野百合鳞茎提取物的抑菌作用

2022-10-10

中国作为世界百合的起源中心之一[1,2], 拥有的百合属 (Lilium) 资源约有55个原生种、18个变种。百合因其花大, 花型优美, 是优良的观赏植物切花。此外, 百合鳞茎中还含有多种生物活性成分, 如多糖、生物碱、多酚、皂甙等, 具有提高免疫力、降低血糖、抗癌及抗疲劳等药理作用, 具有广泛的开发前景[3]。野百合 (L.Brownii) , 又称淡紫百合, 产自广东、湖北、江西、福建、陕西和河南等省区, 因其花大, 花型优美, 香气浓郁, 是观赏价值极高的鲜切花材料。野百合鳞茎中含有大量的淀粉, 可以食用, 原产地也做药用。具有滋阴润肺、开胃健脾、止咳化痰、促进血液循环等功效。研究表明, 食用百合兰州百合 (L.davidii) 和卷丹 (L.lancifolium) 的鳞茎提取物具有抑菌活性。目前, 对野百合活性成分的研究甚少, 对其抑菌作用的研究也鲜有报道。为了合理开发和利用这一珍贵的野生资源, 本研究采用野百合为材料, 以兰州百合为对照, 检测其鳞茎提取物的抑菌活性, 旨在发现野百合在抑菌方面是否具有药用价值, 并为野生百合资源及抗菌药理作用的开发利用提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料及供试菌株

野百合采自湖北省竹溪县, 兰州百合购自兰州当地。将鳞茎去泥洗净后阴干, 粉碎机粉碎后过筛, 待用。

枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) 、金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus) 、蜡状芽孢杆菌 (Bacillus cereus) 为革兰氏阳性细菌, 沙门氏菌 (Salmonella) 、大肠杆菌 (Escherichia coli) 、产气杆菌 (Enterobacter aerogenes) 为革兰氏阴性细菌, 所有测试菌株均已活化。

1.2 抑菌活性的检测

称取百合干粉20 g, 加入200 m L甲醇, 采用超声波法在40℃下提取20 min, 重复提取3次。合并提取液后旋转蒸发浓缩至20 m L。采用纸片琼脂扩散法测定百合鳞茎提取液对6种细菌的抑菌活性。将细菌置入无菌水中制成菌悬液, 并控制菌液浓度为105CFU/100μL, 取0.1 m L菌液涂布于牛肉膏琼脂糖凝胶平板上。将滤纸片 (直径6 mm) 浸入百合鳞茎提取液1 h后放置于上述已涂布细菌的平板上, 每个处理重复3次, 倒置于恒温培养箱中37℃培养24 h, 测定抑菌圈大小, 同时设立甲醇为阴性对照, 头孢霉素 (100 mg/L) 为阳性对照。

1.3 数据统计分析

结果以“平均值±标准差”表示, 重复3次剂量-效应曲线、回归方程及F检验利用DPS7.0统计软件完成。

2 结果与分析

2.1 抑菌活性测定

两种百合鳞茎提取物对不同种类细菌均具有抑制活性, 且野百合的抑菌活性均强于兰州百合, 见表1。两种百合鳞茎提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢杆 (菌革兰氏阳性菌) 的抑制作用均高于对产气杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌 (革兰氏阴性菌) 的抑制作用 (见图1, 2) 。

2.2 百合鳞茎提取物剂量关系的测定

本研究对两种百合鳞茎提取物含量与抑菌作用之间进行了剂量-效应关系的测定 (图3, 4) 。在整个测试浓度范围内, 野百合鳞茎提取物的抑菌活性随浓度的增加而增强 (图3) 。当提取物在0.05~0.1 g/m L时, 其剂量-效应曲线斜率较大, 抑菌活性显著增强。当提取物浓度达到1.0 g/m L时, 野百合对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强, 其次为蜡状芽孢杆菌, 之后依次为枯草芽孢杆菌、革兰氏阴性菌产气杆菌、沙门氏菌和大肠杆菌。

由图4可知, 在整个测试浓度范围内, 随兰州百合鳞茎提取物的含量增加, 其抑菌作用显著增强。提取物含量在0.25~0.75 g/m L浸膏时, 剂量-效应曲线斜率最大, 抑制效果变化明显。当提取物浓度为1.00 g/m L时, 兰州百合对对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强, 其次为枯草芽孢杆, 之后依次为蜡状芽孢杆菌, 革兰氏阴性菌沙门氏菌、大肠杆菌和产气杆。

注:提取物浓度为0.1g/m L-1g/m L。

由表2可知, 两种百合鳞茎提取物含量与其对沙门氏菌、产气杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌的抑制作用之间存在着自然指数线性相关关系, 而对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑制活性与两种百合的鳞茎提取物含量之间存在着自然对数线性相关关系。回归方程与原始数据的拟合度胶合, 经F检验, 回归方程具有显著统计意义 (P<0.05) 。

3 结论

野百合和兰州百合鳞茎提取物对测试的6种细菌均具有一定的抑制作用, 对革兰氏阴性细菌的抑制作用低于对革兰氏阳性细菌的抑制作用, 且野百合鳞茎提取物的抑菌活性均高于传统食用的兰州百合;百合鳞茎提取物的抑菌作用与提取物浓度之间存在明显的剂量-效应, 即百合鳞茎提取物的抑菌作用随着提取物浓度的升高而增强。

摘要：以兰州百合为对照, 采用纸片琼脂扩散法测定了野百合甲醇提取物对6种细菌的抑制活性, 并对其提取物的含量与抑菌活性进行了剂量-效应关系分析。结果表明, 2种百合鳞茎提取物对6种细菌均具有抑制活性, 且野百合对6种细菌的抑菌活性均高于普通食用的兰州百合;2种百合鳞茎提取物含量与抑菌活性的之间存在明显的剂量-效应关系, 即百合鳞茎提取物含量的升高, 其抑菌活性增强。

关键词：野百合,提取物,抑菌作用