大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究（通用16篇）
篇1：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
一株大熊猫肠道厌氧纤维素菌的分离鉴定、系统发育分析及生物学特性的研究
从成都动物园健康大熊猫的肠道采集样品,富集分离获得一株典型的厌氧纤维素分解菌PD.分离菌是杆状,革兰氏阳性(G+),菌体大小为0.5μm×(3～5)μm,严格厌氧;生长温度为25～40℃,最适生长温度为38℃;pH范围5.0～9.0,最适pH 7.2;在纤维素粉作碳源的.琼脂培养基上菌落直径为1～3 mm,白色透明斑;分离菌株不仅能利用纤维二糖、葡萄糖、蔗糖、淀粉、松三糖、覃糖等多种可溶性碳源,而且可以利用纤维素粉等不溶性碳源.同时,对菌株PD进行了16S rDNA的PCR扩增,并对扩增产物测序.对16S rDNA部分序列进行了分析,并构建了系统发育树,表明菌株PD属于梭菌属,与Clostridium lentocellum(T)的16S rDNA序列具有92.2%相似性.图5表1参18
作 者：荣华 邱成书 胡国全 刘晓凤 张辉 费立松 徐恒 邓宇 RONG Hua QIU Chengshu HU Guoquan LIU Xiaofeng ZHANG Hui FEI Lisong XU Heng DENG Yu 作者单位：荣华,刘晓凤,徐恒,RONG Hua,LIU Xiaofeng,XU Heng(四川大学生命科学学院,成都,610064)
邱成书,QIU Chengshu(四川大学生命科学学院,成都,610064;红河学院理学院,云南,蒙自,661100)
胡国全,张辉,邓宇,HU Guoquan,ZHANG Hui,DENG Yu(农业部沼气科学研究所,成都,610041)
费立松,FEI Lisong(成都动物园,成都,610081)
刊 名：应用与环境生物学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY年，卷(期)：200612(2)分类号：Q48 Q959.838关键词：纤维素菌 16SrDNA 系统发育分析 生物学特性
篇2：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
一、实验材料 1．主要仪器设备
倒置显微镜、培养箱、离心机、25ml玻璃培养瓶、吸管；10ml尖底离心管、Ф80mm玻璃培养皿、青霉素小瓶、小鼠用解剖器械（包括眼科剪和眼科镊）2．试剂
RPMI 1640培养液、平衡缓冲生理盐水(PBS, pH7.2-7.4)、0.25%胰蛋白酶 3．实验动物
孕14～15天(E14～16)昆白母鼠，领自福建医科大学实验动物中心。
二、实验步骤
1.获取小鼠胚胎
(1)取孕14～15天的母鼠，断颈处死，置于蜡盘上
(2)75％酒精消毒后，用剪刀和镊子剪开下腹皮肤，用两把弯头止血钳夹住切口处的皮肤向头尾两侧牵拉即剥皮，用眼科弯镊和眼科弯剪打开腹腔，暴露出子宫。(3)用眼科弯镊夹住一侧子宫，分离子宫系膜，眼科弯剪剪断子宫角和子宫颈，将整个子宫分离下来（注意勿使子宫滑落到腹腔外，避免污染）。将子宫置于无菌滤纸上去除血迹。
(4)在超净台内将子宫移入预先盛有PBS的培养皿中，洗涤数次。
(5)将子宫移入另一盛有PBS的培养皿中，用眼科弯剪沿子宫系膜打开子宫，取出带有胎膜的胎鼠，并用两把眼科镊子剔除胎膜，取出胎鼠（一般有12只）。
(6)将胎鼠移入另一盛有PBS的培养皿中，用眼科剪和眼科镊去除胎鼠的头、四肢和内脏，得鼠胚躯干。
(7)将鼠胚躯干移至另一盛有PBS的培养皿中，用PBS洗涤两次至无肉眼可见的血色。
2.小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养（组织块半消化法）
(1)将干净的鼠胚躯干移至青霉素小瓶内（每6个鼠胚躯干装1瓶），用眼科直剪剪成约1 mm3以下的碎块。
(2)用5ml的刻度吸管每瓶加入约3ml的PBS，混匀后连同鼠胚碎块一起移至一尖底离心管中。
(3)室温下静置5min，用刻度吸管吸去上清液，留下鼠胚组织碎块。
(4)向装有鼠胚碎块的离心管内加入1ml 0.25%胰蛋白酶消化液，轻轻吹吸30秒（可见组织块变得较为粘稠）。
(5)加入1 ml 1640培养液终止消化，室温下静置5min，吸去上清液，留下鼠胚组织碎块沉淀。
(6)每个离心管内加入5ml 1640培养液悬浮鼠胚组织块，并接种到25ml的螺口的培养瓶中（接种时应用滴管将组织块混匀）。(7)做好标记（如培养日期，细胞名称，编号），将装有鼠胚组织碎块的培养瓶放入37℃，5％CO2，100％相对湿度的培养箱中培养。
篇3：要闻
2月14日, 国务院办公厅印发《关于加快众创空间发展服务实体经济转型升级的指导意见》, 提出促进众创空间专业化发展, 为实施创新驱动发展战略、推进大众创业万众创新提供低成本、全方位、专业化服务, 更大释放全社会创新创业活力, 促进科技成果加快向现实生产力转化, 增强实体经济发展新动能。
《意见》强调, 重点在电子信息、生物技术、现代农业、高端装备制造、新能源、新材料、节能环保、医药卫生、文化创意和现代服务业等产业领域加快建设一批众创空间。鼓励龙头骨干企业围绕主营业务方向, 按照市场机制与其他创业主体协同聚集, 形成以龙头骨干企业为核心、高校院所积极参与、辐射带动中小微企业成长发展的产业创新生态群落。鼓励科研院所、高校围绕优势专业领域, 建设以科技人员为核心、以成果转移转化为主要内容的众创空间, 为科技型创新创业提供专业化服务。依托国家自主创新示范区、国家高新技术产业开发区等试点建设一批国家级创新平台。发挥重点区域创新创业要素集聚优势, 与科技企业孵化器、加速器及产业园等共同形成创新创业生态体系。
发改委等10部门共同发文支持共享经济
2月17日, 由国家发展改革委等10个部门制定的《关于促进绿色消费的指导意见》对外发布。指出, 近年来, 随着经济较快发展、人民生活水平不断提高, 我国已进入消费需求持续增长、消费拉动经济作用明显增强的重要阶段, 绿色消费等新型消费具有巨大发展空间和潜力。与此同时, 过度消费、奢侈浪费等现象依然存在, 绿色的生活方式和消费模式还未形成, 加剧了资源环境瓶颈约束。促进绿色消费, 既是传承中华民族勤俭节约传统美德、弘扬社会主义核心价值观的重要体现, 也是顺应消费升级趋势、推动供给侧改革、培育新的经济增长点的重要手段, 更是缓解资源环境压力、建设生态文明的现实需要。
根据《意见》, 到2020年, 绿色消费理念将成为我国社会共识, 长效机制基本建立, 奢侈浪费行为得到有效遏制, 绿色产品市场占有率大幅提高, 勤俭节约、绿色低碳、文明健康的生活方式和消费模式基本形成。《意见》同时提出, 支持发展共享经济, 鼓励个人闲置资源有效利用, 有序发展网络预约拼车、自有车辆租赁、民宿出租、旧物交换利用等, 创新监管方式, 完善信用体系。
工信部加强产融合作推进供给侧改革
3 月2 日, 工信部会同中国人民银行、银监会印发《加强信息共享促进产融合作行动方案》, 旨在推进供给侧结构性改革, 支持《中国制造2025》加快实施, 缓解企业融资难、融资贵问题。行动方案提出, 通过建立产融信息对接工作机制, 强化银企信息共享, 促进政策协同, 提升金融服务实体经济的能力和效率, 引导产业与金融协调发展、互利共赢, 推动产业提质增效、转型升级。
行动方案要求, 各级工业和信息化主管部门建立融资信息对接清单, 为银行制定信贷政策提供参考。同时, 要求银行主动对接清单内企业的融资需求, 对符合信贷条件的重点企业和重点项目, 积极给予支持。银行要针对不同类型企业实施差别化信贷政策, 创新金融支持方式, 加大精准支持。另外, 行动方案还提出发挥企业自身的作用, 支持企业设立财务公司, 提高企业内部资金运作效率, 利用融资租赁方式拓宽企业资金渠道。要求企业加强公司治理和诚信体系建设, 提高资金管理水平和风险防控能力。地方相关部门要加强对企业的培训和辅导, 为提高企业融资能力创造良好条件。
广东:实施信息化先导战略, 加快培育新动能
2月24日, 广东省经济和信息化工作会议在广州召开。提出今年广东全省经济和信息化工作的总体要求是:以创新驱动发展为核心战略和总抓手, 全面贯彻中国制造2025, 深入推进工业转型升级攻坚, 加强供给侧结构性改革, 提高供给体系质量和效率, 实施信息化先导战略, 加快培育新动能, 促进工业经济和信息化平稳发展和提质增效, 尽快形成创新型经济新格局。
篇4：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
腺病毒载体介导的GFP基因在鸭胚成纤维细胞中的表达及RNA干扰
目的:建立在鸭胚成纤维细胞(DEF)中进行RNA干扰(RNAi)的技术平台,为鸭基因组功能的研究提供新的技术手段.方法:以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因,脂质体转染化学合成的GFP特异小于扰RNA(GFP-siRNA),用流式细胞仪测定GFP-siRNA对重组腺病毒(Adv-GFP)介导的GFP基因在DEF中表达的干扰效果.结果:200 MOI(感染复数)Adv-GFP介导的GFP基因在DEF中表达效率最高,为31.20%+3.11%,对DEF的`活力无明显影响;GFP-siRNA能有效干扰GFP基因在DEF中的表达,相对抑制率为98.56%.结论:在DEF中进行RNAi是可行的,Adv-GFP是介导外源基因在DEF中表达较为理想的载体;首次建立了在DEF中进行RNAi的技术平台,为鸭基因组的功能等研究提供了新的技术手段.
作 者：孟宇航 汤承 杨发龙 邓书 岳华 于学辉 MENG Yu-Hang TANG Cheng YANG Fa-Long DENG Shu YUE Hun YU Xue-Hui 作者单位：西南民族大学,生命科学与技术学院,四川,成都,610041刊 名：生物技术通讯 ISTIC英文刊名：LETTERS IN BIOTECHNOLOGY年，卷(期)：19(3)分类号：Q78 R394关键词：鸭胚成纤维细胞 RNA干扰 腺病毒载体 绿色荧光蛋白 鸭
篇5：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
新生猪骨骼肌卫星细胞的培养鉴定及生物学特性
采用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶两步消化法获取新生猪骨骼肌卫星细胞,并进行体外原代和传代培养.观察细胞各个阶段的形态,通过生长曲线等手段研究骨骼肌卫星细胞的增殖与分化能力,利用RT-PCR以及免疫细胞化学染色对所获得的细胞进行鉴定.结果显示两步消化法适用于骨骼肌卫星细胞的获取.在生长培养基作用下,细胞增殖旺盛;在分化培养基下,细胞分化良好,可融合成肌管.本研究探讨了猪骨骼肌卫星细胞体外培养、鉴定的`方法及其生物学特性,为建立猪骨骼肌卫星细胞系打下了一定的基础.
作 者：何波 郑嵘 熊远著 胡春艳 HE Bo ZHENG Rong XIONG Yuan-zhu HU Chun-yan 作者单位：华中农业大学,农业部猪遗传育种重点实验室,武汉,430070刊 名：畜牧兽医学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA年，卷(期)：37(6)分类号：S828.2关键词：猪 骨骼肌卫星细胞 培养 鉴定 两步消化
篇6：细胞培养在分子生物学中的应用
随着社会的进步，科学的发展，生物技术已经得到了很大的改进，下面我就从心肌细胞培养，植物体细胞培养再生技术体系，马立克氏病病毒分子生物学诊断技术研究，三羟异黄酮诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的分子机制研究，细菌与放线菌的16S rDNA、真菌26S rDNA D1/D2区及ITS区的分子鉴定体系，载体构建技术体系及其基因靶点的定点诱变和靶序列缺失、改造技术体系6个方面来研究细胞培养在分子生物学中的应用，以阐述细胞培养的重要性。
1.心肌细胞培养
培养心肌细胞能提供单个细胞的同源集落，在记录腔内可视并容易控制。培养方便，定量、重复性好，均一性不受神经体液因素，在分子生物学技术研究成熟心肌细胞(如Ikur分子基础的研究中应用广泛；
心肌细胞位于心肌内膜内。一般认为，正常成年心脏的心肌细胞不再分裂。因此，心肌细胞最初多采用动物或人的胚胎心脏以及刚出生动物的心脏，如乳鼠以及其他刚出生动物的心脏或动物、人的胚胎心脏，这就是ECM。但ECM与ACM相比，在功能和结构上均有差异：ECM用途存在一定的局限性，ACM更适宜做电生理和细胞膜离子通道的研究单个因素干预实验方面更具有代表性
[3-5]
[1,2]
；ACM在进行。
2.植物体细胞培养再生技术体系
棉花是重要的经济作物之一，棉花生产对于我国棉农收入和国民经济的发展具有重要的意义。随着基因工程和分子生物学的发展，转基因技术正广泛地应用于现代植物育种中。然而，建立高效而稳定的植物体细胞培养再生技术体系是植物遗传转化和植物基因工程的基础。此外，棉属野生种中具有陆地棉栽培种所缺少的许多优良性状，通过棉种间的体细胞杂交技术获取种间杂种转育野生棉的优良性状是一条行之有效的技术途径，而建立一套适合这些野生棉种的体细胞胚胎发生和植株再生体系是体细胞杂交创造种间杂种的基础和先决条件。本研究在前人工作的基础上，以四倍体野生棉种毛棉(G.tomentosum Nutt& Seem)为材料，四倍体陆地棉(G.hirsutum L.)珂字棉201为对照，研究野生棉种毛棉体细胞培养过程中的影响因素，以建立适合于四倍体野生棉的体细胞培养体系。
[6]3.马立克氏病病毒分子生物学诊断技术研究
通过与SDS-蛋白酶K法、高纯度PCR模板提取试剂盒(宝灵曼公司产品)、NP<,40>-蛋白酶K法比较,研究小组建立了用TLS(三乙醇胺月桂酸硫酸盐)代替传统 的SDS-蛋白酶K提取DNA的方法,对细胞培养物、血液样品提取DNA,经琼脂糖凝胶电泳、PCR检测,结果表明,TLS法是一种快速、简便的提取高质量DNA的方法.利用地高辛标记马立克病病毒(MDV)GA株BamHI-L及其六个亚片段制备核酸探针,与MDV1型(京-
1、MD<,11/75c)、MDV2型(SB-1)、MDV3型(Fc-126)的核酸进行分子杂交,结果表明L片段是MDV1病毒特异的,与MDV2、MDV3的核酸无同源性,这与Ono等(1992)的报道:在非严格杂交条件下,MDV2 BamHI-F片段与MDV BamHI-L片段有同源性的结论不同.根据BamHI-L片段的核酸序列设计了针对pstI亚片段的寡核苷酸引物,建立了用0.3U Taq酶的10μl反应体系的微量PCR方法,通过对病毒感染细胞培养物DNA和京-1株接种鸡血液DNA的扩增,结果表明,该引物介导的微量PCR是MDV1特异的,MDV2(SB-1)、MDV3(Fc-126)及正常细胞DNA都没有任何扩增产物.敏感性试验表明微量PCR能从0.1pg京-1株感染细胞DNA中检测到MDV DNA,早期感染样品检测结果表明,微量PCR能从京-1株接种鸡的血液中于第5天检出MDV DNA.PCR产物的RFLP结构表明:京-1株和MD<,11/75c>株的产物在 BgII、TaqI、xbaI酶切位点上没有变化.4.三羟异黄酮诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的分子机制研究
三羟异黄酮对肝癌的抑制作用研究,通过细胞培养发现其可诱导肝癌细胞凋亡。通过体外细胞培养和分子生物学技术,检测人肝癌细胞SMMC-7721凋亡过程中相关蛋白基因的表达,可以探讨三羟异黄酮诱导肝癌细胞凋亡的分子机制.方法:应用体外人肝癌细胞系SMMC-7721细胞培养技术,采用MTT法观察三羟异黄酮对肝癌细胞的增殖抑制作用,选择合适的实验剂量.HE染色观察凋亡细胞的形态学表现,琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA Ladder.采用细胞免疫组化检测三羟异黄酮诱导人肝癌细胞凋亡过程中相关蛋白p53、Caspase-
3、Survivin的表达,采用RT-PCR法检测Caspase-
3、Survivin在基因水平的表达。
[7]5.细菌与放线菌的16S rDNA、真菌26S rDNA D1/D2区及ITS区的分子鉴定体系
细菌（包含放线菌）基因组有5S、16S和23S三种rDNA.16S rDNA大小在1500bp左右，其所代表的信息量适中，是进行分类研究的理想靶位。利用16S rDNA两端的引物PCR扩增未知菌株的16S rDNA把序列，并进行后续的DNA测序，与Genbank中已知序列进行同源性比较后判定细菌种类，可将细菌划分到属或种。真菌基因组中编码核糖体RNA的基因为26S rDNA、5S rDNA、18S rDNA和5.8S rDNA。利用rDNA的保守序列设计引物，对未知真菌的26S rDNA D1/D2区域序列或ITS区进行PCR扩增，测序后与Genbank中已知序列进行同源性比较，可将真菌划分到属或种。我公司具备完整的细菌和真菌分子鉴定成熟方案和技术操作体系，已顺利完成近万株海洋细菌与放线菌、霉菌、酵母和来源于土壤的微生物、植株体内生菌的分子鉴定工作。
6.载体构建技术体系及其基因靶点的定点诱变和靶序列缺失、改造技术体系
载体是外源基因导入宿主菌的必需媒介。依据目的基因的来源，灵活选择不同的克隆方法，包括从基因组中分离目的基因，由特定mRNA逆转录合成cDNA后再进行克隆和PCR体外扩增目的片段进行克隆等。同时，根据需要对特定的基因靶点进行定点诱变和靶序列缺失、改造。
【参考文献】
[1] Feng JL，Wible B，Li GR，et a1．Antisense oligodeoxynucleotides directed against Kvl．5 mRNA specifically inhibit ultrarapid delayed rectifier current in cultured adult human atrial myocytes．Grc Res，1997，80：572—579．
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篇7：当前技校生心理特征探寻及对策
从心理学的角度讲, 技校生大多与高中生一样, 处于青年初期的年龄阶段, 这个时期是个体心理发育和心理发展比较迅速并且趋于成熟的时期, 也是可塑性还比较大的时期。但技校生和一般高中生的心理特征上又有所区别, 因此, 加强技校生的心理特征的研究, 对促进他们的身心健康、更好地成长具有重要的意义。
现就当前技校学生有碍健康成长常见的心理问题做些探究, 并提出相应的对策, 在此仅希望以起到抛砖引玉之作用。
一、缺乏自信、不思进取。
现招收的技校生, 一般是在初中毕业时对高考无望, 放弃上高中机会, 从中考分流出来的生源, 而有的高中学生大多也是成绩不佳, 而选择技校。在如今, 社会上还依旧普遍存在着上大学哪怕是本三或专科都比技校光彩的观念, 上技校自然成了学生最无奈的选择。因此, 他们觉得与上大学的同学相比不免有自愧不如的感觉, 自觉低人一等, 这样就会造成学生自卑的心理产生、对自己缺乏自信, 反映在现实中的表现就是精神萎靡不振、随波逐流、得过且过, 或破罐子破摔、不思进取、不求上进, 这些现象都严重影响了学生的健康成长和成才。
二、成绩不佳, 缺乏兴趣。
因为近年来技校学生都是免试入学, 难免使学生的学习成绩停留在较低的水平, 加上经济效益的原因, 各校对程度极差, 而且对上学兴趣全无的生源也采用连拉带拽的办法, 使得技校所招收的学生程度又严重的参差不齐, 反映出来的问题就是老师课难上, 程度极差学生上课精力无法集中, 开小差、做小动作甚至打瞌睡的现象常常出现, 无形中对其他学生产生负面影响, 也制约了教学工作的正常进行。
三、缺少磨砺, 眼高手低。
现在学生中独生子女居多, 还因人们的生活水平的普遍提高, 不少孩子从小被家长宠爱, 过着衣食无忧的生活, 没有经历过困难生活的磨砺, 缺少主见, 自然不能正确地对待困难和挫折, 具体表现在遇到困难和挫折时, 往往显得束手无策或怨天尤人, 而在做事或在就业的选择面前却又是眼高手低、自以为是, 较难令人满意。
针对以上几种学生中常见的问题, 我们需要采取的应对措施应该有:
一、开展理想教育, 重塑学生的自信心。
学校要利用开学初, 对新生进行理想教育, 用我国高技能人才和我们身边的优秀技能人才来教育学生, 用这些人才的成长道路来感染学生。利用板报、广播等宣传媒体, 宣传技校毕业生的楷模、技工优秀人才的先进事迹, 做到潜移默化、润物无声。还可以通过做好学生家长的宣传工作, 鼓励学生岗位成才。榜样的力量是无限的, 因为所宣传的这些楷模和优秀人才, 都是技工出身, 他们用自己的行动证明了读技校一样可以成才, 这更能让学生明白行行出状元的道理, 相信只要经过努力, 他们一样也能够成就自我。这样, 就可以逐渐消除他们原有的自卑感, 重新树立信心, 就有了努力方向, 学习上也就有动力。学生的上进心得到加强, 为他们的健康成长和成才提供了保证。
二、推进教学改革、提高其学习积极性。
技校教育与高中教育不同, 国家对职能教育提出了一系列教改措施, 如一体化教学等, 这些都是为了适应当前我国职能教育的实际。学校不仅要认真落实上级部门的教改措施, 还要根据各自的特点积极探索更加切合实际的教育教学办法, 来提高学生的学习积极性, 以达更好的学习效果。如在理论教学上, 教师要通过“引”和“导”的办法来要求学生掌握基本的理论知识, 重视在实际操作和技能实践活动中, 让学生根据需要和遇到的困难再来寻找解决的途径和从中寻找其理论依据。这样学生记得牢、印象深, 尤其对基础很差的学生, 他们有的动手能力却不差, 这样就可以提高他们的学习积极性, 在有兴趣的技能实践中逐步掌握那些使他们原来感到乏味的理论知识, 变“要我学”为“我要学”。此外, 还可以开展通过专业理论知识竞赛、专业技能比武等方式激发学生对学习知识、掌握技能的兴趣和热情, 以达到整体素质的提高。
三、丰富竞赛内容, 增强团队协作精神。
学校要重视集体竞赛活动的开展, 将竞赛活动贯穿于学期始终, 让学生始终觉得集体的存在和集体的力量始终伴随着自己。具体而言, 可根据各校的特点, 组织开展各种竞赛活动。如, 我校 (福建省青州造纸技术学校) 2010年来, 以文明班级竞赛为龙头, 推进了学校各项工作的开展。就是将各班的学习、纪律、卫生、班风班貌、活动竞赛成绩等一系列指标进行量化, 采用周评月考核的办法, 对月考核的优胜班级给予奖励。这样学生的集体荣誉感大大增强, 每个人积极地为集体出力献策, 形成了一种积极向上的良好氛围。这不仅使学校的校风、学风得到改变, 而且每个学生的自信心大增, 学习动力加强, 学生团队协作、克服困难、正确面对挫折等方面的能力都得到了很大的锻炼和提高。
四、把好招生源头, 做好就业教育和疏通。
如今技校招生虽然都是免试入学, 但学校也要将培育学生成才和学生的就业率放在首位, 这样才能确保技校教育的长久性和自己学校良好的社会评价。对于那些无心学习, 看不上技校教育且程度极差的生源要有宁缺毋滥的态度, 以免影响学校的声誉。对于在校学生要及时做好就业形势教育, 让学生对社会的就业前景有一个全面正确的认识。要教育学生, 对于国有或正规的企业, 作为一名技术工人, 也许你的待遇不是那么的高, 但却有保障, 能够享受到国家对劳动者的相关保护, 只要肯自己努力, 将来也会有很好的发展前景。学校也要积极地为学生就业疏通各种关系, 为其解决实际问题, 排除就业道路上的各种障碍。学校还应当与企业、用人单位多联系、多沟通, 组织学生参观企业、了解企业工人的工作、学习和生活;邀请用人单位来校介绍企业的发展前景、参观学生技能比武以及相关的竞赛活动, 让学校和用人单位形成互动。只有这样, 学生在就业观念上就能够以实事求是、脚踏实地的态度面对用人单位的选择, 而用人单位又对这些学生的能力和水平能够充分的了解, 这才是三赢 (学生、用人单位、学校) 的一件好事。
篇8：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
2008-06-19 00:00 来源：丁香园
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1517 关键词： MEF小鼠 胚胎成纤维细胞
小鼠胚胎成纤维细胞的富集
1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后，实施断颈法处死小鼠。
2、用70％乙醇擦拭腹部，把皮肤向后拉，暴露出腹膜。用消毒过的工具，剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。
3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。
4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开，分离后切除内脏（所有深色的东西）。将胚胎转移到(有盖)培养皿中，用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。
5、用带有弯钩的眼科剪将组织剪碎，当你剪的很累以致于不能再剪的时候，加入2ml胰蛋白酶/EDTA继续剪。再加入另外5ml胰蛋白酶/EDTA，并在37℃孵育大约20分钟。此时，返回至第一步，对下一只鼠进行操作。
6、执行1－4步，到将胚胎置于胰蛋白酶/EDTA中这一步。
7、吹打胰蛋白酶/EDTA中的胚胎，直到有很少的组织物残留。将皿放回培养箱再孵育10分钟。
8、用20ml培养基以终止胰蛋白酶/EDTA的消化，将皿中的物质转移至50ml锥形管中。
9、混匀管内的物质，加入到含有20ml培养基的T75培养瓶中。每个培养瓶中装大约3个胚胎。
10、将这些培养瓶放在培养箱中37℃培养过夜。
11、将胚胎置于PBS中，并重复第5步。
12、第二天更换培养基，以去除碎片和中毒的细胞及其分泌的物质。
13、当培养瓶中的细胞长到80-90%汇合时并仍处于指数生长期时，是冻存细胞的最佳时期。一般说来，这发生在准备胚胎的第二天。这可能或早或晚发生，所以请注意观察你的培养瓶。
注释：
我们已用CF－1品系的鼠制备了成纤维细胞。
培养基成分：
88％ DMEM 10％ FBS 1％ NEAA 1% 双抗
对于新建立的细胞系，要对样本进行支原体检测。
小鼠胚胎成纤维细胞的消化/传代
1、移去MEF培养基
2、用5ml不含钙镁离子的PBS洗涤细胞（以去除胰蛋白酶的抑制物）。
3、每个培养瓶里加入1.5ml的胰蛋白酶/EDTA（0.05%的胰蛋白酶），消化5min。
4、为了使细胞分散开，轻轻吹打细胞。
5、每加入1ml的胰蛋白酶/EDTA，加入至少1ml的MEF培养基以终止胰蛋白酶的消化。
6、将细胞悬液加入到15ml的锥形管中，吹打几次，使细胞分散为单个的。
7、在新的T75培养瓶中加入10mlMEF培养基。
8、将细胞悬液分装到新的T75培养瓶中，放在37℃培养箱中进行培养。
注释：
MEF培养基成分：
89% DMEM(Gibco # 12100-046)10% FBS(Gibco # 16000-044)1% NEAA(Gibco # 11140-050)MEF每传一代就会生长得更慢些。你第一次传代的比例可以是1:5，但是最后一次的传代（第4代或第5代）比例应该是1:2。
小鼠胚胎成纤维细胞的冻存
重悬培养基：
80% DMEM 20% FBS 1% NEAA 冻存培养基：
60％ DMEM 30％ FBS 20％ DMSO
1、用不含钙镁离子的PBS洗一次细胞。
2、加入胰蛋白酶/EDTA37℃消化大约5min。
3、将细胞吹打下来。
4、加入与胰蛋白酶/EDTA等体积的培养基以终止胰蛋白酶的消化。
5、吹散大块组织。如果还有大块组织存在，可将悬液加入到50ml的管中使其沉淀。
6、取上清液，将其分装到锥形管中，1000rpm离心5min。
7、每个冻存瓶中加入0.5ml（冻存液的一半体积）的重悬培养基重悬细胞。
8、逐滴加入等体积的（0.5ml/瓶）冻存培养基，混匀。现在DMSO的浓度是10％。
9、每个冻存瓶中加入1ml的细胞。
10、迅速将细胞转移到冻存的容器中，-70℃冻存过夜。（细胞不能长时间放置在室温而含有DMSO的情况下）
11、第二天将细胞放于液氮中长期保存。注释：
提前标注好冻存细胞的以下信息：
细胞系名称
传代的代数
冻存细胞的数目
日期
Initials 注明冻存/解冻形式
小鼠胚胎成纤维细胞的解冻/复苏
1、将冻存瓶从液氮中取出。
2、放在37℃水浴中快速解冻，being careful not to immerse the vial above the level of the cap.3、当仅还有一点冰晶残留时，用95％的乙醇消毒冻存瓶的外面，并将其置于hood中。（为什么用95％的乙醇消毒？hood是什么？）
4、轻轻地上下翻转细胞一次，将它们放入15ml锥形管中。
5、想管中逐滴加入10ml培养基。这一步操作不能少于两分钟。做快了对细胞将是一种打击，你将得到比其他方法具有更低生活能力的细胞。6、1000rpm离心5min。
7、将细胞重悬于10ml培养基中，然后放入T75培养瓶中。
8、放入37℃培养箱。
9、注明冻存/解冻的形式，以更新数据。
1、关于如何确底胚胎期12.5d~13d的小鼠？希望大家能够介绍一下自己所采用的方法，集思广益。我所采用的方法是选择同一天出生的三对小鼠，到成熟（8~10 w）后，分三周合笼，（每周合笼一对），然后待最早合笼的小鼠产崽后，再取另两个雌鼠的胚胎。不知道这样行不行，也没注意别人是怎样做的。另外问了几个外科的同学也没找到可以查出小鼠孕期的仪器。
2、关于提取MEF的比较好的protocol
3、关于MEF转染时起耐受性如何？这个我以后主要做这些，可能会积累一定的经验，但现在肯定有各位朋友已经从事或正在从事着方面的工作，希望能够分享经验。
4、关于其分泌细胞因子能力？我从一些文献上发现，MEF除了作为胚胎干细胞的饲养层以外，也是研究天然免疫的重要材料，如日本东京大学的AKIRA的实验室，大板大学的takashi fujita实验室就发了相当多的文章。从这些文献可以看出，MEF分泌细胞因子能力远远强于HEK293等工程细胞，相当于肝实质细胞，略低于几种免疫细胞。但较免疫细胞，我认为有其不可替代的优势：
（1）其并不是主要发挥免疫功能的细胞，只有在受到外界刺激时才会应答，分泌细胞因子，免疫细胞在不受刺激时也会为了维持稳态而不断产生细胞因子，即使有严格的control 组，但专门的免疫细胞即使是同一种细胞（DC，NK，T）但不同的细胞分泌细胞因子的能力也是参差不齐的。会造成control 相对不一致。
（2）另一方面，由于这些免疫细胞大部分都是悬浮的，不太容易转染，结果阳性率也会较低。（3）现在的分离MEF的方法很便宜，不复杂，而分离纯的免疫细胞（如NK，DC），需要MACS，FACS等，这对目前国内的实验室经费相对紧张的情况来说，不是很划算。因此除非是需要研究某一种免疫细胞，如果是为了研究天然免疫或者adaptive immune过程中某中基因，或者蛋白，或者某一信号通路等的作用，MEF 细胞不失为一种选择。
网友crepi 的观点：
1、我每次取的是16~18天的胚鼠 个人觉得无碍 我倒更喜欢大一点的胚胎 更好操作一点
2、我取的是皮肤 然后胰酶4度消化过夜 第二天终止消化 撕掉表皮 留下真皮 减碎 用的100目滤网过滤 这个胰酶消化的时间是个关键 时间长了 细胞容易死 时间少了，表皮不容易揭下来 我有此就是这样 消化了15个小时 结果接种下来的细胞不能贴壁 全死了
3、我用的培养液是DMEM+10%小牛血清 培养液也是关键 因为虽然都是成纤维细胞比较泼辣 但总归是原代 可能还是比较娇嫩 我前几天就是这样 后来发现是培养液出的问题 测的PH值都8.3了 细胞不死才怪 毕竟细胞耐酸不耐碱
4、原代培养的最大天敌还是污染
网友baichangming的观点：
MEF对培养基和血清的要求不高，一般的都行我用过高糖DMEM和D/F-12，生长情况都行，而且看不出什么差别。血清也是以前用几百块钱的国产标准胎牛血清也长得也不错，因为要养干细胞，所以现在换成进口Gibco胎牛的血清（两千多/500ml），感觉细胞的状态确实好了一些。我的血清浓度一般是16.66666%。
网友北羽迦楼的观点： 细胞没别的，就是很容易老化，一般我都是1:5~1:3传代，3代之后细胞就出现衰老了，我感觉年轻增殖能力强的MEF应该有着清晰的细胞轮廓，细胞立体效果不错，在相差显微镜下，细胞核清晰，细胞纤长，正在分裂或是刚刚分裂的细胞没有伸出伪足，但是同样有着更加明亮的轮廓，与细胞边缘相比，细胞呈深色（我觉得是透光效果不好）。一般在4×下观察最能看出细胞的状态，此时能看到细胞呈梭形或是三角形。细胞铺展很厉害，细胞的透光效果增加，说明开始衰老。衰老的MEF最好不要做feeder,但是也不是完全不好。但是要是做转染或是感染的话，出现衰老的MEF就不行了。所以一般就是3代以内做。
我们用的就是WiCell的protocal养，和前面那位战友发的差不多。只是我们用1mg/ml Collengase IV消化40min，用什么酶不重要，我觉得最重要的就是种盘后的换液。原代2小时不管还有多少米贴都不要，传代复苏后一小时就换。消化的时候也是要舍得，0.05%Trypsin-EDTA(GIBCO)，5min消化不下来的也统统不要。因为健康的MEF就是易消化易贴壁。老化以及混杂的其他细胞（神经、上皮）就没那么快了。
篇9：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
早期研究使用的成纤维细胞生长因子(FGFs)主要来自牛脑和脑垂体的提取液，是大约150个氨基酸结构的酸性或碱性成纤维细胞生长因子(aFGF：FGF1或bFGF：FGF2)。其后分离的癌基因产物的细胞增殖因子与上述FGFs结构类似，也被分类在FGFs家族，并依次命名为FGF3~9〔1〕。目前已发现23种FGFs。现主要就多能FGFs结构和相关功能机制的研究进展进行综述。?
1发现和鉴定新的FGFs结构?
FGFs作为细胞间信号分子在胚胎发生和分化过程中起重要作用。FGFs是由约150~200氨基酸组成的多肽，相互之间的氨基酸序列有20%~50%是相同的〔2,3〕。其中心区域有大约120个氨基酸序列存在高度的同源性(30%~70%)。利用该区域的同源性，以人、小鼠或大鼠cDNA和基因组DNA为模板、采用同源序列PCR法进行新FGFs基因检测。当然，还可以采用T7噬菌体?cDNA显示法鉴定新FGFs。FGFs受体(FGFRs)是典型的膜结合酪氨酸激酶型受体。将FGFRs的胞外结构域在杆状病毒群(baculovirus)表达株表达，制成重组的细胞外结构域(可溶性FGF受体)。进而利用可溶性FGFRs与配体结合的特性，通过T7噬菌体cDNA显示法对互补cDNA文库进行筛选。?
通过同源序列PCR法，已经发现了6种新的FGFs基因(FGF10、FGF16、FGF17、FGF18、FGF20、FGF21)〔4〕。虽然T7噬菌体cDNA显示法能获得较多的阳性克隆，但不能确认是新发现的FGFs。随着人类基因组结构的解析及其DNA数据库被公开，通过基因检索进而又发现3种新的FGFs基因(FGF19、FGF22、FGF23)〔5,6〕，并发现FGF-22mRNA选择性表达于皮肤毛囊的内毛根鞘〔7〕。加上在探索视网膜特异性表达基因的过程中所发现的4种新的FGFs基因(即FGF11、FGF12、FGF13和FGF14)〔1〕，以及McWhirter等〔8〕在探索嵌合体同源结构域癌蛋白(chimerichomeodomainoncoprotein)E2A-Pbx1下游目标过程中发现的FGF15，迄今共鉴定出23种人或鼠FGFs。但是人FGF15和小鼠FGF19尚未被证实。人FGF19与小鼠FGF15显示很高的同源性(约50%)，且这两种基因都跟FGF3、FGF4基因的染色体邻接〔3〕，由此推断人FGF19是小鼠FGF15的相同体。由于人与小鼠其他FGFs结构之间的同源性达90%以上，因而除非FGF15和FGF19在进化过程中意外地发
篇10：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
人脐血间充质干细胞鉴定及用5-氮胞苷诱导后的生物学特性研究
目的 探讨脐血间充质干细胞经体外扩增纯化表面CD标志的.鉴定及在体外定向分化成心肌样细胞的诱导剂5-氮胞苷(5-aza)作用后的生物学特性.方法 健康妊娠产妇分娩的胎儿脐带血,分离单个核细胞进行培养、传代,取第3代以后细胞用流式细胞仪直接标记分析CD34、CD44、CD90细胞表面标志.10μmmol/L5-aza诱导4周后,进行透视电镜观察,并检测细胞肌球蛋白重链基因的表达.结果 体外纯化扩增后的脐血间充质干细胞含有与骨髓来源的间充质干细胞相同的细胞表面标志,第3代以后细胞纯度较高,经5-aza体外诱导培养可形成心肌样细胞.结论 脐血间充质干细胞经体外纯化扩增,第3代以后的细胞纯度较高,在体外经5-aza诱导定向分化为心肌样细胞后,其基本的生物学特性未发生改变.
作 者：黄景玲 Huang Jingling 作者单位：青海省心血管病专科医院 刊 名：青海医学院学报 英文刊名：JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE 年，卷(期)：2009 30(1) 分类号：Q813 关键词：脐血间充质干细胞 5-氮胞苷 生物学特性 心肌样细胞篇11：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
关键词：中华稻蝗,发生规律,防治技术,辽宁沈阳
近年来, 中华稻蝗已成为水稻区主要害虫之一, 发生面积不断扩大, 危害日趋严重, 对水稻正常生长发育和高产稳产构成严重威胁。为此, 笔者于2006~2007年对中华稻蝗在沈阳地区发生规律及其综合防治进行了研究, 现将研究结果报告如下。
1 发生规律
1.1 生活史
中华稻蝗属直翅目蝗虫科。通过各虫态的大量调查研究可知, 中华稻蝗在沈阳地区1年发生1代, 以卵在土壤里越冬。因受土质、地势、植被等影响, 卵的孵化期不一致。若虫期为5月下旬至8月下旬, 共6个虫龄, 少数雄虫为5龄, 约经90d左右;成虫9月上旬至11月初, 约60d左右。9月中、下旬交尾产卵, 成虫产完卵后相继死亡。
1.2 生活习性
(1) 成虫多在早晨羽化, 羽化后经15~30d才能交尾, 交尾后4d左右产卵。
(2) 雌虫产卵深度在土下1.5~2.0cm, 产卵最盛时为中午。由于产卵场所不同, 孵化时间也有先有后。一般高燥处先孵化, 低温处后孵化, 前后延续20d左右。因此, 虫龄很不整齐。
(3) 卵呈卵块产出, 呈囊状。卵多产于稻田的池埂、水边、堤岸、路边及附近的荒草地等, 在无水的稻田地里也可见卵块。
(4) 每个卵囊平均卵粒数为30粒左右, 每头雌成虫能产卵囊1~3块。
1.3 卵囊分布与孵化进度情况
(1) 卵囊分布情况。调查发现, 杂草长势对稻蝗的产卵量影响很大。在稻田的池埂上, 对卵囊分布情况调查, 分为无杂草覆盖、杂草覆盖25%、杂草覆盖50%、杂草覆盖100%和池埂上种豆5个等级, 每个等级调查9块地, 每块地调查3点, 每点取样面积为0.11m2, 调查结果见表1。从表1可以看出, 杂草覆盖率越高, 稻蝗的落卵量越大, 无杂草覆盖和种池埂豆的池埂产卵量少。因此, 防除杂草可以减少稻蝗的落卵量。池埂种豆可以控制杂草生长, 所以可降低稻蝗的落卵量。
注:调查地点为西淑、胡家、新兴;时间2006年4月25日;调查面积2.97m2。
(2) 卵囊的孵化进度。2006年春季, 采集50块卵囊, 用纱布包好, 埋入表层土壤中, 条件与自然环境相同, 5d调查1次, 观察卵囊的孵化进度。结果表明:苏家屯区的中华稻蝗从5月20日开始孵化, 高峰期在6月11~22日, 7月10日卵孵化完毕。
1.4 中华稻蝗在田间迁移进程
为了掌握若虫孵化后迁入本田的进程, 从6月5日开始对蝗蝻向田间迁移的过程进行调查研究。结果表明:稻蝗若虫在水田边取水食水稻叶片;3龄后陆续迁移本田, 离水田距田埂2m以内取食水稻叶片;4龄期进入水田距田埂5m以内;5~6龄进入全田。由此可见, 中华稻蝗若虫在3龄以前在池埂边、荒草地时是最佳防治时期。这时防治面积小, 稻蝗抗药性差, 防效高, 省时、省力、省药。
2 中华稻蝗对水稻的危害
在观测圃中进行叶片破损程度的调查, 调查5点, 每点5穴, 共25穴、429株, 调查结果见表2。从表2可以看出, 3片破损叶片占21.60%, 2片破损叶片占55.24%, 1片破损叶片占19.10%, 全叶片的占5.12%。
注:调查时间为2007年9月20日, 调查株数429株。
中华稻蝗危害叶片面积与叶产量的关系见表3。结果表明:在测报点中调查, 取危害程度不同的样本进行产量分析, 被中华稻蝗危害的叶片面积大小与产量损失成正比, 平均有1片叶被危害则减产率为9.2%, 平均有3叶被稻蝗危害则减产率达50.0%。
3 药剂防治技术研究
3.1 同一药剂不同施药时期试验
2007年在示范农场水稻田用28%稻乐丰300mL/hm2, 进行不同时期防治效果试验。处理日期分别为6月28日、7月4日、7月9日和7月14日。结果表明, 以6月28日施药最佳, 此时不但防治药效好 (防效达100.0%) , 而且所有的卵全部孵化, 可以达到理想的防治效果。
3.2 药剂筛选试验
2007年在示范农场水稻田进行药剂筛选试验。共设8个处理 (见表4) , 2次重复, 7月8日施药, 7月9日调查, 每个处理调查5m2。结果表明:7种药剂除了敌百虫外, 防效均达到90%以上。根据示范农场的测产调查, 施药区比对照区空秕率下降0.9%~5.1%, 千粒重增加0.9~1.5g, 单产增加7.0%~12.8%。
注:试验地点为示范农场;时间为2007年7月9日;调查面积5m2。
4 结论
根据以上研究可得出中华稻蝗防治的关键技术有以几点:一是提倡种池埂豆, 因杂草覆盖率越高, 蝗虫落卵量越多, 池埂种豆可减少蝗虫落卵量, 有利于控制蝗虫发生。二是3龄前的稻蝗若虫多活动于荒地和池埂边, 抗药性差, 此时是最佳防治时期, 可取得事半功倍的效果。三要做到统防统治, 避免稻蝗逃窜, 造成危害。
参考文献
篇12：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
活的`非可培养状态(VBNC)细菌是一类利用现行培养技术无法分离得到的微生物群,对传统微生物学产生了重要影响.特别是一些处于VBNC状态下的病原菌,一直是最令人担忧且不可忽视的研究对象.论文从种类、形态、排列、组成、致病性、抗原性、黏附性,以及复苏等方面综述了VBNC细菌的生物学特性,旨在更加深入了解和认识VBNC细菌,从而对VBNC病原菌的防控起到积极作用.
作 者：李影 王伟利 段锐 钱爱东 作者单位：李影,钱爱东(吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春,130118)
王伟利(吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心,吉林长春,130062)
段锐(吉林省辽源市畜牧总站,吉林辽源,136200)
篇13：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
小鼠孤雌胚胎干细胞系的建立及生物学特性鉴定
目的:探讨建立合适的小鼠孤雌胚胎干细胞建系方法.方法:采用氯化锶联合细胞松弛素B激活B6D2F1杂交小鼠卵母细胞,所获得的囊胚与桑椹胚分别用于孤雌胚胎干细胞的建系,观察两者的建系成功率.结果:共建立了12株小鼠孤雌胚胎干细胞系,这些细胞SSEA-1抗原阳性,SSEA-4,TRA-1-81,TRA-1-60表面抗原阴性,具有AKP活性,保持正常染色体核型,体内外分化分别形成畸胎瘤和拟胚体.结论:采用囊胚和去透明带的`桑葚胚建立孤雌胚胎干细胞系获得成功.该方法为人类纯合子的胚胎干细胞建系提供基础,在自体细胞治疗领域中具有潜在的应用价值.
作 者：银益飞 孙筱放 蒋永华 张文红 郑育红 孔舒 潘倩莹 廖宝平 作者单位：广州医学院第三附属医院妇产科研究所,广东,广州,510150 刊 名：现代生物医学进展 ISTIC英文刊名：PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年，卷(期)：2007 7(7) 分类号：Q2-33 关键词：孤雌激活 胚胎干细胞 氯化锶 细胞松弛素B 小鼠篇14：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
紫穗槐幼苗在不同干旱胁迫下生长特性的研究
干旱对紫稳槐幼苗的茎高、地径、叶片外部形态、生长状态等生态指标的影响的结果表明:干旱胁迫对植株的生长有明显的.抑制作用.随着干旱胁迫时间的延长、胁迫强度的加剧,其株高和地径减小,复叶叶柄总长度、小叶数量,叶面积也逐渐减小;在长时间干旱胁迫下紫穗槐采用脱落下部枝叶的方式,确保个体生存以增强抗旱性.
作 者：崔大练 马玉心 作者单位：浙江海洋学院海洋科学学院,舟山,316000刊 名：林业科技 PKU英文刊名：FORESTRY SCIENCE & TECHNOLOGY年，卷(期)：35(3)分类号：S793.2 S728.2关键词：紫穗槐 干旱胁迫 生长特性 幼苗
篇15：案事件系统数据库的备份与恢复
我省的案事件系统是金盾工程建设中的一个重要子项目,主要是为了实现刑事案件受理、立案到破(销、结)案各个工作环节中涉及的案件信息的规范化管理,实现基层法律文书的规范制作和对案件相关情况的交叉检索和统计,依托公安计算机网络实现公安机关内部各业务部门之间、上下级之间以及各警种之间信息的快速传递、共享和协同工作,及时、动态地反映案件发破的真实情况,开展大范围的串并案侦查和深层次的信息分析、情报研究,提高刑侦部门主动发现犯罪线索的能力,提高侦查办案的水平、效率和质量,提高上级部门对下监督、指导的力度。案事件信息系统涉及公安机关办理案件的过程中的大量信息,这些信息的安全性非常重要,不容有失,因此制定安全、完整、高效的数据库备份与恢复策略成为必然。
我省案事件系统中采用了ORACLE数据库系统,本文就分别从数据备份和恢复两个方面来描述当前相应的操作过程和计划。
2 数据库备份
ORACLE数据库有导出、热备份和冷备份等3种标准的备份方法,其中导出逻辑备份,热备份和冷备份是物理备份。案事件系统的备份推荐采用导出和冷备份结合的方式进行。建议推荐如下的备份计划:(1)如果数据处理量繁多,每周周未进行一次导出。(2)如果数据处理量繁多,每个月月底进行一次冷备份。(3)将备份出来的文件转移到其他文件服务器上存放,建议同时采用光盘的方式存放。下面分别说明导出和冷备份的操作过程。
2.1 导出备份
利用ORACLE系统的EXPORT工具将数据从数据库中提取出来,以便采用IMPO RT工具将数据重新送入数据库中。ORACL E系统中有简单导出数据和增量导出数据两种操作方式,通常采用增量导出数据的方式提高数据导出的效率。增量导出是一种常用的数据备份方法,它只能对整个数据库来实施,并且必须用SYSTEM账号来导出。在进行此种导出时,系统不要求回答任何问题。导出文件名缺省为export.dmp,如果不希望自己的输出文件定名为export.dm p,必须在命令行中指出要用的文件名。
增量导出包括3种类型:“完全”导出,即逻辑备份整个数据库。“增量型”增量导出,备份上一次备份后改动的数据。“累计型”增量导出,累计型导出方式只是导出自上次“完全”导出之后数据库中变化了的信息。
数据库管理员可以安排一个导出日程表,用增量导出的3种不同方式合理高效地完成逻辑备份。比如数据库的导出任务可做如下安排,按照这个顺序循环进行:(1)初始进行导出,做一次完全导出;接着每个月做一次完全导出(假设导出文件为A);(2)接着每天做一次“增量型”增量导出;(假设导出文件为B);(3)接着每星期做一次“累计型”增量导出;(假设导出文件为C)。如果数据库遭到意外破坏,就可以用最近的3个文件进行恢复,步骤将在下一节恢复中说明。
2.2 冷备份
冷备份发生在数据库已经正常关闭的情况下,当正常关闭时会提供一个完整的数据库。冷备份是将关键性文件拷贝到另外位置的一种说法。对于备份Oracle信息而言,冷备份是最快和最安全的方法。一般情况下,冷备份最好每月做一次。
冷备份中必须拷贝的文件包括:所有的数据文件;所有的控制文件;所有的联机redo log文件;数据库初始参数文件。
冷备份操作可按照如下操作顺序进行:(1)关闭数据库。(2)用拷贝命令(在linu x系统下可以用cp或者tar命令)将列出的文件备份到预定目录。首先查出数据文件和控制文件的存放位置;查出联机redo log文件、数据库的初始参数文件、案事件系统的初始化参数。用vi编辑器写一个脚本backu p.sh,用cp命令将上述所有文件拷贝到预定的备份目录。(3)重新启动数据库。
3 数据恢复
一旦数据库遭到意外破坏,只要有了上面正确而有效的备份,数据库管理员就可以选择合适的方式快速恢复数据库。因为导出和冷备份的操作周期不同,所以可以根据数据库破坏的程度以及不同类型备份的数据完整性来选择恢复的方式。
下面分别说明根据导出备份进行恢复以及根据冷备份进行恢复。
3.1 导入
导入是导出的逆过程,将保存在导出文件中的数据重新处理回数据库中。比如根据导出中的示例,可以按照如下的操作过程进行恢复。
用create database命令重新生成数据库结构;完全增量导入;“增量型”增量导入或者“累计型”增量导入,取决于数据库崩溃时所完成的备份。
对于用户导出的方式则不用重新生成数据库结构,只要在新库建立相应的用户,赋予相应的权限和建立该用户对应的表空间即可导入。
3.2 冷恢复
冷恢复只需将冷备份的文件拷贝回去,目录结构、文件名不变,便很容易恢复到某个时间点上,并能与归档方法相结合,做数据库“最新状态”的恢复。冷恢复前也需要将数据库关闭,完成的时间取决于数据量的多少,完成后将数据库启动,即恢复正常。
4 结语
根据我省案件信息系统硬、软件配备和应用情况,目前最适合的数据安全策略是导出备份和冷备份的综合备份方式,备份数据一般为两份拷贝,异地保存。如遇需恢复数据的紧急情况发生时,采用先导入恢复的方式进行,如出现意外,则使用与冷恢复结合的方式进行,确保数据的绝对安全。
参考文献
[1]李海波.Oracle数据库的安全及备份恢复[J].电脑知识与技术,2004年11期.
[2]张海龙,王德江.Oracle数据库的安全策略[J].信息技术,2001年07期.
篇16：大熊猫皮肤成纤维细胞在不同培养液中的生物学特性研究
目的 探讨皮质、海马来源的神经干细胞增殖特性的异同,为神经干细胞基础和临床研究在取材部位上提供参考资料.方法 无菌条件下分别分离E11-15天小鼠胚脑皮质和海马,经胰酶消化及机械吹打制成单细胞悬液后,在含B27和bFGF的DMEM/F12 24孔板中培养扩增,倒置显微镜观察比较生长状况,免疫细胞化学染色技术鉴定神经干细胞,采用BrdU掺入法检测不同部位来源NSCs的`增殖情况.结果 小鼠胚胎脑皮质与海马均存在神经干细胞,皮质部位神经干细胞比海马部位神经干细胞更易培养,也更易成球,前者神经球数目、BrdU阳性细胞率也明显高于后者.结论 同样条件下皮质神经干细胞比海马神经干细胞更易培养和增殖.
作 者：何精选 王艳炜 程雄飞 戴冀斌 作者单位：何精选,王艳炜,程雄飞(武汉大学中南医院,湖北武汉,430071)
戴冀斌(武汉大学基础医学院解剖学教研室,湖北武汉,430071)