薄层色谱分析技术综述

薄层色谱分析技术综述（通用9篇）

篇1：薄层色谱分析技术综述

薄层色谱分析技术综述

摘要薄层色谱法，是指将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比，用以进行药物的鉴别、杂质检查或含量测定的方法[1]。本文介绍了薄层层析法的原理，操作方法，主要应用及其在各个学科中的应用，并指出了此方法的局限性、须待解决的问题。

关键词：薄层色谱法；原理；操作方法；主要应用；局限性

薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属于固－液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，将样品点成一条线，则可分离多达500mg的样品。因此，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，在进行化学反应时，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。

薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色。

一、原理

色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同，或和其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组份分开。薄层色谱是一种微量、快速和简便的色谱方法。由于各种化合物的极性不同，吸附能力不相同，在展开剂上移动，进行不同程度的解析，根据原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离，计算比移值（Rf）：

化合物的吸附能力与它们的极性成正比，具有较大极性的化合物吸附较强，因此Rf值较小。在给定的条件下（吸附剂、展开剂、板层厚度等），化合物移

动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的，即Rf值是化合物的物理常数，其大小只与化合物本身的结构有关，因此可以根据Rf值鉴别化合物[2]。

薄层色谱可适用小量样品（几到几十微克甚至0.01μg）的分离：也可用于多达500mg样品的分离，是近代有机化学中用于定性，定量的一种重要手段。特别适用于那些挥发性小的化合物，以及在高温下易发生化学变化而不能用气相色谱分析的物质。

二、实验基本流程

铺板点样展开显色 计算Rf值

铺板：取7.5x2.5cm左右的载玻片5片，洗净晾干。在50mL烧杯中，放置3g硅胶G，逐渐加入0.5﹪羧甲基纤维素钠水溶液(CMC)8mL，调成均匀的糊状，涂于上述洁净的载玻片上，用手将带浆的玻片在水平的桌面上做上下轻微的颠动，制成薄厚均匀、表面光洁平整的薄层板，涂好的硅胶G的薄层板置于水平的玻璃板上，在室温放置0.5h后，放入烘箱中，缓慢升温至110℃，恒温0.5h后取出，稍冷后置于干燥器中备用。

点样：点样用的毛细管为内径lmm的管口平整的毛细管，将样品溶于低沸点的溶剂（乙醚、丙酮、乙醇、四氢呋喃等）配成溶液。点样前，可先用铅笔在小板上距一端5mm处轻轻划一横线，作为起始线，然后用毛细管吸取样品在起始线上小心点样，如需重复点样，则应待前次点样的溶剂挥发后方可重点。若在同一块板上点几个样，样品点间距离为5mm以上。

展开：展开剂的选择主要根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来考虑。薄层的展开在密闭的容器中进行。先将选择的展开剂放入广口瓶中，使广口瓶内空气饱和5－10min，再将点好试样的薄层板放入广口瓶中进行展开，点样的位置必须在展开剂液面之上，当展开剂上升到薄层的前沿（离前端5~10mm）或多组分已明显分开时，取出薄层板放平晾干，用铅笔划溶剂前沿的位置后，即可显色。

显色：如果化合物本身有颜色，就可直接观察它的斑点。如果本身无色，可先在紫外灯光下观察有无荧光斑点（有苯环的物质都有），用铅笔在薄层板上划出斑点的位置；对于在紫外灯光下不显色的，可放在含少量碘蒸气的容器中显色来检查色点（因为许多化合物都能和碘成黄棕色斑点），显色后，立即用铅笔标出斑点的位置。

计算Rf值：准确地找出原点，溶剂前沿以及样品展开后斑点的中心，分别测量溶剂前沿和样点在薄层板上移动的距离，求出其Rf值。

三、主要应用

（1）定性鉴别 化学上经典的定性鉴别，例如经典的有机定性分析或经典的毒物分析，是利用各种化合物的溶解度不同和所含功能基的不同，用溶剂提取或用试剂处理，把它们分组或分为单一组分，然后作试管反应或点滴反应(颜色反应)，或根据它们衍生物的理化性质进行定性鉴别。这种方法的缺点是样品用量叫大，分离手续麻烦,分析时间较长(几小时或几时个小时)，并可能有杂质干扰。现采用合适的展开剂和现色剂在薄层上作为分离和鉴别，根据样品中组分的值和现色情况，同时用标准作对照，一般即能却证为某一化合物。用薄层色谱法定性，样品用量小，分离方便，分离时间短(几分钟或几时分钟)，检出灵敏度高。例如，再毒物分析中检验是否巴比妥安眠药中毒时，取胃内容物或尿样品，先用盐酸酸

化后，用乙醚提取，乙醚提取液脱水，过滤蒸干，溶于无水乙醇中，点在硅胶版上用氯仿、无水乙醇（36：1）展开，用硫酸汞二苯偶碳酰肼试剂显色，并用标准品对照，意见出巴比妥，苯巴比妥，戊巴比妥和异巴比妥。鉴别速度快（1小时），这对于抢救中毒患者和及时为医生提供治疗方案极为重要。

（2）药品的质量控制和杂质检查 药品的纯度，通常用熔点，吸光值等物理常数作为鉴定的指标。但是薄层检查也是药品质量控制和杂质检查的一种有效方法，有时甚至比一般方法更有效。一些国家的药典和药品规范已经采用。方法是把一定量得样品溶液(例如，相当于样品)电在薄层上，用展开剂展开并显色，同时用纯品作对照,如果样品只显示出纯品值一致的一个斑点，则表示含有杂质。进一步可用薄层作杂质的限量检查。例如镏体药物的合成和精致工作中，常含结构类似的杂质,即按上述方法控制其质量和杂质的限量。

（3）化学反应进程的控制 反应副产物的检出以及中间体的分析，在化学反应进行到一定时间或反应终了时，把反应液取出作薄层分析，可以知道还剩下多少原料药未起作用。方法是把反应液或其有机溶剂提取液点在薄层上，同时点原料作参比对照，看薄层上是否出现原料药斑点。还可以用薄层检查反应副产物。如果化学反应分步进行，则每一步反应的中间体的质量和产率也都可用薄层进行定性和定量。例如在合成强力霉素的过程中，需要中间地甲烯土霉素氢化物为脱氧土霉素。氢化反应是否完全，可用薄层检查，如果反应完全，则反应釜中几乎没有或只有极少量的甲烯土霉素存在，薄层板上只显示出一个脱氧土霉素，如果薄层板上有上下二个明显的斑点，表示反应还没有完全，尚需继续还原,直到只显示出脱氧土霉素的一个斑点为止才能出料。

（4）柱色普法分离条件的探索 柱色普法的实验条件，例如选用什么吸附剂和洗脱剂较好各个组分按什么顺序从柱中洗脱出来，每一分洗脱液中是含单一组分或就含几种没有分开的组分等，都可以在薄层上进行探索和检验。薄层上所有的展开剂虽不完全照搬柱色普法上，但仍有参考价值。

四、薄层色谱法在各个学科中的应用

（1）食品和营养 食品中的营养成分是蛋白质、氨基酸、糖类、油和脂肪、维生素、食用色素等。与食品和营养有害的物质则有残留农药、致癌的曲黄霉素等。这些成分都可用薄层色谱法定性和定量。蛋白质和多肽水解为氨基酸，对不同来源的动物性和植物性蛋白水解后产生不同的氨基酸进行定性和定量，有助于解决蛋白质的结构和食品营养问题。二十多种氨基酸用硅胶G薄层板双向展开，一次即能分开，然后定性和定量，方法快速而简便。多糖和寡糖可水解为单糖，可用薄层色谱法进行单糖和双糖的定性和定量。文献上有每一个糖的Rf值和相应的展开剂。油和脂肪解为脂肪酸，脂肪酸的种类和结构中的不饱和键数，与营养和卫生有关，关于油和脂肪的薄层（硅胶、硅藻土、纤维素)分析，文献和综述很多。脂溶性和水溶性维生素在薄层上可方便地定性和定量，例如脂溶性维生素A,D,E,K及B2,B6,B12,酶酸，泛酸，叶酸，C,促生素在硅胶G薄层上可用苯：甲醇：丙酮：冰醋酸（7:2:0.5:0.5）分开。用硅胶G薄层和丙酮：氯仿（1:1)以及激发波长365nm和波长450nm,可用荧光法测定ng量的曲黄素B1,B2,G1,G2,方法灵敏快速。

（2）药物和药物代谢 薄层色谱法在合成药物和天然药物中的应用很广。有些文献和内容偏重于合成药物、化合物及其代谢产物，有文献为在中草药分析中的应用。每一类药物，例如磺胺、巴比妥、苯骈噻嗪、甾体激素、抗菌素、生

物碱、强心甙、黄酮、挥发油和萜等，都包括几种或十几种化学结构和性质非常相似的化合物，可以在上述文献中找出一、二种全盘的展开剂，一次即能把每一类的多种化合物很好地分开。药物代谢产物的样品一般先经预处理后用薄层分析，应用也很广，但有时因含量甚微，不用采用气相和高效液相色谱法灵敏。

（3）化学和化工 化工和化学方面的有机原料和产品都可用薄层色谱法分析。例如含各种功能基的有机物，石油产品，塑料单体，橡胶裂解产物，油漆原料，合成洗涤剂等，内容非常广泛。

（4）医学和临床 薄层色谱法的应用还渗透到医学和临床中去，例如它是一种快速的诊断方法可用于妊娠的早期诊断。方法是基于在孕妇的尿中能检出比未媳妇妇女的尿中含更多的孕二醇，把两者的尿提取后点在薄层上比较，即可作出判断。这一方法可不用动物而在2~3小时内化验出结果。

（5）毒物分析和法医化学 如前所述，经典的毒物分析有许多缺点，目前毒物分析和法医化学采用薄层色谱法等新的手段，对麻醉药、巴比妥、印度大麻、鸦片生物碱等均可分析。

（6）农药 十多种有机磷农药和六种有机氯农药都可在硅胶G薄层上分开并测定含量，可用于农药分析及其残留量分析。

综上所述，薄层层析有许多优点：它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点，同时展开速率快，一般仅需15～20分钟；混合物易分离，分辨力一般比以往的纸层析高10～100倍，它既适用于只有0．01μg的样品分离，又能分离大于500mg的样品作制备用，而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。

参考文献:

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典.化学工业出版社, 2000二部: 附录31.[2] 何丽一.平面色谱方法及应用[M].北京:化学工业出版社, 2000.108-112.

篇2：薄层色谱分析技术综述

一、试液的配制

1、重现性 取相同的供试品、对照药材溶液，由两名检验员同时做，做薄层鉴别实验，由色谱图实验结果，验证其重现性。

2、专属性 取相同的供试品、对照药材溶液，利用正己烷试剂作为空白溶液，做薄层鉴别实验，由薄层色谱图结果，验证其专属性。

3、耐用性 按1、2方法下做薄层色谱实验，分别点样于青岛海洋化工厂分厂、烟台大学生物科技与工程研究所制备的硅胶G薄层板，由薄层色谱图结果，验证其耐用性。

白附子薄层鉴别方法验证方案

一、试液的配制

1、重现性 取相同的供试品、对照药材溶液、对照品溶液，由两名检验员同时做，做薄层鉴别实验，由色谱图实验结果，验证其重现性。

2、专属性 取相同的供试品、对照药材溶液、对照品溶液，利用丙酮试剂作为空白溶液，做薄层鉴别实验，由薄层色谱图结果，验证其专属性。

3、耐用性 按1、2方法下做薄层色谱实验，分别点样于青岛海洋化工厂分厂、烟台大学生物科技与工程研究所制备的硅胶G薄层板，由薄层色谱图结果，验证其耐用性。

五味子薄层鉴别方法验证方案

一、试液的配制

1、重现性 取相同的供试品、对照药材溶液、对照品溶液，由两名检验员同时做，做薄层鉴别实验，由色谱图实验结果，验证其重现性。

2、专属性 取相同的供试品、对照药材溶液、对照品溶液，利用三氯甲烷试剂作为空白溶液，做薄层鉴别实验，由薄层色谱图结果，验证其专属性。

3、耐用性 按1、2方法下做薄层色谱实验，分别点样于青岛海洋化工厂分厂、烟台大学生物科技与工程研究所制备的硅胶G薄层板，由薄层色谱图结果，验证其耐用性。

HPLC法测五味子中五味子醇甲方法验证方案

一、标准曲线的制定 利用已知纯度的对照品溶液，设计5个不同浓度，每个浓度制定一份供试品溶液，进行测定，以峰面积作为Y轴，浓度为X轴，并进行线性回归，得出回归方程，得出相关系数r。

二、方法的验证

1、准确度的测定 用已知浓度的对照品溶液，利用加样回收率实验的方法，制备不同浓度的溶液6份，计算回收率的大小，并计算出RSD的大小。

2、精密度的测定 取一批原药材，分别制成6份溶液，测定峰面积，计算平均值，并计算出RSD大小。

3、专属性 采用纯甲醇试剂作为空白样品，连续进样三针，有色谱图结果，考察是否有干扰。

篇3：薄层色谱分析技术综述

1 高效薄层色谱法及其应用

高效薄层色谱 (HPTLC) 采用更细、更均匀的改性硅胶和纤维素为固定相, 对吸附剂进行疏水和亲水改性, 可以实现正相和反相薄层色谱分离, 提高了色谱的选择性[1]。HPLTC采用预制薄层板, 用喷雾法制备, 涂层均匀, 重现性好, 吸附剂颗粒细小, 分离效果好, 展距短, 分离迅速, 检出效率高[2]。

用HPLTC不仅可以定性还可用于定量分析。常用于分析测定生物碱、黄酮类物质。伍庆用HPLTC法建立了快速测定知母药材中菝葜皂苷元的方法[3];米莉莉等用高效薄层色谱扫描法对天然虫草与人工虫草菌丝体中核苷类有效成分进行含量测定, 同时建立了薄层色谱指纹图谱[4];梁小洁等用高效薄层色谱法建立仙方玉容膏中黄芪甲苷含量的测定方法[5];张建生等应用高效硅胶板鉴别麻黄中生物碱类化合物, 成功分离了6种生物碱[6]。

这些实验结果显示用HPLTC法测定中药成分, 稳定性和重现性好, 分离效率高, 可以作为中药质量控制和含量测定的依据和分析方法。

2 假相薄层色谱法及其应用

假相TLC所使用的流动相不是有机溶剂, 而是低浓度的表面活性剂及环糊精的水溶液, 固定剂一般为聚酰胺薄膜。假相TLC能使一些不溶于水的物质及芳烃异构体得到较好的分离, 还可用于药物中微量杂质的检查及体内药物分析[7]。林辉概等分别以不同浓度的表面活性剂SDS、SDBS, Trion X-100, OP, Tween-80, TPC, CTAB, CPC, Zeph的胶束溶液和Trion X-100与SDS、SDBS TPC, CTAB等混合胶束溶液为展开剂, 研究了槲皮素、桑色素和芦丁的胶束薄层色谱行为, 拟出了以4%Zeph-乙酰丙酮-水 (5∶1.5∶5) 溶液为流动相, 聚酰胺为固定剂的3种黄酮的分离体系, 并对槐花中的黄酮进行分离和鉴定, 得到了良好的效果[8]。

3 反相薄层色谱法及其应用

反相薄层色谱 (RP-TLC) 运用经烷基化修饰的硅胶为固定相, 固定相几乎都是被化学键和在载体物质上, 而不是机械覆盖在它的上面, 制备较为复杂, 但其斑点扩散小, 分离效率高。化学键合相硅胶的硅烷化程度, 为分离提供选择性, 可根据样品性质选择适当的固定材料, 实现最佳的分离效果。RP-TLC的展开剂较为简单, 一般为水、甲醇、乙腈等溶剂, 有时还需要2种以上溶剂的混合展开剂[9]。张子忠等以甲基键合硅胶GF254板, 甲醇-水 (7∶3) 为展开剂, 对北沙参的成分进行测定, 测出了8个主要谱峰, 并对欧前胡素成分进行了定性[10]。Ohno T等采用RPTLC对人参、红参中人参皂苷Rg1, 龙胆、日本龙胆中龙胆苦苷, 葛根中葛根素, 栀子中栀子苷, 五味子中五味子素进行了鉴定[11]。兰亦青等采用RP-C18F254高效反相薄层板, 以水作为溶剂的调节剂, 并在水中加入0.1%TBABr作为离子对试剂, 与四氢呋喃组成简单的展开系统, 同时将白芍中丹皮酚、苯甲酸和芍药苷3种组分有效分离[12]。

4 微乳薄层色谱法的应用

经典薄层色谱的展开剂为有机溶剂, 近年以微乳为展开剂的研究有许多报道, 微乳 (microemulsion, ME) 是由乳化剂、助乳化剂、油相和水相组成的光学上各向同性, 热力学稳定的液-液分散体, 只要组分的比例合适则可自发形成均匀透明或微呈乳光的体系并保持稳定。以微乳为流动相的色谱为微乳色谱[13]。崔淑芬等采用0.23 mmol/L SDS+16%正丁醇+11%甲醇+2.4%正庚烷制成微乳, 利用微乳薄层色谱对3种甘草药材:乌拉尔甘草、胀果甘草和光果甘草进行了鉴别[14];康纯等利用微乳薄层色谱对黄酮类成分进行了分离鉴定, 以含水量不同, 具有油包水 (W/O) 型、双连续型 (W/O-O/W) 及水包油 (O/W) 型的6种SDS-正丁醇-正庚烷-水微乳液为流动相, 研究了芦丁、槲皮素和黄芩苷的微乳薄层色谱行为, 并选择了含水量75% (O/W型) 微乳液-甲酸 (9.5∶0.5) 为展开剂, 聚酰胺薄膜为固定相, 对槐米、黄芩等7种中药材及中药饮片, 复方芦丁片、双黄连口服液等7种中成药进行了分离和鉴定, 得到了理想的效果[15]。

5 薄层色谱新技术的应用前景

篇4：薄层色谱分析技术综述

一、氨基酸薄层色谱茚三酮显色的改良

薄层色谱是将固相支持物(也叫吸附剂)均匀铺在玻璃板上使之成为薄层,将待分析的样品点到薄层板的一端,然后将点样端浸入适宜的扩剂中,在密闭的层析缸中展层。由于各种氨基酸的理化性质(分子极性、分子大小和形状、分子亲和力等)不同,其在吸附剂表面的吸附能力各异。当展开剂在薄层板的毛细管中移动时,点在薄板上样品的组分就不同程度地随着展开剂移动,使不同的氨基酸得以分离。

由于吸附剂在喷雾显色时,常见层析表面破坏,造成分析困难,经过多次实验发现,若不采用喷雾法,而直接将展开剂与喷雾剂同时使用,不但便于操作,氨基酸斑点清晰,边缘整齐,薄层面光滑完整,而且比移值也保持不变。

1.仪器

硅胶G薄层板、毛细管、层析缸、电吹风、喷雾器、烘箱。

2.试剂

硅胶G;黏合剂:0.5%的柠檬酸与1%的羧甲基纤维素钠混合,煮沸至无气泡,冷却静置分层后用;氨基酸溶液:0.5%的脯氨酸、缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸以及混合溶液;展开剂:V(正丁醇):V(冰乙酸):V(水)=4:1:2;展开显色剂:V(展开剂):V(0.1%茚三酮无水丙酮溶液)=10:1。

3.操作

(1)薄层板的制备。①调浆:称取硅胶14g,加黏合剂25 mL,置于研钵中充分研磨成均匀的膏状;②涂布:取两块洁净的干燥玻璃板(20×20)置于涂布器上均匀涂层。(请询问作者20×20的单位是否是20 cm×20 cm,没有单位的数值没有意义)③干燥:将玻璃板水平放置,室温下自然晾干。④活化:晾干的薄层板置于烘箱内,105℃活化30 min,切断电源,待玻璃板面温度下降至不烫手时取出。

(2)点样。活化后的硅胶板室温冷却后,在距底边2 cm水平线上均匀确定5个点。用毛细管分别吸取氨基酸溶液,轻轻接触薄层表面,每次加样后原点扩散直径不超过3 mm,干后再点一次。

(3)展层。在层析缸中加入展开显色剂1 cm厚,加盖平衡0.5 h。将薄层板点样端浸入展开显色剂,展开显色剂液面应低于点样线。盖好层析缸盖,上行展层。当展层显色剂前沿离薄板顶端2 cm时,停止展层,取出薄板,用铅笔描出溶剂前沿界线,用热风吹干,即可出现氨基酸显色斑点。

二、改善氨基酸薄层色谱的拖尾

拖尾现象是指展层,显色后在层析分配图上,所看到的某一种氨基酸的分子位移,不像标准图谱那样完整地显示在某一位置上,而是前端粗圆而逐渐细小下来,宛如拖着一个尾巴,其图所呈颜色也是由浓渐淡。

1.拖尾现象原因分析

氨基酸薄层色谱拖尾的出现,原认为是对影响Rf的主要因素[如物质结构、极性、层析溶剂、溶剂和样品的pH、温度、薄层的质地是否均匀、薄厚是否适当、硅胶的松紧度是否适中、展层的方式(上行、下行)等]掌握不够所致。然而多次实验证明,无论操作如何严格都仍不可避免地出现拖尾现象。经分析,样品的处理是为纯化,实现层析分配某氨基酸的清晰显色图像;展层使样品达到一个适当的位移,便于在显色后从图像上区分不同样品的氨基酸;显色剂含水量极低,不会影响洋品的斑点扩散,那么问题就集中在点样这个操作程序上了。

2.拖尾改善方法

(1)点样位置。为了对照实验结果,而分别配制的几种氨基酸的溶液,用微量点样管或毛细管,点在以硅胶为惰性支持物的层析板上设计好的多点位置中去。

(2)风干样品。点样后要自然风干,或冷风吹干。因为一旦控制不好温,势必要使样品破坏,样品点太干燥,样品物的分子牢固吸附在层析板上。所以在展层过程中,样品点的每个物质分子不能在层析板上同时起步,而是形成了有先有后,鱼贯而上行或下行的状况,致使在显色后,实验结果的图像上,观察到的不是一个完整的斑点,而是一个拖着尾巴的斑点。这就是上述所说的拖尾现象。

篇5：薄层色谱分析技术综述

薄层色谱法，系将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图对比，并可用薄层扫描仪进行扫描，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。

1.仪器与材料（1） 玻板  除另有规定外，用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。

（2） 吸附剂或载体  最常用的有硅胶g、硅胶gf<[254]>、硅胶h、硅胶hf<[254]>，其次有硅藻土、硅藻土g、氧化铝、氧化铝g、微晶纤维素、微晶纤维素f<[254]>等。其颗粒大小一般要求直径为10～40μm.薄层涂布，除另有规定外，一般可分无黏合剂和含黏合剂两种；前者系将吸附剂或载体用水适量调成糊状，均匀涂布于玻璃板上，后者系在吸附剂或载体中加入一定量的黏合剂，一般常用10％～15％煅石膏（caso4.2h2o在140℃加热4小时），混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维素钠水溶液（0.2％～0.5％）适量调成糊状，均匀涂布于玻璃板上。也有含一定改性剂如荧光剂或缓冲液等的薄层。

（3） 涂布器  应能使吸附剂或载体在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。

（4） 点样器  一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。

（5） 展开室  可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或有双槽，盖子须密闭。

2.操作方法（1） 薄层板制备  除另有规定外，将吸附剂1份和水3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.25～0.5mm），取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用。或用商品预制板。

（2） 点样  除另有规定外，用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。

点样时必须注意勿损伤薄层表面。

（3） 展开  将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，密封，待展开至规定距离，除另有规定外，一般为8～15cm，取出薄层板，晾干，按正文项下的规定检测。

展开缸如需预先用展开剂预平衡，可在缸中加入适量的展开剂，必要时并在壁上贴二条与缸一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，盖严，使展开缸平衡或按正文规定操作。

（4） 如需用薄层扫描仪对色谱进行扫描供鉴别、检查或含量测定，则可用薄层扫描法。

3.薄层扫描法系指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中有吸收紫外光或可见光的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、杂质检查或含量测定。

除另有规定外，薄层扫描方法可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明，结合具体情况，选择反射方式，采用吸收法，或荧光法，用双波长或单波长扫描。测定方法有内标法及外标法。由于影响薄层扫描结果的因素很多，故薄层扫描定量测定应在保证供试品斑点的量在校正曲线的线性范围内的情况下，与对照品同板点样，展开，扫描，积分和计算。

篇6：薄层色谱分析技术综述

单糖组分的分离测定方法主要有气相色谱法 (GC) 、高效液相色谱 (HPLC) 、薄层色谱法 (TLC) 等。气相色谱法测定糖类时, 遇到的主要问题是糖本身挥发性不好, 因此必须在分析之前先转化成对热较稳定、易挥发的衍生物[2,3]。并且, 由于糖的异构化, 在某些衍生物的制备过程中, 会产异构体, 干扰单糖成分的分离。高效液相色谱法具有分离速度快、分离效果好、不破坏样品、重现性好等优点, 但色谱柱容易被污染且成本昂贵。与气相色谱法和高效液相色谱法相比, 薄层色谱法具有样品制备简单, 能够同时进行多个样品的分析, 所需设备简单易得, 操作简便可行等优点。本实验采用薄层色谱法分析灵芝多糖中的单糖组成, 为进一步的质量分析和控制提供了依据。

1 药品与试剂

微晶纤维素薄层板 (浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂) , 赤芝药材来源于安徽省。灵芝多糖精制品由南京肿瘤医院自制。葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸等试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的配制

分别精密称取样品10 mg于洁净的安瓿中, 加2 mol/L三氟乙酸2.0 ml, 封管, 于沸水浴中水解10 h, 将水解液蒸干, 用甲醇洗4~5次, 蒸干甲醇, 加0.5ml水溶解, 离心取上清液备用。

2.2 单糖溶液和标准混合糖溶液的制备

精密称取葡萄糖、鼠李糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖醛酸各10 mg, 分别溶于1.0ml水中, 再从中各量取0.2 ml溶液混合均匀作为混合糖溶液。

2.3展开剂的选择

分别精密量取标准混合糖溶液2μl, 在微晶纤维素薄层板距薄层板下端2 cm处点样, 点样斑点直径应不大于3 mm。通过选择不同展开剂进行展开, 展开完毕后, 取出晾干, 均匀喷洒苯胺-邻苯二甲酸溶液 (取邻苯二甲酸1.6 g溶于水饱和过的正丁醇100 ml, 加入苯胺0.9 ml, 摇匀即得) , 于110℃放置10 min显色。比较显色结果, 从而选定展开剂对样品进行分析, 结果见表1。

从表1可知, 采用正丁醇:乙酸乙酯:吡啶:水 (6:1:5:4) 展开时, 分离效果良好。因此选用正丁醇:乙酸乙酯:吡啶:水 (6:1:5:4) 为展开剂对样品进行分析。

2.4 鉴别反应

分别精密量取各单糖溶液和标准混合糖溶液各2μl, 点样于微晶纤维素薄层板上, 作为对照。另分别精密量取供试品溶液和标准混合糖溶液各2μl, 点样于另一微晶纤维素薄层板上。分别以正丁醇:乙酸乙酯:吡啶:水 (6:1:5:4) 为展开剂, 展开至溶剂前沿距离顶端2 cm左右后取出晾干, 用相同的展开剂进行二次展开, 取出, 吹干, 喷以苯胺-邻苯二甲酸溶液, 立即吹干, 在110℃加热至斑点显色清晰, 结果见下图。

结果表明, 混合糖溶液中的各个单糖所显斑点清晰, 分离完全。样品具有明显的葡萄糖斑点和较淡半乳糖斑点, 由此可以推测本品是由葡萄糖和半乳糖组成的。

3 讨论

3.1 展开系统的优选

为了获得最佳的展开效果, 本实验通过选取不同的展开剂, 优化得到最优的展开系统为以正丁醇:乙酸乙酯:吡啶:水 (6:1:5:4) 为展开剂, 结果显示各斑点分离效果好, 显色清晰, 说明该展开系统适用于灵芝多糖中的单糖组成分析。

3.2 点样量的选择

分别量取供试品溶液2μl、5μl、10μl、15μl点样于同一薄层板上, 展开完毕后显色, 从结果中可以看出, 点样量为2μl时供试品色谱可以清晰看到葡萄糖斑点和较淡半乳糖斑点。点样量达到5μl以上, 供试品色谱中的葡萄糖斑点拖尾与半乳糖斑点连成一块, 使斑点显色不清晰。因此, 点样量选择2μl较为适宜。

3.3 展开次数的确定

通过实验发现, 采用优选的展开剂展开一次时, 结果显示葡萄糖和半乳糖斑点分离效果不好, 而采用相同的展开剂进行二次展开后, 结果显示各斑点分离完全, 显色清晰, 因此采用二次展开法进行实验。

摘要：目的 测定灵芝多糖中的单糖组成。方法 采用微晶纤维素薄层板, 展开剂系统为正丁醇:乙酸乙酯:吡啶:水 (6:1:5:4) 下二次展开, 苯胺-邻苯二甲酸为显色剂。结果 在该展开剂系统下, 实现了各单糖组分的分离, 灵芝多糖主要由葡萄糖、半乳糖组成。结论 方法简单易行, 重复性好, 该方法能有效分析灵芝多糖中的单糖组成。

关键词：灵芝多糖,单糖组成,薄层色谱

参考文献

[1]戴则林, 昌武.灵芝多糖的生物活性研究进展.安徽中医学院学报, 2005, 10 (5) :60-61.

[2]石瑞.单糖的分析方法及进展.四川食品与发酵, 1997, 1:29-32.

篇7：鲜汁饮薄层色谱鉴别

【关键词】鲜汁饮；薄层色谱；地黄；蒲公英

Study on Quality Standard for Xianzhiyin Mexture

Wang MengliangZhao Jiali

【Abstract】Objective:To study the methods of identification of Xianzhiyin Mexture.Method: Using TLC to identify Rehmanniae ,Taraxaci. Results:The TLC identificationo of Rehmanniae ,Taraxaci was with good results ,high resolution and without feminine sample interferation. Conclusion: This method is rapid,simple ,and with good reproducibility .

【Key Words】 Xianzhiyin Mexture; TLC; Rehmanniae;Taraxaci

【中图分类号】R286.0【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2011）04-0110-01

鲜汁饮来源于我省名老中医之一，原安阳中医院院长，河南省中医学院特邀研究员孙一民主任医师的验方，属医院制剂。由鲜地黄等6味中药组成，均选用新鲜植物药，药鲜质纯，有效成份活性强，易吸收。具有清热解毒，养阴生津，凉血止血之功效。用于：①阴虚内热型血液病所致鼻衄、齿衄、咳血、吐血、尿血、便血、紫癜。②肿瘤放疗、化疗后所致阴虚内热者。③目赤肿痛、口舌生疮、口渴咽疼、尿赤便秘。④外感发热与内伤发热等症状。为了有效控制质量，确保用药安全有效，本试验增加了地黄、蒲公英的薄层鉴别。结果表明，该方法简便快捷，专属性强，结果满意。

1实验部分

1.1仪器、试剂与样品

KQ3200B型超声波清洗器TRANSILLUMINATOR2020D紫外透射仪

试剂均为分析纯

地黄对照药材、蒲公英对照药材（中国药品生物制品检定所，批号121180-200402、121195-200401）；样品由河南省卫辉市中医血液病医院提供

1.2薄层色谱鉴别

1.2.1地黄的TLC鉴别

供试品溶液的制备：取本品20ml微沸蒸干，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

地黄对照药材溶液的制备：取地黄对照药材1g，加甲醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液挥干，加甲醇5ml使溶解，作为对照药材溶液。

鲜地黄汁的制备：取地黄鲜汁10ml，微沸蒸干，加甲醇20ml使溶解，滤过即可。

阴性样品溶液的制备：按处方比例制备缺地黄的阴性样品10ml，同法制备阴性样品溶液。

照薄层色谱法［1］试验，吸取上述四种溶液各5ul。分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15︰40︰22︰10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点，阴性样品无干扰，见图1。

1、供试品 （批号101102）；2、供试品（批号101128）

3、供试品（批号101129）4、鲜地黄汁（自备）5、阴性样品（院方提供）

6、地黄对照药材

1.2.2蒲公英的TLC鉴别

供试品溶液的制备：取本品25ml, 微沸蒸干，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解作为供试品溶液。

蒲公英对照药材溶液的制备：取蒲公英对照药材1g，加水100ml煮沸20分钟，倾取上清液，微沸蒸干，同法制成对照药材溶液。

阴性样品溶液的制备：按处方比例制备缺蒲公英的阴性样品，同法制备阴性样品溶液。

照薄层色谱法［1］试验，吸取上述三种溶液各5ul。分别点于同一：以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5︰3︰1︰1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点，阴性样品无干扰，见图2。

2讨论

2.1地黄中的代表性成分为梓醇、地黄素、甘露醇、多种糖类与氨基酸、维生素A样物质等。以地黄药材做对照，对处方中的地黄进行鉴别，效果良好。

2.2地黄的薄层色谱鉴别中，曾选用展开剂：用氯仿-甲醇-水（14︰6︰1）展开，样品色谱中与对照药材色谱相应位置上的斑点相一致，但斑点靠近前沿，故加入醋酸乙酯调节展开剂的极性，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水（15︰40︰22︰10）10℃以下放置的下层溶液展开后，日光下观察即可显示清晰的黄色斑点，且Rf值适中，效果良好。

2.3蒲公英的薄层色谱鉴别中，曾选用展开剂：氯仿。显色剂：10%硫酸乙醇液，105℃加热，紫外光（365nm）下观察，效果不佳。故又改为本文的条件，效果良好。

参考文献

［1］中国药典2010年版一部附录Ⅵ B，P34～35。

篇8：白屑风酊薄层色谱鉴别

关键词：白屑风酊,薄层色谱,质量标准

白屑风酊由蛇床子、苦参、薄荷脑、侧柏叶等中药研制而成,系江苏省中医院研制的医院制剂,方中蛇床子、苦参燥湿杀虫止痒,侧柏叶止痒,并有减少头发脱落作用,薄荷脑辛凉,杀虫止痒。全方合之,收敛止痒。该制剂经临床应用,疗效显著。本文报道用薄层色谱法鉴别蛇床子、苦参、薄荷脑、侧柏叶,便于有效控制其制剂质量。

1 仪器与试药

蛇床子对照药材、薄荷脑对照药材、苦参对照药材、侧柏叶对照药材均购自江苏省药材公司,经实验室主任中药师鉴定;硅胶G(青岛海洋化工);939全自动薄层制板器(重庆市南岸贝尔德仪器技术厂);试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 蛇床子的薄层鉴别

取蛇床子对照药材2g,加60%乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加无水乙醇2ml溶解,作为对照药材溶液。

另取白屑风酊40ml,水浴蒸干,残渣加无水乙醇2ml溶解,作为供试品溶液。同法制备阴性供试品溶液。

照薄层色谱法(中华人民共和国药典2005年版一部附录VIB)试验,分别吸取上述3种溶液10μl,点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-正己烷(3:1:2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性供试品无干扰。见图1。

2.2 薄荷脑的薄层鉴别

取薄荷脑对照药材,加无水乙醇制成5mg/ml的溶液,作为对照药材溶液。

另取白屑风酊40ml,水浴蒸干,残渣加水30ml溶解,用乙醚振摇提取2次,每次20ml,合并乙醚液,蒸干,残渣加乙酸乙酯2ml溶解,作为供试品溶液。同法制备阴性供试品溶液。

照薄层色谱法(中华人民共和国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述3种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯-氯仿(11:1:3)[1]为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛浓硫酸溶液,105℃加热至显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性供试品无干扰。见图2。

图1蛇床子薄层鉴别图(1)图中1为蛇床子对照药材(2)图中2为供试品;(3)图中3为阴性供试品

图2薄荷脑薄层鉴别图(1)图中1为薄荷脑对照药材;(2)图中2为供试品;(3)图中3为阴性供试品

图3苦参薄层鉴别图(1)图中1为苦参对照药材;(2)图中2为供试品;(3)图中3为阴性供试品

图4侧柏叶薄层鉴别图(1)图中1为侧柏叶对照药材;(2)图中2为供试品;(3)图中3为阴性供试品

2.3 苦参的薄层色谱鉴别

取苦参对照药材2g,加60%乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加水30ml溶解,分别加氨水2ml,氯仿20ml,混匀,分取氯仿液,蒸干,残渣加无水乙醇2ml溶解,作为对照药材溶液。

另取白屑风酊20ml,水浴蒸干,残渣加水30ml溶解,分别加氨水2ml,氯仿20ml,混匀,分取氯仿液,蒸干,残渣加无水乙醇2ml溶解,作为供试品溶液。同法制备阴性供试品溶液。

照薄层色谱法(中华人民共和国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述3种溶液各3μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(5:0.6:0.3)[2]10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以改良碘化铋钾[3]试液。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的橙色斑点。阴性供试品无干扰。见图3。

2.4 侧柏叶的薄层鉴别

取侧柏叶对照药材2g,加60%乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液加60%乙醇至50ml,再加盐酸3ml,加热回流3小时,滤过,滤液作为对照药材溶液。

另取白屑风酊25ml,加60%乙醇至50ml,再加盐酸3ml,加热回流3小时,滤过,滤液作为供试品溶液。同法制备阴性供试品溶液。

照薄层色谱法(中华人民共和国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述3种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1)[4]为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性供试品无干扰。见图4。

3 讨论

苦参的薄层鉴别参考了2005版药典一部中苦参薄层鉴别项下氧化苦参碱的鉴别方法,但药典方法较为繁琐。在药典方法的基础上,参考其它同类文献,本实验采用羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板,而非药典所述2%氢氧化钠的硅胶G板。未采用药典方法两次显色,而是以改良碘化铋钾溶液[3]为显色剂,同样得到了清晰的橙色斑点。

参考文献

[1] 宋广大,袁燕芳.香舒饮分散片的薄层色谱和含量测定研究[J].中国中医药信息杂志,2007;14(4) :54～55．

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[S].北京:化学工业出版社2005,141～142

[3] 时向东.对1995版《中国药典》苦参薄层鉴别的探讨[J].时珍国医国药,2000;11(5) :432

篇9：杜仲药材薄层色谱鉴别研究

【摘要】目的：以杜仲药材对照品、松脂醇二葡萄糖苷和京尼平苷酸为对照，建立杜仲药材的薄层色谱鉴别。方法：采用硅胶G高效预制板，以三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸（1∶7∶1∶1）为展开剂上行展开。结果：考察不同的提取方法，展开剂和展开条件，最终确定实验方法。经对5批药材进行试验均斑点清晰，分离度好。结论：鉴别方法灵敏度高，专属性强，可用于杜仲药材的定性鉴别。

【关键词】杜仲；松脂醇二葡萄糖苷；京尼平苷酸；薄层鉴别

【中图分类号】R282.5【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）02-0008-02

杜仲药材是被子植物门杜仲科杜仲属植物的树皮[1]，在中国药典2010年版中，杜仲药材的定性鉴别仍为外观性状及显微鉴别，这种鉴别方法对于完整的杜仲药材来说是可行的，但对于粉末状药材或药材提取物等来说就不适应。根据有关报道，杜仲的降压成分主要是松脂醇二葡萄糖苷，属于木质素类化合物，其降压作用明显且未见不良反应，且对动物血压有双向调节功能，也是现行药典定量成分。另外，杜仲药材所含的京尼平苷酸具有一定的防癌、抗癌、抗肿瘤、抗辐射损害、抗氧化、抗衰老及调节血压等作用。本文以杜仲药材对照品、松脂醇二葡萄糖苷和京尼平苷酸为对照，建立了杜仲药材的薄层鉴别方法，具有斑点清晰，分离度良好，操作简便，方法重复性好的特点。

1仪器和试药

硅胶G高效预制板，索氏提取器，水浴锅（DK-98-11A，天津市泰斯特仪器有限公司）。松脂醇二葡萄糖苷（批号111537-200501）、京尼平甘酸（批号111828-201102）、杜仲（批号121202-0301）均购自贵州省食品药品监督管理局，药材样品经贵州省食品药品检验所中药检测室鉴定为杜仲药材。所用试剂均为分析纯。

2方法研究与结果

2.1溶液制备方法

2.1.1供试品溶液采用《中国药典》2010年版中对杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量测定的提取方法。取杜仲药材2g，精密称定，置索氏提取器中，加入三氯甲烷适量，加热回流6h，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，再置索氏提取器中，加入甲醇适量，加热回流6h，提取液过滤回收甲醇至适量，转移至10ml两瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.1.2对照药材溶液取杜仲对照药材2g，精密称定，置索氏提取器中，按照供试品溶液的方法制备即得。

2.1.3对照品溶液松脂醇二葡萄糖苷溶液的制备：取松脂醇二葡萄糖苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液。京尼平苷酸溶液的制备：取京尼平苷酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液。

2.2薄层条件的优化

2.2.1展开剂及展开条件的考察和比较通过系列预试验，确定基本具体操作方法：分别吸取对照品溶液，对照药材溶液和供试品溶液，点于同一硅胶G薄层板上，将展开剂倒于展缸中预饱和30min，薄层板预饱和20min展开后，上行展开，展距8cm.。取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液显色。

考察石油醚-乙醚（7：3）；石油醚-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（4：3：3：1）；石油醚-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（5：4：0.5：0.5）三种展开剂，试验结果表明，只有石油醚-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（5：4：0.5：0.5）可以将杜仲分离，但是分离效果亦不理想。经进一步对三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液展开系统的有关比例进行调整，分别考察三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液（3：5：1：0.5）；三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液（1：7：1：1）；三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液（1：8：1：1）。结果这三种展开剂都可以再薄层板上将杜仲药材成分进行分离，但是经三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液（3：5：1：0.5）展开的松脂醇二葡萄糖苷的Rf值太低，经三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液（1：8：1：1）展开的中松脂醇二葡萄糖苷的Rf值太高，只有三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液（1：7：1：1）中的松脂醇二葡萄糖苷的Rf值较为恰当，见表1。

2.2.2点样方式和点样量的比较考察点状点和条带状点两种方式，结果显示，点条带状点比较容易出现拖尾且斑点分离不明显，点状点斑点比较清晰。在点样量为3μl时，京尼平甘酸溶液和供试品溶液斑点均清晰，并且供试品斑点分离较好，但是对照药材和松脂醇二葡萄糖苷溶液斑点过浅，在紫外灯下几乎观察不到，故把对照药材溶液的点样量增加到4μl，松脂醇二葡萄糖苷溶液的点样量增加到6μl，结果分离效果明显，斑点清晰。故确定京尼平甘酸溶液和供试品溶液点样量为3μl，对照药材溶液的点样量为4μl，松脂醇二葡萄糖苷溶液的点样量为6μl。

2.2.3检视条件的选择在日光条件下检视供试品溶液的展开斑点，在与京尼平甘酸对照品对应的位置上可显相同颜色的斑点，但是与松脂醇二葡萄糖苷对照品对应位置上的斑点太浅，不易辨认。在紫外条件下，供试品溶液与京尼平甘酸和松脂醇二葡萄糖苷对照品对应的位置上均可显相同颜色的斑点，且斑点清晰，容易辨认。综合考虑，选择紫外光源作为检视条件。

2.2.4层析条件的验证薄层板：硅胶G高效预制板；点样：点状点样，京尼平甘酸溶液和供试品溶液点样量为3μl，对照药材溶液的点样量为4μl，松脂醇二葡萄糖苷溶液的点样量为6μl；展开剂：三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液（1：7：1：1）为展开剂。展缸预饱和30min，上行展开8cm，显色：喷以5%香草醛硫酸溶液显色，在100℃加热显色至斑点清晰。检视光源：紫外光。结果如图1、2。

3讨论

杜仲的薄层鉴别报道中[4-6]，一般只采用松脂醇二葡萄糖苷作为对照，本研究设立了对照品药材、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸三个对照，从而可提高杜仲药材定性鉴别的专属性和可控性。同时，以本研究确定的展开系统鉴别杜仲药材，经多批次样品试验表明方法的重现性良好。对于样品溶液的制备，曾探讨过多种方法，但都不能有效的去除杜仲胶等杂质，最终选择2010年版《中国药典》中对于松脂醇二葡萄糖苷的提取方法。从薄层板的结果可知，供试品分离效果良好，在实际检测中，杜仲药材薄层鉴别的供试品溶液可直接利用其含量测定的提取溶液进行试验。

参考文献

[1]叶文峰.杜仲叶中化学成分、药理活性及应用研究进展[J].林产化工通讯，2004，38（5）：40-43.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

[3]胡文彬.杜仲中和松酯醇二葡萄糖苷的分离及多种成分同时检测方法[D].长沙：中南林业科技大学，2012.

[4]谭莉莉，万小强，王刚.贵州产杜仲乙醇提取物UV、TLC及HPLC指纹图谱的比较研究[J].遵义医学院学报，2003，26（2）：112-113.

[5]郑雪，刘泽纬，丁来欣，等.杜仲叶中松脂醇二葡萄糖苷的提取分离及含量测定[J].食品科学，2012，33（6）：166-170.

[6]戚向阳，陈维军，张声华.杜仲中双环氧木脂素二糖苷分离纯化技术的研究[J].林产化学与工业，2005，25（4）：47-50.