实验室风险评估程序

第一篇：实验室风险评估程序

病原微生物实验室评估程序-定稿

附件

高致病性病原微生物实验室资格审批工作程序

第一章

总

则

第一条

为确保高致病性病原微生物实验室资格审批(以下简称资格审批)工作的公正、公开、公平，依据《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法》(以下简称《办法》)等，制定本程序。

第二条

高致病性病原微生物实验室是指三级、四级生物安全实验室;高致病性病原微生物是指卫生部颁布的《人间传染的病原微生物名录》中规定的第一类、第二类病原微生物。

第三条

资格审批工作包括申报、评估论证、批准。

第四条

实验室资格审批的申请资料，经所在地省级卫生行政部门审查同意后，向卫生部申报。

第二章

申

报

第五条

申请高致病性病原微生物实验室资格的单位应具备《办法》第六条规定的条件。

第六条

申请高致病性病原微生物实验室资格应按照《办法》第七条的规定，提交完整的资料。

《高致病性病原微生物实验室资格申请表》可从卫生部网站下载(网址：)。

第七条

所有申请资料应一式1份。申请资料应当使用A4规格纸张打印(中文使用宋体小4号字，英文使用12号字)。申报的各项内容 1 应当完整、清楚。申请资料的复印件应当足够清楚并与原件一致。所有申请资料应加盖申请单位公章。

第八条

申请单位将符合要求的申请资料报送省级卫生行政部门。省级卫生行政部门对申请资料的合法性、完整性及规范性进行审核。对申请材料不齐全或者不符合规定形式的，应当在5日内出具申请材料补正通知书;对申请材料齐全或者符合规定形式的，应当在15日内提出初审意见，并将初审意见和有关资料报卫生部。

省级卫生行政部门应当直接向卫生部报送资料，不得委托申请单位向卫生部报送资料。

第九条

卫生部收到申报资料后，对申报资料进行形式审查。符合要求的，在30日内完成现场评估论证工作。

第三章

现场评估论证

第十条

卫生部组织专家组进行现场评估论证，有关要求书面告知申请单位。

第十一条

专家组由5～7名相关专业的专家组成，专家由卫生部从病原微生物实验室生物安全专家库中选取。专家组组长由卫生部指定，为现场评估论证工作技术总负责人。

卫生部可指派1~2名管理或专业人员以观察员的身份参加现场评估论证工作。

第十二条

现场评估论证时间一般为2~3天。在现场评估论证前，专家组长应当提前制定现场技术考核初步计划。

第十三条

卫生部应当在专家组到达评估地前3天将其人员组成情况告知申请单位。申请单位如对专家组成员有异议的，应当在接到通知

2 后24小时内提出需回避的专家名单，并说明理由，由卫生部做出是否回避的决定。

第十四条

现场评估程序包括：专家组预备会议、首次会议、资料审查、实验室考察、现场模拟操作考核、理论知识测试、专家组内部会议、末次会议等。

专家组依据计划进行现场评估论证，申请单位应积极配合，并提供相应协助。

第十五条

专家组在现场评估论证工作开始前召开全体专家组成员参加的预备会议，会议内容包括：

(一)专家组长重申评估论证工作的公正、客观、保密要求，专家组全体人员签署公正性声明和保密协议;

(二)明确评估范围、内容、依据和要求;

(三)明确评估日程和专家组成员分工，确定现场技术考核计划，准备现场评估和论证所需考核试题等有关资料和表格。

第十六条

召开首次会议。参加会议人员包括专家组成员、申请单位负责人及相关人员。会议由专家组组长主持，会议程序及内容如下：

(一)介绍专家组成员和分工;

(二)宣布现场评估论证工作安排、要求和时间表;

(三)明确评估的方法、程序和评定原则;

(四)向申请单位做公正和保密的承诺;

(五)申请单位负责人报告工作情况;

(六)与申请单位确认现场评估所需现场操作和面试考核项目以及被考核人员名单。

3 第十七条

资料审查。专家组审查实验室生物安全手册、程序文件、危害评估报告、标准操作程序、相关记录表格以及《高致病性病原微生物实验室从事实验活动资格现场检查表》涉及的其他资料，并对审查情况进行记录。

第十八条

实验室考察。由专家组根据《高致病性病原微生物实验室从事实验活动资格现场检查表》的内容对实验室进行实地考察，并对考察情况进行记录。

第十九条

现场模拟操作考核。由专家组从实验室操作人员名单中抽取30%的人员(不少于4人)进行现场操作考核，并对考核情况进行记录。

现场模拟操作考核题目由专家组制订，现场操作应涉及申请范围的主要项目，应当覆盖主要仪器设备、主要人员和主要操作技术。

由每名参试人员抽取1个题目进行现场操作，由2位专家组成员进行评判。评判标准依据实验室的标准操作程序。

第二十条

理论知识测试。采取面试形式，全体实验室人员均应参加，参加现场模拟操作考核的人员除外。由2位专家组成员组成考核组，对每名被考核人员进行单独面试并进行评判。

面试考核内容及评判标准依据为《传染病防治法》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法》(卫生部令第50号)、《人间传染的病原微生物名录》、《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》(卫生部令第45号)、《实验室生物安全通用要求》(GB 19489—2004)、本实验室生物安全手册、程序文件、标准操作程序(SOP)以及WHO生物安全手册第三版等相关内容。

4 接受现场操作及面试考核的人员中，未合格者应当重新培训，经考核合格后方能上岗。

第二十一条

专家组内部会议。由专家组组长主持，全体专家组成员参加，会议程序及内容：

(一)专家组成员分别报告资料审查、现场模拟操作考核、理论和知识测试、实验室检查等结果，讨论并提出评估论证意见;

(二)编写并通过《高致病性病原微生物实验室从事实验活动资格现场评估论证报告》。

第二十二条

末次会议。会议由专家组组长主持，参加人员包括专家组成员、申请单位负责人及相关人员。会议程序及内容：

(一)专家组组长宣读评估论证报告及审查结论;

(二)专家组指出存在的问题，提出整改建议;

(三)专家组与申请单位人员沟通交流意见。

第二十三条

专家组长应在现场评估论证结束之日起5日内将评估论证报告、原始记录及有关资料移交卫生部。评估论证报告应当由专家组全体成员签字。

申请单位应按照专家组提出的整改意见，在三个月内完成整改工作，并向卫生部提交整改报告。卫生部在收到整改报告之日起的20日内完成整改复核工作。整改复核工作由原现场评估论证专家组成员完成。

第四章

批

准

第二十四条

卫生部在收到专家组评估论证报告或者整改复核意见之日起20日内，做出是否批准的决定。对予以批准的，由卫生部颁

5 发《高致病性病原微生物实验室资格证书》。对不予批准的，由卫生部书面通知申请单位，并说明理由。申请单位对卫生部不予批准结论有异议的，可自收到通知书之日起15日内书面向卫生部提出复核申请，逾期不予受理。

未通过资格审批的单位，6个月之后可以重新申请。

第二十五条 《高致病性病原微生物实验室资格证书》的有效期为五年。实验室需要继续从事高致病性病原微生物实验活动的，应在有效期满前6个月按照本程序规定，重新申请《高致病性病原微生物实验室资格证书》。

第五章

评估论证工作纪律

第二十六条

专家组成员不得与申请单位有利害关系，否则应主动提出回避;卫生行政部门工作人员不得作为专家组成员参加评审。

第二十七条

专家组成员要严格按照指定的时间到达和离开现场评估目的地。评审期间，专家组成员不得私下与申请单位联系和接触、传递评审相关信息;专家组各项费用由卫生部负责。专家组在评审地的接待工作由省级卫生行政部门安排，严禁申请单位参加接待工作。专家组不得提出任何与评审工作无关的要求。

第二十八条

现场评估过程中，严禁申请单位弄虚作假，严禁通过任何形式对评审施加压力，严禁以各种理由不予配合或拒绝检查。如果出现上述问题，专家组有权终止评审，卫生部也将不予批准。

第六章

附

则

第二十九条

本程序自颁布之日起施行。

第二篇：安全卫生风险鉴别评估程序

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安全卫生风险鉴别评估程序

1.目的

建立并维持程序以鉴别与评估所有作业或活动的安全卫生风险，并对鉴别出的安全卫生风险以登录和区分，列出重点和优先次序，以便采取相应的措施(包括技术和管理两个方面)对风险加以控制。

2.范围

一切具安全卫生风险的作业或活动，生产过程中存在的尘毒、噪声、触电、腐蚀、燃烧、爆炸、打击、坠落、碰撞、铰辗、刺割等危险因素,以及可能的对供应商/承包商的要求。

3.权责

3.1由安全主任会同各部门安全负责人定期对危险因素进行评估,并针对性地制定预防整改措施; 3.2各部门相关人员给予协助、配合; 3.3相关部门负责落实预防整改措施; 3.4安全主任对各项预防整改措施的落实情况实施监督、检查,并评核其有效性; 3.5社会责任委员会进行稽查，并对不符项提出整改要求。 4.程序

4.1 成立鉴别与评估小组

4.1.1安全卫生风险的鉴别与评估由社会责任及安全卫生管理代理人负责。

4.1.2成立由社委会、该作业或活动的部门主管、直接参加人或代表组成的安全卫生风险鉴别与评估小组。

4.1.3小组成员需对该作业或活动有深入的认识或经验，以及具备对风险和作业有一定的分析能力。

4.1.4对具重大风险和影响者，如公司内部缺乏合适的分析评估人员时，需聘请或咨询外部有关专业人士。

4.2确定鉴别与评估风险的准则

4.2.1 根据公司生产经营实际情况，确定适宜的鉴别与评估风险的准则。

4.2.2 安全卫生风险不仅针对人员健康伤害，也包括造成生产、财产损失及环境冲击。 4.2.3 在鉴别与评估安全卫生风险的过程中，须考量下列各相关项：

a.化学性危害，包括吸入、皮肤吸收、误食或错误注射有毒害之烟雾、蒸气、液体、粘液等。 b.物理及机械性危害包括噪声、振动、辐射、温度、压力、雷射、微波、紫外线、坠落、撞击、机具切割、夹、卷等。

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c.生物性危害，包括病毒、细菌、原生虫、昆虫等。

d.人体工学性危害，包括疲劳、作息周期的影响、超时工作的负荷、单调重复性的工作、在固定的速率中工作、精神性和其他的压力。

4.2.4在执行鉴别与评估安全卫生风险时，必须考虑下列事项所导致的不利情况： a.正常操作条件。

b.异常操作条件，包括停、开车的情形。 c.突发事件、意外事件以及潜在的紧急状况。 d.过去、现在以及规划的活动。 4.3先期安全卫生审查

4.3.1审查的目的，在于涵盖所有的安全卫生风险，了解公司安全卫生状况，以做为建立安全卫生管理系统的基础，同时提供明确的数据与结果，作为日后持续改善安全卫生绩效的基准。

4.3.2审查必须涵盖五类关键课题： a.法令规章之要求事项。 b.重大安全卫生风险之鉴别。

c.所有现行社会责任及安全卫生管理措施与程序之检视。 d.以往突发事件调查结果回馈之评估。 e.利害相关者(员工、工会等)之观点。 4.4鉴别与评估的方法

4.4.1按照“物(不安全状态)—人(不安全行为)—环境—管理”进行分类，采用查核表、访谈、直接的检查与量测、以往的稽核结果、危害与可操作分析、假设状况分析、失误模式与影响分析等方法来进行分析与审查。识别生产过程中存在或潜在的危险因素,包括危险设备、危险物质和危险工种;

4.4.2 将存在危险因素的工作分成若干顺序的步骤,并对每个步骤进行安全分析, 识别出每一个工作步骤的危险源、危险部位、起因物和致害物;

4.4.3对这些潜在危险可能造成人员受伤、财产受损和生产延误的风险程度进行深入的分析、评估;通过审查，对各类作业或活动进行筛选和分类，对鉴别出的风险予以登录，并列出重点和优先次序。

4.4.4 根据公司阶段性政策、作业或活动特性、成本/效益分析和技术面的取舍，对具安全卫生风险(尤其是具显著风险者)的作业或活动采取相应的措施(包括技术和管理两个方面)，以控制或降低其风险,制定针对性的预防整改措施;

4.4.5找出受到或可能受到危险因素伤害的人员,对这些人员进行相关培训,以提高他们的安全意识和操作技能,并提供适当的个人防护用品;相关部门按照整改预防措施认真落实整改,以消除、减少和限制潜在的危害。

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4.4.6注重对相关资讯、文献和案例的搜集、整理和分析，为后续设计、改造、控制及鉴别与评估安全卫生风险提供借鉴与指引。

4.5鉴别评估的频率

4.5.1对已经鉴别与评估出的具重大安全卫生风险(高于某一特定程度，可能造成人员伤害、生产停顿、超过一定金额的财产损失或对环境产生重大危害)的作业或活动，每半年重新评估一次;如在日常运作或检查中发现风险有增加的趋势，则应适时进行重新评估，并采取相应措施。 4.5.2引入新的具危害性的作业或活动，或者作业或活动重要构成要素发生变更，有关责任人应及时将情况报社委会，由社委会组织鉴别与评估小组适时进行风险鉴别与评估，并根据评估结果采取相应措施。

4.5.3每年对中度及以上风险重新鉴别与评估一次。

4.5.4根据重新鉴别与评估结果，维持对重大安全卫生风险登录表之更新。 4.6 安委会负责本程序的制订、审查和修订。

第三篇：资产评估准则评估程序讲解

《资产评估准则——评估程序》讲解 崔劲 主要内容

程序准则制定的依据 程序准则相关问题分析

与《操作规范意见》的比较与说明 程序准则讲解

程序准则制定的依据(基本准则) 第十二条 注册资产评估师执行评估业务，应当根据业务的具体情况履行适当的评估程

序。

第十三条 评估程序包括八项内容 明确评估业务基本事项 签订业务约定书 编制评估计划 现场调查 收集评估资料 评定估算

编制和提交评估报告 工作底稿归档 相关问题分析

我国评估行业缺乏对评估程序的研究与规范 评估实践发展对规范程序提出更高要求

评估准则有利于法律责任的界定(行业进入高法律风险阶段) 评估程序准则是评估质量的基础保证 资产评估基本准则的制定基础 国际评估准则对评估程序的规范 与《操作规范意见》比较与说明(1) 《操作规范意见》

第三章“资产评估操作程序”中对评估机构自接受评估项目委托起至完成评估项目、建立项目档案止的操作程序规定了15项。

《程序准则》

根据基本准则的要求将有关内容进行了归纳，例如将第5项指导资产占有单位清查、填报，搜集准备资料，第6项检查核实资产，验证资料;第7项检测鉴定资产的相关内容归纳为“现场调查程序”。增加“收集评估资料程序”，将第8项选择评估方法和计算公式;第9项针对具体对象进行评定估算合并为“评估估算程序”。

与《操作规范意见》比较与说明(2) 《操作规范意见》

第25条:评估机构必须派出足够数量、富有经验的专职业务人员到现场检查核实资产占有单位进行的清查情况，验证所提供的资料。要逐项核查建筑物、机器设备、在建工程;逐笔检查长期投资、无形资产、递延资产和货币资金、应收及预付款项、短期投资等资产及负债。

《程序准则》

第十七条 应当根据评估业务具体情况对评估对象进行适当的现场调查。 第十八条 要求委托方提供涉及评估对象和评估范围的详细资料。要求委托方或者产权持有者对其提供的评估明细表及相关证明材料以签字、盖章或者其他方式进行确认。

与《操作规范意见》比较与说明(2)(续) 《程序准则》

第十九条 注册资产评估师应当通过询问、函证、核对、监盘、勘查、检查等方式进行调查，获取评估业务需要的基础资料，了解评估对象现状，关注评估对象法律权属。

第二十条 注册资产评估师在执行现场调查时无法或者不宜对评估范围内所有资产、负债等有关内容进行逐项调查的，可以根据重要程度采用抽样等方式进行调查。

第二十一条 注册资产评估师应当根据评估业务需要和评估业务实施过程中的情况变化及时补充或者调整现场调查工作。

与《操作规范意见》比较与说明(3) 《操作规范意见》

第22条 一个评估项目只能有一个评估基准日。在征求委托方意见的基础上，评估机构选定评估基准日--- 程序准则

明确评估业务基本事项中，提示评估基准日由委托方确定。 与《操作规范意见》比较与说明(4) 程序准则增加了风险评价程序

第十二条 注册资产评估师应当根据评估业务具体情况，对自身专业胜任能力、独立性和业务风险进行综合分析和评价，并由评估机构决定是否承接评估业务。 准则内容介绍 程序准则 共四章33条 第一章 总则(1-4条) 第二章 基本要求(5-10条) 第三章 评估程序要求(11-32条) 第四章 附则(33条) 第一条 为规范注册资产评估师履行评估程序行为，维护社会公共利益和资产评估各方当事人合法权益，根据《资产评估准则——基本准则》，制定本准则。

讲解: “资产评估各方当事人”具体对象包括注册资产评估师、委托方和相关当事方 第二条 本准则所称评估程序，是指注册资产评估师执行资产评估业务所履行的系统性工作步骤。

第三条 注册资产评估师执行资产评估业务，应当遵守本准则。 讲解: 所称程序涵盖评估业务全过程，按照评估业务的进展步骤阐述具体程序。只有履行了合理有效的评估程序，才能出具评估报告。

评估程序的要求既是对注册资产评估师的要求，也是对评估机构的要求。本准则中仍以“注册资产评估师”为规范主体，对其执行评估业务提出要求。

第五条 注册资产评估师执行资产评估业务，应当遵守法律、法规和资产评估准则的相关规定，履行适当的评估程序。

第七条 注册资产评估师应当根据本准则，结合评估业务情况，制定并实施适当的具体评估程序。

讲解: 基本评估程序是注册资产评估师执行一项完整评估业务时应该履行的主要重点工作步骤及要求，针对每一基本程序还应有具体的实施安排或步骤，评估师应当根据评估对象、评估范围、业务规模的不同，在制定评估计划时落实现场调查、收集评估资料、确定估算方法的具体实施步骤。

具体评估步骤可按照不同评估对象、不同评估方法分别确定。

第八条 注册资产评估师在执行评估业务过程中，由于受到客观限制，无法或不能完全履行评估程序，可以根据能否采取必要措施弥补程序缺失和对评估结论是否产生重大影响，来决定继续执行评估业务或终止评估业务。

讲解: 1.主观限制与客观限制

2.如果重大限制将对报告评估目的下的评估结论的合理性产生重大影响，应与委托方沟通，当委托方明知限制无法排除而又拒绝接受明确充分披露下的评估结论，或评估师认为即使进行充分披露也将影响报告的合理性时，注册资产评估师应提出终止评估业务的要求，解除业务约定书。

第九条 注册资产评估师应当指导业务助理人员履行评估程序。 第十条 注册资产评估师应当记录评估程序履行情况，形成工作底稿。 讲解: 资产评估基本准则与职业道德准则中指出，注册资产评估师应当指导业务助理人员遵守本准则，这就要求注册资产评估师要有引导相关协助人员的工作能力，对他们的工作要有控制能力与管理能力，并对业务助理人员的工作结果负责。

为规避风险、规范执业，要求注册资产评估师对评估对象的调查、评定估算等工作程序与工作步骤形成书面或电子记录，收集评估依据，形成工作底稿。形成的工作底稿应具体、详细、完整。

第十一条 注册资产评估师应当明确下列评估业务基本事项: 委托方、产权持有者和委托方以外的其他评估报告使用者; 评估目的; 评估对象、评估范围; 价值类型; 评估基准日; 评估报告使用限制; 委托协议书相关内容; 评估报告提交时间及方式; 评估服务费总额、支付时间和方式; 委托方与注册资产评估师工作配合和协助等其他需要明确的重要事项。 讲解: 理解在评估前期明确价值类型的作用

价值类型是影响和决定资产评估价值的重要因素

专业评估师应避免使用未经限定的“价值”概念而应对所涉及的特定价值类型进行详细描述

价值类型制约评估方法的选择

明确价值类型，可以更清楚的表达评估结果，可以避免报告使用者误用评估结果

具体按价值类型准则要求

第十二条 注册资产评估师应当根据评估业务具体情况，对专业胜任能力、独立性和业务风险进行综合分析和评价，并由评估机构决定是否承接评估业务。

第十三条 评估机构在决定承接评估业务后，应当与委托方签订业务约定书。评估目的、评估对象、评估基准日、或者评估范围发生重大变化，评估机构应当与委托方签订补充协议或重新签订业务约定书。 讲解: 1. 评估项目风险。一般业务风险主要有来自委托方的风险，来自产权持有者(资产占有方)的风险，来自评估对象的风险，评估报告使用中的风险等等。

2. 专业胜任能力。评估机构和评估师应当根据所了解的评估业务的基础情况和复杂性，分析本机构和评估人员是否具有与该项目相适应的专业胜任能力及相关经验，判断是否有来自注册资产评估师及助理人员执业能力不足而带来的风险。

3. 判断项目是否存在明显或潜在的利益冲突，确认与委托人或相关当事方是否存在现实或潜在的利害关系。

第十四条 注册资产评估师应当编制评估计划。评估计划的内容涵盖现场调查、收集评估资料、评定估算、编制和提交评估报告等评估业务实施全过程。

评估计划通常包括履行的具体步骤、时间进度、人员安排和技术方案等内容。 注册资产评估师可以根据评估业务具体情况确定评估计划的繁简程度。 讲解: 评估计划一般在项目开展前编制，为保证各种资源最有效的配置并合理利用，需要对未来可能进行的所有主要评估工作进行规划，依照评估工作程序的要求对现场调查、收集评估资料、评定估算、编制和提交评估报告等评估工作的各个具体环节进行规划，具体对评估步骤、工作进度安排、专业人员、时间、重点关注的事项等内容加以明确。

第十七条:注册资产评估师执行资产评估业务，应当根据评估业务具体情况对评估对象进行必要的现场调查。

讲解: 现场调查是对评估对象相关情况的调查，是注册资产评估师为获得被评估对象的基础资料，核实评估对象的存在性和完整性，勘查评估对象的品质和使用状况，查验评估对象的法律权属资料，通过询问、核对、勘查、函证等方式进行的一系列尽职调查工作。一般包括:(1)获得需要评估的资产清单;(2)核实评估对象的存在性及完整性;(3)对评估对象品质、使用状况的现场勘查;(4)对评估对象的法律权属资料的查验等，应涵盖了解所有评估对象各种信息的工作。

现场调查应当在评估对象或评估业务涉及的主要资产所在地进行。 注册资产评估师通常应当对评估业务涉及的主要资产进行资产勘查。 第十八条 注册资产评估师应当要求委托方提供涉及评估对象和评估范围的详细资料。

注册资产评估师应当要求委托方或产权持有者对填制的评估明细表及相关证明材料以签字盖章或者其他方式进行确认。

第十九条 注册资产评估师应当通过询问、函证、核对、监盘、勘查、检查等方式进行调查，获取评估业务需要的基础资料，了解评估对象现状，关注评估对象法律权属。

讲解: 由于委托方和产权持有者可能不是同一个企业或组织，产权持有者有义务提供相关资料并保证资料的真实、合法和完整，委托方也有义务督促产权持有者提供相关资料。产权持有者应该对评估对象进行核实，填写资产清查评估申报明细表。

需要盖章确认的资料一般为评估对象或评估范围明细表、有关证明材料等。 第二十条 注册资产评估师在执行现场调查时无法或不宜对评估范围内所有资产进行逐项调查的，可以根据重要程度采用抽样等方式进行调查。

第二十一条 注册资产评估师应当根据评估业务需要和评估业务实施过程中的情况变化及时补充或调整现场调查工作。

讲解: 注册资产评估师实施抽查方法，是从评估对象总体中选取一定数量的样本进行测试，并根据测试结果，推断总体特征的方法。 注册资产评估师在设计与选择样本、评价抽样结果时，应当运用专业判断。 第二十二条 注册资产评估师应当根据评估业务具体情况收集评估资料，并根据评估业务需要和评估业务实施过程中的情况变化及时补充收集评估资料。

第二十三条 注册资产评估师收集的评估资料包括直接从市场等渠道独立获取的资料，从委托方、产权持有者等相关当事方获取的资料，以及从政府部门、各类专业机构和其他相关部门获取的资料。

评估资料有查询记录、询价结果、检查记录、行业资讯、分析资料、鉴定报告、专业报告及政府文件等形式。

讲解: 收集评估资料主要是规范注册资产评估师在执行评估业务过程中根据评估业务具体情况收集评定估算需要的评估相关资料。评估工作资料是评估师在现场调查后，进行评估时的必备资料，与现场调查所收集的的相关资料是不同的。注册资产评估师需要进一步了解获取与判断评估对象价值相关的其他资料，如市场调查资料、政府部门的有关规定、相关专业机构的分析报告或文件等，作为评估作价的依据。

第二十四条 注册资产评估师应当根据评估业务具体情况对收集的评估资料进行必要的分析、归纳和整理，形成评定估算的依据。

讲解: 资产信息资料的分析，指对资产信息资料合理性和可靠性的识别。 信息资料本身的可靠性可通过参考其他来源查证，必要时也可以进行适当的调查验证。

第二十五条 注册资产评估师应当根据评估对象、价值类型、评估资料收集情况等相关条件，分析市场法、收益法和成本法等各种资产评估基本方法的适用性，恰当选择评估方法。 第二十六条 注册资产评估师应当根据所采用的评估方法，选取相应的公式和参数进行分析、计算和判断，形成初步评估结论。

讲解: 1. 评估方法的选择应当与评估目的、评估时的市场条件、评估对象所处状态以及评估的价值类型相适应。

2. 评估方法选择应与评估对象的类型、现实状态等相适应。 3. 评估方法的选择也应当与占有资料的情况相适应。

4. 选取评估方法包括选择评估技术思路、实现评估技术思路的具体方法以及选择技术经济参数等内容

第二十七条 注册资产评估师应当对形成的初步评估结论进行综合分析，形成最终评估结论。

注册资产评估师对同一评估对象采用多种评估方法的，应当对各种方法产生的初步评估结论进行分析比较，确定最终评估结论。

讲解: (一)注册资产评估师应当正确地对一种评估方法下的初步结论进行分析，判断评估结论的合理性。

1. 注册资产评估师应当对评估资料的全面性、客观性及适时性，参数选取的合理性及适时性，计算公式的正确性，计算表格链接的正确性等进行分析; 2. 将评估结论再次核实是否与明确评估目的及价值类型相适应。进行相关增减值分析判断评估结论的合理性。

(二)注册资产评估师应当知晓，如果采用了多种评估方法，不仅要确保满足各种评估方法适用的条件要求和程序要求，还要对各种评估方法取得的各种价值结论进行比较，最终确定评估结论。 第二十九条 注册资产评估师应当根据相关法律、法规、资产评估准则和评估机构内部质量控制制度，对评估报告及评估程序执行情况进行必要的内部审核。

第三十条 注册资产评估师提交正式评估报告前，可以在不影响对最终评估结论进行独立判断的前提下，与委托方或委托方许可的相关当事方就评估报告有关内容进行必要沟通。

第三十一条 注册资产评估师完成上述评估程序后，由其所在评估机构出具评估报告并按业务约定书的要求向委托方提交评估报告。

讲解: 1.评估报告出具前应该进行内部复核

2.在提交正式评估报告前，注册资产评估师可以与委托方或委托方许可的相关当事方就评估报告有关内容进行必要沟通

3.提交报告的方式

第三十二条 注册资产评估师在提交评估报告后，应当按照法律、法规和资产评估准则的要求对工作底稿进行整理，与评估报告一起及时形成评估档案。

讲解: 评估机构应该有明确的档案建设和档案管理意识 资产评估档案规范化管理

第四篇：输血实验室管理程序

1. 目的

为规范输血科(血库)实验室工作，确保工作质量和保障临床输血安全，依据《质量手册》7.5.1(4)条款的要求制定本程序。

2. 适用范围

适用于输血科(血库)实验室的常规工作及其影响因素的管理。

3. 职责

3.1输血科(血库)主任或负责人

3.1.1确定检测项目、方法和检测系统。 3.1.2组织编写实验室体系文件。

3.1.3组织实施对检测方法和程序的确认。 3.1.4合理安排人员、设备开展血液检测工作。 3.1.5负责实验室的质量监督、管理。

3.1.6制定和落实于实验室工作相关的纠正和预防措施。 3.2输血科(血库)技术人员

3.2.1负责受血者血标本的审核、接受、检测、保存和销毁。

3.2.2负责ABO和RhD血型鉴定、红细胞不规则抗体筛选、交叉配血等常规工作以及疑难血标本的送检。

3.2.3负责实验后检测报告的审核、签发，检测后血标本的保存、销毁以及检测结果的解释与咨询服务等工作。

3.2.4负责室内质控和室间质评。 3.2.5负责实验室试剂管理。

3.2.6负责实验室仪器设备的维护保养。 3.2.7负责实验室生物安全。

3.2.8负责实验室原始资料的保存、统计和定期归档。

4. 管理程序

4.1实验前管理

4.1.1环境：实验室的温度和湿度等环境要求符合有关规定。

4.1.2人员：具有国家认定的卫生技术职称，须接受输血检验技术培训，经考核合格后方可上岗。

4.1.3检验仪器：仪器的生产商和(或)供应商须具有国家规定的相应资质，三证齐全(产品注册证、生产许可证、经营许可证)。仪器设备应定期维护、校准，关键仪器设备在新进或大修后应进行确认。计量器具应符合检定要求，有检定合格标识，执行《仪器设备的确认、维护和校准管理程序》。仪器设备档案应有专人管理，有使用、维护和校准记录，日常使用、保养填写《输血科(血库)仪器设备使用、保养记录》。

4.1.4试剂：试剂的生产商和(或)供应商须具有国家规定的相应资质，三证齐全(产品注册证、生产许可证、经营许可证)，其中ABO血型鉴定单(多)克隆试剂要通过批批检，在有效期内使用，使用前进行质控，并做相应记录。 4.1.5血标本：执行《血标本管理程序》。 4.1.6检测项目、方法的选择：输血检测项目、方法必须符合《全国临床检验操作规程》等法规要求，新的或有变化的检测项目和方法使用前必须经过确认，保证符合预期的实验要求。 4.1.7输血前检测项目

(1)ABO和RhD血型鉴定：执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》、《ABO疑难血型鉴定标准操作规程》、《Rh血型C、E、c、e抗原鉴定标准操作规程》、《弱D抗原鉴定标准操作规程》。

(2)交叉配血试验：执行《交叉配血试验标准操作规程》、《疑难交叉配血试验标准操作规程》和《紧急非同型交叉配血试验标准操作规程》。

(3)交叉配血试验相合后需在血袋上贴上《交叉配血相容性标签》，内容包括受血者姓名、床号、病案号、ABO血型、RhD血型、交叉配血实验结果、配血者及配血日期。目的是防止输错血，尤其是换血时将血拿错。 4.1.8输血前检测试验方法

(1)检测IgG抗体的方法：执行《凝聚胺实验标准操作规程》、《抗球蛋白实验标准操作规程》、《微主凝胶实验标准操作规程》。

(2)疑难血型及红细胞不规则抗体辅助检测方法：执行《吸收实验标准操作规程》、《放散实验标准操作规程》。

4.1.9输血相关试验检测项目

(1)新生儿溶血病检测试验：执行《新生儿溶血病血型血清学检测标准操作规程》和《新生儿溶血病产前血型血清学检测标准操作规程》。

(2)红细胞血型物质测定试验：执行《ABH血型物质检测标准操作规程》。

(3)红细胞血型抗体检测试验：执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程》、《红细胞血型抗体效价测定标准操作规程》和《冷凝集素实验标准操作规程》。

(4)血小板抗体筛选试验：执行《血小板抗体(固相凝集法)检测便准操作规程》。 (5)免疫性溶血性输血不良反应查因试验：执行《免疫溶血性输血反应检测标准操作规程》。 (6)试剂红细胞制备：执行《A、B、O型试剂红细胞制备标准操作规程》。

4.1.10输血不良反应需要做进一步查因试验：执行《HLA-I/Ⅱ类血清学分类标准操作规程》、《HLA抗体(ELISA法)检测标准操作规程》及 《HLA抗体(淋巴细胞毒试验法)检测标准操作规程》。 4.2实验检测 4.2.1试验检测

(1)根据试验目的选择适宜的检测项目和方法。

(2)检测仪器设备：应用仪器设备执行《血型血清学专用离心机(KUBOTA KA-2200型)标准操作规程》、《水浴震荡仪标准操作规程》、《生物安全柜标准操作规程》等。 (3)按项目操作规程要求准备试剂。 4.2.2检测过程

(1)输血科(血库)技术人员按项目操作规程对血标本进行检测。 (2)常规输注血液应按相关规定进行相容性检测。

(3)择期输血的患者应进行ABO、RhD血型检测，输血前应复查血型。

(4)交叉配血前可进行红细胞不规则抗体筛选试验，当受血者、献血者血标本红细胞不规则抗体筛选为阴性时，可仅采用盐水交叉配血方法。

(5)若未进行献血者或受血者红细胞不规则抗体筛选检测，交叉配血试验必须采用能检出IgG不完全抗体的方法。

(6)若输血科(血库)血型复核检测与申请血型不符时，应重新采集血标本复核，执行《血标本管理程序》。 (7)凡遇有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者，必须按《全国临床检验操作规程》有关规定作红细胞不规则抗体筛选试验，执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程》。

(8)献血者的血液在输血前需再次进行ABO、RhD血型复核，确保献血者血型准确无误。 (9)按要求对每批实验开展室内质量控制，执行《室内指控标准操作规程》。

(10)按要求参加国家卫生部和(或)省临检中心组织开展的室间质评活动，执行《室间质评标准操作规程》。

4.2.3实验有效性判断：输血科(血库)技术人员按《室内质控标准操作规程》和各自检测项目操作规程中“指控要求”对实验的有效性进行判断。

4.2.4结果判断：输血科(血库)技术人员按照各项目操作规程“结果判断”的内容执行。 4.2.5检测结果的数据传输和处理：完整、准确地对检测结果的数据进行传输和处理，执行《输血管理信息系统标准操作规程》。

4.2.6疑难血标本的送检：对于ABO正反定型不一致、交叉配血不合等本实验室不能解决的疑难问题，需送检有条件的实验室检测。 4.2.7纠正措施

(1)由于各种原因导致检测过程中未能按预定程序完成，输血科(血库)主任或负责人应对该批饰演的结果进行充分评估，以防止不合格报告发放。

(2)当检测过程出现质量问题时，输血科(血库)主任或负责人应进行全面调查和原因分析，采取纠正措施，保证检测的准确性。

(3)输血科(血库)技术人员如遇到本人不能确定的结果时，应请示资深技术人员，必要时应重复进行试验。

(4)疑难实验项目可有输血科(血库)主任或负责人组织本实验室专业人员对检测结果进行讨论分析。

(5)发现检测结果有疑问时，应通知申请科室重新送检血标本，不得将有疑问的报告发往临床科室。 4.3实验后管理

4.3.1检测报告内容：报告应格式规范，文字表述正确，清晰易懂，应当使用中文或国际通用的、规范的缩写。报告中应包括且不限于以下内容：

(1)实验室名称、受血者姓名、性别、年龄、病案号、献血者血液信息。 (2)检测项目、检测结果和单位、参考范围、检测结论、异常结果提示。 (3)操作者、审核者、标本接收时间、报告时间。 (4)其他需要注释的内容。 4.3.2报告的审核、签发 (1)血型鉴定和交叉配血试验必须坚持复核制度。两个或两个以上值班时由两人互相核对;一人值班时，操作完毕后自己复核。最好加盖“已复核”印章，签名后方可发出报告。 (2)签发报告人员需要授权，实习人员及进修人员无权签发报告。 (3)实验室确保检验报告在约定时间内送达临床科室。 4.3.3报告的更改

(1)输血科(血库)技术人员在审核、签发检验报告时要认真、仔细，检验报告一旦发出不得随意更改。

(2)未发出的检验报告需要进行补充或更改时，须由原检验者进行，并经原签发报告者核查和批准，报告更改执行《记录管理程序》。

(3)检验报告发出后确需修改时，必须由输血科(血库)主任或负责人授权修改，未经授权的人员不得更改检验报告。 (4)已发出的检验报告需要进行补充或更改时，应将原报告收回、注销，重新发出一份新的检验报告，新报告的编号与原报告一致，经原检验者、原审核者核查和同意后方可发出报告。 (5)《交叉配血报告单》发出后，输血科(血库)技术人员发现报告单有错误，但该血液或相关成分已发至临床时，应立即通知相关临床科室暂缓输血，并立即报告主任或负责人，由主任或负责人与临床联系。若血液尚未输注，立即告知临床停用，并派专人到临床收回该血液及相关成分，若临床正在输注应立即叫停，密切观察患者的反映，采取相应的急救措施;若已经输注完毕，应密切观察患者的反映，并采取相应的补救措施。 4.3.4报告的保存

(1)所有报告均以电子形式或书面形式存档保存。登记信息应该包括标本的唯一性标识、患者信息、检测项目及结果等内容，以备快速检索。 (2)所有报告均应妥善保存。 4.3.5检验结果的解释与咨询服务

(1)输血科(血库)建立并实施《检验结果解释与咨询服务指南》，输血科(血库)技术人员有责任对检验结果接受咨询和进行解释。

(2)检出稀有血型、罕见红细胞血型不规则抗体等，应及时通知经治医师。 4.3.6检测后血标本的保存与销毁，执行《血标本管理程序》。

4.3.7检测后医疗废物处理和实验室清洁，执行《清洁与消毒管理规程》及《医疗废物管理规程》。

第五篇：(财务风险控制)实验室风险评估与风险控制

实验室风险评估与风险控制程序

一、检验职业感染的现状

经血、呼吸道、粘膜传播疾病直接危害着检验工作者身体健康。我国是HBV感染的高发区,约有1.3亿人携带HBV,HBV表面抗原(HBsAg)的携带率为8%-20%;自90年代以来HCV感染也呈上升趋势,其感染率为3%。目前艾滋病感染在我国的流行已进入增长期。在无偿献血人群中检出乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒、艾滋病等病毒感染占有一定的比例。经调查显示,针头和玻璃碎片是主要锐器致伤因子,经常接触针头者发生锐器伤的危险是不经常接触者的23倍。多种传染病是通过血液传染的,而血液检验中的职业暴露大多数来自实验室工作人员在实验操作和标本采集过程中,意外被带病原体的血液污染破损的皮肤或被病原体感染的针头、血常规采血针、采血玻璃管、吸头等锐器刺破皮肤，呼吸道吸入气溶胶也是传播方式之一。因此,检验人员面临着严峻的职业暴露危险。

1.传播途径

检验人员感染疾病的一般传染途径有:

(1)皮肤破损:带有HIV、HBV、HCV、梅毒等病原体的血液,长时间接触小伤口、溃疡、擦伤等破损皮肤,将会造成机体的感染。

(2)穿刺:由于针头、刀片等对皮肤的意外损伤,使带有病毒的全血、血清或血浆进入皮下或循环系统,造成感染。这种针头意外损伤是职业性HBV和HIV感染最重要的原因。带有HIV的针头意外穿刺皮肤后,HIV感染的可能性在0--0.9%之间,平均为0.4%。而对于HBV,这个可能性在6%-30%之间,平均为18%。有学者进行了相应的统计推算,每1000个艾滋病病人,每年会产生1例由于针头意外造成的职业性HIV感染;而每1000个乙肝患者,每年会产生45例类似职业性HBV感染。由于HBV在人群中的感染率比HIV高得多,在一定人群中,每年产生的因针头意外造成的职业性HBV感染比HIV多得多。

(3)粘膜:由于试管未封闭、离心意外等造成的血液飞溅,带有病原体的血液与口腔、鼻腔黏膜或眼结膜等接触,可以造成感染。还有被HIV、HBV、HCV、梅毒等病原体污染的电话、仪器、工作台面等接触,也可以造成感染。

(4)吸入含病原体的气溶胶引起感染:在采血窗口或发放化验单时,直接与病人面对面接触交谈,易感染呼吸道疾病。此外,能引起气溶胶的操作或事故有离心、溢出或溅洒、混合、混旋、研磨、超声以及开瓶时两个界面的分离等。

2.危害因素

(1)血源性危害:调查研究发现,检验人员被针刺伤占第2位。最常见危害较大的职业传染病有以下3种：

1)乙型肝炎:

HBV是检验人员面临传播危险性最大的血源性疾病,HBV在血液中的浓度可以高达108-109拷贝/ml,检验人员感染率较高。HBV主要传播途径是经血液的传播,病毒携带者血液中HBV的浓度很高,针刺伤时,只需0.004ml，带有HBV的血液足以使受伤者感染HBV。

2)丙型肝炎:丙肝病毒(HCV)在血液中的浓度在102-103/ml左右,主要经血液传播,因此通过注射、针刺、含HCV血液污染的伤口和其他密切接触传播。丙型肝炎大多数患者的症状不明显,往往不容易被发现,可表现为流感样症状,有时会造成比HBV更严重的后果。

3)艾滋病(AIDS):近年来我国AIDS的流行对检验人员造成了日益严峻的职业性感染威胁。HIV在血液中的浓度通常在100-104拷贝/ml,被HIV污染的锐器刺伤而感染的比率为0.3%。美国疾病控制中心最新资料显示,截止到2000年底美国医护人员中已有57人被确诊感染了HIV,其中实验室技术人员19人。

(2)呼吸道、接触及节肢动物叮咬危害因素

病原微生物感染：病原微生物实验室、特别是高致病性病原微生物实验室内操作的任何疏忽、失误都可能造成难以弥补的损失。常见感染：结核分枝杆菌、肠道致病菌等。

3.防护措施

(1)增强检验工作人员的防护意识及防护行为：为了最大限度地减少危害,检验工作人员应主动地从多方面了解关于HBV、HCV、HIV等相关的知识,了解各种病毒的传播方式,使自己知道采取什么样的防护措施。医院和检验科应高度重视,定期加强教育,让检验工作人员都意识到自我防护的重要性,自觉地养成良好的习惯。

(2)规范操作程序：各类医疗废物、垃圾必须分类放置,及时消毒后,再由卫生清洁人员取走。特别注意对损伤性医疗废物的及时处理。严格防止感染或致病因子外泄而污染环境。要严格规章制度,养成良好的工作习惯。检验科应制定一套有关卫生防护的规章制度,人人都应自觉遵守。如在实验室内禁止吸烟、吃东西、接听手机;在免疫学检验室和细菌室工作,要戴口罩和手套。防止各种液体飞溅,必需避免手或皮肤直接接触,若有意外污染应及时消毒、冲洗并擦干飞溅出的液体。在离心机停止转动前时,不要打开顶盖,以减少气溶胶的产生。更不要用手去使离心机减速,避免机械损伤的发生。

(3)避免锐器损伤,熟练掌握锐利器械的使用：感染性的各种针管、吸管、吸头、试管、玻片等用后及时放在专用容器内;用过的针头不要套回针帽,避免刺伤。锐器损伤后立即挤出伤口处的血液,用肥皂水和流水清洗伤口,2%碘伏消毒后纱布包扎,可套橡皮指套

(或橡皮手套),下班前洗手再重新消毒包扎,并准确记录上报,确认损伤器械是否来自有传染性疾病的患者,以使受伤者及时得到监测和治疗。

(4)重视手部清洁：院内感染病原体传播最主要媒介是污染的手。戴医用乳胶手套可以为医务人员提供很好的保护。乳胶手套尽管不能避免针头造成的机械损伤,但可以在很大程度上减少皮肤与血液的接触。而且,当针头造成意外损伤后,乳胶手套还可以起到一种阻挡、封闭作用,减少进入伤口的血量,从而降低感染。正确的洗手方法可使手表面的暂居菌减少1000倍,用普通肥皂和清水擦揉15s以上,可清除暂居菌或降低其在皮肤上的密度,搓洗15s,手表面的金黄色葡萄球菌可下降77%,洗2分钟可降低85%;对铜绿假单胞菌效果更好,搓洗12s便可去除92%,洗2分钟可去除97.8%。

(5)职业暴露的局部处理：工作中职业暴露后现场急救处理非常重要,若黏膜暴露应用生理盐水或清水反复冲洗干净;皮肤意外接触到血液等污染物,应立即以肥皂和清水冲洗;若被血液污染的针头或仪器等锐器刺伤,对伤口进行轻轻挤压,尽可能挤出损伤处的血液,用肥皂和流水清洗伤口,用70%酒精、0.2%-0.5%过氧乙酸、0.5%碘伏等浸泡或涂抹消毒,并包扎伤口、带手套等,发生意外伤害暴露后要立即进行伤口局部处理,并立即报告预防保健部门,受伤者及患者进行HBV、HCV、HIV和梅毒等检测。依据检测结果尽快采取相应的补救措施,减少职业感染率的发生。

二、实验室风险评估目的

风险评估的目的就是确定实验室防护等级，建立生物安全防护机制，配备适当的防护用品，采取相应的防护措施。

评估的范围是科室所有涉及到的病原微生物，以及对化学、物理、辐射、电气、水灾、火灾、自然灾害和噪音等进行风险评估。科室管理机构要统筹安排。

评估的结论要十分明确，包括危险程度极低的微生物。

可以根据实验室工作特点、仪器使用，打包评估。

危害性评估始于实验室设计建造之前，实施于实验活动之中，在使用之后还需进行定期的阶段性再评估。

当发生实验室意外，或新发传染病，或严重疫情时，应特别注意要安排此项工作。

紧急、意外事故应对方案提供以下操作规范：

1.

防备火灾、洪水、地震和爆炸等自然灾害

2.

意外暴露的处理和污染清除

3.

意外事故发生时的继续操作、人员紧急撤离

4.

人员暴露和受伤的紧急医疗处理，如医疗监护、临床处理和流行病学调查。

三、风险评估内容

（一）生物因子危害评估

生物因子(biological

agents)概念：可能引起感染、过敏或中毒的所有微小生物体，包括基因修饰的、细胞培养的和寄生于人体的。

(1)危害评估内容包括生物因子已知或未知的特性，如生物因子的种类、来源、传染性、传播途径、易感性、潜伏期、剂量-效应关系、致病性、变异性、在环境中的稳定性、与其他生物和环境的交互作用、流行病学资料、预防和治疗方案等。

(2)制定评估报告：各种因素的风险发生概率程度、针对这些风险采取的预防措施以及风险发生后的补救方法。

依据2006年1月11日中华人民共和国卫生部颁布的《人间传染的病原微生物名录》，对医院检验科可能接触的病原体进行评估。。

表1.

细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体、病毒分类名录

举例：

1、金黄色葡萄球菌的生物危害评估报告

(一)金黄色葡萄球菌的传播与致病

金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，在空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于春夏季;中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道;上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起菌血症、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎、骨髓炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。

(二)金黄色葡萄球菌的生物学特性

典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下呈单个、成双以及排列成葡萄串状。无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性衰老、死亡和被白细胞吞噬后的菌体革兰染色呈阴性。菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最

适生长温度35~37℃、最适pH7.4~7.6。

金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。

金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。

（三）金黄色葡萄球菌的检测与诊断

1.标本采集采自不同感染部位的各种标本，包括血液、脑脊液、穿刺液;痰液、脓液、创伤分泌物、尿液、粪便和呕吐物等。

2.直接涂片镜检直接涂片检查在正常情况下呈无菌状态的体液标本如血液、脑脊液、穿刺液等，若有检出革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列、无芽胞、荚膜，直径0.5-1μm

的球菌。即具有重要的临床价值。

3.分离培养可以选用普通营养琼脂平板、血平板和高盐甘露醇平板，血平板用葡萄糖肉汤增菌培养基。该菌在普通肉汤中呈均匀迅速混浊生长;若接种于琼脂平板上35℃过夜后可形成直径约2~3mm的厚菌落、湿润有光泽、呈金黄色不透明圆形凸起。若接种于血平板，菌落周围可形成明显的透明的β—溶血环。在高甘露醇平板上金黄色葡萄球菌生成淡橙黄色菌落，以此可与其他凝固酶阴性的葡萄球菌相鉴别。

4.鉴别实验

(1)血浆凝固酶试验：血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌的细胞壁上，能直接作用于血浆中的纤维蛋白原，使之转化为纤维蛋白，环绕菌体而形成凝块。而游离型血浆凝固酶则在产生后被分泌到菌体外，不能直接作用于纤维蛋白原，但可以激活血浆凝血酶原，使之转化成凝血酶，后者再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白。具体的测量方法也因此分为玻片法和试管法两种。

(2)耐热核酸酶试验：将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板，35℃培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。

(3)甘露醇发酵实验金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。

(4)Staphaurex

胶乳凝集实验是鉴定金黄色葡萄球菌的一种快速、简便的商品化直接凝集试验。

5.生化鉴定如上述，注意与其他凝固酶阳性的葡萄球菌的鉴别要点：PYR(吡咯烷酮-β-萘基酰胺)试验阴性;VP试验阳性;鸟氨酸脱羧酶试验阴性。

6.免疫学方法用酶联免疫吸附试验和对流免疫电泳方法可检测金葡菌的磷壁酸抗体。

7.分子生物学方法包括PFGE脉冲场凝胶电泳以及酶切图谱分析等。

（四）金黄色葡萄球菌的防治及生物安全防护

1.细菌的防治

(1)金黄色葡萄球菌的控制主要包括：

1)防止金黄色葡萄球菌污染食品，防止带菌人群对各种食物的污染。

2)防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成。

3)无菌措施(如检查病人前后彻底洗手和消毒合用的器械)至关重要。无症状的鼻腔带菌者,除非所带菌株十分危险或被怀疑为暴发流行的传染源,一般不必隔离。

治疗包括脓肿引流,抗生素(重症病人需肠外给药)和全身支持疗法。培养标本应在开始治疗前或更换抗生素之前获取。抗生素的选择和剂量取决于感染的部位,疾病的严重程度和细菌对药物的敏感性。

医院获得的葡萄球菌和大多数社区获得的菌株,通常对青霉素G,氨苄青霉素和抗假单胞菌青霉素有耐药性。大多数菌株对耐青霉素酶青霉素、头孢菌素、亚胺培南类、庆大霉素、万古霉素、替考拉宁、林可霉素和氯林可霉素敏感。

目前耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株日益增多。MRSA菌株通常对耐β-内酰胺酶青霉素,头孢菌素和卡巴培南类有耐药性。这些细菌对氨基糖苷类和大环内酯类(红霉素,克拉霉素,阿齐霉素,林可霉素和氯林可霉素)的耐药性也很普遍。

虽然亚胺培南-西拉司丁或喹诺酮类对某些MRSA感染是有效的,但静脉注射万古霉素为首选。肾功能正常成人的通用剂量是每6小时静脉注射500mg或每12小时静滴注1000mg,至少在1小时内滴完。肾功能受损时,剂量应根据血清中药物的浓度加以调整,疗程视感染部位及病人的反应而定,但一般为2~4周。某些严重的或有并发症的感染,可能需要静脉给药治疗6~8周,然后再口服治疗1个月或更长时间。

可用于替代万古霉素治疗MRSA感染的药物有：TMP-SMZ,成人剂量为TMP10~15mg

/(kg.d)加SMZ50~75mg/(kg.d),分剂口服或肠外给药,每次间隔8小时或12小时,连续2~4周;利福平(600mg/d)口服或肠外给药;肠外给亚胺培南-西拉司丁(500mg每6小时1次)或美罗匹宁(0.5~1.0g每8小时1次。但利福平不要单独应用,因为细菌很易产生抗药性。在治疗异物相关性MRSA感染或浆膜腔MRSA感染时,利福平和氨基糖苷类是有用的辅助药物。邻氯青霉素,双氯青霉素,TMP-SMZ,环丙沙星及局部用莫匹罗星(mupirocin)可用于治疗MRSA

带菌状态,但MRSA对这些药物可产生抗药性。抗万古霉素的肠球菌(VRE)菌株的流行日益增加,这种菌株在实验室中可将引起抗万古霉素的基因转为凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌

菌株,而在感染的病人中则转变为凝固酶阴性葡萄球菌分离株。可是这些葡萄球菌很容易对治疗这类感染的其他药物产生抗药性。杆菌肽,若有的话,可试用于治疗抗万古霉素的葡萄球菌感染。对这些病人应严格隔离,以防他们的细菌传播。

2.细菌的生物安全防护

根据《病原微生物生物实验室生物安全管理条例》中的有关规定，人间传播的微生物名录(待颁布)金黄色葡萄球菌属于三类，BSL-2。相关的防护事宜包括：

(1)操作要求

1)实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。

2)不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。

3)所有的操作过程应尽量细心，避免产生和溅出气溶胶。

4)对于污染的锐器，必须时刻保持高度的警惕，包括针、注射器、玻片、加样器等。

5)注射和吸取感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器(即注射器和针头是一体的)。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，最好高压杀菌。6)打碎的器皿不能直接用手处理，必须用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前，应按照相关的规定进行消毒。

7)所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室。离开该系统进行消毒的物料，在转移前应包装，其包装应符合有关的法规。

8)溅出或偶然事件中，明显暴露于传染源时，要立即向实验室主任报告。进行适当的医学评估、观察、治疗，保留书面记录。

9)按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其他传染源污染后，实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。污染的设备在送去修理、维护前，要按照相关的规定消毒;在离开设施转移前，要按照相关的规定打包运输。(2)安全设备

1)正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其他合适的人员防护设施、或物理遏制装置。

2)确定可能形成传染性气溶胶或溅出物的实验过程，包括离心、研磨、匀浆、剧烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源的容器、采集感染标本等。

3)涉及高浓度或大体积的传染源时，若选用密封转头或带安全罩的离心机，若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放实验室内离心。

4)当必须在生物安全柜外处理标本时，需采取面部保护措施(跟镜、口罩、面罩、或其他防溅装置)，以免传染源或其他有害物溅或洒到面上。

5)在实验室内，必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非实验室区域时，防护服必须留在实验室内。防护服可以在实验室内处理，也可以在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。

6)可能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重复使用，不能用于接触“洁净”的表面(键盘、电话等)，也不应当戴着到实验室外。要备有带滑石粉的乳胶手套。脱掉手套后，要洗手。

（二）实验室工作岗位风险评估

例：1.标本运送岗位

2.免疫(HIV)检测岗位