术中冰冻病理

术中冰冻病理（精选十篇）

术中冰冻病理 篇1

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选择2012年1月-2014年12月在苏州市高新区人民医院和建湖县人民医院接受治疗的乳腺肿瘤患者86例作为研究对象, 均为女性患者, 年龄24~61岁, 平均 (38±4.5) 岁。按乳腺肿块位置分为:左侧乳腺41例, 右侧乳腺44例, 双侧1例;良性肿瘤46例, 恶性肿瘤40例。对所有患者行术中冰冻切片病理诊断和检查, 并与石蜡切片的病理检查进行对照, 所有检查标本均于术中立即送检, 均为新鲜的组织。

1.2 检查与诊断方法

于手术过程中将肿块切除后认真检查并送检新鲜的组织:资深医师进行冰冻切片的病理检查, 取材根据病理医师的具体需要来定, 取材之后使用恒冷冰冻切片机进行制作。具体操作步骤为:将选取组织放置在冻头上 (涂有甲基纤维素包埋剂) , 将温度控制在-25℃左右进行快速冷冻, 适宜的冷冻时间为2~3 min, 之后进行切片 (切片的厚度为5μm) , 使用95%的酒精或是福尔马林 (10%) 对切片进行固定, 固定时间为1 min, 之后水洗和HE进行染色, 并进行加温速染, 染色完成用酒精进行逐级脱水, 继而封片。在光学显微镜之下进行切片判读, 将诊断的结果传到送检科室。

完成冰冻切片的病理检查后, 将剩余的冰冻组织进行常规的石蜡切片病理检查和诊断复核, 对于比较难以进行确诊的患者, 可以与免疫组化结合进行检查和诊断。检查完毕后将冰冻切片和石蜡切片两项病理检查的结果进行比较, 最终的诊断结果将石蜡切片诊断结果作为标准。

1.3 病理评定标准

本次病理检查主要以确诊、延迟诊断、误诊作为评定标准。 (1) 确诊:指冰冻切片的病理诊断在良性肿瘤与恶性肿瘤的分型和分类上与石蜡切片是一致的 (完全符合) 或是基本符合; (2) 延迟诊断:是指冰冻切片的病理诊断无法将病变性质明确, 可推断恶性肿瘤的存在, 或是具体确诊要等到石蜡切片具体的病理诊断结果; (3) 误诊:诊断结果为假阴性和假阳性[3]。

2 结果

行常规的石蜡切片病理检查和诊断复核结果:40例患者为恶性肿瘤, 占46.51%, 其中31例患者为浸润性的导管癌, 占36.05%, 6例患者为导管原位癌, 占6.98%, 2例患者为浸润性小叶癌, 占2.33%, 1例为神经性内分泌癌, 占1.16%;46例患者为良性肿瘤, 占53.49%:31例为乳腺纤维瘤和腺病, 占36.05%, 9例为导管内的乳头状瘤, 占10.47%, 6例为不典型的导管增生, 占6.98%。

经术中行冰冻切片的病理检查:本组86例乳腺肿瘤患者中, 79例患者确诊, 确诊率为91.86%, 其中完全符合的患者76例, 占88.38%, 基本符合患者3例, 占3.49%;5例患者延迟诊断, 延迟诊断率为5.81%, 其中, 4例诊断为乳腺增生 (后经石蜡切片结合免疫组化检查诊断2例为浸润性小叶癌, 2例为乳腺增生症纤维硬化期) , 1例为不典型的导管增生, 切片使细胞异形, 可能是导管原位癌;2例患者误诊且均误诊为假阴性, 误诊率为2.33%。2例误诊患者:1例导管原位癌, 进行组织取材时癌组织未取到, 进行石蜡切片行病理组织检查时见癌组织;1例为浸润性导管癌, 误诊原因是由于取材不当, 依据快速切片所取组织诊断为乳腺导管内原位癌, 行石蜡切片最终诊断为浸润性导管癌。

3 讨论

作为多发病和常见病, 乳腺疾病的种类多种多样, 一直以来, 由于细胞学检查受到多方面的制约, 且存在假阳性和误检率, 这使得冰冻切片检查在临床更加广泛的应用起来[4]。冰冻切片检查的诊断率更高, 且临床医师可根据冰冻切片的病理检查结果来决定应该采取什么样的手术方案, 这对患者来说至关重要。然而该种病理检查的方法还存在一定误诊率, 且会受到时间、制片的质量以及送检的局限等多因素的影响, 分析影响诊断准确的具体因素有重要的临床意义[5]。

冰冻切片的病理检查出现延迟诊断以及误诊原因主要有:首先, 乳腺肿瘤的组织来源复杂, 但冰冻切片取材时间比较紧迫, 致使取材不当, 从而影响诊断;其次, 一部分病变组织有着较广的侵袭范围, 且表现复杂, 使医师判断不是很全面, 取材不足, 难以判断间质侵润;再次, 医师的经验不丰富制片不良导致读片错误[6]。

总结冰冻切片的病理检查结果延迟诊断和误诊原因得出以下结论:一方面, 进行标本取材时要对冰冻切片检查的局限性进行充分的认识, 对标本进行细致的检查, 切忌盲目的进行切开的同时, 避免取材的局限性。乳腺标本应该进行多切面, 不能遗漏任何一个瘤结, 切片也尽可能的薄一点。若取材时有包膜也要一同取下, 大小保持适中, 若取材过大会使冷冻的效果受到影响, 而太小会使病灶丢失和破坏, 病变诊断不全面[7,8], 多对包膜及实性区取材, 并对包膜浸润和间质浸润认真的鉴别[9]。另一方面, 由于制片不佳也会影响诊断, 而影响制片的因素有冻头的温度 (温度低使使组织太硬) 、血块多、组织的钙化、染色动作不轻柔、固定的时间不够等, 使切片的完整性无法保证。因此, 必须对肿瘤病变的特点进行正确全面的认识, 提高临床诊断水平。最后, 对于快速病理诊断有疑问的病例, 应该而应结合影像学以及实验室等检查, 以及患者的临床表现进行综合判断。病理检查医师还应不断提高自身操作和诊断的水平以及取材技术[10]。

结合本次研究中两误诊为假阴性病例, 1例导管原位癌, 由于病灶较小, 如在取材时加以认真仔细观察, 不遗漏小的可疑病灶, 一定能在快速切片时得到准确的诊断结果;1例为浸润性的导管癌, 误诊原因是由于取材不当, 快速切片所取组织中未能发现导管浸润, 行石蜡切片最终明确诊断, 随访病例, 未对临床治疗造成影响, 但是教训仍然深刻。

综上所述, 冰冻切片的检查方法虽然受到很多限制, 存在误诊等情况, 但作为比较可靠、快速和准确的诊断手段, 只要在取材过程中能够掌握正确的方式, 并注意切片的质量, 冰冻切片病理检查不仅能够有助于判断肿瘤的性质, 最大程度的减少误差, 为临床医师快速决定选择何种手术方案, 值得临床广泛推广和应用。

摘要：目的:对乳腺肿瘤术中冰冻切片病理诊断进行临床分析研究, 以期提高临床诊断率。方法:选择2012年1月-2014年12月在苏州市高新区人民医院和建湖县人民医院接受治疗的乳腺肿瘤患者86例作为研究对象, 回顾性分析所有患者的临床资料, 对比分析患者术中冰冻切片和术后石蜡切片病理诊断的结果和报告。结果:经术中冰冻切片病理诊断, 86例乳腺肿瘤患者中, 79例患者确诊, 确诊率为91.86%, 其中完全符合76例, 占88.38%, 基本符合3例, 占3.49%;5例患者延迟诊断, 延迟诊断率为5.81%, 其中4例诊断为乳腺增生 (后经石蜡切片结合免疫组化检查诊断2例为浸润性小叶癌, 2例为乳腺增生症纤维硬化期) , 1例为不典型导管增生, 切片使细胞异形, 可能是导管原位癌;2例患者误诊且均误诊为假阴性, 误诊率为2.33%。结论:术中冰冻切片病理诊断率高, 具有十分重要的临床指导意义。要使冰冻切片的诊断率和准确率、判别能力进一步提高, 必须要在前期取材过程中掌握正确的方式, 并在中期注意切片的质量, 这样可以在后期提高对诊断的认识, 避免不必要的失误。

关键词：乳腺肿瘤,冰冻切片,病理诊断

参考文献

[1]韦东明, 韦桂兰.乳腺肿瘤的超声诊断及术后病理结果分析[J].中外医学研究, 2013, 11 (6) :50-51.

[2]贾晓娟.乳腺增生症的病理分型及CT诊断价值[J].中外医学研究, 2013, 11 (6) :67.

[3]吴晓晴.彩色多普勒超声对乳腺肿块的诊断[J].中外医学研究, 2013, 11 (15) :44.

[4]黄佩佩, 潘高云, 朱张茜, 等.超声弹性成像和BI-RADS分级在乳腺癌诊断方面的对比分析[J].中外医学研究, 2013, 11 (29) :43-45.

[5]史连国.原发乳腺淋巴瘤的临床病理学特征及预后关系研究[J].中外医学研究, 2014, 12 (6) :127-128.

[6]吴敬恒.超声弹性成像在乳腺良恶性实性结节中的诊断价值[J].中外医学研究, 2014, 12 (31) :80-81.

[7]孙莉薇.全数字化乳腺钼靶X线摄影在乳腺癌影像学诊断中的作用分析[J].中外医学研究, 2014, 12 (32) :40-41.

[8]肖永波, 黄小杏.乳腺浸润性微乳头状癌临床病理分析及免疫组化分析[J].中外医学研究, 2014, 12 (29) :77-78.

[9]周斌.细针穿刺细胞学诊断乳腺肿块516例分析[J].中外医学研究, 2011, 9 (7) :45-46.

术中冰冻病理 篇2

【摘要】 目的 探讨卵巢肿瘤术中快速冰冻切片的诊断价值，总结经验。方法 本次收集85例卵巢肿瘤患者作为研究对象，均为本院2009年3月～2013年9月收治，术中进行快速冰冻切片病理诊断，并与术后常规石蜡切片进行对照。结果 本组85例患者快速冰冻切片与术后石蜡切片对照，总确诊率为95.3%（81/85）。其中良性肿瘤确诊率为100%（58/58），交界性肿瘤确诊率为80%（8/10），恶性肿瘤确诊率为88%（15/17）。误诊4例，误诊率为4.7%。结论 病理医生与临床医生在术前及术中密切沟通，从实验室检查结果、病史、手术观察等多方面分析，最终做出诊断，为临床医师提供卵巢肿瘤性质，有助于临床医师选择适宜的手术方式，应用快速冰冻切片病理诊断的方法是确定手术方式和切除范围的最佳手段。

【关键词】 卵巢肿瘤；快速冰冻切片；病理诊断；准确性

卵巢肿瘤种类繁多，可分为良性、恶性、交界性肿瘤，在妇科常见疾病类型占较高病发率，术前不易确诊，妇产科医生在手术中如仅凭肉眼观察，难以确定肿瘤性质。因肿瘤性质不同，在治疗方案的选择上也存在较大差异。所以手术过程中确定肿瘤性质及制定合理的手术治疗方案所进行的行快速冰冻切片病理诊断是完全必要的，更是对生育机能是否保留对侧卵巢及手术范围的选择具有决定性作用[1]。作者就本院病理科2009年3月～2013年9月卵巢病变术中快速冰冻切片病理诊断进行回顾性分析，旨在提高卵巢肿瘤冰冻切片病理诊断的准确性。资料与方法

1.1 一般资料 本次共选择研究对象85例，年龄16～77岁，平均年龄（38.4±3.1）岁。均与WHO卵巢肿瘤组织学制定的相关分类标准符合，其中良性58例，交界性10例，恶性17例。术后均行常规石蜡切片病理诊断，与术中快速冰冻切片病理诊断对照。

1.2 方法 标本均为术中送检新鲜组织，由经验丰富的病理医师取材，术中仔细观察肿物表面并逐层切开肿物，选代表性的部位取材，肿块病变直径2.5 cm的肿块根据肿瘤情况酌取2～3块，置标本于涂有OCT包埋剂的冻头上，恒温冷冻切片机内冰冻切片，HE染色、光镜诊断。20 min发出冰冻报告，报告分为恶性肿瘤、良性肿瘤、交界性肿瘤及延迟诊断。冰冻报告发出后，将原冰冻剩余组织做石蜡切片，复习原冰冻切片及石蜡切片，将诊断分为三类：①确诊：指冰冻切片诊断与石蜡切片诊断完全相同或良恶性原则一致。②描述性诊断（延迟诊断）：指冰冻切片不能明确诊断，需待石蜡切片最后诊断。③误诊：肿瘤良恶性诊断错误。分假阳性和假阴性（假阳性指良性误诊为恶性，假阴性指恶性误诊为良性）。结果

本组85例患者快速冰冻切片与术后石蜡切片诊断结果对照，总确诊率为95.3%（81/85）。其中良性肿瘤确诊率为100%（58/58）；交界性肿瘤确诊率为80%（8/10），恶性肿瘤确诊率为88%（15/17）。误诊4例，误诊率4.7%，85例冰冻切片确诊81例，诊断符合率95.3%，见表1。2例交界性肿瘤的误诊原因，1例由于为取材不当，另1例由于制片不良，加上读片经验不足，未考虑由于制片不良导致的假象及干扰因素；而2例恶性肿瘤的误诊原因，1例由于取材的局限性，送检标本的体积大，取材不够准确及不够全面，局部癌变的区域未被发现；另1例为送检组织过少，加上患者年龄年轻，诊断时过于保守。讨论

从临床治疗的角度，术中冰冻切片病理诊断解决了手术过程中难以诊断其疾病良、恶性的问题。近年来，经济体制改革的迅猛发展显著带动了医疗科技水平，公众对诊疗服务要求不断提高，妇科卵巢肿瘤患者在临床具有一定特殊性，及时明确诊断，并制定有效治疗方案是保障预后，提高患者生存质量，维护家庭和谐和社会安宁的关键。卵巢肿瘤种类繁多，临床无法确诊。卵巢肿瘤患者的治疗中，手术治疗是最常用的也是最重要的治疗方法。而即使辅以B超，CT等检查，卵巢肿瘤在术前不易确诊，手术医生凭其肉眼也无法判定肿瘤性质。而术中快速冰冻切片作为一项快速组织学诊断手段，在临床已普遍应用。术中冰冻可以为妇科医生在手术中提供病变性质（良性、交界性、恶性），从而决定适当的手术方案。冰冻切片诊断可预防手术切除过度或不足，有的也可避免不必要的二次手术。

本次研究以快速冰冻切片在卵巢肿瘤临床诊断中的应用价值为重点，选取相关病例展开探讨，结合本次选取患者年龄结构示，平均年龄（38.4±3.1）岁，提示处于生育期、有活跃且旺盛生育功能的女性为卵巢肿瘤高发人群，与相关研究[3，4]结论一致。分析实验结果，得出卵巢肿瘤采用快速冰冻切片诊断准确性居较高水平，确诊率为95.3%，与文献报道冰冻切片诊断肿瘤的准确率为94%～97%[2]接近。熟练掌握WHO卵巢肿瘤分类是具备开展快速冰冻切片诊断的病理医生的基本要求。较高的确诊率是临床制定恰当的治疗方案的可靠保证。

提高快速冰冻切片诊断卵巢肿瘤的准确率在于以下几个方面：①在手术前对卵巢肿瘤患者的CT、B超等常规检查结果和各种临床表现等方面病史及肿瘤分布情况进行详细掌握，并且在手术过程中及时和临床医师进行沟通；②对送检的冰冻标本要认真仔细的检查确定病变部位和器官，要查看标本的完整性，有无包膜，包膜破损否，与周围组织有无粘连，切面为囊性、实性，还是囊实性，囊性区囊壁局部是否有乳头，都要仔细查看，卵巢肿瘤往往体积大，较大的浆液性和粘液性肿瘤大体标本特征常有明显局部差异，尽可能知道最可能存在何种肿瘤或病变，做到心中有数；③冰冻切片的取材是非常重要的环节，取材局限是造成延迟诊断的主要原因，取材时应仔细观察标本的切面，选取肿块的实性区、囊壁增厚处及衬有丰富的乳头状突起的囊壁等处。实性区应取灰白色鱼肉区域及不同质地和不同颜色区域，易发现上皮增生改变和癌变的区域；④优良的冰冻切片是保证冰冻切片诊断正确的关键，必须要制作优质的冰冻切片，要防止冰晶的发生，把握最佳切片温度，在冰冻组织的在速冻板上出现冰冻包埋剂周边开始变白，最后中央透明消失，这时就得及时从速冻板上取下冷冻头，固定切片机夹头上并开始修组织块，为最佳的切片温度（-25～-23℃）和切片时间。冰冻切片中出现的空泡，大都是取材时标本接触到水的原因，应尽量避免，若不小心接触到水后，制片过程中要多用无水酒精冲洗即可。切片要做到组织平整、厚薄均匀一致，细胞染色清晰，对比染色好。⑤病理医师要客观、冷静，充分了解患者病史、体征及各项术前检查，诊断时要严格把握恶性肿瘤的诊断标准，严防假阳性诊断，以免造成过度手术，引起医疗纠纷或致残等严重后果。但对部分特殊病例，特别是交界性肿瘤，并且年龄年轻的，有生育要求的患者，又确实难以明确诊断的，应及时与临床医师沟通并讲明情况，临床医师根据患者的具体情况决定手术方式。

总之，快速冰冻切片作为手术中病理诊断，在明确肿瘤的良、恶性、明确边缘组织有无肿瘤组织、淋巴结是否有转移，具有重大帮助和指导意义。病理科医师只有紧密与临床联系，不断更新专业知识，认真总结经验，才能提高冰冻切片诊断的准确性，减少误诊，为临床提供快速准确的诊断，满足广大患者的需要。

参考文献

[1] 苑晓军.肿瘤术中冰冻切片的病理诊断分析及临床价值.中国社区医师，2011，32（1）：213-214.[2] Sawady J，Bemer JJ.Accuracy of and resons for frozen section：a correlative rerrospeetive study.Hum Pathol，1998（19）：1019.[3] Chambers JT，Merino MJ，Kohorn EL，et al.Borderline ovarian tumors.Am J Obstet Gynecol，1988（159）：1088-1094

术中冰冻病理 篇3

关键词 诊断 冰冻切片 石蜡切片 甲状腺肿瘤

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.09.191

甲状腺肿瘤及瘤样病变虽然是头颈外科中常见病变，但它们在临床上缺乏特异性表现，各种实验室检查及影像学检查，均无法在术前做出明确诊断，因此术中冰冻组织快速病理诊断成为临床外科医生决定手术方式的主要依据。此时病理诊断医师肩负责任重大，因不恰当的诊断可能会导致严重的后果，并给临床治疗造成困难，所以提高冰冻切片的准确性非常重要。甲状腺疾病特别是乳头状癌亚型及少见的甲状腺恶性肿瘤由于其结构复杂加之取材局限，诊断限时等情况，有时能明确诊断报告确有相当大难度。2007年1月～2011年10月对637例甲状腺病变快速冰冻切片进行回顾性分析，以期总结经验，提高甲状腺切片术中冰冻切片病理诊断的准确率。

资料与方法

一般资料：2007年1月～2011年10月做甲状腺冰冻切片637例，其中男82例，女555例，年龄17～78岁，平均45岁；74例恶性，年龄17～73岁，其中女63例，男11例。

方法：全部标本均为术中送检未固定新鲜组织，选取可疑病变处进行取材，立即置LEICA CM1900恒冷切片机内，-23℃冰冻3分钟，甲醇固定，HE染色，光镜观察，剩余组织常规做石蜡切片诊断进行对比分析，结果分为三种：①符合：病变良恶性一致。②误诊：包括假阳性和假阴性，假阳性指将良性病变误诊为恶性，假阴性是将恶性病变误诊为良性。③延迟诊断：指冰冻不能确定病变性质，有待石蜡切片报告。

结果

637例冰冻切片共检出甲状腺癌54例，延迟诊断9例，冰冻与常规诊断符合612例，诊断准确率为96.075%；常规石蜡切片共检出甲状腺癌74例，其中乳头状癌70例，滤泡性癌1例，未分化癌1例，髓样癌1例，桥本甲状腺炎合并乳头状癌1例；良性病变以结节性甲状腺肿最多523例，甲状腺瘤16例，桥本氏甲状腺炎12例，亚急性甲状腺炎8例；延迟诊断9例中，6例为甲状腺乳头状癌，1例为非霍奇金淋巴瘤，1例为桥本氏甲状腺炎合并乳头状癌，1例为甲状腺滤泡癌，16例假性诊断，术后常规切片15例为乳头状癌，1例为滤泡癌；1例假阳性报告，冰冻切片报微小癌，常规报告为结节性甲状腺肿伴灶性滤泡上皮乳头状增生。

讨论

术中冰冻切片对于临床疑为甲状腺癌的病例诊断是目前最可靠的方法，外科医生常根据其诊断结果来决定手术切除范围，冰冻切片诊断是选择手术方式的前提。甲状腺手术冰冻切片过程中，因冰冻取材局限性、冰冻切片形态学特殊性、加之时间仓促、病理诊断医师的诊断局限性，因此冰冻切片会出现延迟诊断或误诊；鉴于上述困难，外科医生要接受这一现实：无论病理医生多么精明和富有经验，总会有相当比例的高分化癌冰冻切片不能作出正确诊断［1］。Emanuelle等［2］认为冰冻切片诊断包膜内癌和微小癌价值有限。国内陈乐真等［3］报道冰冻切片的诊断准确率为99.8%，在本组637例甲状腺疾病中，女性多于男性。男女比例为1:6.8；甲状腺乳头状癌是甲状腺恶性肿瘤中最常见类型，本组74例甲状腺癌中乳头状癌70例(10.98%)，乳头状癌分化较好时易误诊为良性肿瘤［4］；另外少数甲状腺微小癌、甲状腺滤泡性肿瘤及非典型桥本氏甲状腺炎由于取材局限或病理诊断医师经验局限性，冰冻切片时也易误诊，总之冰冻切片存在相当大的难度和局限性，不可能做到百分之百正确，但可以通过自身努力，在取材、制片、诊断三个环节上多下功夫，就能最大限度提高冰冻切片的准确率。

术前应全面了解病史，在接到甲状腺疾病冰冻切片申请单后，尤其是临床疑癌而未确诊者，病理科医生应于术前及时调取患者病历，详细了解患者基本情况，如病史、甲状腺病变位置及B超、T3、T4检测结果，甲状腺ECT检测情况、颈部淋巴结有无肿大等作为冰冻切片诊断参考依据。

仔细检查大体标本防止漏诊。当新鲜手术标本送达时，病理医生要注意观察包膜情况，沿最大面剖开，每隔0.3～0.5cm多做剖面，防止漏掉主要病变，观察病变颜色、质地、有无灰白、灰黄色及脆弱坏死区，乳头，切开时有无砂砾感；对上述区域重点取材，务必连同包膜一起取2～3块组织；良性病变切面多显红色、胶质状，乳头状癌切面呈乳头或颗粒状、或灰白似疤痕、结节、部分切割时有砂砾感，滤泡癌切面呈灰白色、包膜常不完整，桥本甲状腺炎和亚急性甲状腺炎质实、切面黄白或灰白色、橡皮样。

甲状腺癌各亚型病理特点：①乳头状癌：WHO(2004)甲状腺和甲状旁腺肿瘤分类［5］将乳头状癌分为经典型15种组织病理学变异型，将具有细胞核特征的各种变异型甲状腺癌均归为乳头状癌。使乳头状癌包括乳头状微小癌成為最常见的癌，占所有甲状腺癌的74%～80%［6］所以在冰冻切片中解决乳头状癌的诊断，在临床上有重要意义。典型的甲状腺乳头状癌较易诊断，但当其以乳头状癌变异形或微小癌形式出现则诊断可能会出现困难或误诊。有报道称冰冻切片乳头结构可表现多样，如树枝状、花瓣状、车轨状、脑回状、绒毛状，不如石蜡切片乳头那样清晰和形态多样，甚至局部乳头与乳头间的细胞似腺样或拥挤成实性片状，但这些结构对于鉴别良恶性增生性乳头具有实用价值，良性乳头状增生结节内乳头内一般可见继发性滤泡。乳头状癌诊断的重要意义，具有脉管轴心的乳头状分枝及级数；核的特征性改变如毛玻璃样核(冰冻切片中毛玻璃样核不如石蜡切片清楚)，核沟、核内假包涵体；是继发性改变，如间质的纤维化、钙化和砂砾体的出现。核沟和砂砾体是诊断乳头状癌的有力指标和依据。在显微镜下疤痕区乳头的出现是乳头状癌的一个重要指征，此时若病灶小应补取标本或深切组织，以免漏取。②滤泡癌：在诊断甲状腺滤泡癌时，要见到明确的瘤组织穿透包膜或侵犯血管，有时在甲状腺间质血窦内可能会见到一些滤泡上皮细胞，不要误认为癌细胞侵入血管。血管浸润的形态学标志是癌细胞团紧贴血管壁；癌细胞和红细胞混在一起；血管内细胞形态与血管外肿瘤细胞相同［7］。③髓样癌：除经典型外一般不见滤泡增生和腺管形成。尚有小梁/束状型、腺泡型、假乳头样型、类癌型，叶/岛状型、小细胞型、血管瘤型，淀粉样物质沉积是其诊断要点。④未分化癌：细胞短梭形成多形性，异型性明显，核分裂像多见，酷似肉瘤，相对而言较易诊断。

误诊原因分析：16例假阴性报告中，9例在冰冻切片检查中无法检出，在术后的石蜡切片中通过大量组织切片检查确诊；6例由于诊断经验不足或心理压力过大造成了过低诊断；1例由于制片质量不理想，影响了诊断结果。1例假阳性是由于滤泡上皮增生折叠很象肿瘤性乳头，细胞轻度异型性，仅少数细胞有核沟，术中报微小癌；石蜡切片经多次取材未能找到较多的核沟、明显的毛玻璃核及核内包涵体，加做免疫组化也未能证实乳头状癌，最后报告为结甲伴灶性滤泡上皮乳头状增生。在延迟诊断9例中3例是由于冰冻过程中组织出现了结晶，以致染色不良影响了诊断；3例为结甲伴区域性乳头状增生，不能排除乳头状癌；其中2例常规诊断为乳头状癌，另1例依为结甲伴灶性滤泡上皮乳头状增生；1例滤泡性肿瘤侵犯部分包膜但未穿透，因取材局限性未能定性，建议待石蜡、常规切片中找到明确的包膜穿透结构，诊断为滤泡性癌；1例在桥本氏甲状腺炎中见灶性增生性乳头，由于乳头数量少，未能定性，石蜡切片诊为桥本氏甲状腺炎合并乳头状癌；1例诊为桥本氏甲状腺炎、淋巴瘤待排，术后经免疫组化检查确定为甲状腺非霍奇金淋巴瘤。

总之，虽然甲状腺术中冰冻切片诊断还存在一定局限性，但在目前来说它仍是甲状腺病变的主要诊断方法之一。病理诊断医师应全面深入了解甲状腺病变的形态学特点，提高对甲状腺病变，特别是冰冻切片与石蜡切片异同的认识，与临床医师紧密配合，提高冰冻切片的准确率，减少误诊，保证医疗质量。

参考文献

1 Rossi J Ackerman.外科病理学［M］.北京:北京大学医学出版社,2006:562.

2 Emanuelle L,Xavier L,Francois P,et al.Why do frozen sections have Limited value in encapsulated or minimally invasive follicular carcinoma of the thyroid［J］.Am J Clin Pathol,2001,115(30):370-374.

3 陈乐真,于占洋.提高冰冻切片诊断准确性的经验和体会［J］.中华病理学杂志,2000,29(2):140-142.

4 洪声明.1663例甲状腺疾病的病理分类［J］.中国医科大学学报,1994,23(6):563-564.

5 Ronald AD,Ricardo VL,Philipp UH,et al.World Health Organization classification of tumoys:Pathology and genetics of tumors of endocrine organs United Kingdom Europe［J］.Oxford university Press,2004,20(1):57-66.

6 沈立红,李宁江,杜水清,等.甲状腺癌冰冻切片与组织病理切片的对照研究［J］.中国基层医药,2010,17(1):84.

7 陈乐真.手术病理诊断图鉴［M］.北京:科学技术文献出版社,2005:97.

甘肃：基本药物实现“电子身份证”

本刊讯（记者 王夏玲） 目前甘肃省对省内生产基本药物的企业实现了全品种覆盖抽验，所有在产的基本药物品种全部具备赋码条件，全面实现对基本药物的电子监管。

为进一步保障药品安全，甘肃省逐步对参加招标的基本药物实行电子监管，即使是售价0.1元的小包装基本药物中标品种，出厂前也要带上“电子身份证”，即统一的药品电子监管码。

截至目前，甘肃省各级食药监部门已对卫生部规定的307种国家基本药物及甘肃省增补的206种基本药物，涉及省内生产企业的，进行了全品种覆盖抽验，并加大了對流通环节的基本药物，特别是生物制品、注射剂、有特殊储存要求等品种药物的监督抽验力度。

同时，力争甘肃全省30%的零售企业在2012年年内开展全部药品电子监管试点工作。

术中冰冻病理 篇4

1 资料与方法

1.1 临床资料

根据我院最近收取的56例卵巢肿瘤患者, 并收集整理56例卵巢肿瘤患者的石蜡切片和冰冻切片资料。根据卵巢肿瘤组织学的分类标准, 可以将诊断结果分成三类, 恶性、交界性和良性。在56例卵巢肿瘤患者中, 诊断结果为良性的有38例, 交界性的有8例, 恶性的有10例, 其中患者年龄在19~71岁, 平均年龄在35.3岁。

1.2 方法

结合相关临床资料对卵巢患者术中进行冰冻切片和石蜡切片的两种方法的诊断结果进行对比分析, 并研究分析术中冰冻切片对卵巢肿瘤进行诊断的准确性。

2 结果

在术中56例卵巢肿瘤患者经过冰冻切片诊断后, 确诊为54例, 确诊率为96.4%。其中诊断有9例为恶性肿瘤, 有8例为交界性肿瘤, 37例为良性肿瘤, 恶性肿瘤诊断符合90%, 交界性肿瘤诊断符合100%, 良性肿瘤诊断符合97.3%, 在56例卵巢肿瘤患者中有2例患者经过冰冻切片诊断错误, 误诊率为3.6%。

3 讨论

3.1 术中冰冻切片病理诊断主要是用于对于卵巢肿瘤患者进行卵巢病变性质进行分析判断, 来进一步确定手术方式和肿瘤切除范围。

同时根据我院有关资料显示56例卵巢肿瘤患者进行冰冻切片病理诊断过程中, 结果表明诊断准确率达96.4%, 进一步说明了在卵巢肿瘤术中利用冰冻切片诊断对卵巢肿瘤患者的肿瘤性质能准确的判断, 为卵巢肿瘤患者进行下一步手术提供了良好的保障。

3.2 结合有关文献和本组临床资料等进行分析, 在术中采用冰冻切片诊断方法中存在很多不足之处, 导致诊断出现误诊。

在冰冻切片诊断过程中, 由于有些患者的卵巢肿瘤较为复杂, 并且送检的组织不全, 选取的组织不够准确, 极易导致出现诊断错误[1,2]。同时在诊断过程中, 使用的冰冻切片质量不合格, 质量较差, 导致标本不能固定, 制片质量差, 对细胞的分析不过准确, 在诊断过程中, 极易出现诊断不清, 导致恶性、交界性和良性情况判断不准确。在读片过程中也存在问题, 由于医师对卵巢肿瘤的组织分类不熟悉, 对卵巢肿瘤的组织学形态掌握不够, 与临床医师的交流沟通不足和经验不够丰富等, 这些情况都有可能导致在读片过程中产生误诊。因此在冰冻切片诊断过程中, 首先应该具备正确的诊断思路, 通过对卵巢肿瘤患者的肿瘤情况和其他各方面的情况进行充分了解, 根据患者的不同情况进行准确地选取组织和针对体积大些的肿瘤进行选择多切面方式等, 采取不同质地的实质性细胞组织进行选取, 然后才能送检, 来确保病理医师根据准确的材料做出准确地判断。在制片过程中, 需要选取合格的冰冻切片, 在镜下观察, 寻找比较有代表性的形态结构和细胞特征等作为卵巢肿瘤的病理判断依据, 尽量避免在制片过程总出现气泡、折皱等情况出现, 从而保证制片质量。同时作为诊断医师应该具备过硬的素质, 不断学习相关知识, 认真总结诊断经验, 对卵巢肿瘤的组织分类和卵巢肿瘤组织的各形态有很深的了解, 还应具备丰富的临床经验[3,4]。其中在冰冻切片诊断过程中, 病理诊断医师应该及时地与临床医师进行交流沟通, 详细了解卵巢肿瘤患者在术前的临床表现和身体的各项检查结果, 根据这些资料进行才能对患者的病情做出准确的判断。

近几年来, 冰冻切片诊断方法在各大医院得到了广泛的应用, 主要是因为其能够更快速、更准确的对卵巢肿瘤患者进行病理诊断, 为进行下一步手术提高了重要的依据。同时在手术前对卵巢肿瘤患者的CT、B超等常规检查结果和各种临床表现等方面进行详细掌握, 并且在手术过程中及时和临床医师进行交流, 确保在诊断过程中能够对卵巢肿瘤患者进行准确的诊断。

参考文献

[1]黄章骞, 高明, 蔡红光, 等.卵巢肿瘤快速冰冻切片212例病理诊断分析[J].中国妇幼保健, 2007, 22 (14) :1888.

[2]金亦, 李迎春, 李海刚.卵巢肿瘤快速冰冻切片256例病理诊断分析[J].中国实用妇科与产科杂志, 2005, 21 (3) :167.

[3]杨绍珍, 张文, 高兰英.冰冻切片对卵巢肿瘤诊断价值的探讨[J].天津医药, 1998, 26 (10) :72.

手术中冰冻切片病理检查志愿书 篇5

门诊、住院科 室ID号住院号

姓名年龄性别职别单位

手术中冰冻切片病理检查是将切下的病变组织在冰冻切片机中迅速冷冻后制成病理切片，由病理医师即刻在显微镜下检查，做出病现诊断，主要目的是：（1）帮助判断病变的性质。如：炎症、肿瘤或其它性质的病变；如果是肿瘤，则需进一步判断是良性还是恶性肿瘤。（2）帮助判断切除肿瘤组织的边缘是否有残留的癌组织。（3）帮助辨认手术切除组织。

（4）判断手术切除的淋巴结中有无转移的癌细胞。冰冻切片病理诊断结果作为术中会诊意见提供给临床医生，临床医生将其作为重要的参考依据决定进一步手术的方式和范围。与常规石蜡包埋切片相比，冰冻切片诊断的局限性是：（1）冰冻切片质量较差，诊断准确率低于常规石蜡切片。（2）在做冰冻切片采取活检组织时，有造成肿瘤种植的可能，特别是在甲状腺和肺等实质器官。（3）术中冰冻切片技术不适用于脂肪组织和骨组织。（4）某些疑难病例和交界性病例有时在石蜡切片诊断都很困难，需要做免疫组化和电镜观察，仅凭冰冻切片难以确定诊断，因而要延缓病理诊断。（5）冰冻切片取材局限，有时局部的组织不能代表整个标本。因此，有的病例冰冻切片组织象和手术切除大标本的石蜡切片组织象相差很远，甚至造成假阴性诊断。（6）病变组织在冷冻过程中不可避免地形成冰晶，以及组织处理和诊断时间紧迫等技术因素所限，“冰冻”诊断的准确率有一定的局限性，有可能与最终的“常规”病理切片诊断不相符合，最后病理诊断应以“常规病理诊断为准”。

医师签名：年月日

我已仔细阅读并了解上述关于“冰冻”切片病理诊断的作用及其局限性，同意对实施手术中切除的病变组织进行冰冻切片快速病理检查。

患者本人签字：

代表签字：（与患者关系：）

年月日

术中冰冻病理 篇6

关键词：术中冰冻,诊断正确率,病理因素

冰冻切片技术主要运用于术中病理诊断中, 因该技术所需的时间较短, 且能较准确地确定组织病变的良恶性, 为肿瘤疾病的临床治疗提供了重要诊断依据。目前, 冰冻切片被国内外大多数医院的临床手术广泛运用[1]。然而, 在迅速冰冻的条件下进行病理检查时, 由于受技术条件的限制, 会在一定程度上影响诊断的正确性, 使患者治疗不足或过度治疗, 严重影响患者的生活质量。本文主要以我院2010-2012年收集的术中冰冻切片524例, 与术后石蜡切片的诊断结果进行回顾, 分析影响术中冰冻诊断正确率的临床及病理因素, 具体操作如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2010-2012年收集的524例术中冰冻切片为研究对象, 冰冻切片当中, 有219例为甲状腺切片, 171例为乳腺切片, 78例为子宫及附件切片, 56例为其他切片。

1.2 方法

所有送检组织均由病理医师进行取材, 根据实际情况选择1~3片组织, 选择恒温冰冻切片机进行切片, 在冷冻头上抹一层OCT置于切片机中冷冻, 将组织置于冷冻头上。不同的组织选择不同的冰冻温度, 通常在-12~-40℃之间, 待组织冷冻到周边OCT凝固后, 进行切片操作, 厚度控制在5~7μm。切片后将其置于AAF液中固定, 并给予HE染色, 用浓度为1%的酒精盐酸分化, 浓度为1%的氨水蓝化, 梯度乙醇进行脱水, 最后用中性树胶将其封片。

1.3 评价标准[2]

将术中冰冻切片的诊断结果与术后石蜡切片的诊断结果进行对比, 将诊断标准分为: (1) 完全符合:两种切片的诊断结果完全一致; (2) 基本符合:两种切片良恶性诊断一致, 分型、分级或分类略有差别; (3) 不肯定:术中的冰冻切片肿瘤的良恶性诊断不明确, 只能提供倾向性意见; (4) 不符合:冰冻切片将恶性误诊为良性或将良性误诊为恶性, 两种切片的诊断结果完全不一致。

2 结果

与术后石蜡切片相比, 冰冻切片有512例确诊, 确诊率为97.7%。完全符合354例 (67.5%) , 基本符合158例 (30.2%) 。冰冻切片诊断不肯定的有11例, 占2.1%, 其中2例诊断性质不明确, 处于良恶性之间;1例为良性形态、恶性行为;4例因取材不完整而导致诊断结果不肯定;另外3例因标本太大, 取材不完整, 导致诊断结果不全面;1例因冷冻温度不当所致。不符合的有1例, 占0.2%, 这1例是直径为0.3cm的甲状腺乳头状癌, 冰冻切片时因取材块数限制, 没有发现病灶, 而在术后石蜡切片检查中才发现。

3 讨论

冰冻切片诊断的正确性可以为手术过程中下一步治疗方案的选择提供重要依据。Tille等[3]对冰冻切片技术的适用提出了合理的理由, 包括对病变的存在和性质进行判定;确定已选取的标本时候能够做出正确的诊断;检查手术切缘是否足够。随着冰冻切片技术的日益成熟, 各大医院开展的冰冻切片工作数量多、涉及范围广, 在医疗诊治过程中和手术治疗过程中起着重要作用。同时, 因为冰冻切片取材范围及大小有限, 诊断时间段、实际操作过程中, 不可避免地会出现误诊和不能确诊的情况。据国外数据统计[4], 冰冻切片的诊断正确率在97%~99%之间。本文中将冰冻切片诊断结果与术后石蜡切片诊断结果相比, 结果显示, 冰冻切片有512例确诊, 确诊率为97.7%, 冰冻切片诊断不肯定的有11例, 占2.1%, 不符合的有1例, 占0.2%。这与国外报道的数据相一致。

为提高冰冻切片诊断的正确率, 手术医生应当对冰冻切片申请单进行详细填写, 保证送检标本的准确性, 不能自行将标本剖开, 使送检标本的原始形态得到保证, 以便病理医师对病变组织和包膜情况进行全面观察, 并及时送检。另外, 冰冻切片的质量对诊断结果有直接影响, 冰冻切片时, 不同的组织应当调节不同的温度, 一般情况下, 脑、肝、肾、子宫、甲状腺等温度的范围在-12~-16℃适宜, 肾上腺、子宫、卵巢等温度范围在-18~-22℃适宜, 脂肪类组织以-50℃适宜。此外, 印片细胞学检查与冰冻切片相结合, 以及超声处理在部分微小标本中的应用, 对冰冻切片的准确率的提高也具有重要作用。

综上所述, 选择正确的取材方法, 保证切片质量, 提高对肿瘤类型的识别能力, 结合印片细胞学检查进行病变处理, 对提高冰冻切片诊断正确率具有重要作用。

参考文献

[1]汪锋, 宋晓燕, 贺慧杰, 等.影响乳腺癌术中冰冻诊断准确性的病理与临床因素分析[J].中国实验诊断学, 2011, 15 (10) :674.

[2]王聆宇, 汪静.年轻女性乳腺癌200例临床及病理特点分析[J].实用临床医药杂志, 2009, 13 (8) :81.

[3]Tille JC, Egger JF, Devillaz MC, et al.Frozen section in axillary sentinel lymph nodes for diagnosis of breast cancer micro meta stasis[J].Anticancer Res, 2009, 29 (10) :4711.

术中冰冻病理 篇7

1 资料与方法

1.1 一般资料:

选择我院在2011年12月至2014年12月收治的113例作为研究对象,113例均为女性,年龄在29～67岁,平均(47.6±8.2)岁。所有入选对象均接受手术治疗,且经术后石蜡切片检查或免疫组化检查确诊为乳腺癌。未孕5例,已绝经56例,已生育未绝经52例;7例有乳腺癌患病家族遗传史,15例患有糖尿病,23例患有高血压。113例患者的乳腺癌术中与术后病理信息齐全。

1.2 方法:

本组中的113例患者在术前未接受其他外科治疗或保守治疗,为了保证患者在术后的生活质量,根据情况行乳腺改良术或保乳术,确定手术方式时主要将肿瘤大小作为依据,如肿瘤直径<3 cm,则实施保乳术;如肿瘤直径>3 cm,则在实施保乳术前先进行辅助化疗,以确保顺利完成手术。在术中采用冰冻诊断法快速诊断恶性肿瘤或良性肿瘤,术中冰冻诊断所采用的设备、材料包括Feather刀片,Leica-CM1900冷片机,AAF固定液,固定液由甲醛、冰醋酸及乙醇组成。此外,还有普通胶水、染色液,染色缸、二甲苯、梯度乙醇及水溶伊红。全面检查送检标本,在病灶核心区重点取材,选好送检标本的切面后,迅速进行冰冻处理。冰冻操作的环境温度为-30～-18℃,在冷冻托中部放置切片,随后利用胶水将切片封住,封住切片后放置在冰冻台上,在冰冻条件下进行切片,切片时保证刀速处于缓慢均匀状态,切片厚度需控制在4～6μm,随后在载玻片上放置展平后的切片,利用AFF固定液对切片进行固定,待1 min后可染色及采用树胶封片。完成上述操作后由病理医师肉眼观察乳腺标本,随后借助显微镜诊断切片组织,并对组织学的大小与分级情况进行记录。冰冻诊断报告需在0.5 h后发出,在发出诊断报告后将剩余组织处理成石蜡切片,将术后石蜡切片诊断结果作为确诊标准。

1.3 观察指标:

观察术中冰冻诊断的符合率情况,包括病理组织分级与大小的符合情况,以明确影响冰冻诊断准确性的病理因素。病理组织分级包括Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级,同时将组织学大小分为两种形态,包括≤3 cm及>3 cm。

1.4 判定标准:

本研究采用的病理组织分级判定标准如下:①腺管形成程度:存在大量明显腺管为1分,存在中度分化的腺管为2分,细胞呈条索状或实性片状生长为3分。②细胞核的形状、大小及染色质情况:细胞核形状及大小、染色质均匀一致为1分,细胞核形状及大小等不规则为2分,细胞核表现为多形性为3分。③核分裂相与染色质是否增多:1/10HPF为1分,2/10～3/10HPF为2分,>3/10HPF为3分。将上述3项指标分数相加,得分为3～5分为I级,6～7分为Ⅱ级,8～9分为Ⅲ级[2]。

1.5 统计学分析:

采用统计软件SPSS20.0对本研究中的数据进行对比分析,组间差异检验法为χ2检验,P<0.05,则说明组间数据存在统计学意义上的显著性差异。

2 结果

对冰冻诊断、石蜡切片诊断的结果进行分析后发现:①在组织学大小方面,≤3 cm的诊断符合率低于>3 cm的诊断符合率,两种病理组织大小诊断的符合率存在显著性差异(P<0.05)。②在组织分级方面,冰冻诊断确诊为Ⅲ级的符合率较高,Ⅱ级诊断的符合率低于Ⅲ级,I级诊断的符合率低于Ⅱ级,Ⅲ级诊断的符合率与Ⅱ、Ⅰ级比较存在显著性差异(P<0.05),I级与Ⅱ级诊断的符合率无显著性差异(P>0.05)。冰冻诊断乳腺癌组织学大小的符合率情况见表1,诊断乳腺癌组织学分级的符合率情况见表2。

3 讨论

乳腺癌的发病率呈现出了逐年上升的趋势,病死率也居高不下,手术切除肿块是治疗乳腺癌的有效方法。在实施手术治疗的过程中通常需要依据冰冻诊断结果快速判断病理分型及决定是否实施保乳术[3]。由于目前所采用的冰冻诊断条件有限,因此得出的病理诊断结果也会受到一定的影响,如冰冻诊断结果存在偏差,则会对治疗方案的合理选择造成干扰,所以在临床中应积极寻找影响乳腺癌术中冰冻诊断准确性的病理因素,以便根据可能对诊断结果造成影响的病理因素积极优化冰冻诊断技术。就一般情况而言,导致冰冻诊断、术后石蜡切片诊断病理组织大小与分级之间存在差异的原因包括选取的组织是否合理、标本量情况、冰冻切片处理过程是否有效及病理医师个人的判断经验是否可靠等。由于术后石蜡切片诊断被作为诊断乳腺癌组织分型的金标准,所以在判断术中病理诊断结果是否可靠时也需要将冰冻诊断结果与术后石蜡切片诊断结果进行比较。目前有研究指出,将术后石蜡切片病理诊断作为金标准时,冰冻诊断的符合率明显高于细胞学或细针穿刺诊断,但由于冰冻诊断需要在低温条件下进行,而在温度较低时肿瘤细胞内部可能出现细小冰晶,当细小冰晶存在于肿瘤细胞内部时可导致原始形态的细胞遭到破坏或被拉长[4]。如此一来,就会给病理医师辨别切片中的病理组织分级与大小带来困难,进而影响到冰冻诊断结果的准确性。

本研究发现,在病理组织分级为Ⅲ级时,冰冻诊断的符合率较高,达到了96.43%,Ⅰ级与Ⅱ级的符合率分别为78.26%、81.63%,Ⅲ级的诊断符合率与Ⅰ级与Ⅱ级比较存在显著性差异(P<0.05),提示在病理组织分级的级别越高时,冰冻诊断病理组织分级的符合率也就越高,在病理组织核分裂计数越大、细胞核多样性越明显及腺管形成程度越高的情况下,冰冻诊断的准确性也就越好。此外,本研究还发现组织学大小≤3 cm的诊断符合率低于>3 cm的诊断符合率,两种病理组织大小诊断的符合率存在显著性差异(P<0.05),提示肿瘤越大,则冰冻诊断的符合率也就越高。有研究指出,在肿瘤直径较小时,则冰冻诊断结果容易受到切片中的刀痕、切片厚薄及是否完整等因素的影响,肿瘤直径较大时,则上述因素产生的影响较小,因此对于诊断结果准确性的影响也相对较小[5],本研究再次证实了上述观点。除了病理因素之外,临床因素也会对冰冻诊断结果的准确性产生影响,常见的临床因素包括肿物大小情况、X线钼靶的钙化情况及患者是否绝经等,在钼靶钙化点较少、绝经后、肿物较大时,冰冻诊断的符合率较高。为了保证冰冻诊断的准确性,在临床上要综合考虑临床因素与病理因素。综上所述,病理组织分级与大小均可能对乳腺癌术中冰冻诊断结果的准确性产生影响,在临床中应加以重视。

摘要：目的 分析影响乳腺癌术中冰冻诊断结果 准确性的病理因素。方法 选择我院在2011年12月至2014年12月收治的113例作为研究对象,术前未接受其他外科治疗或保守治疗,在乳腺癌术中进行冰冻诊断,在术后进行石蜡切片诊断。结果 在组织学大小方面,≤3 cm的诊断符合率低于>3 cm的诊断符合率,两种病理组织大小诊断的符合率存在显著性差异(P<0.05);冰冻诊断确诊为病理Ⅲ级的符合率较高,Ⅱ级诊断的符合率低于Ⅲ级,Ⅰ级诊断的符合率低于Ⅱ级。结论 病理组织分级与大小均可能对乳腺癌术中冰冻诊断结果的准确性产生影响。

关键词：病理因素,准确性,冰冻诊断,乳腺癌

参考文献

[1]刘军杰,陈圆圆,李智贤,等.广西地区散发性乳腺癌BRCA1突变及其相关临床、组织病理特征的研究[J].广西医科大学学报,2013,30(4):496-499.

[2]陈颖,李睿,刘源,等.免疫组化和PCR检测乳腺癌Her-2、EGFRt和CK5/6过表达水平用于乳腺癌疗效的评估[J].哈尔滨医科大学学报,2013,47(1):56-59.

[3]梁晓燕,马少君,王原,等.骨转录因子Runx2和骨桥蛋白OPN在人乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌微钙化的关系[J].西安交通大学学报(医学版),2014,35(6):828-831.

[4]黄隽,苏榕.膜联蛋白A2和骨桥蛋白在乳腺癌组织的表达及其与乳腺癌生物学行为的关系[J].中华实验外科杂志,2013,30(12):2688-2690.

提高病理冰冻切片质量的体会 篇8

1 材料与方法

1.1 一般资料

选择临床手术送检的新鲜组织标本:乳腺50例;子宫40例;甲状腺20例;皮肤10例, 胃肠10例等。

1.2 方法

1.2.1 试剂

OCT;AAF液:95%乙醇85ml, 冰醋酸5ml, 甲醛10ml;1%盐酸乙醇:75%乙醇99ml, 盐酸1ml改良Gill氏苏木素;伊红;梯度乙醇;二甲苯;中性树胶。

1.2.2 仪器

LEICA CM3050S恒冷冰冻切片机。

1.2.3 操作步骤

将组织固着器放到速冻台上, 先放少量OCT, 待冻结后将取材好的组织块放上, 并在组织周围添加少量OCT[1], 注意不可覆盖组织表面。继续放入箱内冷冻至适当硬度, 移至冷冻头上夹紧。关闭观察窗, 开始粗修, 至组织暴露最大面后, 调节切片厚度至6-8um, 放下防卷板切片、贴片, 进行如下染色: (1) AAF液固定1min→水洗; (2) 改良Gill氏苏木素染色1min→水洗; (3) 1%盐酸乙醇分化2s→水洗; (4) 45℃左右温水蓝化5s→水洗; (5) 伊红染色5s; (6) 梯度乙醇脱水;二甲苯透明;中性树胶封片。

2 结果

切片完整, 厚薄均匀, 染色核浆对比鲜明, 基本无冰晶, 细胞形态及组织结构清晰, 符合术中快速冰冻诊断要求。

3 讨论

随着临床外科手术及冰冻切片技术的不断发展, 要求送检的快速冰冻病例越来越多。然而, 冰冻切片因受时间的限制, 组织未经固定、脱水等先期处理, 细胞形态结构与常规HE染色切片有较大的差异, 容易造成误诊[2]。这就要求病理技术人员能够熟练地应用冰冻切片技术, 了解各种组织的特性, 掌握制片的技巧, 尽量减少人为的一些影响, 以达到快速做出精良的冰冻切片, 为病理医师快速诊断提供可靠保证。如何在尽量短的时间内, 提供一张优质的冰冻切片?笔者根据自身工作经验及体会, 认为可以从以下方面着手。

首先, 从准备工作和取材说起。 (1) 冰冻切片机应处于24h恒温待机状态, 一般应于切片前1h开机预冷。冷室温度可设置为-20℃～-25℃, 冷冻头温度为-22℃左右; (2) 为缩短冷冻时间, 可提前将组织固着器放入箱内预冷。或将组织固着器包埋面稍湿润后, 滴加OCT冷冻; (3) 手术室送来的新鲜标本, 在不影响诊断的前提下, 标本取材尽量小些, 一般可切取1.5cm×1.5cm×0.3cm, 组织厚度勿超过4mm[3]。这样有利于组织的速冻, 可减少冰晶现象的出现, 避免因冰晶挤压周围组织而破坏组织原来的形态结构[4]。在取材时, 尽量保持刀具与台面的干燥, 避免组织与水接触。因脂肪组织不易切片, 取材中应尽量剔除, 若必须切片, 则应取得小而薄些, 以节省冷冻时间。对于富含纤维结缔组织的标本, 如子宫肌瘤, 乳腺纤维瘤等, 则应取得稍厚些。此外, 像脑、消化道等含水量较多的组织, 可在取材后, 用吸水纸吸干水分再包埋、制片, 以减少冰晶的出现。

其次, 冷冻时间与切片技巧的掌握是制片的关键。实际操作中, 经常会遇到一些组织结构软硬不同的标本, 如皮肤, 切片时易产生组织挤压、皱缩, 此时可将组织与切片刀平行放置, 表皮面放在冷冻托的上端, 先切较软的皮下组织, 依次切真皮、表皮。同时用毛刷轻轻展开切片, 就能做出一张完整的好片。对于软组织, 如肺、乳腺、胃肠等, 用OCT包埋后, 尽可能冻硬再切片。胃肠组织切片时宜横向放置, 粘膜面向上, 浆膜面向下 (先切) 。硬组织如子宫、宫颈、乳腺纤维瘤等, 一般冻至八成状态切片效果最佳。取材时将组织取成方形, 切片时将组织对角线与刀片平行放置, 这样, 减小组织作用于刀片的阻力, 比较容易切成平整的薄片。对于甲状腺等较脆的组织在切片时常出现的"百叶窗"样空洞, 多源于组织在恒冷箱内冷冻时间偏长所致, 可用手指贴在组织面上稍加温, 使其软化后切片。子宫肌瘤的"梯田状"切片亦可效仿之。一般而言, 在冰冷切片中, 细胞丰富的组织:如肝、脾、淋巴结等, 在OCT包埋后不能冻得太硬, 一般八成即可切片, 切片厚度降到3-5um;细胞疏松的组织:如脂肪、脑等应增加冷冻时间, 切片厚度可为8um-10um。

另外, 好的切片离不开恰当地染色。因冰冻切片要求时间短, 时常会出现切片中细胞染色过浅或模糊不清, 这与切片的固定时间, 苏木素染色时间, 梯度乙醇脱水时间是否充分有关, 可适当减缓流程, 避免一味追求速度。而细胞核浆对比不清, 则与1%盐酸乙醇分化时间, 染液的新旧情况, 切片厚薄, 组织性质等有关。特别地, 对于甲状腺组织, 因其含有丰富的胶质, 可在AAF液固定后, 不水洗, 擦去组织周围多余液体直接行HE染色, 这样可以较好地保存胶质。

总之, 高质量的冰冻切片对于确保实验结果的科学性、可靠性极其重要[5]。因此, 在冰冻切片时, 应对不同的组织区别对待, 认真、仔细, 结合实际操作情况, 多方分析, 才能使问题得以良好解决。

摘要：目的通过自身的工作体会, 探讨提高冰冻切片质量的技巧及方法。方法对乳腺、子宫、甲状腺、胃肠等几种不同组织进行冰冻切片比较、观察。结果切片完整, 厚薄均匀, 染色核浆对比鲜明, 细胞形态及组织结构清晰, 符合术中快速冰冻诊断要求。结论一张优质的冰冻切片需要技术员对不同的组织区别对待, 从取材、冷冻、切片、固定、染色等环节认真做起。

关键词：冰冻切片,组织,诊断

参考文献

[1]全国卫生专业技术资格考试专家委员会.病理学技术.第一版.北京:人民卫生出版社, 2006.445.

[2]赵阿红, 张秋红.Leica CM1900冰冻切片机的应用质量保证[J].临床与护理工程, 2005, 20 (3) :72.

[3]陈洁.制作冰冻切片的几点体会[J].现代实用医学, 2001, 13 (12) :614

[4]田玉旺, 丁华野.一种减少冷冻切片组织内冰晶的处理方法[J].临床与实验病理学杂志, 2002, 18 (5) :568.

胰腺病变快速冰冻的病理特征 篇9

资料与方法

2012-2013年收治胰腺疾病患者8例, 其中男5例, 女3例, 年龄15~68岁, 平均46岁。手术切除后新鲜组织即刻送病理科取材, OCT包埋剂包埋后, 快速放至-22℃~-20℃冷冻室快速冷冻台, 数十秒后取出组织样品头放入冷冻切片机的样品夹头夹紧, 开始切片, 切片厚度6~8μm, 取完整、无褶皱、无刀痕、贴片恰当的理想切片收片, 组织切片用丙酮固定液固定数秒, 进行HE染色, 中性树胶封固。病理结果与常规结果相比较。

病理检查:术中快速冰冻送检标本多为不规则小块灰棕色或灰白色组织, 切面灰棕色或灰白色, 实性、结节状或囊性, 质硬实或脆或韧。镜下观察: (1) 胰腺肿瘤:导管样结构伴有纤维间质3例, 瘤细胞柱状, 核圆形, 胞浆淡染。诊断为胰腺腺癌。1例肿瘤组织呈岛状、小梁状、假腺样结构, 瘤细胞多角形, 胞界不清, 胞浆浅染, 嗜酸性, 细颗粒状, 核圆形或卵圆形, 大小较一致, 染色质均匀细致, 核仁不明显, 核分裂象罕见, 周围有毛细血管血窦及纤维间质, 结合临床生化特点, 诊断为胰岛素瘤。 (2) 胰腺囊肿:纤维组织构成的囊壁, 见少许含铁血黄素细胞, 囊内壁无上皮被覆, 囊壁周边呈慢性炎症变化的胰腺组织。诊断为胰腺假性囊肿。 (3) 小肠壁黏膜与肌层见胰腺小叶结构, 有腺泡及导管, 与正常胰腺相似。诊断为胰腺异位。 (4) 胰腺间质纤维组织轻度增生, 间质内有单核细胞与淋巴细胞浸润, 腺泡与胰岛萎缩, 诊断为慢性胰腺炎。

结果

胰腺肿瘤4例, 囊肿1例, 胰腺异位1例, 胰腺炎症2例。

快速冰冻后标本经4%甲醛固定, 石蜡包埋切片, HE染色, 免疫组织化学对照, 冰冻结果与常规结果报告一致。

讨论

胰腺疾病的症状变异性较大, 且无特异性, 由于病变程度不同, 症状和体征等临床表现也有很大差异。所以胰腺在手术过程中的快速冰冻尤为重要, 但是胰腺疾病快速冰冻检查由于取材组织有限, 组织未经固定与脱水处理, 切片时间较短, 切片有冰晶与裂隙等质量欠佳现象, 与常规切片相比会有清晰度差, 核浆着色淡, 对比差, 细胞肿胀, 变形, 形成空泡, 会有很多的陷阱与人为假象, 所以快速冰冻组织切片与常规切片有很大的差异[2], 增加了冰冻切片的诊断风险。

为了减少与避免诊断的风险, 保证医疗质量的安全, 更好地为患者提供优质的医疗服务, 病理医生每一步都要认真负责, 从收到快速冰冻预约单开始, 就对患者的基本情况作一了解。例如:本组的1例患者, 男, 15岁, 以“间断性头晕伴乏力1年”为主诉入院。1年前无明显诱因出现头晕, 伴乏力, 无恶心、呕吐、黄疸、发热等, 血常规无明显异常, 血葡萄糖2.89mmol/L, 血胰岛素46.30u Iu/ml。CT示“胰腺颈部占位, 考虑胰岛细胞瘤”。如果此例患者事先没有这些临床资料, 仅仅凭快速冰冻的切片诊断胰岛细胞瘤是非常困难的。准备工作还包括冰冻切片机24小时恒温待机状态, 切片前1小时预冷, 收到新鲜标本, 选有诊断价值的部分取材, 这就要求取材医生的个人经验丰富, 一般要有高年资医生取材或指导。放入冰冻机后立即速冰, 这样能减少冰晶形成, 切片厚度6~8μm, 取完整、无褶皱、无刀痕、贴片恰当的理想切片收片, 组织切片用丙酮固定液固定数秒, 进行HE染色。染色切忌为了追求速度而减少染色时间, 以防出现染色过淡模糊不清, 染色后中性树胶封固[3]。

冰冻诊断对于病理医生来讲是一种考验, 由于快速冰冻组织没有经过固定脱水预处理, 结构不清, 细胞肿胀, 变形, 发生人为假象, 加上检材有限、切片较厚、染色不良, 其质量远较常规石蜡切片为差, 大大增加了诊断难度, 故诊断正确性受到一定的限制。根据临床统计, 至少有5%的误诊率[4], 其中有假阳性和假阴性两种情况。因此, 有一定的医疗风险, 这时病理医生的专业知识与临床经验很重要, 诊断与鉴别诊断一定清晰明了, 诊断的要点把握好, 鉴别的特征要分辨清楚。比如诊断胰腺腺癌导管样结构伴有纤维间质, 瘤细胞柱状, 核圆形, 胞浆淡染;纤维组织构成的囊壁, 见少许含铁血黄素细胞, 囊内壁无上皮被覆, 囊壁周边呈慢性炎性变化的胰腺组织, 诊断为胰腺假性囊肿;胰腺间质纤维组织轻度增生, 间质内有单核细胞与淋巴细胞浸润, 腺泡与胰岛萎缩, 诊断为慢性胰腺炎。慢性胰腺炎有时与肿瘤不容易区别, 但是见到胰岛就为慢性胰腺炎提供了有力的证据[5]。以上8例患者常规石蜡切片与免疫组化均支持冰冻的诊断。如胰岛细胞瘤的患者免疫组织化学检测显示, 肿瘤细胞AAT局部阳性、NSE部分阳性、β-Catenin部分阳性、Cyclin-D1阴性、PR部分阳性、Syn阳性。

摘要：目的:分析胰腺病变在快速冰冻中病理形态学特点、诊断和临床意义。方法:复习8例胰腺病变的临床资料和病理学特征。结果:胰腺肿瘤4例, 囊肿1例, 胰腺异位1例, 胰腺炎症2例。快速冰冻结果与常规结果报告一致。结论:胰腺疾病中常见是炎症与肿瘤, 先天异常与囊性疾病次之。胰腺病变明确诊断需根据临床表现、生化特点和病理特征相结合。

关键词：胰腺病变,快速冰冻,临床意义,病理特征

参考文献

[1] 梁英杰, 凌启波, 张威.临床病理学技术[M].北京:人民卫生出版社, 2011:62-63.

[2] 吴在德, 吴肇汉.外科学[M].北京:人民卫生出版社, 2012:576-588.

[3] 赵阿红, 张秋红.Leica CMl900冰冻切片机的应用质量保证[J].临床与护理工程, 2005, 20 (3) :72-73.

[4] 全国卫生专业技术资格考试专家委员会.病理学技术[M].北京:人民卫生出版社, 2006:445.

术中冰冻病理 篇10

1 资料与方法

1.1 临床资料

资料来源于我院2010年1~12月共计426例冰冻切片资料,年龄20~63岁,平均年龄39.2岁。

1.2 方法

为保证诊断的准确性,所有标本均为术中送检新鲜组织,要求用干纱布包裹或置于不加任何液体的洁净容器内及时送达病理科,病理医师详细检查大体标本后取肉眼确认病变最明显区域1~2块组织,迅速置全自动恒冷切片机上制作切片[2]。乳腺肿块病变直径<2.5cm全部取材,直径>2.5cm的肿块根据肿瘤情况酌取2~3块,冰冻切片、HE染色、光镜诊断。20min发出冰冻报告,将诊断结果分为三类,(1)确诊:冰冻切片诊断与石蜡切片完全相同或良恶性原则一致。(2)未确诊(延迟诊断):指冰冻切片未能明确诊断,需等石蜡切片获取最后的诊断。(3)误诊:肿瘤良恶性诊断错误,分假阳性和假阴性(假阳性,良性误诊为恶性;假阴性,恶性误诊为良性)[3]。冰冻报告发出后,将原冰冻剩余组织做石蜡切片,复习原冰冻切片及石蜡切片,将二者诊断加以对比分析。

2 结果

4 2 6例冰冻切片病理诊断中良性病变为3 5 2例,占82.6%(见表1);恶性病变为74例,占17.4%,而在恶性病变中浸润性导管癌为52例,占70.3%(见表2),最为常见。与石蜡切片相比,冰冻切片良性病变准确率为99.3%,恶性病变准确率为94.6%。

3讨论

国内外文献表明[4,5]冰冻切片的病理诊断中乳腺疾病占1.2位,乳腺疾病病理诊断中使用冰冻切片说明了冰冻切片病理诊断得到了高度的认可,冰冻切片的主要用途是:(1)提供乳腺病变的诊断依据,根据肿块决定手术性质及切除范围;(2)确定肿瘤的范围,手术的成功与否与肿瘤边缘切除的是否关键有很大关系。

本组研究表明,乳腺疾病冰冻切片病理诊断中准确率高,与相关文献报道的准确率为94.0%~97.0%一致[4],国外报道98%~99%也基本类似[6,7]。由于术中冰冻切片受取材部位、冰冻条件、受诊时间等因素限制较多,给乳腺疾病冰冻切片病理诊断带来了一定的影响,为保证病理诊断水平,病理诊断医师应进行术前查房会诊,对患者乳腺病变的周围组织、肿块性质及病发过程等进行了解,重视检查结果,诊断时以便参考[8~10]。必须真确采取冰冻切片组织,进行过个平行切面,仔细探摸较硬部分组织。此外,病理医师认真的肉眼观察对于做出正确的病理诊断也起着重要的作用,病理医师都具有长期的工作经验及临床知识,对冰冻切片认识较足,定期进行回顾可以有效地减少误诊率[11~12]。

参考文献

[1]王素萍.乳腺疾病156例冰冻切片病理诊断分析[J].中国民康医学,2006;18(7):494

[2]张勤,聂世贵,陈玉华,等.104例乳腺肿块术中印片细胞学及冰冻切片分析[J].肿瘤防治研究,2004;31(9):562

[3]刘丽男.乳腺病变冰冻切片1524例诊断分析[J].实用肿瘤学杂志,2000;14(4):304~306

[4]韩树青,郭瑞峰,杨保凯.乳腺疾病冷冻切片诊断分析[J].华北国防医药,2005;17(4):299

[5]Fechner RE.Frozen section examination of breast biopsies.Practice parameter.Am J Clin Pathol,1995;(103):6~96Zarbo RJ.Quality assessment in anatomic pathology in Costcoscious.Am J Clim Pathol,1996;(106):3~107Wakey SL,Baxendine JA,Gallagher PT.Aberrant Cbagnoses by individual surgicall pathologyists.AMJ surg Pathol,1998;(22):7782

[8]陈乐真.手术中病理诊断图鉴[M].北京:科学技术文献出版.2005,2~5

[9]黄泽玲.MRI在乳腺癌诊断中的临床体会[J].中国当代医药,2011;18(2):80

[10]张金文,72例早期乳腺癌临床观察[J],中国医药导报,2010;7(16):202

[11]郭梅,王玉香,李宝慧,等.496例乳腺疾病冰冻切片病理诊断分析[J].肿瘤基础与临床,2011;8(20):75~76