加替沙星铽敏化化学发光与应用

2024-04-14

加替沙星铽敏化化学发光与应用(共5篇)

篇1:加替沙星铽敏化化学发光与应用

加替沙星铽敏化化学发光与应用

加替沙星(Gatifloxacin, GFLX), 1-环丙基-6-氟-7-(3-甲基-1-哌嗪基)-8-甲氧基-1,4-二氢-4-氧-喹啉-3-羧酸1/2水合物是一种新型的第三代氟喹诺酮抗菌药物, 与现有的`氟喹诺酮类药物相比, 增强了对金葡萄菌、肺炎菌等革兰阳性菌的抗菌活性, 对厌氧菌、支原体和抗酸菌也有抗菌活性, 拓宽了抗菌谱. 该药物的水溶性好, 易吸收, 代谢稳定, 副作用小, 具有良好的药效和安全性[1,2]. 其8位带有甲氧基, 是光毒性最小的氟喹诺酮类药物. 对此药物的分析方法的研究在临床治疗和药动学研究上具有重要意义. 目前GFLX的分析方法仅有高效液相色谱法[3]和荧光光度法[4]. 高效液相色谱法操作复杂, 仪器昂贵. 荧光光度法干扰大, 不适于生物样品的测定. 我们依据Tb3+-GFLX能极大地增强Ce(Ⅳ)-Na2SO3产生的微弱化学发光现象, 提出了Tb3+-GFLX-Ce(Ⅳ)-Na2SO3敏化化学发光测定GFLX的新方法. 此方法灵敏度高, 测定范围广, 仪器和操作简单, 不需要光源和无光散射等背景干扰的特点, 尤其与流动注射相结合, 测定简单快速, 重现性好. 线性范围为2.0×10-8~1.0×10-6 mol/L, 检出限为3.5×10-9 mol/L(3σ), 相对标准偏差为3.2%(c=1.0×10-7 mol/L, n=11). 此法用于生物体液中GFLX的测定, 不需预先分离, 适当稀释即可测定. 本文简述了发光机理.

作 者:连宁 赵慧春 孙春燕 金林培 张仲伦 郑雁珍 作者单位:连宁(青海师范大学化学系)

赵慧春,孙春燕,金林培(北京师范大学化学系,北京,100875)

张仲伦,郑雁珍(中国科学院生物物理研究所,北京,100101)

刊 名:高等学校化学学报 ISTIC SCI PKU英文刊名:CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES年,卷(期):23(4)分类号:O657.3关键词:加替沙星 铽 化学发光 能量转移 流动注射

篇2:加替沙星铽敏化化学发光与应用

Tb3+敏化化学发光法测定氟罗沙星

利用Tb3+能大大增强Ce*$-H2SO3-FLX的.化学发光,建立了一种简单、快速、高灵敏度、高选择性的测定氟罗沙星的新方法,氟罗沙星浓度在2.0×10-9~8.0×10-8 mol/L范围内时,发光强度与氟罗沙星浓度呈良好的线性关系,方法的检出限为8.3×10-10 mol/L,对2.0×10-8 mol/L的氟罗沙星平行测定11次,相对标准偏差为1.2%.并用该方法测定了沃尔得及天方片剂中氟罗沙星的含量,不经任何预处理,直接测定了尿样中氟罗沙星的含量及回收率,结果令人满意.

作 者:聂丽华 赵慧春 王旭 作者单位:北京师范大学化学系刊 名:分析化学 ISTIC SCI PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY年,卷(期):29(8)分类号:O65关键词:化学发光 流动注射 氟罗沙星 片剂 尿样

篇3:加替沙星铽敏化化学发光与应用

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

IR-PROSTIGE-21型红外光谱仪 (日本岛津公司, KBr压片) ;UV-2550型紫外可见分光光度计 (日本岛津公司) ;RF5301-PC型荧光光谱仪 (日本岛津公司) ;2400Ⅱ型元素分析仪 (美国PE公司) 。铽含量通过EDTA法测定, 以二甲酚橙为指示剂。

主要试剂:Tb CI3·6H2O (99.9%, 国药集团) , 诺氟沙星 (AR) , 邻菲啰啉 (AR) , 无水乙醇 (AR) 。

1.2 方法

将Tb CI3·6H2O和诺氟沙星、邻菲啰啉以摩尔比例1:3:1在乙醇溶液中溶解后混合, 以Na OH调节溶液p H约为5~6, 加热下搅拌5h后得到沉淀, 将沉淀静置24h后抽滤, 用乙醇洗涤三次, 干燥, 得到铽-环丙沙星-邻菲啰啉三元稀土配合物。

2 结果与讨论

2.1 配合物结构表征

2.1.1 红外光谱

取配合物, 制成溴化钾压片, 在400~4000cm-1进行红外光谱扫描, 其主要光谱数据见表1。形成配合物后配体分子内部原子间键强度的变化导致其红外吸收峰的位置和强度变化。由表1配体和配合物的红外光谱数据结果可见, 两个配体和配合物的红外光谱特征吸收峰明显不同。在生成配合物以后, 原配体诺氟沙星在1732cm-1处羧基上的羰基振动吸收峰消失, 环上1616cm-1附近的吸收峰保留, 说明诺氟沙星分子有一个羰基参与了配位;配合物在1384cm-1和1585cm-1附近出现两个新峰, 分别为伸缩振动吸收峰υs (COO-) 和不对称伸缩振动吸收峰υas (COO-) 。即Tb3+与诺氟沙星的羧基氧原子配位。配体邻菲啰啉的特征峰ν (N=C) 1586cm-1和δ (C-H) 853cm-1、737cm-1峰分别移动到1555cm-1和842cm-1、720cm-1, 向低波数发生移动, 说明邻菲啰啉以N原子与Tb3+发生配位。在3433cm-1附近出现了O-H宽峰, 而没有出现水分子的面内和面外摇摆振动吸收峰, 表明配合物分子中有水存在, 且为结晶水, 未发生配位。配合物在458cm-1出现了较弱的新的吸收峰, 为Tb-O的伸缩振动峰。综合红外光谱的分析结合元素分析的结果可初步推测配合物其组成为Tb (NFLX) 3Pheno4H2O。

对配合物溶解性进行了测试。溶解度实验表明, 配合物易溶于水, 微溶于DMF、氯仿、THF, 不溶于乙醇、环己烷、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、甲醇。

2.1.2 配合物紫外光谱

将配体和配合物配成1×10-4mol/L的水溶液, 在波长200~400nm范围内进行紫外吸收光谱扫描, 测试了配体和配合物的紫外吸收光谱, 如图1。

紫外光谱结果显示, 配体和配合物的紫外吸收最大吸收峰位置明显不同。形成配合物后, 诺氟沙星在283nm处的峰位发生了移动, 配体邻菲啰啉在265nm和228nm附近的两个峰位及, 吸收峰的相对强度也发生了变化, 峰位及峰强度的改变证明配体与稀土离子发生了键合作用。

2.2 配合物荧光光谱

荧光光谱用RF-5301-PC型荧光光谱在室温下测定, 扫描速度1200nm/min, PMT电压700V, 狭缝宽度1.5nm。配合物溶液浓度为1×10-4mol/L。

固定发射波长为545nm, 扫描配合物水溶液的荧光激发光谱, 见图2。由图2可见, 配合物最佳激发光波长为341nm。在341nm的激发波长下, 扫描配合物的发射光谱, 见图3。在490nm、545nm、587nm、620nm分别表现Tb3+的特征荧光发射峰, 分别对应于5D4→7F6、5D4→7F5、5D4→7F4、5D4→7F3跃迁, 位于545nm处为最强峰。配合物溶液发出很强的绿色荧光。在配合物的荧光发射光谱上没有出现配体的特征峰, 说明配体诺氟沙星和邻菲罗啉有很好的协同作用, 很好的将能量传递给铽离子, 敏化铽离子发光。

3 结论

合成了诺氟沙星 (NFLX) 药物与Tb3+及辅助配体邻菲罗啉的三元稀土配合物, 表征了其结构, 研究了其溶解性能。荧光光谱显示, Tb (NFLX) 3Phen具有很好的荧光性, 诺氟沙星和邻菲罗啉配体有效的将能量通过分子内能量传递给铽离子, 敏化了铽离子的荧光发射, 配合物发出尖锐的稀土离子荧光峰。铽-诺氟沙星-邻菲啰啉作为一种具有强荧光性和良好的水溶性的配合物, 具有很好的应用开发前景。

参考文献

[1]Shailaja#space2;#R, Patila, Umesh#space2;#S, et#space2;#al.Fluorimetric#space2;#Study#space2;#of#space2;#the#space2;#Interaction#space2;#Between#space2;#ATP#space2;#and#space2;#Ciprofloxacin-Y3+Complex#space2;#and#space2;#its#space2;#App#space2;#lication[J].Journal#space2;#of#space2;#Rare#space2;#Earths, 2010, 28 (3) :329-332

[2]Yuguang#space2;#Lv, Ye#space2;#Li, Li-bin#space2;#Yang, et#space2;#al.Research#space2;#and#space2;#application#space2;#of#space2;#fluorescence#space2;#system#space2;#on#space2;#norfloxacin-terbium-Phen-SDBS[J].Journal#space2;#of#space2;#Rare#space2;#Earths, 2012, 30 (8) :842-846

[3]王莹, 姜兆华, 吕玉光, 等.稀土-环丙沙星纳米稀土配合物合成、表征及发光性质研究[J].稀土, 2013, 34 (3) :50-54

[4]王文华, 杨天林, 丁玲, 等.一种新型三足席夫碱稀土配合物的合成及与DNA作用方式的研究[J].稀土, 2012, 33 (3) :90-95

篇4:加替沙星铽敏化化学发光与应用

[关键词] 化学发光免疫分析技术;研究进展;应用

章编号:1004-7484(2014)-03-1787-01

化学发光免疫分析起源于1977年,化学发光免疫分析主要利用了化学发光测定技术和免疫反应,化学发光测定技术有着非常高的灵敏性同时免疫反应有着非常高的特异性,通过两者的结合使得化学发光免疫技术成为现今最新的免疫分析技术。化学发光免疫分析技术较其他免疫分析技术而言拥有着高灵敏度、价格低以及操作简便等多种优点,正因为这些优点使得化学发光免疫分析技术被广泛的运用。

1 化学发光免疫分析技术的基本原理

化学发光免疫分析最关键的步骤就是化学发光以及免疫,免疫分析技术就是对分析的抗原进行标记,而化学发光分析技术就是对所产生的微观反应进行检测,以此来达到分析的目的。免疫分析就是利用抗原与抗体之间的特异性结合所产生的明显现象来检测所检测物质,而采用标记免疫分析就是通过对抗原进行放射性的标记,这样就能够更好的检测微观物质所发生的化学反应[1]。化学发光技术则是化学反应中的一种现象,化学反应必然伴随着能量的迁移,而具备能量的分子为了達到稳定的状态就要释放多余的能量,能量则是通过光形式释放出来,对所发出的光和能量迁移进行分析便可以知道内部所发生的化学变化。

2 化学发光免疫分析技术的应用

由于化学发光免疫分析技术不仅拥有较好的灵敏度以及较高的自动化程度,而且其还有较高的精密程度,所以得到了较多的应用。化学发光免疫分析技术在兽医学、临床医学以及食品分析中都得到了相当多的应用,下面将进行详细介绍。

2.1 化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用 化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用还处于早期阶段,因此没有得到较多的应用。主要原因则是化学发光免疫分析技术在兽医学的应用中会跨越化学、兽医以及生物学科方面的知识,而这样加大了化学发光免疫分析技术的应用难度,因此没有在兽医学中得到较多的应用。但是化学发光免疫分析技术仍然是兽医学中一项疾病快速检测的方法,即通过化学发光免疫分析技术可以精准快速的判定动物所发生疾病的原因,而且通过这项技术的运用还可以监测动物体内的疾病发生概率[2]。化学发光免疫分析技术在我国没有较多的应用到兽医学中,而且技术也没有国外先进,这进一步制约了化学发光免疫分析技术在我国的应用。国外化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用较多,比如国外利用化学发光免疫分析技术来进行动物肠道病毒检测试验、猪肉中沙门菌抗体检测以及评价胰岛素浓度对奶牛繁殖性能的影响,并且取得了较好的成果。

2.2 化学发光免疫分析技术在临床医学中的应用 化学发光免疫分析技术在临床医学中有较多的应用,比在兽医学中的应用要更加广泛,而且在临床医学的应用中非常重要。美国通过对化学发光免疫分析技术进行改进,使得其具备更好的灵敏性以及精准性,现今化学发光免疫分析技术在临床医学中主要用来检测甲状腺系统、性腺系统、血液系统以及心血管系统中激素浓度。后来有科学家利用金刚烷衍生物在碱性磷酸酶的条件下可产生长时间辉光的特性将其运用到化学发光免疫分析技术中,即通过碱性磷酸酶来作为标记物,完善后的化学发光免疫分析技术科用来检测心脏病、传染病、糖尿病以及过敏症状,另外还可以用于血液系统和胰岛素的检测中。现今将化学发光免疫分析技术运用的最好的就是Roche公司,其所创造的ECL分析系统可以检测到及其细微的反应信号,并且特异性反应极为强烈,操作过程也非常快捷。

2.3 化学发光免疫分析技术在食品分析上中的应用 现今食品安全已成为人们越来越关注的问题,检测食品中含有的违规成分也有一定的难度。但是通过化学发光免疫分析技术的运用可以快速精确的测定食品中违规成分的含量,使得食品检测部门可以更好的测定食品中含有成分的含量。化学发光免疫分析技术可以用于鸡肉样品中CAP的检测以及牛奶中黄曲霉毒素的检测,国外科学家还利用化学发光免疫分析技术来测定牛奶、牛肉以及鸡蛋中肉毒梭菌毒素A的含量,由于化学发光免疫分析技术有着较高的灵敏度,所以所测定的结果非常准确,而且极大的节省了测试所需要的时间[3]。Yang M等科学家将增强型化学发光免疫检测技术以及电荷耦合器件结合起来创造了检测食品中葡萄球菌肠毒素B的技术,其灵敏度非常高、方法实用而且检测成本非常低。

3 化学发光免疫分析技术的新研究进展

3.1 新的标记物 化学发光免疫分析技术运用的重点就是检测内部微观化学反应的情况,而为了达到更好的检测效果就需要发光物质发光时间更加持久发光更加明亮,而这可以通过标记新的标记物来得以实现。各国科学家都致力于研究标记物的发光时间以及发光强度,标记物发光需要特定酶的催化,这需要科学家通过长时间的实践才能够证明哪一种标记物在哪一种酶的催化下才能够达到长时间的发光以及高强度的发光,另外对于标记物发光过程还需要较高的稳定性。目前科学家通过大量实验得到luminol-H2O2在HRP2A的催化下可以发出高强度而且长时间的光,而且发光的稳定性非常好。化学发光免疫分析技术能够快速、灵敏、精准的测定非常细微的物质含量,对于医学检测以及食品安全检测都有着较多的应用,通过不断的研究会使得该技术得到更广泛的运用。

参考文献

[1] 魏光伟,余永鹏,魏文康.化学发光免疫分析技术及其应用研究进展[J].动物医学进展,2010-03-20.

[2] 农天雷.常用化学发光免疫分析技术及其特点[J].现代医药卫生,2011-07-30.

[3] 吴建伟.化学发光免疫分析技术的临床应用及研究进展[J].中国实用医药,2010-12-10.

篇5:加替沙星铽敏化化学发光与应用

【关键词】 临床检验;应用;化学发光免疫技术

doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2013.11.826 文章编号:1004-7484(2013)-11-6802-02

化学发光免疫技术具有标本用量较少、稳定性较高、标记物制备较容易、不污染环境、操作简便以及便于实现自动化等优点,主要将免疫分析与化学反光分析相结合,被广泛应用到临床医学和基础医学中。化学发光免疫技术是继酶免疫、发射免疫以及荧光免疫测定之后的免疫技术,在临床检验中经常需要检测和分析表征性物质,以判断疾病以及身体病理特征[1]。通过在临床检验中应用化学发光免疫技术,快速分析各种物质,能够提高检测的灵敏度与准确度。

1 化学发光免疫技术的概况

化学发光免疫技术主要包括化学发光分析和免疫分析系统,用于抗原、抗体、酶、激素、维生素以及脂肪酸等检测分析技术。化学发光分析是根据免疫反应情况,待免疫反应完之后加入酶或氧化剂等发光底物,发光底物经过氧化会形成处于激发状态的中间体,通过发射光子来释放能量,以达到稳定状态。而免疫分析是在抗体或抗原之上利用标记物进行直接的标记,标记物为化学物质或酶,待抗体或抗原发生反应后,会产生带有抗体免疫的复合物。

化学发光免疫技术的原理是以化学发光剂对抗体或抗原进行直接标记,待磁颗粒性、抗体或抗原发生反应之后,在磁场的作用下,分离处于游离状态和结合状态的化学发光剂,将发光促进剂加入到结合状态的部分,使其进行快速的发光反应,并以定性或定量的方式检测处于结合状态的发光强度。化学发光免疫技术系统具有操作较为简单,结果较为准确可靠,且自动化程度较高以及试剂储存的时间较长等优点,可根据激发态分子能量的来源,将化学发光的过程分为生物发光、光照发光和化学发光。

2 化学发光免疫技术在临床检验中应用的类别

化学发光免疫技术在临床检验中,主要分为酶催化化学发光的免疫分析、直接标记发光物质的免疫分析以及电化学发光的免疫分析。酶催化化学发光的免疫分析是通过抗体或抗原在标本中发生反应之时,采用发光的酶作为标记物。直接标记发光物质的免疫分析是采用吖啶酯对体或抗原进行直接标记,待抗体或抗原发生免疫反应后会产生一种复合物,加入氢氧化钠和带有双氧水的氧化剂后呈碱性,出现发光、分解等现象[2]。而电化学发光的免疫分析过程包括化学反光和电化学,将三丙胺作为电子供体,对抗体或抗原用三联吡啶钌进行标记,在电场的作用下,通过电子转移而产生发光反应。

3 在临床检验中应用化学发光免疫技术的分析

3.1 应用化学发光免疫技术分析传染性疾病 乙型肝炎病毒是血清学的标志物,是治疗和评价机体免疫功能的重要指标。诊断乙型肝炎病毒中的抗体或抗原的表面部分是否受到感染,这样的诊断为常规酶法,但常规酶法会使低病毒含量的携带者出现漏检的情况。化学发光免疫技术和以前的常规酶法相比,具有线性范围宽和高灵敏度等特点,在临床检验中应用化学发光免疫技术对传染性疾病进行分析,如对于已感染免疫病毒的儿童,应对其体内的甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒以及单纯疱疹病毒以Bowser等进行测定,检测出的灵敏度较高。

3.2 应用化学发光免疫技术分析肿瘤标志物 肿瘤标志物指肿瘤肿瘤在发生与增殖的过程中,通过肿瘤细胞进行合成、释放或者是机体与肿瘤细胞发生反应,产生酶、激素、白质以及癌基因产物等物质。患者的细胞、血液以及组织中都会有肿瘤标志物,利用化学发光免疫技术能够快速的寻找到难以发现的肿瘤标志物。通过对患者进行体外的辅助诊断以及术后监测,能够缓解患者的病痛。采用Mac等诊断和监测食管癌患者的病情,如对血清中的癌胚抗原浓度、鳞状细胞癌的抗原浓度等进行检测。以Raslan和Shabin对健康孕妇德阴道液和胎膜早破中的人绒毛膜促线性激素和AFP标志物进行比较,AFP的特异性和敏感度较高。

3.3 应用化学发光免疫技术分析心脏疾病 在临床检验中,经常以同丁酶对心脏疾病患者进行定量测定。心肌损伤的标志物包括肌酸激酶、肌红蛋白和肌钙蛋白T,应用化学发光免疫技术分析心脏疾病的标记物,能够提高检测的准确度。通过采用Dutra等将肌钙蛋白T(cTnT)的受体分子制成免疫传感器,应用于早期心肌梗死的临床检测,其方法较好,具有相关性,可以应用到临床中对标本进行检测。

3.4 应用化学发光免疫技术分析激素 激素是细胞和细胞间进行信息传递的媒介,主要指散在内分泌细胞中或内分泌腺所分泌出来的高效能的活性物质。在临床检测中应用化学发光免疫技术分析和测定性激素、甲状腺激素等激素,能够为临床诊断和治疗提供比较可靠、准确的实验室数据,提高检测的灵敏度和特异性[3]。通过以Vutyavanich等对血清中的促黄体生成素、睾丸素、促卵泡生成素以及催乳素等进行检测,以Karlsson对患者甲状旁腺进行检测,以Gayk和Schmidt对骨代谢标志物中的降钙素进行测量,并和放射免疫法相比,其精密度和准确度较高。

3.5 应用化学发光免疫技术分析其他物质 在临床检验中,应用化学发光免疫技术还可以分析细菌、维生素、免疫球蛋白、细胞因子、酶以及基因等。通过Dasgupta等对血清中高辛含量进行检测,以Quan等对食物中含有的盐曲霉毒素B1进行检测。

综上所述,化学发光免疫技术具有不污染环境、操作简便以及便于实现自动化等优点,被广泛应用到临床医学和基础医学中。在临床检验中应用化学发光免疫技术,能够为临床检验提供数据依据,提高检测的精密度和准确度。

参考文献

[1] 施丽娟.发光免疫分析技术及在临床检验中的应用[J].检验医学与临床,2012,6(4):57-58.

[2] 刘爱国.学发光免疫分析技术在临床检验中的应用分析[J].内蒙古中医药,2013,7(14):89-90.

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