胶体制备及性质优质课

2024-04-10

胶体制备及性质优质课（精选2篇）

篇1：胶体制备及性质优质课

氢氧化铁胶体的制备和性质实验教学设计

1.掌握实验室制备氢氧化铁胶体的实验操作技能和方法。2.实验探究胶体的重要性质——丁达尔效应，学会用简单的方法鉴别胶体和溶液。3.培养由宏观实验现象推断微观粒子大小的能力。4.认识胶体在生活生产和科学研究中的应用。1.利用已有的经验，并查阅有关资料或向老师咨询，完成以下问题：（1）按分散质或分散剂的聚集状态（气态、液态、固态），它们之间可以组合形成9种分散系，对每种分散系，请各举一个实例。（2）当分散剂是水或其他液体时，按分散质粒子的大小不同，可将分散系分为哪几类？对每一类请各举几个实例。2.胶体是物质的一种存在形式，是一种（填“混合物”或“纯净物”）体系，它研究的（填“是”或“不是”）某种物质特有的性质，而是物质所表现出来的性质。由此可知，物质的性质不仅与有关，还与有关。3.在实验室制备FeOH3胶体的实验操作方法是，有关反应的化学方程式为。4.若将FeOH3胶体和泥水分别进行过滤，你预测在滤纸上都有固体物质留下吗？蒸馏水，FeCl3饱和溶液，CuSO4溶液，泥水，食盐溶液，淀粉胶体小烧杯，量筒，酒精灯，铁架台（配铁圈），石棉网，胶头滴管，激光笔（或手电筒），玻璃棒，漏斗，火柴，滤纸 1.制备FeOH3胶体：在洁净的小烧杯里加入约25 mL蒸馏水，加热至沸腾，然后向沸水中逐滴加入12 mL FeCl3饱和溶液，继续煮沸至液体呈红褐色，停止加热。FeCl3饱和溶液呈色。FeOH3胶体呈色。反应的化学方程式为。2.FeOH3胶体、CuSO4溶液和泥水的外观比较：另取两个小烧杯分别加入约25 mL CuSO4溶液、25 mL泥水，观察比较FeOH3胶体、CuSO4溶液

和泥水。FeOH3胶体、CuSO4溶液都是的液体，泥水是的液体。静置，的分散质会下沉。FeOH3胶体和CuSO4溶液在外观上。三种分散系中最不稳定的是，分散质粒子最大的是。3.丁达尔效应：1把盛有CuSO4溶液和FeOH3胶体的烧杯置于暗处，分别用激光笔（或手电筒）照射烧杯中的液体，在与光束垂直的方向进行观察。2把盛有食盐溶液和淀粉胶体的烧杯置于暗处，分别用激光笔（或手电筒）照射烧杯中的液体，在与光束垂直的方向进行观察。光束照射时：FeOH3胶体中、CuSO4溶液中。光束照射时：淀粉胶体中、食盐溶液中。预测：FeOH3胶体有此现象的原因可能是或等。淀粉胶体和食盐溶液在外观上。综合12可知造成胶体的丁达尔效应的原因（填“是”或“不是”）液体的颜色，而是不同，这一现象说明胶体和溶液中分散质粒子的大小顺序是。4.FeOH3胶体、泥水的过滤：按“实验1-1”中过滤的装置和操作方法，将FeOH3胶体和泥水分别进行过滤，观察现象。过滤后的滤纸上：FeOH3胶体、泥水。FeOH3胶体的分散质粒子（填“能”或“不能”）透过滤纸孔隙，这说明胶体和浊液中分散质粒子的大小顺序是。结论：溶液、胶体和浊液中分散质粒子的大小顺序是，三种分散系的稳定性顺序是，三种分散系的本质区别是。液体的颜色不同不是三种分散系的本质区别。1.请从分散质粒子大小（单位：nm）、主要特征、具体实例等方面列表比较浊液、溶液和胶体。2.有三瓶液体，分别是NaCl溶液、FeOH3胶体、淀粉胶体，请设计实验方案检出哪一瓶是NaCl溶液？由此你能得到什么结论？ 3.半透膜（如鸡蛋壳膜、羊皮纸、玻璃纸等）有

非常细小的孔，只能允许较小的离子、分子透过，胶体的分散质粒子不能透过。请查阅有关资料、设计实验方案提纯精制用FeCl3饱和溶液制备的FeOH3胶体，将你的方案与同学或老师讨论后，再到实验室进行实验。4.查阅有关资料，列举几个具体实例：（1）生产、生活中的常见胶体及其应用。（2）丁达尔效应在生产、生活和科学研究中的重要应用。5.本次实验中，你还发现了什么问题或有什么其他新的认识或感受？豆丁致力于构建全球领先的文档发布与销售平台，面向世界范围提供便捷、安全、专业、有效的文档营销服务。包括中国、日本、韩国、北美、欧洲等在内的豆丁全球分站，将面向全球各地的文档拥有者和代理商提供服务，帮助他们把文档发行到世界的每一个角落。豆丁正在全球各地建立便捷、安全、高效的支付与兑换渠道，为每一位用户提供优质的文档交易和账务服务。

篇2：胶体制备及性质优质课

弓形虫是一种专性细胞寄生性原虫, 具有广泛的宿主群, 引起人畜共患病, 并在世界范围内流行。爱滋病患者、恶性肿瘤患者等免疫功能损伤或抑制者, 弓形虫作为一种机会感染因子, 可致患者死亡[1]。弓形虫病不但是医学上的一种重要疾病, 更是影响人类优生优育的一个重要生物因子。怀孕妇女感染弓形虫, 无论有无临床症状, 均可使约50%携带者因垂直传播出现流产、死胎及胎儿先天性缺陷[2], 在养殖上, 弓形虫病也会造成重大损失。

在实验动物中, 小鼠、大鼠、豚鼠等是弓形虫重要的中间宿主, 猪是终末宿主, 弓形虫在终末宿主的肠上皮细胞内完成有性生殖并随粪便排出卵囊。在体外完成孢子过程成为侵袭性卵囊, 中间宿主动物吞食侵袭性包囊后, 在其体内进行无性生殖, 主要经消化道感染[3]。

实验动物中的大鼠、小鼠感染弓形虫后几乎没有症状;豚鼠主要表现肝、脾肿大, 幼龄鼠出现角弓反张, 排粪、排尿紊乱;猫急性发病时出现体温升高、嗜睡、呼吸困难, 有时出现呕吐和腹泻;孕猪可发生流产死胎;猴有脑炎表现。

目前弓形虫病诊断取得较大进展, 但常用的IHA及ELISA等方法操作烦琐, 只停留在实验室阶段, 可用于现场快速检测的试剂盒寥寥无几[4]。对基层实验动物中心开展弓形虫病检测带来诸多障碍。本研究拟建立一种方便、敏感的弓形虫快速检测方法, 并制备试纸条, 以弥补基层检验设备的缺乏和技术力量的不足。

1 材料

S-300凝胶, HAu Cl4, 牛血清白蛋白, 硝酸纤维素膜, 滤膜, 滤器, 吸水垫, 不干胶, PVC板等购自上海生化试剂公司;弓形虫阳性、阴性血清, 由上海兽医研究所提供。

2 方法

2.1 玻璃器皿的处理

所有玻璃器皿先用洗洁剂浸泡72 h, 再以自来水冲净, 而后依次用洗洁精、蒸馏水、双蒸水洗3次, 烘干备用。

2.2 弓形虫排泄分泌抗原的制备

选取健康ICR小鼠20只, 随机分成2组, 每组10只, 常规方法饲养。第1组人工注射含弓形虫RH株的悬液0.5 m L/只, 5 d后全部扑杀, 无菌收集腹腔液。

取人工感染弓形虫RH株的小鼠腹腔液, 1:20稀释, 经腹腔接种健康ICR小鼠;第4 d收集腹腔液, 以PBS洗涤离心后, 上清液备用[5]。

2.3 抗弓形虫抗体的制备

选取健康羊5头 (2年内未发生过弓形虫病) , 在第1、7、21 d分别以弓形虫抗原 (1 m L/头) 进行免疫。在测得抗体效价1:64以上后, 开始采集羊血清, 将抗体进行粗提, 并经层析纯化, 低温保存备用。

2.4 胶体金-弓形虫排泄分泌抗原结合物的制备

先将0.1 g/L HAu Cl4200 m L煮沸状态下与10 g/L的柠檬酸三钠1.5 m L结合, 继续煮沸5 min至酒红色, 冷却。而后用0.2 mol/L K2CO3调整金溶胶p H至8.9, 制成金溶胶。加入4 mg弓形虫排泄分泌抗原, 混匀后, 搅拌20 min, 4℃静置30 min, 加入牛血清血蛋白240 mg, 继续搅拌5 min, 4℃2 000 r/min离心10 min, 弃去沉淀, 10 000 r/min离心60 min, 将沉淀物按8:100复溶于金稀释液, 形成弓形虫排泄分泌抗原结合物, 4℃冷藏[6]。

2.5 试纸条组装

试纸条由样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸和不干胶保护层4部分组成。金标结合垫浸着弓形虫排泄分泌抗原, 37℃烘干;硝酸纤维素膜分别用弓形虫排泄分泌抗原 (0.01 mol/L PBS液稀释) 和抗弓形虫抗体包被成检测线和质控线;干燥后用含犊牛血清 (10 g/L) 的PBS液封闭 (37℃, 30 min) 。再以0.01 mol/L PBS漂洗, 干燥后依次粘在PVC板上;用斩切机切成0.3 cm×8.0 cm的试制条。T带 (黄色) 为检测区, C带 (红色) 为质控区。

2.6 操作步骤及结果判定

检测时, 从加样孔滴加2~3滴样品液, 2~5 min内观察结果, 10 min后观察结果无效。判定标准:检测区 (T带) 、质控区 (C带) 均出现红色为阳性;仅质控区 (C带) 出现红色为阴性;T、C带均未出现红色则试纸无效。

3 试纸条性能检测

3.1 试纸条灵敏性试验

随机取健康兔8只, 人工感染弓形虫RH速殖子, 每天耳静脉采血, 分离血清, 作1:64稀释后, 用同批次试纸做灵敏性、特异性检测, 同时用ELISA法检测作为对照, 结果见表1。结果提示, 试纸条第3 d就已经测出多数样品抗体的存在, 而ELISA法到第3 d仅能测出1份样品阳性。试纸条灵敏性明显优于ELISA法。

3.2 临床应用

用同批次试纸条检测来自金华市实验动物中心的50份小鼠血清、50份兔血清、弓形虫标准阳性血清和阴性血清各10份, 以ELISA法做平行对照, 结果见表2。临床试验结果提示, 试纸条对实验动物弓形虫阳性感染的检出率与ELISA基本一致, 甚至略优于ELISA法。

4 讨论与小结

1) 研究证实, 弓形虫代谢分泌抗原所含微线体蛋白、棒状蛋白、致密颗粒蛋白均能刺激小鼠和羊机体产生相同虫株的高水平抗体血清, 因此本研究选择羊作为抗体表达的动物载体[7]。

2) 研究中试纸的原理是, 样品接触胶体金包被的单抗时, 形成抗原抗体复合物。当复合物流经T带时, 固定在膜上的特异性抗体捕获该复合物并逐渐凝集成一条肉眼可见的红线, 未结合的胶体金抗体被质控区 (C带) 的二抗捕获, 并形成红线。

3) 免疫层析技术是新近发展起来的体外诊断技术。具有简单快速、操作简便、无需特殊设备等优点[8]。弓形虫快速检测方法的建立, 对实验动物屏障系统的完善和生物安全控制有着积极的意义。本研究中试纸条的性能稳定, 与传统方法符合率高, 这对临床应用而言有着重要的作用。

注:“+”代表阳性;“-”代表阴性。

参考文献

[1]于恩庶.弓形虫病学[M].福州:福建科学技术出版社, 1992:125-127.

[2]郑挺, 崔君北, 谢丽群, 等.广西1990-1995年弓形虫病的病原学和血清学研究[J].寄生虫与医学昆虫学报, 1998, 5 (3) :129-135.

[3]刘佩林, 吴增强, 武苏平.弓形虫速殖子纯化方法的比较[J].天津医科大学学报, 1996, 2 (1) :59-60.

[4]王艳华, 李学瑞, 张德林, 等.弓形虫病诊断方法研究进展[J].中国兽医寄生虫病, 2008 (1) :29-32.