微生物实验室述职报告

报告是日常生活与学习的常见记录方式，报告有着明确的格式。在实际工作中，我们怎么样正确编写报告呢？以下是小编整理的关于《微生物实验室述职报告》相关资料，欢迎阅读！

第一篇：微生物实验室述职报告

微生物实验室生物安全管理自查报告

为加强医院病原微生物实验室生物安全管理工作，确保医院平安目标的实现，我院检验科根据山东省《病原微生物实验室生物安全管理条例》的相关内容，对医院实验室安全管理工作进行了自查，对涉及病原微生物菌(毒)种及样本的人员进行了培训，提高他们生物安全的意识，掌握必要的生物安全知识。

一、实验室生物安全管理工作、各项规章制度的运行情况 医院检验科根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》的相关规定进行学习，并定期对有关生物安全各项规章制度的运行情况进行检查，对存在的问题及时进行整改。实验室所从事的实验活动均严格遵守有关的国家标准和实验室技术规范、操作规程，并指定专人监督检查实验室技术规范和操作规程的落实情况。同时，对检查情况进行详细记录，定期召开会议讨论工作中发现的问题，及时纠正。

二、病原微生物菌(毒)种的管理及运输 因各方面条件限制我院现不能开展病原微生物实验室生物的检查，根据通知要求积极组织相关人员主要学习了：病原微生物实验室菌(毒)种的管理严格登记制度，收到菌(毒)种后立即进行编号登记，详细记录菌(毒)种的名称、来源、特性、用途、批号、传代日期、数量。在菌(毒)种的管理，安全保卫制度，安全保卫措施，保管过程中，传代、分发及使用，均应及时登记，定期核对库存数量。菌(毒)种在进行销毁时，灭菌指示标志，灭菌效果，同时做好销毁登记等内容。

三、实验室生物安全突发事件的处理工作 在此次自检中，我院实验室对以前制订的处置意外事件的应急指挥和处置体系，进一步进行了修订，使之能满足实际工作的需要。 针对当发生自然灾害(如地震、水灾等)或设施出现故障时，我们制定了可能遇到的紧急情况及其处理原则。同时规范了菌(毒)种外溢在台面、地面和其他表面的的处理原则、皮肤刺伤(破损)的处理原则、离心管发生破裂的处理原则并建立了意外事故报告制度。 在实验室的显著位置张贴了实验负责人、实验室工作人员、消防、医院、公安、工程技术人员、水、电气维修部门电话。

四、提高意识，加强学习 组织检验人员对《病原微生物实验室生物安全管理条例》进行全面系统的学习，同时加强了实验室的准入制度的管理，标明实验室类型、负责人及其联络方式。加强了个人安全防护，并要求检验人员严格遵守标准的操作规程进行检验。 通过这次对微生物实验室生物安全管理工作自查，提高了全体检验人员对微生物实验室生物安全管理工作重要性的认识，加强管理，采取有效措施，确保实验室工作安全。

****卫生院检验科

2015-10-14

第二篇：病原微生物实验室生物安全管理自查整改报告

南和北关医院

病原微生物实验室生物安全管理自查整改

报

告

为深入实施《病原微生物实验室生物安全管理条例》，进一步规范我院实验室生物安全管理，根据上级安排，对我院实验室生物安全管理进行自查，情况如下：

一、实验室资质和备案情况

医院检验科已于 年 月向卫计委申请BSL-2实验室备案，实验室资质已于 年 月通过邢台市临检中心现场评审。

二、实验室生物安全组织机构、管理体系及各项规章制度的运行情况

我院已成立生物安全委员会及工作领导小组，委员会明确了职责，建立了工作制度，检验科在此基础上建立实验室安保制度，并定期对有关生物安全各项规章制度的运行情况进行检查，对存在的问题及时进行整改。实验室所从事的实验活动均严格遵守有关的国家标准和实验室技术规范、操作规程，并指定专人监督检查实验室技术规范和操作规程的落实情况。同同时，对检查情况进行详细记录，定期召开会议讨论工作中发现的问题，及时纠正。

三、人员培训与管理

目前检验科共有工作人员4名，全部为专业技术人员，三名均获得医学检验专业资格资质，并建有实验室工作人员健康档案，所有实验室的活动均符合有关国家标准、技术规范和操作规程，非实验有关物品不得进入实验室，实验操作人员防护水平符合相关规定。

四、实验室环境、设施及设备

实验室入口处张贴有生物安全危害标识，走廊设置紧急撤离路线标识，实验室内整洁无与实验无关物品，实验室内各消毒用品均在有效期内，实验室内设有洗手池及洗眼装置。各仪器运行状态正常，均有相关操作及维护程序，实验室内配备1台生物安全柜，放置位置合理，使用规范，均已定期更换滤网并委托专业机构进行检测，检测结果合格。

五、实验室记录和档案

目前实验室尚未通过生物安全审批，但已申请备案，病原微生物实验室活动均有记录，样本保存及销毁均有记录，消毒液配制及使用均有记录，实验室备有紧急安全防护装备(隔离衣、防护服、护目镜、N95口罩、橡胶手套)定期检查，均在效期，实验室各设备均有使用维护记录，操作人员已通过考核。

六、实验室应急预案

实验室有针对相关意外事故的紧急预案，工作人员能熟练掌握并及时处理。

七、个人防护 有专门人员承担院感控制工作，实验室人员每年有体检，并有健康档案，个人防护用品充足。

八、菌(毒)种和样本的储藏与管理

目前本实验室不保存病原微生物菌(毒)种病原微生物，样本管理严格登记制度，样本在离开实验室前均进行高压灭菌销毁时做好销毁登记。

九、实验室废弃物管理

按照《医疗废物分类目录》对医疗废物进行分类收集、包装物、容器符合标准，警示物品醒目，不存在医疗废物混入生活垃圾的情况，使用后的一次性医疗器械按照感染性废物进行销毁、消毒管理，医疗废物转运交接完整。从业人员每年进行相关培训，并配备必要防护用品，实验室要对样本进行高压灭菌并记录欠完整，实验室台面消毒没有登记。

整改具体措施

1、管理者及工作人员对生物安全的认识和管理水平尚不够高，在思想上、管理制度上准备不充分，对于个人防护及环境生物污染的意识不强，从而导致条例、法规、制度的不完善，管理力度不足。所以要进一步完善各种规章制度，加强管理力度。

2、多年来实验室工作人员大多数专业人员只偏向于检验专业技术的提高，未系统学习生物安全方面的知识，对预防微生物污染的意识不强，缺乏具体的技术操作规范。所以，加强生物安全方面的知识的培训，对全科工作人员进行生物安全知识考试。

3、建立了实验室台面消毒登记本。完善了高压锅消毒登记，加强了生物安全的管理。

通过这次对微生物实验室生物安全管理工作自查，提高提高了全体检验人员对微生物实验室生物安全管理工作重要性的认识，加强管理，采取有效整改措施，确保实验室工作安全

第三篇：微生物实验报告

姓名：阿曼古丽

学号：09070401042

班级：生物科学08-班

微生物实验课程已经接近尾声，同时训练我们实际动手能力的实验课程也已经全部结束，通过自己切身动手设计，操作实验，感到收获颇多。

我觉得最重要的就是实验过程中操作实验的重要性。实验操作可以说是实验成功与否的关键部分，可是马虎不得。对于需要团队合作的实验，个人认为要有强势的人员搭档，不说是精通实验操作规程，最少也得知道实验的基本操作，掌握要做实验的基本放法，这对于后续的实验无疑是有决定性作用的。对于个人的实验能力，关键还是要看平时的实验积累，有些实验操作繁琐复杂，需要极大的耐心，这些都应该是逐渐培养起来的。

在这里我以学过的几个实验为例，简单谈一下自己的心得体会。

(一) 环境因素对微生物生长的影响

温度对微生物学报的大分子(蛋白质、核酸等)稳定性、酶的活性、细胞膜的流动性和完整性等方面有重要的影响。过高温度会导致蛋白质(酶)及核酸变性失活，细胞膜破坏等，而过低温度会使酶活性受抑制，细胞新陈代谢活动减弱

pH值过高或过低会使蛋白质、核酸等生物大分子所带电荷发生变化，影响其生物活性，甚至导致变性失活，还可以引起细胞膜电荷变化，影响学报对营养物质的吸收，同时还会改变环境中物质的可给性及有害物质的毒性。 紫外线诱导形成胸腺嘧啶二聚体和DNA交联，从而抑制DNA的复制。此外，细菌具有光复合效应。紫外线穿透力弱，加一张蜡光纸即可阻止其穿过。

在自然界中普遍存在微生物间的拮抗现象，许多微生物可以产生抗生素，能选择性地抑制或杀死其他微生物。

常用化学消毒剂包括有机溶剂(酚、醇、醛等)、重金属、卤素元素及其化合物、染料和表面活性剂。有机溶剂使蛋白质(酶)和核酸变性失活，破坏细胞膜;重金属盐也可使使蛋白质(酶)和核酸变性失活，或与细胞代谢产物螯合使之变成无效化合物;碘与蛋白质酪氨酸残基不可逆结合而使蛋白质失活;低浓度染料可抑制细菌生长，革兰氏阳性菌比革兰氏阴性菌对染料更加敏感。

影响微生物生长的外界因素很多，其一是前面讨论过的营养物质，其二是许多物理、化学因素。当环境条件的改变，在一定限度内，可引起微生物形态、生理、生长、繁殖等特征的改变;当环境条件的变化超过一定极限时，则导致微生物的死亡。研究环境条件与微生物之间的相互关系，有助于了解微生物在自然界的分布与作用，也可指导人们在食品加工中有效地控制微生物的生命活动，保证食品的安全性，延长食品的货架期。

(二) 革

兰

氏

染

色

通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

革兰氏阴性菌，以[大肠杆菌]为代表。大肠杆菌为兼气性菌种，一般生存於肠道中及厌氧的还境中。革兰氏阴性菌细胞壁的特徵为有一层out member 与阳性菌种不同。目前对大肠杆菌的研究很多，除了它是一般食物中是否有被污染的指标外，很多分子生物学方面的研究皆需要使用到大肠杆菌当作实验宿主。

临床应用：用于革兰氏细菌分类形态观察前的染色。主要应用于细菌分类和鉴定，革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。

适用范围：适宜石蜡切片、涂片等染色。

(三) 活菌计数

菌计数法

此法又称活菌计数法，其原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。将待测样品经一系列 10 倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取 0.2ml 放入无菌平皿，再倒入适量的已熔化并冷至 45 ℃ 左右的培养基，与菌液混匀，冷却、待凝固后，放入适宜温度的培养箱或温室培养，长出菌落后，计数，按下面公式计算出原菌液的含菌数：

每毫升原菌液活菌数=同一稀释度三个以上重复平皿

菌落平均数×稀释倍数× 5

此法还可以将稀释的菌液取 0.2m 1 加到已制备好的平板上，然后用无菌涂棒将菌液涂布整个平板表面，放入适宜温度下培养，计算菌落数，再按上公式计算出每毫升原菌液的所含活菌总数。 此法可因操作不熟练造成污染，或因培养基温度过高损伤细胞等原因造成结果不稳定。尽管如此，由于该方法能测出样品中微量的菌数，仍是教学、科研和生产上常用的一种测定细菌数的有效方法。土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽抱与抱子等的数量均可用此法测定。但不适于测定样品中丝状体微生物，例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等。

随着微生态学的发展，微生态疗法通过调整肠道菌群作为部分疾病的辅助治疗已应用于临床。粪便标本肠道菌群的定量检测方法——平板活菌计数法能够较好地判定其疗效以及肠道菌群是否存在失调和失调的程度。此种方法计数的线性范围大，能较好的反映菌落的疏密程度。重复性、平行性好，但操作较繁琐，且测定值常受各种因素的影响，需要操作者有熟练的技术。

在同学们的相互配合和老师的耐心指导下，这门实验课也接近了尾声，在这一学的这门实验课中我也学到了很多的实验室知识。为了保证实验过程高质高量完成，除了实验准备及实验过程外，还要求实验技术人员必须具备相应的素质，实验操作人员必须具备较扎实的专业基础、熟练的实验技能及高度的责任心，在工作中要善于总结，同时一定要和老师积极沟通，不懂得地方及时向他请教，在以后的学习和工作中，我会继续保持这种态度，认真完成老师交给的各项任务。

第四篇：微生物观察实验报告

广西大学环境工程基础实验

实验题目: 湖塘水体和沉积物中微生物的观察

姓名：学号：

班级：组别：

指导教师：

实验(1)湖塘水体和沉积物中微生物的观察和计数

1.实验概述

1.1实验目的及要求

水体和沉积物是水生生物繁衍生息的基本场所。本实验通过实地调查和实验室观察实验，对湖塘水体和沉积物中微生物观察和定性，初步了解湖塘水体和沉积物中微生物的种类和分类;了解其对水体净化的正面和负面的影响。

1.2实验原理

(1)显微镜的原理

(2)血球计数板的结构和计算方法。

血球计数板是一块比较厚的特制玻片。玻片中央刻有4条槽，中央两条槽之间的平面比其他平面略低，中央有一个小槽，槽两边的平面上刻有9个大方格，中间的一个大方格为计数室，其长和宽均为1mm，深度0.1mm，体积0.1m3。计数室的规格是把大方格分成16个中方格，每一个中方格有分成25个小方格，总共有400个小格。

血球计数板的计算方法是：先求得每个中方格中微生物的平均值，乘以中格数，即为一个大格中的总微生物数，再乘以10000，即为稀释后的溶液中的总微生物数。如要换成原液中的微生物总数，乘以稀释倍数即可。

为简化计，通常取4个角上的4个中格进行计数，取其平均值，作为每个中格中微生物的平均值。

计算公式：微生物数(mL)=(100个小格内的微生物数/100)*400*10000*稀释倍数

2.实验内容

2.1实验方案设计

选择一个池塘，对湖塘和水体和沉积物采样，观察其中微生物并计数。要求手绘观察图像，计算微生物数量。

2.1.1实验设备和材料

(1)实验设备

显微镜、血球计数板、载玻片、盖玻片、滴管、移液管

(2)实验材料

校园池塘的水体和沉积物

2.2实验过程(实验步骤、记录、数据、分析 )

(1)用压滴法制作表本片

取一块洁净的载玻片置于实验平台上，用滴管吸取湖水或含有沉积物的混合液，滴加在载玻片中央，用干净的盖玻片覆盖在滴液上，不要有气泡，即制成标本片。

(2)用显微镜观察标本片上的微生物。

(3)加被测样品到血球计数板

取干净的血球计数板，用盖玻片盖住计数室，用细口滴管吸取少量已经充分摇匀的湖水和沉积物的混合液，滴于盖玻片边缘，微生物自行深入计数室，静止5-10min，待微生物自然沉降稳定后计数。

(4)计数

先用低倍镜寻找大方格网的位置(视野不要太亮)，找到计数格后，换用40倍物镜观察计数。

2.3结论

手绘观察到的微生物的形状，相对大小(见附图)

计算样品微生物数量

2.4 建议(如果有)

实验(2)湖塘水体和沉积物中微生物的革兰氏染色和定性

1.实验概述

1.1实验目的及要求

水体和沉积物是水生生物繁衍生息的基本场所。本实验通过实地调查和实验室观察实验，对湖塘水体和沉积物中微生物观察和定性，初步了解湖塘水体和沉积物中微生物的种类和分类;了解其对水体净化的正面和负面的影响。

1.2实验原理

微生物细胞由蛋白质、核酸等两性电解质及其它成分组成，表现出两性电解质的性质。细菌的等电点pI在2-5之间，所以当pH>5时，细菌带负电荷，容易与带正电荷的碱性染料结合而被染色。微生物体内的不同结构和染料的结合能力不同，故可用不同染料对微生物的不同结构分别染色。

2.实验内容

2.1实验方案设计

对池塘水体和沉积物中得细菌进行革兰氏染色和定性，进行微生物形态图的绘制。

2.1.1实验设备和材料

(1)实验设备

显微镜、接种环、载玻片、酒精灯。

(2) 试剂

草酸铵结晶紫染液、革兰氏碘液、95%乙醇、番红

(3) 实验材料

校园池塘的水体和沉积物

2.2实验过程(实验步骤、记录、数据、分析 )

(1)涂片

取干净的载玻片于实验台上，在正面边角作记号，滴一滴无菌蒸馏水在玻片中央，灼烧接种环，冷却后取样品，与玻片上水滴混匀，在玻片上涂布成一层均匀的薄层，涂布面不宜过大。

(2)固定

即干燥，干燥过程最好在空气中晾干。为加速干燥，可在微小火焰上烘干，烘干后在火焰上方快速通过3-4次，使菌体完全固定在载玻片上。不宜长时间高温烘烤，易致急速失水使菌体变形。

(3)初染

滴加草酸铵结晶紫染色液染色1-2min，水洗。

(4)媒染

滴加革兰氏碘液，染1-2min，水洗。

(5)脱色

滴加95%乙醇，洗约45s，接着水洗。或滴加95%乙醇，将玻片摇晃几次即倾倒乙醇，如此重复2-3次后水洗。

(6)复染

滴加番红，染2-3min，水洗并干燥。

(7)镜检

显微镜观察。

2.3结论

观察颜色，并判断是G(紫色)还是G(红色)。手绘观察到的微生物图像，标明颜色。

2.3.1注意事项：

(1)涂片所用载玻片要洁净无油渍。

(2)细菌不宜多，涂片不宜厚，宜薄而均匀。

(3)染色过程中勿使染色液干涸。用水洗后，应该甩去玻片上残水以免染色液被稀释而影响染色效果。

(4)革兰氏染色成败的关键是脱色时间是否合适。如脱色过度，G易被误认为G。而脱色时间过短，G易被误认为G。脱色时间长短还受涂片厚薄，脱色时玻片晃动程度影响。

2.4 建议(如果有)

2. 思考题

(1)涂片为何要固定?固定时要注意什么?

答：原因有三

1、固定细菌，防止冲掉

2、变形蛋白易染色

3、杀死细菌，防止感染。实验中固定是用酒精灯烘干水样，应注意控制温度，控制时间，防止将菌体烧成灰烬，无法染色。固定时用载玻片背面靠近火源，而不是直接烘载玻片正面。

(2) 革兰氏染色如果只做1-4步，不用番红复染，能否分辨革兰氏染色结果?为什么?

答：能。在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+)，被酒精脱色为革兰氏阴性菌。最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。

(3)革兰氏染色在微生物学中有何实践意义?

指导教师评语及成绩：

成绩：指导教师签名

批阅日期

第五篇：食品微生物综合实验报告

项目一:食品中细菌总数的测定…………………………1

项目二： 革兰氏染色技术………………………………5

项目三：饮用水中大肠菌群测定………………………7

指导老师：郭永班级:食品1002班学号：2010040734

姓名：任冠华

食品微生物综合实验报告

项目一：食品中细菌总数的测定

1. 目的

本方法规定了食品中菌落总数的测定方法。 本方法适合于各类食品中菌落总数的测定。 2. 设备和材料

温箱：36±1℃。恒温水浴：46±1℃。电炉 吸管。广口瓶或三角瓶：容量为500ml玻璃珠：直径约5mm。平皿：直径为90mm。试管。酒精灯。试管架。灭菌刀或剪子。灭菌镊子。 3.测定步骤 检样稀释及培养

(1)以无菌操作，将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。 (2)用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水 或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管，混合均匀，做成1∶100的稀释液。 (3)另取1mL灭菌吸管，按上条操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1mL火菌吸管。

(4)根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。 (5)稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46±1℃水浴保温)注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照

(6)待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h。 菌落计数方法

做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

菌落计数的报告

食品微生物综合实验报告

(1)平板菌落数的选择

选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落;如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。 (2)稀释度的选择

应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。

若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均数;若大于2则报告其中较小的数字。

若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。

若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 菌落数的报告

菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算。为了缩4.出现的问题

①接种过程操作速度太慢，导致培养基与接种液无法充分混合。②平板划线不规律。③仪器使用不熟练，配合不够默契。 5.参照国标得出结论部分食品国标

3 短数字后面的零数，也可用10的指数来表示。

食品微生物综合实验报告

瓶(桶)装饮用水菌落总数限量是≤20CFUmL，/总大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出，耐热大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL) 不得检出，大肠埃希氏菌(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出常温液态奶≤10cfu/ml。 6.结论：

自来水(或啤酒)的培养基均未培养出菌落，表示自来水(或啤酒)中菌落总数合格。土壤(或污水)的培养基中发现有大量菌落，则自来水和啤酒中无超标现象，符合卫生标准。

项目二:细菌涂片制作及革兰氏染色技术

食品微生物综合实验报告

一.目的

学习金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等细菌涂片制作、干燥和固定技术。 掌握细菌的简单染色和革兰氏染色技术 二.设备和材料

菌种

大肠杆菌16h 牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物，金黄色葡萄球菌16h 牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。 溶液和试剂

草酸铵结晶紫染液，革兰氏碘液，95%乙醇，番红复染液等。 仪器和其他用品

酒精灯，载玻片，显微镜，双层瓶(内装香柏油和二甲苯)，擦镜纸，接种环，试管架，镊子，载玻片夹子，滤纸，滴管和无菌生理盐水等。 三.测定步骤

1、细菌涂片制作

(1)涂片。用接种环从试管培养液中取一环菌，于载玻片中央涂成薄层即可，或先滴一滴无菌水于载玻片中央，用接种环从斜面挑出少许

(2)干燥。涂片后自然干燥，也可在酒精灯上略加热，使之迅速干燥。

(3)固定。固定的方法主要取决于勇什么染色方法，常用的有火焰固定法和化学固定法，火焰固定法的主要操作要领是：手持载玻片一端，标本面向上，在灯的火焰外侧迅速来回移动3~4次，约3~4s.

2、革兰氏染色法

涂片→干燥→草酸铵结晶紫(60s)→水洗→革兰氏碘液媒染(60s)→95%酒精脱色(30s)→水洗→番红(2min)→水洗→干燥→镜检。

脱色是革兰氏染色关键的一步，可直接用95%酒精冲洗脱色，直到流下的酒精无明显的紫色为止。然后，应立即用水冲洗，以避免脱色时间过长而影响最终染色结果。另外，挑菌量、固定温度、染色时间也是影响结果的重要因素，只有通过反复实践，才能获得满意的结果。

食品微生物综合实验报告

四.注意事项: 1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌;如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响，难以严格规定。

2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。

项目三：饮用水中大肠菌群测定

食品微生物综合实验报告

一、目的：

1.学习食品中大肠菌群检测程序、方法。 2.掌握食品中大肠菌群检测结果的报告方式

二、实验器材

1.培养基：乳糖胆盐发酵管，伊红美蓝琼脂、乳糖发酵管、蛋白胨 2.试剂：革兰氏染液

3.器皿：水浴、均质器或乳钵、载片等 三.内容、方法与步棸 1.检样稀释

以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。

另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管。

根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种3管、 2. 乳糖发酵试验

将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃ 温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进 7

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行。 3.分离培养

将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃ 温箱内,培养18-24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。 4.证实试验

在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置 36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。 5. 报告

根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。

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四.总结

1.实验步骤多且繁琐，因此需要小组成员的共同协作，从实验器材的刷洗到检样的稀释，以及培养基的配制等等都是需要每个成员认真密切配合的，如果哪位成员粗心大意或者偷懒少做步骤都会导致实验结果的变化，而这是我们食品工作者的禁忌。所以说，与队友的配合

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和一丝不苟、任劳任怨的精神是至关重要的。

2.作为一个学生，很多东西都不懂，因此做实验的时候，必须要阅读实验步骤和实验要求，最重要的是认真听取老师的观点和方法以及注意事项。

3.实验过程中，我们每个人都难免会有出错或者是不懂得地方，这时候一定要虚心求教，不能不懂装懂。尤其是当队友提出我们不正确的时候，不能不服气，更不能莽撞恶语伤人。

5.做实验时我觉得我的技术还不娴熟，一些细节还掌握不够比如涂片始终涂不均匀，导致镜检时观察到的现象总是一团一团或一对一对的。还有一个问题就是，虽然按照严格的步骤进行了操作，但就是做不出结果，现实与期望的相差太远，我想这里面的原因就是因为技术和细节没有达到标准要求。

6.通过这次试验我认识到团队的力量是无穷的，个人太过渺小了。一粒沙虽微不足道，但聚沙能成塔;一滴水渺小无比，但汇集能成海。这个实验要想成功团队各个成员要有明确的分工，我们小组做的实验之所以不太成功，一方面的原因就是分工不太明确，每个人对自己的任务都不太清楚，尤其是我自己更不清楚，做实验时有点无所事事。 7.这次做实验虽然出现了诸多问题，但是我还是受益匪浅学到了很多知识。