艾滋病的实验室检查

艾滋病的实验室检查（精选12篇）

篇1：艾滋病的实验室检查

艾滋病的实验室检查

一、概述

艾滋病一词系获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)英文名词缩写的音译，由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的。该病毒主要侵犯人体的免疫系统，尤其是破坏辅助性T淋巴细胞（TH或T4），使患者细胞免疫功能明显低下，失去对外界感染的抵抗力，容易发生各种顽固感染和恶性肿瘤，艾滋病缺乏有效的治疗，死亡率高，预后很差。艾滋病已成为当今世界严重危害人类健康和生命的烈性传染病。本病主要通过性接触传播，生殖器皮肤粘膜有破损的受染机会大大增加；其次通过血液、血液制品、组织器官的移植而传播，输入含艾滋病毒的血液或血液制品，静脉吸毒者共用未经消毒的注射器，针头上带有的微量血液足以使人染上艾滋病毒；再次为母婴传播，受艾滋病毒感染的孕妇可通过胎盘的脐带血将病毒传染至胎儿，也可在分娩时及产后传染给婴儿。国外研究报道，大约1/4的HIV感染儿童在生后一年发展为艾滋病，HIV感染儿童5年存活率为70%。

二、实验室检查

１． HIV病原学检查 从患者体液或组织中分离HIV是确定HIV感染最可靠的证据，分离HIV的技术要求高，仅在少数有特殊装备的实验中才能作。常用的有抗体检测法，可用免疫荧光法，酶联免疫吸附试验（ELISA）及蛋白印迹法等。也可作抗原检测，如检测HIV P24抗原等。

２．免疫学检查 做末梢淋巴细胞计数显示淋巴细胞数量呈进行性下降，做亚形计数主要是CD4细胞（辅助性T细胞，TH）及CD8细胞（抑制性T细胞，Ts）。在急性期TH计数是正常的，早期TH计数在400/mm3以上，中期降至200～400/mm3以下，晚期降至200/mm3以下，且TH/Ts比值小于1。

３． 机会性感染的病原学检查 包括病毒、细菌、真菌及原虫等的检测。

早期HIV感染的诊断主要靠检出HIV抗体。对一些高危人群如发生传染性单核细胞增多症的表现应常规作HIV抗体检测。

（三）诊断标准 我国于1990年8月在“中华人民共和国传染病防治法”中规定艾滋病属乙类传染病，并提出试验诊断标准。1996年又组织专家作了修订，其主要内容如下： １． HIV感染 受检血清经初筛试验，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫酶标法或间接免疫荧光试验等方法检查阳性，再经确证试验如蛋白印迹法(Western Blot)等方法复核HIV抗体阳性可确诊为HIV感染。

２． 确诊病例

（１）HIV抗体阳性，又具有下述任何一项者，可为实验确诊艾滋病病人：①近期内（3～6个月）体重减轻10%以上，且持续发热达38度℃一个月以上；②近期内（3～6个月）体重减轻10%以上，且持续腹泻（每日达3～5次）一个月以上；③卡氏肺囊虫肺炎。④卡波西(Kaposi)肉瘤，⑤明显的霉菌或其它条件致病菌感染。

（2）若HIV抗体阳性，体重减轻，发热，腹泻症状接近第一项标准且有以下任何一项时，可为实验确诊艾滋病病人：①CD4/CD8淋巴细胞计数比值<1，CD4细胞计数<200/mm3。②全身淋巴结肿大。③明显的中枢神经系统占位性病变的症状和体征，出现痴呆，辨别能力丧失，或运动神经功能障碍。

三、预防

艾滋病病人及HIV感染者是唯一的传染源，缺乏确切有效的预防和治疗手段，因此切断其传播途径，即切断通过性接触、血液及母婴三条途径的传播才能有效地预防和控制艾滋病播散。要遵守传统的道德标准，保持性生活的纯洁性及忠诚性。取缔贩黄制黄、卖淫嫖娼等社会不良现象。要保证血液供应的安全，避免有高危险行为的人供血；所有医疗用血，在使用前必须经过HIV抗体检查。杜绝吸毒，尤其是静脉吸毒者，对静脉吸毒者除强制性戒毒外，还应常规做HIV抗体检测。注射器、针头应严格消毒，对高危人群应采用一次性注射器具。在医疗中对提供组织、器官及精液者应做HIV抗体检测。对于HIV感染的妇女，应避免怀孕，怀孕后以做人流为宜。

HIV对环境中理化因素抵抗力不强。一般消毒剂如50%～70%酒精、5%石炭酸、0.1%家用漂白粉、2%福尔马林，2%次氯酸钠等皆可灭活病毒。HIV感染者或艾滋病病人的废弃物可采用焚烧的方法，需重复使用的衣物可用煮沸及高压蒸气消毒，不宜煮沸的物品可用2%戊二醛、70%酒精等浸泡10分钟后再洗净。家用漂白粉、次氯酸钠以及酒精等常用于污染环境及物体表面的消毒。

要加强宣传教育，进行多种形式的预防HIV传播及艾滋病知识的宣传，尤其要加强对高危人群的宣传教育。

篇2：艾滋病的实验室检查

1、ELISA ：对gp41 HIV 1型抗体的检测是标准的筛选方法，敏感性可达99.5%，但特异性并不高。该法的阳性者中仅13%为真正的HIV者，因此，属筛选试验。

2、蛋白印迹（Western印迹)法：是最常用的证实实验。若检出所有3个HIV主要基因gag、po1、env产物的抗体时为阳性，可确诊为HIV感染。

3、HIV1型抗原检测

由于血中p24抗原浓度低且形成了免疫复合物，p24抗原检测阳性率不如抗体阳性率高。在HIVl型感染的无症状期及艾滋病期 p24阳性率分别为4%及70%。

酶联免疫吸附试验检测p24抗原的特异性很好

下列情况时可进行抗原检测：1)测定HIVI型细胞培养；2)评价抗病毒治疗的效果；3)估计血清阳性母亲所生婴儿的HIVl型感染状态。

4、病毒培养感染病人的HIV1型培养敏感性为65%-100%(目前尚停留于实验室研究阶段)

5、DNA-PCR扩增外周血单核细胞中的前病毒DNA来确定HIV感染。可检测到每1万个细胞1个拷贝HIV前病毒。还可对病毒特定区段DNA进行序列分析，以研究病毒对抗病毒药物的耐药性。

6、RNA-PCR/b-DNA可对血清中HIV基因做定量检测，有利于诊断、估计预后，且可做抗病毒治疗的疗效考核。

7、HIV感染的辅助检查

CD4+细胞计数是公认的HIV感染进程的指标。

slL-2R测定：在HIV l型感染期间，sIL-2R呈非特异性升高，水平与感染进展有关。sIL-2R水平与CD4+细胞计数意义相反。β2微球蛋白测定在以淋巴细胞活化和(或)淋巴细胞破坏为特征的各种疾病中可见β2微球蛋白水平升高。

新喋呤与β2微球蛋白升高的意义相同，因此，两者之一同CD4+细胞计数一起，是预测HIV感染进展的最佳指标。

8、其它机会性感染病原或抗体的检测

卡氏肺孢子虫：痰、支气管分泌物、支气管灌洗液，或肺活检制成涂片或切片，姬姆萨或苏木素－伊红染色找虫或滋养体 隐孢子虫：大便涂片

真菌：直接涂片找孢子和菌丝，隐球菌可取CSF涂片墨汁染色

弓形虫、病毒性肝炎、巨细胞病毒：可行抗体检测

细菌：结核杆菌涂片抗酸染色，其它细菌可行血培养

篇3：艾滋病病毒抗体的实验室检测方法

1 筛查试验方法

筛查试验主要包括酶联免疫吸附试验 (ELISA) 、免疫斑点试验、免疫层析试验和凝集试验等方法, 后3种方法是为提供自愿咨询检测 (VCT) 的需求使用的简单而快速的试验方法。

1.1 ELISA试验

这种方法是使用最早, 也是最常用的HIV抗体筛查方法。目前, 试剂已经发展到第四代。

第一代试剂于1985年开始在美国使用, 主要用于献血员的筛查。试剂使用的抗原是完全病毒的裂解产物, 采用间接ELISA试验检测抗体。由于抗原常常含有细胞培养的蛋白成分而出现较多假阳性反应, 使特异度降低;而提高特异度的措施是稀释标本, 反而又使敏感度下降。同时, 抗原制备和纯化较困难, 危险性较大。

1990年, 第二代ELISA试剂使用重组或合成多肽抗原, 仍采用间接ELISA试验检测抗体, 能同时检测HIV-l和HIV-2。由于选择、使用了重要的抗原决定簇, 特异度和敏感度都有所提高, 抗原制备更加安全、容易, 重复性也较好。但是, 由于重组抗原有时含有载体的组分, 出现假阳性反应;多肽抗原缺乏合适的立体构象, 可能使敏感度下降。

1992年, 美国研制出第三代试剂, 与第一代和第二代试剂的检测方法不同, 采用双抗原夹心法检测抗体。这种试剂可以检出针对HIV抗原的所有抗体亚型, 不需要过度稀释标本保证特异度, 相对第二代试剂敏感度有所提高, 但还存在漏检现象。

第四代试剂是新发展起来的HIV抗原、抗体联合检测试剂, 可同时检测HIVP24抗原和HIV-1和HIV-2抗体。同时, 试剂的敏感度提高了, 缩短了窗口期, 减少急性感染者窗口期漏检, 降低了血源筛查的残余危险度。与第三代试剂相比, 第四代试剂可提前1～2周作出诊断。目前国内主要使用第三代试剂, 少数使用第二代试剂。

1.2 免疫斑点试验

免疫斑点试验通过使用硝酸纤维素膜为截体, 将HIV抗原滴在膜上成点状, 即为固相抗原。如果待测血清标本中存在HIV抗体, 即可与HIV抗原发生免疫反应, 形成的抗原抗体复合物可以与酶标记的抗人免疫球蛋白结合, 阳性结果在膜上抗原部位显示出肉眼可见的有色斑点。该方法具有反应时间短 (10min内) , 抗原用量少的优点。

1.3 免疫层析试验

该方法是在硝酸纤维素膜的加样区包被用特殊材料标记的 (通常用金或硒标记) 的HIV抗原, 在检测区和对照区包被重组或多肽HIV抗原。如果被检测标本中含有HIV抗体, 则样品中的抗体首先与标记的抗原结合, 发生抗原抗体反应形成复合物, 该复合物由于层析作用向前移动, 与包被在检测区的抗原结合, 形成标记HIV抗原-HIV抗体-重组多肽HIV抗原抗体复合物而显色。免疫层析试验大部分为一步法, 操作简便, 结果容易判定。

结果判断:检测区和对照区各出现一条红线, 被认为是HIV抗体阳性;只在对照区出现一条红线, 被认为是HIV抗体阴性;没有条带出现, 则认为试验无效。

少数免疫层析试剂在固相载体的不同部分包被不同的抗原来检测HIV-l M群和O群以及HIV-2抗体。该方法可以用血清、血浆或尿液检测, 检测时间为5min, 阳性结果一般在2min左右出现, 弱阳性结果5min左右出现;该方法适合基层医院快速筛查, 对不同基因型的区别有助于流行病学调查。

1.4 凝集试验

凝集试验将明胶颗粒、乳胶颗粒或自身红细胞等作为固相载体, 通过被HIV抗原致敏的固相载体与抗体发生免疫反应, 根据固相载体在孔中的凝集情况, 来检测标本中的HIV-1/2抗体。凝集试验操作时不需要仪器设备, 操作人员不需要很强的实验操作能力和结果解释能力。但是, 由于每次操作需要U板、样品、致敏和末致敏颗粒, 需设立阳性对照, 需要按要求稀释, 孵育时间长达2h等原因, 目前尚不能再基层医疗单位得到广泛应用。

另外, 唾液、尿液等生物材料也可以用于HIV抗体的检测。如艾滋病唾液检测卡, 在硝酸纤维素膜上包被人工合成的HIVgp41gp36蛋白抗原, 可同时检测含在唾液中的HIV-1/2抗体, 原理为酶免疫间接法。主要检测HIV IgA和IgG, 敏感度和特异度与ELISA相似, 避免了静脉穿刺;但样品预处理时间长, 且售价较高。尿液HIV-1抗体检测试剂在1996年由美国FDA首次批准, 主要用于静脉注射毒品人群和其他高危险人群的大规模流行病学调查。如我国赵立庆等[1]研究表明, CalypteTM尿液试剂盒的真阳性率为100%, 真阴性率为99.1%;与确认试验结果比较, 阳性符合率为100%, 可以作为快速筛查的方法。

2 确认试验方法

确认试验包括免疫印迹试验 (WB) 、线性免疫试验和免疫荧光试验等方法, 其中WB为最常用的方法 (金标准) 。

2.1 免疫印迹试验 (WB)

该方法通过对HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化, 能够检测针对不同抗原成分的抗体, 所以其敏感度一般不低于筛查试验, 特异度也很高。就HIV的病原诊断而言, 是目前使用最多的HIV抗体确认试验方法。但是, 尽管病毒经过浓缩和纯化, 但条膜上仍然可能含有病毒赖以生存的宿主细胞成分, 可出现非特异性反应, 大多出现在中分子量区域。因而, 这种方法的缺点是在某些情况下, 产生大量的不确定结果。

2.2 线性免疫试验 (LIA)

该方法将HIV不同型别和亚型的特异性抗原 (重组蛋白和合成肽) 以及质量控制带包被在一条尼龙膜条上, 用于检测样本中的HIV-1和/或HIV-2抗体。在检测抗体的同时, 还可以区分是HIV-1感染还是HIV-2感染。LIA可以减少WB出现的大量不确定结果。

2.3 免疫荧光试验

该方法以固定在玻片上的感染细胞内的HIV为抗原, 与待测血清反应后, 加入荧光素标记的抗人免疫球蛋白, 洗掉没有结合的荧光抗体, 在荧光显微镜下观察结果, 胞浆内出现特异性荧光而对照孔没有出现, 可判定为HIV抗体阳性。但该试验不宜在一般的实验室开展和应用。

HIV抗体检测工作应该按照《全国艾滋病检测技术规范》的要求, 在合格的实验室内进行, 要采取严格的质量保证、质量控制和质量评价措施, 注意实验室生物安全管理和防护, 注意职业暴露的预防, 严格遵守实验室标准操作程序, 防止样品间交叉污染, 切实保证样品检测质量。

我们坚信, 随着检验技术的快速发展, 将有更多的试剂和新方法用于HIV抗体检测, 使HIV感染者得以早期诊断。

参考文献

篇4：艾滋病的实验室检测及管理

【关键词】实验室；检测；管理

【中图分类号】R5 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2012）09-0337-01

艾滋病，又名“获得性免疫缺陷综合征”，从1981年美国诊断出全球首例患者至今的25年间，已有2500万人不治身亡，感染者达到3950万人，资料表明全球目前每8秒钟就新增1例感染者。这些感染者是如何通过实验室检测出来的？我们该怎样科学检测和管理呢？

1实验室检测

1.2免疫学检查　循环淋巴细胞显著下降，TH细胞减少，TH/TS小于0.1；T细胞功能下降，迟发型皮肤试验转阴，体外试验证明以非特异性有丝分裂原刺激时，T细胞反应降低，T细胞的细胞毒作用下降，产生白细胞介素2及a-干扰素下降。B细胞功能失调，多克隆性高球蛋白血症，对新抗原刺激不产生应有的抗体反应，自然杀伤细胞活性下降。

1.2HIV抗体检测目前，艾滋病病毒（HIV）的主要检测方法是做HIV抗体检测，它是诊断HIV感染者和艾滋病病人的主要指标。检测方法包括：1.酶联免疫吸附法（ELISA）；2.明胶颗粒凝集试验（PA）；3.免疫荧光检测法（IFA）；4.免疫印迹检测法（Western Blot，简称WB法）；5.放射免疫沉淀法（RIP）。其中前三项常用于筛选试验，后二者用于確证试验。HIV感染后数周或数日内常不能检出抗体，95%的受染者在5个月内可测出抗体。但也有感染后3-4年仍不能检出抗体者，此时有必要检测HIV病毒。

HIV抗体检测流程是：受检者先要到国家批准的有资质的艾滋病筛查实验室做筛查试验。需要说明的是，筛查实验室是不能发出HIV抗体阳性报告的。如筛查结果为阳性，需要用两种试剂复测，若复测两种试剂均为阴性，则报告“HIV抗体阴性”；若两种试剂均为阳性或一阴一阳，必须再将标本送到国家批准的艾滋病确证实验室做确证试验，如确证试验结果无法确证为阴性或阳性，则报告确证试验结果为“HIV抗体不确定”，一般要求在3个月的“窗口期”后复查，复查结果如果仍为不确定，必须再过3个月复查，最终结果仍为不确定或为阴性，则可排除受检者为艾滋病感染者。

2实验室管理

艾滋病检测实验室是艾滋病预防控制工作中的一个重要组成部分,其提供的检测数据是制定遏制艾滋病的传播流行措施的重要依据。至2006年底,全国共有初筛检测实验室6000多家,116家确证实验室。随着艾滋病检测面的不断扩大,艾滋病确证实验室无法完成更多的初筛检测任务,因而更多的初筛检测就由初筛检测实验室来承担。而对艾滋病初筛实验室进行规范化的管理是全面提高艾滋病初筛实验室的技术水平，提高检测质量，确保检测准确性的重要保证。

2.1加大对实验室硬件的投入，根据《全国艾滋病检测工作管理办法》对初筛实验室的建设条件和仪器设备进行资金的投入。保证实验室人员业务能力、设施环境等条件满足检测要求。

2.2健全和规范管理制度，根据《全国艾滋病检测工作管理办法》和《全国艾滋病检测技术规范》的要求，制定一系列管理制度，如样品的管理、职业暴露预防和处理制度、实验室安全措施、实验室工作制度等，并严格按制度执行。

2.3在初筛实验室引入先进的管理模式，实验室建立检测标准操作程序文件和实验室管理文档，建立检测数据库，制定废弃物管理及处理制度，使实验室的工作得到规范化的管理。

参考文献：

[1] 现代预防医学，[M]科学技术出版社，2011.

[2] 艾滋病的实验室检查，[J]中华检验医学杂志，2009.3.

篇5：艾滋病的实验室检查

关于开展艾滋病综合防治 工作督导检查的通知

各县（市）区防治艾滋病工作委员会办公室：

为深入了解2011年度各地艾滋病防治工作落实和全面掌握2012年我市艾滋病、丙肝、性病等综合防治工作进展工作情况，扎实推进全市艾滋病综合防治工作顺利实施，确保全年艾滋病综合防治工作任务圆满完成，市防艾办决定开展全市艾滋病综合防治督导检查，现将具体事宜通知如下：

一、督导内容

（一）2011年度艾滋病综合防治工作完成及经费执行情况

（二）2012年度艾滋病综合防治工作进展情况

二、督导方式 采取听取汇报（口头）、查阅资料、现场检查的方式进行。

三、督导对象

船营区、永吉县综合防治示范区，各县（市）区疾控中心、定点医院、综合医院。

四、时间安排

5月14日昌邑区（上午）、船营区（下午）5月15日舒兰市

5月16日丰满区（上午）、高新区（下午）5月17日龙潭区（上午）、经开区（下午）5月18日蛟河市 5月21日永吉县 5月28日磐石市 5月29日桦甸市

五、督导组成员

组 长：石善江 市卫生局副局长、市防艾办主任 副组长：李丽佳 市卫生局疾控处处长 乔建国 市疾控中心主任

成 员：翟 强 市卫生局疾控处副主任科员 关凯程 市卫生局疾控处副主任科员

孙殿伟 市疾控中心办公室主任 蔡 勇 市疾控中心艾滋病科科长

廉光春 市疾控中心艾滋病科科员 胡 杰

市疾控中心艾滋病科科员

六、督导要求

（一）督查组成员要严格按照督查的重点内容，本着求真务实的工作态度认真进行督查，对检查出的问题及时给予指导和反馈。

（二）督查结束后，督导组要对整体检查情况进行总结，并提出整改意见，市防艾办将对督查整体情况进行通报。

二○一二年五月十一日

主题词：卫生 艾滋病 督导检查 通知 抄送：省防治艾滋病工作委员会办公室

篇6：手术前到底要不要检查艾滋病

手术前到底要不要检查艾滋病

手术前艾滋病检查是俗称的“术前四项检查”之一，目的以确诊患者是否患有或感染了这种病。医生认为，手术前进行必要的病原学检查，是为了更好地制定治疗方案，也更好的防止这些疾病的医源性传播。

医源性传播是艾滋病血液传播途径之一。血液传播是感染HIV最直接的途径，如输入被病毒污染的血液，尤其是“窗口期”的血液（即献血者已被病毒感染，但还未出现抗体的阶段所献血液，不能被现有的检测手段查出）；使用了被污染而又未经严格消毒的医疗器械，包括注射器、针灸针、口腔科器械、妇产科的接生用具以及外科手术用的刀子、剪子、钳子等。另外，在作胃镜、肠镜、膀胱镜等介入检查和治疗时，都有感染艾滋病病毒及其他病毒的可能性。因此，在临床治疗中，进行术前四项检查可以帮助医生针对不同的患者制定不同的治疗方案。

专家们还认为，术前四项检查有助于减少医疗纠纷，“一个病人输血或动手术后发现感染了艾滋病，是输血和医源性感染所致，还是患者接受治疗或入院前已被感染？这就需要与患者手术前或输血前检查的资料进行对比。如果查了，责任就好分了；如果没查，那就说不清了。”

如何预防医源性艾滋病

①对输血者进行艾滋病病毒检测，严厉打击非法献血者。

②普遍推广应用一次性注射器、针头、针灸针，使用后严格毁型；手术器械、内窥镜和其他相关设备要严格消毒。

③在艾滋病病毒感染较高地区，有必要对给病人做手术的医务人员和病人进行艾滋病病毒检测。

④值得注意的是通过器官或组织或人工受精传播艾滋病病毒。

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篇7：艾滋病的实验室检查

作者：艾买尔江 来源：疾控中心 发布时间：2012年06月15日 点击数：

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为全面掌握艾滋病综合防治各项措施的落实和工作进展情况，及时发现和解决遇到的困难问题，进一步推动艾滋病防治工作的开展，落实“逢孕必检”和“逢院必检”措施，扩大艾滋病检测和抗病毒治疗覆盖面，提高防治工作质量和效果。6月12日，地区艾滋病防治督导组一行5人对我县上半年艾滋病综合防治工作进行了督导检查。

篇8：艾滋病的实验室筛查与质量管理

1 实验室设施与条件

实验室分为清洁区、半污染区和污染区, 配备有生物安全柜、酶标仪、洗板机、冰箱、水浴箱、离心机、加样器、消毒与污物处理设备等。符合国家二级生物安全实验室 (BSL-2) 要求[1]。

2 设备维护与校准

将仪器的维护及校准制度化。酶标仪、洗板机的使用、校准、维护等有详细记录, 每年市计量所定期来专家对酶标仪、精密移液器进行校准并保留记录。经常检查洗板机管道是否通畅, 是否有漏液现象, 检查洗涤时各孔是否与相应的冲洗头对位良好, 负压是否符合规定要求等。每天检查冰箱及孵育箱的温度, 并做好记录。

3 检验人员资质

负责筛查试验有3名医技人员, 其中中级职称1人, 均有2年以上病毒血清学检测工作经验, 掌握艾滋病的基本知识和安全操作要求, 熟知HIV抗体筛查程序, 参加过多次HIV检测技术培训班, 有部、省、市级证书。

4 艾滋病抗体筛查试验

采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 。

4.1 筛查试剂

使用的是上海科华生产的双抗原夹心法ELISA试剂, 复检用上海科华、夏门新创两厂家的ELISA试剂。均为经国家食品药品监督管理局注册批准, 批检合格, 且临床质量评估优良的有效期内试剂。检测时, 试剂和样品放置在室温18~23℃, 按HIV抗体筛查检测的标准操作文件 (SOP) 做好试剂准备。

4.2 实验操作

备好试剂盒、待检样品和外部对照质控血清后, 按说明书及质控和安全防护要求进行筛查检测。操作中应注意, 加样时应将标本加在孔底, 避免加在孔壁上部, 并注意不可出现气泡。加酶和底物时, 应该使用相同口径的滴管, 使每滴液体的体积基本相同。

按规定控制好温育的时间和温度。强调各ELISA板不应叠放在一起, 保温最好是水浴箱, 如用恒温箱, 将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中, 可使温度迅速平衡。当室温较低时, 可适当延长保温时间, 否则临界值或弱阳性样本会有测不出来的问题。

洗涤是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质, 以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质, 它是实验成败的关键环节之一。用洗板机洗板有洗液残留的问题, 如有酶结合物的非特异性吸附, 将使空白值升高, 或有假阳性的可能。为了使实验结果可靠, 最后一遍机洗后, 可加用手工将反应板洗液甩掉、拍干。

4.3 结果判定

控制好显色时间, 终止反应, 结果必须使用酶标仪判定。根据试剂盒要求的方法计算实验的Cut off值。

阴性:待检样品的OD值小于Cut off值 (S/CO<1) 。

阳性:待检样品的OD值大于Cut off值 (S/CO≥1) 。

4.4 实验报告

筛查试验呈阴性反应出具HIV抗体阴性报告, 阳性反应则采用两个不同厂家的ELISA试剂复检仍阳性时, 出具“HIV抗体待复查”报告, 即刻上报主管领导和做好保密工作。同时进行以下处理: (1) 填写HIV抗体复查送检单, 经1名检测人员和1名具有中级以上技术职称的人员审核签字; (2) 尽可能重新采集受检者的血样, 将2份血样 (或仅原血样) 连同HIV抗体复查送检单一起送艾滋病确认实验室。送交的确认样品置于带盖的试管内, 试管上应有明显的标记, 将试管放入专用带盖的容器内, 容器的材料要易于消毒处理。做好运送感染性材料记录。

4.5 实验室医疗废物的处理

废弃物处置应符合《实验室生物安全通用要求》和《消毒技术规范》。从艾滋病实验室出来的所有废弃物, 包括不再需要的样品, 均应视为感染性废弃物, 应置于专用的密封防漏容器中, 安全运至消毒室, 高压消毒后统一处理。

5 质量控制[2]

5.1 室内质控

内部对照质控血清指试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。内部对照是质量控制的基础, 并且它只能在同批号的试剂盒中使用。外部对照质控血清是为了监控检测的重复性和稳定性, 以及试剂盒批间或孔间差异所设置的一个弱阳性对照血清。室内质量控制是通过对外部对照质控血清的检测和分析, 推断和控制常规标本的检测质量, 因此, 室内质控血清与检测标本必须同等对待。

5.2 质控图

使用外部对照质控血清值绘制室内质控图。当测定结果波动在均值±2s范围内, 表明工作正常、结果可靠, 方可发出标本检测报告。否则, 应及时回顾检验过程分析原始数据, 查找原因并复检。引起室内质控失控的原因很多, 如换用新批号诊断试剂盒、仪器设备未经校准或测试、温育时间和温度不准确、新的检验人员、质控血清反复冻融等。因此, 我们对实验结果和过程应进行认真记录并保存, 以便及时查找原因予以纠正。

5.3 室间质评

每年参加卫生部临床检验中心组织的室间质评均获得优秀成绩。

自2000年以来, 检测各类实验标本约31 680人次, 其中阳性标本9例, 均经省艾滋病确认实验室证实, 无一起因检测技术原因引起的医疗事故与纠纷。

通过多年来的HIV实验室筛查, 使我们真正认识到这项工作的严肃性和重要性。所以, 为了做好艾滋病筛查工作, 准确、规范地出示检测报告, 要求我们在严格执行检测技术规范的同时, 务必做好艾滋病初筛的质量管理。

参考文献

[1]中华人民共和国卫生部.全国艾滋病检测工作管理办法[J].中国生育健康杂志, 2006, 17 (5) :260～264

篇9：艾滋病的实验室检查

【摘要】艾滋病病毒（Human Immunodeficiency Virus或HIV）感染的诊断主要依据实验室结果，实验室的检测质量直接影响检测结果[1]。为了尽早、尽快发现感染者，昭通市建成了比较完整的艾滋病检测实验室网络。截止到2013年底，全市有1个确证实验室、14个筛查实验室、192个快速检测点[2]。为了了解昭通市艾滋病快速检测实验室的具体情况，规范昭通市艾滋病网络快速检测实验室的管理，对其实验室现状进行了一系列的调查。

【关键词】传播；预防；艾滋病；自我防护

【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）06-0283-01

1 资料与方法

1.1 基数资料

本地区艾滋病快速检测实验室共有192家。

1.2 方法

对艾滋病快速检测实验室发放盲样5份，现场观看实验室人员操作，察看实验室库存试剂、原始记录、结果报告与告知，并采用酶联免疫吸附试验进行临床检测。

2 检测结果

2.1 检测实验室的基本情况：人民医院12家，中医医院7家，妇幼保健院12家，卫生院144家，计划生育服务站3家，民营医院14家。实验室工作人员≥2人99.5%（191/192），具有相关检验或医学知识的占100%（329/329），经过相关专业技术部门实验室检测技术培训并取得合格证书的占38%（125/329），未进行实验室检测培训的人员占62%（204/329）。

2.2 检测仪器

该实验室均使用的是免疫层析试剂，均经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内[3]。乡镇卫生院、中医医院、计划生育服务站及民营医院只有1种快速试剂[4]，而人民医院、妇幼保健院有2种或以上快速试剂。妇幼保健院使用的快速试剂为省级统一招标采购试剂。99%（190/192）的实验室移液器均未检定或自检，72%（138/192）的实验室使用劣质移液器。

2.3 考核结果统计 192家艾滋病快速检测实验室的5份盲样的准确率为99%（190/192）。99%（190/192）的实验室考核成绩为优秀，1%（2/192）的实验室考核成绩为合格。对未获得优秀成绩的实验室进行原因分析，发现1家没使用移液器，而是使用分离血浆的塑料滴头加样，导致样本量不准确而出现错误，另1家是实验室人员不会操作造成。

3 讨论

艾滋病筛查实验室进行疾病筛查时，选用的HIV筛查试剂应具备两种或两种以上检测方法的试剂。四代酶联检测试剂的敏感性较三代酶联试剂的敏感性更低，因此建议筛查实验室优先采纳三代酶联免疫试剂。其中化学发光法所需仪器的自动化程度较高，且时间较短，因此许多实验室采用该实验方法替代酶免法，且该种实验方法全市只有几家较大型的综合性医院采用，对该实验方法的质量控制仍然是临床关注的重点。

艾滋病快速检测实验室主要建立有检测需求、尚不具备条件建立筛查实验室的单位。我市为了响应《国务院关于进一步加强艾滋病防治工作的通知》（国发【2010】48号）[5]的扩大检测服务范围的要求，截止到2013年底，全市先后建立了192個艾滋病快速检测实验室。快速检测实验室使用试剂均为快速试剂，试剂的质量、操作是否正确、是否使用外部质控、温度、湿度等，是判断试验结果是否有效的标准。

医疗机构实验室人员流动过于频繁，新近人员的培训不到位，缺乏经验，操作不规范，对结果解释不清。因此，及时掌握实验室工作人员的整体情况，包括人员变动、技能培训等，稳定实验室工作人员的队伍，从而有利于保证实验室的检测质量，提高实验室检测水平。

快速检测实验室的外部质控是判断该批临床样品检测的有效性[6]。每天做1次外部质控，更换检测人员、批号、包装、不同厂家试剂时加做做1次外部质控，这样可以监控实验的重复性，了解各批次试剂的批间差异，从而更好的保证试验结果的准确性。

检查相关制度的落实情况。只有对实验室制度进行有效的落实才能够保障HIV检测工作的正常运行，并得到较为准确的检测结果。定期对实验室的规范制度进行监督，如：样品接收制度，登记本内容是否记录完整等；安全防护制度，检查实验室检测人员是否正确戴帽子、口罩；消毒管理制度，紫外灯强度是否在正常范围之内等。

艾滋病快速检测实验室要实施常年的动态管理，对新进人员要及时培训，新建立的实验室做好技术支持和指导。定期对检测人员进行业务培训，包括实践操作与理论知识考核等，如果条件允许可到上级单位进行参观学习等，提高实验室检测人员的专业技术水平与实际操作能力等。此外，年终对考核结果较优秀的实验室进行通报表扬，邀请相关检测人员在培训会议上传授工作经验等，从而利于各筛查实验室提高对检测质量的重视，提高检测质量。

对基层地区提高HIV的检测覆盖率，艾滋病防治工作十分重要，当地政府应加大资金投入用于乡镇卫生条件的改善，建立艾滋病检测点或筛查实验室；同时加强血清HIV抗体检测服务，及时对孕产妇与手术患者进行检测；加强力度宣传咨询服务，提高当地的卫生服务水平。

加强对艾滋病实验室检测仪器的投入，提高实验室工作人员的业务能力，有利于进一步提高咨询检测服务的长远发展。

参考文献：

[1] 潘晓红，陈琳，徐云等.2012年浙江省HIV感染者和艾滋病患者检测发现特征及影响因素[J].中华预防医学杂志，2014，48（5）：380-385.

[2] 汤后林，毛宇嵘，张铁军等.HIV感染者及艾滋病患者检测发现晚的原因调查分析[J].中华预防医学杂志，2012，46（11）：1004-1008.

[3] 李媛媛，凌媛，马志新等.结晶紫蚀斑法检测重组痘苗病毒艾滋病疫苗病毒滴度方法的建立[J].中华微生物学和免疫学杂志，2011，31（10）：948-952.

[4] 江春美，陈世新，陈莲等.婚检服务平台在预防艾滋病平行传播和母婴传播的应用研究[J].中国妇幼保健，2015，30（19）：3121-3123.

[5] 桂希恩，张元珍，杨蓉蓉等.孕产妇和婚检人群艾滋病、乙型肝炎及梅毒综合防治成本分析[J].中华流行病学杂志，2010，31（8）：873-875.

篇10：艾滋病初筛实验室总结

各位领导、各位专家：

大家好！

HIV初筛实验室自2006年建立以来，在省市业务部门的关心、支持、指导下，克服困难和压力，顺利完成了各项工作和任务，现将2013年度7月份-2014度6月份HIV初筛实验室有关工作情况汇报如下：

一、加强领导，提高认识

HIV初筛工作具有严格的科学性和政策性，任何错误的诊断都会对被检测者产生不良的影响，为确保备一份检测结果的准确性和可靠性，中心按照艾滋病检测技术规范要求，进一步完善了实验室各项管理制度，并组织认真学习，在实际工作中严格执行。

二、基本情况

1、实验环境：中心HIV初筛实验室分为清洁区、半污染区和污染区，各区分区明确，物品摆放符合分区要求。检测仪器与设备布置合理，操作流程符合单向流动的原则，有利于避免交叉污染。墙面、地面、台面耐酸碱且易于处理。装有感应流水装置，备有冲眼设备。

2、仪器设备：配备与检测工作需要相适应的离心机、移液器、洗板机、水浴箱、酶标仪、生物安全柜、专用冰箱等仪器设备，并保持正常使用。有消毒处理设施和安全防护用品。

3、人员条件：实验室由6名卫生技术人员组成，其中有2名中级卫生职称人员。实验室人员有从事病毒血清学检验经历，并经省或市疾控中心培训合格，持有效合格证上岗，均建立了个人健康档案，同时HIV初筛实验室工作人员均参

加了省级生物安全岗前培训班。

4、制度：建立了实验室管理制度，包括实验室安全事故报告制度、管理制度、生物安全制度等。

5、标准化操作程序：制定的SOP文件包括：(1)样品的接收、登记和处理；(2)检测方法和步骤；(3)仪器的使用维护和校准；(4)实验质量控制；(5)结果解释与报告；(6)保密程序；(7)检测数据的记录与保存；(8)追踪和处理；(9)实验室的清理和消毒；（10）实验室安全防护等。

6、实验记录：实验原始记录表、打印数据、检测记录表、标本登记、仪器设备维修和校准记录等记录。

7、实验操作：操作时按照二级防护着装进行着装，有确实的防护措施，操作规范，反应板标记明确，严格按照试剂盒操作说明书进行检测。

三、质量控制

1、仪器校准：建立了移液器、酶标仪、温湿度计等常用仪器的维护及校准制度。以上仪器设备每年均送江西省计量检定院检定一次，记录、标识完整。

2、试剂：经国家食品药品监督管理局注册批准合格的试剂，且在有效期内使用。

3、质控品的使用：有外部质控品，且正确保存、分装、使用。

4、质控图的建立：建立了质控图，有问题的进行了分析。

5、完成能力验证工作。

6、加强生物安全及职业暴露的培训和学习，促使工作人员加强生物安全的意识和观念。

四、业务工作情况

1、认真学习HIV筛查实验室各种制度,严格执行各种规章制度。

2、接受上级有关单位的监督和指导。3、2013年7月份-2014年6月份HIV抗体筛查：术前检测2178次，孕产妇检测821，VCT,551 次，娱乐场所从业人员检测100人份，两牢人员检测222人份，合计 3872人份。确诊HIV抗体阳性共4例。4、2014年6月配合市卫生局、市疾控中心完成了辖区内10家卫生院检测点的评审工作。

篇11：艾滋病实验室规章制度

1、实验室工作人员要熟悉生物安全操作知识和消毒技术；

2、不得在实验室内喝饮料、吸烟、吃食物、和化妆打扮等；不得在实验室内会客；

3、实验室用品（包括工作服）不得用于其他用途；不可将私人和无关的物品带入实验室；

4、工作时，要带手套、穿工作衣和隔离衣，操作时手套破损应立即丢弃、洗手并带上新手套；

5、不要用戴着手套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等；

6、尽量避免使用尖锐物品和器具；宜用不易破碎材料制品；禁止用口吸任何物质；

7、工作结束后，要对工作台面消毒，如用消毒液清洗后要干燥20分钟以上；操作时有标本、检测试剂外溅时应及时消毒；平时要保持环境整洁；

8、工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用肥皂和流动水洗手；

9、遇有意外事故，应立即处理并以口头和书面报告上级部门。如工作人员皮肤被刺伤，可以用流动水局部清洗或用刺激性较轻的含氯创伤消毒剂锓泡皮肤创口；样品或检测试剂溅入眼内立即用生理盐水冲洗，溅入嘴内，先吐出残留的液体后，用水反复漱口；

篇12：艾滋病初筛实验室设备技术参数

艾滋病初筛实验室设备包括：12支移液器、1台-20—-40℃低温冰箱、1台高速离心机、1台低速离心机、荧光显微镜1台。

一、移液器技术参数（预算单价均为0.25元/支）

1、移液器12支：包括量程0.5-10μl 3支，量程20-200μl 3支，量程10-100μl 3支，量程100-1000μl 3支。

2、单道，手动，连续可调，可使用于相同型号任何市售吸嘴。

3、拆卸方便，零件易拆易装，可更换，可高温高压灭菌。

4、具有高精准度、高重现性、高耐用性、高舒适度。5、0.5-10μl移液器最大量程不准确度≤±1.0%，不精密度≤±0.5%。6、10-100μl移液器最大量程不准确度≤±0.8%，不精密度≤±0.2%。7、20-200μl移液器最大量程不准确度≤±0.6%，不精密度≤±0.2%。8、100-1000μl移液器最大量程不准确度≤±0.6%，不精密度≤±0.2%。

二、低温冰箱技术参数(预算单价为5万元/台)

1、低温冰箱：1台。用于冷冻保存血浆或试剂。

2、外部尺寸（WxDxH）：800～850x750～800x1800～1850(mm)；内部尺寸（WxDxH）：650～700x600～650x1250～1300(mm)

3、立式，有效容积≥480L；温度范围-20—-40℃（每档1℃），箱内温度均匀度误差≤3℃。

4、外部材料：彩色涂层钢板或冷轧钢板；内部材料：不锈钢或苯乙烯脂或彩色铝板。

5、隔热材料：硬质聚亚氨酯原位整体发泡。

6、外门：2扇（上室下室各一扇），隔热材料带磁性门封条。

7、锁：1个，2个可加独立挂锁门栓。

8、脚轮：4个，2个可调节。

9、抽屉式储存盒，上层≥6个，下层≥4个。每个抽屉均带标示贴。

10、具有电池、风扇寿命提醒功能，高低温报警功能，断电报警功能，远程报警接点。

11、配置：钥匙1套，除霜冰铲1把。

三、高速离心机技术参数(预算单价为4万元/台)

1、高速离心机1台。

2、最高转速≥14,000rpm。

3、最大转子容量≥18x1.5/2ml。

4、时间设置: 0.5-599分钟，可连续运转。

5、加速至最高转速的时间≤15秒。

6、从最高转速减速的时间≤15秒。

7、卡口式气密型金属转子盖，超静音，可以无转子盖的情况下离心。

8、具有宽泛的温控范围：0℃至40℃。

9、离心机具备快速制冷功能，可迅速降温至设定温度。

10、离心结束后，可持续制冷，即使在最高转速时，也可保持4℃。

11、离心结束后自动开盖，减少样品预热。

13、离心结束后声音提示。

14、便利的两旋钮操作。

15、可选择速度的短时离心功能可以快速完成瞬时离心功能。

16、具备定时记速功能，可在达到设定转速后才开始倒数计时。

17、转子和附件均可高压灭菌(121°C，20分钟)。

18、系统需达到国际最高安全标准。

四、低速离心机技术参数(预算单价为4万元/台)

1、低速离心机：1台。

2、最高转速≥4000 r/min。

3、最大相对离心力≥3000×g。

4、具有真空采血管自动脱盖功能，脱盖成功率＞90%。

5、适配器分层可拆卸，适用于100mm、75mm两种长度。

6、触摸面板、大屏幕液晶显示、操作简便。

7、采用电子门锁，安全性能强。

8、最大分离数≥100根采血管。

9、可同时脱帽离心≥100支真空采血管。

10、显示类型：LCD 段式液晶显示

11、时间控制：1sec～99min59sec

12、产品符合国际质量管理体系认证。

13、配置：离心机主机 1台，100孔自动脱盖转子1套。

五、荧光显微镜技术参数(预算单价为12万元/台)

1、光学系统：采用无限远光学系统。具有明场，荧光功能；可扩展相差、偏光等功能，扩展双人、三人及多人共览。

2、调焦系统：2档同轴粗/微调焦，调焦驱动钮高、低位可调。适合不同大小的手掌贴着桌面操控调焦，有效降低手掌、手臂、肩膀的肌肉疲劳。具有载物 2 台限位装置，能有效防止压碎标本。

3、防止肩部劳损的对称操作设计：载物台驱动装置和聚焦按钮在显微镜上同一高度，并且离操作者的距离相同，形成对称操作，操作显微镜时，两手可以放在一条直线上，肩部与身体轴线成一直角。

4、载物台：超硬浅米色镀陶瓷载物台，坚固耐刮、耐腐蚀，行程76mm x 25 mm。载物台驱动手柄可左、右更换，使左、右手操作皆为可能，另外可轻松实现X、Y、Z轴单手调节。载物台钢丝传动，阻尼可调，扭矩可调，X-Y移动无暴露齿条，带刻度，可方便记录座标位置。

5、单手可操作玻片夹，方便另一只手同时执笔记录，提高了工作效率。

6、聚光镜：数值孔径N.A.0.9/1.25，孔径光栏具有彩色标记，并且与物镜放大倍数的颜色标记相匹配，带有物镜倍数标注

7、物镜转换器：≥5位物镜转换，高齐焦性、高同轴性。

8、宽视野三目镜筒，分光比50:50%，倾角30度，瞳距调节55-75mm，视场数20mm；

9、目镜：10倍宽视野目镜，高眼点，视野数为22mm；

10、物镜：平场消色差物镜，配4X(NA=0.1)WD≥18mm、10X(NA=0.25)WD≥5.8mm、20X(NA=0.40)WD≥2.3mm同步亮度物镜，与40X(NA=0.65)WD≥0.36mm物镜保持同样亮度，换物镜时免去光亮调节，保护眼睛。

11、照明装置：LED冷光源照明，LED灯泡250V/4W，寿命可达10万小时。

12、配长寿命荧光光源；拥有≥3个滤光片块档位，提供≥3个荧光滤光块，可与各种荧光染料配合使用。