第一篇：生物实验室安全知识
实验室生物安全知识普及与推广
医学实验室生物安全相关概念
首都医科大学附属北京天坛医院 张国军
一、医学实验室的定义
在 IS015190 ： 2003(E) 《医学实验室——质量和能力的专用要求》这样定义：是以为诊断、预防、治疗人体疾病或评估人体健康提供信息为目的，对来自人体的材料进行生物学、微生物学、免疫学、化学、血液免疫学、血液学、生物物理学、细胞学、病理学等检验的实验室。
此外，还规定医学实验室可以提供其检查范围内的咨询性服务，包括结果解释和为进一步适当检查提供建议。标准中的进一步解释：上述的检验还包括用于确定、测量或描述各种物质或微生物存在与否的操作;仅仅采集或准备样品的机构，或作为邮寄分发中心的机构，尽管可以作为大型实验室网络体系的一个部分，却不能称为医学或临床实验室。
二、医学实验室的基本任务
医学实验室的服务是对患者医疗保健的基础，因而应满足所有患者及负责患者医疗保健的临床人员之需求。
这些服务包括受理申请，患者准备，患者识别，样品采集、运送、保存，临床样品的处理和检验及结果的确认、解释、报告以及提出建议。
此外，还应考虑医学实验室工作的安全性和伦理学问题。在国家法规许可的前提下，期望医学实验室的服务除进行诊断和患者管理之外，还包括会诊病例中患者的检验和积极参与疾病预防。
所有医学实验室应当为其专业人员提供教育和科研机会。
1. 为临床诊断和治疗提供实验数据，其最终成果主要体现在检验报告上，所以，能否向临床提供高质量 ( 准确、可靠、及时 ) 的检验报告，得到患者和临床的信赖与认可，满足患者和临床的要求，是医学实验室最基本和最重要的任务。
2. 为其他医疗机构的患者 ( 例如会诊患者 ) 提供力所能及的服务。
3. 为预防疾病提供实验室数据，积极参与大众保健、卫生防疫等公益性活动。
4. 保护所服务对象 ( 包括患者和临床医护部门 ) 的合法权益，尊重其隐私。
5. 重视人员安全、生物安全和保护环境。
6. 积极开展医学实验室相关的科研活动，为疾病的诊断、治疗、预防提供科学依据，加强实验室的专业能力。
7. 加强对员工的教育和培训，积极参与所在机构或社会的医学实验室方面的人才教育活动。
8. 为服务对象提供解释和咨询。这就要求医学实验室在建立质量管理体系时对解释和咨询服务进行规定，且这种解释和咨询应该是针对医学实验室服务全过程的，包括检测试验的适用范围、某疾病的诊断及辅助诊断可选择的实验、检测实验的局限性、检验申请单的书写、标本的采集、标本运送、标本保存、标本处理、试验的允许误差及危急值、试验的准确性及精确性、试验的生理及病理干扰因素、试验所采用的仪器试剂及检测程序、实验的质量控制、检验结果报告时限、检测结果及其临床意义、实验结果的正常参考范围等等，力求满足临床工作人员和患者的需要。对作出解释和咨询的人员应有严格的资格规定，应必须具备足够的专业知识和工作经验。
三、生物安全
(一)定义
1. 生物安全
生物安全一般是指由现代生物技术开发和应用所能造成的对生态环境和人体健康产生的潜在威胁，及对其所采取的一系列有效预防和控制措施。
临床实验室生物安全的目的是避免危险生物因子造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施。
2. 生物因子
是指一切微生物和生物活性物质。
3. 病原体
是指可使人、动物或植物致病的生物因子。
4. 危害废弃物
有潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有毒、放射和起破坏作用的对人、环境有害的一切废弃物。
5. 气溶胶
悬浮于气体介质中的粒径，一般为 0.001-100 μ m 的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。
(二)概念产生背景
基于生物技术发展有可能带来的不利影响，人们提出了生物安全的概念。
1. 生物安全问题引起国际上的广泛注意是在上世纪 80 年代中期， 1985 年由 UNEP 、 WHO 、 UNIDO 及 FAO 联合组成了一个非正式的关于生物技术安全的特设工作小组，开始关注生物安全问题。
2. 国际上对生物安全立法工作引起特别重视是在 1992 年召开联合国环境与发展大会后，此次大会签署的两个纲领性文件《 21 世纪议程》和《生物多样性公约》均专门提到了生物技术安全问题。
3. 从 1994 年开始，联合国环境规划署( UNEP )和《生物多样性公约》( CBD )秘书处共组织了 10 轮工作会议和政府间谈判，为制订一个全面的《生物安全议定书》做准备，为了尽快拟定议定书初稿，还召开了 4 次关于《生物安全议定书》的“特设专家工作组”会议。
4.1999 年 2 月和 2000 年 1 月先后召开了《生物多样性公约》缔约国大会特别会议及其“续会”， 130 多个国家派代表团参加会议讨论有关问题，其中欧盟 15 国最为积极，环境部长全部到会，美国副国务卿参加了此次会议。
5. 经过多次讨论和修改，《〈生物多样性公约〉卡塔赫纳生物安全议定书》终于在 2000 年 5 月 15 日至 26 日在内罗毕开放签署，其后从 2000 年 6 月 5 日至 2001 年 6 月 4 日在纽约联合国总部开放签署
(三)实验室生物安全的标识
实验室的建筑物入口、实验室入口、实验室操作间，仪器设备等都粘贴相应的警示标识，列明该实验室内各种潜在危险。
(四)实验室生物安全相关法律、法规、标准
实验室的生物安全越来越受到人们的重视，我国陆续出台了若干部有关实验室生物安全的规范与标准。
1. 实验室生物安全通用要求国家标准《实验室生物安全通用要求》 (GB19489 - 2004) 已于 2004 年 5 月 28 日颁布，于 10 月施行。该标准由科技部和国家认证认可监督管理委员会提出、军事医学科学院主编，主要参考了 ISO15190 ： 2003(E) 《医学实验室安全要求》和 WHO 《实验室生物安全手册》 [ 第二版 ( 修订版 ) ， 2003] 。标准不仅适用于医学实验室，而且适用于进行各个级别的生物因子操作的各类实验室。
2. 病原微生物实验室生物安全管理条例
2004 年 11 月 12 日，国务院总理温家宝签署国务院令 ( 第 424 号 ) ，公布《病原微生物实验室生物安全管理条例》。条例分为七章：总则、病原微生物的分类和管理、实验室的设立与管理、实验室感染控制、监督管理、法律责任、附则。共 72 条。
3. 生物安全实验室建筑技术规范
建设部 2004 年 8 月 3 日发布公告，《生物安全实验室建筑技术规范》 (GB50346 - 2004) 自 2004 年 9 月 1 日起开始实施。该规范的实施改变了长期以来我国在生物安全实验室建设、建筑技术方面缺乏统一标准的局面。
4. 兽医实验室生物安全管理规范
为加强兽医实验室生物安全工作，防止动物病原微生物扩散，确保动物疫病的控制和扑灭工作以及畜牧业生物安全，农业部根据《中华人民共和国动物防疫法》和《动物防疫条件审核管理办法》的有关规定，参照国际有关对实验室生物安全的要求，制定了《兽医实验室生物安全管理规范》。并于 2003 年 10 月 15 日颁布施行。
5. 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则
2002 年 12 月 3 日，国家卫生部发布了卫生行业标准《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则《 WS233 - 2002) 》，该准则于 2003 年 8 月 1 日开始实施。但鉴于医疗机构微生物和生物医学实验室的状况以及生物安全要求的特殊性，卫生部于 2003 年 8 月 19 日发布通告 ( 卫通 [2003]14 号，宣布医疗机构推迟两年执行该准则。在此期间，卫生部将组织有关专家，针对医疗机构微生物和生物安全实验室的特点对该准则进行适当的补充完善。
6. 传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法
传染性非典型肺炎是一种严重的传染性疾病。为确保生物安全，防止实验人员感染和污染环境，科技部组织制定了《传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法》，于 2003 年 5 月 12 日颁布施行。
7. 消毒技术规范
2002 年 11 月由中华人民共和国卫生部颁布，分四部分：总则;消毒产品检验技术规范;医疗卫生机构消毒技术规范(消毒与灭菌方法、一般诊疗用品的消毒、检验相关物品的消毒、污物的消毒处理等);疫源地消毒技术规范。
8. 国际标准规范
世界卫生组织一直非常重视实验室生物安全问题，早在 1983 年就出版了《实验室生物安全手册》; 2003 年 4 月第二版 ( 修订版 ) 以电子版形式在 WHO 网页上问世。美国在实验室的生物安全管理方面更是走在了世界的前面， NIH/CDC 联合出版的《微生物学及生物医学实验室生物安全准则》现已推出了第四版。很多国家在制定本国的生物安全准则时，主要参考上述两个准则。
四、生物安全实验室各级特点
(一)一级
对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致病的致病因子。
(二)二级
对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子，对健康成人、动物和环境不会造成严重危害。有有效的预防和治疗措施。
(三)三级
对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人传染上严重的甚至是致命疾病，或对动植物和环境具有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。
(四)四级
对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，或未知的、危险的致病因子。没有预防治疗措施。
五、生物安全实验室分级
(一)生物安全一级实验室 (BSL-1)
1. 适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，已知不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等，且对实验室工作人员和环境的潜在危害性最小。 主要从事 枯草杆菌、格氏阿米巴原虫、感染性肝炎病毒等。
2. 无特殊屏障、实验服、实验袍或实验制服，防止便服被污染或弄脏;如果手部皮肤破损或起疹时应戴上手套;要配备可替换的胶乳手套。
3. 需要洗手池。
4. 标准微生物操作。
幻灯 22 显示的是生物安全一级实验室，有 简单的操作台就可以 。
(二)生物安全二级实验室 (BSL-2)
1. 适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物，如麻疹病毒、沙门氏菌、弓形体、乙型肝炎病毒。
2. 在一级实验室基础上增加生物安全柜、灭菌锅、洗眼器等。
幻灯 25 、 26 显示的是 是生物安全二级实验室，和一级实验室相比，多了生物安全柜。
(三)生物安全三级实验室 (BSL-3)
1. 适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素。
2. 在一级和二级实验室基础上增加：二级或三级生物安全柜(容易产生气溶胶、飞溅以及病原体培养)、实验室自备灭菌锅、呼吸道防护设备。
3. 生物安全三级实验室中要求有隔离建筑物或隔离区、双门进入系统、向内定向气流、单一通过气门、独立的送风排气系统、保持一定的负压梯度。
幻灯 28 显示的是生物安全三级实验室，对 气压、气流都有非常明确的要求。
(四)生物安全四级实验室 (BSL-4)
适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。
六、实验室生物安全设备和用途
(一)正确使用生物安全柜
1.I 级生物安全柜
非循环气流流向柜内，再经 HEPA 滤膜过滤后排放到室内。适用于保护操作人员，不需要对实验样品进行保护的情况。
2.II 级生物安全柜
有效保护操作人员、样品及环境，操作区域无菌，气体经 HEPA 滤膜过滤后排放到室内。
3.III 级生物安全柜
完全密闭， 100% 进气、 100 %排气，不得使用超净台操作传染性材料。
(二)生物安全柜的设置
生物安全柜一般是做致病菌、霉菌酵母菌来用，操作区域是负压，简单说是往处抽风的，当然致病菌也不是直接抽出排到室外，是过滤在生物安全柜的顶部漏器上，从排风量上可以分为： 50% 外排型、 75% 以及 100% 外排型。
超净台是做一般对人体没有直接伤害的常规细菌的操作实验，正压送风，吹向样品以及实验人员的风是经过过滤器过滤，达到局部百级。超净台就相当于一个缩小了的无菌室(无菌空间)。简单的说，生物安全柜是往里面吸空气，防止生物病菌或试剂溅出安全柜污染实验室和实验员，是保护人的设计。超净台是往外吹风，不考虑实验室和实验员，是保证试验台无菌环境的仪器。
幻灯 35 显示的是离心机，是最常用的实验室设备，同时也是最易导致实验室感染发生的设备。
幻灯 36 显示的是液氮罐、显微镜、 CO 2 孵箱。
幻灯 37 显示的是冰箱内部物品的管理。
幻灯 38 显示的是洗板机、摇床、酶标仪、移液器 。
幻灯 39 显示的是水浴箱、超净台、传递窗。
生物安全柜的洗手池和门把手应为自动开关，仅供洗手用，不可倒入任何实验废弃液，应用自动烘干机干手，定期消毒门把手。
幻灯 41 显示的是最常见的办公室污染源。
七、检验科实验室生物安全管理制度
作为检验科来讲，一定要建立一整套 实验室生物安全的管理制度，包括 人员培训考核制度，实验室准入制度，设施 / 设备监测、检测和维护制度，健康监护制度，实验室资料档案管理制度，意外事件处理与报告制度，实验室安全保卫制度，消防安全管理制度等。
幻灯 45 显示的是发现生物安全或生物恐怖事件报告流程图。 假如说东城 区 公安局总值班出现情况， 总值班接到 相关科室负责人的电话， 要 报告到相应的卫生局。 科室 内如果出现生物危害，科室的第一负责人一定要迅速报告到医院的总值班，报告到保卫处，由医院 、 总值班和保卫处再去报告 给 相应的卫生管理部门。一定要 在最短的时间内 报告。
生物安全在临床实验室管理中的地位及重要性
首都医科大学附属北京天坛医院 张国军
一、实验室安全设备的选择
临床医学实验室活动可产生很多的生物危害，为防止这些生物危害对操作者或其他进入实验室的人员产生的危害，在临床医学实验室中必须有相应的安全设备。临床医学实验室需要采血、或制备血图片或细菌图片，都可能引起意外的划伤或刺伤，这时需要一种安全设备——利器盒，把采血用完的采血针或涂片放到利器盒中。采血管有可能发生泄露或产生气溶胶，这时最好用螺口的带盖瓶子储存或分装。一些样本，尤其是细菌菌种的运输和储存，可能会造成意外泄露。为防止泄漏，运送时一定要采用专用的样本运输箱。凡是能产生气溶胶的操作，最好是在生物安全柜或具有负压柔性的薄膜隔离装置中进行。 如果操作过程中能产生喷溅，需要佩戴个体防护装备，包括面罩、护目镜、手套、防护服等。在进行热操作或接种环灭菌时，也可能产生气溶胶，或经口摄入污染，这时要用生物安全柜或一次性的接种环。操作碱性或酸性等腐蚀性化学物品时，为了防止喷溅可能造成的意外伤害，需要防护装备，如护目镜、口罩、帽子。同时还有洗眼器、紧急喷淋装置。
二、生物危害
(一)分类
1. 相关实验研究人员感染
集中在严重的病毒性感染，如肾综合征出血热、各种类型的肝炎、艾滋病、SARS、TB等。
2. 致病微生物对环境的污染
病原从实验室或通过实验动物逸出，对环境造成污染。
3. 生物制品的污染
生物制品被病毒病原污染在许多国家均有发生，主要是一些血源性疾病和输血性肝炎、艾滋病等。
(二)传播途径
1. 经呼吸道
经呼吸道传播主要是气溶胶，气溶胶为粒径0.001-100μm的悬浮于空气中的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。
2. 经口腔-肠道
细菌或病毒通过口腔进入到肠道，如果黏膜存在破溃，可能造成感染。
3. 经皮肤破损处
4. 经黏膜接触
例如操作时，细菌、病毒或其他有害物质溅到眼睛中，经眼睛的黏膜造成相应的感染。
三、生物安全实验室分级
临床上生物安全实验室分为一级、二级、三级、四级。临床实验室主要是生物安全二级实验室。适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物，如麻疹病毒、沙门氏菌、弓形体、乙型肝炎病毒等。
生物安全二级实验室的防护措施是生物安全柜，可以产生负压和特定的气流流向，从而保护操作者。适用于容易产生气溶胶、飞溅以及病原体培养。生物安全二级实验室中还需要配备灭菌锅、洗眼器等。
PPT6显示的是生物安全二级实验室模式图，操作时要有生物安全柜，同时要有生物安全标识，要有相应的防护装置。气流形成较一致的流向。
PPT7显示的是生物安全柜中的操作，包括细菌培养接种。
四、安全操作规范
生物安全要有安全操作规范，任何一个临床实验室都必须建立安全的管理制度，包括生物安全的管理委员会(一般由院长作为整个医院生物安全管理委员会的主任委员)，同时有临床及管理部门的人员参加，科室也要建立生物安全操作规范。
应对所有工作人员进行定期的生物安全培训，包括对生物安全理论知识的培训和讲解，包括生物安全规范制度的讲解，同时要进行生物安全演练。
五、实验室感染的控制
(一)指定专门机构承载实验室感染控制工作，医院一般由院感办公室来统筹安排。
(二)经常进行相应的检查和培训
包括实验室生物安全防护情况，定期调查了解工作人员的健康情况，菌(毒)种的保存、使用、安全操作情况，实验室排放的废水、废气和废物的处理。
(三)预防实验室感染
包括生物安全柜的安全参数验证、排风过滤安全验证、废水废物的高压灭菌的验证。
(四)预防注射
(五)预防治疗
(六)实验室感染发生时积极隔离治疗
六、检验科细菌室生物安全管理
检验科最有可能造成生物安全的地方是细菌室，因此细菌室要有较严格的管理规定。首先要有实验室人员准入制度，另外要有门禁系统，对于新入科的人员，要对其进行相应的培训，加大力度进行管理。
菌种和样本的储存最好放在专门的冰箱或储藏柜中，同时要进行双人双锁管理，有条件者，最好能安装电子监控。
七、生物安全管理培训
实验室负责人要进行相应的生物安全讲解，参加培训的人员要进行签名，同时要对培训人员进行现场考核。生物安全培训，一年至少进行 1-2 次。
清洁工也是生物安全培训很重要的对象，有些实验室可能会忽略这一点。作为临床医学实验室的管理者，一定要对进入实验室的所有人员进行培训。
医疗废弃物是指医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。医疗废弃物的处理一定要按照医疗卫生机构相应的规定去做。
临床实验室中还存在化学品、火箭、辐射等安全问题，同样对实验室的安全操作带来危害，也必须要引起我们的重视。
八、危险的化学品分类
第一类：爆炸品;第二类：压缩气体和液化气体;第三类：易燃液体;第四类：易燃固体;第五类：氧化剂和有机过氧化物;第六类：毒害品;第七类：放射性物品;第八类：腐蚀品。
实验室生物安全相关设备及使用要点 首都医科大学附属北京天坛医院 张国军
一、生物安全柜
(一)概况
生物安全柜(BSCs)是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。当操作液体或半流体，例如摇动、倾注、搅拌，或将液体滴加到固体表面上或另一种液体中时，均有可能产生气溶胶。在对琼脂板划线接种、用吸管接种细胞培养瓶、采用多道加样器将感染性试剂的混悬液转移到微量培养板中、对感染性物质进行匀浆及涡旋振荡、对感染性液体进行离心以及进行动物操作时，这些实验室操作都可能产生感染性气溶胶。由于肉眼无法看到直径小于5μm的气溶胶以及直径为5～100μm的微小液滴，因此实验室工作人员通常意识不到有这样大小的颗粒在生成，并可能吸入污染工作台面的其他材料。已经表明，正确使用生物安全柜可以有效减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物污染。生物安全柜同时也能保护环境。
生物安全柜一般用于做致病菌、霉菌酵母菌，操作区域是负压，简单说是往处抽风的，当然致病菌也不是直接抽出排到室外，是过滤在生物安全柜的顶部漏器上，从排风量上可以分为50%外排型/75%以及100%外排型。超净台是做一般对人体没有直接伤害的常规细菌的操作实验，正压送风，吹向样品以及实验人员的风是经过过滤器过滤，达到局部百级。超净台就相当于一个缩小了的无菌室(无菌空间)。简单的说就是生物安全柜是往里面吸空气，防止生物病菌或试剂溅出安全柜污染实验室和实验员，是保护人的设计。超净台是往外吹风，不考虑实验室和实验员，是保证试验台无菌环境的仪器。
(二)生物安全柜的分级
1.I级生物安全柜
排出的气体经HEPA过滤，使柜内保持负压状态。非循环气流流向柜内，再经HEPA滤膜过滤后排放到室内，适用于保护操作人员，不需要对实验样品进行保护的情况。
2.II级生物安全柜
(1)A
1、A2型：排气到室内(表面风速不同)。
(2)Bl型：70%排气到室外。
(3)B2型：100%排气到室外。
II级生物安全柜可有效保护操作人员、样品及环境，整个操作区域无菌，气体经HEPA滤膜过滤后排放到室内。经过过滤后，进入到样品区域的空气必须是洁净的空气。
3.III级生物安全柜
完全密闭，100%进气、100%排气。
幻灯10显示的是生物安全柜比较。I级生物安全柜没有涡流单向流空气，不能保护实验对象不受污染，不需要手套箱式操作口;II级生物安全柜有涡流单向流空气，可以实验对象不受污染，不需要手套箱式操作口;III级生物安全柜有涡流单向流空气，可以实验对象不受污染，需要手套箱式操作口。
(三)正确使用生物安全柜
1.I级生物安全柜
非循环气流流向柜内，再经HEPA滤膜过滤后排放到室内，适用于保护操作人员，不需要对实验样品进行保护的情况。
2.II级生物安全柜
有效保护操作人员、样品及环境，操作区域无菌，气体经HEPA滤膜过滤后排放到室内。
3.III级生物安全柜
完全密闭，100%进气、100%排气，不得使用超净台操作传染性材料。
(四)生物安全柜的使用
1.柜内物品摆放原则
(1)按照洁净区到污染区的方向摆放。
(2)所有物品尽可能放在工作台后部。
(3)可产生气溶胶的设备应靠近安全柜的后部。
(4)废弃物袋、盛废气吸管的盘子，以及吸滤瓶等体积较大的物品，放在柜内的某一侧。
(5)前进气格栅不能被纸、仪器设备或者其他物品阻挡。
幻灯14的图片上可以看到生物安全柜分为洁净区，半污染区和污染区。
幻灯15显示的是日常工作中物品的摆放。
2.对紫外灯的要求
(1)每周都要进行清洁，除去可能影响杀菌效果的灰尘和污垢。
(2)每次生物安全柜的认证，要检查紫外线的强度，确保有消毒、灭菌能力。
(3)房中有人时，一定要关闭紫外灯，以保护眼睛和皮肤。
3.对明火的要求
(1)在生物安全柜中，最好不要用明火，因为明火可以造成生物安全柜内的气流紊乱，干扰正常的气流流动模式，同时还可能损坏我HEPA过滤器。
(2)处理挥发性的物品和易燃物品时，容易造成危险。
(五)工作前准备
首先要用紫外灯照射30分钟，关掉紫外灯后，打开安全柜的日光灯和风机，用消毒剂对生物安全柜内的内表面进行消毒擦试。将实验中需要用到的物品集中用消毒剂擦试后，放到台面相应的位置上，不能挡在挡风口上。等待5分钟后，净化工作区的空气污染物。
幻灯19显示的是生物安全柜物品的摆放。
(六)操作规范
1.双臂垂直缓慢进入前面的开口，在生物安全柜中等待约1分钟，使安全柜调整完毕后，才可对样品进行处理。
2.所有操作都应在离前窗10cm以外的工作区进行。
3.废弃物应丢弃在生物安全柜内的处理容器中。
(七)操作时注意事项
1.避免胳膊在前开口处快速地移动和频繁进出。
2.尽量避免污染物进入洁净区。
3.在生物安全柜内进行操作时，不能进行文字工作。
4.尽量减少操作者身后的人员活动。
(八)工作结束后的要求
1.将安全柜继续运行至少3分钟来完成净化的过程。
2.将柜内物品移出前，使用有效的消毒剂进行擦试。
3.每天实验结束后，对生物安全柜内的内壁和台面进行擦试。
4.等待5分钟后，关闭前窗，关灯，关风机，然后用紫外灯照射30分钟。
(九)生物安全柜的维护
1.用70%的酒精或合适的消毒剂擦试内壁的工作台。
2.如果使用漂白剂等腐蚀性的消毒剂，需要用无菌的水再次擦试，以除去残余的消毒剂，防止对生物安全柜内壁的腐蚀。
3.定期抬起工作台面，对其下面的区域进行清洁。
4.消毒后，用玻璃清洁器对前窗玻璃和紫外灯进行清洁。
(十)紫外灯管的清洁
1.用纱布蘸75%乙醇，擦试灯管。
2.不能直接用手接触灯管的表面。
3.用玻璃清洁剂对灯管进行表面清洁，清洁时，一定要等灯管的温度降到室温。
(十一)定期保养
用湿布擦试内壁和工作台面;每年按需要更换紫外灯和日光灯。同时，每年至少认证1次。
(十二)清除污染
可以使用甲醛或过氧化氢熏蒸等方法，应由有资质的专业人员来进行。以下情况下需要进行熏蒸：检查和维修之前，更换HEPA滤器之前，在移动安全柜之前，安全柜被严重污染，使用目的发生改变，长时间没有使用。
二、超净工作台
生物安全柜除了能保护实验材料免受污染外,还可保护操作人员及环境,而超净台只能保护实验材料,不能保护操作人员及环境。
三、通风柜
可以保护使用者的安全,防止实验中的污染物质向实验室扩散。
四、消毒设施及用品
消毒方式有以下3种：
(一)化学消毒
许多消毒剂对人或环境有害,明确有效消毒浓度及配制日期及有效期,确保相关人员知晓,配制及使用均应有记录。
(二)高压消毒
(三)焚烧
理想的是一级焚烧室的温度至少应达到800摄氏度，而二级焚烧室的温度至少应达到1000摄氏度，焚烧炉可能对环境造成负面影响。
五、安全防护用具
幻灯31显示的是安全操作的设备，包括安全柜、消毒筒、紫外消毒灯、洗眼器、淋浴器、带螺口的试管、高压消毒设备、离心机、个人的防护设备灯。
(一)各级生物安全实验室的个人防护要求
1.BSL-1实验室
工作人员实验时应穿工作服，戴手套,必要时戴防护眼镜。离开实验室,必须脱下工作服,留在实验区,不得穿着进入办公区。工作服应定期消毒。
2.BSL-2实验室
除符合BSL-1的要求外，还应该符合下列条件：
(1)在实验室中应穿专用工作服或防护服。
(2)如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。
(3)当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。
3.BSL-3实验室
除符合BSL-2的要求外，还应该符合下列条件：
(1)工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室(或缓冲间)进行正确的个人防护,包括2层专用防护服(外层应是背开式)、2层手套、生物安全专业防护口罩(不得使用医用外科口罩等)、2层鞋罩。必要时佩戴眼罩、呼吸保护装置等。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。
2.必须戴手套(两付)。在操作传染性物质或已被污染的仪器后，需脱去、换戴外层手套。当手移出生物安全柜时，准备进行生物安全柜外的操作，如使用离心机、温箱、开冰箱、使用电话等，必须换戴外层手套。
3.在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。配备应急药品。
4.有可能溅出或喷出传染性物质、危险试剂、或进行可能产生感染性气溶胶的操作时，需使用面部和眼部防护器具。当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。
5.当有的程序不能在生物安全柜内处理时，要组合使用适当的操作人员防护设备(如面罩、呼吸器)和物理容器设备。
6.实验结束后，清理、消毒操作台和实验室时，应保持戴手套。谨记不能带着实验内的手套离开BSL-3实验室。所有离开BSL-3实验室的物品必须正确消除污染，并放在干净的容器或袋子中。需要继续进行实验室外的操作时，应重新带干净的手套。
(二)移液器和移液管的使用
使用移液器等辅助器材时，严禁用口吸。所有移液管都应带有棉塞，以减少污染。不能向含有感染性物质的溶液中吹入气体，感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合，不能将液体从移液管内用力吹出。污染的移液管，应完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎的容器中。盛放废气移液管的容器，不能放到外面，应当放在生物安全柜内。
(三)样本运输箱
必须能防止微生物泄露。有3个特征：坚固，高空落下不易碎;能盛放感染物质的防水性一级和二级容器;用于吸收溢出物的材料。
国际民航组织的《危险物品航空安全运输技术细则》中将感染性物质分为A、B两类。
1.A类感染性物质
指在运输过程中与之接触能对健康人或动物造成永久性残疾或致命疾病的感染性物质。此处“接触”系指感染性物质离开保护性包装与人或动物的身体接触或经呼吸道吸入的情况。
A类感染性物质使人染病或使人和动物都染病者，联合国编号为UN2814，其运输专用名称为危害人的感染性物质;仅使动物染病者联合国编号为UN2900，其运输专用名称为仅危害动物的感染性物质。
幻灯41显示的是A类感染性物质的包装与标签。
2.B类感染性物质
不符合列入A类标准的感染性物质。其联合国编号为UN3373。运输专用名称为诊断标本或临床标本或生命物质B类。 幻灯43显示的是B类感染性物质的包装与标签。
幻灯44显示的是托运人资质。
幻灯45的表格是A类包装和B类包装的汇总。A类包装是对人和动物致死或者永久致残的生物物质。B类包装是不符合A类标准的感染性物质。A类物质必须有UN的专用标记，B类可以没有。A类包装，一定是防水、防穿刺、防泄露;而B类包装，要防破损，防泄漏。一定要有危险品申报单。
幻灯46显示的是常规的转运标本容器、转运箱，以及防振动和泄露的物质。
在设施内的运送：为了避免意外的泄漏或溢出，应当使用盒子等二级容器，并将它固定在架子上，使装有标本的容器保持直立。二级容器可以是金属或塑料的制品，应该具有耐高压灭菌或耐受化学消毒剂的作用。密封口最好有一个垫圈，要定期进行清除污染。
(四)手套的使用规范
1.在佩戴前，应检查是否有漏损。
2.戴好后，完全遮住手腕部，可以覆盖实验室长罩服或外衣袖子。
3.如果撕破或者怀疑内部有污染，要及时更换。
4.在工作时，需要接触参考资料、电话或键盘前，要摘掉污染的手套。
5.在出实验室之前，一定要把手套摘下。
戴手套注意要点：在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套;将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖;手套的手要远离面部。
脱手套过程及注意要点：用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内;用戴着手套的手拿住该手套;用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面;脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状;丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。
幻灯51显示的是戴手套和脱手套的过程。
(五)护目镜
护目镜应该戴在常规视力矫正眼睛或隐形眼镜的外面，防止飞溅和撞击，对生物学危害没有保护作用，主要是防止液体的飞溅。
(六)安全眼镜 即使侧面带有护罩镜也不能对喷溅提供充分的保护，可起到防止碰撞的作用。
(七)防护面罩
采用防碎塑料制成，形状与脸形是比较相配，通过头带或帽子佩戴，可防止碰撞和喷溅，在发生意外时，很容易把它取下。
1.对整个脸部进行防护
必须使用一种标准的防护面罩以罩住整个脸部，或使用口罩加护目镜(或口罩加安全镜)。
2.保护部分面部
配戴安全眼镜或护目镜，但必须戴口罩以保护部分面部或配戴标准防护面罩。
3.注意事项
在使用防护面罩时常常同时佩带安全镜或护目镜或口罩。实验完毕后必须先摘下手套，然后用手卸下防护面罩。
(八)口罩
只适用于生物安全一级和二级的实验室中使用。只能保护部分面部免受生物危害物质，如血液、体液、分泌液以及排泄物等的污染。
(九)鞋
临床实验室中，所穿的鞋应舒适、防滑。露趾便鞋不适合坐位实验室用鞋。推荐使用皮质或合成材料的不渗液体的鞋类。
(十)洗眼装置
如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时，应该(或在同事的帮助下)在就近的洗眼台(洗眼装置)用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少15-30分钟。
(十一)淋浴装置和应急消毒喷淋装置
可降低苛性碱和腐蚀性化学品对身体的危害。
1.规定
BSL-2实验室在必要时应设置应急喷淋装置;BSL-3实验室应设置淋浴装置(清洁区)，必要时在半污染区设置应急消毒喷淋装置。 2.要求
保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒喷淋、装置的摆放位置、培训其操作方法。
3.应急消毒喷淋装置在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要20分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。
六、安全脱卸个人防护装备的考虑要点
一般情况下的脱卸顺序：外层手套——面罩/或护目镜——隔离衣——口罩、防护面具、防护帽——鞋套——内层手套。
主要特别强调的是所有个人防护装备不得带离实验室。
临床实验室常见感染性物质处理原则
首都医科大学附属北京天坛医院 张国军
一、医疗废物的定义
指医疗卫生机构在医疗预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。
包括感染性废物、病理性废物、损伤性废物、药物性废物和化学性废物。
实验室中的废弃物主要为感染性废弃物，包括：实验室培养物、可能为污染源的送检标本如血液，各种体液，排泄物;在标本采集时与感染病人有接触的组织(棉签)等物品;沾有人的组织或液体的锐器，如针头、输液器、解剖刀、小刀子、刀片、剪刀和碎玻璃等废弃物，在医疗废物中占的比重较大，是最为主要的医疗废物之一。
二、废物处理相关的法规制度
《巴塞尔公约》已将部分医疗废物列入危险废物名录的首位。国际上对医疗废物管理的总体原则是从医疗废物的产生;分类收集;警示标记;密闭包装与运输、贮存、无害化处置的整个流程实行全过程严格控制。
据卫生部 2001 年对全国 20 个省、市、区 96 家医院医疗废物管理现状调查，医疗废物的管理和处置存在严重的问题。缺乏适合我国国情的专门法规，医疗废物混入生活垃圾，流入社会的现象普遍。 1992 年生效的《巴塞尔公约》已有 100 多个国家签约，中国政府 1990 年签署了公约。
为了加强医疗废物的安全管理，防止疾病传播，保护环境，保障人民群众身体健康，国家在 2003 年先后颁布的以下几个重要文件，标志着我国对医疗废物管理步入法制化管理的轨道。包括国务院颁布的《医疗废物管理条例》，卫生部颁布的《医疗卫生机构医疗废物管理办法》，卫生部、国家环保总局共同颁布的《医疗废物分类目录》，《医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定》、《医疗废物管理行政处罚办法》。
《医疗卫生机构医疗废物管理办法》中明确了医疗卫生机构对医疗废物的管理职责。医疗卫生机构应当建立、健全医疗废物管理责任制，其法定代表人或者主要负责人为第一责任人，切实履行职责，确保医疗废物的安全管理。
三、医疗废弃物的处理
(一)分类收集、运送、暂时贮存
医疗卫生机构应当按照以下要求，及时分类收集医疗废物。
1. 根据医疗废物的类别，将医疗废物分置于符合《医疗废物专用包装物、容器的标准和警示标识的规定》的包装物或者容器内。
2. 在盛装医疗废物前，应当对医疗废物包装物或者容器进行认真检查，确保无破损、渗漏和其它缺陷。
3. 感染性废物、病理性废物、损伤性废物、药物性废物及化学性废物不能混合收集。少量的药物性废物可以混入感染性废物，但应当在标签上注明。
4. 废弃的麻醉、精神、放射性、毒性等药品及其相关的废物的管理，依照有关法律、行政法规和国家有关规定、标准执行。
5. 化学性废物中批量的废化学试剂、废消毒剂应当交由专门机构处置。
6. 批量的含有汞的体温计、血压计等医疗器具报废时，应当交由专门机构处置。
7. 医疗废物中病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液等高危险废物，应当首先在产生地点进行压力蒸汽灭菌或者化学消毒处理，然后按感染性废物收集处理。
8. 隔离的传染病人或者疑似传染病病人产生的具有传染性的排泄物，应当按照国家规定严格消毒，达到国家规定的排放标准后方可排入污水处理系统。
9. 隔离的传染病病人或者疑似传染病病人产生的医疗废物应当使用双层包装物，并及时密封。
10. 放入包装物或者容器内的感染性废物、病理性废物、损伤性废物不得取出。
11. 医疗卫生机构内医疗废物产生地点应当有医疗废物分类收集方法的示意图或者文字说明。
12. 盛装的医疗废物达到包装或者容器的 3/4 时，应当使用有效的封口方式，使包装物或者容器的外表面被感染性废物污染时，应当对被污染处进行消毒处理或者增加一层包装。
13. 盛装医疗废物的每个包装物、容器外表面应当有警示标识，在每个包装物、容器上应当系中文标签，中文标签的内容应当包括：医疗废物产生单位、产生日期、类别及需要的特别说明等。
14. 运送医疗废物应当使用防泄漏、防遗撒、无锐利边角、易于装卸和清洁的专用运送工具。
15. 每天运送工作结束后，应当对运送工具及时进行清洁和消毒。
16. 医疗卫生机构应当建立医疗废物暂时贮存设施、设备，不得露天存放医疗废物;医疗废物暂时贮存的时间不得超过 2 天。
(二)医疗废物暂时贮存设施、设备
应当达到以下要求：
1. 有远离医疗区、食品加工区、人员活动区和生活垃圾存放场所，方便医疗废物运送人员及运送工具、车辆的出入。
2. 有严密的封闭措施，设专(兼)职人员管理，防止非工作人员接触医疗废物。
3. 有防鼠、防蚊蝇、防蟑螂的安全措施。
4. 防止泄漏和雨水冲刷。
5. 易于清洁和消毒。
6. 避免阳光直射。
7. 设有明显的医疗废物警示标识和“禁止吸烟、饮食”的警示标识。
(三)医疗废物的登记制度
医疗卫生机构应当将医疗废物交由取得县级以上人民政府环境保护行政主管部门许可的医疗废物集中处置单位处置，依照危险废物转移联单制度填写和保存转移联单。
医疗卫生机构应当对医疗废物进行登记，登记内容应当包括医疗废物的来源、种类、重量或者数量、交接时间、最终去向以及经办人签名等项目。登记资料至少保存 3 年。
(四)禁止转让、买卖
禁止医疗卫生机构及其工作人员转让、买卖医疗废物。禁止在非收集、非暂时贮存地点倾倒、堆放医疗废物，禁止将医疗废物混入其它废物和生活垃圾。
(五)医疗废物的自行处置
不具备集中处置医疗废物条件的农村地区，医疗卫生机构应当按照当地卫生行政主管部门和环境保护行政主管部门的要求，自行就地处置其产生的医疗废物。自行处置医疗废物的，应当符合以下基本要求：
1. 使用后的一次性医疗器具和容易致人损伤的医疗废物应当消毒并作毁型处理。
2. 能够焚烧的，应当及时焚烧。
3. 不能焚烧的，应当消毒后集中填埋。
(六)意外事故的紧急处理
医疗卫生机构发生医疗废物流失、泄漏、扩散和意外事故时，应当按照以下要求及时采取紧急处理措施：
1. 确定流失、泄漏、扩散的医疗废物的类别、数量、发生时间、影响范围及严重程度。
2. 组织有关人员尽快按照应急方案，对发生医疗废物泄漏、扩散的现场进行处理。
3. 对被医疗废物污染的区域进行处理时，应当尽可能减少对病人、医务人员、其它现场人员及环境的影响。
4. 处置措施，对泄漏物及受污染的区域、物品进行消毒或者其他无害化处置，必要时封锁污染区域，以防扩大污染。
5. 对感染性废物污染区域进行消毒时，消毒工作从污染最轻区域向污染最严重区域进行，对可能被污染的所有使用过的工具也应当进行消毒。
6. 工作人员应当做好卫生安全防护后进行工作。
7. 处理工作结束后，医疗卫生机构应当对事件的起因进行调查，并采取有效的防范措施预防类似事件的发生。
(七)发生意外伤害的处理
医疗卫生机构的工作人员在工作中发生被医疗废物刺伤、擦伤等伤害时，应当采取相应的处理措施，并及时报告机构内的相关部门。
具体实际施行时应做到以下几方面：
1. 建立医疗废物管理制度
参照《办法》第
二、三章。
( 1 )明确负责人：法定代表人或主要负责人。
( 2 )成立医疗废物管理机构：总务后勤为主，护理部门协助，院感办监督。
( 3 ) 建立 医院内医疗废物管理制度、医疗废物处置工作流程。
( 4 ) 建立 临床科室、医技部门的医疗废物管理制度。
( 5 ) 建立 医疗废物的分类收集管理制度。
( 6 ) 建立 医疗废物回收、运送、贮存管理制度。
( 7 ) 建立 医疗废物暂时贮存场所的管理制度和工作要求。
( 8 ) 建立 医疗废物的交接、登记制度。
( 9 ) 建立 医疗废物意外事故的应急方案(确定、报告、处理、防护、消毒、调查、防范等)。
2. 制定各类工作人员的职责
参照《办法》第
二、
三、四章。
要明确主要负责人、医疗废物管理部门主管人员、医务人员负责医疗废物分类收集、医疗废物回收、运送人员、医疗废物贮存场所管理人员、医疗废物管理监督人员的职责。
3. 处置医疗废物分工
医疗废物分类收集由废物产生者，如医务人员、工作人员;医疗废物运送由专职工作人员(保洁公司);医疗废物暂时贮存由专职工作人员(保洁公司)。
4. 明确医疗废物处置工作流程
医疗废物产生地点——分类收集——回收(交接、登记)——运送——贮存场所(交接、登记)——无害化处理中心。
一次性医疗废物(输液袋等一次性塑料制品)应使用黄色塑料袋(专用包装袋);医疗废物，用黄色塑料袋(专用包装袋);锐利器具(针头、刀片、缝针、输液管、输血管等)，应使用黄色利器盒(专用包装袋);对收治的传染病病人或者疑似传染病病人产生的生活垃圾，应使用双层包装物(专用包装袋)。
使用利器盒无疑会大大减少护士工作中的受伤的机会，既减少临床护士处理利器的工作程序和劳动强度，又为临床操作节省宝贵的时间。使用后的注射器、针头等处理不当可能给他人造成伤害，也会污染环境。医院规范地处理医疗废物，特别是规范地处置损伤性废物和感染性废物，是医务人员医德的体现，社会责任感的良好体现。
根据医疗废物的危险程度进行分类，可重点安全管理感染性、损伤性废物，使感染性、损伤性废物得到有效处理，减少需重点处理的医疗废物量。
(八)《医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规》
1. 第二条——包装袋标准
( 1 )基本要求
装袋不得使用聚氯乙烯( PVC )塑料为制造原料;聚乙烯( PE )包装袋正常使用时不得渗漏、破裂、穿孔;最大容积为 0.1m 3 ，大小和形状适中，便于搬运和配合周转箱(桶)盛状;如果使用线型低密度聚乙烯( LLDPE )或低密度聚乙烯与线型低密度聚乙烯共混( LLPDE+LDPE )为原料，其最小公称厚度应为 150 μ m ;包装袋的颜色为黄色，并有盛装医疗废物类型的文字说明，如盛装感染性废物，应在包装袋上加注“感染性废物”字样;包装袋上应印刷本规定第五条确定的医疗废物警示标识。
( 2 )技术性能要求
包装袋外观标准符合要求，如划痕、气泡、穿孔、破裂、晶点、僵块、杂质。包装袋物理机械性能符合要求，如拉伸强度(纵向、横向)、断裂伸长率(纵向、横向)、落膘冲击质量( G )、热封强度。包装袋规格：推荐采用筒状包装袋：折径×长×厚( mm )： 450 × 500 × 0.15mm ;当包装袋容积在 0.1m 3 范围内，包装袋规格可以根据用户要求确定。当用户有特殊要求，并且包装袋容积超过 0.1m 3 时，包装袋厚度应根据试验确定，保证包装袋防渗漏、防破裂、防穿孔。
对未处理装袋的危险生物废弃物，应该禁止未授权的人接触和获得。最大值储存时间：超出温度 32 ℃ ，储存时间不得超过 7 天。或温度在 0 ℃以下，储存时间不得超过 90 天。
2. 第三条——利器盒标准
( 1 )利器盒整体为硬制材料制成，密封，以保证利器盒在正常使用的情况下，盒内盛装的锐利器具不撒漏、利器盒一旦被封口，则无法在不破坏的情况下被再次打开。
( 2 )利器盒能防刺穿，其盛装的注射器针头、破碎玻璃片等锐利器具不能刺穿利器盒。
( 3 )满盛装量的利器盒从 1.5m 高处垂直跌落至水泥地面，连续 3 次，利器盒不会出现破裂、被刺穿戴等情况。
( 4 )利器盒易于焚烧，不得使用聚氯乙烯( PVC )塑料作为制造原材料。
( 5 )利器盒整体颜色为黄色，在盒体侧面注明“损伤性废物”。
( 6 )利器盒上应印刷本规定第五条确定的医疗废物警示标识。
( 7 )利器盒规格尺寸可根据用户要求确定。
3. 利器盒使用注意事项
( 1 )使用前必须将黄色塑料袋置于利器盒的内层，以防渗漏。
( 2 )最多只能装至容量的 80% ，不得超过警戒线。
( 3 )封口要紧实、严密，严禁重新开启。
( 4 )遵照预防准则，不要套回针帽。
( 5 )不要分离针头和针筒，应将整副针具弃置。
( 6 )不要弯曲，毁损或用手直接处置使用后的针头。
( 7 )只能用把手小心搬运利器盒，应将利器盒远离你的身体。
( 8 )利器盒使用后应放置在安全合适的地方。
( 9 )利器盒的外表面不得沾有任何医疗废物，被污染时，应对被污染处进行消毒处理，必要时加一层包装。
( 10 )在进行转运时，必须把所有红色袋子和锐利器材的容器储放在第二个坚固的容器，例如桶、纸板箱、垃圾箱、大型垃圾装卸卡车、或箱子的第二个严格容器里。
( 11 )第二个容器必须是防渗漏和有紧闭合适的盖子。
( 12 )必须在第二个容器盖子、侧面上贴标签，并且标以词 “传染性废弃物”。或者用国际性生物符号和词 “生物危险”。可以重新使用的第二个容器，必须容易清理和洗涤，每当第二个容器空出时必须消毒，除非完全保护避免感染。
( 13 )转运中严禁扔、摔等动作，以避免造成包装破损和医疗废物的泄漏。
(九)实验室与医疗传染性 / 危险性生物的废弃物的初步处理
实验室与医疗传染性 / 危险性生物的废弃物可以使用下列方法进行初步处理：
1. 热力消毒和灭菌
加热是最常用的清除病原体污染的物理手段。“干”热没有腐蚀性，可用来处理实验器材中许多可耐受 160 ℃或更高温度 2 ～ 4 h 的物品。
2. 燃烧或焚化
燃烧或焚化也属于干热方式。在处理那些经过或事先未经清除污染的动物尸体以及解剖组织或其他实验室废弃物时，焚烧是一种有效的方法。只有在实验室可以控制焚烧炉的条件下，才能用焚烧代替高压灭菌来处理感染性物质。
3. 高压灭菌
高压灭菌的湿热法最为有效。临床使用最多的是高压湿热灭菌法。危险性生物废弃物掩埋之前，主要使用压力锅处理使废弃物变成非传染性，压力锅处理后废弃物应再以固体医疗废弃物掩埋，要注意不要还有其他危险例如辐射物质。
4. 煮沸
并不一定能杀死所有的微生物或病原体，但如果其他方法(化学杀菌、清除污染、高压灭菌)不可行或没有条件时，也可以作为一种最起码的消毒措施。
实验室生物安全法律法规及评估程序解读
首都医科大学附属北京天坛医院 张国军
一、实验室生物安全相关法律、法规
实验室的生物安全越来越受到人们的重视，我国陆续出台了若干部有关实验室生物安全的规范与标准。
(一)实验室生物安全通用要求
国家标准《实验室生物安全通用要求》 (GB19489 - 2004) 已于 2004 年 5 月 28 日颁布，于 10 月施行。
该标准由科技部和国家认证认可监督管理委员会提出、军事医学科学院主编，主要参考了 ISO15190 ： 2003(E) 《医学实验室安全要求》和 WHO 《实验室生物安全手册》 [ 第二版 ( 修订版 ) ， 2003] 。标准不仅适用于医学实验室，而且适用于进行各个级别的生物因子操作的各类实验室。
(二)病原微生物实验室生物安全管理条例
2004 年 11 月 12 日，国务院总理温家宝签署国务院令 ( 第 424 号 ) ，公布《病原微生物实验室生物安全管理条例》。条例分为七章：总则、病原微生物的分类和管理、实验室的设立与管理、实验室感染控制、监督管理、法律责任、附则。共 72 条。
(三)生物安全实验室建筑技术规范
建设部 2004 年 8 月 3 日发布公告，《生物安全实验室建筑技术规范》 (GB50346 - 2004) 自 2004 年 9 月 1 日起开始实施。该规范的实施改变了长期以来我国在生物安全实验室建设、建筑技术方面缺乏统一标准的局面。
(四)兽医实验室生物安全管理规范
为加强兽医实验室生物安全工作，防止动物病原微生物扩散，确保动物疫病的控制和扑灭工作以及畜牧业生物安全，农业部根据《中华人民共和国动物防疫法》和《动物防疫条件审核管理办法》的有关规定，参照国际有关对实验室生物安全的要求，制定了《兽医实验室生物安全管理规范》。并于 2003 年 10 月 15 日颁布施行。
(五)微生物和生物医学实验室生物安全通用准则
2002 年 12 月 3 日，国家卫生部发布了卫生行业标准《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则《 WS233 - 2002) 》，该准则于 2003 年 8 月 1 日开始实施。
但鉴于医疗机构微生物和生物医学实验室的状况以及生物安全要求的特殊性，卫生部于 2003 年 8 月 19 日发布通告 ( 卫通 [2003]14 号，宣布医疗机构推迟两年执行该准则。在此期间，卫生部将组织有关专家，针对医疗机构微生物和生物安全实验室的特点对该准则进行适当的补充完善。
(六)传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法
传染性非典型肺炎是一种严重的传染性疾病。为确保生物安全，防止实验人员感染和污染环境，科技部组织制定了《传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法》，于 2003 年 5 月 12 日颁布施行。
(七)消毒技术规范
2002 年 11 月由中华人民共和国卫生部 颁布。共 分四部分：总则;消毒产品检验技术规范;医疗卫生机构消毒技术规范(消毒与灭菌方法、一般诊疗用品的消毒、检验相关物品的消毒、污物的消毒处理等);疫源地消毒技术规范。
(八)国际标准规范
世界卫生组织一直非常重视实验室生物安全问题，早在 1983 年就出版了《实验室生物安全手册》; 2003 年 4 月第二版 ( 修订版 ) 以电子版形式在 WHO 网页上问世。美国在实验室的生物安全管理方面更是走在了世界的前面， NIH/CDC 联合出版的《微生物学及生物医学实验室生物安全准则》现已推出了第四版。很多国家在制定本国的生物安全准则时，主要参考上述两个准则。
二、临床实验室生物危害评估程序
(一)生物危害程度分级
2004 《实验室生物安全通用要求》根据其危害性(包括实验室感染的可能性、感染后发病的可能性、症状轻重及愈后情况、有无致命危险及有效的防止实验室感染方法、用一般的微生物操作方法能否防止实验室感染、我国有否此种菌种及曾否引起流行人群免疫力等情况)将感染性微生物分为四级：
1. 危害等级 I (低个体危害，低群体危害)
是指不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。
2. 危害等级Ⅱ ( 中等个体危害，有限群体危害 )
是指能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。
3. 危害等级 III (高个体危害，低群体危害)
指能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原体。
4. 危害等级Ⅳ ( 高个体危害，高群体危害 )
是指能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接或间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物间传播的病原体。
(二)生物危害评估
当实验室活动涉及传染或潜在传染性生物因子时，应进行危害程度评估。危害程度评估应至少包括下列内容：生物因子的种类(已知的、未知的、基因修饰的或未知传染性的生物材料)、来源、传染性、致病性、传播途径、在环境中的稳定性、感染剂量、浓度、动物实验数据、预防和治疗。危害程度评估应由适当的有经验的专业人员进行。
(三)生物危害评估程序
1. 目的
通过该程序对本中心所涉及的病原微生物生物进行危害程度评估，得出评估结论，从而对该病原微生物有充分地认识，该结论将指导本中心制定相应微生物操作、仪器设备使用的操作程序与管理规程;潜在危害分析与意外事故处理程序;人员防护及健康保障与监督等程序。
2. 范围
临床实验室主要对临床样本进行检测，从事常见病原微生物的鉴定和检测工作，对此类病原微生物的生物危害评估主要参照 2006 年卫生部《人间传染的病原微生物名录》进行。由于临床实验室多数按照 BSL-2 级实验室建设，因此对于高致病性病原微生物不进行分离和培养，一旦有可疑高致病性病原微生物的样本应转交给具有相应安全防护级别的实验室进行。
3. 职责和权限
医院生物安全委员会应组织有关专家进行病原微生物的生物危害评估，并对评估的结论进行核查和认可并做记录。
评估人员(包括实验室专家、设备专家、设施专家、临床医生及生物安全专家)应该应用自己在本领域丰富的经验，收集与拟进行研究或检测的病原微生物的相关资料以及实验室的性质或职能以及将进行的相关试验的信息，对这些因素进行综合评价。
(四)评估程序要求
1. 由实验室向医院生物安全委员会提出对某病原微生物生物危害评估的申请。
2. 医院生物安全委员会接到申请后应立即组织有关专家进行病原微生物的生物危害评估。
3. 各专家分工对病原微生物的背景资料(致病性、暴露的潜在后果、自然传播途径、病原微生物在环境中的稳定性、宿主、当地是否能进行有效的预防和治疗等)进行收集和分析。
4. 专家对拟从事实验活动的危险进行分析。
5. 专家综合病原微生物背景资料和拟从事的实验活动危险性分析 , 得出危害评估的结论。
评估结论主要包括 :
( 1 )根据实验的内容与对各实验环境的分析 , 明确危害来源和危害因素。
( 2 )进行固有风险评估 , 即未采取任何控制措施之前，如果事故发生可能面临的风险，确定危害产生的后果和产生后果的可能性。在此基础上，采用数字分级方式填写固有风险( IR )表。对高度风险的需要立即采取行动，对中度风险的必须明确后续处理时各人的职责，对低风险的采用常规程序处理。
幻灯 22 的表格显示的是不采用有效的控制措施产生危害的可能性。共 分为5级，等级1是指 少发生，发生的可能性描述为仅在异常情况下可能发生;等级 2 是不大可能发生，发生的可能性描述为有时可能会发生;等级 3 是可能发生，发生的可能性描述为有时很可能会发生;等级 4 是很可能发生，发生的可能性描述为在大多数情况下可能会发生;等级 5 是几乎是确定发生的，发生的可能性描述为在大多数情况下预计要发。
幻灯 23 表格显示的是固有风险。后果的严重性 分为5种，第一种是不重要，第二种是低度，第三种是中度，第四种是高度，第五种是灾难性。
幻灯 24 显示的是控制措施有效性的评级标准。 很好的评级标准是：控制措施符合最佳操作规范，采用明确的标准，时刻得到遵循。高度强调对风险清除、采用替代方式或工程控制手段。合理：有控制措施，但未能时刻得到遵循，可能有不符合最佳操作规范之处。高度强调管理，防护性设备。不足：有部分控制措施甚或没有，未明确采用相应标准，控制措施中没有强调分等级控制的原则。
医学实验室生物安全相关概念
1、临床实验室生物安全的目的是避免( )造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施
A、微生物
B、传染性细菌 C、危险生物因子
D、传染性病毒
2、( )是指一切微生物和生物活性物质
A、生物因子
B、病原体
C、病毒
D、细菌
3、建设部2004年8月3日发布公告，《生物安全实验室建筑技术规范》自( )2004年9月1日起开始实施
A、2003 B、2002 C、2000 D、2004
4、气溶胶一般为( )的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系
A、0.001-100μm B、0.001-100mm C、0.1-1000μm D、1-200μm
5、以下对II级生物安全柜的认识，错误的是( )
A、有效保护操作人员、样品及环境 B、完全密闭
C、操作区域无菌
D、气体经HEPA滤膜过滤后排放到室内
6、生物安全三级实验室应在一级和二级实验室基础上增加( )
A、胶乳手套
B、呼吸道防护设备
C、洗眼器
D、洗手池
7、以下对生物安全柜和超净台的认识，错误的是( )
A、生物安全柜目的是防止生物病菌或试剂溅出安全柜污染实验室和实验员 B、生物安全柜是往里面吹空气
C、超净台是往外吹风
D、超净台目的是保证试验台无菌环境的仪器
8、生物安全二级实验室适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物，如( )
A、枯草杆菌
B、格氏阿米巴原虫
C、弓形体
D、感染性肝炎病毒
9、以下哪项不属于III级生物安全柜的特点( )
A、100%进气、100%排气
B、完全密闭
C、不需要对实验样品进行保护
D、不得使用超净台操作传染性材料
10、生物安全一级实验室不适合哪种病菌的研究工作( )
A、枯草杆菌
B、格氏阿米巴原虫
C、感染性肝炎病毒 D、沙门氏菌
生物安全在临床实验室管理中的地位及重要性
1、临床上生物安全实验室共分为( )级
A、3 B、4 C、5 D、6
2、凡是能产生气溶胶的操作，最好是在( )中进行
A、利器盒
B、密闭实验室
C、样本运输箱 D、生物安全柜
3、为了防止采血或制备血图片可能引起意外的划伤或刺伤，可采用以下哪种防护设备( )
A、利器盒
B、螺口的带盖瓶子
C、样本运输箱
D、一次性的接种环
4、操作碱性或酸性等腐蚀性化学物品时，为了防止喷溅可能造成的意外伤害，需要以下哪种防护设备( )
A、利器盒
B、护目镜、口罩
C、样本运输箱
D、一次性的接种环
5、细菌菌种的运输和储存可能会造成意外泄露，为防止泄漏，运送时一定要采用( )
A、利器盒 B、密闭实验室 C、样本运输箱
D、生物安全柜
6、在进行热操作或接种环灭菌时，也可能产生气溶胶，或经口摄入污染，这时要用以下哪种防护设备( )
A、利器盒
B、螺口的带盖瓶子
C、样本运输箱
D、一次性的接种环
7、以下对菌种和样本储存的认识，错误的是( )
A、最好放在专门的冰箱或储藏柜中
B、双人双锁管理
C、有条件者，最好能安装电子监控 D、应在高温环境下储存
8、经呼吸道传播主要是( )
A、支原体 B、气溶胶
C、生物因子
D、真菌
9、以下哪项不属于生物危害的传播途径( )
A、经血液
B、经呼吸道
C、经口腔-肠道
D、经黏膜接触
10、如果操作过程中能产生喷溅，需要佩戴除以下哪项外的防护设备( )
A、面罩
B、护目镜
C、紧急喷淋装置
D、防护服
实验室生物安全相关设备及使用要点
1、以下对生物安全柜物品摆放的认识，错误的是( )
A、所有物品尽可能放在工作台后部 B、按照污染区到洁净区的方向摆放
C、可产生气溶胶的设备应靠近安全柜的后部
D、前进气格栅不能被纸、仪器设备或者其他物品阻挡
2、生物安全柜操作时的注意事项，认识错误的是( )
A、避免胳膊在前开口处快速地移动和频繁进出 B、在生物安全柜内进行操作时，不能说话
C、尽量避免污染物进入洁净区
D、尽量减少操作者身后的人员活动
3、以下对I级生物安全柜的认识，错误的是( )
A、没有涡流单向流空气
B、不需要手套箱式操作口 C、可以保护实验对象不受污染
D、排出的气体经HEPA过滤，使柜内保持负压状态
4、以下哪项不属于样本运输箱的特征( )
A、不透光
B、坚固，高空落下不易碎
C、能盛放感染物质的防水性一级和二级容器
D、用于吸收溢出物的材料
5、应急消毒喷淋装置在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要( )分钟
A、10 B、40 C、20 D、30
6、二级焚烧室的温度至少应达到( )摄氏度
A、100 B、1000 C、800 D、1300
7、工作结束后应将安全柜继续运行至少( )分钟来完成净化的过程
A、0.5 B、2 C、1 D、3
8、护目镜的主要作用是( )
A、矫正视力
B、纠正色差
C、对生物学危害有保护作用 D、防止液体的飞溅
9、如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时，应该在就近的洗眼台用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少( )分钟
A、10-15 B、5-10 C、3-5 D、15-30
10、以下对生物安全柜和超净台的认识，错误的是( )
A、生物安全柜操作区域是负压
B、超净台是做一般对人体没有直接伤害的常规细菌的操作实验 C、超净台是往里面吸空气
D、生物安全柜一般用于做致病菌、霉菌酵母菌
临床实验室常见感染性物质处理原则
1、盛装医疗废物的每个包装物、容器上应当系中文标签，中文标签的内容不包括( )
A、医疗废物产生单位
B、产生日期
C、类别 D、患者姓名及诊断
2、锐利器具(针头、刀片、缝针、输液管、输血管等)，应使用( )色利器盒盛装
A、蓝 B、黄
C、红
D、黑
3、实验室与医疗传染性/危险性生物的废弃物的初步处理，临床使用最多的是( )
A、高压湿热灭菌法
B、煮沸法
C、燃烧法
D、热力消毒法
4、实验室中的废弃物主要为( )
A、损伤性废物 B、感染性废弃物
C、药物性废物
D、化学性废物
5、利器盒最多只能装至容量的( )，不得超过警戒线
A、70% B、95% C、90% D、80%
6、以下对医疗废弃物分类收集、运送、暂时贮存的认识，错误的是( )
A、运送医疗废物应当使用防泄漏、防遗撒、无锐利边角、易于装卸和清洁的专用运送工具
B、在盛装医疗废物前，应当对医疗废物包装物或者容器进行认真检查，确保无破损、渗漏和其它缺陷
C、批量的含有汞的体温计、血压计等医疗器具报废时，由医院直接粉碎处理
D、废弃的麻醉、精神、放射性、毒性等药品及其相关的废物的管理，依照有关法律、行政法规和国家有关规定、标准执行
7、对未处理装袋的危险生物废弃物储存时间不得超过( )天
A、3 B、1 C、7 D、5
8、“干热”没有腐蚀性，可用来处理实验器材中许多可耐受( )或更高温度2～4h的物品
A、1200℃
B、1600℃
C、120℃ D、160℃
9、《医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规》对利器盒标准的要求，错误的是( )
A、能防刺穿，其盛装的注射器针头、破碎玻璃片等锐利器具不能刺穿利器盒 B、利器盒整体颜色为红色，在盒体侧面注明“损伤性废物”
C、利器盒规格尺寸可根据用户要求确定
D、利器盒要易于焚烧
10、医疗废物暂时贮存的时间不得超过( )
A、2天
B、1天
C、12小时
D、5天
实验室生物安全法律法规及评估程序解读
1、国家标准《实验室生物安全通用要求》于( )年5月28日颁布
A、2004 B、2002 C、2001 D、1999
2、NIH/CDC联合出版的《微生物学及生物医学实验室生物安全准则》现已推出了第( )版
A、2 B、4 C、3 D、6
3、科技部组织制定了《传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法》，于( )年5月12日颁布施行
A、2004 B、2003 C、2001 D、1999
4、临床实验室生物危害评估后果的严重性分为( )种
A、3 B、4 C、5 D、6
5、中等个体危害，有限群体危害，属于危害等级中( )级
A、III B、I C、Ⅱ
D、Ⅳ
6、高个体危害，低群体危害，属于危害等级中( )级
A、Ⅳ
B、I C、Ⅱ
D、III
7、( )在实验室的生物安全管理方面走在了世界的前面
A、中国
B、印度
C、韩国 D、美国
8、能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接或间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物间传播的病原体，属于危害等级中( )级
A、III B、I C、Ⅳ
D、Ⅱ
9、( )的实施改变了长期以来我国在生物安全实验室建设、建筑技术方面缺乏统一标准的局面
A、兽医实验室生物安全管理规范 B、生物安全实验室建筑技术规范
C、微生物和生物医学实验室生物安全通用准则
D、消毒技术规范
10、不采用有效的控制措施产生危害的可能性，共分为( )级
A、3 B、4 C、5 D、6
第二篇：高中生物实验知识点总结
实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布
实验原理：DNA 绿色(甲基绿)，RNA 红色(吡罗红)
分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。
实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. (高倍显微镜下看不到DNA、RNA分子)
实验二 物质鉴定
还原糖 + 斐林试剂(水浴加热)～砖红色沉淀 脂 肪 + 苏丹III ～橘黄色
脂 肪 + 苏丹IV～ 红色
蛋白质 + 双缩脲试剂 ～紫色反应
斐林试剂现配现用，甲液和乙液等量混合均匀后再加入。 双缩脲试剂A液、B液分开加。
葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
实验三 观察叶绿体和细胞质流动
1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片
2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。
用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。
知识概要：
(1)为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶?
因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。
(2)取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉?
表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。
(3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度?最适温度是多少?
进行光照、提高水温、切伤部分叶片;25℃左右。
(4)对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显?
叶脉附近的细胞。
(5)若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的?
仍为顺时针。
(6)是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动?
否，活细胞的细胞质都是流动的。
实验四 观察有丝分裂
制作流程：解离→漂洗→染色→制片
1. 解离: 药液: 质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1 : 1混合液). 时间: 3~5min .目的: 使组织中的细胞相互分离开来.
2. 漂洗: 用清水漂洗约10min. 目的: 洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.
3. 染色: 用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~ 5min 目的: 使染色体着色,利于观察. 4. 制片: 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片. 然后用拇指轻轻地按压载玻片. 目的: 使细胞分散开来,有利于观察.
(三)观察
1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。
2、换高倍镜下观察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。(注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点)。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。
实验五 色素的提取和分离
1、原理：叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素
各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素
2、步骤：
(1)提取色素
研磨
(2)制备滤纸条
(3)画滤液细线：均匀，直，细，重复若干次
(4)分离色素：不能让滤液细线触及层析液
(5)观察和记录: 结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b). 二氧化硅 ( 为了使研磨充分)，
碳酸钙
(保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏)
实验六 观察质壁分离和复原
结论: 细胞外溶液浓度 > 细胞内溶液浓度，细胞失水 质壁分离
细胞外溶液浓度 < 细胞内溶液浓度，细胞吸水 质壁分离复原
实验七 探究酵母菌的呼吸方式
1、原理: 酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水：
C6H12O6 + 6O2 + 6H2O→6CO2 + 12H2O + 能量
在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳：
C6H12O6→ 2C2H5OH + 2CO2 + 少量能量
2、检测：(1)检测CO2的产生：使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
(2)检测酒精的产生：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。
实验八 低温诱导染色体加倍
1、原理：用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。
2、讨论：秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍，这两种方法在原理上有什么相似之处?
都能抑制纺锤体的形成
实验九 调查常见的人类遗传病
要求：调查的群体应足够大;选取群体中发病率较高的单基因遗传病。如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等.
实验十
探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用
1、常用的生长素类似物:NAA(萘乙酸), 2,4-D, IPA(苯乙酸). IBA(吲哚丁酸)等
2、方法：
①浸泡法：把插条的基部浸泡在配置好的溶液中，深约3cm，处理几小时或一天。处理完毕就可以扦插了。这种处理方法要求溶液的浓度较低，并且最好是在遮荫和空气湿度较高的地方进行处理。
②沾蘸法：把插条的基部在浓度较高的药液中蘸一下(约5s)，深约1.5cm即可。
3、预实验：先设计一组浓度梯度较大的实验进行探索,在此基础上设计细致的实验。
实验十一 种群密度的取样调查
(1)什么是种群密度的取样调查法?
在被调查种群的生存环境内，随机选取若干个样方，以所有样方种群密度的平均值作为该种群的种群密度。
(2)为了便于调查工作的进行，在选择调查对象时，一般应选单子叶植物，还是双子叶植物?为什么?
一般应选双子叶植物，因为双子叶植物的数量便于统计。
(3)在样方中统计植物数目时，若有植物正好长在边线上，应如何统计?
只计算该样方相邻的两条边上的植物的数目。
(4)在某地域中，第一次捕获某种动物M只，标志后放回原处。第二次捕获N只，其中含标志个体Y只，求该地域中该种动物的总数。 MN/Y
(5)应用上述标志重捕法的条件有哪些?①标志个体在整个调查种群中均匀分布，标志个体和未标志个体都有同样被捕的机会。②调查期中，没有迁入或迁出。③没有新的出生或死亡。
植物：样方法
动物：标志重捕法
第三篇：高中生物教材实验中涉及试剂知识总结
1、
斐林试剂 : 配制：1)甲液质量浓度为 0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml .2)乙液质量浓度为0.05g/ml，取5gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml .用时甲乙两夜等量混合，水浴加热，且必须现配现用。鉴别可溶性还原糖(葡萄糖，果糖，麦芽糖)时产生砖红色沉淀。
2、
双缩脲试剂：配制：1)甲液质量浓度为 0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml 。2)乙液质量浓度为0.01g/ml，取1gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml 。先加入甲液，再加入乙液。用于检测蛋白质中的肽键。应注意的是蛋白质一定有肽键，有肽键的不一定是蛋白质，如尿素。鉴定蛋白质时，产生紫色反应。
3、
班氏尿糖定性试剂：配制：称取17.4克无水硫酸铜(CuSO4)溶解于100毫升热蒸馏水中，冷却后，稀释到150毫升。称取柠檬酸钠(Na2CO3)100克，加蒸馏水600毫升，加热使之溶解，冷却后，稀释到850毫升。把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中，搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。使用方法同斐林试剂。
4、
苏丹红Ⅲ /Ⅳ：配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20ml95%酒精中。用于鉴定脂肪被苏丹红Ⅲ染为橘黄色，被苏丹红Ⅳ染为红色。鉴定时，先制备临时装片，再进行显微观察。
5、
甲基绿吡罗红染色剂：用于观察DNA和RNA在细胞中的分布情况。必须现用现配。DNA遇到甲基绿为蓝绿色，RNA遇到吡罗红为红色。
6、
盐酸：配置解离液或改变溶液的PH值。
7、
碘液：用于鉴定淀粉的存在，遇到淀粉变为蓝色。(用于光合作用实验)。
8、
龙胆紫溶液：用于染色体着色，可将染色体染成紫色，显色反应。
9、 醋酸洋红溶液：为碱性染料。与龙胆紫溶液一样，都是用于染色体着色，但它却是将染色体染成红色。
10、 层析液:配置：苯+丙酮。用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。
11、 二氧化硅：可使绿叶研磨充分。
12、 碳酸钙：防止在研磨时，叶绿体中的色素受到破坏。
13、 13.0.3g/ml的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，用于质壁分离实验。不会使细胞致死，且细胞分离后可复原。
14、 胰蛋白酶：用于分离蛋白质。用于动物细胞培养时分解组织，使组织细胞分散开，制成细胞悬浮液。
15、 秋水仙素：巨毒。人工诱导染色体组加倍。原理：化学诱变因子抑制有丝分裂时纺锤体的形成。
16、 氢氧化钠：用于吸收二氧化碳或改变溶液的PH值。用于细胞呼吸。
17、 碳酸氢钠：提供二氧化碳。用于细胞光合作用。
18、 澄清石灰水：鉴定二氧化碳。
19、 溴麝香草酚蓝水溶液：检测二氧化碳。溴麝香草酚蓝水溶液由蓝色变为黄色 20、 重铬酸钾的浓硫酸溶液：检测酒精在酸性条件下，酒精使橙色的重铬酸钾的浓硫酸溶液变为灰绿色。用于探究酵母菌的呼吸方式。
21、 健那绿染色剂：专一性用于线粒体染色的活细胞染料。将线粒体染成蓝绿色
22、 解离液：固定细胞形态，使细胞分散开。
23、 23.95%的酒精溶液：用于提取叶绿体中的色素。用于与15%的盐酸等体积混合后解离根尖。
24、 二苯胺：配制：称取1.5g二苯胺，溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，避光保存。DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。
第四篇：实验室生物安全
实验室生物安全事件应急预案
一 总则
(一) 目的对医学工作者健康与安全负责的精神，加强实验室生物安全的管理，制定有效的应急处理程序和控制措施，以保证在实验室发生生物安全事件时，做到应急准备充分，信息渠道畅通，指挥系统有效，反应机制灵敏，从而遏制生物安全事件危害的进一步扩大，保证中心相关人员的健康，保证公众健康和社会稳定。
(二)工作原则 1.预防为主 常备不懈 2.设施规范 管理到位 3.主动监测 反应及时 4.依法处理 措施果断 5.机制通畅 遏制危害
(三)适用范围
本预案适用于发生于实验室内部的、与实验室安全相关的、危害工作人员健康以及社会公众健康和社会稳定的所有事件。主要包括：
1.病原微生物和有毒有害化学试剂的实验室污染事件; 2.工作人员受到实验室内有毒有害病原微生物或有毒有害化学试剂的感染或侵害;
3.病原微生物、有毒有害化学试剂被泄漏出实验室事件。 4.由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。
(四)编制依据
1.《中华人民共和国传染病防治法》 2.《突发公共卫生事件应急条例》 3.《实验室生物安全通用要求》 4.《实验室生物安全手册》
(五)预案启动
当出现
(三)中的任意情况，启动本预案。
二、组织指挥体系及职责任务
(一)组织机构
1、元宝山区平庄镇中心卫生院实验室生物安全应急领导小组： 组长：孟宪杰 成员：李磊
2、元宝山区平庄镇中心卫生院实验室生物安全事件应急处理工作组
组长：孟宪杰 成员：李磊
(二)职能与工作
1.领导小组：制定实验室生物安全防护指导方针，规划对实验室的硬件建设、组织实施科学管理。在实验室生物安全事件发生时，决策指挥，调动人员，全面部署。
2.应急处理工作组：制定实验室生物安全管理办法，建立规章制度和实验室操作规范，对各类实验室的安全进行监督检查，督促各项
2 生物安全管理责任和措施落实到位;突发事件发生时，在领导小组的指挥下实施全面的应急工作。
三、预防预警
(一)预防
1.加强实验室标准化建设，对实验室设备的配置、个人防护和实验室安全行为应按《实验室生物安全通用要求》做出明确规定。
2.建立实验室病原微生物专库，建立有毒有害化学试剂专库。对于传染病病原样本、剧毒化学品建立严格的监督管理制度。
3.增强安全意识，合理完善实验室生物安全的各项规章制度。把生物安全管理责任和措施落到实处，消除安全隐患。实验室工作人员应自觉遵守实验室生物安全管理规定，严格按照操作规程和技术规范开展研究工作。
4.提高警惕，加强安全保卫，防止不法之徒盗窃病原微生物和有毒有害化学试剂，用于对人群进行生物化学恐怖攻击，对公众健康产生严重损害，影响社会稳定。
(二)预警
1.建立有效的预警机制，为各种病原微生物和有毒有害化学试剂建立档案和使用纪录，填写准确。每次使用后及时登记，发现遗失或被盗，立即报告(见处理程序)。
2.建立中心实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害应立即报告。
3.定期开展自查，及时发现安全隐患，发出预警通报。
四、应急控制措施
实验室生物安全事件发生后，立即启动应急机制。在领导小组的指挥下，有关部门进入应急状态，对突发事件进行侦测、调查，综合评估，采取应急处理措施，控制危害的蔓延等等。
(一)对实验室生物安全事件综合评估
1.流行病学调查 包括事件发生的原因、接触人员的发病情况、引起疾病流行的可能因素等。
2.标本、样品采集和检验 对污染的物品、区域、感染的人员进行采样和检测，对可疑生物进行样本检查，进行病原的分离鉴定，以确定事件的性质与危害。
3.污染区域划定 对污染区及其周围的地区进行卫生监测。对于病原微生物和有毒有害化学品、放射源的丢失或被盗事件，应监测生活资源受污染范围和严重程度，现场调查和取证人员应采取适宜的防护措施。
(二)现场控制措施
1.根据实验室生物安全事件发生的规模、危害的程度，可能波及的范围，封闭或封锁相关实验室和实验区。
2.传染源控制 对于受到实验室生物安全事件影响的现症病人实行就地报告，通过“绿色通道”，送至实验室人员感染救治的定点医院。对于疑似病人和接触者进行入院观察。对于事件中的高暴露人群根据实际情况进行预防性服药、留检、医学观察或隔离。在可能波及的范围内，开展疑似病例的搜索，开展传染源、传播途径及暴露因素
4 的调查。
3.对于查明的微生物病原、生物毒素以及有毒有害化学品污染的物品要对其进行封存和销毁，紧急封闭公共饮用水源等公众共用设施。
4.对受到污染实验室等所有场所、物品等进行消毒处理，具体方法参照《消毒技术规范》。
5.保护易感人群 对易受感染的人群和其他易受损害的人群采取紧急接种、预防性投药、群体防护等。
6.卫生知识宣教 针对事件性质，开展特异性卫生知识宣教。 7.人员疏散 出现大量或毒性极大的病原微生物和有毒有害化学试剂丢失、并有迹象出现严重危害公众健康事件时，可报请政府取消集会性活动，采取必要的停工、停业、停课和人员疏散措施。
8.消除区域民众心理障碍和精神应激 采取宣传教育、心理咨询等方式针对性解决。
(三)追踪监测
追踪事件可能波及的地区的高暴露人群，开展主动监测工作，做到早发现、早报告、早隔离、早治疗。
(四)上报与部门协调
及时上报卫生主管部门，报告程序按照《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》的有关规定。对于病原微生物、有毒有害化学试剂和放射源丢失的事件，立即上报公安部门，并与相关部门密切配合，尽快查明下落;要与卫生监督部门配合协调，
5 搞好相关区域的食品、饮水、环境卫生监督。
对于实验室人员受到感染和侵害事件，积极与医疗部门协调，提供有关资料，尽早确诊，尽早治疗，把危害降低到最小。
五、疫情的解除
如果查明实验室生物安全事件是由于细菌毒素或传染性较差的病原体引起的危害较小的污染，经实验室消毒处理后即可解除封锁。但对感染者必须加强治疗和必要的限制。如查明生物污染或泄漏是由于国家规定的
一、
二、类病原微生物，或发生上述相应疾病的病症时，应继续封锁，并应将封锁区分为若干个大小封锁圈。各封锁圈之间应完全隔离开来，对病人进行隔离治疗，对受感染者及病人密切接触者进行隔离留验。解除封锁的条件是对污染区或疫区进行必要的卫生处理，如对病原体进行彻底的消毒或扑灭;根据情况进行了必要的杀虫、灭鼠;对小隔离区进行终末消毒，并从最后一例病人算起，经过一个最长潜伏期仍无新的病人发生，报请批准封锁的主管部门解除封锁。
六、保障措施
1.技术保障
加强科学研究，提高科技含金量，强化实验室规范化建设。 2.人员培训
加强对涉及实验室生物安全的监测与预警、疫情分析评估、流行病学调查、消毒隔离技术等方面的业务培训。
加强对实验室业务人员在法制化管理和法律责任方面的培训。
3.监督检查
6 相关实验室要定期自查，建立实验室检查制度。 4.应急演练
应急演练工作每两年不少于1次。演练工作应根据性质的不同分类进行。
7 实验室生物安全事故和意外事故的处理程序
一、 菌(毒)外溢在台面.地面和其他表面
1、 戴手套，穿防护服，必要时需进行脸和眼睛防护。
2、 用布或纸巾覆盖并吸收溢出物。
3、 向纸巾上倾倒适当的消毒剂，并立即覆盖周围区域。通常可以使用2000mg/L漂白剂(或5%次氯酸钠溶液);但在飞机发生溢出时，则应该使用季铵盐类消毒剂，如苯扎溴铵等。
4、 使用消毒剂时从溢出区域的外围开始，向中心进行处理。
5、 作用适当时间后(例如 30 分)，将所处理物质理掉。如果含有碎玻璃或其他 锐器，则要使用簸或硬的厚纸来收集处理过的物品，并将它们置于可防刺透的容器中以待处 理。
6、 对溢出区域再次清洁并消毒(如有必要，重复第 2～5 步)。
7、 将污染材料置于防漏.防穿透的废弃物处理容器中。
8、 再成功消毒后，通知主管部门目前溢出区域的清除污染工作已经完成。 二.菌(毒)外溢在防护服上 应立即进行局部消毒，更换。污染的防护用消毒液浸泡后进行高压灭菌处理。 三.菌(毒)外溢到皮肤粘膜 这种情况被视为有很大危险，应立即停止工作，能用消毒液的部位可进行消毒， 然后用水冲洗 15～20 分。处理后安全撤离，视情况隔离观察，期间根据条件进 行适当的预防治疗。
8 四.皮肤次伤 若皮肤被刺破应被视为有极大危险，应立即停止工作，对伤口进行挤血，用水冲 洗消毒。视情况隔离观察，其间根据条件进行适当的预防治疗。 五.离心管发生破裂
(一) 非封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂 这种情况被视为发生溶胶暴露事故，应立即加强个人防护力度，其处理原则如下：
1、如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭机器电源，停止后密 闭离心筒至少 30 分，使气溶胶沉积。
2、如果机器停止后发现破裂，应立即将盖子盖上，并密闭至少 30 分。 发生这两种情况时都应报告实验室负责人。随后的所有操作都应加强个人呼吸保 护并戴结实的手套(如厚橡胶手套)，必要时可在外面戴适当的一次性手套。当 清理玻璃片时应当使用镊子，或用镊子夹着的棉花来进行。所有玻璃的离心管、玻璃碎片.离心桶.十字轴和转子都应放在无腐蚀性的.已知对相关微生物具有杀 灭活性的消毒剂内。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中，然后 回收。离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂反复擦拭，然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废物处理。
(二)在可封闭的离心桶(安全杯)内离心管发生破裂 所有密封离心桶都应在生物安全柜内装卸。如果怀疑在安全杯内发生破损，应该 松开安全杯盖子并将离心桶高压灭菌。还可以采用化学方法消毒安全杯。
六、潜在危害性气溶胶的释放(在生物安全柜以外)：
1、所有人员必须立即撤离相关区域，任何暴露人员都应接受医学咨询。应当立即通知实验室负责人和生物安全人员。为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降，在一定时间内严禁人员入内。如果实验室没有中央通风系统，则应推迟进入实验室。
2、就地张贴“禁止进入”的标志。过了相应时间后，在生物安全人员的指导下来清除污染。应穿戴适当的防护服和呼吸保护装备。
七、发现相关症状 若操作者或其所在实验室的工作人出现于被操作病原微生物导致疾病类似的症状，则应被视为可能发生实验室感染，应及时到指定医院就诊，并如实主诉 工作性质和发病情况。在就诊过程中，应采取必要的隔离防护措施，以免疾病传播。
第五篇：微生物实验室生物安全操作规程
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一、目的
制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫生以及防止对外界环境造成污染。
二、适用范围
适用于微生物实验室人员人身安全、卫生健康安全管理及设备安全。
三、职责
实验室工作人员必需严格遵守安全操作规程。
四、安全操作规程： 1.员工安全操作规程
1.1 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。
1.2 禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。
1.3 进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。
1.4 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 1.5 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 1.6 尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。
1.7 实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。
1.8 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。
1.9 工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。
1.10禁止将无关动物带入实验室。 2.无菌室安全操作规程
2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布专用)，紫外线照射消毒30min以上，超净工作台台面每次实验前要用75%酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。
2.2无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。
2.3无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5%的甲酚溶液，75%的酒精，0.1%的新洁尔灭溶液，等等。
2.4无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 2.5需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。
2.6工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒剂再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。
2.7无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌30分钟。
2.8供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。
2.9每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 2.10吸取菌液时，必须用移液器吸取，切勿直接用口接触吸管。
2.11接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。 2.12带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液或巴氏消毒液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。
2.13如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3%的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。
2.14凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。 2.15无菌室应每月检查菌落数。在层流无菌风开启的状态下，取内径90mm的无菌营养琼脂平板5个，分别放置无菌室四周及中央位置，开盖暴露30分钟后，倒置于36℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落/平皿，10000级洁净室平均不得超过3个菌落/平皿。如超过限度，应用臭氧发生器等对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 3.压力蒸汽灭菌器的安全使用操作程序：
3.1堆放：将需灭菌的物品予以妥善包扎，各包之间留有空隙，依次堆放在灭菌桶的筛板上，以蒸汽穿透，提高灭菌效果。需灭菌物品外需黏上高压指示胶带以检验灭菌温度是否达到要求。
3.2 加水：在锅体内注入生活用水，水位一定要超过电热管2厘米以上(不宜过多);连续使用时，每次操作前，必须补足上述水位，以免烧坏电热管和意外发生。
3.3 密封：在每次使用高压锅前，都必须认真检查高压锅的出气伐和安全阀，确保其状态完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高压灭菌锅。把堆放好物品的灭菌桶放在锅体内，盖上锅盖并锁紧。
3.4 加热灭菌：将灭菌器接通与铭牌一致的电源，按下电源开关，接通电源，指示灯亮，表示电源已正常输入本器，按下开始按纽电热管开始加热工作;灭菌期间工作人员需监视高压锅指示面板上的压力、温度和时间等。
3.5 开盖：灭菌结束后，切勿立即将灭菌锅内的蒸汽排出，否则：由于液体物品的温度未能下降，而压力蒸汽突然释放，会使液体剧烈沸腾，造成溢出或容器爆裂。应待压力表指针归零位后，方可开启锅盖。 4.生物安全柜操作规程
4.1确认玻璃窗处于关闭位置后，打开紫外灯，对安全柜内工作空间进行灭菌。灭菌结束后，关闭紫外灯。安全柜使用前后均需灭菌。
4.2抬起玻璃门至正常工作位置。打开外排风机。打开荧光灯及内置风机。检查回风格栅，使之不要被物品堵塞。在无任何阻碍状态下，让安全柜至少工作10分钟。
4.3用消毒液彻底清洗手及手臂。穿上工作褂，戴橡胶手套并套在袖口上，如有必要的话，戴防护眼镜和防护面罩。
4.4按实验程序放入实验材料，要将工作区域内的污染物质与洁净物质分开放置。 尽量将所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要过载，不要挡住前后风口。放入. 4.5尽量避免使用可干扰安全柜内气流流动的装置和程序。在操作期间，避免随便移动材料，避免操作者的手臂在前方开口处频繁移动，尽量减少气流干扰。 尽量不要使用明火。
4.6在操作过程中，如果有物质溢出或液体溅出，在将物品移出安全柜前，要对其表面进行消毒，为防止安全柜内有任何残留的污染物，在安全柜工作过程中，就要将安全柜内表面全部消毒。所有接触了污染材料的物体，在从安全柜中取出前，要进行表面消毒。所有开口容器，从安全柜中拿出前要盖好。
4.7全部工作结束后，用70%的乙醇或适当的中性消毒剂，擦拭安全柜内表面，让安全柜在无任何阻碍的情况下继续至少工作5分钟，以清除工作区域内浮沉污染。
4.8关闭照明灯和安全柜风机。关闭玻璃门，打开UV灯消毒。灭菌结束后，关闭UV灯。 4.9定期抬起工作区域下面板，擦拭或冲洗工作面底下空间。
5.标准菌株安全操作规程
5.1标准菌株由专人保管。保管人负责建立标准菌株目录;目录至少应包编号、菌株号、菌种名称、来源、购买日期、购买数量、保存方法等。
5.2标准菌株应做好标识后，保存于专用冰箱中。
5.3标准菌株不能随意转借其它单位或个人，需要时，须经实验室负责人批准后方可提供。
5.4必须在生物安全柜中进行标准菌株实验，操作过程中，不要穿戴巳经污染的防护性手套触摸门柄、仪器或污染区以外区域，避免扩大污染范围。
5.5试验结束后，操作过程中所有可能与生物危险物接触或被污染的试验器械和物品，能够高压消毒的必须高压消毒，不能进行高压消毒的物品，应使用有效的消毒剂消毒处理。
6.微生物培养物废弃物安全处理程序
6.1 尽可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器损伤。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。
6.2 禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须应用次氯酸消毒液或其他有效药品进行消毒。
6.3 所有培养物、废弃物在运出实验室之前须经巴氏消毒液消毒处理或高压灭菌后,置于专门污物袋内，交由专业卫生处理公司处置。
6.4 实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒。
7、微生物实验室紧急事故处理办法
7.1刺伤、切割伤或擦伤。受伤人员应脱下防护服，清洗双手和受伤部位，使用适当的皮肤消毒剂进行消毒，必要时进行医学处理。同时记录受伤原因和相关的微生物，并保留完整适当的医疗记录。
7.2潜在感染性物质的食入。应脱下受害人的防护服，进行必要的医学处理。报告食入材料的鉴定和事故发生的细节，并保留完整适当的医疗记录。
7.3潜在危害性气溶胶的释放(在生物安全柜以外)。所有人员必须立即撤离相关区域，暴露人员应接受医学咨询，同时立即通知实验室负责人和生物安全负责人。为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降，在一定时间内严禁人员入内，若实验室没有中央通风系统，应推迟进入实验室的时间，同时张贴“禁止进入”的标志。待气溶胶排出、较大的粒子沉降后，在生物安全负责人的指导下，清理人员穿戴适当的防护服和呼吸保护装备进行污染的清除。
7.4容器破碎及感染性物质的溢出。应立即用布或纸巾覆盖被感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品，并倒上消毒剂。作用适当时间后，将覆盖物以及破碎物品清除，再用消毒剂擦拭污染区域。玻璃碎片应用镊子清理，已污染的布、纸巾和抹布等应放在盛放污染性废弃物的容器内。如果用簸箕清理破碎物，应对其进行高压灭菌或放在有效的消毒液内浸泡消毒。所有操作过程中要求戴手套。
若实验表格或其他打印或手写材料被污染，应将这些信息复制后，再将原件置于盛放污染性废弃物的容器内，按废弃物处理的方式进行处理。
7.5未装可封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂。如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭机器电源，让机器密闭适当时间(如30min)，使气溶胶沉积。如果机器停止后发现破裂，不开盖或立即将盖子盖上，并密闭(如30min)。同时应通知生物安全负责人。玻璃碎片应使用镊子，或用镊子夹着棉花进行清理。所有破碎的离心管、玻璃碎片、离心桶、十字轴和转子都应放入无腐蚀性的、已知对相关微生物具有杀灭活性的消毒剂内进行消毒。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中，消毒后回收。离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂多次擦拭，再用水冲洗后干燥。
清理时，应戴结实的手套(如厚橡胶手套)，必要时在外面再戴适当的一次性手套。所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理。
7.6在可封闭的离心桶(安全杯)内离心管发生破裂。所有的密封离心桶都应在生物安全柜内装卸。若怀疑在安全杯内发生破损，应松开安全杯盖子并将离心桶高压灭菌，也可采用化学消毒的方法进行处理。
7.7生物安全柜内生物危害溢出。等待至少5min，让安全柜充满气溶胶，清理时应穿戴实验服，安全眼镜和手套，且让安全柜继续工作。使用浸泡消毒剂的消毒纸巾吸附溢出物，进行消毒处理应保证一定的接触时间(至少20min)。并用同样的消毒纸巾擦拭安全柜内壁、工作台表面和柜内所有设备。按照正确的生物废弃物处理步骤处理被污染的物质，将可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高压灭菌盘并且用报纸包起来，然后进行消毒或清理。用消毒剂对无法进行高压灭菌的物品进行至少20 min的消毒处理后再拿出安全柜。最后脱下个人防护服并放进污染物收集袋中进行高压灭菌处理。若所要清理的物品达到2级生物安全水平或者更高，应联系生物安全办公室负责人。
7.8使用消毒剂进行清洁的具体步骤如下：用干纸巾覆盖溢出物(用来吸附液体) 后，再放上浸泡消毒液的纸巾，使消毒剂包围溢出物，并确保消毒剂与污染溢出物充分接触，尽可能减少气溶胶的形成。对溢出物附近的所有物品进行消毒处理，处理一定时间，使消毒剂的消毒作用得到充分发挥。使用正确的消毒剂擦拭设备，并按照正确的生物危害物处理程序处理被污染的物质。对可回收利用的物品进行消毒处理。