生物安全实验室规范

生物安全实验室规范（共6篇）

篇1：生物安全实验室规范

上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范 第一章 总则

第一条 为加强本院病原微生物实验室生物安全管理，防止病原体通过实验室向外环境扩散和实验室感染，保护实验室工作人员和公众的健康，根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2004）、《生物安全实验室建筑技术规范》（GB50346－2004）和卫生部《人间传染的病原微生物名录》（以下简称《名录》）制定本规范。

第二条 本院对病原微生物实验室实行“预防为主、分级管理、单位负责、突出重点、保障安全”的管理原则。

第三条 病原微生物实验室是指从事《名录》中所规定的适用于（A）BSL-1和（A）BSL-2防护等级的病原微生物相关实验活动的场所。

第四条 本规范适用于本市范围内的一、二级病原微生物实验室。

第五条 本规范为病原微生物实验室生物安全管理的基本要求。第二章 管理要求 第一节 组织管理

第六条 实验室设立单位的法定代表人对本单位实验室安全负责，其主要职责为：

（一）负责建立本单位生物安全管理体系，落实生物安全管理责任部门或责任人；

（二）定期召开生物安全管理会议，对实验室生物安全相关的重大事项作出决定；

第七条 实验室生物安全管理责任部门或责任人的主要职责为：

（一）负责组织制（修）订和实施实验室生物安全手册、生物安全规章制度、操作规范和标准操作规程；

（二）负责组织对涉及的生物因子、使用动物、重组DNA以及基因修饰物质的研究方案进行审查和风险评估；

（三）负责对本单位实验室生物安全防护，微生物菌（毒）种和生物样本保存和使用，实验室安全操作，实验室废气、废水、废弃物处置和消毒灭菌等规章制度实施情况进行监督、检查，并定期评估实施效果；

（四）负责定期调查、了解实验室工作人员的健康状况和健康监护情况；

（五）组织生物安全知识培训并评估培训效果。

第八条 实验室负责人为实验室生物安全第一责任人，其主要职责为：

（一）全面负责实验室生物安全工作；

（二）决定并授权进入实验室的工作人员；

（三）监督有关法规和标准操作规程的执行，纠正违规行为并有权作出停止实验的决定；

（四）任命实验室生物安全管理员具体落实实验室生物安全管理工作；

（五）负责制定和实施实验室应急处置预案；

（六）负责实验室安全事故的现场处置和调查，并将调查结果以及处理意见向设立单位生物安全管理责任部门或责任人报告；

（七）负责对涉及感染性物质的研究计划、方案以及操作程序等，实施前的生物安全审查。

第九条 实验室生物安全管理员的主要职责为：

（一）负责实验室生物安全保障以及技术规章方面的咨询工作；

（二）就技术方法、程序和方案、生物因子、材料和设备进行定期的内部安全检查；

（三）纠正违反生物安全操作规程的行为；

（四）在出现潜在感染性物质溢出或其他事故时，协助事故调查；

（五）检查和监督实验室废弃物的有效管理与安全处置；

（六）检查和监督实验室各项消毒灭菌措施的落实情况。

第十条 实验室应建立健全生物安全管理制度，编写生物安全手册，手册应包括以下内容：

（一）实验室生物安全管理体系

（二）生物因子生物危害评估

（三）实验室人员和项目准入制度

（四）人员培训考核制度

（五）人员健康监护制度

（六）生物安全检查制度

（七）实验室人员生物安全行为规范

（八）实验室内务管理制度

（九）实验室菌（毒）种和生物样本安全保管和档案管理制度

（十）实验室废弃物管理制度

（十一）实验室消毒隔离制度

（十二）实验室生物危险标识使用规定

（十三）事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度

（十四）实验室应急处置预案

（十五）实验活动生物安全标准操作规程

（十六）其他必要的管理性和技术性文件 第二节 备案

第十一条 本市开展《名录》中所规定的病原微生物相关实验活动的一、二级病原微生物实验室，应按《关于在本市开展病原微生物实验室备案工作的通知》的规定向所在区（县）卫生局卫生监督所备案。二级实验室还应向所在区（县）公安机关备案。第三节 人员管理

第十二条 实验室应建立工作人员上岗考核制度，所有与实验活动相关的人员都应经过培训并取得上岗资质。

第十三条 培训对象应包括实验室管理人员、实验室技术人员、样本运输人员、废弃物处置人员、仪器设备维修人员等。

第十四条 培训内容应包括实验室生物安全的基本知识、基本技能、消防和应急处置预案、化学和放射安全、生物危险和传染预防、应急救护等课程。

第十五条 实验室相关人员应每年接受生物安全培训。培训组织机构应采取有效方法对培训的效果进行评估。实验室设立单位应建立人员培训档案。

第十六条 实验室应定期对实验人员开展与其从事实验活动相关的健康体检，建立人员健康档案。

第十七条 实验室工作人员应在身体状况良好的情况下进入实验区工作，若出现疾病、过劳状态或其他意外状况，则不应进入实验区或立即退出实验区。第四节 菌（毒）种和生物样本管理

第十八条 生物样本采集应符合国家有关规定和技术标准的要求。

样本采集人员应掌握相关专业知识和操作技能，并具有与采集病原微生物样本危害等级相适应的生物安全防护装备和防止扩散污染的措施。

样本采集人员应对样本的来源、采集时间、采集人员等做好记录。

第十九条 高致病性（或疑似）的病原微生物菌（毒）种和生物样本的运送应按《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或生物样本运输管理规定》执行。

非高致病性的病原微生物菌（毒）种和生物样本的运送应由专人负责，专车运送，运送人员应经过培训取得相关资质，不得通过公共交通工具运送，运送过程应采取相应的防护措施。运输过程中发生意外状况，运送单位、运送人、接受机构应按国家有关规定，采取必要的应急措施。

第二十条 单位内部运送病原微生物菌（毒）种和生物样本的容器或包装材料应满足生物安全防护的要求，应密封，防水、防破损、防外泄。

外送病原微生物菌（毒）种和生物样本的容器或包装材料应满足国际民航组织《危险品航空安全运输技术细则》（Doc9284包装说明PI650）规定的B类包装要求。

最外层的容器或包装材料上应按规定做好生物安全警示标识。

第二十一条 实验室保藏菌（毒）种和生物样本应符合国家相关规定。病原微生物实验室菌（毒）种或样本保藏部位为内部治安保卫的重点，有关实验室内部治安保卫管理应严格按照国务院第421号令《企业事业单位内部治安保卫条例》执行。

第二十二条 实验室应指定专人负责菌（毒）种和生物样本的保藏，双人双锁，并建立所保藏的菌（毒）种和生物样本名录清单。

保藏的菌（毒）种和生物样本应设立专册（卡），详细记录名称、编号、来源、鉴定的日期和结果、鉴定者、所用的培养基、保藏的方法、传代次数等。

第二十三条 实验室应建立菌（毒）种和生物样本的销毁制度，销毁保存的菌（毒）种和生物样本应经实验室负责人批准，并在专册（卡）上注销并注明原因、时间、方法、数量、经办人等。

第五节 实验室环境、设备与器材的消毒和废弃物的处置

第二十四条 实验室应根据相关标准的要求结合实验工作的类型、操作生物因子的特性选择适宜的消毒方法。

应编写包括针对各种设施、设备、工作环境、污染状态的消毒程序的操作规程。

应根据《医院消毒卫生标准》（GB15982-1995）的规定采用有效手段监测消毒效果，并要作好书面记录。

第二十五条 实验室空调系统应定期维护、清洗消毒，并有书面记录，空调系统清洗消毒应委托有资质的机构承担。

第二十六条 实验室应根据国家规定的要求建立实验器材和废弃物无害化处置工作程序。

实验器材和废弃物处置应由专人负责。

实验室污水须经无害化处理后排放。

实验用一次性个人防护用品和实验器材、弃置的菌（毒）种、生物样本、培养物和被污染的废弃物应在实验室同一建筑内消毒灭菌，达到生物学安全后再按感染性废弃物收集处理。

实验用非一次性个人防护用品和实验器材，应放置在有生物安全标记的防漏袋中送至指定地点消毒灭菌后方可清洗。运送过程中应防止有害生物因子的扩散。

经生物无害化处理后的废弃物包装必须符合要求，并有中文标签，标签内容包括产生部门、日期、类别等。

实验废弃物最终处置必须交由经市环保部门资质认定的医疗废物处置单位集中处置。

第二十七条 其他可能接触感染性或潜在感染性材料的相关场所的消毒和废弃物处置应根据实际工作需要参照本规范的要求执行。第六节 应急处置

第二十八条 实验室应建立意外事件应急处置系统，制订针对意外暴露和事故等状况的应急预案。应急预案应包含以下内容：

（一）对暴露病原微生物的检测和生物危害评估。

（二）明确高危险区域和地点。

（三）明确可以暴露于危险或受感染的人员及其这些人员的转移通道。

（四）列出能够接受暴露或感染人员进行治疗、隔离的单位和运送方案。

（五）列出事故处理需要的免疫血清、疫苗、药品、特殊仪器和其他物资的来源。

（六）列出应急状态下所需的装备和制剂的名录及存放地点。

（七）明确事故处理的责任人员及其所承担的职责。

（八）其他必须明确规定的事项。

第二十九条 实验室的应急预案应每年培训或演练，所有工作人员应熟练掌握应急处置操作程序等有关事项。第三章 技术要求

第一节 生物危害评估

第三十条 在建设实验室或开展实验活动之前，实验室设立单位的生物安全责任部门或责任人应参照卫生部《名录》组织各相关方面的专家对拟操作的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性、应急预案的有效性等因素进行评估，确定相应的生物安全防护水平等级。

第三十一条 实验室生物危害评估结果应由设立单位的法定代表人签字认可，并归档保存。

第二节 设施设备

第三十二条 实验室所用设施、设备和材料均应符合国家相关标准和规定要求。

第三十三条 二级病原微生物实验室的设施设备要求

（一）可设在共用建筑内，但应相对独立，设可自动关闭的带锁的门。

（二）实验时门应呈关闭状态，在实验结束后实验室应呈锁闭状态。实验室的门或墙上应有可视窗。

（三）在室内应配备生物安全柜，生物安全柜的型号应根据实验的项目和对象确定。生物安全柜应放在气流流动少，人员走动少，离出口处较远的位置，周围留有一定的空间。

（四）当对可能产生气溶胶的感染性材料样本的操作无法在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，应加装负压罩。

（五）在所在的区域内应配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，作好记录，确保消毒效果和使用安全。高压蒸汽灭菌器的安全、计量鉴（检）定和管理应符合国家压力容器管理的有关规定，使用人员应作好使用记录。

（六）在室内应设有洗眼装置，必要时应设紧急喷淋。

（七）应保障实验室的通风和换气，可采用自然通风，如采用机械通风，应保证有不少于每小时3-4次的通风换气次数。

（八）应有可靠的电力供应和应急照明。保证紧急情况下基本设备的用电需要。

（九）在门口应有二级生物安全防护水平实验室标识。

（十）有特殊要求的专用实验室按其要求执行。

第三节 个人防护

第三十四条 实验室使用的个人防护用品应符合国家相关标准和规定的要求。

应在生物危害评估的基础上，按防护级别的要求选择适当的个人防护用品。防护用品的选择、使用和维护应有明确的规定。

第三十五条 二级病原微生物实验室个人防护要求：

（一）进入工作场所操作时应穿专用防护服，戴防护帽和防护口罩，必要时使用面部保护装置。

（二）在从事有可能出现渗漏的实验工作时，应穿戴防水鞋或防水鞋套。

第三十六条 其他可能接触感染性或潜在感染性材料相关场所的个人防护应根据实际工作需要参照同等级的病原微生物实验室要求执行。

第四节 安全操作

第三十七条 实验室应在危害评估的基础上，对实验活动过程和所有对安全性有较大影响的特定实验活动制定标准操作规程，这些规程应包括以下内容：

（一）相关实验和检测项目生物安全操作规程；

（二）移液管和移液辅助器使用规程；

（三）生物安全柜使用规程；

（四）离心机使用规程；

（五）匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器使用规程；

（六）尖锐利器使用规程；

（七）样本分离操作规程；

（八）洗手操作规程；

（九）其他有必要制定的操作规程。

第三十八条 实验室应建立人员进出登记制度，禁止非工作人员进入实验室。特殊情况下，非工作人员进入实验室的须经实验室负责人批准，由专人陪同，并做好登记。

第三十九条 实验室应建立内务管理制度，个人物品不允许带入实验区。

第四十条 对会产生气溶胶或高浓度或大容量感染性材料的样本进行高风险实验操作时（包括离心、混匀、超生雾化和剧烈搅拌等），实验室应使用密封的离心机转子、安全的离心杯或样本储存容器，并只允许在生物安全柜或负压罩中开闭、装载和操作。

第四十一条 实验室应确保检测报告的生物无害性，宜采用电子通讯方式在清洁区打印、发放报告。在污染区出具的检测报告，需经消毒处理，达到生物安全后方可发出。

篇2：生物安全实验室规范

近几年来，我国陆续出台了多部有关实验室生物安全的规范与标准，实验室的生物安全越来越受到人们的重视。本文就实验室生物安全的相关规范与标准作一简要叙述，供大家参考。

1、病原微生物实验室生物安全管理条例及其配套文件

2004年11月12日，国务院发布第424号国务院令，公布《病原微生物实验室生物安全管理条例》。

条例分为七章：总则、病原微生物的分类和管理、实验室的设立与管理、实验室感染控制、监督管理、法律责任、附则，共72条。

该条例颁布后，农业部和卫生部相继出台了配套文件。

农业部文件包括《动物病原微生物分类名录》、《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》和《高致病性动物病原微生物实验室生物安全管理审批办法》。

卫生部文件包括《人间传染的病原微生物名录》和《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》。

2、医疗废物管理条例及配套文件

《医疗废物管理条例》（第380号国务院令）已于2003年6月4日国务院第十次常务会议通过，并予公布，自公布之日起施行。

条例分总则、医疗废物管理的一般规定、医疗卫生机构对医疗废物的管理、医疗废物的集中处置、监督管理、法律责任、附则，共7章57条。

条例适用于医疗废物的收集、运送、贮存、处置以及监督管理等活动。根据条例规定，任何单位和个人有权对医疗卫生机构、医疗废物集中处置单位和监督管理部门及其工作人员的违法行为进行举报、投诉、检举和控告。

根据《医疗废物管理条例》，卫生部和国家环境保护总局制定了《医疗废物分类目录》、《医疗废物管理行政处罚办法》。卫生部颁布实施了《医疗卫生机构医疗废物管理办法》（2003年8月14日经卫生部部务会议讨论通过）。国家环保总局颁布实施了《医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定》(环发[2003]188号)和《医疗废物集中处置技术规范》（试行）（环发[2003]206号）。

3、实验室生物安全通用要求

国家标准《实验室生物安全通用要求》（GB 19489—2004）已于2004年5月28日颁布，于该年10月施行。

标准规定了实验室建设和实验室生物安全管理的原则，内容包括：危害程度和生物安全分级；实验室设施和设备的配置要求；个人防护和实验室安全行为；动物实验室的生物安全等；对实验室的管理（如操作规程、水电、消防等）也作了特别要求。

本标准不仅适用于医学实验室，而且适用于进行各个级别的生物因子操作的各类实验室。

4、生物安全实验室建筑技术规范

建设部2004年8月3日发布公告，《生物安全实验室建筑技术规范》（GB 50346－2004）自2004年9月1日起开始实施。该规范的实施改变了长期以来我国在生物安全实验室建设、建筑技术方面缺乏统一标准的局面。

该规范内容包括生物安全实验室建筑平面、装修和结构的技术要求，实验室的基本技术指标要求，空气调节与空气净化、给水排水、气体供应、配电、自动控制和消防设施配置以及施工、验收和检测的原则、方法等各个方面。它适用于微生物学、生物医学、动物实验、基因重组以及生物制品等使用的新建、改建、扩建的生物安全实验室的设计、施工和验收，并明确生物安全实验室的建设应以生物安全为核心，确保实验人员的安全和实验室周围环境的安全，同时根据实验需要保护实验对象不被污染，在建筑上应以实用、经济为原则。

5、兽医实验室生物安全管理规范

为加强兽医实验室生物安全工作，防止动物病原微生物扩散，确保动物疫病的控制和扑灭工作以及畜牧业生产安全，农业部根据《中华人民共和国动物防疫法》和《动物防疫条件审核管理办法》的有关规定，参照国际有关对实验室生物安全的要求，制定了《兽医实验室生物安全管理规范》。并于2003年10月15日颁布施行。

6、传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法

传染性非典型肺炎是一种严重的传染性疾病。为确保生物安全，防止实验人员感染和污染环境，科技部组织制定了《传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法》，于2003年5月12日颁布施行。

该办法对从事传染性非典型肺炎病毒研究的实验室实行分级管理。实验室分为：传染性非典型肺炎病毒实验室、传染性非典型肺炎病毒感染小动物实验室、传染性非典型肺炎病毒感染大动物实验室。

该办法明确规定了实验室的组织管理、规章制度和健康医疗监督等管理要求。

7、生物安全柜行业标准

目前国内有关生物安全柜的行业标准有两部，分别是国家食品药品监督局(SFDA)制定的YY0569-2005（2005年7月18日颁布，2006年6月1日实施）以及建设部颁布的JG170—2005(2005年3月25日颁布，2005年6月1日实施)。两大标准分别由以下特色：

SFDA的标准以目前世界最权威的NSF49标准为基础，并收纳了EN12469中生物挑战试验中的精华部分：KI-Discus 测试。在安全柜性能要求上，YY0569-2005标准考虑到中国实际情况，提出了对安全柜下沉气流和进气流风速显示及声光警报系统等性能的要求。这项要求是NSF所没有的，因为美国市场具有很好的统一性，安全柜认证技术人员可以随时随地提供技术支援，而中国缺乏完善的认证系统，这些要求将对生物实验室的科研人员的安全提供了保障。

建设部的标准在NSF49和EN12469的基础上增加了一些特色测试要求，比如安全柜洁净度的测试要求，建设部的标准在某些项目的要求甚至高于NSF49，比如对安全柜噪音的要求。这两大标准各有特色，对规范中国安全柜市场将起到重要作用。

8、微生物和生物医学实验室生物安全通用准则

2002年12月3日，国家卫生部发布了卫生行业标准《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则（WS233-2002）》，该准则于2003年８月１日开始实施。但鉴于医疗机构微生物和生物医学实验室的实际状况以及生物安全要求的特殊性，卫生部于2003年8月19日发布通告（卫通[2003]14号），宣布医疗机构推迟两年执行该准则。在此期间，卫生部将组织有关专家，针对医疗机构微生物和生物安全实验室的特点对该准则进行适当的补充完善，另行下发。

9、国际标准规范

篇3：生物安全实验室规范

《全日制义务教育生物课程标准 (实验稿) 》明确要求学生正确使用显微镜等生物学实验中常用的工具和仪器, 具备一定的实验操作能力, 初步具有生物学实验操作的基本技能, 一定的科学探究和实践能力。生物是一门实验性科学, 平时注重实验教学对培养学生学习生物兴趣、提高生物成绩是至关重要的, 因此作为一名生物教师, 除了具有渊博的学科知识之外, 还应掌握熟练的实验操作技能。

为了促进学校加强初中生物实验教学, 开足开齐初中生物实验, 让教学资源充分发挥效益, 提高教学质量, 培养学生的实践能力和创新精神, 在高淳县教育局领导支持下, 县教育研训中心和县技术装备办合作举办了初中生物实验技能培训和比赛, 准备选拔优秀初中生物教师及实验员参加省、市实验技能大赛。笔者有幸被聘任为本次实验技能培训指导教师, 并对培训过程中出现的一些现象进行了思考。

一、生物实验操作应科学规范

在培训中, 笔者详细介绍了实验操作的重点和难点, 在进行实验操作时一人一组, 每个实验都要求教师独立完成, 力求理论与实践相结合, 同时, 结合我校生物实验教学中的困惑与他们面对面进行了交流。培训中, 教师们听得很认真, 边听边记笔记, 非常好学。动手实验中, 虽然实验现象较明显, 但实际操作中出现了一些不规范的现象。如用滴管滴加碘液时, 有部分教师将滴管伸进了试管, 水浴加热时, 部分教师将温度计碰到烧杯壁或将温度计随便放在烧杯底, 等等。教师都受过高等教育, 应该掌握了基本的实验操作, 在理论上知道应该怎样操作, 但在实际操作时不经意间出现了一些不规范的操作。究其原因:一是平时实验做得少, 实验操作有些生疏;二是思想上对规范操作重视不够, 有随便、应付之嫌。教师的一言一行, 一举一动, 学生都喜欢模仿, 不规范的操作将会给学生带来不良影响, 因此, 生物教师一定要时时处处为学生做出榜样, 凡是教师要求学生做到的, 自己首先要做到, 教师在做演示实验时应科学规范。

二、生物实验需要教师注重创新

教师虽然开展了实验教学, 但由于部分实验因为种种原因出现现象不明显甚至实验不成功等结果, 教学中倍感困惑。笔者认为, 实验教学前一定要对实验进行深入细致地研究, 分析在实验中可能存在或发生的问题, 做好充分的准备, 有条不紊地引导学生实验, 出现意外现象影响正常实验教学时要冷静对待并同学生一起共同探究。如在“探究光对鼠妇生活的影响”时, 适值阴雨天, 光线较暗, 光线对鼠妇的影响很小, 学生普遍感到困惑, 笔者提示学生光线偏暗, 怎么办呢?当时我们是用装鞋子的纸盒来做实验的, 有学生想到把鞋盒举高了对着教室内的日光灯, 鼠妇纷纷爬向阴暗的角落, 现象非常明显。还有的学生想到可以用手电筒来增加亮度。这充分说明了学生在实验过程中会受到激发产生灵感和创新。

又如在“观察蚂蚁的运动器官和步伐”时, 课本指导是将蚂蚁放入纸盒中, 在纸盒的一端放置一些糖, 然后观察蚂蚁的步伐。实际操作中, 蚂蚁的爬行速度较快, 足细小, 学生难以观察到蚂蚁的步伐。笔者提示学生怎样才能使蚂蚁的步伐慢一些?引导学生讨论如何让蚂蚁的步伐慢下来, 他们很快联想到人在行走时因为路面、坡面、负重、风吹等情况行进速度会受到不同程度的影响。如何改进实验让蚂蚁的步伐慢下来, 经过学生的多次探究和师生交流, 我们总结了5种方法: (1) 先在玻璃板下垫上一张白纸, 将30%的蔗糖溶液均匀地涂在玻璃板上, 然后撒上薄薄的一层粉笔灰, 再将蚂蚁放上去, 用放大镜来观察。 (2) 将宽条的透明胶展平, 透明胶有粘性的一面朝上, 透明胶下垫上一张白纸, 撒上薄薄的一层粉笔灰, 再将蚂蚁放上去, 用放大镜观察。 (3) 将湿润的烧杯正放, 将蚂蚁放入烧杯底, 用放大镜观察在烧杯壁上爬行的蚂蚁的步伐。 (4) 将一些较大的米粒放入纸盒, 纸盒底事先垫上一张白纸, 用放大镜观察搬取米粒的蚂蚁的步伐。 (5) 将蚂蚁放在一张白纸上, 边用嘴均匀地吹气, 减缓蚂蚁的步伐, 边用放大镜来观察。在实验教学中, 教师要放手让学生动手实验, 在实践中发现问题、分析问题、解决问题, 体验科学探究的乐趣。实验的多变性又常常促生灵感的闪现, 教师要敏锐捕捉那些稍纵即逝的智慧火花, 准确把握“意外”带来的教育契机, 将使实验教学出现精彩的生成。实践也证明, 学生主动参与实验设计、操作过程, 获得具体的经验, 不仅有利于学生主动完成知识构建, 深刻理解和掌握所学内容, 而且能促进学生主体性 (自主性、主动性、创造性和社会性) 的发展。

三、生物实验教学需要重新审视

培训过程中, 从教师们的口中得知, 部分学校生物实验室虽然配备了实验员, 但不是生物专业实验员。这是一件非常糟糕的事情, 说明学校领导在人事安排上不谨慎。笔者认为, 非专业教师做生物实验员, 首先, 对实验器材没有感情, 不会深入了解和钻研器材的性能, 在生物实验方面无法和生物教师进行专业交流;其次, 无法做到专业地协助生物教师开展生物实验教学。另外, 很多学校实验器材不足, 甚至配备不全, 培训中有些仪器教师没有在他们学校见过。高淳县不同地区的学校在规模、环境、师资、资金以及体制方面都存在一定的差异, 教师应因地制宜, 积极发挥现有设备的作用, 提高生物教学质量。同时也应鼓励学生和教师一起充分利用身边廉价的器具和材料, 设计富有创造性的实验和实践活动。例如, 在“观察细胞中的叶绿体”时, 生物教科书建议用黑藻或绿色植物的叶片, 高淳县地形东高西低, 分为圩区、半山半圩、山区3大类, 我校处于半山半圩, 靠近固城湖, 取用固城湖中的黑藻比较方便, 观察黑藻细胞中的叶绿体非常明显。但对于山区的中学来说, 要想找到黑藻确实困难, 学校生物教师及时查找资料和动手实际操作, 寻找山区绿色植物中含叶绿体较多的植物。笔者建议他们首先寻找校园内的绿色植物的叶片, 如香樟、黄杨、桂花、银杏等植物的叶片, 发现细胞中的叶绿体不明显;其次走出校园寻找田野里的绿色植物, 青菜叶中的叶绿体较明显;另外经查找资料得知, 每平方毫米的蓖麻叶含有3×107~5×107个叶绿体。于是他们选用当地大片种植的蓖麻叶来观察, 同样观察到了非常明显的叶绿体。

四、利用生物实验操作考查促进实验教学

目前, 南京市初中物理和化学学科有实验操作考查, 但初中生物学科没有实验操作考查。培训过程中, 教师反映部分学校很少做实验, 很多实验只是“纸上谈兵”, 仍然能在南京市初中生物学业水平测试中取得不错的成绩, 由此直接导致部分教师和学生对实验不认真做甚至不做。笔者认为从笔试中很难考查实验教学质量, 生物教学应着眼于培养学生终身学习的愿望和能力, 体现义务教育阶段生物课程的普及性、基础性和发展性。南京市从2008年开始对全市初中毕业生进行物理和化学两门学科实验操作考查, 考查结果供招生学校参考。为切实

参考文献

[1]汪忠, 刘恩山.生物课程标准解读[M].北京:北京师范大学出版社, 2002

[2]汪忠.生物[M].江苏:江苏教育出版社, 2007

篇4：生物安全实验室规范

关键词：二轮复习;回归;规范;深化

在二轮复习中，怎么提高学生的实验综合能力，规范解题能力，是值得我们研究的一个问题。本文介绍回归、规范和深化的复习三部曲（策略）来提升学生的实验备考能力。

一、回归——明白高考实验试题考查特点

1.明确高考考纲的要求

（1）能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。（2）具备验证简单生物学事实的能力，能设计实验、提出实验思路，并能对实验现象和结果进行分析、解释和处理。（3）具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、调查、实验、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。（4）能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订。

2.研究近5年高考实验试题的特点，明确规律

通过对浙江省高考课改自主命题以来5年试题的研究，找出命题的高频率考点，并预测2015年的命题方向，使学生心中有数，从容备考。

命题规律：

（1）考查材料均是动物（第32题考查的材料均是植物），要么是动物培养，要么是细胞培养。

（2）降低“实验原理”难度，以“分析和讨论”形式考查。

（3）目的考了2次，实验步骤考了3次，预测考了5次，结论考了1次;实验原理（以分析讨论形式出现）考了4次。

（4）每次均有“说明”，看清才能有的放矢。

（5）每年均考“实验结果预测”，形式有曲线图（包括单曲线和双曲线）和表格。

（6）可能考虑到批阅的难易，10～12答案字数也逐年下降，2013、2014年增加了分析讨论的容量，但以填空或表格形式出现，也有利于快速批阅。

二、规范——知道高考实验试题评分标准

1.掌握实验设计方案中各环节的答题规范

（1）实验题目的书写规范

探究/研究/验证（自变量）对实验对象（因变量）的影响。

（2）实验目的书写规范

实验目的、实验假设、实验结论高度相关，只要知道其中之一，就可知道另外两者。

（3）实验步骤的书写规范

（4）实验预期的书写规范

（5）实验结果的书写规范

这里还要注意实验结果和实验结论的区别，实验结果是客观的事实，展示的形式一般是肉眼直接观察到或借助测量工具测得的数据，而实验结论是透过现象看本质得出的實质东西。

2.熟练实验题答题规范

（1）精心批改，拍下典型错误答案

该过程既是对学生学情的分析，又能获得更加直观和有效的教学资源，这是开展新模式讲评的基础和前提。

（2）展示错误，自主评分合作讨论

上课伊始，教师用多媒体展示学生的典型错误，让学生根据事先发下的答案，再次给展示的答案评分，学生的兴趣会因为这种新颖的角色互换体现瞬间激发，每位同学会专注地投入到主题中。接着，教师展示教师的给分，最后请学生小组讨论，两者给分的差距原因是什么，这样，学生就能慢慢领悟答题的规范。

（3）教师点拨，拓展训练巩固提高

在学生自悟的基础上，教师及时总结归纳。此时，学生已经跃跃欲试，教师就应趁热打铁，进行变式训练，从而巩固答题规范。

三、深化——巩固高考实验试题应答技能

1.利用好书本实验

书本上的实验有显性实验和隐性实验。显性实验是指考纲要求掌握的实验，隐性实验是指课本小资料中的实验。例如，观察细胞有丝分裂、检测生物组织中的糖类和蛋白质、细胞光合色素的提取和分离、验证活细胞吸收物质的选择性等是显性实验。脊蛙实验、探究洋葱表皮细胞的浓度范围、甲状腺促进蝌蚪变态和光合作用的早期研究史等是隐性实验。

我们在复习中一般会关注显性实验。实际上，课本中的隐性实验更应该关注，如2013年的高考实验题就是来自书本的“甲状腺促进蝌蚪变态”，2014年的则来自书本的“脊蛙实验”，体现了高考“来源于书本但又不拘泥于书本”的命题思路，所以书本隐性实验能够动手做的就是尽可能让学生做，不能动手的实验也要讲清实验原理、实验方法。

2.吸收各地区的二模试卷精华

各地二模试卷集中了各地教师的思维精华，也就是集中了各地区教师最顶尖的研究心血，他们在出模拟试卷时肯定会根据考纲的要求来命题，体现了他们对高考试题的研究心得，“三个臭皮匠，顶个诸葛亮。”所以，我们必须高度重视各地的二模试卷，特别是上年的模拟试卷。

3.重视生物竞赛试题

生物竞赛题目命题肯定集中了我省最高智商，也就是集中了各地区最有水平教师的智慧来命题，因此，我们必须高度重视竞赛试卷。

如2014届高考前的适应性训练的讲评前，就结合高考命题走向。我认为今年高考有可能考查背景是动物。根据高考的命题原则之一是“来源于教材又不拘泥于教材”，我们大胆推测2014年有可能还是以动物为背景材料，我们应高度重视必修三P32页的脊蛙实验，所以高考前一天晚上，我详细讲了竞赛试题第57题。第二天理综考完后，学生就兴奋地告诉我：“试卷上的图与昨天晚上讲得图一模一样，您真是太神了。”事后我去查看2014年高考实验试题，虽然题干很不一样，但是思路和图确实差不多，学生考试时心情就淡定很多。

4.出好全真模拟试卷

全真模拟试卷是考验一个学校对高考命题的走向把握程度，此时，我们必须坚信自己对高考研究规律的把握，要利用各地模拟试卷的精华试题来变式出题，比如我们认为背景材料是动物，就应找各地区有关动物的实验题作为例题来训练学生的实验备考能力。

5.踢好临门一脚

踢好临门一脚是指导好高考前一天晚上的适应性练习，此时我们应仔细考虑，平时哪些实验可能忽略了，但又非常重要，我们一定要好好提醒学生重点复习。

总之，在高中生物实验复习当中，既要重视解题规范，又要从实际出发，运用恰当的复习方法，循序渐进，定能提高学生的复习效率。

参考文献：

[1]葛为民.2014年浙江省普通高考考试说明[M].浙江教育报刊总社，2014：127-128.

[2]田巧云.优化高中生物实验教学进行实验设计能力的培养研究[J].中国校外教育：理论，2008（3）.

篇5：生物安全实验室规范

(沪卫科教〔2006〕34号)

各区（县）卫生局、浦东新区社发局，申康医院发展中心、各有关大学及附属医院、其他各有关单位：

为防止病原体通过实验室向外环境扩散和造成实验室感染，保护实验室工作人员和公众的健康，根据国务院第424令《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2004）、《生物安全实验室建筑技术规范》（GB50346-2004）和卫生部《人间传染的病原微生物名录》（以下简称《名录》），制定《上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范》（以下简称《管理规范》）。

现将《管理规范》印发给你们，请按照《管理规范》的要求，加强病原微生物实验室生物安全管理工作。市卫生局将定期组织专家对病原微生物实验室生物安全管理工作进行检查。

附件：上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范

二○○六年十月十七日

附件：

上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范

第一章 总则

第一条 为加强本市一、二级病原微生物实验室生物安全管理，防止病原体通过实验室向外环境扩散和实验室感染，保护实验室工作人员和公众的健康，根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2004）、《生物安全实验室建筑技术规范》（GB50346－2004）和卫生部《人间传染的病原微生物名录》（以下简称《名录》）制定本规范。

第二条 本市对一、二级病原微生物实验室实行“预防为主、分级管理、单位负责、突出重点、保障安全”的管理原则。

第三条 本规范所称的一、二级病原微生物实验室是指从事《名录》中所规定的适用于（A）BSL-1和（A）BSL-2防护等级的病原微生物相关实验活动的场所。

本规范所称的实验活动是指实验室从事与卫生部《人间传染的病原微生物名录》中所规定的病原微生物菌毒种、样品有关的研究、教学、检测、诊断等活动。

第四条 本规范适用于本市范围内的一、二级病原微生物实验室。第五条 本规范为一、二级病原微生物实验室生物安全管理的基本要求。

第二章 管理要求 第一节 组织管理

第六条 实验室设立单位的法定代表人对本单位实验室安全负责，其主要职责为：

（一）负责建立本单位生物安全管理体系，落实生物安全管理责任部门或责任人；

（二）定期召开生物安全管理会议，对实验室生物安全相关的重大事项作出决定；

（三）批准和发布实验室生物安全手册、生物危害评估等重要文件。

第七条 实验室生物安全管理责任部门或责任人的主要职责为：

（一）负责组织制（修）订和实施实验室生物安全手册、生物安全规章制度、操作规范和标准操作规程；

（二）负责组织对涉及的生物因子、使用动物、重组DNA以及基因修饰物质的研究方案进行审查和风险评估；

（三）负责对本单位实验室生物安全防护，微生物菌（毒）种和生物样本保存和使用，实验室安全操作，实验室废气、废水、废弃物处置和消毒灭菌等规章制度实施情况进行监督、检查，并定期评估实施效果；

（四）负责组织跟踪国际国内实验室生物安全管理最新动态；

（五）负责定期调查、了解实验室工作人员的健康状况和健康监护情况；

（六）组织生物安全知识培训并评估培训效果。

第八条 实验室负责人为实验室生物安全第一责任人，其主要职责为：

（一）全面负责实验室生物安全工作；

（二）决定并授权进入实验室的工作人员；

（三）监督有关法规和标准操作规程的执行，纠正违规行为并有权作出停止实验的决定；

（四）任命实验室生物安全管理员具体落实实验室生物安全管理工作；

（五）负责制定和实施实验室应急处置预案；

（六）负责实验室安全事故的现场处置和调查，并将调查结果以及处理意见向设立单位生物安全管理责任部门或责任人报告；

（七）负责对涉及感染性物质的研究计划、方案以及操作程序等，实施前的生物安全审查。

第九条 实验室生物安全管理员的主要职责为：

（一）负责实验室生物安全保障以及技术规章方面的咨询工作；

（二）就技术方法、程序和方案、生物因子、材料和设备进行定期的内部安全检查；

（三）纠正违反生物安全操作规程的行为；

（四）在出现潜在感染性物质溢出或其他事故时，协助事故调查；

（五）检查和监督实验室废弃物的有效管理与安全处置；

（六）检查和监督实验室各项消毒灭菌措施的落实情况。

第十条 实验室应建立健全生物安全管理制度，编写生物安全手册，手册应包括以下内容：

（一）实验室生物安全管理体系

（二）生物因子生物危害评估

（三）实验室人员和项目准入制度

（四）人员培训考核制度

（五）人员健康监护制度

（六）生物安全检查制度

（七）实验室人员生物安全行为规范

（八）实验室内务管理制度

（九）实验室菌（毒）种和生物样本安全保管和档案管理制度

（十）实验室废弃物管理制度

（十一）实验室消毒隔离制度

（十二）实验室生物危险标识使用规定

（十三）事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度

（十四）实验室应急处置预案

（十五）实验活动生物安全标准操作规程

（十六）其他必要的管理性和技术性文件

第二节 备案

第十一条 本市开展《名录》中所规定的病原微生物相关实验活动的一、二级病原微生物实验室，应按《关于在本市开展病原微生物实验室备案工作的通知》的规定向所在区（县）卫生局卫生监督所备案。二级实验室还应向所在区（县）公安机关备案。

第三节 人员管理

第十二条 实验室应建立工作人员上岗考核制度，所有与实验活动相关的人员都应经过培训并取得上岗资质。

第十三条 培训对象应包括实验室管理人员、实验室技术人员、样本运输人员、废弃物处置人员、仪器设备维修人员等。

第十四条 培训内容应包括实验室生物安全的基本知识、基本技能、消防和应急处置预案、化学和放射安全、生物危险和传染预防、应急救护等课程。

第十五条 实验室相关人员应每年接受生物安全培训。培训组织机构应采取有效方法对培训的效果进行评估。实验室设立单位应建立人员培训档案。

第十六条 实验室应定期对实验人员开展与其从事实验活动相关的健康体检，建立人员健康档案。

第十七条 实验室工作人员应在身体状况良好的情况下进入实验区工作，若出现疾病、过劳状态或其他意外状况，则不应进入实验区或立即退出实验区。

第四节 菌（毒）种和生物样本管理

第十八条 生物样本采集应符合国家有关规定和技术标准的要求。

样本采集人员应掌握相关专业知识和操作技能，并具有与采集病原微生物样本危害等级相适应的生物安全防护装备和防止扩散污染的措施。

样本采集人员应对样本的来源、采集时间、采集人员等做好记录。

第十九条 高致病性（或疑似）的病原微生物菌（毒）种和生物样本的运送应按《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或生物样本运输管理规定》执行。

非高致病性的病原微生物菌（毒）种和生物样本的运送应由专人负责，专车运送，运送人员应经过培训取得相关资质，不得通过公共交通工具运送，运送过程应采取相应的防护措施。运输过程中发生意外状况，运送单位、运送人、接受机构应按国家有关规定，采取必要的应急措施。

第二十条 单位内部运送病原微生物菌（毒）种和生物样本的容器或包装材料应满足生物安全防护的要求，应密封，防水、防破损、防外泄。

外送病原微生物菌（毒）种和生物样本的容器或包装材料应满足国际民航组织《危险品航空安全运输技术细则》（Doc9284包装说明PI650）规定的B类包装要求。

最外层的容器或包装材料上应按规定做好生物安全警示标识。

第二十一条 实验室保藏菌（毒）种和生物样本应符合国家相关规定。病原微生物实验室菌（毒）种或样本保藏部位为内部治安保卫的重点，有关实验室内部治安保卫管理应严格按照国务院第421号令《企业事业单位内部治安保卫条例》执行。

第二十二条 实验室应指定专人负责菌（毒）种和生物样本的保藏，双人双锁，并建立所保藏的菌（毒）种和生物样本名录清单。

保藏的菌（毒）种和生物样本应设立专册（卡），详细记录名称、编号、来源、鉴定的日期和结果、鉴定者、所用的培养基、保藏的方法、传代次数等。

第二十三条 实验室应建立菌（毒）种和生物样本的销毁制度，销毁保存的菌（毒）种和生物样本应经实验室负责人批准，并在专册（卡）上注销并注明原因、时间、方法、数量、经办人等。

第五节 实验室环境、设备与器材的消毒和废弃物的处置

第二十四条 实验室应根据相关标准的要求结合实验工作的类型、操作生物因子的特性选择适宜的消毒方法。

应编写包括针对各种设施、设备、工作环境、污染状态的消毒程序的操作规程。

应根据《医院消毒卫生标准》（GB15982-1995）的规定采用有效手段监测消毒效果，并要作好书面记录。

第二十五条 实验室空调系统应定期维护、清洗消毒，并有书面记录，空调系统清洗消毒应委托有资质的机构承担。

第二十六条 实验室应根据国家规定的要求建立实验器材和废弃物无害化处置工作程序。

实验器材和废弃物处置应由专人负责。

实验室污水须经无害化处理后排放。

实验用一次性个人防护用品和实验器材、弃置的菌（毒）种、生物样本、培养物和被污染的废弃物应在实验室同一建筑内消毒灭菌，达到生物学安全后再按感染性废弃物收集处理。

实验用非一次性个人防护用品和实验器材，应放置在有生物安全标记的防漏袋中送至指定地点消毒灭菌后方可清洗。运送过程中应防止有害生物因子的扩散。

经生物无害化处理后的废弃物包装必须符合要求，并有中文标签，标签内容包括产生部门、日期、类别等。

实验废弃物最终处置必须交由经市环保部门资质认定的医疗废物处置单位集中处置。

第二十七条 其他可能接触感染性或潜在感染性材料的相关场所的消毒和废弃物处置应根据实际工作需要参照本规范的要求执行。

第六节 应急处置

第二十八条 实验室应建立意外事件应急处置系统，制订针对意外暴露和事故等状况的应急预案。应急预案应包含以下内容：

（一）对暴露病原微生物的检测和生物危害评估。

（二）明确高危险区域和地点。

（三）明确可以暴露于危险或受感染的人员及其这些人员的转移通道。

（四）列出能够接受暴露或感染人员进行治疗、隔离的单位和运送方案。

（五）列出事故处理需要的免疫血清、疫苗、药品、特殊仪器和其他物资的来源。

（六）列出应急状态下所需的装备和制剂的名录及存放地点。

（七）明确事故处理的责任人员及其所承担的职责。

（八）其他必须明确规定的事项。

第二十九条 实验室的应急预案应每年培训或演练，所有工作人员应熟练掌握应急处置操作程序等有关事项。

第三章 技术要求 第一节 生物危害评估

第三十条 在建设实验室或开展实验活动之前，实验室设立单位的生物安全责任部门或责任人应参照卫生部《名录》组织各相关方面的专家对拟操作的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性、应急预案的有效性等因素进行评估，确定相应的生物安全防护水平等级。

第三十一条 实验室生物危害评估结果应由设立单位的法定代表人签字认可，并归档保存。

第二节 设施设备

第三十二条 实验室所用设施、设备和材料均应符合国家相关标准和规定要求。第三十三条 一级病原微生物实验室的设施设备要求：

（一）无需特殊选址，可以设置在共用建筑物内。但应有防止节肢动物和啮齿动物进入的设计和设施，有开启式窗户的应设置纱窗。

（二）布局应分实验区和非实验区，二者之间应有效分隔，在实验区外应有实验所需用品的储存、个人物品存放和工作人员休息的空间。实验室的人流、物流也应符合从清洁到污染的要求。

（三）墙壁、天花板和地面应平整、不渗水、易清洁并耐化学品和消毒剂的腐蚀。

（四）实验台和橱柜应牢固稳定，实验台面能防水、耐腐蚀、耐热、易消毒。

（五）每个实验室应在靠近出口处设洗手池，洗手龙头应为自动感应式、长手柄式或脚踏式，备有洗手皂液，必要时配备快速消毒洗手液。

（六）室内仪器和物品的摆放合理，便于操作，并应遵循易消毒的原则。

（七）室内应有空气和物体表面消毒的设备和设施。

（八）室内使用的利器应盛放在固定的容器内。

（九）室内照明应保证工作需要，并避免反光和强光。

（十）在出口处应设挂衣装置，专门放置实验室工作服。

（十一）门口应有一级生物安全防护水平实验室标识。

第三十四条 二级病原微生物实验室的设施设备要求

（一）可设在共用建筑内，但应相对独立，设可自动关闭的带锁的门。

（二）实验时门应呈关闭状态，在实验结束后实验室应呈锁闭状态。实验室的门或墙上应有可视窗。

（三）在室内应配备生物安全柜，生物安全柜的型号应根据实验的项目和对象确定。生物安全柜应放在气流流动少，人员走动少，离出口处较远的位置，周围留有一定的空间。

（四）当对可能产生气溶胶的感染性材料样本的操作无法在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，应加装负压罩。

（五）在所在的区域内应配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，作好记录，确保消毒效果和使用安全。高压蒸汽灭菌器的安全、计量鉴（检）定和管理应符合国家压力容器管理的有关规定，使用人员应作好使用记录。

（六）在室内应设有洗眼装置，必要时应设紧急喷淋。

（七）应保障实验室的通风和换气，可采用自然通风，如采用机械通风，应保证有不少于每小时3-4次的通风换气次数。

（八）应有可靠的电力供应和应急照明。保证紧急情况下基本设备的用电需要。

（九）在门口应有二级生物安全防护水平实验室标识。

（十）有特殊要求的专用实验室按其要求执行。

第三节 个人防护

第三十五条 实验室使用的个人防护用品应符合国家相关标准和规定的要求。

应在生物危害评估的基础上，按防护级别的要求选择适当的个人防护用品。防护用品的选择、使用和维护应有明确的规定。

第三十六条 一级病原微生物实验室个人防护要求：

（一）工作场所应配备有足够的清洁专用工作服和乳胶手套，并有专柜存放。污染的工作服和手套应放置在有适当标记的防漏袋中消毒。

（二）实验时应穿戴专用工作服和手套，手套应戴在工作服外面。穿戴工作服和手套时不得离开实验室。工作完全结束离开实验室之前方可除去手套和工作服。使用过的工作服和手套不得带离实验室，一次性手套和工作服不得清洗和再次使用。

（三）当防护用品破损或污染物泼溅时应立即更换。

（四）应着不露趾防滑防水的工作鞋。

第三十七条 二级病原微生物实验室个人防护要求：

（一）进入工作场所操作时应穿专用防护服，戴防护帽和防护口罩，必要时使用面部保护装置。

（二）在从事有可能出现渗漏的实验工作时，应穿戴防水鞋或防水鞋套。

第三十八条 其他可能接触感染性或潜在感染性材料相关场所的个人防护应根据实际工作需要参照同等级的病原微生物实验室要求执行。

第四节 安全操作

第三十九条 实验室应在危害评估的基础上，对实验活动过程和所有对安全性有较大影响的特定实验活动制定标准操作规程，这些规程应包括以下内容：

（一）相关实验和检测项目生物安全操作规程；

（二）移液管和移液辅助器使用规程；

（三）生物安全柜使用规程；

（四）离心机使用规程；

（五）匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器使用规程；

（六）尖锐利器使用规程；

（七）样本分离操作规程；

（八）洗手操作规程；

（九）其他有必要制定的操作规程。

第四十条 实验室应建立人员进出登记制度，禁止非工作人员进入实验室。特殊情况下，非工作人员进入实验室的须经实验室负责人批准，由专人陪同，并做好登记。

第四十一条 实验室应建立内务管理制度，个人物品不允许带入实验区。

第四十二条 对会产生气溶胶或高浓度或大容量感染性材料的样本进行高风险实验操作时（包括离心、混匀、超生雾化和剧烈搅拌等），实验室应使用密封的离心机转子、安全的离心杯或样本储存容器，并只允许在生物安全柜或负压罩中开闭、装载和操作。

第四十三条 实验室应确保检测报告的生物无害性，宜采用电子通讯方式在清洁区打印、发放报告。在污染区出具的检测报告，需经消毒处理，达到生物安全后方可发出。

附录一

术语

一级病原微生物实验室：是指实验操作、安全设备和设施适应于从事具有明确生物学特征的、已知在健康成人中不引起疾病的、活的微生物菌（毒）种研究的生物安全防护水平实验室。

二级病原微生物实验室：是指实验操作、安全设备和设施适应于操作我国的生物危害第三类以下的致病微生物或少量第二类致病微生物的某些实验活动的生物安全防护水平实验室。

专用实验室：是指专门用来开展针对某一特定病原微生物的实验活动的实验室，如艾滋病实验室、结核病实验室等。

附录二

病原微生物危害等级分类

本规范采用《病原微生物实验室安全管理条例》的病原微生物危害等级分类方法，与《实验室生物安全通用要求》GB19489-2004和WHO《实验室生物安全手册》的分类方法对应关系见表1。

表1：病原微生物的危害等级划分与标准

┌──────────────┬────────────┬─────────────┐│《病原微生物实验室生物安全管│《实验室生物安全通用要求│WHO《实验室生物安全手册》 ││理条例》

│》GB19489-2004

│（第三版2004）

│├──────────────┼────────────┼─────────────┤│四类 在通常情况下不会引起人 │Ⅰ级（低个体危害，低群 │Ⅰ级（无或极低的个体和群 ││类或者动物疾病的微生物。

│体危害）不会导致健康工作│体危险）不太可能引起人或动││

│者和动物致病的细菌、真菌│物致病的微生物。

││

│、病毒和寄生虫等生物因子│

││

│。

│

│├──────────────┼────────────┼─────────────┤│三类 能够引起人类或者动物疾 │Ⅱ级（中等个体危害，有 │Ⅱ级（个体危险中等，群体 ││病，但一般情况下对人、动物或│限群体危害）能引起人或动│危险低）病原微生物能够对人││者环境不构成严重危害，传播风│物发病，但一般情况下对健│或动物致病，但对实验室工作││险有限，实验室感染后很少引起│康工作者、群体、家畜或环│人员、社区、牲畜或环境不易││严重疾病，并且具备有效治疗和│境不会引起严重危害的病原│导致严重危害。实验室暴露也││预防措施的微生物。

│微生物。实验室感染不导致│许会引起严重感染，但对感染││

│严重疾病，具备有效治疗和│有有效的预防和治疗措施，并││

│预防措施，并且传播风险有│且疾病传播的危险有限。

││

│限。

│

│├──────────────┼────────────┼─────────────┤│二类 能够引起人类或者动物严 │Ⅲ级（高个体危害，低群 │Ⅲ级（个体危险高，群体危 ││重疾病，比较容易直接或者间接│体危害）能引起人类或动物│险低）病原微生物通常能引起││在人与人、动物与人、动物与动│严重疾病，或造成严重经济│人或者动物的严重疾病，但一││物间传播的微生物。

│损失，但通常不能因偶尔接│般不会发生感染个体向其他个││

│触而在个体间传播，或能使│体的传播，并且对感染由有效││

│用抗生素、抗寄生虫药物治│的预防和治疗措施。

││

│疗的病原微生物。

│

│├──────────────┼────────────┼─────────────┤│一类 能够引起人类或者动物非 │Ⅳ级（高个体危害，高群 │Ⅳ级（个体和群体危险均高 ││常严重疾病的微生物，以及我国│体危害）能引起人或动物非│）病原微生物通常能引起人或││尚未发现或者已经宣布消灭的微│常严重疾病，一般不能治愈│动物的严重疾病，并且很容易││生物。

│，容易直接或间接或偶然接│发生个体之间的直接或间接传││

│触在人与人，或动物与人，│播，对感染一般没有有效的预││

│或人与动物，或动物与动物│防和治疗措施。

││

│间传播的病原微生物。

│

│└──────────────┴────────────┴─────────────┘

附录三

生物安全柜选型原则

实验室应根据所需保护的实验对象的类型；针对操作感染性物质所需的个体防护要求；暴露于放射性核素和挥发性有毒化学品时的个体防护要求；或其他特殊性的工作要求来选择生物安全柜的类型。一般在二级生物安全防护水平实验室中主要使用Ⅱ级生物安全柜（A1型、A2型、B1型、B2型），常用的是A2型和B2型。生物安全柜的选型遵循原则见表2。

表2：生物安全柜选型原则

┌─────────────────────┬──────────────────┐│保护类型

│生物安全柜选择

│├─────────────────────┼──────────────────┤│个人防护，针对危害程度一、二、三类的微生物│Ⅱ级各型生物安全柜

│├─────────────────────┼──────────────────┤│少量挥发性放射性核素/化学品防护

│Ⅱ级B1型或外排式Ⅱ级A2型生物安全柜 │├─────────────────────┼──────────────────┤│挥发性放射性核素/化学品防护

│Ⅱ级B2型生物安全柜

│└─────────────────────┴──────────────────┘

附录四

消毒、灭菌方法的选择和基本程序

一般根据物品的种类和污染后的危害程度来选择消毒、灭菌方法。消毒首选物理方法，不能用物理方法消毒的方可选化学方法。

对于菌（毒）种、生物样本、其他感染性材料和污染物等，应选用高压蒸汽灭菌法处理。

对于实验防护服、实验器具等，可选用高压蒸汽灭菌、化学浸泡法处理。

对于实验仪器，台面和实验室环境等，可选用化学消毒剂或紫外线照射的方法处理。但若有病原微生物污染时，应采用更为有效的消毒法（如甲醛熏蒸等）。

对于被菌（毒）种、生物样本或其他感染性材料污染的器材和物品应先消毒后清洗，使用前再按物品危险性的种类，选择适当的消毒、灭菌方法进行消毒或灭菌处理。

附录五

消毒、灭菌效果监测的方法

实验室必须对消毒、灭菌效果定期进行监测。灭菌合格率必须达到100%，不合格的物品不得离开实验室。

一、使用中的消毒剂、灭菌剂，应进行生物和化学监测。

生物监测：消毒剂每季度一次，细菌含量必须＜100cfu/mL，不得检出致病微生物。

灭菌剂每月一次，不得检出任何微生物。

化学监测：应根据消毒、灭菌剂的性能定期监测，含氯制剂、过氧乙酸等应每日监测，对戊二醛的监测应每周不少于一次。

消毒灭菌物品的监测：应定期对消毒、灭菌物品进行随机抽检，消毒物品不得检出致病性微生物，灭菌物品不得检出任何微生物。

二、高压蒸汽灭菌效果监测。

高压蒸汽灭菌应进行工艺监测、化学监测和生物监测。工艺监测应每锅进行，并详细记录。化学监测应每包进行，对于高危险性物品需进行中心部位的化学监测。预真空压力灭菌器每天灭菌前进行B-D试验，生物监测应每月进行，新灭菌器使用前必须先进行生物监测，合格后方可使用。

三、紫外线消毒效果监测

紫外线消毒应进行灯管照射强度监测和生物监测。

灯管照射强度监测每半年进行一次，不得低于70μw/cm2。新使用的灯管也要进行监测，不得低于100μw/cm2

生物监测必要时进行，要求经消毒后的物品或空气中的自然菌应减少90.00%以上，人工染菌杀灭率应达到99.90%。

四、环氧乙烷气体灭菌效果监测

环氧乙烷气体灭菌必须每锅进行工艺监测，每包进行化学监测，每月进行生物监测。

五、环境监测

环境监测包括对空气、仪器设备、物体表面和工作人员手的监测。在怀疑有实验室污染时应进行环境监测。监测方法和卫生标准见《医院消毒卫生标准》（GB15982-1995）。

附录六

生物安全标识的使用

一、生物安全标识见图1

图1：生物安全标识（略）

二、生物安全标识的使用

在生物安全实验室入口的明显位置必须张贴生物危害标志。标志上应明确标示实验室生物安全水平等级，实验室生物安全责任人、紧急联系方式等。见图2

图2：生物安全实验室标识（略）

凡是盛装生物危害物质的容器、运输工具、进行生物危险物质操作的仪器和专用设备等都必须粘贴标示有相应危害级别的生物安全标志。

篇6：良好的微生物实验室操作规范

简介

在微生物实验室中，良好的实验室操作规范是基于很多原则，包括以下活动：无菌技术、培养基的控制、菌种的制备、仪器设备的管理、细致的记录和数据的评估、人员的培训。众所周知，微生物测定数据的可变性、可靠性和重现性是基于公认方法的使用和坚持良好的实验室操作规范。

微生物菌种的维护

生物样本是最灵敏(delicate)的,因为他们生存能力和特性是依赖于适当的处理和贮存。菌种的处理和贮存的标准是使用者的实验室制定的，采用减少污染的机会和减少生长特性变更。小心一致的处理贮存用菌种是微生物测试结果一致性的重要因素。按药典方法方法使用的菌种应该取自国家菌种保藏中心。可以包括冷冻的、冻干的、斜面培养的或是马上使用的形式。在质量控制测试使用前应进行菌种纯度的确定和菌种的鉴别。马上使用的菌种要求确定纯度、鉴别、接种体大小。鉴定的确认，对通常用的实验室菌种，理想的是进行基因水平的分析（如：使用合适的经过验证的探针进行DNA指纹,RNA基因排序,PCR光电导继电器）

菌种的制备和复壮应该参照供应商的说明书或采用己验证批准的方法。种子批技术被推荐用于贮备用菌种的保存。

从国家菌种保藏中心得到的初始菌种在合适的培养基被复壮、培养。部分的贮备菌种（第一次接种或是传代）是悬浮在抗冷冻培养基中，分装至小瓶中，在零下30°或更低的温度下冷冻，直到使用。如果冷冻在零下70°，或是冻干形式，菌种可以持续的保存。这些冷冻的贮存菌种可以每月或每周接种用作工作菌种。一旦打开，制备了工作悬浮液，不能再冷冻。不能用的部分应该丢弃，以减少繁殖能力损失带来的风险和贮存污染带来的风险。

工作用菌种的接种量应该记录，以防止过量接种增加表型变种。一代的定义是从具有繁殖能力的菌种接种微生物到一新鲜制备的具有促微生物生长能力

和培养基中。任何形式的接种都被当做是一次转移传代。

实验室仪器的维护

多数的仪器（培养箱、水浴、灭菌锅）必须遵从标准验证程序包括安装确认、操作确认和性能确认。另外还要求有定期的校验（通常每年一次）。新的设备，实验室关键的，应该根据QCU 批准的方案进行确认。

用于微生物实验室仪器（如：pH计和分光光度计）应按规定的进度表进行定期的校验和测试，以保证其性能。校验的频率和性能的确认是基于仪器的型号的不同和能产生实验室数据的设备的重要程度的不同。

实验室的布局和操作 实验室的布局和设计应考虑良好的微生物操作和安全。本质是最大程度的减少微生物菌种的交叉污染，微生物样本的处理环境也是重要，因为环境也能引起也污染的可能。

一般情况下，实验室应分成洁净区、无菌区和阳性室。如果可能，处理和培养灭菌产品的周围的环境区域应与阳性区完全分离。但是要将阳性和洁净区完全分开是不可能的，那么有必要采取隔离和无菌操作来减少可能的意外污染。这些隔离包括：防护衣、清洁、消毒程序和仅用于洁净无菌的生物安全柜。对于活的菌种引起的溢出和灾祸的程序应放在现场，所有相关技术人员进行上述方法的培训。

部分样品会出现微生物的生长，要求进一步分析来确定污染源。当发现有菌生长，样品应从洁净区立即转入阳性区。接种，着色、菌种鉴定或其它的调查操作应在实验室的阳性室操作。如果可能，发现有菌落生长的样品在实验室的洁净区是不能被打开的。小心隔离污染的样品和原料将减少假阳性结果。

正在进行取样操作活动的人员不能进入阳性室或在阳性室操作处理除非特别小心，包括穿防护服和手套，退出后仔细清净手。理想状态，受权人员进行样品取样操作时，特别是无菌过程的，不能在阳性操作室附近工作。同样，所有微生物样品都应采用无菌取样技术，包括非无菌样品的取样。如果可能，在规定的完全无菌的条件的取样区域进行操作。

要重点考虑的是样品的污染，它能导致假阳性的出现，除非在过程中特别注意无菌操作。取样间应设计好，这要原料和辅料的取样就可以在受控条件下进行，包括无菌衣和无菌取样设备。对于公用系统的取样，如水系统，在完全无菌的条件下是不太可能的；然而，当样品未采用无菌技术取样时应有记录，其可靠性不可避免的下降。

环境监测的取样方法要求对取样的设备（负载或未负载）进行最小化的无菌处理。如果可能，在对取样环境进行取样时，取样的设备应同时配备培养基。

实验室中所有的测试，对关键的测试操作，如：最终剂型的无菌测试，散装产品，生物产品用菌种培养，或是生物产品用细胞培养都应在受控的条件下进行，隔离技术也是可以采用的，无菌的微生物测试。己在显示，隔离技术比人为的洁净区域具有更低的环境污染水平，因此，更能减少假阳性结果的产生。隔离系统的验证是重要的，既能保证环境的完整又能防止假阴性结果的产生，假阴性的结果是由化学消毒物质带入。

实验室记录的维护

合适的数据记录和研究对成功的微生物实验室是重要的。最重要的原则是按照SOP规定操作，SOP应是书面化的，并能反映测试的实际操作是如何进行的，实验室笔记本应能提供所有详细的记录，并保证记录的完整。实验室书写至少应包括以下内容：

日期；

测试物料

微生物测试人员名称

操作程序记录测试偏差 参数的记管理员，的号码 的结果

录（使用的设备，使用微生物菌种，培养基的批号）第二个复核人签名

每一台关键仪器的使用都应在台帐上记录，所有都应根据SOP的要求记录在校正进度表和维护记录上。日志和其它记录形式对实验室记录本起到支持和帮助。设备的温度（水浴，培养箱，灭菌锅）应有记录并可以追踪。

己签发的SOP及其版本应有清楚的记录。数据的改变应用单钱划去并签上日期和缩写。初始的数据不应抹去或复盖。

测试结果应包括初始记数，允许复核者根据最终结果重新计算。数据的分析方法在SOP中应详细描述。

所有的实验室记录应存档避免遗失，现场中应有正式的记录保存和查阅程序。

检验结果的解释

微生物试验结果难以解释，因为下列原因：

微生物是普遍存在于自然界中的，又存在于通常的环境污染，由人类支配的很多类型的特殊的有机物。

实验室分析人员在样品分析和操作中可能引入微生物污染。微生物可能不是均匀的分布在样品和环境中。微生物的分析结果存在相当大的可变性。

因此，从预期结果中获得的微小的不同是没有多大意义的。

因为微生物分析的这些特性，实验分析应非常小心以避免外来的污染，正如本章前面讨论的。同样重要的，从主要微生物观察考虑，结果必须要解释。不仅包括假定污染的种类，而且包括药物成分、辅料或测试环境中存在的有机物。另外，其微生物的生长特性也应该考虑。

当出现的结果与药典正文或其它建立的质量标准不一致时，就应该进行调查。没有满足标准要求的微生物污染，通常有两个明显的原因：可能是实验室的错误或是实验环境产生无效的结果，也可能是产品有一定污染或其它形式的污染使得超出规定的标准或限度。另外一种情况，实验室操作，在多数情况下，应立即通报。

应该对围绕结果的所有情况进行全面的评估。所有实验条件和因应充分考虑，包括数据的漂移，与建立的限度和标准比较。重要的是根据结果的可变性知道观察的统计意义。

实验室环境，对现场取样的保护装置，测试条件下物料的历史数据，物料的种类，特别注意物料中微生物的存活和繁殖在调查中应被考虑。另外，与实验员进行讨论，分析中的实际操作可以得到有价值的信息。来决定结果的可靠性和决定采取和措施。如果可以确定得到不一致结果的明确原因，那么应该采取纠正措施，并记录问题所在。跟踪正式批准和执行的纠正措施，并进行仔细的检查。