HPLC法考察齐佩能与常用输液配伍的稳定性

2023-01-06

亚胺培南 (imipenem, IMP) 为碳青霉烯类抗生素, 由美国Merck&Dohme药厂开发研制, 亚胺培南一般与肾脱氢肽酶抑制剂-西司他丁钠 (cilastatin sodium, CS) 1∶1配伍制成注射用无菌粉末, 称为泰能, 而由印度Ranbaxy Laboratories Limited公司生产的商品名称为齐佩能。齐佩能是一种广谱的β-内酰胺类抗生素, 由于强大的抑制细菌细胞壁合成的能力, 可杀灭绝大部分革兰阳性和革兰阴性的需氧和厌氧病原菌, 抗菌谱较广泛, 实际上包括了在临床上有意义的几乎所有病原菌, 可是有关稳定性的研究还鲜见报道。亚胺培南发挥抗菌作用, 而西司他丁钠仅是肾脱氢肽酶抑制剂, 因此选择测定亚胺培南的含量变化来间接考察齐佩能的稳定性。本文对齐佩能在5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、0.9%氯化钠注射液4种溶媒中的稳定性进行了考察, 为临床合理用药提供科学依据。

1 试验

1.1 仪器

Agilent 1100型系列高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司) ;pHs-3C型pH计 (上海智光仪器仪表有限公司) ;WZZ-2S数字式自动旋光仪 (上海精密科学仪器有限公司) ;BP211D电子天平 (德国塞多利斯公司) ;Cary-100紫外分光光度计 (美国瓦里安公司) 。

1.2 试药

亚胺培南标准品 (印度Ranbaxy Laboratories Limited公司) ;齐佩能 (印度Ranbaxy Laboratories Limited公司, 批号:15883899) ;5%葡萄糖注射液 (5%GS, 南京正大天晴制药有限公司, 批号:070306) ;10%葡萄糖注射液 (10%GS, 南京正大天晴制药有限公司, 批号:070118) ;葡萄糖氯化钠注射液 (GNS, 南京正大天晴制药有限公司, 批号:070128) ;0.9%氯化钠注射液 (0.9%NS, 南京正大天晴制药有限公司, 批号:070202) ;注射用水 (医院自制) ;甲醇为色谱纯, 乙酸、乙酸铵为分析纯。

2 方法

2.1 色谱条件

色谱柱:Atlantis C18柱 (150mm×4.6mm, 5μm) ;流动相:甲醇-0.01mol/L乙酸铵缓冲液 (用乙酸调节p H至3.6) (5∶95, v/v) ;流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:298nm;进样量:20μL。

2.2 测定方法

2.2.1 吸收波长的选择

配制10mg/L的齐佩能水溶液, 以注射用水为空白, 在200~400nm波长范围内扫描测定, 结果在298nm处亚胺培南有最大吸收, 而西司他丁钠无吸收, 本实验因此选择此波长为检测波长。尽管葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液在该波长处也有吸收, 但在选定的色谱条件下, 其色谱峰可与亚胺培南色谱峰达到基线分离, 不干扰测定[2]。

2.2.2 标准曲线的绘制

精密称取亚胺培南标准品5.0 mg于100mL量瓶中, 用0.01mol/L乙酸铵溶液稀释至刻度, 分别精密吸取2、4、6、8、10、20mL于25mL量瓶中再用0.01mol/L乙酸铵溶液稀释至刻度, 加上第1次稀释液组成系列标准溶液, 分别进样20μL检测, 以亚胺培南峰面积为纵坐标, 亚胺培南的质量浓度为横坐标, 进行线形回归, 得亚胺培南标准曲线为A=34.1771C0.2162, R2=1.0000, 显示亚胺培南在4.0~40μg/mL范围内具有良好的线形关系。

2.2.3 回收率实验

按照2.2.2项下的处理方法操作, 精密配制3种不同浓度的亚胺培南溶液, 进样检测, 计算回收率, 结果如表1。

2.2.4 输液样品的配制

参考临床用量, 取齐佩能1.0g于100mL量瓶中, 分别用5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、0.9%氯化钠注射液溶解, 并稀释至刻度, 混匀, 即得亚胺培南4种样品溶液。

3 结果与讨论

3.1 含量测定与结果

按照设定的时间点, 顺次精密吸取上述各配伍液0.2mL于100mL量瓶中, 用各输液稀释至刻度, 分别进样检测, 以亚胺培南峰面积代入标准曲线得亚胺培南的含量, 并以0h时的含量为100%, 计算其他不同时间的百分含量, 结果见表2和图 (1) 。

3.2 外观变化

观察3.1项下各配伍液内外观的变化。结果齐佩能与5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液的配伍液在4h内均显黄色, 而与0.9%氯化钠注射液的配伍液在6h内未出现颜色变化。

3.3 讨论

3.3.1 亚胺培南的结构与分离

亚胺培南为两性化合物, 具有类似第二甲酰胺的甲脒结构, 因其中的C-N键具有部分双键的性质, 致使环绕C-N的自由旋转受阻, 因而存在一对类似顺反异构的构象异构体。构象异构体一般能从周围环境中吸收能量, 相互转化, 处于动态平衡, 如采用的分离技术对构象异构体有识别能力, 可将二者分离。本文采用的高效液相色谱法就能将二者分离。但是尝试用亚胺培南顺式异构体的峰高作为测定含量的依据, 尽管线性良好, 却发现除在0.9%氯化钠注射液中比例稳定外, 在其他3种溶媒中比例随时间逐渐下降, 因此只能选择亚胺培南两异构体峰面积之和作为测定其含量变化的依据。

3.3.2 溶液pH对亚胺培南的影响

据2005年版药典规定, 葡萄糖注射液pH3.2~5.5, 葡萄糖氯化钠注射液pH3.5~5.5, 0.9%氯化钠注射液pH4.5~7.0。已有研究表明, 亚胺培南在pH7.0左右的水溶液中较稳定, 氢离子、氢氧根离子均可催化亚胺培南的降解, 因此在p H不同的溶媒中, 齐佩能的稳定性也应有所不同。从外观变化看, 齐佩能与5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液的配伍液在4h内均显黄色, 而与0.9%氯化钠注射液的配伍液在6h内未出现颜色变化。说明齐佩能与5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液的配伍液中产生了化学反应, 而与0.9%氯化钠注射液的配伍液可能未出现化学变化, 初步推测齐佩能在0.9%氯化钠注射液中较稳定。

4 结语

从含量变化看, 2 5℃, 6 h内齐佩能与葡萄糖氯化钠注射液 (pH=3.6) 的配伍液中亚胺培南的含量下降最快, 6h时仅为30.0 9%;与5%葡萄糖注射液 (pH=3.8) 和10%葡萄糖注射液 (p H=3.7) 的配伍液中亚胺培南的含量也下降至35%左右;而与0.9%氯化钠注射液 (p H=6.1) 的配伍液中亚胺培南的含量在6h内仍有96.73%;可见在同一温度条件下, 随着溶媒pH的下降, 齐佩能在溶媒中的稳定性下降。

综合实验结果, 为确保齐佩能的稳定性, 建议齐佩能在临床上应尽可能与0.9%氯化钠注射液配伍使用, 若与其他3种注射液配伍, 则应不超过1h滴完, 才能保证配伍液中亚胺培南的含量维持在新配时的80%。

摘要：目的考察齐佩能在5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、0.9%氯化钠注射液4种溶媒中的稳定性。方法用HPLC法考察25℃, 6h内4种配伍液中亚胺培南的含量变化, 并观察配伍液的外观。结果 pH对齐佩能的稳定性有较大影响。结论 pH影响是齐佩能稳定性的重要因素。齐佩能在0.9%氯化钠注射液中最为稳定, 在其他3种注射液中较不稳定, 尤以葡萄糖氯化钠注射液为甚, 建议在临床上应尽可能将齐佩能与0.9%氯化钠注射液配伍使用。

关键词：齐佩能,输液,稳定性,HPLC