绞股蓝化学成分研究论文

2022-04-15

摘要:绞股蓝是一种药食两用的中草药,以其较高的营养价值和康养功效引起国内外学者的广泛关注。本文详细论述了绞股蓝中主要的功能成分及抗氧化、抗癌、降血糖、降血脂及减肥等功效,总结了绞股蓝的研究现状,对未来研究方向提出展望,以期为绞股蓝的产业发展和有效利用提供科学依据。今天小编给大家找来了《绞股蓝化学成分研究论文(精选3篇)》,仅供参考,希望能够帮助到大家。

绞股蓝化学成分研究论文 篇1:

绞股蓝提取物制备工艺研究

【摘 要】 目的:研究出绞股蓝提取物,为绞股蓝产品研发提供实验数据。方法:建立绞股蓝提取物的化学评价方法;优化绞股蓝提取物的提取工艺,用化学评价方法分别对绞股蓝的乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数4个单因素进行考察,以L9(34)正交表设计优化工艺,筛选出最佳提取工艺。结果:经单因素考察和正交优化得到绞股蓝提取物制备工艺为料液比为1∶[KG-*3/5]8的70%乙醇,加热回流提取3次,每次45min,绞股蓝总皂苷含量为0.1025mg/mL,提取率为10.25%。结论:建立的化学评价方法可评价绞股蓝提取物;制备工艺能为绞股蓝产品研发提供依据。

【关键词】 绞股蓝;提取物;制备;工艺优化

絞股蓝为葫芦科绞股蓝属藤本植物,号称“南方人参”[1-2],是2002年卫生部公布的可用于保健食品的中药[3]。绞股蓝主要有效成分是绞股蓝皂苷、绞股蓝糖苷、水溶性氨基酸、黄酮类[4]、多种维生素[5]、微量元素、矿物质等,有益气健脾、化痰止咳、清热解毒之功效[6]。临床上发现,绞股蓝具有降血脂、调血压、防治血栓、调节血糖、促睡眠、缓衰老、防抗癌[7]、提高免疫力、调节人体生理机能等多种作用[8]。目前对绞股蓝皂苷提取方法[9]主要有甲醇、正丁醇提取法、生物提取法、超声提取法、硅胶吸附法、大孔树脂吸附法[10]等。这些提取方法[11-16]易造成有机试剂残留,致使人们服用时存在较大安全隐患。如用甲醇提取时溶剂处理不当易引起失明、肝病[17]。正丁醇虽然有非常出色的萃取效果,但同样有着不容忽视的危害,使用不当易引起肝皮肤功能异常、嗅觉减退等毒性反应[18-19]。不同厂家提取的绞股蓝皂苷质量存在较大差异。目前,对绞股蓝皂苷系统的制备工艺的研究甚少,有关文献仅是简单的提取方法的介绍。

基于以上研究背景,本课题采用单因素考察和正交设计试验相结合的方式系统研究绞股蓝皂苷提取物的制备工艺,并进行三批样品的验证性实验,结果表明该工艺稳定可靠,重现性高,提供的工艺技术能为后期绞股蓝产品转化提供参考。

1 仪器与材料

1.1 药材来源 绞股蓝(批号:18050801)药材来源于广东大森林连锁药店有限公司,经嘉应学院医学院天然药物教研室聂华博士鉴定为葫芦科绞股蓝属植物绞股蓝 Gynostemma pentaphyllum(Thunb.) Makino干燥全草。

1.2 仪器 HH恒温水浴锅(金坛市中大仪器厂);DW调温电热器(上海平环燃烧设备工程技术有限公司);YF3-1型流水式粉碎机(瑞安市永历制药机械有限公司);JP-100S型超声波清洗器(深圳市洁盟清洗设备有限公司);FA2004型电子分析天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司);N-1100V型旋轉蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司);DHG-9246电热鼓风干燥箱(常州普天仪器制造有限公司);UV-1800型紫外-可见分光光度计(日本岛津公司)。

1.3 材料 无水乙醇(分析纯,广州化学试剂厂),硫酸(化学纯,广州化学试剂二厂),香草醛(化学纯,汕头市光华化学厂),人参皂苷Rb1对照品(批号:110704-200420,中国药品生物制品检定所)。

2 方法与结果

2.1 建立绞股蓝总皂苷化学评价方法

2.1.1 溶液制备

2.1.1.1 供试品制备 将绞股蓝干燥全草粉碎,过50目筛,称取50g,加60%乙醇500mL,回流提取60min,倾出提取液;药渣加60%乙醇400mL,回流提取45min,倾出提取液,反复提取六次,合并提取液,滤过两次,滤液减压浓缩,得总浸膏。取0.1g总浸膏,用乙醇溶解定容至500mL容量瓶,取1mL溶液至10mL容量瓶,置80℃水浴中挥干溶剂备用。

2.1.1.2 对照品制备 精密称取人参皂苷Rb1 4mg,用乙醇制成每1mL含有2mg的溶液,备用。

2.1.2 检测波长的选择 取对照品溶液与供试品溶液,分别加入8%香草醛乙醇溶液(现配现用)0.5mL,77%硫酸溶液5mL,摇匀,密塞,置60℃水浴加热显色15 min,取出,立即用冰水冷却10min,在200~700nm波长处扫描,结果显示对照品溶液和供试品溶液在538nm处有最大吸收,无干扰,故选择测定波长为538nm。

2.1.3 方法学考察

2.1.3.1 标准曲线绘制 分别精密吸取对照品溶液60μL、80μL、100μL、120μL、140μL、160μL于10mL容量瓶,置80℃水浴中挥干溶剂。分别加入8%香草醛乙醇溶液(800mg香草醛溶于10mL无水乙醇溶解中,现配现用)0.5mL,77%硫酸溶液5mL,摇匀,密塞,置60℃水浴加热显色15min,取出,立即用冰水冷却10min,以随行试剂为空白,按照《中华人民共和国药典》2015年版一部紫外-可见分光光度法(附录VA),于538nm波长处测定吸光度,以吸光度值A为纵坐标,浓度(mg·mL-1)为横坐标绘制标准曲线,计算回归方程为y=2.9571x+0.0394, 相关系数为0.9952,人参皂苷Rb1含量在0.12~0.32mg/mL范围内有良好的线性关系。结果如图1所示。

2.1.3.2 精密度试验 精密吸取对照品溶液60μL,置10mL容量瓶,按2.1.3.1项下方法测定,重复6次,RSD值为1.14%,表明仪器精密度良好。

2.1.3.3 重复性试验 取供试品溶液5份,照紫外分光光度法测定,重复5次,RSD值为1.36%,表明该方法重现性良好。

2.1.3.4 稳定性试验 取同一份供试品溶液,分别在0h、2h、4h、6h、8h、24h时测定,RSD值为1.87%,表明该样品液在24h内稳定。

2.1.3.5 准确度试验 精密吸取1mL已知浓度的样品溶液置10mL容量瓶,精密加入样品量的80%、100%、120%的对照品,分别加入8%香草醛乙醇溶液0.5mL,77%硫酸溶液5mL,摇匀,密塞,置60℃水浴加热显色15min,取出,立即用冰水冷却10min,按2.1.3.1项下测定,试验回收率为99.3%,RSD为1.01%,表明此方法加样回收率良好。

2.1.3.6 样品的测定 精密量取2.1.1.1项下供试品,加入8%香草醛乙醇溶液0.5mL,77%硫酸溶液5mL,摇匀,密塞,置60℃水浴加热显色15min,取出,立即用冰水冷却10min,照紫外分光光度法测定。

2.2 绞股蓝总皂苷制备工艺研究

2.2.1 单因素考察 以乙醇作为提取溶媒,提取工艺选择乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和提取次数进行单因素考察。

2.2.1.1 乙醇浓度考察 取15g绞股蓝粉末样品,置圆底烧瓶中,分别加入40%、50%、60%、70%、80%、90%乙醇150mL,回流提取15min,过滤,收集提取液,置蒸发皿中蒸干得浸膏,平行操作,通过绞股蓝皂苷含量测定结果分析不同乙醇浓度对绞股蓝皂苷提取物提取工艺的影响,结果见表1。

由表1、图2可知,以70%乙醇提取的绞股蓝皂苷含量最高,提取率达9.023%,与80%乙醇和90%乙醇提取率和70%乙醇的提取率接近,但却降低了乙醇浓度,节约了成本,故选择70%乙醇作为绞股蓝皂苷的溶媒浓度。

2.2.1.2 料液比考察 取15g绞股蓝粉末样品,置圆底烧瓶中,分别以料液比1∶[KG-*3/5]4、1∶[KG-*3/5]6、1∶[KG-*3/5]8、1∶[KG-3/5]10、1∶[KG-*3/5]12、1∶[KG-*3/5]14加入70%乙醇,回流提取15min,过滤,收集提取液,置蒸发皿中蒸干得浸膏,平行操作,通过绞股蓝皂苷含量测定结果分析不同料液比对绞股蓝皂苷提取物提取工艺的影响,结果见表2。

由表2、图2可知,以料液比1:8提取的绞股蓝皂苷含量最高,提取率达8.493%,故选择料液比为1∶[KG-*3/5]8的70%乙醇作为绞股蓝皂苷的溶剂用量。

2.2.1.3 提取时间考察 取15g绞股蓝粉末样品,置圆底烧瓶中,以料液比1∶[KG-*3/5]8的70%乙醇,分别回流提取15min、30min、45min、60min、90 min、120min,过滤,收集提取液,置蒸发皿中蒸干得浸膏,平行操作,通过绞股蓝皂苷含量测定结果分析不同提取时间对绞股蓝皂苷提取物提取工艺的影响,结果见表3。

由表3、图2可知,提取时间为45min时提取率最高,可达8.442%,超过45min后,皂苷提取率随提取时间的增加而下降,故选择提取时间为45min。

2.2.1.4 提取次数考察 取15g绞股蓝粉末样品,置圆底烧瓶中,以料液比1∶[KG-*3/5]8的70%乙醇,回流提取45min,分别提取1次、2次、3次,過滤,收集提取液,置蒸发皿中蒸干得浸膏,平行操作,通过绞股蓝皂苷含量测定结果分析不同提取次数对绞股蓝皂苷提取物提取工艺的影响,结果见表4。

由表4、图2可知,不同提取次数下提取绞股蓝,以料液比为1∶[KG-*3/5]8的70%乙醇回流提取4次,每次45min,绞股蓝皂苷提取率最高,可达8.892%,与料液比为1∶[KG-*3/5]8的70%乙醇回流提取3次,每次45min的绞股蓝皂苷提取率相当接近,但却减少了提取次数,节约了成本,故选择提取次数为3次。

2.2.2 正交设计试验 用正交设计试验优化绞股蓝皂苷的提取工艺,根据相关资料与预实验结果,选取影响绞股蓝皂苷的3个因素,即乙醇浓度、提取时间、提取次数。每个因素下各选取3个水平,采用L9(34)正交表设计实验,结果见表5。

由表6、表7分析结果可知,提取次数对绞股蓝总皂苷的提取率影响较显著,影响大小为C>B>A,即提取次数>提取时间>乙醇浓度。绞股蓝总皂苷最佳制备工艺条件为A2B2C3,即料液比为1∶[KG-*3/5]8的70%乙醇,加热回流提取3次,每次45min。

2.2.3 验证性实验 按2.2.2项下最佳提取工艺,制备三批绞股蓝皂苷提取物,照紫外分光光度法测定。由表8可知,采用最佳提取工艺,即料液比为1∶[KG-*3/5]8的70%乙醇,加热回流提取3次,每次45min,得到的提取物中绞股蓝皂苷提取率为10.25%,表明该工艺重现性好。

3 讨论

该实验系统研究绞股蓝皂苷的提取工艺,建立了绞股蓝提取物的化学评价方法,分别对绞股蓝的乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数4个单因素进行考察,以L9(34)正交表设计优化工艺,筛选出最佳提取工艺为料液比为1∶[KG-*3/5]8的70%乙醇,加热回流提取3次,每次45min;连续进行三批样品制备,证明该工艺的重现性好;制备了绞股蓝皂苷提取物,为绞股蓝产品化发展提供数据支撑。

通过对绞股蓝指标成分含量研究,实验得出了绞股蓝皂苷提取物,但是研究中仍存在不足。绞股蓝总皂苷约有140余种[20],其成分的含量测定和成品标准,都以人参皂苷Rb1的多少作为标准。故本文以人参皂苷Rb1为检测目标建立了绞股蓝皂苷的化学评价方法和提取工艺,但现有技术不能指证绞股蓝发挥神奇疗效仅因为含有人参皂苷Rb1成分。在今后的进一步研究中,还需综合考虑绞股蓝皂苷中的其他成分对人参皂苷Rb1的相互影响,以期找到更完善的绞股蓝皂苷制备工艺。

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作者:钟娜娜 吴思平 吴凌凤

绞股蓝化学成分研究论文 篇2:

绞股蓝的功能成分与功效研究进展

摘要:绞股蓝是一种药食两用的中草药,以其较高的营养价值和康养功效引起国内外学者的广泛关注。本文详细论述了绞股蓝中主要的功能成分及抗氧化、抗癌、降血糖、降血脂及减肥等功效,总结了绞股蓝的研究现状,对未来研究方向提出展望,以期为绞股蓝的产业发展和有效利用提供科学依据。

关键词:绞股蓝;功能成分;营养价值;功效

绞股蓝又称为五叶参,自然生长于湖北西部和陕西南部山区,古时候绞股蓝就在民间广泛使用。明朝时期称其为“神仙草”,在朱棣著写的《救荒本草》一书中将其正式记载命名为绞股蓝。云南曲靖地区临床观察发现绞股蓝对中老年慢性气管炎治愈率可高达79%,引起了国内外医学界专家学者的极大关注和重视。日本研究学者也对绞股蓝进行了药理学和植物化学方面的研究[1]。2002年,国家卫生部将绞股蓝列入药食同源和保健品名单。

1.绞股蓝的功能成分

近年来,国内外研究学者和专家利用现代化分析手段和分离技术对绞股蓝的主要化学成分进行了深入而广泛的研究[2]。研究结果表明,绞股蓝中含有多糖、皂苷、黄酮、氨基酸和微量元素等多种成分。

1.1 多糖

多糖是绞股蓝中含量较多的一种功能成分,随着国内外学者对多糖成分研究的逐渐深入,绞股蓝中多糖成分日益受到人们的广泛关注。一般情况下绞股蓝茎和叶中的多糖含量较高,为2%左右,根中含量较低,为0.5%左右。绞股蓝茎和叶中多糖的水解产物包括鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖等[3]。研究表明,绞股蓝粗多糖AGM中可能包含2种多糖成分,其中一种多糖中含有结合蛋白。对绞股蓝多糖进行研究,分离出3种绞股蓝多糖,分别是GPS-2,GPS-3和GPS-4,并确定了GPS-2和GPS-3的分子量。

1.2 皂苷

皂苷也是绞股蓝中的一种重要成分,主要分布在营养器官和韧皮部中,皂苷在绞股蓝根、茎、叶各部位中的相对含量大小依次为叶>茎>根[8]。不同品种绞股蓝中的皂苷含量差异较大,例如光叶绞股蓝、绞股蓝中的皂苷含量最高,五柱绞股蓝、长梗绞股蓝的皂苷含量最低。

1.3 黄酮

绞股蓝中黄酮含量约为2%-5%,目前研究报道过的黄酮类物质包括槲皮素、商陆素和异鼠李素等。研究认为绞股蓝茎中的黄酮含量7月份最高。江西药物研究所通过成分分析发现,某些产地的绞股蓝主要含有皂苷,而另一些产地的绞股蓝主要含有黄酮类物质,说明产地对绞股蓝的主要功能成分含量影响较大[4]。

1.4 氨基酸

目前在绞股蓝中已经检测出共计18种氨基酸,包括天门冬氨酸、丙氨酸、苏氨酸、亮氨酸等,其中8种氨基酸属于人体必需氨基酸,绞股蓝所含的氨基酸食疗作用符合医学药典的要求,应作为新型的食疗药源对其进行有效充分利用。

1.5 微量元素

绞股蓝中含有23种微量元素,其中包括硒、锌、铁等13种必需的微量元素和钾、钙、钠、磷、镁等5种常量元素。绞股蓝中所含有的微量元素和常量元素对人体健康十分有益。

1.6 其他成分

绞股蓝中还含有磷脂、维生素和有机酸等。绞股蓝中磷脂含量为0.15%左右,其中含有溶血磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇和磷脂酰乙醇等。维生素主要有VBl、VB2、VB6、VC、VD、VE等,其中VE的含量最高。上述这些成分可能和绞股蓝抗肿瘤和降血脂等药理作用有一定的联系。

2 功效及其研究进展

2.1 降血脂

絞股蓝中的皂苷具有明显降低血液中低密度脂蛋白,提高高密度脂蛋白的作用。从中医药理论上讲,高血脂是痰饮上泛和痰湿不化所导致的,绞股蓝味苦、微甘,具有清热解毒、祛除痰浊的功效,因而从中医角度来看,具有防治高血脂的作用。药理学和植物化学证明,绞股蓝中所含有的多种皂苷,具有降低血脂的生物活性,其降脂作用主要和抑制脂肪细胞产生游离脂肪酸有关[5]。通过调节脂肪代谢,绞股蓝还被认为具有减肥的功效。

2.2 抗动脉硬化

在中老年人群中,由于动脉硬化而引起脑血管病和冠心病,已经成为中老年人致死的首要原因之一。常见的病理原因是由于血液中的过氧化脂质较高,使血管的内皮细胞膜受损,血液中的胆固醇和低密度脂蛋白沉积于内膜之下,导致血小板聚集,平滑肌细胞增生[6]。绞股蓝中皂苷能明显降低血液中过氧化脂质含量,保护血管内皮细胞,阻止动脉粥样硬化的形成。

2.3 降血糖

研究表明,绞股蓝具有一定的降血糖和改善糖尿病并发症的作用。研究发现绞股蓝乙醇提取液能够改变葡萄糖代谢酶的活性,显著降低血中葡萄糖水平,显著减小胰岛素的抵抗参数[7]。

3 展望

绞股蓝具有极高的药用价值和食用保健价值,具有较大的市场潜力,现阶段绞股蓝相关产品的研发依处于初加工阶段并且具有一定的地域局限性。目前,绞股蓝中活性成分和功效之间的对应关系和其在机体内发挥作用的机制尚不明确,皂苷类、黄酮等活性物质的提取纯化技术也有待进一步研究。本文阐述了绞股蓝的化学成分和药理作用等方面的最新研究进展,为绞股蓝的食品、药品和保健品的研发提供技术支撑和理论依据。

参考文献:

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作者:陈明来

绞股蓝化学成分研究论文 篇3:

8个不同产地绞股蓝多糖含量的测定

摘 要 为比较8个不同产地绞股蓝中多糖含量的差异,采用水加热回流提取法提取绞股蓝中多糖,采用蒽酮-硫酸比色法测定不同产地绞股蓝中多糖含量。结果发现,不同产地的绞股蓝中多糖含量分别为7.85%、6.18%、7.47%、6.31%、4.84%、6.25%、6.04%、3.87%。本试验建立的绞股蓝中多糖含量测定方法简便、稳定、可行,不同产地绞股蓝中多糖含量存在差异,该结果为今后绞股蓝的开发利用和深入研究提供一定的参考。

关键词 绞股蓝;多糖;含量测定;不同产地

绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.) Makino]系葫芦科(Cucurbitaceae)绞股蓝属(Gynostemma)多年生草质藤本植物[1]。《中药大辞典》名七叶胆,别名小苦药、遍地生根、五葉参,日本名甘茶蔓等[2-4]。该属植物基源复杂、品种繁多,我国有14种和3变种[5],广泛分布于陕西、四川、湖北、福建、云南等地。绞股蓝中含有皂苷、多糖、黄酮类等化合物及铁、锌、铜、锰、硒等20多种微量元素[6],有“南方人参”“第二人参”的美誉[7-9],其中绞股蓝皂苷是绞股蓝主要的药效成分[10-11],国内外对其研究较多。目前对绞股蓝多糖的研究相对较少,但有研究表明绞股蓝多糖具有抗癌、抗疲劳、抗氧化、抗衰老等显著作用[12]。本研究采用蒽酮-硫酸法比较了8个不同产地绞股蓝多糖的含量,以期为绞股蓝今后的开发利用和深入研究提供一定的参考。

1 仪器与材料

1.1 仪器

7200型可见分光光度计(尤尼科仪器有限公司)。

1.2 材料

8种不同产地的绞股蓝购自于成都药材市场,经四川卫生康复职业学院副主任药师钟辉云鉴定为葫芦科绞股蓝属植物绞股蓝;所用试剂均为国产分析纯,水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

准确称取葡萄糖对照品22.5 mg、12.5 mg、8.3 mg、6.2 mg、3.1 mg加水定容至50 mL。

2.2 供试品溶液的配制

分别取1 g不同产地绞股蓝干燥粗粉,加10 mL 95%乙醇,80 ℃条件下回流提取2次,每次2 h,过滤。药渣用10 mL水90 ℃回流提取2次,每次2 h,过滤,滤液定容至25 mL,得供试品溶液。

2.3 显色剂配制

取硫酸190 mL,缓慢加入含有约50 mL水的250 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。准确称取蒽酮50 mg置于50 mL容量瓶中,逐渐加入上述硫酸溶液至刻度,摇匀即得。

2.4 线性关系的考察

分别准确量取1 mL对照品溶液,加入 5 m L显色剂,同法操作为空白对照,然后沸水浴,10 min后冷却至室温,在625 nm处测吸光度[13]。以吸光度为纵坐标,葡萄糖的浓度为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程Y=

2 278.3X+0.407 4,R2=0.999 1,线性范围62~450 μg/mL。

2.5 精密度试验

准确量取同一对照品溶液,依2.4项下方法操作,连续测定5次,对照品吸光度RSD为0.53%。

2.6 稳定性试验

准确量取同一供试品溶液,按2.4项下方法操作,分别于0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h测定吸光度,样品吸光度RSD为0.82%,表明供试品溶液在5 h内稳定。

2.7 重复性试验

准确量取同一供试品溶液6份,依2.4项下方法操作,在相同条件下测定并计算多糖的含量,结果RSD为0.75%。

2.8 回收率试验

取63 mg葡萄糖加入1 g云南绞股蓝中,按2.2项操作,平行6份。依2.4项下方法操作,样品吸光度RSD为0.63%。

2.9 多糖的含量测定

按照2.2项下制备供试品溶液,分别准确量取1 mL,按2.4项下方法测定吸光度,由回归方程计算多糖含量,不同产地绞股蓝中多糖的含量见表1。

由表1可见,多糖由多至少依次为陕西、内蒙古、云南、江西、四川、广东、湖北、福建。

3 讨论

多糖是绞股蓝药理活性的有效成分,多糖的开发利用具有广阔的市场前景,选择多糖含量高的绞股蓝品种可提高绞股蓝的经济价值。采用水加热回流提取法对绞股蓝中多糖进行提取,采用蒽酮-硫酸比色法对不同产地绞股蓝中多糖含量进行测定,不同产地绞股蓝总多糖含量为:陕西>内蒙古>云南>江西>四川>广东>湖北>福建。不同产地的绞股蓝多糖含量存在一定的差异,可能是由于生长环境的不同造成的,比较8个不同产地绞股蓝多糖含量,对今后绞股蓝的开发利用和深入研究有一定的参考意义。

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(责任编辑:赵中正)

作者:吴秀丽 马泽刚 钟辉云

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