川芎化学成分分析论文提纲

2022-11-15

论文题目：五加生化胶囊成分分析及质量标准研究

摘要：目的:明确五加生化胶囊的化学成分。利用网络药理学推测其作用靶点及通路,预测其药效物质基础。建立五加生化胶囊多种指标性成分的含量测定方法及其指纹图谱分析方法,进而对五加生化胶囊的质量控制标准进行全面提升。方法:1.五加生化胶囊化学成分分析:采用UPLC-Q-TOF-MS技术对五加生化胶囊进行分析,首先优化供试品制备及分析方法,确定实验条件并对样品进行数据采集。将所得数据及自建一级质谱数据库导入软件分析,通过同位素丰度比和精确质量数确定分子式,再与对照品的保留时间和二级质谱信息进行比对,确定成分,推断其裂解规律。2.五加生化胶囊网络药理学研究:在TCMSP平台对所得化学成分进行筛选,利用Pharm Mapper服务器获取筛选成分的相关靶点,Drug Bank、Gene Cards、Disgenet疾病数据库获取相关疾病靶点,取二者交集靶点,导入Cytoscape软件构建“中药-成分-靶点”网络图、导入STRING平台绘制蛋白质-蛋白质（PPI）相互作用网络图、导入DAVID平台进行GO生物学过程富集分析和KEGG代谢通路富集分析。3.五加生化胶囊质量标准研究:根据网络药理学筛选出Degree值较高的成分为五加生化胶囊的活性成分,并通过预实验筛选出指标性成分。建立其HPLC多指标成分含量测定,并对10批不同批次五加生化胶囊进行含量测定。同时建立10批五加生化胶囊HPLC指纹图谱,导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统其相似度进行评价。结果:1.五加生化胶囊化学成分分析:本实验共推断鉴别出90种化合物,其中黄酮类24个,香豆素类8个,三萜皂苷类9个,脂肪酸类9个,内酯类8个,有机酸类8个,姜辣素类6个,木脂素类5个,生物碱类2个,甾体类2个,苷类1个,其他类8个。其中黄酮类成分主要来源于甘草,木脂素类成分主要来源于刺五加,香豆素类成分主要来源于刺五加、当归、川芎,有机酸类成分主要来源于川芎、当归,萜类成分来源于甘草,内酯类成分来源于川芎和当归,脂肪酸类成分来源于川芎和桃仁,甾体类成分来自当归和桃仁,生物碱类成分来源于桃仁、川芎和刺五加,苷类来源于桃仁,姜辣素类成分来源于干姜,其他类成分则为包含所有药材。2.五加生化胶囊网络药理学研究:对五加生化胶囊体外化学成分进行筛选得到28个成分,通过Pharmmapper服务器获得3603个成分靶点,去重后共396个,通过Drug Bank、Gene Cards、Disgenet疾病数据库获得2387个疾病靶点,去重后共1939个。将成分靶点与疾病靶点取交集共得到179个重合靶点,构建“药材-成分-靶点”网络图,根据Degree值大小筛选出10个活性成分。再对重合靶点进行GO富集分析及KEGG通路富集分析。3.五加生化胶囊质量标准研究:对通过网络药理学筛选出Degree值较高的10个活性成分进行预实验的摸索,结合预实验结果。最后共建立六种成分的含量测定方法。成分分别为刺五加中的紫丁香苷、刺五加苷E,当归、川芎中的洋川芎内酯A和藁本内酯,刺五加、当归、川芎共有的绿原酸及甘草中的甘草酸铵。再对10批不同批次的五加生化胶囊进行测定。其中紫丁香苷的含量不得少于0.29%、绿原酸含量不得少于0.25%、刺五加苷E含量不得少于0.13%、甘草酸铵含量不得少于0.17%、洋川芎内酯A含量不得少于0.09%、藁本内酯含量不得少于0.11%。通过对上述指标性成分的含量测定实现五加生化胶囊的质量标准控制。同时建立五加生化胶囊的HPLC指纹图谱,共选出10批不同批次五加生化胶囊的24个共有特征峰并对其进行药材归属,同时指认出其中8个特征峰所代表的成分,再通过相似度评价,对五加生化胶囊不同批次间的质量状况差异进行直观分析。结论:UPLC-Q-TOF-MS技术能够高效、简便、快速的分析表征五加生化胶囊的化学成分;为网络药理学研究提供了化学基础;基于网络药理学研究方法推测五加生化胶囊活性成分的作用靶点及作用通路,预测其药效物质基础,二者结合,为五加生化胶囊的质量标准研究提供理论依据;最后建立五加生化胶囊HPLC多指标成分含量测定,从多种成分来控制质量,同时建立五加生化胶囊HPLC指纹图谱,可以直观发现不同批次之间的差异,实现对五加生化胶囊质量标准的全面控制。

关键词：五加生化胶囊;化学成分;网络药理学;质量标准

学科专业：中药学

缩略语表

摘要

ABSTRACT

前言

第一章文献综述

第一节五加生化胶囊研究概述

第二节中药复方的现代研究

第三节中药复方质量控制研究进展

第二章五加生化胶囊化学成分分析

(一)仪器与材料