气管下穿一棉线备用。

3、颈部神经及血管分离术

3.1 颈总动脉的分离 在颈部,神经与颈总动脉被结缔组织膜束在一起,形成血管神经束,位于气管的外侧,其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌所覆盖。用玻璃分针将气管两侧上述肌肉分离后,用左手拇指和食指轻轻捏住分离的左侧肌肉和皮肤,稍向外翻,即可将血管神经束翻于食指之上。然后用玻璃分针分离颈总动脉外的结缔组织膜,将动脉分离约4cm长,并向头端追索到甲状软骨上缘,暴露颈动脉窦,在颈动脉下穿一棉线。用同样的方法可分离右侧颈总动脉。 3.2 颈部神

17 经的分离 轻轻提起左侧颈总动脉下的线,即可清楚看到三条粗细不同的神经。其中迷走神经最粗,呈白色，一般位于外侧,易于识别;交感神经较细,略呈灰色，一般位于内侧;减压神经最细，呈白色,一般位于迷走神经和交感神经之间。

由于家兔品种不同及个体间的差异,三条神经的位置有较大的变异,应注意识别。识别准确后,用玻璃分针顺着神经的方向,小心分离其外的结缔组织膜,-般先分离减压神经,然后再分离交感神经和迷走神经,并分别在各神经下穿不同颜色的线(双线)备用。

4、气管切开术

在喉头下2-3cm处的气管上作一“T”型切口,将与气管口径相近的气管插管向心方向插入气管中，用线结扎,并将余线固定于气管插管的分叉处,以防气管插管脱落。

5、腹部手术

剪去剑突部位腹部被毛,切开胸骨下端剑突部位的皮肤,并沿腹白线再切开长约2cm的切口。细心分离剑突软骨并结扎,线的另一端连于张力换能器上,张力换能器连接于计算机BL-410的 1 通道上。

6、开机→BL-410生物机能实验系统→实验项目→呼吸实验→呼吸运动调节 这时可看到在屏幕上显示4个波形窗口,鼠标左双击1通道窗口,即只显示出1通道波形窗口,在屏幕右下角选实验标记。鼠标点开始即可描记呼吸运动曲线。

7、观察项目

7.1 慢速记录正常的呼吸运动曲线,注意分清吸气与呼气时的曲线方向; 7.2 增加无效腔对呼吸运动的影响 将橡皮管(长约lm,内径0.7cm)连于气管插管的一个侧管上,用止血钳夹闭另一侧管,使无效腔增加,观察并记录呼吸运动的变化。当呼吸运动出现明显改变后立即去掉橡皮管使呼吸运动恢复正常;

7.3 窒息对呼吸运动的影响 将气管插管的两个侧管同时夹闭,观察并记录呼吸运动的变化;

7.4 血中酸性物质增多的效应 取5ml注射器,由耳缘静脉较快地注入3%乳酸溶液2m1,观察呼吸运动的变化;

7.5 分别刺激迷走神经中枢端和外周端,观察并记录呼吸运动。 注意事项

1、实验过程中，要防止动脉套管刺破颈总动脉和发生凝血现象;

2、剪去一段剑突软骨时，不能剪得过深，以免伤及其下附着的膈肌，并要保证剑突软骨与胸骨完全分离;

3、在分离神经及穿线时,切勿损伤与其伴行的神经;

4、在颈总动脉近甲状腺处有甲状腺前动脉,分离时应稍靠下方,以免损伤;

5、注射要缓慢，兔舌要拉出，颈部必须放正拉直。

实验

十、实验动物环境因子检测

目的

1、正确使用环境因子检测仪器;

2、了解噪音计、光度计、温度计、湿度计的测定原理;

3、学习测定方法。 内容

测定各种实验动物环境的照度、噪音、温度和湿度。

18

实验十

一、 小白鼠走迷宫

目的

1.通过观察、分析小白鼠学习和记忆过程，理解大脑在动物行为机制建立中的作用。

2.通过实验，了解影响动物学习和记忆能力的因素。

3. 通过实验，了解数据统计分析在科学研究中的重要作用。 实验原理

老鼠接近人类，通过老鼠的实验可以间接地了解人脑的功能。 学习和记忆是神经系统高级中枢的重要机能之一。学习是神经系统不断接受环境刺激而获得的行为习惯或经验;获得的行为习惯或经验维持一定时间的能力就是记忆。动物的学习和记忆能力对其生存具有重要意义。

在人为设置的迷宫里，动物通过不断感受复杂通道的结构，调整和改进自己的行为。随着训练次数的增加，条件反射逐渐建立，以至在大脑皮层形成记忆。通过记录动物搜寻食物的时间长短可以对此加以评价。同时也可以考察一些刺激(如饥饿和化学药剂)对记忆力的影响。

实验材料

小白鼠。 用品

由学生根据实验需要自行准备。 实验步骤

(一)实验准备

1.用硬纸板或木板构建迷宫。高度以小白鼠不能爬上为宜，上面也可以盖上一玻璃板。

1、 选择健康活泼的小白鼠5只，要求年龄和体重一致，实验前饥饿一天，但提供水。另选择一只未经饥饿处理的小白鼠备用。在迷宫内特定位置放置一块面包。

(二)实验项目

1.饥饿处理的小白鼠1只，放置在迷宫入口，记录其找到食物所需时间。5分钟后，重复上述步骤，同样的间隔时间对其进行四次实验，每只小白鼠共计进

19 行5次实验。

2.对其余四只饥饿处理的小白鼠进行5次实验，记录每只小白鼠找到食物所需时间。

3.数据处理 根据实验数据，求出5只小白鼠每次实验找到食物所需时间的平均值。以实验次数为横坐标，找到食物的时间为纵坐标，建立直角坐标系，制作标准曲线。把上述平均值标在坐标纸上并连接各点，从而得到实验数据与寻找时间的关系曲线。观察图形的变化趋势。

4.取未经饥饿处理的小白鼠进行步骤1，把记录的时间与标准曲线进行对比，分析小白鼠记忆力的变化。

5.取1只饥饿处理的小白鼠称重，皮下注射120mg/kgNaNO2，然后让其走迷宫，重复步骤1，将所记录的时间与标准曲线对比，分析小白鼠记忆力的变化。

6.另取1只饥饿处理的小白鼠称重，测试前半小时将小白鼠灌服20%-40%酒精100ml/kg。将所记录的时间与标准曲线进行对比，分析小白鼠记忆力的变化。

7.再取1只饥饿处理的小白鼠静脉注射乙酰胆碱，重复步骤1，将所记录的时间与标准曲线对比，分析小白鼠记忆力的变化

实验改进点

1、 实验用年老的小鼠与小白鼠进行对比考察年龄对学习和记忆力的影响。

2、 实验考察乙酰胆碱和NaNO2对小白鼠学习和记忆力的影响。

3、

实验注意事项

1、选材为活泼健康的小白鼠，不能选运动机能和记忆力差的小白鼠。

2、为了避免嗅觉对测试的影响，做每一个实验项目前都应对迷宫进行清洁。 实验分工

和 负责找资料， 负责整理和制作，实验改进点由这几人讨论。

实验预期结果

1、随着小白鼠学习和记忆过程的进行，小白鼠找到食物的时间会越来越短。

2、未经饥饿处理的小白鼠由于没有饥饿的刺激，找到食物的时间会更长。

3、由于NaNO2是缺氧剂，会造成脑部缺氧，从而破坏记忆的保持，因此小白鼠找到食物的时间会变长。

4、测试前半小时将小白鼠灌服20%-40%酒精可以明显干扰记忆的再现，因此小白鼠找到食物的时间会变长。

5、小白鼠脑部乙酰胆碱的增加会增强记忆力，因此小白鼠找到食物的时间会变短。 思考

1.小白鼠的年龄对学习和记忆有没有影响? 2.人的大脑也和小白鼠有类似的结果吗? 3.乙酰胆碱在该实验中的作用机理是什么?

实验参考资料

《实验动物和动物实验技术》苗明三主编中国医药出版社 .北京.1997.6

20 《动物生物学实验技术》黄诗笺主编高等教育出版社 施普林出版社2001.8：109，131，132 《实验动物学》罗满林、顾为望主编中国农业出版社 2002.8P127-143.

实验十二 消化系统疾病动物模型建立及验证(设计)

(一)病毒性肝炎模型

常用方法是注射乙型肝炎病人血清复制乙型肝炎模型。但大部分实验动物对甲型肝炎病毒不易感。我国已有报导红面猕猴、恒河猴、人及野生树鼩种毒后出现人甲型肝炎现象。近年来发现某些鸭肝炎病毒的特征与人肝炎病毒十分相似，故用鸭作为人肝炎模型也开始增多。

(二)免疫性肝炎模型

慢性或迁延性肝炎患者体内存在着抗肝细胞成分抗体。1959年国外有人用肝组织悬液加弗氏佐剂免疫豚鼠，成功地诱发了肝细胞变性及坏死病变。也有人报导肝膜蛋白(LSP)加佐剂分次注射产生动物免疫性肝炎模型。

(三)胃、肠道溃疡模型

在动物身上复制胃、肠道溃疡的方法较多，但所用的方法不同，引起的溃疡病变也各有特点。常用的方法有：

1.应激法 以各种强烈的伤害性刺激(如强迫制动、饥饿、寒冷等)，引起动物发生应激性溃疡。如把动物浸入冷水中或放在应激箱中不断地遭受电刺激，使之剧烈不安，一昼夜即能引起胃粘膜出血及溃疡。这种方法简单，成功率达99%以上。

2.药物法 给动物投服或注射一定量的组织胺、胃泌素、肾上腺类固醇、水杨酸盐、血清素、利血平、保泰松等可造成动物胃肠溃疡。如给豚鼠小剂量的组织胺，连续数天，可引起胃、十二指肠、食道等发生溃疡。又如可用利血平、血清紧张素、阿斯匹林等诱发大白鼠或小白鼠的胃溃疡。

3.烧灼法 用电极烧灼胃底部的胃壁，可造成象人的胃溃疡病变;用浓醋酸给大鼠胃壁内注射或涂抹于胃壁浆膜面上可造成慢性溃疡。烧灼法复制胃、肠道溃疡模型的优点是方法简便，溃疡部位可由作者自己选择。

4.结扎幽门法 选用大鼠、小鼠或豚鼠，麻醉后，无菌技术下在剑突下由腹正中切开腹壁皮肤及肌层，切口长约3cm，暴露胃，沿胃向右，辩清幽门和十二指肠的联结处，避开血管，于其下穿线，将幽门完全结扎。术后绝对禁食禁水。幽门结扎后，可刺激胃液分泌并使高酸度胃液在胃中潴留，造成胃溃疡。这类溃疡复制方法简单，发生快，成功率高，但病变较表浅，严格地说仍然属于胃粘膜急性出血性糜烂，与人类胃溃疡的典型病变差距较大，适于作探索抗溃疡病药物研究和胃溃疡发病学方面的研究。

其他还可用外科手术方法从肠道上部排除可中和胃酸的碱性胆汁、胰

21 液或十二指肠液造成溃疡。还可用刺激、损伤或毁损脑组织等方法造成溃疡。

(四)胰腺炎模型

复制胰腺炎模型可采用使胰液外分泌发生潴留;使各种胰酶在胰管系统内活化;感染或某些微生物毒素的作用，影响胰腺的营养、代谢等。实验动物选用狗、兔和大鼠。将狗自身胆注按0.5ml/kg体重缓慢注入狗胰腺体尾交界处的胰腺实质内，则可引起胰腺局部组织坏死及炎性浸润，与人类急性胰腺炎和病变相似。用大肠杆菌悬液9亿/ml，按1ml/kg体重，向兔胰管内逆进注射可诱发急性胰腺炎。另外也可采用大鼠腹腔内连续注射乙硫胺酸诱发成功胰腺炎模型。随着乙硫胺酸注射时间的延长，胰腺组织可以出现广泛进行性破坏和退化及胰酶水平的持续下降。

(五)糖尿病模型

糖尿病模型的复制方法采用注射致高血糖因子;手术切除胰腺的全部或大部;用四氧嘧啶(Alloxan)破坏胰岛β细胞，造成胰性糖尿病;注射根皮苷使肾小管对糖的再吸收发生障碍并破坏酯酶致使葡萄糖磷酸化过程和脱磷酸过程障碍，引起根皮苷糖皮。

四氧嘧啶复制的糖尿病动物模型是目前研究人类糖尿病较好的方法，其实验性糖尿病近似人类糖尿病，体内代谢障碍时有可能产生此种衍生物，胰岛外分泌部不受损伤，几乎所有常用实验动物都可用来进行实验研究。模型胰岛的β细胞不是功能消失，而是功能不同程度的降低，有利于研究胰岛组织再生和功能恢复，动物不必注射胰岛素即可存活很久。大鼠造型剂量为12mg/100g体重，家兔为150～200mg/kg体重，狗约为50～60mg/kg体重。家兔根皮苷皮糖尿病造型剂量为0.5%根皮苷按15m/kg体重，皮下注射。注意所用四氧嘧啶和根皮苷溶液必须现配现用。

实验十

三、骨质疏松动物模型建立和验证(设计)

22

第三篇：生物学虚拟仿真实验教学中心

华中农业大学是教育部直属、国家“211工程”建设的全国重点大学，在近120年的办学历史中，积淀了“勤读力耕、立己达人”的办学传统;形成了以农科为优势，以生命科学为特色，多学科协调发展的学科体系和用现代生物技术提升传统农科、培养高素质创新人才的办学特色。

华中农业大学生物学实验教学中心成立于2001年，2005年获批为湖北省高校首批实验教学示范中心，2007年获批为国家级示范中心。中心总面积4500平方米，设有植物学、微生物学、细胞与遗传学、生化与分子生物学、生物信息学、学生创新等8个功能分室;仪器设备台件数1929台，总价值达1530万元。每年承担全校15个生物类专业的相关实验，完成实验教学任务30万人学时。中心有教师96人，包括国家名师、长江学者、国家杰青等一批高层次人才，为开展高质量的实验教学提供了坚实的保障。

中心坚持“理论教学与实践教学并重、实验技能训练和科学思维训练并举”，根据生物学学科特点，由浅入深，构建了从群体到分子水平的“3+3+1”的实验教学体系。2009年以来，中心教师先后主持省级教改项目9项，建成国家精品及视频公开课7门，发表教改论文10余篇，获省级以上教学成果奖6项。

随着实验教学改革的不断深入，教学资源分散，综合设计性实验周期长、成本高，高精尖设备本科生无缘接触等实体实验教学的局限性日益凸显。如何应用信息技术集成优势、破解发展瓶颈，成为中心思考和实践的重要课题。

2014年，在教育部虚拟仿真实验教学中心建设思想的指导下，学校按照 “统一规划、分期实施;集成优势，共享资源”的建设思路，依托作物遗传改良国家重点实验室、农业微生物学国家重点实验室、微生物农药国家工程研究中心等国家和省部级研发平台，以生物学实验教学中心为主干，集中作物学、水产养殖、动物医学等3个国家级和6个省级实验教学中心的力量，建成校内8个与生命科学相关学院共享的生物学虚拟仿真实验教学中心。

虚拟仿真中心以“学科特色、产业实践、技术前沿、创新能力”为导向，建立了包含四大模块的虚拟仿真实验资源：

I 综合设计性虚拟实验项目模块

本模块以生物学所属12个二级学科为边界，针对生命科学技术呈现向多学科、多领域综合发展的特点，充分挖掘本校特色学科资源开发综合设计性虚拟项目，培养学生综合创新能力。目前已开发了果蝇综合实验、水稻遗传转化等经典或前沿综合设计性虚拟实验项目。其中，水稻遗传转化虚拟仿真实验项目依托“国家转基因重大专项”和我校全球领先的转基因水稻研发技术成果，让学生全面理解和掌握愈伤组织的诱导及继代、农杆菌侵染、共培养、抗性愈伤组织筛选、外源基因转化瞬时表达检测、转基因植株的分化及移栽、外源基因稳定表达检测等水稻遗传转化的全程技术，使学生尽早接触学科前沿。

II校内外实习实训虚拟仿真模块

本模块立足于为学生创造一个开展宏观生物学学习、实践和了解、掌握生物技术产业化应用的环境。校园及神农架国家生物学野外实习基地数字植物地图仿真项目，目前已涵盖校园内200余种植物的形态特性、生物学特性及分布地点。学生可通过植物在校园或实习点的位置查询掌握植物的分类及生物学特性。

藻类是目前生物工程中进行规模化培养以获得特定产物的一个典型代表类群，经济价值前景广阔。藻类规模化培养虚拟仿真实验项目，可让学生了解从藻类细胞制种、扩大培养、规模化培养、诱导、收获和提取加工等整个藻类细胞培养和利用的流程，使学生从宏观上了解生物技术从理论走向实践的全过程。

III 尖端仪器设备虚拟仿真模块

随着生命科学研究的不断深入，生物学研究手段也不断更新。本模块围绕本校用于生物学研究的尖端仪器设备，开发虚拟仿真实验项目，让学生掌握操作原理，熟练操作过程，接触前沿实验技术，为进入实验室预约使用设备、开展科研训练和后续深造打下基础。目前该模块已将学校蛋白质平台的流式细胞分选仪、分析超速离心机、蛋白质纯化仪开发成虚拟仿真项目，很好的满足了本科生对这类尖端设备的使用需求。

IV 生物学资源拓展模块

本模块主要是整合全校相关的生物学资源，为师生搭建共享学习平台。动植物数字切片平台，提供了动物、植物、微生物等形态切片300余份，可满足各专业学生对其形态、功能的学习需求。建设中的校园数字博物馆平台，将提供数万份珍贵动物、植物、土壤与地质矿藏数字标本资源。

虚拟仿真中心已建立了功能齐全的综合管理平台，不仅可以对实体实验中心资源进行系统管理，还可以对学生参与虚拟仿真实验项目进行测试考核，在线管理师生互动交流，从而建立起“虚-实-虚”有机结合的实验教学体系和考核体系。

中心的建设与改革为学校培养生物学创新人才提供了有力支撑，发挥了重要示范辐射作用。国家生物学理科基地曾两次被评为全国优秀，100余所高校来校交流。2009年以来，“三生”专业本科生在《核酸研究》等国际杂志发表论文50余篇，先后摘取IGEM、美国数学建模等多项赛事桂冠，每年出国和深造率超60%。

虚拟仿真中心将秉承我校生命科学的优势和特色，瞄准学科和产业发展前沿，不断推进资源整合、校企联合、开放融合，构建“经典与现代、虚拟与现实”相融通的实验教学体系，打造教研产协同的创新人才培养环境，努力实现人才培养的现代化与国际化。

第四篇：病原生物学实验I标准答案

(2006 ——2007 学年第 I 学期)

课程号：50128730课序号：0

适用专业年级： 04级医学、口腔8年制学生人数：115

一、名词解释(10分/个，共20分)

1、革兰染色：原理(细胞壁学说为重点)(3分)，步骤(4分)，结果(2分)，意义(1分)

2、培养基：由适合于细菌生长繁殖所需的多种营养物质配制而成的基质(4分)。合格的培养基，需要具有充足的营养，一定的酸碱度，且清亮无菌(6分)。

二、填空题(2分/个，共50分)

1、μm，油镜，1000倍。

2、大小，形态，排列，染色性。

3、均匀浑浊，絮状沉淀，菌膜生长(或腐败性恶臭)。

4、荚膜、鞭毛、芽孢。

5、电镜观察，鞭毛染色后光镜下观察，半固体接种(或悬滴观察活菌运动)。

6、色素。

7、阿伯特(Alert)染色法，异染颗粒。

8、判断细菌分解含硫氨基酸的能力，培养基中出现黑色的硫化铅或硫化亚铁沉淀。

9、抑菌圈的直径大小。

10、动物接种，鸡胚培养，组织细胞培养。

三、问答题(30分)

标本的选取(5分);

划线接种到血平板上，注意平板的选取(5分);

370C培养18~24小时后，观察菌落形态(描述金黄色葡萄球菌及乙型溶血性链球菌的菌落 形态)(5分);

挑取可疑菌落进行革兰染色(描述金黄色葡萄球菌及乙型溶血性链球菌的镜下形态)(5分); 血浆凝固酶实验(3分);

药物敏感实验(3分);

其他(如毒素检测、动物实验，生化反应等)(4分)。

第五篇：高中生物学实验的各种颜色反应总结

1斐林试剂检测可溶性还原糖

原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀

注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用，而且是现用现配，条件需要水浴加热。

应用：检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。

2苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪

原理：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色

注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察。

应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪。

3双缩脲试剂检测蛋白质

原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色

注意：双缩脲试剂在使用时，先加A液再加B液，反应条件为常温(不需要加热)。应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。

4碘液检测淀粉

原理：淀粉+碘液→蓝色

注意：这里的碘是单质碘，而不是离子碘。

应用：检测食品中营养成分是否含有淀粉

5DNA的染色与鉴定

染色原理：DNA+甲基绿→绿色

应用：可以显示DNA在细胞中的分布。

鉴定原理：DNA+二苯胺→蓝色

应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂。

6吡罗红使RNA呈现红色

原理：RNA+吡罗红→红色

应用：可以显示RNA在细胞中的分布。

注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂，而不是单独染色。

7台盼蓝使死细胞染成蓝色

原理：正常的活细胞，细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。应用：区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。

8线粒体的染色

原理：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿

色，而细胞质接近无色。

应用：可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。

9酒精的检测

原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。

应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。

10CO2的检测

原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。应用：根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短，可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。

11染色体(或染色质)的染色

原理：染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色。

应用：用高倍镜观察细胞的有丝分裂。

12吲哚酚试剂与维生素C溶液呈褪色反应

原理：吲哚酚即2，6-二氯酚靛酚钠，其水溶液为蓝紫色，维生素C具有还原性，能将其褪色。

应用：可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C。

13亚硝酸盐的检测出现玫瑰红

原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

应用：将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

14脲酶的检测

原理：细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，使PH升高，从而使酚红指示剂变红。

应用：在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂，培养某种细菌后，看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。

15伊红美蓝检测大肠杆菌

原理：在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的代谢产物(有机酸)与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色。

应用：用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量。

16刚果红检测纤维素分解菌

原理：刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素分解菌分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

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