液相色谱-电喷雾质谱法测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的参数优化

液相色谱-电喷雾质谱法测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的参数优化（精选5篇）

篇1：液相色谱-电喷雾质谱法测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的参数优化

液相色谱-电喷雾质谱法测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的参数优化

摘要：在液相色谱-电喷雾质谱法测定壬基酚聚氧乙烯醚的.过程中,对壬基酚聚氧乙烯醚加合离子的形成影响因素进行分析,优化了关键参数,建立了测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的高分辨高灵敏的液相色谱-电喷雾质谱方法.流动相A为0.1mmol・l~(-1)乙酸钠缓冲液,流动相B为甲醇,各聚合度壬基酚聚氧乙烯醚的加合离子响应值达到最大;锥孔电压没为60V能最大程度上避免[NPnEO+2Na]~(2+)对测定的干扰.NP1EO,NP2EO和NPnEOs(n=3-15)的仪器检出限分别为10pg,1pg和0.1pg.该方法成功用于污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的测定.Abstract：The analysis of nonylphenol ethoxylate by liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry (LC-ESI-MS) was investigated in terms of some parameters influencing the formation of different types of adducts. To compare the metal preference of NPnEOs during adduct formation, NaAc, NH_4Ac, and KAc were added to mobile phase, respectively, and the corresponding adducts were monitored. Results showed that the sodium adducts gave the most signals for both short-chain and long-chain oligomers at NaAc of 0.1 mmol ・l~(-1) used as the mobile phase buffer. At the cone voltage of 60V, [NPnEO +2Na]~(2+) were eliminated at the most limit to avoid interference during quantification. For NP1EO, NP2EO, NPnEOs (n = 3-15), IDLs were 10pg, 1pg, 0.1pg, respectively. Investigation of NPnEOs in wastewater and sludge samples taken from a WWTPs in Beijing was successfully performed by this method.作 者：连静    刘俊新    LIAN Jing    LIU Jun-xin  作者单位：中国科学院生态环境研究中心,北京,100085 期 刊：环境化学  ISTICPKU  Journal：ENVIRONMENTAL CHEMISTRY 年，卷(期)：, 28(6) 分类号：X13 关键词：壬基酚聚氧乙烯醚    缓冲液    加合离子    锥孔电压.   Keywords：nonylphenol ethoxylates    adduct formation    mobile phase buffer    cone voltage.   

篇2：液相色谱-电喷雾质谱法测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的参数优化

固相萃取-高效液相色谱法测定生活污水中壬基酚聚氧乙烯醚及其降解产物

比较了液-液萃取和固相萃取浓缩富集水体中壬基酚聚氧乙烯醚(NPnEO,n为聚合度)及其小分子代谢产物的效率,建立了复杂基体水样中壬基酚聚氧乙烯醚及其小分子代谢产物多成分同时测定的`高分辨高灵敏的固相萃取(SPE)-正相高效液相色谱(NP-HPLC)-荧光检测(FL)方法.优化了影响SPE回收率的条件,洗脱溶剂和样品过柱的速度.SPE对NPnEO的回收率大于82%;使用1L水样,方法的检测限对壬基酚(NP)、NP1EO为0.01μg/L,NP2EO、NP3EO为0.02μg/L,NP4EO～NP12EO为0.05μg/L.应用本方法测定了生活污水水样,检测到了NPnEO(n=1～12)及其小分子降解产物NP、NP1EO、NP2EO.

作 者：侯绍刚 胡智| 孙红文 黄国兰  作者单位：南开大学环境科学与工程学院,天津,300071 刊 名：中国环境监测  ISTIC PKU英文刊名：ENVIRONMENTAL MONITRING IN CHINA 年，卷(期)： 21(4) 分类号：X832 关键词：固相萃取   高效液相色谱   壬基酚聚氧乙烯醚   壬基酚  

篇3：液相色谱-电喷雾质谱法测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的参数优化

国内外天麻素血药浓度监测方法,各具特色:薄层色谱法相对价格低廉,但灵敏度有待进一步加强;同位素标记方法特异性强,但费用较高,且放射性同位素对人体有害,实验室和环境易被污染,放射性废物处理困难。因此,推广使用受到限制[9]。高效液相分析法灵敏度高、稳定性好,是近些年来被广泛应用的体内药物分析方法[10,11];液相-质谱联用分析法具有较之高效液相方法具有更高的灵敏度和专属性,样品用量少,分析速度快,分离和鉴定同时进行等优点。本实验应用液相色谱-电喷雾电离质谱,建立了微量大鼠血浆中天麻素定量检测方法,采用一步操作的液萃取方法,快速、灵敏,结果准确,重现性好,完全可以满足天麻素在大鼠体内药代动力学检测的要求。

1实验部分

1.1 仪器

岛津LCMS-2010A高效液相色谱-质谱联用仪。2台LC-10ADvp泵,DGU-14AM在线真空脱气机,SCL-10Avp系统控制器,SIL-10ADvp恒温自动进样器,CTO-10Avp柱温箱,电喷雾离子化接口的四极杆质谱检测器以及LCMS solution 2.04色谱工作站,Milli-Q Gradient A10超纯水器(Millipore Inc. USA)。

1.2 药品与试剂

天麻素:纯度: >99%,昆明贝克诺顿制药有限公司提供;内标:岩白菜素,江苏省药品检验所(批号: 1532-200202, 含量: 99.9%),结构式见图1。乙腈(色谱纯,Fisher Scientific (Toronto, Canada));超纯水由超纯水器制备;其余试剂均为市售分析纯。

(a) (分子量286.28)岩白菜素 (b) (内标, I.S., 分子量328.27)

1.3 大鼠血浆样品中天麻素LC-ESI-MS测定法的建立与考证

1.3.1 色谱条件

色谱柱为Luna C18柱(150×2.00 mm, 3.5 μm),柱温35℃。采用梯度洗脱方式:流动相A为0.05 μmol氯化铵,流动相B为乙腈;流速为0.2 mL/min。梯度洗脱程序如下:0～1.8 min流动相中乙腈比例从12%上升至45%,3 min升至75%维持2 min,5.1 min后降为12%并维持5 min。

1.3.2 质谱检测参数

LC-ESI-MS质谱离子化方式:电喷雾离子化(ESI);离子极性 Negative;选择性离子检测(SIM):天麻素[M+Cl]-:m/z = 321.00;岩白菜素(内标)[M+Cl]-:m/z = 363.05。雾化气流速:1.5 L/min;干燥气流速:2.0 L/min;曲型脱溶剂装置(CDL)温度:250℃;CDL电压:-5 V;加热块(Block)温度:200℃;检测电压:1.6 kv。

1.3.3 标准溶液的配制

天麻素标准溶液的配制:精密称取天麻素标准品10.0 mg,用超纯水溶解、定容至10.0 mL,配制成1.0 mg/mL贮备液,临用时用超纯水稀释到相应的浓度。内标液:精密称取岩白菜素0.5 mg,用超纯水溶解后,稀释至5 g/mL备用。

1.3.4 大鼠血浆生物样品的处理

取50 ml血浆, 加内标岩白菜素 20 ml(5 g/ml),混匀后, 加入正丁醇1.0 ml,涡旋振荡3 min,于23000rpm离心10 min,取上清0.8 ml,于SpeedVac真空浓缩装置中挥去有机溶剂,测定时用200 ml超纯水溶解残渣, 涡旋3 min,于4℃,23000 rpm离心10 min,吸取上清液10 μl进样。用样品与内标峰面积比进行定量分析。

1.3.5 大鼠血浆中标准曲线的制备

取洁净的Eppendorf管放入大鼠空白血浆,精密加入不同浓度的豆腐果苷标准品溶液,制备成含豆腐果苷标准品浓度分别为5、10、25、50、100、500、1000、1500 ng/ml,按“血浆样品处理方法”操作并测定。利用标准品峰面积与内标峰面积比R对标准品加入量(浓度C)作线性回归, 得相应的回归方程。

1.3.6 大鼠血浆中回收率的测定

配制含豆腐果苷浓度为5、100 、1000 ng/mL的血浆样品,加入内标,“血浆样品处理方法”项下操作。与相应浓度的纯品溶液,加入内标,对比。测定提取样品峰面积Ax 和纯品峰面积As ,按下式计算样品提取回收率:

R%=Ax/As×100%(n=5)

1.3.7 大鼠血浆样品精密度的测定

取大鼠空白血浆45 ml,加5 ml标准品使浓度分别为5、100 、1000 ng/mL,同“血浆样品处理”项处理,用样品/内标峰面积比Ri代入同一条工作曲线,计算相应的浓度,考察批内和连续5 d的批间变异情况。

1.3.8 稳定性考察

取洁净的试管,加入空白大鼠血浆,加标准品使浓度分别为5、100 、1000 ng/mL, 分别放置-80℃冰箱冷藏1月;-80℃和室温反复冻融三次;室温37℃摆放4 h;4℃进样盘摆放4 h,同“血浆样品处理”项处理,测定药物浓度。另将配置好的标准溶液放置1个月测定其受试物浓度。

1.3.9 超线稀释分析

超过标准曲线浓度的样品的检测方法的验证,是由1000 ng/mL的血浆样品(n=5),稀释100倍后带入标准曲线后,求得其浓度,并算其均值及RSD。

1.3.10 天麻素在大鼠体内药代动力学试验方案

取大鼠 6只,体质量180～220 g。雄雌各半。禁食但可自由饮水,10 h后,灌胃给予200 mg/kg天麻素,取血点为给药前及给药后 0.08、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12 和24 h从眼底静脉从取血,于肝素化试管中,4000rpm离心10 min,取血浆50 ml,80℃保存,1月内分析完毕。

2结果

2.1 方法特异性的考证

取大鼠空白血浆,按上述相应的方法进行处理,并与给药后生物样品以及标准品对照,所得的色谱图见图1～3。天麻素的保留时间约为2.7 min,内标保留时间约为4.9 min。由图可见,内源性物质不干扰天麻素色谱峰和内标峰。

(a)空白大鼠血浆,(b)加入150 ng/mL天麻素和内标200 ng/mL的大鼠血浆样本(c)灌胃给予天麻素200 mg/kg,4 h后的大鼠血浆样本;(1),(2)分别代表天麻素和内标

2.2 方法学

按上述1.3.4血浆提取方法提取样本,在5～1500 ng/mL浓度范围内,标准曲线y=0.0021x+0.0018(r2=0.9995,)。三个浓度的提取回收率均在90%以上,详见表1。长期冻存、冻融、室温、进样盘和溶剂稳定性均符合标准,详见表2.5、100、1000 ng/mL浓度对应的,批内变异RSD和批间变异RSD,均小于10%,结果见表3。超限稀释研究结果表明,1000 ng/mL血浆样品稀释后浓度为9.81±0.11 ng/mL(均值±SD),RSD为1.12%,说明,高浓度的血浆样品浓度可以由稀释的方式求得。

注:剩余百分比(%)= 测得浓度÷加入浓度×100%

2.3 药代动力学研究结果

本研究所建立的血浆样品检测方法已经成功应用于大鼠体内药代动力学的研究,最低检测限5 ng/ml可以保证精确检测到大鼠灌胃24 h的血药浓度情况。下图为大鼠灌胃天麻素200 mg/kg后24 h内的血药浓度时间曲线。

3讨论

用于天麻素血药浓度检测的方法很多,因方法学上的差异,各种检测方法在灵敏度、特异性、抗干扰性等方面各有特点。特别是高效液相方法做为其中,HPLC和色谱-质谱联用方法用于天麻素血药浓度检测的方法,具有更高灵敏度,不易受代谢产物的干扰。W.Zhang等在Phytomedicine杂志上报道,采用与本研究相同的LC-ESI-MS联用的方法,研究了天麻素及其苷元在大鼠体内的药代动力学行为,其中天麻素采用200 ml血浆提取,最低检测限为2 g/ml。

篇4：液相色谱-电喷雾质谱法测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的参数优化

关键词：莠去津；烟嘧磺隆；玉米；液相色谱质谱；残留分析

中图分类号： S481+.8；O657.7+2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）02-0253-02

收稿日期：2013-11-07

基金项目：北京市农林科学院创新建设项目（KJCX201103002）

作者简介：贾春虹（1962—），女，北京人，副研究员，主要从事植物化学保护研究。Tel：（010）51503438，E-mail：chjia55@163.com。玉米是世界上分布最广泛的粮食作物之一，种植面积仅次于小麦和水稻，中国年产量居世界第二位。随着种植技术水平的提高及农村劳动力的减少，杂草的防治主要采用化学除草的方法，莠去津和烟嘧磺隆是玉米田中常用的除草剂品种[1-3]。莠去津和烟嘧磺隆都是内吸选择性除草剂，莠去津以根吸收为主，烟嘧磺隆可被杂草茎叶和根部吸收，随后在植物体内传导，造成杂草生长停滞、茎叶褪绿、逐渐枯死。莠去津和烟嘧磺隆对玉米具有良好的选择性，二者混合使用可以扩大杀草谱，显著提高对杂草的控制效果，降低烟嘧磺隆的用量以及用药成本，延缓杂草的抗药性[3]。目前已有文献报道莠去津和烟嘧磺隆的残留分析方法，检测方法多采用气相色谱法[4-5]、液相色谱法等[6-7]，也有文献报道同时分析水体中这2种农药的方法[8]。传统的色谱法容易受到基质的干扰，为了去除干扰杂质，前处理方法多采用传统的液液萃取、固相萃取方法，这些前处理需要消耗大量的有机溶剂，费时费力。近年来，液相色谱质谱联用技术得到了快速的发展，利用液质联用仪器，可以提高分析方法的选择性和灵敏度，简化前处理步骤，提高实验室工作效率。本研究拟采用分散固相萃取净化，液相色谱离子阱质谱仪检测，分析玉米中莠去津和烟嘧磺隆的残留量。

1材料与方法

1.1主要仪器与试剂

1200 LC-MSD-Trap系统（美国安捷伦公司生产），包括1200高效液相色谱以及6310离子阱质谱仪；QL-901型漩涡混合器，海门市其林贝尔仪器制造有限公司生产；湘仪TD25-WS型离心机，湖南湘仪实验仪器开发有限公司生产；JFSD-100型粉碎机，上海嘉定粮油仪器公司生产。

莠去津和烟嘧磺隆，100 μg/mL乙腈标准品溶液购自Honeywell公司（色谱纯），C18吸附剂、无水硫酸镁均为分析纯（艾杰尔科技有限公司）。

1.2试验方法

1.2.1样品前处理取5 g样品，加入10 mL提取液乙腈，使用漩涡混合器提取3 min，4 000 r/min离心3 min，取1 mL提取液至小离心管，然后加入50 mg C18固体吸附剂和150 mg无水硫酸镁，12 000 r/min离心2 min后进仪器分析。

1.2.3仪器条件色谱柱：ZORBAX SB-C18，3.5 μm，150 mm×3.1 mm（内径）。流动相：乙腈 ∶水（0.1%甲酸）=6 ∶4；柱流速：0.3 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：5 μL。电离源模式：电喷雾离子化，电离源极性：正模式，雾化气：氮气，雾化气压力：276 kPa，毛细管电压：3 500 V，干燥气温度：350 ℃，干燥气流速：12 L/min；质谱模式为MS/MS，烟嘧磺隆的母离子为433，子离子为278，莠去津的母离子为216，子离子为174。在本色谱条件下烟嘧磺隆和莠去津的保留时间分别为3.4 min和7.6 min。

2结果与分析

2.1标准曲线

取100 μg/mL的标准品溶液，用乙腈逐级稀释，配制成质量浓度分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.0 μg/mL系列溶液，使用“1.2.3”节所列仪器条件进行分析检测，检测各个浓度的峰面积。以质量浓度（μg/mL）为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得到莠去津和烟嘧磺隆的线性回归方程分别为：y=141 113x+1 612.3，r2=0.997 8；y=124 124x+1 107.8，r2=0.998 4。

2.2方法的灵敏度

在本仪器条件下，莠去津和烟嘧磺隆的最小检出量分别为2.5×10-10 g和3.0×10-10 g，在玉米中烟嘧磺隆和莠去津的最小检出浓度为0.04 mg/kg。

2.3方法的准确度与精密度

用空白玉米样品进行了烟嘧磺隆和莠去津的添加回收率试验，每个添加浓度重复5次，按照上述样品前处理以及仪器分析方法计算回收率和相对标准偏差（RSD），结果见表1。代表性LC-MSD总离子流色谱图见图1至图3。结果表明：玉米中烟嘧磺隆的添加回收率在75.2%～95.1%之间，莠去津的添加回收率在82.0%～108.3%之间，RSD在4.9%～81%之间。

3讨论

莠去津可以采用气相色谱和液相色谱的方法进行检测，烟嘧磺隆只能采用液相色谱的方法分析，可以使用紫外检测器（UVD）对这2种化合物进行分析检测；但是UVD在选择性和灵敏度上与质谱检测器相比有很大的差距，因此在本研究中采用液相色谱质谱联用的方法同时分析烟嘧磺隆和莠去津，提高了方法的灵敏度和选择性。在前处理方面，国标 GB 19649—2005《粮谷中405种农药多残留测定》分析谷物中的除草剂使用的是加速溶剂萃取的方法，需要使用加速溶剂萃取仪，一些实验室并不具备该条件。本试验中采用相对比较简单的前处理方法，采用漩涡混合器萃取后，使用分散固相萃取的方法进行净化。通过比较PSA和C18 2种不同的吸附剂，使用C18取得了比较好的净化效果。

我国制定的玉米中莠去津最大残留限量标准为 0.05 mg/kg[4]，烟嘧磺隆最大残留限量标准为0.1 mg/kg。从方法的灵敏度、添加回收率、相对标准偏差等方面来考察，本研究建立的方法完全可以满足现有的国家农药残留限量标准要求。前处理方法更为简单，节省了有机溶剂，为玉米中这2种除草剂的残留检测提供了一种有效的方法。

参考文献：

[1]赵维，李美，高兴祥，等. 烟嘧磺隆及其与莠去津复配制剂防除玉米田杂草试验[J]. 山东农业科学，2008（3）：99-102.

[2]樊建斌，张润祥，高越，等. 烟嘧磺隆·莠去津可湿性粉剂对夏玉米田杂草的防除效果[J]. 山西农业科学，2011，39（1）：57-60.

[3]艾国民，张玉聚，潘同霞，等. 4%烟嘧磺隆悬浮剂防除玉米田杂草试验[J]. 河南农业科学，1999（6）：18-19.

[4]马婧玮，李萌，马欢，等. SPE净化-GC（NPD）测定土壤及玉米中莠去津残留量[J]. 分析实验室，2011，30（7）：75-78.

[5]单娟，董崭，王文博. 气相色谱法测定玉米中乙草胺·莠去津·2，4-滴丁酯残留[J]. 农药，2011，50（8）：582-584.

[6]葛宝坤，赵孔祥，王云凤，等. 固相萃取-高效液相色谱法测定粮谷中多种磺酰脲除草剂残留量[J]. 食品研究与开发，2009，30（6）：127-129.

[7]杨培苏，江树人，赵洪波. 烟嘧磺隆在玉米和土壤中的残留分析和消解动态研究[J]. 农药，1998，38（1）：33-35.

[8]Gallitzendrfer R，Timm T，Koch D，et al. Simultaneous determination of 12 sulfonylurea herbicides in drinking water after SPE by LC-DAD[J]. Chromatographia，2011，73（7/8）：813-816.

篇5：液相色谱-电喷雾质谱法测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的参数优化

1材料与方法

1.1 材料 ACQUITYTM

超高效液相色谱仪 (Waters公司) 、Micro mass Quattro UltimaTM Premier质谱仪 (Waters公司) 、纯水机 (Millipore公司) 。乙腈、甲醇均为色谱纯, 由Fisher公司提供;甲酸 (97%, Alfa Aesar) ;超纯水由二次重蒸水再经Millipore 纯水机制得;西地那非 (由中国药品生物制品检定所提供) ;C18固相萃取柱 (Cleanert C18, 500 mg/3 ml, Agela公司) 。

1.2 分析条件

1.2.1 色谱条件

色谱柱:Waters ACQUITY UPLCTM BEH (2.1 mm×50 mm×1.7 μm) ;柱温30 ℃;样品温度10 ℃;进样体积5.0 μl。流动相A为乙腈, 流动相B为含0.1% (体积分数) 甲酸的水。

1.2.2 质谱条件

离子源:电喷雾电离[ESI (+) ];毛细管电压 (Capillary) :1.50 kV;锥孔电压 (Cone) :30 V;离子源温度 (Source Temp) :100 ℃;脱溶剂温度 (Desolvation Temp) :400 ℃;脱溶剂气流量 (Desolvation Flow) :500 L/h。采用多反应监测模式 (MRM) , 西地那非的采集参数见表1。

1.3 样品处理

1.3.1 液体样品

含量高的样品取适量用甲醇稀释;含量低的样品, 准确吸取适量样品, 60℃水浴挥干, 然后用适量的甲醇溶解并定容, 过0.2 μm滤膜上机测定。

1.3.2 固体样品

准确称取粉碎后的样品于容量瓶中, 加入甲醇超声提取30 min, 然后定容, 5 000 r/min离心机离心20 min, 上清液过0.2 μm滤膜上机测定。

1.3.3 含脂肪、蛋白等杂质和干扰物质的复杂样品

因为西地那非在C18固相萃取柱上无保留, 而干扰杂质却可以保留。故对于此类样品, 先提取定容;用2 ml甲醇活化C18固相处理小柱, 抽干, 然后取1 ml提取液上样, 用3 ml甲醇分3次洗脱, 收集洗脱液混和后再过滤膜上机测定。

2结果

2.1 样品处理条件的确定

对于生物样品以及基质比较复杂的试样, 脂肪和蛋白质等杂质是主要的干扰物质。在前处理过程中, 加入缓冲溶液和甲醇可以去除部分蛋白质等杂质, 但由于超高效液相色谱所用色谱填料粒径小 (1.7 μm) , 试样在UPLC MS/MS分析之前, 必须进一步净化。本实验选用C18固相萃取柱净化, 加标试样经过固相萃取净化处理后的TIC图见图2, 结果表明基本无杂质干扰峰, 净化效果好。

2.2 液相分离条件的优化

在已报道的液相色谱分离西地那非的流动相中, 一般选用磷酸、三乙胺等水溶液体系, 由于质谱中不能加入不挥发性的盐, 因此改用挥发性的甲酸作为改性剂。本实验分别选用不同体积分数 (0.05%～0.3%) 的甲酸水溶液和乙腈为流动相, 对分子离子峰的响应进行了考察。当甲酸含量为0.05%～0.1%时, 随着甲酸含量的增加, 分子离子峰的响应值均逐渐增加;而甲酸含量为0.1%～0.3%时, 随着甲酸含量的增加, 响应值又逐渐降低;所以甲酸含量为0.1%时目标化合物的响应值最高, 因此最终选用甲酸含量为0.1%的水溶液和乙腈作为流动相。

2.3 质谱条件的优化

本文先采用流动注射泵连续进样进行了质谱条件的优化, 在正离子和负离子模式下进行了全扫描以选择适当的分子离子峰和电离方式。结果表明:在正离子模式下, 这些化合物全扫描的分子离子[M+H]+最理想, 结果见图3。因此选择目标化合物[M+H]+作为碰撞诱导解离的母离子。用不同的碰撞能量对母离子[M+H]+进行碰撞, 并对产生的离子碎片进行子离子扫描, 结果见图4。最终确认m/z为99.8、283.2、311.4的3个离子为其特征碎片离子。

2.4 检测限、线性范围、精密度及回收率

分别配制质量浓度为0.005～100 μg/ml的系列标准溶液。以目标组分的峰面积y对相应的质量浓度x (μg/ml) 做标准曲线, 其相关系数r=0.999 0, 表明西地那非在质量浓度为0.005～100 μg/ml时具有较好的线性关系。方法检出限 (LOD) (S/N= 3) 和最低定量限 (LOQ) (S/N = 10) 分别为1.0 fg/ml和3.0 fg/ml。

对相同浓度的标准试样在同1日内的不同时间进行6次重复试验, 目标化合物峰面积的RDS为1.6%～5.3%。

取保健酒做加标回收实验, 加标浓度分别为50、10、1 μg/ml, 每个浓度做6次实验, 结果表明样品回收率在87.3%～98.5%之间, 见表2。

3讨论

由于西地那非多和枸橼酸、柠檬酸等有机酸结合以盐的形式存在, 因此在复杂基质样品的分析过程中, 会出现样品出峰时间和标准出峰时间对不上的现象。经加标实验证明, 加标后, 标准出峰位置没有出峰, 而样品出峰位置的峰面积增大, 这说明样品基质中存在能和西地那非结合的其他酸类物质干扰西地那非在色谱柱上的保留, 因此在分析过程中要特别注意。

UPLC是分离分析科学中的一个全新类别。其涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术。在全面提升液相色谱HPLC的速度、灵敏度及分离度诸品质的同时, 保留其原有的实用性及原理。因此超高液相色谱UPLC和电喷雾串联四级杆质谱法联用使其检测具有分析通量高、灵敏度高、柱效高、分析速度快和溶剂消耗少等特点。因此结果令人满意。

摘要：目的建立用超高效液相色谱-串联电喷雾四级杆质谱法 (正离子模式, UPLC-MS/MS) 在多反应监测 (MRM) 模式下测定西地那非。方法应用Waters ACQUITY UPLCTM色谱系统在BEH色谱柱上进行样品分离, 以乙腈和含0.1%甲酸的水为流动相、以0.25 ml/min的流速进行洗脱;在分析过程中以保留时间和离子对 (母离子和3个碎片离子) 信息比较进行定性, 以母离子和响应值高的碎片离子进行定量。结果该方法的检测限为1.0 fg/ml, RSD<6.0%, 回收率在87.3%98.5%之间。结论方法测定速度快、特异性好、灵敏度高, 定性定量准确, 结果令人满意, 可应用于保健品以及药品中西地那非的确证和定量检测实验。

关键词：超高效液相色谱-串联电喷雾四级杆质谱,西地那非,检测

参考文献

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