颠茄乳膏剂的制备及其活血作用的初探

2022-10-09

颠茄提取物化学成分为莨菪碱、山莨菪碱、东莨菪碱、樟柳碱, 总称为颠茄生物碱[1], 在制药工业中, 颠茄供制备颠茄流浸膏、颠茄浸膏及颠茄酊等用。莨菪碱受热会转变为阿托品, 山莨菪碱、东莨菪碱、樟柳碱不会发生改变。其中山莨菪碱也具有扩张小动脉、改善微循环的良好作用, 且其不易通过血脑屏障, 故很少表现为中枢作用。除此之外山莨菪碱作用选择性高, 毒副作用轻, 排泄也比阿托品快。而樟柳碱解痉作用与山莨菪碱相似, 毒性却远比山莨菪碱和阿托品小。东莨菪碱具有较强的亲水性, 这是一般生物碱所没有的。本实验采用渗漉法提取药材的有效成分。渗漉法系动态浸出, 浓度梯度大, 置换作用强, 扩散作用好, 较浸渍法用时短, 浸出完全, 且免于分离浸液和药渣, 省时, 省工。

1 实验仪器材料、药品

1.2 实验主要仪器材料

昆明种小鼠、SPF级、体重 (19±1) g (福建医科大学实验动物中心提供) 、目镜测微尺、物镜测微尺、温度计、TG16-WS台式离心机 (长沙湘仪离心机仪器有限公司) 、PH试纸 (上海三爱思试剂有限公司) 、恒温水浴锅 (上海精宏实验设备有限公司) 、光学显微镜 (江西凤凰光学仪表厂) 。

1.2 实验药品

I-IK试剂、硬脂酸、液体石蜡、单硬脂酸甘油酯、十二烷基硫酸钠、甘油、羟苯乙酯、扶他林乳膏剂、8%硫化钠溶液、颠茄草 (购于宜又佳医药超市, 产地:安徽) 、70%脂肪醇 (南京东方明珠化工公司) 、95%乙醇 (龙吉利化工试剂有限公司提供) 、白凡士林 (江西德诚制药有限公司) 、5%巴比妥钠 (上海化学试剂总厂) 。

2 颠茄乳膏剂的制备

2.1 颠茄生物碱的提取

注:与0.1g/cm2凡士林对比, *P<0.05, **P<0.01;与0.1g/cm2扶他林乳剂对比, △P<0.05, △△P<0.01

取颠茄粉1000g, 按渗漉法, 用95%乙醇作溶剂, 浸渍48h后, 以每分钟1~3mL的速度缓缓渗漉, 收集初漉液850mL, 另器保存。继续渗漉, 至漉液颜色不再变浅, 续漉液作下一次渗漉的溶剂用, 过滤初漉液, 滤液在60~70℃蒸发至稠膏状, 加10倍量的乙醇, 搅拌均匀, 静置, 等沉淀完全, 吸收上清液, 浓缩至稠膏状。取出约0.1g, 验证颠茄生物碱, 低温干燥, 研细, 过四号筛, 即得[2] (表1) 。

3 活血作用试验

3.1 实验方法

取小鼠, 雌雄各半, 共36只。随机分成6组, 即空白组:0.1g/1cm2凡士林;颠茄乳膏剂小剂量组:0.1g/1cm2;颠茄乳膏剂中剂量组:0.3g/1.5cm2;颠茄乳膏剂大剂量组:0.5g/2cm2;阳性对照组:0.1g/1cm2扶他林;乙醇组:95%乙醇0.5m L/1cm2。试验前1日, 将受试小鼠编号并用剪刀和8%硫化钠使其背部 (面积分别约1cm2、1.5cm2、2cm2) 及右耳背脱毛。试验时, 用5%巴比妥钠溶液0.17m L/10g体重腹腔注射麻醉。使用显微镜测微尺方法观察并记录小鼠微静脉管径、微动脉管径, 及微静脉血流速度, 分别给予受试品、对照品和阳性品 (按上述剂量) , 用保鲜膜、胶布固定在背部。并选择血液流态相似的微静脉, 用于观察血液流态的改变。分别在10min、20min、30min时, 连续观察小鼠耳部选定的同一位置, 测定上述各指标, 及微动、静脉管径的差值。并将小鼠腹部向下固定在显微镜的载物台上, 使鼠耳固定, 调节显微镜放大倍数为10×40, 直至可以清楚地观察小鼠耳廓微循环情况。固定视野, 调节测微尺的位置, 测量微动脉、微静脉血管直径的变化, 同时对微静脉血液的流态进行评分[4], 并作为观察指标, 对各组试验所得数据均以均值±标准差 (±s) 表示, 采用成组t检验, 结果见表2、表3、表4。

3.1

实验数据

4 结语

药物对微动脉管径差值的影响:颠茄乳膏剂的小、中、大剂量组与空白组凡士林比较对微动脉管径的扩张作用均具有极显著差异 (P<0.01) ;与阳性组扶他林比较颠茄乳膏剂的中、大剂量组对微动脉管径的扩张作用具有极显著差异 (P<0.01) 。药物对微静脉管径差值的影响:颠茄乳膏剂的小、中、大剂量组与空白组凡士林比较对微静脉管径的扩张作用均具有极显著差异 (P<0.01) ;与阳性组扶他林比较颠茄乳膏剂的中剂量组在10min时对微静脉管径的扩张作用具有极显著差异 (P<0.01) , 而在20min、30min时无显著差异 (P>0.05) , 而颠茄乳膏剂的大剂量组对微静脉管径的扩张作用具有极显著差异 (P<0.01) 。药物对微静脉血液流速的影响:颠茄乳膏剂的小、中、大剂量组与空白组凡士林比较对促进微静脉血液流速的作用均具有极显著差异 (P<0.01) ;与阳性组扶他林比较颠茄乳膏剂的中剂量组在30min时对促进微静脉血液流速有显著差异 (P<0.05) , 颠茄乳膏剂的大剂量组对促进微静脉血液流速的作用具有极显著差异 (P<0.01) 。

5 讨论

本实验从微观上可以看出小鼠耳廓微动、静脉的血管直径有明显的增大、微静脉的血液流速加快;从宏观上看小鼠耳廓血管颜色变深、肉眼可见的血管数增多, 这些是血管扩张血流量加大的表现。因此实验表明颠茄乳膏剂在中、大剂量时的活血作用效果显著, 同时实验过程中发现颠茄乳膏剂的中剂量组仅在10min时与同期的扶他林乳膏比较具有极显著差异, 说明在药物作用前期颠茄乳膏剂具有优于扶他林的药效, 证明了在乳膏剂中加入了透皮促进剂脂肪醇能使药物的透皮速率增大, 并且颠茄乳膏剂的药物作用时间较扶他林乳膏长, 药效持久。这是未预期到的实验结果, 可能是由于颠茄生物碱的成分较多, 综合作用的结果。

摘要：目的本实验用颠茄草制备颠茄乳膏剂并通过7项质量评定, 研究对小鼠耳廓微循环的影响。方法将36只小鼠分成6组, 每组6只, 分别用自制颠茄乳膏剂0.1g/cm2、0.3g/1.5cm2、0.5g/2cm2空白组凡士林0.1g/cm2和阳性对照组扶他林乳膏0.1g/cm2涂抹于小鼠背部, 给药后分别观察10min、20min、30min小鼠耳廓的微动、静脉管径的差值和微静脉血液流态去探索颠茄乳膏剂对小鼠微循环的促进作用。结果颠茄乳膏剂的小、中、大剂量组和凡士林组对微动、静脉管径的扩张作用和血液流态都具有极显著差异 (P<0.01) , 颠茄乳膏剂的大剂量组和扶他林组对微动、静脉管径的扩张作用和血液流态具有极显著差异 (P<0.01) 。结论颠茄乳膏剂能增加小鼠微动、静脉管径, 促进微静脉血流速度, 具有一定的活血作用。

关键词：颠茄草,乳膏剂,活血作用