比阿培南中丙酮、乙腈、二氯甲烷和四氢呋喃的GC测定

2022-09-12

比阿培南是新型1β-甲基碳青霉烯类抗生素, 它具有抗菌谱广、对肾脱氢肽酶稳定、药物动力学参数优良、临床治疗效果好、耐受性好和不良反应少等特点[1]。本品对革兰阴性和阳性菌的需氧菌和厌氧菌等均具有超广谱强敏抗菌作用, 并有良好的组织渗透性;药代动力学特性优良;用于治疗下呼吸道感染和泌尿道感染;临床有效率为89.5%~100%;药物不良反应轻微[2]。为有效控制比阿培南中的残留溶剂, 本研究参考文献[3], 建立了GC法测定比阿培南中的丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃。

1 仪器与试药

安捷伦6890气相色谱仪、安捷伦7694E顶空自动进样器

丙酮、乙腈 (天津市科密欧化学试剂开发中心, 含量不小于99.9%) 二氯甲烷、四氢呋喃 (国药集团化学试剂有限公司, 含量不小于99.5%) ;乙酸乙酯 (国药集团化学试剂有限公司, 含量不小于99.5%) ;比阿培南 (哈药集团制药总厂, 批号A200909001A200909002A200909003) ;甲酸为分析纯, 水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:固定相为 (6%) 氰丙基苯基- (94%) 二甲基聚硅氧烷的毛细管柱, 柱温50℃, 以氮气为载气, 氢火焰离子化检测器, 检测器温度250℃, 进样口温度200℃, 顶空进样, 顶空瓶温度80℃, 平衡时间20min。

2.2 溶液配制

内标溶液的制备:精密称取乙酸乙酯适量, 加10%的甲酸溶液制成每1mL中含0.5mg的溶液。

供试品溶液的制备:取本品约0.5g, 精密称定, 置20mL顶空瓶中, 精密加入内标溶液5mL使溶解, 密封, 摇匀。

对照品溶液的制备:分别称取丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃适量, 精密称定, 加内标溶液制成每1mL中含0.5mg、0.041mg、0.06mg、0.072mg的溶液, 精密量取5mL置20mL顶空瓶中, 密封。

2.3 专属性试验

取对照品溶液按色谱条件测定, 丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃的理论塔板数分别不低于81000、89000、90000、75000, 分离度分别为3.51、4.03、30.52、4.96。见图1。

2.4 线性试验

精密配制每mL含丙酮5mg、乙腈0.41mg、二氯甲烷0.6mg、四氢呋喃0.72mg的对照品储备液, 于储备液中分别精密量取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0和1.2mL置6个10mL量瓶中, 加入内标溶液稀释至刻度, 摇匀, 精密量取5~20m L顶空瓶中, 密封。按测定法分别进行测定, 记录色谱图。以浓度为横坐标, 丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃分别与内标物峰面积比值为纵坐标进行线性回归, 回归方程分别为:Y=-0.0163+0.9400X (r=0.9984) 、Y=-0.0005+0.4948X (r=0.9978) 、Y=-0.0001+1.6405X (r=0.9935) 、Y=-0.0055+1.9256X (r=0.9989) , 说明丙酮在0.1～0.6 mg/mL、乙腈在0.0082～0.0492mg/m L、二氯甲烷在0.12～0.072mg/m L、四氢呋喃在0.0144～0.0864mg/m L浓度范围内的峰面积与内标峰面积的比值均呈良好的线性关系。

2.5精密度和回收率试验

取供试品溶液, 连续进样6次, 按测定法测定, 丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃峰面积与内标峰面积的比值的RSD分别为0.28%、3.4 3%、2.5 7%、1.5 9%。

精密称取比阿培南1.000g9份置9个10mL容量瓶中, 精密吸取每mL含丙酮5mg、乙腈0.41mg、二氯甲烷0.6mg、四氢呋喃0.72mg的对照品储备液0.8mL、1.0mL和1.2mL各3份分别置上述10mL容量瓶中, 同时加入内标溶液稀释至刻度, 摇匀。从每个容量瓶中精密量取5~20mL顶空瓶中, 密封。按测定法分别进行测定, 同时取对照品溶液和供试品溶液按测定法测定, 记录色谱图, 按内标法以峰面积计算测得回收率。丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃的平均回收率分别为106.25%、110.19%、99.16%、101.43%。

2.6 样品测定

取比阿培南3批, 按上述方法制备供试品溶液, 取供试品溶液和对照品溶液按测定法分别进行测定, 记录色谱图, 见图2。按内标法以峰面积计算供试品中丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃的残留量, 结果见表1。

3 讨论

比阿培南中二氯甲烷的残留量小, 所以取样品0.5g。比阿培南在甲酸中易溶, 但考虑到甲酸的腐蚀性强, 故采用10%的甲酸溶液作为溶剂。

摘要：建立了GC法测定比阿培南中的丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃。采用固定相为 (6%) 氰丙基苯基- (94%) 二甲基聚硅氧烷的毛细管柱, 柱温50℃, 以氮气为载气, 氢火焰离子化检测器, 检测器温度250℃, 进样口温度200℃。丙酮在0.1～0.6 mg/mL、乙腈在0.0082～0.0492mg/mL、二氯甲烷在0.12～0.072mg/mL、四氢呋喃在0.0144～0.0864mg/mL浓度范围内的峰面积与内标峰面积的比值均呈良好的线性关系, 方法回收率分别为106.25%、110.19%、99.16%、101.43%, 精密度RSD分别为0.28%、3.43%、2.57%、1.59%。

关键词：丙酮,乙腈,二氯甲烷,四氢呋喃,GC,测定