高丽参注射液的制备与含量测定

2022-12-26

高丽参注射液是我院采用南朝鲜良字30支“正官装”高丽红参生产。由于“正官装”高丽红参是选用了6年的人参进行炮制, 而且又得到了韩国官方认证和监督, 再加上其炮制和配方的独特, 用其生产的高丽参注射液疗效肯定, 不良反应少, 在本地区深受病患者和临床医生的喜爱, 从1990~2006年间, 高丽参注射液一直是我院自制药的拳头产品。

1 处方与制备

1.1 处方

高丽红参500g、氯化钠8g、共制成1000mL。高丽红参为韩国“正官装”红参, 规格为良字、30支装、150g/盒。

1.2 制备

1.2.1 回流提取

称取高丽红参, 去芦头, 切成薄片, 用65%乙醇加热回流提取7次, 每次用4倍量65%乙醇加热回流提取2h, 合并回流提取液。

1.2.2 醇沉

取回流提取液过滤, 回收乙醇, 并浓缩至稠膏状, 加乙醇使药液含乙醇量为75%, 放置冰箱中4℃冷藏48h, 过滤, 滤液以40%氢氧化钠液调pH值至7.8~8.2, 再放置冰箱中4℃冷藏48h, 过滤, 滤液回收乙醇, 浓缩至稠膏状, 再加乙醇使药液含乙醇量为85%, 放置冰箱中4℃冷藏48h, 过滤, 回收乙醇并浓缩至无醇味。

1.2.3 配成贮备液

取上述浓缩液加入适量注射用水, 搅拌溶解, 加入氯化钠并使之溶解, 再加注射用水至1000mL, 过滤, 滤液调pH值至6.0~6.5, 加入0.1%针用活性炭煮沸15min, 过滤除炭, 滤液灌封于500mL的玻璃瓶中, 115℃灭菌30min, 放凉, 置冰箱中4℃冷藏30d以上备用。

1.2.4 配制注射液

取上述贮备液, 用0.45um微孔滤膜精滤, 灌封于洁净的2mL安瓿中, 100℃灭菌30min, 即得。

2 含量测定

高丽红参总皂苷含量约为2%~4%, 据研究报道[1], 以人参皂苷Re作为对照品, 利用比色法测定高丽红参总皂苷含量, 方法可靠、准确。

2.1 仪器与试剂

M850紫外分光光度计 (江苏泰州无线电仪器厂) ;FA1604s型电子分析天平 (上海天平仪器厂) ;高丽参注射液 (台山市中医院生产, 规格2mL, 批号20040825等) ;人参皂苷Re对照品 (中国药品生物制品检定所, 批号0754-200012, 供含量测定用) ;水为注射用水;其它试剂为分析纯。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量, 加甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中含人参皂苷Re2mg的溶液, 即得。

2.3 标准曲线的制备

精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100uL, 分别置10mL具塞试管中, 挥尽溶剂, 精密加5%香草醛冰醋酸溶液-高氯酸 (2∶8) (临用新配) 的混合液1mL, 于60℃水浴中放置15min, 取出, 置冰浴冷却, 精密加冰醋酸5mL, 摇匀, 立即照分光光度法, 在544nm的波长处测定吸收度, 以吸收度为纵坐标, 浓度为横坐标, 绘制标准曲线。

2.4 供试品溶液的制备及测定

精密量取高丽参注射液0.25mL, 蒸干, 加乙醇溶解, 过滤, 并定量转移至10mL容量瓶中, 加乙醇稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液。精密量取1mL, 于具塞试管中, 蒸干, 照标准曲线项下的方法, 自“精密加5%香草醛冰醋酸溶液-高氯酸 (2∶8) (临用新配) 的混合液1mL”起, 依法测定吸收度, 从标准曲线上读出供试品溶液的浓度, 计算, 即得。

2.5 稳定性试验

取高丽参注射液 (批号20040825) 的供试品溶液和对照品溶液按以上测定方法项下依法测定, 每隔一定时间测定其吸收度, 共测定0~4h, 结果见表1。

2.6 重复性试验

取同一批号 (20040825) 高丽参注射液, 按上述供试品溶液的制备方法制备6份, 然后按上述的测定方法进行测定, 计算人参皂苷的含量, 结果人参皂苷的平均含量为3.32mg/mL, RSD=3.89% (n=6) 。

2.7 回收率试验

取已知人参皂苷含量的高丽参注射液5份, 分别精密按 (1:1) 添加已知量的人参皂苷Re对照品, 按上述供试品溶液的制备方法制备5份, 然后按上述的测定方法进行测定, 计算人参皂苷的含量, 结果见表2。

3 结语

(1) 人参皂苷是高丽红参的主要成分, 含量约为2%~4% (g/g) , 易溶于水、甲醇、乙醇。曾用不同浓度乙醇 (55%、65%、75%) 进行加热回流提取研究, 发现用65%乙醇提取制得的高丽参注射液澄明度最为理想。

(2) 制备工艺中加入活性炭吸附杂质, 能提高产品的澄明度, 同时亦能吸附有效成分人参皂苷而造成含量下降。我们曾对工艺中加入活性炭的量进行反复研究, 实验证明, 活性炭对高丽参注射液中人参皂苷有明显的吸附作用, 并随着加入量的增大而明显增强。通过实验和多年的生产实践, 活性炭的加入量控制在0.1%左右较为理想, 既可以防止有效成分流失, 又能确保产品的澄明度。

(3) 我院生产高丽参注射液已有10多年历史, 从2004年开始我们按此法测定人参皂苷含量, 连续测定了25批次, 含量范围为3.29~3.87mg/mL, 可见紫外分光光度法测定人参皂苷含量是一种操作简便、准确可靠的检验方法, 适用于基层医疗单位用作测定含人参的制剂中人参皂苷的含量。

(4) 国产“高丽参”多采用长白山地区的种植人参加工而成, 由于没有严格的年限界定, 大多为3~4年龄, 效用会存在一些差异。我们曾用国产“高丽参”进行生产试验, 发现其临床疗效差, 澄明度不容易控制, 产品放置易产生沉淀。

摘要：目的研究制备高丽参注射液的工艺和质量控制方法。方法以65%乙醇回流提取, 用75%、85%乙醇分别醇沉, 配成贮备液冷藏等方法生产生产高丽参注射液。用紫外分光光度法测定含量。结果本制备工艺及测定方法可行。结论紫外分光光度法测定人参皂苷含量可作为控制高丽参注射液质量的手段。

关键词：高丽参注射液,制备,紫外分光光度法