步骤

2024-05-01

步骤（精选14篇）

篇1：步骤

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路考步骤口诀路考步骤解析

总觉得驾照路考步骤多且复杂，一时间难记又难理清，一上车不是忘记这个路考步骤就是忘记那个动作，有时一紧张，大脑就会“短路”，一片空白。一次偶然，根据驾照路考步骤，写下了这段路考口诀。电子路考试技巧

路考步骤：上车喊报告，拉门出左脚；坐好叫考官，面带梨涡笑。

关门深呼吸，坐姿要摆好；查看空挡位，点火要轻柔。

方向别忘了，挂挡要干脆；手刹要放掉，起步问考官。

多看后视镜，喇叭来欢叫；离合器放松，做好半联动。

出发要稳当，别让考官晃；换挡要及时，加挡要迅速。

遇人要刹车，可别过了头；转弯要减速，立即减下挡。

多看多停顿，安全放心中；肩膀要放松，双手放到位。

神态要自然，莫因考官慌；自己有信心，艰辛都不怕。

胆大又心细，礼貌别忘了；只要牢记着，考试准能过。

看完了上编写的路考步骤，对于驾照路考步骤，大家现在是否理清了呢？是不是觉得记忆起来也容易了？其实，路考也不是大家想像中的那么难，只要掌握好驾照路考技巧，按照这些驾照路考步骤来一步步操作，在实际考试过程中，多注意一些细节问题，路考注意事项和要领通过考试并非难事。如果您心里还有所顾虑，不妨记下这段口诀，相信在考试时能帮您理清思绪、顺利过关

篇2：步骤

(1)收获细胞，加入适量细胞IP裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂)，冰上或者4?裂解30min，12,000g离心30 min后取上清;(2)取少量裂解液以备Western blot分析，剩余裂解液将1μg相应的抗体和10-50 μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液，4?C缓慢摇晃孵育过夜;(3)免疫沉淀反应后，在4?C 以3,000 g速度离心5 min，将protein A/G-beads离心至管底;将上清小心吸去，protein A/G-beads用1ml裂解缓冲液洗3,4次;最后加入15μl的2×SDS 加样缓冲液，沸水煮10分钟;(4)SDS-PAGE, Western blotting或进行质谱分析。

一、样品处理: 免疫沉淀实验成功与否，第一步处理样品非常关键。免疫沉淀实验本质上是处于天然构象状态的抗原和抗体之间的反应，而样品处理的质量决定了抗原抗体反应中的抗原的质量，浓度以及抗原是否处于天然构象状态。所以制备高质量的样品以用于后续的抗体-agarose beads孵育对免疫沉淀实验是否成功非常关键。在这个环节中，除了要控制所有操作尽量在冰上或者4?完成外，最为关键的是裂解液的成份。

用于免疫沉淀实验的样品一般是原代培养细胞裂解液或者细胞系裂解液。我们以常用的RIPA裂解液为例(主要含有pH7.4左右的离子缓冲液，接近生理浓度下的NaCl，一定比例的去垢剂和甘油以及各类蛋白酶抑制剂等)来说明其各主要成份的用途，进而帮助我们如何针对不同的实验目的和不同的蛋白质特性来选择最佳的裂解液。

a(缓冲液:离子缓冲液常采用pH7.4的Hepes或者Tris-Cl。b(NaCl浓度一般习惯用150 mM，这主要是因为150 mM接近生理浓度，不会破坏蛋白质之间的相互作用。然而细胞内部的NaCl浓度并不是均一的，局部NaCl的浓度可以低到50 mM，150 mM的NaCl有可能会破坏这个区域的蛋白质相互作用。因此裂解液配方最佳的NaCl浓度要视所分析的蛋白的亚细胞定位而定。

c(甘油由于其粘性，可以对蛋白质之间的相互作用起到一个很好的保护作用。一般添加10%的甘油有助于稳定蛋白质之间的相互作用。

d(裂解液中的去垢剂可以裂解细胞质膜，也同时破坏了许多细胞器的膜，从而释放了其中储存的许多蛋白酶。而由于用于免疫沉淀实验的去垢剂作用比较温和，因此蛋白酶的活性大部分得以保存。还有一部分蛋白酶来自胞质中，主要由于其抑制蛋白或者其活性抑制环境受到改变后从而恢复了蛋白酶活性。因此，添加蛋白酶抑制剂对于防止目的蛋白的降解从而完成免疫沉淀实验非常关键。一般主要通过添加EDTA抑制金属蛋白酶，通过Protease Cocktail(多种蛋白酶抑制剂混合物)可以抑制蛋白酶。

e(去垢剂对于免疫沉淀实验尤其是免疫共沉淀实验是一个非常关键的因素。不同的去垢剂种类和不同的去垢剂浓度主要通过影响以下三个因素来影响免疫沉淀效果:-细胞质/器膜的通透性:因为许多目的蛋白都定位在细胞器中，所以必须先将这些蛋白释放出来，抗体才能与之反应。

-膜蛋白的释放:许多膜蛋白的构象对去垢剂种类和浓度非常敏感，因此针对这类蛋白的免疫沉淀实验，需要谨慎地尝试多种去垢剂以及不同浓度。

-蛋白相互作用:不同去垢剂对不同性质的蛋白质的相互作用影响程度不一样，需要根据具体蛋白的特性进行分析选择去垢剂种类和浓度。而由于何种去垢剂适应作用于何种蛋白质现在很难精准预测，所以一个更为切实可行的办法就是通过具体实验筛选合适的去垢剂种类和浓度。

二、抗体-agarose beads孵育

裂解细胞，离心并去除不可溶的膜组份后，上清可以储存在-80?保存3个月，但最好能够使用新鲜制备的细胞裂解液上清去进行抗体-agarose beads孵育实验。抗体可以先加入上清中与样品孵育数小时后再加入Protein A或者G beads孵育过夜，也可以同时加入抗体和Protein A或者G beads孵育过夜。一般选择1mg总蛋白(1mg/ml)对应添加1 ug抗体，最高可以添加至5 ug抗体，过多的抗体会产生假阳性。这个步骤中关键因素在于选择合适的阴性对照。一般选用加同样量的IgG，但更为妥当的方法是选择针对胞内其它无关目的蛋白的一抗做对照。例如，做膜蛋白A的免疫沉淀，选择膜蛋白B来做阴性对照，只要确认二者之间没有相互作用;而做胞质可溶性蛋白C的免疫沉淀，则选择另外一个可溶性蛋白D来做阴性对照。同时，为避免Protein A或者G beads有(非)特异性吸附从而造成免疫沉淀实验结果的假阳性，一般在加入目的蛋白抗体之前，预先将Protein A或者G beads与细胞裂解液孵育数小时，然后取上清用于后续的抗体-agarose beads孵育。

同时，Protein A或者G beads对不同类型的抗体亲和力不同，结合一抗的种属和Ig亚型，选择合适的Protein A或者G beads也是决定免疫沉淀实验成功与否的一个重要因素。一般推荐使用Protein A和Protein G beads的混合物，这样可以达到最佳实验效果，而且省去了许多选择的烦恼。

三、抗体-agarose beads复合物洗涤: 除了选择特异性好的抗体以及选择合适的阴性对照外，去除免疫沉淀实验非特异性的一个办法是对抗体-agarose beads复合物进行多次洗涤。一般洗涤缓冲液使用和裂解液一样的配方，但去除甘油，以减少由于甘油的粘性带来的非特异性吸附。针对不同的实验要求，还可以通过更改NaCl的浓度以及去垢剂的比例，种类来达到去除非特异性吸附的效果。例如，针对单纯的免疫沉淀而非免疫共沉淀实验或者虽然是进行免疫共沉淀实验，但蛋白质之间的结合比较牢靠，可以考虑使用低浓度(0.2-0.5%)的SDS洗涤抗体-agarose beads复合物，这样可以去除绝大部分非特异性相互作用。

四、鉴定

免疫沉淀实验用途非常广泛(见IP: Q&A)，而且基于最基本的免疫沉淀实验衍生出了许多免疫沉淀相关实验手段(比如免疫共沉淀，染色质免疫沉淀和RNA-蛋白免疫沉淀)，因此，免疫沉淀实验的鉴定方法主要视实验目的而定。

我们在本手册中主要简单概述常见的免疫沉淀之后的WB检测需要注意的实验环节。由于

免疫沉淀实验使用目的蛋白抗体加Protein A/G beads与样品孵育，因此在最后离心获得抗体-agarose beads复合物后，eppendorf管中主要含有抗体，目的蛋白，Protein A/G beads以及一些其它非特异性作用蛋白。其中，抗体和目的蛋白以及Protein A/G beads三者之间是以非共价健结合在一起，只有Protein A/G与agarose beads是共价结合在一起的。因此，最后经过添加含巯基乙醇的加样缓冲液以及煮沸变性并离心出去Protein A/G beads后，eppendorf管只有抗体和目的蛋白以及少量非特异性吸附蛋白。这样SDS-PAGE中就含有目的蛋白和抗体二种蛋白，由于加样缓冲液中含有巯基乙醇从而导致抗体的重链与轻链之间的二硫键被破坏从而使得抗体分子变成重链分子(55KD)和轻链分子(25KD)。因此，WB显色反应中除了能检测到目的蛋白外，如果所使用的二抗与用于免疫沉淀实验的抗体分子属于同一种属的话，还能检测到重链和轻链分子。通常用于免疫沉淀的抗体量非常大(1ug)，所以当目的蛋白的大小接近重链或者轻链分子时，重链或者轻链分子的WB信号常常由于信号过强而导致影响对目的蛋白的WB结果判断。

针对上述情况，通常有二种解决办法: a(选择不同种属的抗体分别进行免疫沉淀实验和WB实验，这样再选择一个种属交叉反应比较弱或者无种属交叉反应的二抗进行WB实验，就可以大大减弱重链和轻链分子的WB信号。

b(使用交联剂将抗体和Protein A/G beads交联，然后通过添加不含巯基乙醇的加样缓冲液处理目的蛋白-抗体-agarose beads复合物，最后离心去除抗体-agarose beads复合物，上清中只留下目的蛋白。

免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)原理

IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G"特异性地结合到抗体(免疫球

蛋白)的FC片段的现象开发出来的方法。目前多用protein A/G预先结合在argarose beads上，使之

与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A/G就能达到吸附抗原的目的。通过低速离心，可以从含有目的抗原的溶液中将目的抗原与其它抗原分离。

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质是否在生理条件下有相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质,蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用蛋白。

白与蛋白寻找新的经由免疫共沉淀然后通过质谱或者的相互相互作用 WB鉴定新的相互作用蛋白作用蛋白

验证目的经由免疫共沉淀然后通过使用待测蛋白和蛋白待测蛋白的抗体进行WB实验可以确定目的蛋是否有白

相互作用和待测蛋白是否有相互作用通过对经由免疫共沉淀而得到的DNA 片段进行PCR实验可以获得DNA片研究蛋白与DNA的动态作用段的序列信息以及目的蛋白与DNA 之间的动态作用信息

通过使用针对组蛋白不同修饰位点的研究蛋白抗体进行染色质免疫沉淀实验去检测

染色质与DNA 研究组蛋白的各种共价修饰组蛋白的不同修饰状态和目的基因启

免疫沉淀的相互与基因表达之间的关系动子之间的动态相互作用，从而研究作用组蛋白修饰与目的基因表达之间的关

系

基于CHIP的原理发展出来的RIP 研究蛋白与RNA的相互作用(RNA-IP)技术可以用来研究目的蛋白与RNA之间的相互作用信息

我该选择什么样的抗体做免疫沉淀，免疫共沉淀和RNA免疫沉淀以及染色质免疫沉淀, 在所有免疫沉淀相关实验中，抗原的起始浓度相对其它免疫相关实验(WB和IF等)要低得多，所以对抗体的亲和力相对其它实验(WB和IF等)提出了很高的要求，这就需要使用高亲和力的抗体去进行免疫沉淀相关实验。同时，由于免疫沉淀相关实验主要是在生理条件性进行，所以需要抗体识别蛋白的天然表面构象，因此选择的抗体其针对的抗原决定蔟需要暴露在蛋白表面。这些因素对制备能成功应用于IP实验的抗体提出了很高的要求: a(用于免疫的蛋白抗原其构象需要尽量接近目的蛋白的天然构象或者用于免疫的多肽尽量暴露在目的蛋白的表面。获得接近天然构象的蛋白抗原的途径有很多，主要有天然提取，原核表达重组蛋白以及真核表达重组蛋白三种方式。这其中，就蛋白构象角度而言，天然提取是最佳途径，但这种方法受材料来源限制和纯化方法复杂等多因素影响，一般很少采用。原核表达因为成本低廉，操作方便最为受欢迎，但其受表达环境与大部分蛋白天然存在环境差别巨大，构象失真情况严重，抗原的构象质量有严重问题。大规模瞬时真核表达是近期新兴的表

达系统，具有表达环境接近天然，操作方便等诸多优点，是获取具有天然构象蛋白抗原的首选工具。

b(亲和力要比普通的抗体应用要求高得多。多克隆抗体由于可以结合目的抗原的多个抗原决定簇，所以在亲和力方面是首选。但考虑到特异性，获得单克隆抗体群是更好的选择。具体优缺点总结如下表。

单克隆抗体群(由一个免疫原产生的多多克隆抗体单克隆抗体个单克隆抗体混合物)抗体抗原作由抗体的亲和力决定(极佳极佳极佳用信号强度或者极弱)通常很好，但有时会极佳(由于选择可以进行IP且没有交特异性极佳，但有时会有交叉反应有非特异性相互作用叉反应的抗体组成单克隆抗体群)亲和力高(由于抗体特异性好，亲和力高(由于选择可以进可以与目的蛋白的多特异性好，且可以无限量供优点行IP且没有交叉反应的抗体组成单克个抗原决定蔟相互作应隆抗体群)用)需要筛选亲和力高的抗体;能够筛选得到的符合条件的单克隆并非特异性相互作用很缺点抗原表位可能会被相互作不多，所以单克隆抗体群也就不容易获难去除用蛋白遮蔽得

免疫沉淀效由抗体的亲和力决定(极佳极佳(由于选择可以进行IP且没有交极佳(由于亲和力高)果或者极弱)叉反应的抗体组成单克隆抗体群)由抗体的亲和力决定和抗通常很好，但有时非免疫共沉淀原表位是否被相互作用蛋极佳(由于选择可以成功进行IP且没特异性相互作用会带效果白遮蔽决定(极佳或者极有交叉反应的抗体组成单克隆抗体群)来假阳性弱)由抗体的亲和力决定和抗

通常很好，但有时非原表位是否被遮蔽或者以染色质免疫极佳(由于选择可以成功进行IP且没特异性相互作用会带及抗原表位是否被交联实沉淀效果有交叉反应的抗体组成单克隆抗体群)来假阳性验所破坏决定(极佳或者极

篇3：作文复习四步骤

一.审题立意要到位

以近些年高考常见的材料+话题作文为例。作文阅卷专家们, 是这样给“话题作文”定义的:“话题作文”的命题, 只是为考生提供了一个既有开放性、又有约束力的“话题”。往往文体不限, 题目自拟, 考生可以自由选择、自由发挥, 写法更是灵活多样。其命题目的, 主要是激发考生的创造性和想象力。此类作文一般由四个方面组成:材料、简短提示语、由材料引出的“话题”和注意事项。所以准确到位的审题立意是写好作文的关键一步, 这就要求学生仔细思考、分析材料所引发的写作要求、明确体裁、选材范围, 确定写作重点和主题。以高考题为例:

阅读下面的文字, 根据要求作文。

走你自己的路, 让别人去说吧! (但丁)

常问路的人不会迷失方向。 (波兰谚语)

应当耐心地听取他人的意见, 认真考虑指责你的人是否有理。 (达·芬奇)

相信一切人与怀疑一切人, 其错误是一样的。 (塞纳克) ———这是“材料”。

面对各种说法, 有人想:我该相信谁的话呢?也有人想:还是相信自己最重要。———这就是“简短提示语”。

请以“相信自己与听取别人的意见”为话题, 所写内容必须在话题之内。———显然是“话题”。

自定立意, 自选文体, 自拟标题, 写一篇不少于800字的文章。——这显然是“注意事项”。

这类“话题作文”提供的“材料”, 不像以往的“材料作文”那样, 是立意的出发点和归宿点;它只是命题者所做的“作前指导”。是引发考生思考的一个“由头”, 是启发考生打开思路的一个“例子”。是“举一反三”中的“一”。“话题”本身, 也不是“题目”, 它只是规定了一个写作的“范围”。通过阅读要引导学生把重点放在“简短提示语”上, 这是审题立意的最重要的一步。“我该相信谁的话呢?”学生应思考相信的范围应是自己与他人, “还是相信自己最重要”暗示学生相信自己是最重要的, 但也不能扔弃别人的意见, 这就要学生应兼顾两者, 不能只相信自己而拒绝听取别人的意见, 更不能只听取别人的意见而全面否定自己。因此, 这个话题作文的审题立意可确定为:相信自己, 不可随意听取别人的意见;听取别人意见, 不可盲目相信自己;既要相信自己, 又要听取别人的意见。这样通过审题立意确定了作文方向, 就比较容易完成作文了。

二.选择文体要适合

高考作文大都没有限制文体, 给学生自己选择、自由发挥的机会。既然如此, 学生选择文体要依自己的情况而定, 让每一位学生选择自己最擅长的文体, 让他的优势得到充分发挥, 才华得以尽情展露。首先让学生明确, 议论文要有一个中心;散文要围绕“神”展开;记叙文要有深刻的中心思想;小小说要围绕主旨展开。当然其他文体学生也可选择。

比如, 议论文, 是考场上得分最保险的一种文体, 确定中心论点后, 选取论证结构, 有三种结构供选择。一、六字联珠式:点 (开门见山, 点明中心论点) 、正 (正面举例论证) 、反 (反面举例论述) 、深 (对中心和事例进行深入分析论证) 、联 (联系现实) 、总 (照应开头, 回扣论点) 。二、总分总式:“总--分--总”式, 也就是“提出论点--用论据证实论点--写出结论”这种议论文首先提出中心论点, 然后将中心论点分成几个横向或纵向展开的分论点进行论证, 最后在结论部分加以归纳、总结和必要的引申加强。 (1) 分论点并列:首先提出一个论证总题, 围绕总题, 从几个不同的角度列出几个不重复、不相互包括、也不能相互交叉的平行的具体论点, 分别予以论证, 充分阐释总题, 最后得出结论。 (2) 分论据并列:在论证过程中, 为了充分摆事实, 讲道理, 把几个横向展开的论据并列起来, 不断蓄势, 最后让人感觉文章论点的正确性无可置疑。三、层进式:也称为递进式。文章各层次之间是层层深入, 步步推进的。可以是“剥笋式”由外到内, 直击中心;摆表现、论危害、控根源、揭实质、提办法。也可以是“追问式”的打破沙锅问到底, “是什么”“为什么” (为什么要这样, 不这样会怎样, 正反论证) “怎么办” (为什么要这样做, 不这样做会怎样, 正反论证) 等等, 依次逻辑性清晰地展开;如鲁迅先生的《拿来主义》。

散文, 选择写散文, 就必须掌握“形散神不散”这一特点, “形散”是材料内容可广泛选材, “神不散”是有固定的中心主旨。学生应该明确抒情散文不可一味抒情, 要写事写景抒情。

记叙文, 记叙文的六要素 (时间、地点、人物、事件、原因、结果) 要掌握。记叙文的表达方式可采用倒叙式, 让文章有波澜有悬念, 避免平铺直叙。记叙文内容应是一件完整的事, 从一件事中得到启发, 受到教益, 选取的事, 必须读起来感觉就是自己亲身经历的, 如要记叙多件事, 应围绕一个中心去写。记叙文应有一个丰满的人物形象, 刻画人物的方法通常有以下几种:有正面描写, 有侧面描写;正面描写又分肖像描写、动作描写、语言描写、心理描写等等;还要注重细节描写, 细节描写是指抓住生活中的细微而又具体的典型情节, 加以生动细致的描绘, 它具体渗透在对人物、景物或场面描写之中。它是最生动、最有表现力的手法, 它往往用极精彩的笔墨将人物的真善美和假丑恶和盘托出, 让读者欣赏评价。

小小说, 应在情节、语言上下工夫, 写成短小精悍、故事性强、耐人寻味的小说较可取, 结尾最好是意料之外、情理之中。

三.布局谋篇要新颖

布局谋篇可分为立题、开篇、结尾三部分。

立题:巧拟标题, 一目传神, 好的文章标题要抓住人。学生常用几种拟题法:1、直言明旨法, 如《压力也是一种财富》《珍惜诚信》《明镜照己, 昏镜照人》《语言是沟通的钥匙》。2、借助辞格法, 如《宽容是阳光》 (比喻) 、《事业诚可贵, 亲情价更高》 (化用) 、《忙兮忙兮奈若何》 (仿拟) 、《言必信, 信必果》 (引用) 、《治世之能臣, 乱世之奸雄》 (对偶) 、《父亲, 我爱你!》 (呼告) 、《我为人人, 人人为我》 (顶真) 。3、提出问题法, 如《这个世界怎么了》、《答案是什么?》4、翻新词句法, 如《君子动口也动手》。5、自我矛盾法, 如《吃亏就是占便宜》。

开篇:作文要具有较强的感染力, 让人能“一见钟情”, 扣人心弦。开门见山, 点明主旨, 统摄全篇可用开头;或在作文开头先引用一段或一句话 (名言、警句、俗语、哲言等) , 作为文章的论点或引出中心论点;或在作文开头先叙述一件事 (国家大事、世界要闻、凡人小事、自然现象、逸闻趣事、寓言故事等) , 根据所述之事提出论点, 也可由此事引出论点、论题;或在开头运用类比, 列出几个属性相关的观点或事物, 提出观点或要议论的话题;或运用倒叙的方法, 在开头写出事情的结果, 也可写出事件最有吸引力的片段;或运用排比、比喻、拟人的修辞手法, 采用骈句、整句的形式开头, 来议论点题, 抒发感情, 总领全文, 以达到引人入胜的效果。

结尾:我们常说文如撞钟, 余音不绝, 结尾要打动人。如果作文中没有明确的观点, 结尾要卒章显志, 画龙点睛;或文章开头提出了论题或观点, 中间分析论证, 结尾要回扣论点;结尾时, 也可引用别人的话, 或引言后再略加发挥的内容, 可以是对引言的解释、分析、评价, 也可以是由引言得到的启迪、鼓励、警戒;还可以根据引言发出号召, 促人思考。

四.语言表达要丰富

1、语言通顺

高考作文语言运用的标准是规范、准确、连贯、得体。作文要用规范的现代汉语写作, 不能生造词语乱用句式;准确是选词造句贴切, 符合实际;连贯的一般标准是通顺, 好的标准是流畅;得体是在一定的语言环境中, 注意语言表达的对象、场合、说话的方式, 把言语表达得恰如其分。

2、有文采

文采, 就是语言变化多, 用语精美。可以先让学生写一篇作文, 然后让学生自我修改。学生要记住一句话“作文是写出来的, 好作文是改出来的”。在语言通顺的基础上, 引导学生在修改文章上下工夫, 可以从以下几个方面来修改:

(1) 恰当运用多种标点符号。

(2) 段落之间要有过渡句, 灵活选用复句、反问句、设问句, 而且能做到整散句结合。

(3) 灵活运用多种修辞手法:比喻、对偶、排比等。

篇4：仔猪诱食五步骤

2.诱食开始的时间：国外饲养的仔猪出生3天就开始诱食，我们要求对外三元仔猪最晚5～7日龄就开始诱食，内三元仔猪最晚7～10日龄就要开始诱食。

3.诱食的操作规程：诱食第1天，可把优质诱食料少量洒在或用手指抹在母猪的乳头上，让仔猪在吃乳时舔食，第2天可将诱食料抹在乳猪的嘴里，第3天就可将诱食料少量洒在料盘中。

4.诱食的原则：由于所有的诱食料都像牛奶一样营养丰富，潮湿以后很容易变质。仔猪添加诱食料时必须遵循“少量多次，逐次增加，保持新鲜”的原则，这是仔猪诱食作用好坏的关键。吃不完的可清扫给母猪吃，以免浪费，也可避免仔猪吃到变质的饲料引发下痢等疾病。开始时一般每天5～7次，以后可减为3～4次，对一些弱小的仔猪，可以额外补喂，促进其正常生长。

5.饮水的补充：由于仔猪生长迅速，代谢旺盛，特别是由于母乳脂肪含量高，诱食料往往是干料，消化吸收需要较多的饮水，更由于仔猪所处的环境温度高，奶中的水分是远远不够的，故从仔猪2～3日龄起就应补充清洁的消毒饮用水，同时在水中少量添加甜味剂、酸味剂和营养剂。但必须注意，饮水一定要干净，也可用冷开水，并且每天换几次，要保持饮水新鲜。

篇5：步骤

Win10系统自带录音机，能把你的Win10系统里的某段声音录制下来，与录音机功能类似的还有一个比较新潮的功能，就是步骤记录器，能记录Win10上操作步骤和文字说明，如何使用呢?

1、打开步骤记录器

2、点击开始录制

然后就开始录制状态了

3、接着我们在桌面上创建了一个文件夹;命名;复制一份在修改名称

4、然后点击停止录制

5、然后可以看到我们录制的步骤和截图

在最下面还有详细的文字记录

6、点击保存录制的内容

7、保存好之后我们打开看看保存的内容

8、以HTML格式来保存录制的内容

并且有截图和文字说明哦

这个步骤记录器很好用，从本文的图片中大家也能看到，Win10步骤记录器会自动捕捉用户在计算机上执行的步骤，包括点击的文本描述和每次点击操作之间的屏幕图片，

篇6：测绘数据检查步骤

1、检查原始测量数据

（1）已知点使用是否正确，包括检查点和作业结束后复测点；要求对照作业单

已知已有资料检查；

（2）特征点采集是否正确、合理，要求采用展点方式对照图形检查；

（3）有甲方提供资料或要求的，现场采集数据与甲方提供资料或要求是否一

致。

2、检查过程数据

（1）图形编辑是否正确、符合实际；

（2）有计算的检查计算是否正确；

（3）表格、文档资料填写是否正确、齐全；同一项目，图、表、文档资料数据

是否匹配、一致；

（4）有甲方提供资料的，表格、文档资料填写、图形数据处理与甲方提供资料

是否一致；

（5）涉及方量计算的，必须检查原始高程与构网高程是否一致，必须导出三角

网数据检查参与构网的数据是否异常；

（6）涉及权属调查的，必须检查界址确定是否有依据（如红线图、土地证等权

属来源资料）、是否符合土地登记政策、相关确权习惯。

3、成果检查

（1）检查成果应包含的项目是否完整；

（2）每个项目成果内容是否齐全、正确；

（3）成果格式是否正确、注记是否齐全；

（4）成果注记是否突出重点（主要成果内容表示、注记应最醒目）、注记大小

篇7：心形折纸步骤教程

心形折纸步骤教程

心形折纸的心心相印折法，很受用的心形折纸，用来做信纸或者日常桌面装饰都可以，送给情人更是不二选择哦。以下就是心心相印心形折纸详细图解教程，大家一起动手起来吧!

篇8：情绪调节五步骤

1.当……(描述事件、情境)

2.我觉得……(标明情绪)

3.我的想法是……(省察自己的思想)

4.我所需要的是……(探索心理需求)

5.A.我的建设性的想法是……;B.我的建设性的行动是……(可以帮助他人成功地与你重建关系)

比如,当你约好朋友去看一场期待已久的电影时,领座一对人却在不断聊天,让你听不清楚电影的声音。于是,你很生气。你会怎么做呢?是怒气冲冲地责备他们,然后大家大吵一场,不欢而散?还是用五步调节法调节自己的情绪,然后采取建设性的行动呢?其实你可以这样做:

1.描述事件、情境——当我看一场精彩的电影时,邻座在不断聊天,影响了我看电影。

2.标明情绪——我觉得生气、挫折。

3.省察自己的思想——我会有这样的情绪,是因为觉得他们不尊重别的观众,不遵守公共秩序,没礼貌。

4.探索心理需求——我所需要的是让他们不再讲话,让大家可以安安静静地看电影。

5.我的建设性的想法是:他们并不是故意的。我的建设性的行动是:找到一个双赢的办法,客气有礼貌地告诉他们。

你可以这样告诉他们:先生,实在抱歉,由于我听力不是很好,能不能麻烦您二位暂时不要讲话,非常感谢。十分抱歉。

让我们产生情绪的不是事情本身,而是我们对事情的看法。比如,你在马路上开车,听到后面的车对你大声地按喇叭,你很生气;当你回头看时,却看见你多年未见的老朋友探出车窗向你打招呼,这时,你转怒为喜。所以,同样的按喇叭,会引起不同的情绪反应。情绪的转变在于你的认识不同,思想不同。

再比如,想象一下,你在海上驾驶一艘船,眼看要撞到前面的一艘船了,你大声地喊:“快让开,快让开。”可是,对方毫无反应。这使你很生气。可是,当你靠近一看,发现那只是一艘空船时,相信生气的情绪也就荡然无存了。当我们感受到伤害时,不代表别人故意要伤害我们;当你没感受到爱时,并不代表爱就不在身边。外在的情绪只是冰山一角,你只有学会对内探寻自己的思想,探究自己的需求,才能更好地认识自己,理解他人。

篇9：卖场沟通五步骤

首先，通过促销活动来提升自己品牌在卖场的销售；其次，通过终端形象整改来实现品牌升级；其三，通过实施品牌推广活动来提升品牌在终端的口碑和认知度。要注意，采购每天都会看到各个厂家提出的销售建议，如果你的方案也是没有新意的老三样的话，那效果可就不怎么样了，创新、独特的东西才能打动人心，谁愿意天天吃一样的饭菜呢？企业和企业，产品和产品的竞争终极体现就是销售方式的竞争，比的不是单纯的产品的好与坏，而是比的谁更会卖产品，这个跟方案的创意和执行力是有绝对关系的。但这个环节不是业务人员自己能独立解决的事情了，企业的市场部门、创意部门要承担更大的责任。不过好的业务人员要有为决策部门提供参考意见的能力。寻求一切可提供支持的力量

供应商与采购的沟通不光需要供应商自身的努力，还需要许多外界的帮助。供应商要想与卖场、采购建立起更深的合作关系，光有产品这个载体是不够的，还需要很多很多“第三方”的帮助。尤其是当供应商与采购在前期的合作中存在“误会”时，能够获得“第三方”对供应商的支持，对于供应商与采购关系的扭转，是能够起到决定作用的。比如，上海家乐福与某供应商发生利益纠纷时，供应商请某知名媒体出面从中加以协调，最终促进叉叉方矛盾的化解。拥有的复合资源，无论是人脉资源、行业资源还是社会资源，都是帮助自己发力的棋子，供应商要学会关注卖场需求，并储备和利用一切可调动的资源，来跟卖场、采购的需求相匹配，复合资源型的供应商比单一的产品型供应商拥有更强的控制能力。（编辑：袁航market@vip.sina.com）

nlc202309042058

篇10：男人美容方法步骤

目前市场上有越来越多的男士护肤品，例如最基本的洗面奶、爽肤水、乳霜，还有磨砂膏、面膜、精华素等，细数之下，男士护肤品无论是品牌还是分类绝对不差于女性护肤品。男士护肤品的主导品种主要配合剃须使用、防晒、收缩毛孔、祛痘消炎、运动护理等。女性护肤品大多是以清洁、滋润和保护为主的日常营养修饰性产品。其实男人和女人一样，不同的肤质应该选择不同的护肤品。

油性与混合性皮肤

面子问题：面部经常油亮亮的，毛孔粗大，肤质粗糙，皮质厚且易生暗疮粉刺，不易产生皱纹。混合性皮肤面孔中部、额头、鼻梁、下颌有油光，易长粉刺，其余部分则干燥。

面子对策：油性和混合性皮肤关键在于均衡油脂分泌，清洁及收紧毛孔。日常皮肤的清洁要选用一些用后感觉清新爽洁的洗面奶，每周做一次清洁面膜。平时使用一些有控油功能的面霜来改善面部出油状况。在控制油脂的同时，还应用补水乳霜及时补充水分，尤其是混合性皮肤，控油之后会变得比较干燥，所以补水乳霜尤为重要。此外，一瓶收敛水也是必要的，它能收敛粗大的毛孔，让皮肤变得清洁细致。

篇11：小学作文写作步骤

一、提高认识事物和表达事物的能力。

我国著名教育家叶圣陶先生指出:写任何东西决

定于认识和经验，有什么样的认识和经验，才能写出什么样的东西来。

反之，没有表达认识的能力，同样也写不出好作文。

二、把认识结构作为作文的核心，包括学习知识，观察积累，记忆储存，训练思维，丰富

想象，培养情感，锻炼意志;从说到写，推敲修改，多读勤写。

三、树立大作文观，听、说、读、写有机结合

一要注重审题;二要明确写作目的，立意要新;三是选材要有根据;四要讲究谋篇技巧，安排好篇章结构;五要注意文章分段，事先列小标题，作文提纲;六要注重文章写法，因文用法;七要妙用语言，用思想调遣语言。

学会五种立意法:以事赞人，直抒胸臆，借物喻理，触景生情，托物言志。

四、作文大目标的逐年级分解:一年级字词，二年级句子，三年级片断，四年级篇章，五

年级综合，六年级提高。

五、实施五项训练

根据认识是作文的核心这一原则，围绕这个发展学生心理机制的核心，扎扎实实地进行了五项训练:

(一)、字词训练。

学习掌握大量字词。

掌握运用字词的金钥匙:联系自己熟悉的事物;

联系自己生活实际;联系自己学会的语言及字词知识。

运用十引说的方法，把字词学习与说话训练相结合。

十引说是:1、分析字形;

2、利用教具;3、凭图学词;4、组词扩词;5、选词填空;6、词语搭配;7、调整词序;

8、触景用词;9、词语分类;10、联词成句。

丰富了说话训练内容，使自己积累大量会说会用的字词，为写作文打下坚实基础。

(二)、句子训练。

只要是一个句子，都包括两个方面:一是说的人、事、物、景，

二是说目的。

可有些教师指导学生说一句话时，没有很好凭借图画和事物，认真教学

生观察、认识、分析、表达的方法，只是拿出一张图或一事物让学生说写一句话，学

生不知道为什么要说写一句话，怎样说写一句话，说写一句什么句型、什么句式的话，

导致作文中语调单一、呆板、不活泼生动。

可以改让学生凭图、看物、对话、练习说

写一句时间、地点、人物、事件四要素完整的话，四种句型，九种句式的话。

学生

才会在作文中运用不同句型、句式，表达不同的思想、感情、态度、目的。

(三)、段的训练。

结合八种段式:以事物发展为序段，时间先后为序段，空间变

换为序段，总述、分述结构段，因果段、转折段，递进段，并列段。

以此认识客观事

物的发生、发展规律。

不论哪种段式，都是记叙事物的发展和人们对事物的认识，即

段的`内容，段的中心。

它和一句话一样，也是对人、事、物、景的叙述，也是表达一

个意思。

只不过是把一句话进一步说得更清楚、更深刻。

(四)、篇章训练。

篇是由段组成的。

通过对审题、立意、选材、谋篇、定法、用

语的知识与方法，通过记叙、描写、抒情、议论四种表达方法，文章开头与结尾、过渡

与呼应方法，各种文章体裁的知识与方法。

学会写中心明确，意思完整，详略得当的记

叙文和应用文。

(五)、生活现场训练。

篇12：三个步骤搞掂销售

当消费者不失时机地利用展现在面前的机会时;当销售者提供给消费者应用的工具时;消费者开始主宰了交易。销售者必须更清楚地了解他们的顾客，因为权力的天平已经倾向了消费者，他们的期望值越来越高，而他们面临挫折和失望的忍耐力越来越低。消费者正在改变着购物的感受，所以销售者必须尝试新的销售方式。

我们在对营销实战步骤研究的基础上(参见“营销实战中必须经历的八个关键步骤”)，基于“以顾客为中心”的基本思想，结合中国本土企业产品与服务的现状，归纳出达成销售的三个步骤。与以往的销售方式不同的是，新的销售流程将主要针对“顾客交易承诺”的激发与管理，而不再仅仅强调对“销售者承诺”的管理。一切的销售活动将围绕：“让顾客满意”与顾客商业采购承诺的直接对接。

步骤一：认准交易对象

在辨别客户是否有需求的基础上，通过对客户每一次投入的判断，决定是否有进一步交易努力的必要，

如果在正常的销售周期内，客户做出了有利于进一步沟通的承诺，那么他还是你的交易对象;如果，无论销售者如何努力对方没有做出进一步的承诺，那就应该尽早放弃。

蕴涵在步骤一里的销售定律：激发顾客的交易承诺是成功销售的基础。既成事实总比海誓山盟来得可靠。

步骤二：准备交易方案

围绕客户需要解决的问题提供解决或改善这个问题的方案，包括：在解决问题的过程中，销售者可以做些什么?(产品能做什么?我们的其他服务能做什么?)销售者所做的这些为什么可以使问题得到解决或改善?如何证明?这个方案将如何被实施?

步骤三：建立与客户的交易关系

建立一种双方都感觉有利的价格关系。这个价格的组成必须包括：交易价格、客户风险成本、客户维护成本、客户转换成本。如果那些较低的(客户)成本只有你能够提供的时候，你和客户的交易关系就是比较牢靠的了。而且你将获得较高的交易价格。

蕴涵在步骤三中的销售定律：不要让对方感到你希望通过一次交易“挣完”他全部的钱，否则他会尽力压低你的交易价格。因为做一单买卖的销售者只会增加客户对未来风险的感觉。为了在交易时尽量减少未来的风险，他们只有压低价格。

篇13：语文“项目学习”实施步骤

2.项目任务。基于问题设计任务是整个项目学习很重要的一环,项目任务的确定要根据学习目标,设计的任务要具有挑战性,有助于学生创新思维的培养。

3.活动探究。根据项目学习计划,小组成员采用自主学习、合作学习、文献检索等活动方式,分析研究项目内容,并通过提出假设、验证假设等策略,获得初步的活动成果。

4.作品制作。在项目学习的任何时间都可以进行作品制作,如首先制作好栏目、图景等,然后通过改换或扩充标题,录入搜集来的相关内容,最后修改充实。作品形式可以是评论,也可以是报告;可以是图片、音像,还可以是网页、光盘。

5.成果交流。项目学习注重综合性学习的探究过程和活动成果,学生的成果可以通过演示文稿、网络等方式进行研讨、质疑,以进一步促进知识内化。

篇14：中考解题三步骤

关键词：数学概念；转化思想；基本模型；内心

认真研究数年的中考真题，发现对于任何一种题型，要想将问题迎刃而解，必须掌握好以下三个步骤：

一、透彻理解数学概念——明确解题的方向及范围

要想进行正确的思维活动，获得关键的解题思路，必须明确其中的各个数学概念，那么就要清晰地理解数学概念的内涵和外延，概念的内涵：即这个概念所反映的事物的本质的属性。如，（1）等边三角形：三角形，三边相等；（2）矩形：平行四边形，一个角是直角；（3）相反数：两个数，只有符号相反……概念的外延：即适合这个概念的一切对象。如，（1）复数：实数和虚数；（2）实数：有理数和无理数；（3）有理数：整数和分数……

所以，学生在对数学概念的学习时需要注意每个概念的内涵和外延，要善于解剖概念中的关键词语，只有明确了概念，才能在解题的过程中寻找关键的信息，了解了考查对象的本质及范围，就明确了解题的方向及深度，等于找到了黑暗的道路中的一盏明亮指路灯，茂密的森林中的一个指明方向的指路牌。

二、联想相关知识信息——利用转化的思想，将未知转为已知

研究教材中的知识体系时，常常会用到一个数学思想方法：转化的思想。

如，在我们的教材中：

七年级时，将有理数的减法运算转化为加法运算；将有理数的除法运算转化为乘法运算；将一元二次方程的解法转化为解一元一次方程；将解分式方程转化为解整式方程……

八年级时，将四边形的问题转化为三角形的问题；将复杂的、不规则的图形转化为规则图形进行解决……

九年级时，将锐角三角函数的问题转化为相似三角形的问题；将圆的问题转化为相似的问题；将内心问题转化为角平分线的问题……

在平时的教学中，可以发现对于知识的生成过程，新问题的解决方法的寻找，利用的都是转化的思想，在寻找问题的解题思路中，也可以遵循这个规则：透彻理解数学概念之后，将孤立的知识点与已学过的知识相联系，整合，寻找其异同点，继而复杂的简单化，繁复的简洁化，弯曲的直接化等，将难以解决的问题转化为已知的、已会的问题来解决。

三、利用基本模型得到方法——寻找已知的基本模型，得到解题的方法

在平时的教学过程中，将各个题型的解题规律进行归纳总结，让学生的知识体系系统化，故数学具有较多的基本模型：

在学习方程时，握手问题、贺卡问题、比赛问题、路程问题、增长率问题、优惠问题等；

在学习角平分线时：角平分线、等腰、平行，三个中“知二得一”模型；

在学习圆的垂径定理时：过圆心的直径、平分弦、垂直于弦、平分弦所对的优弧、劣弧，五个中“知二求三”模型；

在学相似三角形中，有射影定理、两两相似等等。

认真研究这些基本模型，在做题的过程中往往可以达到事半功倍的效果。

本文从中考真题中一道三角形的四心的问题进一步解析这三个步骤，对于三角形的四心，一则学生无法区别四心的概念，二则因为四心定义的简单，学生无法从中获得有用的信息，而对题目束手无策。

例：抛物线C1：y=ax2+bx+c的开口向下，顶点为D点，与y轴交于点C，且经过A（-1，0），B（3，0）两点，若△ABD的面积为8.

（1）求抛物线C1的解析式；

（2）Q是抛物线C1上的一个动点，当△QBC的内心落在x轴上时，求此时点Q的坐标。

（1）易求抛物线的解析式为：y=-x2+2x+3