蓝莓提取物

蓝莓提取物（精选三篇）

蓝莓提取物 篇1

1 材料与方法

1.1 材料

供试材料为高丛蓝莓蓝丰,未转色和完熟的蓝莓果实取自青岛沃林农业基地。

供试试剂为焦碳酸二乙酯(DEPC)、SDS、EDTA、Tris-HCl为北京全新拓达公司产品,反转录酶为Promega产品,植物总RNA抽提试剂盒、水饱和酚、引物均为上海生工产品,亚精胺、β-巯基乙醇为Sigema产品,其余试剂为国产分析纯。一次性塑料耗材和各种试剂均用1%的DEPC水处理,并高压灭菌去除DEPC。玻璃器皿于180℃烘干12 h。

CTAB提取液(2%CTAB,2%PVP,100 mmol·L-1 Tris-HCl,pH为8,2 mol·L-1NaCl,3.44 mmol·L-1亚精胺,25 mmol·L-1EDTA,pH为8,用前加2%β-巯基乙醇)。SSTE buffer(0.5%SDS,1 mol·L-1NaCl,10 mmol·L-1Tris-HCl,pH为8,1 mmol·L-1EDTA,pH为8)。SDS提取液(100 mmol·L-1Tris-HCl,pH为7.5,500 mmol·L-1NaCl,25 mmol·L-1EDTA,1.5%SDS,pH为8,2%PVP,用前加0.7%β-巯基乙醇)。

1.2 方法

1.2.1 RNA的提取

RNA的提取采取4种方法。

(1)改良CTAB法:

50 mL离心管中加入10 mLCTAB提取液,65℃预热。取1 g果实液氮研磨至粉末后加入离心管,震荡混匀,65℃反应10 min。加入等体积氯仿:异戊醇(24∶1)抽提2次,震荡混匀,4℃12 000 r·min-1离心10 min。取上清液移至1.5 mL离心管中,加入1/4体积10 mol·L-1LiCl,4℃沉淀过夜。4℃12 000 r·min-1离心30 min,小心倒掉上清液,75%酒精洗至无色。加入500 mLSSTE buffer和等体积的氯仿∶异戊醇(24∶1),震荡混匀,4℃12 000 r·min-1离心10 min。取上清加2倍体积的无水乙醇,-20℃放置2 h。4℃12 000 r·min-1离心30 min,小心倒掉上清液,75%酒精清洗2次。吸干上清,沉淀自然干燥后,溶于适量DEPC-ddH2O。

(2)TRIzol法:

按Invitrogen公司的TRIzol试剂盒说明书操作进行。

(3)试剂盒法:

按照上海生工植物总RNA抽提试剂盒的说明书进行操作。

(4)SDS法:

50 mL离心管中加入10 mLSDS提取液,加入1 g液氮研磨的果实粉末,震荡混匀,室温反应10 min。4℃12 000 r·min-1离心15 min,取上清加入1/3体积预冷的5 mol·L-1NaAc,混匀,冰浴30 min。4℃12 000 r·min-1离心15 min,取上清,加入等体积的酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1),震荡混匀。4℃12 000 r·min-1离心15 min,小心移取上清至1.5 mL离心管中,加入3倍体积的无水乙醇,-80℃放置30 min。4℃12 000 r·min-1离心30 min,小心倒掉上清,75%乙醇清洗2次。吸干上清,沉淀自然干燥后,溶于适量DEPC-ddH2O。

1.2.2 RNA纯度及完整性检测

提取的RNA经1%非变性琼脂糖凝胶电泳检测后,用紫外凝胶成像系统观察其完整性。

取5 μL RNA用DEPC-ddH2O稀释到50 μL,在紫外分光光度计中测量在230、260和280 nm处的紫外吸光值,计算RNA总产量:RNA得率=RNA浓度(即40×OD260×稀释倍数)×样品体积(mL)/样品质量(g)[4]。

1.2.3 总RNA中DNA的去除

每20 μL反应体系加入总RNA14 μL,RQ1 RNase-free DNase 5 μL,10×Buffer 2 μL,RNase Inhibitor 1 μL,短暂离心混匀。37℃30 min,加入1 μLRQ1 DNase Stop Solution,65℃反应10 min。

1.2.4 合成cDNA并进行PCR反应

按Promega公司的反转录试剂盒说明书进行反转录(11 μL去DNA的总RNA+1 μL Oligo dT20+2 μL dNTP+4 μL 5×Buffer+1 μL RNase抑制剂+1 μL Rever Tra Ace),得到20 μL cDNA。取0.5 μL cDNA进行PCR扩增(20 μL反应体系):PCR扩增基因为蓝莓果实F3′5′H基因片段(Genebank登录号JK664585,片段大小为324 bp)。cDNA模板经94℃变性4 min,按94℃30 s,55℃30 s,72℃30 s程序扩增35个循环,最后72℃继续延伸10 min。PCR扩增产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测。

2 结果与分析

2.1 蓝莓总RNA提取

利用4种方法从蓝莓果实中提取RNA,结果发现,SDS法提取的RNA呈现粘稠状,不易溶解。电泳结果表明(见图1),TRIzol法没有条带呈现,无法提取到RNA;试剂盒法提取的幼果期RNA无完整的条带,完熟期28s∶18s亮度约为2∶1,但得率太低;SDS大量法提取的总RNA条带弥散,有拖尾现象;只有改良CTAB大量法提取的蓝莓2个时期果实RNA条带较清晰完整,且28s∶18s的亮度接近2∶1。

a为改良CTAB大量法;b为TRIzol法;c为试剂盒法;d为SDS大量法;泳道1为幼果期果实;泳道2为完熟期果实

a is modified CTAB method;b is TRIzol Kit method;c is Detection Kit method;d is SDSmethod;lane 1is fruit at young fruit stage;lane 2is fruit at full maturity stage

根据电泳结果,分别取改良CTAB大量法、试剂盒法和SDS大量法提取的总RNA检测吸光度(见表1)。改良CTAB大量法提取的2个时期的RNA OD260/OD280在2.0左右,OD260/OD230的比值都大于2.0,得率均大于20 μg·g-1;虽然SDS大量法提取的成熟期果实RNA得率也较高,但OD260/OD230的比值过低,说明存在多糖等杂质的污染。因此将改良CTAB大量法提取的2个时期果实总RNA继续进行PCR的检测。

2.2 PCR检测结果

以改良CTAB大量法反转录的cDNA为模板,对蓝莓果实F3′5′H基因片段进行扩增,结果表明2个时期均能扩增出片段,经PCR产物凝胶电泳分析,所扩增片段大小与预期片段的大小一致(见图2),表明改进的CTAB大量法提取的RNA并反转录成的cDNA样品,可用于基因的克隆、表达等分子生物学研究。

泳道1为幼果期果实,泳道2为完熟期果实

lane 1is fruit at young fruit stage;lane 2is fruit at full maturity stage

3 结论与讨论

目前关于多糖多酚的植物组织提取RNA方法的报道很多[5,6,7,8,9],但不同植物或同一植物的不同品种或同种植物的不同组织器官往往因种属组织部位及发育成熟度的差异其内含物组分及含量都存在一定差异,加之不同的RNA提取方法亦各有优缺点[10],故针对蓝莓果实中富含大量的糖类和酚类等次级代谢产物的特点,对不同提取方法进行了比较。

对植物果实来说,提取高质量RNA的关键就是去除多糖多酚等杂质的影响。近年来比较流行的TRIzol试剂具有操作简单,提取纯度高,所需样品量少等优点受到大家欢迎,但由于TRizol试剂含酚和异硫腈酸胍等组分缓冲能力较差,因而在提取果实总RNA时效果不好[6,9,11]。且在该研究中加入异丙醇后管底出现白色不溶沉淀,在山核桃[12]和树莓[6]的研究中也出现过这样的现象,刘丹等人认为不溶沉淀的产生以及去除多糖和酚类等杂质同时造成的RNA损失是导致TRizol法RNA电泳检测未见条带的原因。SDS法也是提取果实总RNA常用的方法,虽然该研究中使用了高浓度的醋酸钠沉淀和酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1)抽提,但仍然无法去除多糖的污染。只有改良CTAB大量法中提取的总RNA质量较好,由于在提取过程中用多个步骤去除多糖多酚,因此杂质较少。首先在提取液中加入了亚精胺,在提取过程中有效地抑制了核糖核酸酶的活性。其次为了阻止果实中的酚类物质氧化为多醌与RNA共结合,使用2%的PVP和2%的β-巯基乙醇协同作用[13],PVP作为多酚化合物的螯合剂与酚结合,β-巯基乙醇作为强还原剂使多酚不易被氧化,还可以打断多酚氧化酶的二硫键使之失活[14],二者协同作用有效抑制了酚类物质对RNA提取的影响。而单独加入PVP或β-巯基乙醇都无法有效抑制多酚类物质的影响[15,16]。再通过后续氯仿异戊醇抽提和Li+沉淀将已经与PVP结合和未被氧化的酚类物质除去。再次,在高浓度Na+存在条件下通过氯仿异戊醇的抽提去除一部分多糖后,又通过LiCl沉淀RNA而将多糖留在溶液中,极大地降低了多糖的污染。另外,在改良的CTAB法中还采用65℃反应10 min使样品彻底裂解和LiCl沉淀后75%的酒精清洗沉淀至无色以除去色素等的步骤提高RNA的提取质量。经过此方法提取的蓝莓果实总RNA可以满足后续的分子实验操作,为蓝莓分子生物学研究奠定了基础,同时也为其它植物材料RNA的提取提供参考。

摘要：为了在蓝莓果实中提取出高质量RNA,比较了改良CTAB法、TRIzol法、试剂盒法和SDS法4种方法。结果表明:改良CTAB大量法能有效地去除果实中的多糖和酚类物质,获得的总RNA质量较好,纯度较高。28s∶18s的亮度约为2∶1,OD260/OD280在1.8～2.0,OD260/OD230的比值都大于2.0,且得率也较高,幼果期为23.978μg·g-1,完熟期为30.817μg·g-1。完全能适用于RT-PCR、转录组测序等分子生物学实验。

蓝莓之乡 蓝莓飘香 篇2

吃着来自胶南的新鲜蓝莓，那酸甜美味、饱满诱人的小果子，一定能让你感受到它生长的地方——山清水秀、蓝天碧云、天然无污染的大自然，这里就是中国“蓝莓之乡”。

胶南，环境和区位优势极为优越，同时，发展蓝莓产业的信心和魄力也不容小觑。胶南是国内最早大面积种植蓝莓的地区，胶南宝山镇2001年就引进了蓝莓种植，是全国最早引入蓝莓种植的地区之一。

当地政府深知种植蓝莓会带来良好的经济收益，认准发展蓝莓产业大有可为，于是凭借其良好的环境资源优势，大力发展蓝莓这一绿色农业。在当地政府的大力扶持下，胶南蓝莓产业布局逐步优化，依托多项有利措施以及龙头企业的带动，胶南蓝莓种植实现了产业化发展。如今，胶南市积极打造以张家楼、藏南和宝山、六汪为中心的蓝莓核心区，扎实推进沃林、隆辉、宝山三个千亩蓝莓精品示范园建设，辐射带动周边组团发展，促进全市蓝莓实现规模化发展。“蓝莓实现规模化种植”被胶南市委、市政府评为“胶南撤县设市20周年最有影响的重大事件”之一。

每年六月底七月初，胶南大田蓝莓开始大量上市!作为目前全国种植面积最大、产业化程度最高的蓝莓主产区，2011年胶南市的蓝莓可采摘面积达到9500余亩。

现在，胶南市坚持“企业+合作社+基地+农户”的生产经营模式，依托沃林、隆辉、杰诚、慧海、宝林、宝康等蓝莓龙头企业，大力发展蓝莓组培育苗和产品精深加工，依托青岛富民蓝莓专业合作社等11家合作社，大力推进农超对接和产销衔接，促进全市蓝莓实现产业化发展。同时，胶南在依托蓝莓龙头企业大力发展蓝莓组培育苗和产品精深加工的基础上，胶南市积极引导生产企业和基地申报“三品一标”认证，着力打造“胶南蓝莓”公用品牌，促进全市蓝莓实现品牌化发展。目前，全市共有21个蓝莓产品通过“三品”、ISO9000和GAP认证，“沃林”、“农园彩珠”、“慧海”、“健康农庄”等4个品牌蓝莓获国际有机食品认证，“沃林蓝莓”被评为青岛市十大名特优农产品品牌。

初识蓝莓，蓝色的光泽，美丽悦目；一颗入口，酸甜的口感，香气逼人。近年来，凭借极高的营养价值，蓝莓被美国人称之为“神奇果”，被澳洲人美誉为“蓝宝石”，在欧洲，更被称为“口服的皮肤化妆品”。

蓝莓：以时尚之名

消费是市场的最终端，其上游往往还有一条产业链。眼下这小小蓝莓果子，成了胶南农业发展的一种方向。蓝莓，正以时尚的名义，穿起了胶南的无数遐想。

吃蓝莓，如今越来越流行

两三年前，蓝莓身价颇高，单独陈列在超市冷藏柜里，125克一小盒，得卖好几十元。在上海一些高端超市，甚至卖出过68元、88元的价格。

但经过两三年的培育，蓝莓消费的市场在今年快速扩大，鲜果销量与去年相比呈数倍的增长。据悉，今年有机蓝莓采摘节首日就涌入近两千人。到8月底，蓝莓鲜果的销售告一段落，蓝莓果汁饮料等的销售则接替鲜果，继续打响蓝莓旗号。

小果子串起一条产业链

除了鲜果销售，小小蓝莓果背后的产业链，正在迅速形成。与蓝莓有关的产品新鲜而繁多地冲击着我们的视线：蓝莓鲜果、蓝莓冻果、蓝莓冻干果、蓝莓果干、蓝莓饮料、蓝莓浓缩汁、蓝莓茶、蓝莓果醋、蓝莓原浆、蓝莓酒、蓝莓苗木等。

以蓝莓为名义的乡村游也着实让这个夏季的胶南火了一把。乡村旅游一直是胶南市的特色和优势。七月是蓝莓成熟的季节，蓝莓采摘游成为这个时期乡村游的主角。记者在宝山镇有机蓝莓采摘观光园看到，该园的千亩蓝莓已进入可采摘的成熟期，累累的果实挂满枝头，伴以波光潋滟、蛙鸣幽幽的水面，清风飒飒、绿草萋萋的原生态田园风光，构成一幅盛夏农家悠闲自在的画面，也成为该园的一大特色。而为了吸引游客前来观赏游玩，观光园将在七月初自助采摘游开幕后，推出更加丰富多彩的活动，让游客在此尽享一段轻松快乐的休闲时光。打造独具特色的乡村游，一直也是胶南市加强现代农业转方式、调结构的重要举措，各镇想方设法加大宣传推介力度，完善各项管理制度，健全旅游配套服务设施，为乡村游搭建最佳的平台。谈到蓝莓的前景，宝山镇镇长李金国充满信心，“宝山镇的蓝莓以前是最早，现在是最大，而未来将做到最好。”

此外，蓝莓果苗销售的产业链也在形成。一些园艺爱好者率先掀起了蓝莓果苗的种植热潮。在张家楼沃林农业(青岛)有限公司，我们看到了企业已初步形成品种引进、种苗繁育、基地种植、果品深加工……一条越来越完善的产业链。胶南市农业局副局长李绍良表示，沃林与天虹的合作只是胶南蓝莓与全国主要城市大中型连锁机构合作的开始。“十二五”期间，胶南要建设10万亩蓝莓产业基地，力争覆盖全国23个城市的前10大连锁零售机构，打造中国的“蓝莓之乡”。“胶南早在2001年就引进蓝莓种植，目前已发展到2，39万亩，占全国总种植面积的1／3，是目前全国种植面积最大、产业化程度最高的蓝莓生产县。”

蓝莓产业作为一个新兴的产业，正备受关注。

蓝莓：给你一双慧眼

蓝莓具有独特的风味和极高的营养价值，果实含有多种维生素，对于促进心血管健康，增强记忆力、消除疲劳有着神奇的功效。联合国粮农组织将它列为人类五大健康食品之一。

蓝莓是真正的“蓝色食品”，果实的蓝色来自于高含量的花青素类物质。蓝莓中含有“超氧化物歧化酶”，可以成为人体过剩氧自由基的清除剂，达到防止神经老化的目的。

蓝莓提取物 篇3

1 材料与方法

1.1 材料及试剂

蓝莓75%乙醇提取物购自大兴安岭林格贝有机食品公司。人结肠癌细胞株HCT116由中国科学院上海细胞生物学研究所提供。DMEM培养基及胎牛血清为Invitrogen公司产品,NF-κB和GAPDH一抗购自Abcam公司,辣根过氧化物酶标记的抗小鼠IgG购自Promega公司,Super Signal ECL化学发光试剂盒购自Pierce公司,Caspase-3活性检测试剂盒、PI试剂盒均购于江苏碧云天生物技术公司,蛋白定量试剂盒(Bradford)、β-巯基乙醇、过硫酸铵等均购自上海生工公司。细胞培养皿和96孔培养板购自Corning公司。蛋白电泳及转膜装置购自Bio-rad公司。分光光度计购自Beckman公司。流式细胞仪购自Becton Dickison公司。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养

HCT116细胞用含有10%胎牛血清、100 U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的DMEM/F12培养液,培养在37℃、CO2体积分数为5%的细胞培养箱中。细胞每隔2 d以1∶3的比例传代1次。

1.2.2 癌细胞增殖抑制率检测

取处于对数生长期的HCT116细胞,调整细胞密度至2×105个/mL,接种于96孔培养板中,每孔100μL,每个处理组各设置6个复孔。培养24 h,弃掉原培养液,换成含有不同浓度(0、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L)蓝莓提取物的培养液,每孔200μL。分别于24、48和72 h向每孔中加入20μL质量浓度为5 mg/mL的MTT,继续培养4 h后,小心吸弃全部上清液,然后向每孔中加入150μL DMSO,震荡10 min至结晶全部溶解,于酶标仪上490 nm波长处读取吸光度(A)值。实验重复3次,按以下公式计算细胞增殖抑制率.

1.2.3 流式细胞法检测细胞凋亡

不同浓度蓝莓提取物作用24 h后收获细胞移入试管,PBS洗涤1次,400μL Binding Buffer重悬细胞。取200μL细胞悬液加入AnnexinV 5μL,PI 10μL,避光20 min,加入200μL Binding Buffer上流式细胞仪检测。用Cellquest软件获取数据,用ModFit软件进行数据分析。

1.2.4 Caspase-3活性检测

分别用溶剂(空白对照组)和1.0 mg/L蓝莓提取物(药物组)处理HCT116细胞,作用后不同时间点(0、36、72 h)收集处理后细胞,加入50μL 4℃Lysis Buffer(含DTT 0.5μL),冰浴条件下裂解20～60 min,4℃离心(10 000 r/min)1 min,取上清,Braford法进行蛋白定量。按Caspase-3活性检测试剂盒方法进行操作,分光光度计测定400 nm波长处吸光度值。Caspase-3相对活性用吸光度相对比值表示,相对倍数=OD诱导剂/OD对照。

1.2.5 免疫印迹法检测NF-κB蛋白表达

分别用溶剂(空白对照组)和1.0 mg/L蓝莓提取物(药物组)处理HCT116细胞,作用后不同时间点(0、36、72 h)用Western blot检测NF-κB蛋白表达水平,GAPDH为内参蛋白,具体步骤如下:收集处理后细胞,预冷的PBS洗3次,加入蛋白匀浆液(50 mmol/L Tris-HCl,pH值为7.4,1%Triton X-100,0.2 mmol/L PMSF,1 mmol/L EDTA),用4℃超速离心机12 000 r/min离心10 min,取上清,用10%的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,10μg/well,电泳结束后,将蛋白从聚丙烯酰胺凝胶转移到PVDF膜上,NF-κB或GAPDH(1∶2 500)一抗孵育,4℃过夜,加标记辣根过氧化物酶IgG二抗,常温孵育1 h,然后用ECL发光,X光胶片曝光成像,Total Lab软件进行图像分析。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0软件进行数据分析,计量资料数据以均数±标准差表示,比较采用t检验,计数资料采用百分率表示,组间对比采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 蓝莓提取物对HCT116细胞增殖的抑制作用

与对照组(0 mg/L)相比,0.25、0.50、1.00和2.00 mg/L蓝莓提取物处理组的HCT116细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05);同一浓度的蓝莓提取物分别作用24 h、48 h和72 h后,肿瘤细胞生长抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。蓝莓提取物对HCT116细胞的增殖抑制作用呈现明显的剂量及时间效应关系,即随着蓝莓提取物剂量和作用时间的增加,其对HCT116细胞的生长抑制作用逐渐增强(图1)。

2.2 蓝莓提取物对HCT116细胞凋亡的影响

由Annexin V-FITC/PI双参数图(图2A)可见,位于右下象限的为早期凋亡细胞(FITC+,PI-),位于右上象限的为晚期凋亡细胞(FITC+,PI+),位于左下象限的为活细胞(FITC-,PI-),位于左上象限的为坏死细胞(FITC-,PI+)。不同浓度的蓝莓提取物处理24 h即可诱导人结肠癌细胞HCT116发生早期凋亡,随着剂量增加早期凋亡细胞逐渐升高,且晚期凋亡细胞比例也成升高趋势,不同剂量(0、0.25、0.5、1.0、2.0 mg/L)平均凋亡率分别为6.62%、8.86%、16.33%、49.29%、63.68%(图2B)。

2.3 蓝莓提取物对Caspase-3活性的影响

为了深入研究蓝莓提取物抗肿瘤作用的机制,本研究探讨了其对肿瘤细胞Caspase-3的表达及其活性影响。蓝莓提取物对HCT116细胞Caspase-3的表达的影响结果如图3,HCT116细胞在蓝莓提取物作用36 h和72 h后,细胞Caspase-3的活性与对照组相比分别提高2倍和3倍左右(P<0.01)。

2.4 蓝莓提取物对NF-κB表达的影响

HCT116细胞在药物作用36 h和72 h后,NF-κB表达水平与空白对照组相比分别下降16%和55%左右(P<0.01),呈明显的时间效应关系。

3 讨论

近年我国各类癌症发病率日益上升,迫切需要研发出既能抑制癌细胞增殖甚至凋亡而又对人体危害较少的药物,因此开发天然抗癌药物成为研究热点[5,6]。美国农业部(USDA)人类营养中心研究了40种水果和蔬菜,蓝莓所含有的抗氧化活性物质最多(主要成分包括花色苷、黄酮醇等),研究证明,花色苷比维生素和茶酸等有更强的清除自由基的功能[7,8]。本实验通过观察蓝莓提取物对人结肠癌细胞株HCT116体外生长、增殖、凋亡的影响,探讨了蓝莓提取物对人结肠癌细胞抑制作用以及相关机制。

细胞凋亡是由Caspase家族介导的蛋白酶级联反应过程,不同的细胞或不同信号转导途径诱发的凋亡过程参与的Caspase也不尽相同,而Caspase-3是凋亡的关键酶和执行者,是所有细胞凋亡蛋白酶级联反应的“公共通路”,被称为“死亡蛋白”。研究发现[9,10],淫羊藿次苷Ⅱ和葫芦素B等植物提取物均可激活Caspase-3并产生级联反应,促进癌细胞凋亡。本研究的结果表明,蓝莓提取物可以引发HCT116肿瘤细胞中凋亡关键蛋白Caspase-3的活性显著升高,且药物作用时间与Caspase-3活性水平之间均呈现明显的时间效应关系。

NF-κB是一种存在广泛且高度保守的核因子,可在基因水平调控癌细胞的增殖、侵袭、血管生成及转移等。NF-κB通路被认为是一个很有前景的癌症治疗靶点[11]。本研究结果显示蓝莓提取物可以显著抑制NF-κB蛋白的表达,并且这种抑制作用具有时间依赖性,提示蓝莓提取物对NF-κB蛋白表达的抑制可能是其机制之一。

综上所述,蓝莓提取物可能通过激活Caspase-3凋亡蛋白酶级联反应通路和抑制癌细胞NF-κB的表达等机制,诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡。本研究对于临床应用具有十分重要的指导意义,但是,有关蓝莓提取物抑制人结肠癌细胞生长增殖以及诱导凋亡深入机制,还需进一步研究。

摘要：目的 研究蓝莓提取物对人结肠癌细胞株HCT116增殖的体外抑制作用及其机制。方法 应用不同浓度梯度蓝莓提取物处理人结肠癌HCT116细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测肿瘤细胞增殖情况,应用流式细胞术检测蓝莓提取物对HCT116细胞体外凋亡情况影响,并进一步研究了Caspase-3活性以及NF-κB表达变化情况以探讨相关机制。结果 蓝莓提取物对HCT116细胞的增殖抑制作用呈现明显的剂量及时间效应关系;流式细胞仪检测显示各浓度(0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L)蓝莓提取物处理组HCT116细胞平均凋亡率分别为(8.86±1.03)%、(16.33±1.99)%、(49.29±6.73)%、(63.68±8.26)%,除0.25 mg/L组外,均显著高于对照组的(6.62±0.97)%;1.00 mg/L蓝莓提取物还可显著升高肿瘤细胞中Casepase-3活性,抑制NF-κB表达。结论 蓝莓提取物可能通过激活Casepase-3级联反应通路和抑制NF-κB表达,诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡从而抑制其体外的生长与增殖。