食品生物化学实验大纲

第一篇：食品生物化学实验大纲

医学生物化学实验大纲

课程号：18121790课程名称：医学生物化学实验学分：1.5

英文名称：Medical Biochemical Experiment Technology周学时：0-3预修课程：分析化学、有机化学、生物化学

面向对象：临床医学(七年制)、预防医学、基础医学、口腔医学

内容简介：通过本课程的学习，使学生掌握生物化学的基本原理，方法和技术，

为从事医学教学，科研和临床工作打下坚实的基础。

选用教材或参考书：

自编实验教材。

课程号：18121790课程名称：医学生物化学实验学分：1.5

英文名称：Medical Biochemical Experiment Technology周学时： 0-3预修课程：分析化学、有机化学、生物化学

面向对象：临床医学(七年制)、预防医学、基础医学、口腔医学

一、教学目的和基本要求：

通过本课程的学习，使学生掌握生物化学研究的基本原理、方法和技术，为从事

医学教学、科研和临床工作打下坚实的基础。

二、主要内容及学时分配 ：

每周8学时，共6周,共计48学时

主要内容：

实验

一、动物细胞中蛋白质的提取及含量测定

实验

二、真核细胞染色体DNA提取及含量测定

实验

三、SDS电泳测定蛋白质分子量

实验

四、酶动力学实验

实验

五、层析技术应用

实验

六、从豆科植物中提取植物凝集素并鉴定

三、教学方式：

课堂讲授、小组讨论， 2人一组

四、相关教学环节安排：

小班教学，每班不多于32人

五、考试方式及要求：

以期终实验的理论考试以及每次实验报告及实验操作、考勤等为依据确定成绩。

六、推荐教材或主要参考书：

自编实验教材。

第二篇：《生物化学》实验教学大纲

课程编号: 课程名称：生物化学 课程类型: 实验教学 学

时：24 适用对象: 生物制药及相关专业 先修课程：基础化学实验、有机化学实验

一、课程性质、目的和任务

生物化学实验是与生物化学理论课相配套的一门以实验为主的课程，它是生物制药及相关专业必修的专业基础课程。本课程通过介绍生物化学实验技术的原理和操作方法，对学生进行生物化学基本技能训练，为今后进行后继课程的学习和将来的科学研究工作打下良好基础。

通过本实验课程的学习，增强学生对生物化学理论知识的理解与感性认识，使学生牢固掌握生物化学的基本理论与基本实验技能，培养学生严谨的科学态度和良好的实验习惯，提高学生在实验过程中发现问题、分析问题、解决问题的综合能力。

二、教学基本要求

生物化学实验教学以学生为主体的教学实践活动,•教师只作必要的实验原理和注意事项的讲解,并注意引导学生拓展所学的内容。通过实验内容的学习使学生掌握生物化学技术的基本原理和操作要点，同时注重在实验的过程中提高学生的实践能力和创新能力。

三、实验内容及要求(此部分根据具体实验项目列出具体内容及要求)

大纲基本内容包括6个必做的实验，在规定的24个学时内完成。

实验一 氨基酸的分离与鉴定(基础性实验，3学时)

实验准备，滤纸准备，点样，展层和显色，分析。

了解利用层析法分离掌握氨基酸的基本原理，学会利用层析法分离氨基酸的方法。

实验二 蛋白质的提取及含量的测定(综合性实验，4学时)

实验准备，蛋白质样品的提取，标准曲线的制作，分光光度法测定。

学会从生物材料中提取蛋白质的基本技术，掌握离心机的使用方法，了解蛋白质含量测定的基本原理，学会测定的方法。

实验三 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳(基础性实验，3学时)

实验准备，浸膜，点样，电泳，染色，分析。

掌握电泳技术的基本原理，了解电泳设备的组成，学会使用的方法，掌握利用电泳分离蛋白质的技术。

实验四RNA的提取及含量的测定(综合性实验，5学时)

实验准备，浓盐法提取RNA，离心，等电点沉淀，抽滤，烘干，称重，配制成溶液，紫外分光光度法测定含量。

学会用浓盐法从酵母中提取RNA的方法，掌握纯化的技术(离心法，等电点沉淀法、抽滤法)，学会紫外分光光度计的使用，掌握利用紫外分光光度法测定核酸含量的方法。

实验五 碱性磷酸酶的提取、分离和比活力的测定*(综合性实验，5学时)

实验准备，碱性磷酸酶的提取和分离，配制试剂，碱性磷酸酶活力的测定，蛋白质含量的测定，比活力的计算。

掌握从动物新鲜组织中制备酶的方法，学习酶提纯的方法，了解碱性磷酸酶活力测定的原理，掌握测定的方法，学会碱性磷酸酶活力的计算方法，掌握比活力的概念及计算方法。

实验六 发酵过程中无机磷的被利用和ATP的生成*(综合性实验，4学时)

实验准备，发酵，发酵样品的处理，无机磷的测定，DEAE纤维素薄析层析法测定ATP的形成。

了解ATP生成的意义，掌握无机磷的测定方法，学会DEAE纤维素薄板制作的方法，掌握DEAE纤维素薄析层析法测定ATP的形成。

四、考核方式

实验总成绩包括实验过程表现成绩和实验报告成绩。其中实验过程表现成绩占60%，包括学习态度是否认真、实验操作是否正确规范、实验结果是否正确、是否具有创新意识等。实验报告成绩占40%，包括实验报告的格式是否正确、原理是否论述清楚、实验结果分析讨论是否符合逻辑，报告字迹是否清楚等方面。

五、推荐教材和教学参考书

实验教材：《生物化学实验》(第三版)陈钧辉等编，科学出版社，2003。 参考教材：《基础生物化学实验》(第二版)王秀奇等编，高等教育出版社，1999。

《生物化学技术原理及其应用》赵永芳主编，科学出版社，2002。 《生化实验方法和技术》张龙翔，张庭芳，李令媛编，高等教育出版社，1997。

六、说明

大纲制订人：张辉 大纲审定人： 制订日期：2014-11-8

第三篇：《食品工艺学》实验教学大纲

1、课程属性：必修

2、实验属性：非独立设课

3、学时学分：学时10

4、实验应开学期：第5学期

5、先修课程：食品工艺学、食品化学、食品微生物学、食品工厂设计

一、课程的性质与任务

食品工艺学实验课是在学习食品工艺学理论课的基础上进行的一个实践性环节，本课程的教学任务是让学生运用已学过的知识进行生产实践，巩固和加深对食品工艺学课程中基本理论知识的理解，训练学生理论知识的运用能力、实验操作技能、仪器的使用能力以及对实验数据的处理和分析能力。

二、实验目的与基本要求

本实验课配合理论教学，通过实验从实践中进一步学习，掌握和运用学过的基本理论;培养、训练学生的分析和解决问题的能力。

学生必须完成的基本要求：准备实验，拟定实验方案;组织实验;写出预习报告;测取实验数据;整理实验数据;写出实验报告。

三、实验考核方式及办法

考核方式：考查。

实验成绩评分办法：预习报告占20%，实验过程占60%，实验报告占20%。其中实验过程又细分为：出勤表现3%、抽查提问10%、操作技能20%、组织纪律2%、劳动表现5%、环境卫生5%、加工的产品质量15%、特色之处5%。

四、实验项目一览表

食品工艺学实验项目一览表

序号 1 2 3 4 实验项目名称 面包的制作 烤肉仔鸡的加工 酸牛奶的加工 果酱的制作

实验类型 综合性 综合性 综合性 综合性

实验要求 必做 必做 必做 必做

适用专业 农学类 农学类 农学类 农学类

学时 3 2 2 3

五、实验项目的具体内容

实验一

面包的制作

1、本次实验的目的和要求

了解并掌握面包的制作原理及操作方法。

2、实验内容或原理

面包是以小麦粉为主要原料，加以酵母、水、蔗糖、食盐、鸡蛋、食品添加剂等辅料，经过面团的调制、发酵、醒发、整形、烘烤等工序加工而成。面团在一定的温度下经发酵，面团中的酵母利用糖和含氮化合物迅速繁殖，同时产生大量二氧化碳，使面团体积增大，结构酥松，多孔且质地柔软。

3、需用的仪器和试剂

实验材料：面包粉、砂糖、植物油、活性干酵母、盐、鸡蛋、面包改良剂等。 仪器设备：和面机、醒发箱、烤箱、烤盘、台秤、面盆、烧杯等。

4、实验步骤

原辅料→第一次调粉→发酵→第二次调粉→醒发→成型→醒发→烘烤→冷却

5、教学方式

学生为主，教师辅助，充分预习，独立完成。

6、考核要求

准备实验:认真阅读实验指导书，弄清本实验的目的与要求;根据本次实验的具体任务，研究实验的做法及其理论根据;根据实验任务拟定实验方案。

组织实施实验：本实验是几个人合作完成，实验时必须做好组织工作，既有分工，又有合作，保证实验质量。实验方案应该在组内讨论，每个组员都应各有专责(包括操作、读取数据及现象观察等)，而且要在适当时间进行轮换。凡是影响实验结果或在数据整理过程中所必需的数据都要测取。同一条件下至少要读取两次数据，只有当两次读数相接近时才能改变操作条件;每个数据记录后，应该立即复核，以免发生读错或写错数字等现象，记录原始数据。

7、实验报告要求

按正规实验报告要求书写。

实验二

烤肉仔鸡的加工

1、本次实验的目的和要求

(1)通过实验，进一步认识和理解腌制过程中所用腌制剂的种类和作用以及腌制的重要性。

(2)了解肉的烤制原理。

(3)掌握烤肉仔鸡的加工工艺流程及质量控制操作要点。

2、实验内容或原理

烤鸡是利用肉用仔鸡为原料，经宰杀、清洗、腌制、腹内涂料、填料和浸烫皮料后，用烤炉的高温将肉烤熟的肉制品。烤制是利用热空气对原料肉进行的热加工。原料肉经过高温烤制，表面变得酥脆，产生美观的色泽和诱人的香味。肉类经烧烤产生的香味，是由于肉类中的蛋白质、糖、脂肪、盐和金属等物质在加热过程中，经过降解、氧化、脱水、脱胺等一系列变化，生成醛类、酮类、醚类、内酯、硫化物、低级脂肪酸等化合物，尤其是糖与氨基酸之间的美拉德反应，不仅生成棕色物质，同时伴随着生成多种香味物质;脂肪在高温下分解生成的二烯类化合物，赋予肉制品的特殊香味;蛋白质分解产生谷氨酸，使肉制品带有鲜味。

此外，在加工过程中，腌制时加入的辅料也有增香作用。如五香粉含有醛、酮、醚、酚等成分，葱、蒜含有硫化物;在浸烫皮料所用的糖，烧烤时这些糖与蛋白质分解生成的氨基酸，发生美拉德反应，不仅起着美化外观的作用，而且产生香味物质。烧烤前浇淋热水，使皮层蛋白凝固，皮层变厚、干燥，烤制时，在热空气作用下，蛋白质变性而酥脆。

3、需用的仪器和试剂

实验材料与辅料：肉鸡，45-60天日龄。生姜、葱、八角、花椒、香菇、食盐、白酒、味精、白芷、丁香、山萘、香油、鲜辣粉、味精、洋葱、香菇、食盐、白糖、亚硝酸钠、复合磷酸盐、抗坏血酸钠。

实验仪器设备：刀具、案板、腌制缸、锅、瓷盆、电子称、远红外烤炉等。

4、实验步骤

(1)腌制液的配制

配方：腌制料(以10斤腌制液计)：焦磷酸钠6克，三聚磷酸钠6克，六偏磷酸钠3克，亚硝酸钠0.70克，抗坏血酸钠2克，葡萄糖15克，白糖40克，食盐0.8斤，生姜10g，葱15g，八角15g，花椒10g，香菇5g，食盐400g，白酒20ml，味精10g，白芷5g，丁香1g，山萘2g。

(2)配制方法：

①先将花椒、大料等香辛料用纱布包起来在水中煮制，沸腾后保持30分钟;

②将三种磷酸盐按比例称好用少量热水溶解，加入亚硝酸钠和抗坏血酸钠; ③在煮制好的香辛料中依次加入白糖、葡萄糖、溶解的磷酸盐和食盐，冷却后再加入味精和白酒;

④将清洗后并沥干的白条鸡放入腌制缸内，将配好的腌制液倒入;

⑤腌制时间根据鸡的大小，气温高低而定，一般腌制时间0-4℃温度条件下48h; ⑥腌制好后捞出，洗取表面过多盐分，挂鸡晾干。 (3)腔内涂料

①香油100g，鲜辣粉50g，味精15g，能涂20只鸡的内腔。

②按照鸡的数量和配方配制腔内涂料，搅拌均匀，把腌好的光鸡放在台上，用带圆头的棒具，挑约5克左右的涂料插入腹腔向四壁涂抹均匀。

(4)腹内填料

①每只鸡腹腔内填入生姜10g，洋葱15g，香菇10g湿重。

②向每只鸡腹腔内填入生姜2-3片，葱2-3根，香菇2块，然后用刚针绞缝腹下开口，不让腹内汁液外流。

(5)浸烫涂皮料

150g糖放入锅中熬制，待稀糖化后，倒入10斤开水中。将填好料缝好口的光鸡逐只放入加热到100℃的皮料液中浸烫，约半分钟左右，然后取出挂起，晾干待烤。

(6)烤制

一般用远红外线电烤炉，先将炉温升至100℃，将鸡挂入炉内，每炉烤鸡数量，不同规格的烤炉挂鸡数量不一样，当炉温升至180℃时，恒温烤15-20min，这时主要是烤熟鸡，然后再将炉温升高至240℃烤5-10min，此时主要是使鸡皮上色、发香。当鸡体全身上色均匀达到成品橘红色时立即出炉。出炉后趁热在鸡皮表擦上一层香油，使皮更加红艳发亮，擦好香油后即为成品烤鸡。

5、教学方式

学生为主，教师辅助，充分预习，独立完成。

6、考核要求

按照《食品工艺学实验》总的考核方式进行。

7、实验报告要求

按正规实验报告要求书写。

实验三

凝固型酸乳的加工

1、本次实验的目的和要求

掌握凝固型酸乳的制造的原理和制造方法;掌握实验注意事项及实验报告要求。

2、实验内容或原理

发酵剂的制作;酸乳加工工艺过程。

3、需用的仪器和试剂

培养箱

无菌室

牛奶10斤，白糖0.7斤，事先制作好的酸乳发酵剂0.3斤

4、实验步骤

(1)乳预处理(脂肪标准化，强化乳固体，添加糖和稳定剂) (2)乳预热到50~60℃

(3)在15.0~20.0Mpa压力下均质 (4)乳的热处理(85℃，30min)

(5)冷却至发酵温度(40~42℃短期发酵或30℃长期发酵) (6)接种发酵剂 (7)罐装于零售容器中 (8)发酵 (9)冷却 (10)成品

5、教学方式

以实验为主，课堂讲授为辅;学生为主，教师辅助，充分预习，独立完成。

6、考核要求

拟定实验方案;准备实验，写出预习报告;测取并整理实验数据;写出实验报告。

7、实验报告要求

按正规实验报告要求书写。

实验四 果酱的制作

1、本次实验的目的和要求

理解果酱制作的基本原理;熟悉果酱制作的工艺流程，掌握果酱加工技术;了解果酱加工中常见质量问题及其防止措施。

2、实验内容或原理

果酱是以食糖的保藏作用为基础的加工保藏法。利用高糖溶液的高渗透压作用，降低水分活度作用、抗氧化作用来抑制微生物生长发育，提高维生素的保存率，改善制品色泽和风味。

果酱加工的实质在于利用果实中的糖、酸、果胶在一定条件下形成凝胶的过程。果酱加工的关键是创造良好的凝胶条件。

3、需用的仪器和试剂

实验材料：苹果、山楂、胡萝卜、柠檬酸、白砂糖、食盐、四旋瓶等。

设备：手持糖量计、打浆机、不锈钢锅、电炉、过滤筛、不锈钢刀、不锈钢锅、台秤、天平等。

4、实验步骤

工艺流程

原料→清洗→软化→打浆→浓缩→装瓶→封口→杀菌→冷却。

操作要点

(1)原料：选用充分成熟、色泽好、无病虫的果实。一些残次果实、罐头生产中的破碎果块以及果汁生产中的果渣(应搭配部分新鲜果实)等均可用于生产果酱。

(2)清洗：对果实用清水漂洗干净,并除去果实中夹带的杂物。

(3)去皮、切分、去心：将苹果手工去皮后,挖去损伤部分,对半纵切,再用挖核器挖掉果心。胡萝卜去皮后切块。

(3)软化、打浆：将果实和水置于锅中加热至沸，然后保持微沸状态20—30分钟,将果肉煮软而易于打浆为止。果实软化后,趁热用筛板孔径为0.8-1.0毫米的打浆机进行打浆1—2次,除去果梗、核、皮等杂质,即得果泥。山楂核较坚硬,打浆时加料要均匀,并调节好刮板与筛网之间的距离,防止损坏筛网。

(4)加糖浓缩：按果泥∶白砂糖=1∶1的比例配料。先将白砂糖配成75%的糖液并过滤,然后糖液与山楂泥混合入锅。浓缩中要不断地搅拌,防止焦糊。浓缩终点可以根据以下情况判断：浓缩至果酱的可溶性固形物达65%以上,或用木板挑起果酱呈片状下落时,或果酱中心温度达105—106℃时即可出锅。如果果酱酸度不够时,可在临出锅前加些柠檬酸进行调整。 如果需添加果胶，则要注意将果胶与5倍的糖混匀后，加水溶解，在浓缩临近终点时添加。 (5)装瓶、密封：要趁热装瓶，保持酱温在85℃以上,装瓶不可过满,所留顶隙度以3毫米左右为宜。装瓶后立即封口，并检查封口是否严密,瓶口若粘附有果酱,应用干净的布擦净,避免贮存期间瓶口发霉。

(6)杀菌、冷却：5分钟内升温至100℃,保温20min，杀菌后,分别在65℃，45℃和凉水中逐步冷却至37℃以下，尽快降低酱温。冷却后擦干瓶外水珠。

5、教学方式

学生为主，教师辅助，充分预习，独立完成。

6、考核要求

按照《食品工艺学实验》总的考核方式进行。

7、实验报告要求 按正规实验报告要求书写。

六、实验教材及主要参考资料

纪家笙等,水产品工业手册.北京：中国轻工业出版社,1999年 李雅飞等,水产食品罐藏工艺学.北京：中国农业出版社,1996年 刘铁玲主编,《水产食品加工工艺学》.天津农学院出版,2000年

郭梅 刘金福主编，《食品工艺学实验任务书》，天津农学院出版，2003年。

第四篇：初中生物实验室管理人员培训大纲

“四项配套”工程

初中生物实验室管理人员培训大纲

一、培训目的

为配合农村初中“四项配套”工程的实施，提高所配器材设备的管理、使用水平和效率，实施对农村初中生物实验室管理人员的培训。通过培训，应达到如下目的：

1.引导实验室管理人员更新教育观念，认识实验室工作在初中生物教学中的地位和作用，掌握实验室工作的基础知识和基本技能，进一步提高他们的专业素养和整体素质。

2.掌握实验室管理工作的一般规程和工作规范，掌握仪器、药品的验收、分类、存放、保管常识和各种帐册管理要求，掌握实验室的安全与防范措施。

3.初步掌握“四项配套”工程所配生物仪器的使用、保养与维护方法。 4.了解实验室通用技术，初步掌握初中生物实验常用技术。

5.了解《初中生物》教材中实验的操作要领，能协助任课教师完成实验教学任务。

6.知道实验教学的基本原则和方法，了解几种常见实验教学形式的特点。

二、主要培训内容、要求与参考课时 1.中学实验室工作概述与生物实验室建设：

认识实验室工作的地位、作用、任务、内容，了解实验室建设的基本要求，了解江苏省初级中学实验室装备标准。

参考课时：2 2.中学实验室管理：

掌握生物实验室管理工作的一般规程和工作规范，懂得仪器、药品的验收、分类、存放、保管的知识，掌握仪器帐目管理要求，会正确记载仪器总帐、分类帐和低值易耗品帐。 参考课时：12 3.中学实验室的安全与防范：

熟悉中学实验室安全用电与防火、防爆、防盗、防污染的基本要求与措施，具有对实验室中一般伤害及中毒事故的处理与防护的能力。

参考课时：2 4.“四项配套”工程所配生物仪器及中学生物实验常用技术：

初步掌握“四项配套”工程所配生物仪器的使用、保养与维护方法，初步掌握实验材料的制备、玻璃器皿的清洗和存放、动植物标本的采集、制作、基础的植物栽培技术、标本的存放、保养、与维护、中学生物实验室常用试剂和培养液的配制等中学生物常用实验技术。

参考课时：20 5.初中生物实验教学：

知道实验教学的基本原则和方法，了解几种常见实验教学形式的特点。

参考课时：2 6.实验创新和自制教具：

了解实验创新的含义，了解自制教具的作用、设计原则、制作方法和使用等。

参考课时：1 7.实验室在校本课程和科技活动中的作用：

了解实验室服务校本课程和科技活动的目的、作用、特点与方法等。 参考课时：1 8.专题讲座或经验交流

参考课时：4

三、主要教学方法

本培训采用教师讲授与学员自学、教师演示与学员操作相结合的教学方式，努力形成教师与学员双向互动、既有理论教学又有实践操作的最佳教学模式。

1.在课堂教学过程中，应注意发挥学员的积极性与主动性，除鼓励学员随时积极提问和发言外，可让学员参与课堂演示活动。 2.应保证每个学员都能有不少于8个课时的时间进行实践操作，并在学员操作时给予必要的指导。

3.可安排一定的课时用于组织学员进行自学、分组讨论和观摩。

四、考试方法

本培训考试采用考勤结果+书面考试和实验操作考试相结合的办法，学员需在以下两项同时达到及格方可获得结业证书。

1.考勤结果和书面考试采用百分制，合计达70分以上为及格，其中：考勤结果占10分，缺课1课时扣除2分，累计缺课达5课时及以上者，视为本次培训考试不及格;书面考试占90分，采用开卷考试的方法进行。

2.操作考试分“及格”与“不及格”两等。

五、主要教学参考资料

1.《中学实验室管理与实验技术》 2.《初中生物教学仪器介绍》(光盘) 3.《初中生物》(现行初中教材，学员自备)

第五篇：食品微生物综合实验报告

项目一:食品中细菌总数的测定…………………………1

项目二： 革兰氏染色技术………………………………5

项目三：饮用水中大肠菌群测定………………………7

指导老师：郭永班级:食品1002班学号：2010040734

姓名：任冠华

食品微生物综合实验报告

项目一：食品中细菌总数的测定

1. 目的

本方法规定了食品中菌落总数的测定方法。 本方法适合于各类食品中菌落总数的测定。 2. 设备和材料

温箱：36±1℃。恒温水浴：46±1℃。电炉 吸管。广口瓶或三角瓶：容量为500ml玻璃珠：直径约5mm。平皿：直径为90mm。试管。酒精灯。试管架。灭菌刀或剪子。灭菌镊子。 3.测定步骤 检样稀释及培养

(1)以无菌操作，将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。 (2)用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水 或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管，混合均匀，做成1∶100的稀释液。 (3)另取1mL灭菌吸管，按上条操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1mL火菌吸管。

(4)根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。 (5)稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46±1℃水浴保温)注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照

(6)待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h。 菌落计数方法

做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

菌落计数的报告

食品微生物综合实验报告

(1)平板菌落数的选择

选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落;如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。 (2)稀释度的选择

应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。

若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均数;若大于2则报告其中较小的数字。

若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。

若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 菌落数的报告

菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算。为了缩4.出现的问题

①接种过程操作速度太慢，导致培养基与接种液无法充分混合。②平板划线不规律。③仪器使用不熟练，配合不够默契。 5.参照国标得出结论部分食品国标

3 短数字后面的零数，也可用10的指数来表示。

食品微生物综合实验报告

瓶(桶)装饮用水菌落总数限量是≤20CFUmL，/总大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出，耐热大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL) 不得检出，大肠埃希氏菌(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出常温液态奶≤10cfu/ml。 6.结论：

自来水(或啤酒)的培养基均未培养出菌落，表示自来水(或啤酒)中菌落总数合格。土壤(或污水)的培养基中发现有大量菌落，则自来水和啤酒中无超标现象，符合卫生标准。

项目二:细菌涂片制作及革兰氏染色技术

食品微生物综合实验报告

一.目的

学习金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等细菌涂片制作、干燥和固定技术。 掌握细菌的简单染色和革兰氏染色技术 二.设备和材料

菌种

大肠杆菌16h 牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物，金黄色葡萄球菌16h 牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。 溶液和试剂

草酸铵结晶紫染液，革兰氏碘液，95%乙醇，番红复染液等。 仪器和其他用品

酒精灯，载玻片，显微镜，双层瓶(内装香柏油和二甲苯)，擦镜纸，接种环，试管架，镊子，载玻片夹子，滤纸，滴管和无菌生理盐水等。 三.测定步骤

1、细菌涂片制作

(1)涂片。用接种环从试管培养液中取一环菌，于载玻片中央涂成薄层即可，或先滴一滴无菌水于载玻片中央，用接种环从斜面挑出少许

(2)干燥。涂片后自然干燥，也可在酒精灯上略加热，使之迅速干燥。

(3)固定。固定的方法主要取决于勇什么染色方法，常用的有火焰固定法和化学固定法，火焰固定法的主要操作要领是：手持载玻片一端，标本面向上，在灯的火焰外侧迅速来回移动3~4次，约3~4s.

2、革兰氏染色法

涂片→干燥→草酸铵结晶紫(60s)→水洗→革兰氏碘液媒染(60s)→95%酒精脱色(30s)→水洗→番红(2min)→水洗→干燥→镜检。

脱色是革兰氏染色关键的一步，可直接用95%酒精冲洗脱色，直到流下的酒精无明显的紫色为止。然后，应立即用水冲洗，以避免脱色时间过长而影响最终染色结果。另外，挑菌量、固定温度、染色时间也是影响结果的重要因素，只有通过反复实践，才能获得满意的结果。

食品微生物综合实验报告

四.注意事项: 1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌;如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响，难以严格规定。

2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。

项目三：饮用水中大肠菌群测定

食品微生物综合实验报告

一、目的：

1.学习食品中大肠菌群检测程序、方法。 2.掌握食品中大肠菌群检测结果的报告方式

二、实验器材

1.培养基：乳糖胆盐发酵管，伊红美蓝琼脂、乳糖发酵管、蛋白胨 2.试剂：革兰氏染液

3.器皿：水浴、均质器或乳钵、载片等 三.内容、方法与步棸 1.检样稀释

以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。

另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管。

根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种3管、 2. 乳糖发酵试验

将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃ 温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进 7

食品微生物综合实验报告

行。 3.分离培养

将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃ 温箱内,培养18-24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。 4.证实试验

在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置 36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。 5. 报告

根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。

食品微生物综合实验报告

四.总结

1.实验步骤多且繁琐，因此需要小组成员的共同协作，从实验器材的刷洗到检样的稀释，以及培养基的配制等等都是需要每个成员认真密切配合的，如果哪位成员粗心大意或者偷懒少做步骤都会导致实验结果的变化，而这是我们食品工作者的禁忌。所以说，与队友的配合

食品微生物综合实验报告

和一丝不苟、任劳任怨的精神是至关重要的。

2.作为一个学生，很多东西都不懂，因此做实验的时候，必须要阅读实验步骤和实验要求，最重要的是认真听取老师的观点和方法以及注意事项。

3.实验过程中，我们每个人都难免会有出错或者是不懂得地方，这时候一定要虚心求教，不能不懂装懂。尤其是当队友提出我们不正确的时候，不能不服气，更不能莽撞恶语伤人。

5.做实验时我觉得我的技术还不娴熟，一些细节还掌握不够比如涂片始终涂不均匀，导致镜检时观察到的现象总是一团一团或一对一对的。还有一个问题就是，虽然按照严格的步骤进行了操作，但就是做不出结果，现实与期望的相差太远，我想这里面的原因就是因为技术和细节没有达到标准要求。

6.通过这次试验我认识到团队的力量是无穷的，个人太过渺小了。一粒沙虽微不足道，但聚沙能成塔;一滴水渺小无比，但汇集能成海。这个实验要想成功团队各个成员要有明确的分工，我们小组做的实验之所以不太成功，一方面的原因就是分工不太明确，每个人对自己的任务都不太清楚，尤其是我自己更不清楚，做实验时有点无所事事。 7.这次做实验虽然出现了诸多问题，但是我还是受益匪浅学到了很多知识。