氯苯那敏含量测定方法学

氯苯那敏含量测定方法学（精选9篇）

篇1：氯苯那敏含量测定方法学

摘要：本文研究的目的是通过对氯苯那敏含量测定方法的专属性、线性、稳定性、回收率、精密度、范围等实验，证明其含量测定方法适应检测要求，能为氯苯那敏含量测定提供可靠的检测方法，并对马来酸氯苯那敏的工艺合成配比起到指导作用。

关键词：氯苯那敏;方法学;含量测定;专属性;线性

1 检验方法

HPLC法：流动相：水：乙腈：甲醇：四氢呋喃(1375：800：200：125)对照溶液的制备：精密称取工作对照品(马来酸氯苯那敏)约0.30g，加流动相稀释至25ml，精密取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

样品溶液的制备：精密称取氯苯那敏样品约0.20g，加甲醇溶解并稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。分别取对照品溶液与样品溶液20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算即得。

色谱条件：检测器：紫外检测器检测波长：254nm

色谱柱：C18，25cm，5μm 流速：1.5ml/min

2 分析方法的验证

2.1 专属性试验:检验方法HPLC法：取氯苯那敏样品，按不同的色谱分离模式：反相色谱与离子交换色谱分别进行试验。

(1)反相色谱分离：按本验证方案中验证方法与操作中的检验方法进行检验。

(2)离子交换色谱分离：

色谱条件：检测器：紫外检测器;检测波长：220nm;

色谱柱：离子交换柱柱长：25cm;

流速：0.8ml/min;

流动相：乙腈：0.075mol/L磷酸氢二钠(用H3PO4调PH=4.0)=35∶65

对照溶液的制备：

精密称取工作对照品(马来酸氯苯那敏)约0.30g，加乙腈稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。

样品溶液的制备：

精密称取氯苯那敏样品 约0.20g，加乙腈稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。

测定：取对照品溶液20μl、样品溶液20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图。量取峰面积值，按外标法计算。两种检测方法结果相对偏差≤0.5%。

测定结果见表1：

表1

色谱分离模式样品名称批号结果(%)相对偏差(%) 反相色谱柱检测氯苯那敏Z-03-080405-0196.82

0.07% 离子交换色谱柱检测氯苯那敏Z-03-080405-0196.68

2.2 线性回归试验:检验方法：HPLC法：精密称取工作对照品0.30g，置100ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。分别精密吸取对照品贮备液0.5ml、1.0ml、2.0ml、4.0ml、6.0ml分别置25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即分别得5个对照品溶液。

分别取对照品溶液20μl，注入液相色谱仪中，测定色谱峰面积，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，求出线性方程及R值。线性回归应呈明显的线性，R值≥0.999。

测定结果见表2。

表2 线性范围试验结果

进样量(μg)1.2.40244.80489.609614.4144 色谱峰面积6260341222685244324848464987125753

2.3 稳定性试验：检验方法：HPLC法：取氯苯那敏样品约0.20g，加甲醇溶解并稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。精密量取同一供试品溶液20μl，按0、2、4、6、8小时时间间隔分别注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，根据5次峰面积计算其相对标准偏差(RSD)。峰面积相对标准偏差RSD≤2.0%。

测定结果见表3。

2.4 精密度试验

(1)重复性：检验方法：HPLC法：精密称取工作对照品(马来酸氯苯那敏)约0.30g，加流动相溶解并稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。另取氯苯那敏样品约0.20g，分别称取6份，分别加甲醇稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得6份供试品溶液。

取对照溶液20μl、供试品溶液20μl分别注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，根据峰面积计算供试品含量(%)及样品含量的相对标准偏差(RSD)。其相对标准偏差(RSD)≤2%。

测定结果见表4。

(2)中间精密度：本方案为考察随机变动因素对精密度的影响，设计中间精密度试验。变动因素为不同检验日期、不同分析人员。检验方法同重复性。中间精密度试验：含量相对标准偏差RSD≤2%。中间精密度与重复性试验含量相对偏差≤0.5%。

测定结果见表5,表6。

2.5 回收率试验:检验方法：HPLC法：精密称取工作对照品(马来酸氯苯那敏)约0.30g，加流动相溶解并稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

取氯苯那敏样品约0.05g，精密称定3份，分别置25ml的量瓶中，分别精密加入马来酸氯苯那敏对照品0.075g，加甲醇溶解并稀释至刻度，精密吸取1.0ml，置25ml的.量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。编号为1、2、3。

2.6 范围试验:检验方法： HPLC法： 精密称取工作对照品 (马来酸氯苯那敏) 约 0.30g，加流动相溶解并稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。另取氯苯那敏样品约0.20g，加甲醇溶解并稀释至25ml，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

取对照溶液20μl、供试品溶液20μl分别注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，根据峰面积计算供试品含量(%)。含量：≥90.0%。

测定结果见表8。

表8 范围试验测定结果

批号Z-03-080517-01 Z-03-080519-02 Z-03-080522-03 含量 97.4% 97.2% 97.3%

取氯苯那敏样品约0.10g，精密称定3份，分别置25ml的量瓶中，分别精密加入马来酸氯苯那敏对照品0.15g，加甲醇溶解并稀释至刻度，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。样品编号为4、5、6。

取氯苯那敏样品约0.15g，精密称定3份，分别置25ml的量瓶中，分别精密加入马来酸氯苯那敏对照品0.22g，加，加甲醇溶解并稀释至刻度，精密吸取1.0ml，置25ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。编号为7、8、9。

分别取对照溶液和供试品溶液20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，根据峰面积计算工作对照品加入量，工作对照品计算加入量与实际加入量之比即为回收率。回收率应在95%~105%之间，回收率相对标准偏差RSD≤2%。

测定结果见表7。

3 结论

通过对氯苯那敏含量测定方法的专属性、线性、稳定性、回收率、精密度、范围等实验，证明其含量测定方法适应检测要求，可为氯苯那敏含量测定提供可靠的检测方法，并对马来酸氯苯那敏的工艺合成配比起到一定的指导作用。

篇2：氯苯那敏含量测定方法学

【拼音全码】MaLaiSuanLvBenNaMinPian

【主要成份】马来酸氯苯那敏片每片含主要成分马来酸氯苯那敏4毫克。

篇3：氯苯那敏含量测定方法学

1 仪器与试药

采用Waters 540型高效液相色谱仪、TU-2010紫外分光光度计;甲醇:色谱纯;乙腈:色谱纯;马来酸氯苯那敏对照品(供含量测定用):100365-200594;纯化水;HypersilC18分析柱(250mm×5.0mm,5um);醋酸溶液;三乙胺溶液。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:C18柱(150×4.6mm 5um);流动相:乙腈-水(用42%醋酸溶液50ml与1ml三乙胺溶液稀释至1 000ml),检测波长为280nm;柱温为室温。

2.2 对照品溶液的制备

将马来酸氯苯那敏对照品20mg经100℃干燥,精密称定后置于50ml量瓶中,然后取1%醋酸溶液稀释至刻度,摇匀,得到既定溶液(每1ml含马来酸氯苯那敏0.03mg)。

2.3 供试品溶液的制备

取本品重量差异项下的内容物15片,精密称定后,研细,取适量本品,再次精密称定,然后将本品置于50ml的量瓶中,加入1%醋酸溶液稀释至刻度,摇匀后滤过,取得滤过液放置。

2.4 测定法

将对照品溶液和供试品溶液分别精密吸取10ul,然后注入液相色谱仪中进行测定,即得。

2.5 线性关系的考察

将马来酸氯苯那敏对照品溶液精密吸取5ml,置入25ml的量瓶中,然后加入1%醋酸进行稀释溶解,定容至刻度,摇匀,分别吸取(1、3、5、7、9、11)ul进样,然后测定峰面积,结果见表1

以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标得到回归方程为:

y=824.26x-2.0251r=0.9997

结果表明,马来酸氯苯那敏量在(0.05018～0.55123)ug范围内,峰面积和进样量之间有良好的线性关系。

2.6 精密度实验

连续6次分别取相同批号的供试品适量按照2.1项下的色谱条件进行含量测定,然后分别称算精密度。结果1=102.98%,2=102.69%,3=103.01%,4=102.39%,5=102.97%,6=102.89%。平均含量=102.73%。6次测定结果误差在实验允许范围内,表明该方法测定精密度良好。

2.7 稳定性实验

吸取供试品溶液10ul,精密称取,分别在(0、2、4、6、8、12)h测定,结果0小时峰面积为360.58,2小时峰面积为360.28,4小时峰面积为360.49,6小时峰面积为359.64,8小时峰面积为357.48,12小时峰面积为355.49。RSD为0.92%,表明样品在12小时内稳定性良好。

2.8 重复性实验

取相同批号的样品,按照制备供试品的方法制备6份供试品的溶液,并在2.1项色谱条件下分别测定含量。结果样品1含量为102.4%,样品2含量为102.5%,样品3含量为102.8%,样品4含量为103.1%,样品5含量为102.9%,样品6含量为102.2%。6份试品平均含量为103.4%,RSD为0.49%。

2.9 回收率实验

将已知含量马来酸氯苯那敏样品(4.08mg/g)精密称定,然后加入浓度为0.506mg/ml马来酸氯苯那敏的对照品溶液1 ml,按照2.1项下的色谱条件进行测定,进行回收率的计算,得到平均回收率为100.2%,结果见表2。

2.1 0 样品含量的测定

取不同批号的样品分别进行样品含量的测定,按照1.2项色谱条件下进行测定,结果为批号:090321,含量为101.2%;批号:090325,含量为102.6%;批号:090402,含量为98.7%。

3 讨论

高效液相色谱法又称高速液相色谱法、高压液相色谱法。经典的液相层析技术始于1906年,它比气相色谱早40多年。但它的发展速度曾经一度停滞不前,主要是以往缺乏自动灵敏的检测器装置,近年由于气相色谱发展,积累了很多经验,液相色谱又得到了迅速发展。与气相色谱法相比,用高效液相色谱法测定复方伤风胶囊中马来酸氯苯那敏的含量具有如下几个特点:(1)校温的要求比气相色谱低。气相色谱要求柱温条件很高,复杂组分还要求程控升温,而液相色谱的校温常在室温下工作,操作简单,便于随时监测;(2)柱效高于气相色谱。气相色谱柱的柱效为2000塔板/m,液相色谱往的柱效可达5 000塔板/m,这是由于液相色谱使用许多新型固定相之故。由于分离效能高,故色谱柱的长度,早期为(20～50)cm,目前多采用(10～30)cm。(3)分析速度与气相色谱相似。高效液相色谱的载液流速一般为(1～10)ml/min,分析样品只需几分钟或几十分钟,操作方便简捷。(4)灵敏度与气相色谱相似。通过本组测验数据表明液相色谱法可以准确、重复、有效地测定复方伤风胶囊中马来酸氯苯那敏的含量,值得推广使用。

摘要：目的:探讨复方伤风胶囊中马来酸氯苯那敏含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法进行含量测定,检测波长为280nm,分别测定产品的线性关系、精密度实验、稳定性实验、重复性实验、回收率实验等。结果:马来酸氯苯那敏量在0.05018～0.55123ug范围内,峰面积和进样量之间有良好的线性关系;6次测定结果误差在实验允许范围内;样品在12小时内稳定性良好。结论:用高效液相色谱法对复方伤风胶囊中马来酸氯苯那敏的含量进行测定效果理想。

关键词：复方伤风胶囊,马来酸氯苯那敏,含量,高效液相色谱法

参考文献

[1] 谢景新,薜昌明.高效液相色谱法测定羚黄氨咖敏片中的对乙酰氨基酚、咖啡因和马来酸氯苯那敏的含量[J].中外健康文摘(新医学学刊),2009;2(4) :68～69

篇4：氯苯那敏含量测定方法学

云南省曲靖市食品药品检验所,云南 曲靖 655000

【关键词】:扑尔敏;含量;测定

【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】1007-8517(2009)03(上)-0009-02

马来酸氯苯那敏片是《中国药典》[1]2005年版二部收载的品种,规定其含马来酸氯苯那敏(C16H19ClN2.C4H4O4)应为标示量的93.0%~107.0%｡笔者在按《中国药典》对该品种进行含量测定时,得到的结果往往低于规定值,经复核后也在低限｡当改变样品的溶解方法和溶剂的条件下试验,不但使含量测定有较大幅度的提高,而且缩短了样品的溶解时间｡

1 实验Ⅰ

1.1 实验目的

考察溶解方法对马来酸氯苯那敏片含量测定结果的影响｡

1.2 仪器与试药

日本岛津UV-2401可见紫外分光光度计;梅特勒AE-100电子天平;上海超声波仪器厂CSF-1A超声波发生器｡

马来酸氯苯那敏片(1､广东南国药业有限公司,批号070201;2､河南九势制药有限公司,批号080103;3､山西汾河制药有限公司,批号0804382;4､广东南国药业有限公司,批号080403｡规格:均为4mg);稀盐酸;纯化水等｡

1.3 实验方法

每个样品精密称取6份,量200ml量瓶中,加稀盐酸2ml与水适量,其中2份用振摇15min溶解;2份用超声5min溶解;2份用超声10min溶解;其它操作按《中国药典》的方法进行｡

1.4 观察到的现象

1.4.1 当样品加稀盐酸2ml与水适量并稍振摇后可见不浸润现象:样品粉末附着与瓶壁或浮在液面上｡

1.4.2 在264nm的波长处有最大吸收,结果见表1｡

1.5 实验Ⅰ小结

第一,从含量测定结果来看:超声法溶解比振摇溶解的效果好;超声5min和超声10min基本无差别｡也就是说超声5min即可达到将马来酸氯苯那敏全部溶出的目的｡

第二,从吸收峰的特征看:两种方法的最大吸收均出现在《中国药典》规定的波长,超声溶解并未改变马来酸氯苯那敏的结构和性质｡

2 实验Ⅱ

2.1 实验目的

考察溶剂对马来酸氯苯那敏片含量测定结果的影响｡

2.2 仪器与试药

日本岛津UV-2401可见紫外分光光度计;梅特勒AE-100电子天平｡

马来酸氯苯那敏片(广东南国药业有限公司,批号070201);纯化水､0.1mol/L盐酸溶液｡

2.3 实验方法

精密称取6份,量200ml量瓶中,其中4份加0.1mol/L盐酸溶液约150ml振摇溶解(其中2份振摇5min,另2份振摇10min)后加0.1mol/L盐酸溶液至刻度;后2份加稀盐酸2ml与水适量振摇30min溶解;其它操作按《中国药典》的方法进行｡

2.4 观察到的现象

2.4.1 当样品加0.1mol/L盐酸溶液并稍振摇后即湿润,未见不浸润现象｡

2.4.2 在264nm的波长处有最大吸收,结果见表2｡

2.5 实验Ⅱ小结

第一,从含量测定结果来看:以0.1mol/L盐酸溶液为溶剂振摇溶解的效果好;振摇5min振摇10min基本无差别｡也就是说振摇5min即可达到将马来酸氯苯那敏全部溶出的目的｡

第二,溶剂对含量测定结果的影响很大｡以稀盐酸2ml与水适量为溶剂振摇30min达到了《中国药典》规定的“溶解”的要求,而测定结果却只有96.8%｡如果以超声溶解和以0.1mol/L盐酸溶液为溶剂溶解样品的测定结果为100.4%为真值,那么以稀盐酸2ml与水适量为溶剂测定结果的误差就是3.6%｡

第三,从吸收峰的特征看:用两种不同的溶剂溶解的样品的最大吸收均出现在《中国药典》规定的波长,0.1mol/L盐酸溶液并未改变马来酸氯苯那敏的结构和性质｡

第四,0.1mol/L盐酸溶液的酸度和人体胃环境相同｡

3 结论

马来酸氯苯那敏在水中易溶,旦由于剂型和辅料的影响,加稀盐酸2ml与水适量并稍振摇后可见不浸润现象｡而加0.1mol/L盐酸溶液并稍振摇后即湿润,未见不浸润现象;结合胃环境的特征;笔者认为:制备马来酸氯苯那敏片含量测定的供试液时,以0.1mol/L盐酸溶液为溶剂振摇5min溶解为宜｡本方法不但缩短了样品的溶解时间,而且可使被测成分马来酸氯苯那敏(C16H19ClN2.C4H4O4)溶出完全｡

参考文献

[1]中国药典2005年版二部[S].2005,40.

篇5：马来酸氯苯那敏片说明书

【英文名称】ChlorpheniramineMaleate Tablets

【拼音全码】MaLaiSuanLvBenNaMinPian

【主要成份】马来酸氯苯那敏片每片含主要成分马来酸氯苯那敏4毫克。

篇6：氯苯那敏含量测定方法学

1 材料与方法

1.1 实验所需要的材料试剂和主要仪器

高效液相法测定康乐鼻炎片的马来酸氯苯那敏的含量中所需要的材料是每片中含有0.66g马来酸氯苯那敏的康乐鼻炎片，实验中使用的试剂主要有马来酸氯苯那敏的对照片、色谱纯乙腈、甲醇、三氯甲烷、浓氨水、无水乙醇等，实验中所需要的主要仪器有十万分之一的分析天平、高效液相色谱仪、酸度计、722自动分光光度计、水浴锅等。

1.2 实验的方法

1.2.1 试剂提取的方法

(1) 提取弱极性溶剂的方法：首先取出高效液相法测定康乐鼻炎片1.0g，加甲酸饱和50m L的三氯甲烷，然后称定重量，经过回流一个小时后，及时补足甲酸饱和三氯甲烷失去的重量。补足之后进行摇匀过滤，最后吸取25m L续滤液蒸干，就可以得到酸性条件下的弱极性溶剂。 (2) 提取极性溶剂方法：样2：首先取出1.0g称取的高效液相法测定康乐鼻炎片和50m L精密加氨性甲醇，然后回流一个小时后进行超声处理，用氨性甲醇补足失去的重量，将溶剂摇匀过滤后，在吸取25m L续滤液蒸干，就可以得到碱性条件下的极性溶液。样3：首先称取1.0g高效液相法测定康乐鼻炎片和50m L加氨性乙醇，超声的方法处理1h后，再用氨性乙醇补足失去的重量，然后眼晕过滤，最后吸取25m L续滤液蒸干，就可以得到碱性条件下的极性溶液。样4：首先称取1.0g称取的高效液相法测定康乐鼻炎片和50m L加浓氨水，超声处理一个小时后，用浓氨水补足失去的重量，然后摇匀过滤，最后吸取25m L续滤液蒸干，就可以得到碱性条件下的极性溶液。 (3) 三氯甲烷索氏提取法：首先称取0.5g高效液相法测定康乐鼻炎片，把高效液相法测定康乐鼻炎片装置在索氏提取器中，然后称取150m L的加三氯甲烷，索氏提取两个小时后，蒸干。

1.2.2 线性确定

依次取1μL, 2μL, 3μL……10μL的浓度为80μg/mL的马来酸氯苯那敏对照品，然后再马来酸那敏对照品中注入液相色谱仪，记录峰面积，然后就会得到明确的进样量和峰面积的线性范围。

注：样4由于杂志太多，色谱条件无法调制，所以没有列出来

1.2.3 对照品试剂调制的方法

首先称取40g对照品的马来酸氯苯那敏，然后加入流动相溶解，加到100mL为宜，再从中选取20mL，接着加入流动相溶解到100mL为宜，从而可以得到80μg/mL的溶液，就是所需要的对照品。

1.2.4 色谱条件的确定

首先取出由0.1mol/L盐酸制成的马来酸氯苯那敏盐酸大约80μg/mL的溶液，然后把溶液放在紫外分光光度计中进行扫描，从而能够得到对应波长为262nm的峰值，再用紫外检测器进行检测。因为马来酸为二元酸，其二级电离常数ka1为1.0×10-2，对应的pka为2.00。k2为5.5×10-7，对应的和的pk2为6.26。所以流动相用乙腈：pH3.0缓冲液=20∶80.填充的色谱柱用十八烷基硅键合硅胶。见图1。

1.2.5 稳定性试验

首先将液相色谱仪加入到放置一段时间的样品及对照品内，观察峰面积的变化。

1.2.6 回收率的试验

首先取出浓度已知的对照品，然后把对照品添加到未知的样品中，在做平行测定的时候与待测样品同时进行。

2 结果与讨论

2.1 线性范围的确定

通过进行实验分析可以得知：试验中选取的40.28mg马来酸氯苯那敏的对照品，并将流动相溶解加到100mL，按照上述方法进行试验可以得到下列数据如下表1所示。

马来酸氯苯那敏的线性回归方程为：Y=849.58x-2.0171r=0.9998，根据计算结果，马来酸氯苯那敏具有很好的线性关系。

2.2 精密度检测的结果

在试验的过程中通过任意取出浓度不一的康乐鼻炎片样品进行四次的试验测定，其检测的结果得出的峰面积为1145265、1146253、1146591、1144567。1145649是平均值，cv=0.07%。

2.3 稳定性试验

经过分析，马来酸氯苯那敏在48h内，稳定性是很好的。至于马来酸氯苯那敏的稳定性具体能保持到什么时候，还需要进行更多的实验来反复的验证。

2.4 样品的测定

首先取出取10μL浓度为80μg/mL的马来酸氯苯那敏对照品，然后把样品注入到热相色谱仪中，记录注入马来酸氯苯那敏后的色谱图。见表2。

2.5 提取方法的确认

由表2可知，最好的提取方法是：1.0g精密提取的本品，50mL精密加氨性甲醇，超声处理一个小时后，然后用氨性甲醇补足超声处理时失去的重量，再进行摇匀过滤，最后蒸干吸取的25mL的续滤液。

2.6 回收率的试验

2.6.1 标准品的检测结果

首先精称取10.86mg对照品，然后加入氨性甲醇，使它们溶解至200mL就得到了我们实验中所需要的标准品。

2.6.2 样品制备

首先取出康乐鼻炎片样品1.000g，将样品放入容量为100mL的量瓶中。然后在样品中加入50mL氨性甲醇，称定重量后，超声处理1h，再用氨性甲醇补足处理的时候失去的重量，摇匀过滤，再将吸取的25mL续滤液蒸干，把残渣加流动使之相溶解，最后转移到25mL的量瓶中。加流动相到刻度的位置。摇匀过滤后就得到了所需要的样品。

2.6.3 混合样品制备

精密称取样品0.500g，放置在容量为100mL的量瓶里，精密加入25mL氨性甲醇，取25mL标准品，超声处理1h，补足失重时用氨性甲醇，摇匀过滤，蒸干精密吸取续滤液25mL。加流动相溶解残渣，转移到25mL的量瓶里，加流动相至刻度的位置，摇匀过滤。

3 总结

通过以成品康乐鼻炎片为样品，根据多角度方面的考虑，线性测定范围内，样品有很强的稳定性，很高的回收率，较好的进样精密度，和很高的重现性，所得的结果非常的接近实际值，所以用高效液相法可以测定出康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量。

摘要：目的 测定康乐鼻炎片中的马来酸鲁本那敏的含量。方法 采用高效液相法测定康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量, 其中包括色谱条件、制备对照品溶液和供试品溶液等。结果 通过系统适应性实验、考察线性关系、精密度、稳定性试验等, 得出马来酸氯苯那敏的线性回归方程为Y=849.58x-2.0171r=0.9998, 具有很好的线性关系。在精密度的实验结果中, 所得到的平均值是1145649, cv=0.07%, 变异系数为0.17%, 所得的结果非常的接近实际值。结论 用高效液相法可以很好很准确的测定出康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量。

关键词：高效液相法,康乐鼻炎片,马来酸氯苯那敏

参考文献

[1]刘荷英, 程奇珍, 易路遥.康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量测定法[J].齐鲁药事, 2012, 31 (2) :78.

[2]王旭梅, 张丽华, 刘大勇.RP-HPLC测定康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量[J].中国药师, 2008, 11 (12) :1525.

[3]陈俊, 廖峻, 胡奕勤.高效液相色谱法测定康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量[J].医药导报, 2009, 28 (1) :116.

[4]王丽, 杨晓云, 许荣臻.高效液相法测定康乐鼻炎片的马来酸氯苯那敏含量[J].黑龙江医药, 2009, 22 (5) :612.

[5]彭占群.高效液相法测定康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量[J].吉林农业C版, 2011 (2) :72.

篇7：氯苯那敏含量测定方法学

关键词：高效液相法；康乐鼻炎片；马来酸氯苯那敏；含量

中图分类号：R917文献标识码：A文章编号：1674-0432（2011）-02-0073-3

康乐鼻炎片处方中包含：苍耳子、辛夷、白芷、麻黄、穿心莲、黄芩、防风、广藿香、牡丹皮、薄荷脑、马来酸氯苯那敏。可通窍消肿，祛风退热，调合气血，增强机体免疫性，具有特异性收缩鼻粘膜血管，降低管壁通透性，抑制粘液腺分泌，增强TS原细胞等多种药理作用。康乐鼻炎片本着专病专治，辨证施治原则，鼻炎患者结合病程和自身情况，坚持连续三个疗程可以彻底治疗慢性鼻炎顽症，具有同类产品不可替代的优势。作用快，疗效更确切；毒副作用小，安全可靠； 急慢性鼻炎、鼻塞、鼻窦、鼻渊强效首选用药。但是如何准确、快速测定马来酸氯苯那敏的含量成了该药品质量控制的小难题。

1 材料与方法

1.1 材料

康乐鼻炎片：吉春制药厂批号为100915的成品。片重0.35g（每片含马来酸氯苯那敏0.66mg）。

1.2 试剂

马来酸氯苯那敏对照品（中国药品生物制品检定所100047-200606），色谱纯乙腈，以下试剂为分析纯：无水乙醇、甲醇、浓氨水、磷酸二氢铵，磷酸，三氯甲烷，甲酸，纯化水。

1.3 主要仪器

岛津LC2010自动进样高效液相色谱仪，十万分之一分析天平（0.00000），水浴锅，722自动分光光度计，烘箱，酸度计。

1.4 方法

1.4.1 提取方法的摸索 （1）酸性条件弱极性溶剂提取。精密称取本品1.0g，精密加甲酸饱和三氯甲烷50ml，称定重量，回流1h。用甲酸饱和三氯甲烷补足失重，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml蒸干（样1）。

（2）碱性条件下极性溶剂提取。精密称取本品1.0g，精密加氨性甲醇（1→20）50ml，超声处理1h，用氨性甲醇（1→20）补足失重，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml蒸干（样2）。

精密称取本品1.0g，精密加氨性乙醇（1→20）50ml，超声处理1h，用氨性乙醇（1→20）补足失重，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml蒸干（样3）。

精密称取本品1.0g，精密加浓氨水（1→20）50ml，超声处理1h，用浓氨水（1→20）补足失重，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml蒸干（样4）。

（3）三氯甲烷索氏提取法。精密称取本品0.5g，置索氏提取器中，加三氯甲烷150ml，索氏提取2h，提取液蒸干（样5）。

1.4.2 对照品的配制 精密称取马来酸氯苯那敏对照品40mg，加流动相溶解至100ml，精密吸取20ml，加流动相溶解至100ml，即得80μg/ml的溶液。

1.4.3 色谱条件的选择 取马来酸氯苯那敏加0.1mol/L盐酸制成大约80μg/ml的溶液，在紫外分光光度计中扫描，得到峰值对应波长为262nm，可用紫外检测器。马来酸为二元酸，其2级电离常数Ka1和Ka2分别为1.0×10-2和5.5×10-7，对应的pKa分别为2.00和6.26。所以用乙腈：PH3.0缓冲液（11.5g磷酸二氢铵加水溶解至1000ml，用磷酸调节至PH3.0）=20：80为流动相。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱。

1.4.4 线性范围的确定 依次取浓度为402.8μg/ml的马来酸氯苯那敏对照品1μl，2μl，3μl……10μl注入液相色谱仪，记录峰面积。进而明确进样量与峰面积的线性范围。

1.4.5 阴性对照试验

1.4.6 稳定性试验 将样品及对照品放置一段时间再注入液相色谱仪观察峰面积的变化。

1.4.7 回收率实验 取对照品（浓度已知的），添加到待测的未知样品中，与待测的未知样品同时做平行测定。测得的添加标准物量与实际所取得的标准物量之间的百分率就为回收率：

1.4.8 精密度实验 取同一样品重复测定6次。观察结果的变化。

1.4.9 重现性试验 重复做三次独立的试验，计算得到结果分别作平均值、相对平均偏差的计算。

2 结果与讨论

2.1 线性范围的确认

精密称取马来酸氯苯那敏对照品40.28mg，加流动相溶解至100ml，按照1.4.3的方法，得到数据如下表：

注：马来酸为二元酸，其2级电离常数Ka1和Ka2分别为1.0×10-2和5.5×10-7，对应的pKa分别为2.00和6.26。在通常的流动相pH范围内，马来酸氯苯那敏主要解离为马来酸阴离子和氯苯那敏阳离子，因此，马来酸氯苯那敏会出两色谱峰，考虑到样品中马来酸出峰时间短且容易同样品中杂质混淆干扰，故以氯苯那敏峰面积来定量计算。

2.2 稳定性试验

按照1.4.7的方法测得数据如下表：

结果表明：马来酸氯苯那敏在此实验条件下非常稳定，由于工作繁忙，稳定性只考察了48h，未见明显变化。具体稳定到什么程度，还有待进一步验证。

2.3 样品的测定

精密吸取浓度为125.3μg/ml的对照品10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。

取1.4.1中“样1”，“样2”，“样3”，“样4”，“样5”分别加流动相使溶解，定量转移至25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。分别精密吸取10μl，注入液相色谱仪，依1.4.3项色谱条件，记录色谱图。按外标法计算其含量，得到数据如下表：

2.4 提取方法的确认

由上表可知，最佳提取方法最可能是“样2”对应的方法，即：

精密称取本品1.0g，精密加氨性甲醇（1→20）50ml，超声处理1h，用氨性甲醇（1→20）补足失重，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml蒸干（样2）。

下文中的样品前处理方法，包括回收率亦用的是此方法。

2.5 回收率试验

2.5.1 标准品的制备 精密称取马来酸氯苯那敏对照品10.86mg，加氨性甲醇溶解至200ml即得。

2.5.2 样品的制备 精密称取1.000g样品，至100ml量瓶中，精密加入氨性甲醇50ml，称定重量，超声处理1h，用氨性甲醇（1→20）补足失重，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml蒸干。残渣加流动相溶解，转移至25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过即得。

2.5.3 混合样品的制备 精密称取0.500g样品，至100ml量瓶中，精密加入氨性甲醇25ml，2.5.1项下标准品25ml，称定重量，超声处理1h，用氨性甲醇（1→20）补足失重，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml蒸干。残渣加流动相溶解，转移至25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过即得

计算得回收率分别为：101.36%；103.31%；101.93%；101.44%；102.33%； 102.08%。平均值为：102.8%，变异系数：CV=0.50%

2.6 进样精密度试验

取任意浓度的样品进行六次平行测定，所得的峰面积为：1146591；1146284；1144904；1146602；1145201；1144656。平均值：1145706，变异系数：CV=0.07%。

2.7 重现性试验

表6 重现性试验

结果分别为：94.54%；94.82%；94.92%；94.88%；95.06%；95.26%。平均值：94.92%，变异系数：CV=0.17%。

3 结论

以吉春制药厂批号为100915的成品康乐鼻炎片为待测样，从线性测定范围、稳定性试验、回收率实验、精密度实验、重现性实验等多个角度考虑。线性测定范围（进样量0.4028-4.028μg范围内，R2=0.9999，n=10），样品稳定性强（48h未见明显变化），回收率高而且稳定(101.36-103.31%，CV=0.50%，n=6)，进样精密度好（CV=0.07%，n=6），重现性较高（CV=0.17%，n=6），所得结果更接近真实值。所以，本方法可以精确测定康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量。

参考文献

[1] 叶非,高岩.有机化学[M].中国农业出版社,2003.02:

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[2] 柴晓杰.崔喜艳.生物化学实验技术[M].吉林大学出版社,

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[3] 周建新.现代医学生物学实验基础教程[M].中国农业出版社,2001.01:173-176.

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[5] 纪宇.关于马来酸氯苯那敏色谱峰的识别[J].中国药品标准,2004,5(1):31.

[6] 李玲，郭敏，李莉.HPLC测定苍菊鼻炎胶囊中马來酸氯苯那敏的含量［J］.中成药,2006,28(9).

篇8：氯苯那敏含量测定方法学

1仪器与试药

LC-10AP型高效液相色谱仪 (日本岛津公司) ;SPD-10Avp紫外-可见检测器;LC-10ATVP7725 (i) 型手动进样器;威玛龙色谱工作站。甲醇为色谱纯;其余试剂为分析纯。马来酸氯苯那敏对照品购自中国药品生物制品检定所 (供含量测定用) ;速感宁胶囊 (购自A厂, 共3批) 。

2实验方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18 (4.6 250 mm, 5 μm) ;流动相:甲醇0.25%磷酸溶液 (25:75) ;流速:1 ml/min;检测波长:262 nm;进样量:10 μl。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取马来酸氯苯那敏对照品适量, 加流动相稀释成每1 ml含32.5 μg的溶液, 作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取本品内容物约0.5 g (约相当于马来酸氯苯那敏1.8 mg) , 精密称定, 置具塞锥形瓶中, 加流动相50 ml, 称定重量, 超声处理40 min, 放冷, 补重, 摇匀, 滤过, 取续滤液, 即得。

2.4 线性关系

分别精密吸取对照品溶液 (32.45 μg/ml) 3, 6, 9, 12, 15 μl, 按上述色谱条件测定峰面积, 以进样量对峰面积绘制标准曲线, 得回归方程Y=1.06 1 05X+29 014.3, r=0.9995, 表明马来酸氯苯那敏在0.0974～0.4868 μg范围内呈现良好线性关系。

2.5 精密度试验

精密吸取上述对照品溶液10 μl, 重复进样6次, 测定马来酸氯苯那敏, 其RSD为0.35%。

2.6 稳定性试验

精密吸取供试品溶液 (批号:20080407) 10 μl, 分别于0、4、8、12、24 h进行测定, 其峰面积RSD为0.45%, 表明供试品溶液在24 h内稳定。

2.7 阴性对照试验

取除马来酸氯苯那敏阴性样品, 按供试品制备方法制成阴性供试品。按上述色谱条件测定, 结果在马来酸氯苯那敏出峰位置无干扰峰。

2.8 重复性试验

取同一批样品6份, 分别按样品溶液制备方法制备, 按上述色谱条件测定, 求得马来酸氯苯那敏平均含量为标示量的95.67%, RSD为1.35%。

2.9 回收率试验

取已知含量的样品6份 (批号:20080407) , 分别精密加入马来酸氯苯那敏对照品0.8113 mg, 按供试品溶液制备方法处理。并按上述色谱条件测定, 计算回收率分别为98.06%、99.88%、97.65%、102.16%、99.98%、96.87%, 平均回收率为99.10%, RSD=1.96%。

2.10 样品测定

取对照品溶液和供试品溶液, 依法测定, 外标法计算马来酸氯苯那敏含量分别为95.14% (20080117) 、95.03% (20080407) 、96.83% (20080823) 。

3讨论

3.1 波长的选择

文献[2]采用262 nm作为检测波长;对马来酸氯苯那敏对照品溶液进行紫外吸收光谱测定, 其吸收峰为226 nm和262 nm, 262 nm处的峰面积较大, 故选择262 nm作为本品的检验波长。

3.2 流动相的选择

文献[3]采用甲醇-庚烷磺酸钠醋酸混合溶液 (60 ∶ 40) 为流动相;本试验分别考察了流动相:①甲醇:水:乙酸 (30:70:1) ;②甲醇:水:磷酸 (43:57:0.2) ;③甲醇0.25%磷酸溶液 (25:75) ;结果表明在③条件下, 马来酸氯苯那敏的峰型和分离度较好, 阴性对照无干扰。

参考文献

[1]朱张庆, 李园园.高效液相色谱法测定小儿氨酚黄那敏颗粒马来酸氯苯那敏含量与均匀度.医药导报, 2008, 27 (11) :1391-1392.

[2]罗远秀.HPLC法测定维C银翘胶囊中马来酸氯苯那敏的含量.广西中医学院学报, 2009, 12 (2) :60-62.

篇9：氯苯那敏含量测定方法学

1仪器与试药

美国Agilent1200、11100型高效液相色谱仪;Waters 2695高效液相色谱仪,2487紫外检测器。Empower色谱工作站;MILLI-PROA纯水处理器;MILLI-Q纯水发生器;MIKRO 22R型高速冷冻离心机;德国 METTLER TOLEDO AB265-S 电子分析天平;甲醇、乙腈为色谱纯,水为高纯水(经0.45μm水系滤膜滤过),其他试剂均为分析纯。

马来酸氯苯那敏对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:100047-200305,供含量测定用);处方所用药材均符合《中国药典》2010年版1部标准;本试验所用维C银翘胶囊样品分别为广西邦琪药业有限公司的100126批、100412批以及南宁市维威制药有限公司的110101批、110301批。

2方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Gemini C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相:乙腈—0.3%十二烷基硫酸钠溶液—磷酸(60∶40∶0.02)(三乙胺调pH至3.3);检测波长:262nm;流速:1.0ml/min;柱温:35℃。

2.2 对照品溶液的制备

取马来酸氯苯那敏对照品适量,精密称定,加甲醇制成每毫升含40μg的溶液,即得。

2.3 供试品溶液的制备

本品(维威110301)研细后,取0.3g(相当于马来酸氯苯那敏1mg),精密称定,分置25ml量瓶中,加甲醇20ml,超声处理(功率为320W,频率为40kHz)20min,放冷,再分别加入上述各溶剂稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

2.4 阴性对照试验

取按处方比例除去马来酸氯苯那敏的其他药材适量,依照维C银翘胶囊的制备工艺和供试品溶液的制备方法得到缺马来酸氯苯那敏的空白对照溶液,作为阴性对照溶液。按照上述色谱条件进行测定,结果缺马来酸氯苯那敏阴性样品的图谱中,在8.252min处有一吸收峰,峰面积为11.502;而维C银翘胶囊样品在8.277min处吸收峰面积为300.639,300.639×5%=15.032>11.502,可认为阴性样品对测定无干扰,见图1。

2.5 线性试验

精密称取马来酸氯苯那敏对照品25.57mg,置25ml量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得对照品储备液。分别精密量取贮备液2、3、1ml分置25、50、25ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为马来酸氯苯那敏对照品溶液⑤(浓度为81.824μg/ml)、④(浓度为61.368μg/ml)、③(浓度为40.912μg/ml)。精密吸取对照品溶液⑤5ml置20ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液①(浓度为20.456μg/ml)。精密吸取对照品溶液④5ml置10ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液②(浓度为30.684μg/ml)。吸取对照品溶液⑤、④、③、②、①各10μl,注入液相色谱仪,测定。以对照品进样量为横坐标(X),峰面积积分值为纵坐标(Y)绘制标准曲线,计算回归方程:Y=9.1413×102X-3.0771,r=1.0000。结果表明,马来酸氯苯那敏进样量在0.2046～0.8182μg范围内线性关系良好。

(A:对照品;B:缺马来酸氯苯那敏的阴性对照;C:样品)

2.6 精密度试验

取同一份供试品溶液(维威110301批),按供试品溶液的色谱条件,连续测定6次。结果表明6次测定的马来酸氯苯那敏峰面积平均值为298.161,相对标准偏差(RSD)=0.78%(n=6)。

2.7 稳定性试验

取上述精密度试验的供试品溶液,并分别于0、2、4、8、10h进样,根据峰面积计算马来酸氯苯那敏的RSD=0.97%(n=5)。结果表明,供试品溶液中马来酸氯苯那敏至少在10h内稳定。

2.8 重复性试验

取同一批样品(维威110301)适量,按供试品溶液的制备方法平行测定6份,根据峰面积,计算马来酸氯苯那敏标示量的百分含量平均值为99.97%,RSD=2.78%(n=6)。

2.9 加样回收试验

取马来酸氯苯那敏对照品25.27mg,精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀,得到对照品储备液①(浓度为1.0108mg/ml)。精密吸取储备液5ml置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液②(浓度为0.5054mg/ml)。

取已知含量的本品(维威110301,马来酸氯苯那敏含量为3.2022mg/g),研细,取0.15g,精密称定(共9份),置25ml量瓶中,1～3份各精密加入上述对照品溶液②0.5ml、4～6份各精密加入上述对照品溶液②1ml、7～9份各精密加入上述对照品溶液①1ml,按供试品溶液测定的方法提取、进样,计算加样回收率,结果马来酸氯苯那敏平均加样回收率为101.57%,RSD=0.70%(n=9),结果见表1。

2.10 含量测定

按供试品的含量测定方法,测定4批样品中马来酸氯苯那敏的含量,结果见表2。

3讨论

马来酸氯苯那敏含量测定考察了不同提取时间(5、10、20、30、40min)、不同提取媒介(水、甲醇、乙醇)对样品中马来酸氯苯那敏提取量的影响,结果以采用甲醇、超声提取时间为10min效果好;马来酸氯苯那敏含量测定流动相的选择,参照国家食品药品监督管理局标准YBZ00382009维C银翘胶囊马来酸氯苯那敏含量测定项,以乙腈—0.3%十二烷基硫酸钠溶液—磷酸(60∶40∶0.02)(三乙胺调pH至3.3)作为流动相,所测成分马来酸氯苯那敏峰形良好,且与其他成分达到基线分离。

检测波长的选择:分别取马来酸氯苯那敏的对照品溶液及供试品溶液,按其对应的色谱条件进样,在高效液相色谱系统上实现分离后,以二极管阵列检测器测定其紫外光谱图,马来酸氯苯那敏对照品与维C银翘胶囊样品均在262nm处有最大吸收,故分别选择检测波长为262nm。

不同品牌色谱柱的比较:取同一份供试品溶液(维威110301),分别采用Geminni C18、CAPCELLPAK C18、Kromasil C18进行分离,结果本品供试液的HPLC色谱图中马来酸氯苯那敏与相邻杂质峰达到基线分离,理论板数(n)分别为7141、19414、13645,测得马来酸氯苯那敏含量分别为99.97%、101.90%、100.29%,测定结果RSD为1.03%。参照维C银翘片中马来酸氯苯那敏含量测定的理论板数订为应不低于3000。

摘要：目的 建立维C银翘胶囊中马来酸氯苯那敏含量测定的高效液相色谱法(HPLC)。方法 采用HPLC以乙腈—0.3%十二烷基硫酸钠溶液—磷酸(60∶40∶0.02)(三乙胺调pH至3.3)为流动相,在检测波长262nm处测定马来酸氯苯那敏含量。结果 马来酸氯苯那敏在0.2046～0.8182μg范围内具有良好的线性关系,相关系数r=1.0000,平均加样回收率为101.57%(RSD=0.70%)。结论 该方法简便、可靠,重现性好,可用于维C银翘胶囊的质量控制。

关键词：维C银翘胶囊,马来酸氯苯那敏,高效液相色谱法

参考文献