化学发光法在水分析、大气监测中的应用

2024-04-24

化学发光法在水分析、大气监测中的应用(共9篇)

篇1:化学发光法在水分析、大气监测中的应用

化学发光法在水分析、大气监测中的应用

摘要:通过提出化学发光法的`基本原理,介绍了化学发光法对水中无机物、有机物的测定方法,并可应用于大气中SO2,O3,NO,NO2等的测定.作 者:马艳 MA Yan 作者单位:灌云县环境保护局,江苏,灌云,222200期 刊:江苏环境科技 ISTIC Journal:JIANGSU ENVIRONMENTAL SCIENCE AND TECHNOLOGY年,卷(期):,21(z1)分类号:X8关键词:化学发光法 水分析 大气监测

篇2:化学发光法在水分析、大气监测中的应用

NBS氧化流动注射化学发光法在土壤腐殖酸含量测定中的应用

摘要:在碱性条件下,NBS直接氧化腐殖酸产生强烈的化学发光信号,结合流动注射技术,建立了测定土壤庸殖酸舍量的流动注射化学发光分析法并详细研究了影响化学发光信号强度的`各种因素.方法的测定线性范围为1.0×10-7~1.0×10-3g/ml,检出限(3б)为3×10-8g/ml.对5.0×10-5g/ml的腐殖酸进行11次平行测定,相对标准偏差为1.8%.将该法用于实际土壤样品分析,结果令人满意.作 者:方卢秋 FANG Lu-qiu 作者单位:长江师范学院化学及环境科学系,重庆,涪陵,408003期 刊:中国环境监测 ISTICPKU Journal:ENVIRONMENTAL MONITORING IN CHINA年,卷(期):,23(2)分类号:X833关键词:NBS 土壤 腐殖酸 流动注射 化学发光

篇3:化学发光法在水分析、大气监测中的应用

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择该院临床中心的160例梅毒患者血清与135例非梅毒患者的血清为实验标本, 梅毒患者血清标本通过真空促凝管采集静血浆3 m L, 将血清分离, 保存在4~8℃的冰箱, 待检测[7,8,9]。

1.2 仪器与试剂

CLIA试剂盒、TPPA试剂盒均为日本富士瑞必欧生物技术有限公司, RPR试剂盒为上海荣盛生物科技有限公司。

1.3 方法

将160份梅毒患者血清与135例非梅毒患者血清标本分别同时进行CLIA和TPPA检测, 比较两种方法的不同之处。

将160份梅毒患者血清与135例非梅毒患者血清, 进行CLIA检测结果显示为阳性时, 再进行TPPA和RPR检测, 探讨TPPA阳性结果的S/CO值与TPPA、RPR之间有何联系。所有进行检测的试剂均达到实验要求, 且操作均按照操作说明书操作[10]。

1.4 统计方法

采用SPSS14.2软件对数据进行统计学分析, 计数资料进行χ2检验。

2 结果

(1) 160份梅毒患者血清中, CLIA法检测阳性151份, TPPA阳性130份, 以回归分析结果为参考, CLIA法的阳性率为93.75%, TPPA法的阳性率为82.50%, 两种方法差异无统计学意义 (χ2=3.8, P<0.05) 。

(2) 135份非梅毒患者血清中, CLIA法检测阳性率为2.28%, TPPA法检测阳性率为9.28%, RPR阳性法检测阳性率为10.37%。CLIA的S/CO值在2~11有3份, 其中TTPA阳性12份, RPR阳性14份;738份, TPPA均为阳性, RPR阳性7份。CLIA法阳性S/CO值与TPPA, RPR法所测结果关系, 见表1。

(3) CLIA与TPPA结果不一致的21份, 经RPR法检测, 阳性4份, 1份含TP31、TP47条带, 3份含TP32、TP47条带, 1份含TP17、TP32、TP47条带, 检测结果未显示出的4份, 为TP45阳性。14份RPR法检测阴性的标本, 通过CLIA法验证也均为阴性[11]。3讨论

梅毒对人体的危害多种多样, 越早对梅毒的确诊, 有利于患者得到全面有效的治疗, 有利于患者疾病的快速康复。梅毒临床确诊按照梅毒病毒的特异性抗体的检测和患者的临床症状作为判断依据[12]。TP-ELISA适合数量较大的操作, 但测量结果经常遇到假阳性的情况[13]。CLIA技术是ELISA技术的更新技术, 以敏感的化学发光底物代替原始的底物, 其特点是信号模式可被酶增强, 而且发光信号时间被保持和拉长了, 一方面保留了发光免疫分析超高的敏感性, 另一方面也避免了传统光信号持续时间较短等缺点。过氧化物酶催化鲁米诺发光和碱性磷酸酶催化金刚烷衍生物的方法是当今较为常用的两种方法。CLIA法对各期梅毒的灵敏性和特异性均>97.5%, 因此其也成为一种新兴的检测梅毒的方法[14]。

该研究发现, CLIA法的阳性符合率高于TPPA法。研究发现, CLIA法为阳性结果时, S/CO值较低时TPPA会出现阴性结果, RPR法发现14份为阴性, CLIA法验证结果也为阴性, 由此可说明CLIA法的灵敏度明显高于TPPA法;此外, 实验中出现假阳性的结果可能是标本处理不当导致的。

采用RPR法检测结果为阳性的为4份, 1份为TP17、TP45条带, 2份为TP45、TP47条带, 1份为TP32、TP45、TP47条带。这是由于CLIA包被的梅毒抗原特异性导致的, 而TPPA采用的抗原是提纯后的致病性梅毒螺旋体菌体, 对TP15、TP17、的抗体选择性较强, 当仅有TP15、TP17抗体时, TPPA只会出现阴性。有研究发现梅毒早期诊断的指标之一为TP47[15], 活动期梅毒标志的抗体之一是TP15[16]。因此推测, 9份抗体梅毒标本可能属于早期感染或隐性感染的患者, 在早期或隐性梅毒感染中的检测CLIA法比TPPA具有更高的灵敏度。

篇4:化学发光法在水分析、大气监测中的应用

【关键词】水功能区监测;连续流动分析技术;问题;实验;分析

在全球经济一体化建设进程不断加剧与城市化建设规模持续扩大的推动作用之下,水利建设事业在整个国民经济建设发展中所占据的地位日益关键。可以说,水利建设事业的发展程度与整个国民经济的建设发展程度是息息相关的。相关工作人员需要清醒的认识到一个方面的问题:在城市化建设不断发展完善的同时,生态环境的构建问题被摆在了一个极为关键的地位。城市化的建设发展不得以生态环境的恶化为代价。水环境作为生态环境体系构建过程中的主体与基础,应当受到相关工作人员的广泛关注与重视。据此,在水环境构建及发展进程当中所推进并逐步形成的水功能区划管理作用之下,如何不断提升水功能区监测工作质量与工作效率,确保整个水环境的安全稳定发展,已成为现阶段相关工作人员最亟待解决的问题之一。那么,现阶段水功能区监测存在着怎样的问题?连续流动分析技术有着怎样的应用优势?水功能区监测如何实现与连续流动分析技术的融合呢?笔者现结合实践工作经验,就以上问题谈谈自己的看法与体会。

1.现阶段水功能区监测工作存在的问题分析

相关工作人员需要清醒的认识到一个方面的问题:为及时且更加全面的掌握整个水环境功能区的水质状况,强化以水功能区为整体的监督管理工作的开展,政府相关部分需要持续推进有关地表水功能区水质监测工作的开展。简单来说,在政府相关职能部门的支持之下,整个水环境系统中的功能区监测工作需要做到全面化覆盖、持续化覆盖以及频率化覆盖。这也就是说,对于水环境这一整体而言,水功能区监测数量以及监测频率正呈现出較为显著的发展趋势,这对于水功能区监测实验室有关水样分析工作的开展面临着前所未有的发展机遇与挑战,相关水质部分所面临的分析工作压力也不断提升,这使得传统意义上的手工监测方式已无法充分满足现阶段水功能区监测工作的有效开展。在当前技术条件支持下,我国相关政府部门所制定的《地表水环境质量标准》针对各项污染物指标监测工作提出了更为具体与系统的要求。能够充分满足以上监测要求的分析方法大多操作复杂且耗时问题严重,与此同时其对于水样分析试剂的消耗问题尤为严重,在试样分析过程当中所生成并向外直接排放的各类废液对对于整个水环境而言是极为不利的。换句话来说,在水样分析工作量持续加大的现实形势作用之下,怎样快速、准确且低消耗的针对水样试剂进行系统分析,已成为水质监测部门及相关工作人员的当务之急。

2.连续流动分析技术概述

从理论上来说,连续流动分析技术是一种微量溶液效率自动分析技术。其从本质上来说是微量溶液效率分析的一种。连续流动分析技术的关键在于以多种差异性模式的组合为依据,以一种表现出多通道的蠕动泵装置作为动力提供依据,以管道系统为载体,确保水样试剂能够在管路系统当中参与整个连续流动反应,并自动进入检测器当中进行实时状态检测。与此同时,连续流动分析技术所支持的软件系统也能够针对实时状态检测所得出的各类监测数据信息进行高效的分析与处理,最大限度的确保整个分析技术对于样品监测试剂的高效、灵活、精确以及低消耗综合化处理,这也正是水功能区监测实验室自动化转型的必然选择与发展趋势。基于大量的实践研究,我们需要认识到一点:将连续流动分析技术引入水功能区监测工作当中不仅极为显著的提高了整个水功能监测的工作效率,且有效控制并缓解了传统分析技术在样品试剂分析过程中给整个水环境带来的不利影响与危害,值得大范围的应用与推广。

3.连续流动分析技术在水功能区监测中的实验及结果分析

笔者现以SKALAR 连续流动分析仪对水功能区监测中水中氰化物含量指标的监测分析为例,针对连续流动分析技术在水功能区监测工作中的运用问题做详细分析与说明。我们知道:氰化物作为现阶段已探明物质元素中具有剧毒性质的一种化和性物质,其能够在与高铁细胞色素——氧化酶相结合的过程当中生成一种氰化高铁细胞色素氧化酶元素,人自身的身体机能会在吸收这种氰化高铁细胞色素氧化酶元素的过程当中丧失氧气传递的能力,从而导致人体因缺氧发生窒息,给人体生命安全造成极为不利的影响。在现阶段技术条件支持之下,有关水功能监测区中水中氰化物含量的监测分析技术主要为异烟酸——吡唑啉酮光度法。这也是现阶段我国相关机构部门所认可的标准氰化物含量监测技术。然而这种技术在监测数据精确性及及时性方面的缺失使其应用受到了较大的限制。连续流动分析技术在监测氰化物含量过程当中所表现出的精确性、真实性以及连续性需要引起相关工作人员的广泛关注与重视。笔者现对其做详细分析与阐述。

(1)连续流动分析技术监测水功能区水中氰化物含量的原理分析。水体样品能够在特定的化学流路中发生一定的反应行为,依照分光光度法对样品中的氰化物含量进行系统分析与测定。

(2)连续流动分析技术监测水功能区水中氰化物含量的一般步骤分析。首先,相关工作人员需要配置相应的工作曲线,按照0、5、10、30、50、70以及100μg /L取值方式对标准溶液浓度进行划分与配置;其次,开启相应仪器设备,将其调整至Flow Access 操作系统当中,并设定好有关氰化物的进样时间、冲洗时间以及浓度曲线,自动转入曲线观测界面当中。

(3)连续流动分析技术监测水功能区水中氰化物含量的结果分析。观察检测结果可以发现,所测定工作曲线的相关系达到了0.9995 以上且监测仪器所测定的氰化物最低检出浓度上限为3μg/L,检测结果符合相应质量标准规范。与此同时,SKALAR 连续流动分析仪在检测水体样品的过程当中表现出了较好的稳定性、重复性以及可回收性。对比传统意义上的异烟酸——吡唑啉酮光度法监测结果可以发现,两种分析技术下监测结果的偏差率始终控制在0~3.3%范围之内,与国标检测方法分析结果无显著差异(p<0.05),值得大范围推广与应用。

4.结束语

伴随着现代科学技术的蓬勃发展与经济社会现代化建设进程日益完善,社会大众持续增长的物质文化与精神文化需求同时对新时期的水利建设事业提出了更为全面与系统的发展要求。换句话来说,水利建设事业的发展程度将直接关系着整个经济社会的建设发展程度。水功能区检测作为确保整个水利建设事业安全稳定发展的基础与保障,应当引起相关工作人员的广泛关注与重视。本文针对水功能区监测中连续流动分析技术的应用这一中心问题做出了简要分析与说明,希望能够为今后相关研究与实践工作的开展提供一定的参考与帮助。

【参考文献】

[1]丁卫东.王中平.赵颖等.水质分段法优化河流监测断面及其在水功能区达标监测中的应用[J].中国环境监测.2005.21.(06):4-7.

[2]毛学文.王进.河流水功能区动态纳污能力综合评价方法[J].中国水利.2004.(03):30-32.

[3]付铭韬.蟒河水功能区水质监测及入河排污口调查分析[J].人民黄河.2011.33.(07):64-66.

[4]王方清.吴国平.刘江壁等.建立长江流域水功能区纳污红线的几点思考[J].人民长江.2010.41.(15):19-22.

篇5:化学发光法在水分析、大气监测中的应用

目前,产地环境空气中二氧化硫的检测方法是引用现行国家标准《HJ482—2009,环境空气二氧化硫的测定甲醛吸收一副玫瑰苯胺分光光度法》,并没有自动监测的技术规范。然而,HJ482—2009检测二氧化硫不仅操作流程长,不能及时反映污染物的变化动向,且要花费很多人力物力,给监测带来了很多不利。利用二氧化硫自动监测仪可以解决这个问题,它不仅快速、准确,而且还可以随时跟踪污染浓度的变化趋势,调取监测数据记录。本项目采用的仪器是基于化学发光法原理的,二氧化硫进入仪器传感器后,就会与传感器上特殊的化学物质发生化学反应并发光,光的强度与二氧化硫浓度成正比。光线通过光电倍增管转化成可检测的电流,进而得出二氧化硫的浓度。仪器内部还配置了标准气源和零气,每一个测试周期都进行校标和校零,使测量数据更为可靠。因此,很有必要将该仪器用于产地环境空气污染物二氧化硫的检测,并且与现行的国家标准方法进行对比,以达到快速检测的目的。

1 方法

1.1 仪器

(1) K108i空气中二氧化硫分析仪(沈阳恺米迪科技有限公司):标准量程0~2000μg/m3,分辨率1μg/m3。

(2) 6600UV-VIS多参数分光光度计(德国WTW公司):量程-3.3~3.3ABS。

(3)恒温水浴:0~40℃,控制精度为±1℃。

(4)多孔玻板吸收管:10 mL和50 mL两种。

(5)具塞比色管:10 mL。

(6) TH-3000BIV型便携式恒温大气采样器(武汉天虹公司):具备有恒温、恒流、计时、自动控制开关的功能,流量范围0~1.0 L/min。

(7) TH-BQX1型流量校准仪(武汉天虹公司):测量范围0.1~1 200 L/min。

(8) 146i多元气体校准仪(美国热电公司):稀释倍数5~2 500倍。

1.2 试剂

SO2标准溶液(100μg/ml,环保部标样所);SO2标准气体(48.9 mg/m3,佛山市科的气体化工有限公司);环己二胺四乙酸二钠(AR,成都市科龙化工试剂厂);甲醛(AR,成都市科龙化工试剂厂);氨磺酸钠(AR,环保部标样所);氢氧化钠(AR,广东光华化学厂);盐酸副玫瑰苯胺(AR,天津市光复精细化工研究所)。

1.3 采样监测方法

使用大气采样仪进行采样,采样前对仪器流量进行校准,且采样前后流量相差小于5%。仪器自动采集温度及大气压数据,并计算出平均气温及气压,根据平均气温气压计算标准采样体积。样品采集完成后按照国家标准《HJ 482—2009环境空气二氧化硫的测定甲醛吸收一副玫瑰苯胺分光光度法》[2]进行检测分析,最后算出二氧化硫的浓度。

1.4 自动监测方法

仪器运行后要预热20 min以上才能正常使用。一般来说,仪器每年要进行一次多点校准,而本研究采样的监测仪已经通过权威计量部门进行检定了,所以只需要每次监测前进行单点校准,以防止零点漂移[3]。在进行单点校准时,标准气体与样品气体的路径保持一致。校准完毕后即可进行SO2监测。

1.5 采样监测与自动监测的对比试验

为了使试验得出可靠的结论,采样监测与自动监测必须使用同一根进气管,支管长度要一致,且不宜过长。本次研究选取了南宁地区某个甘蔗产地作为研究对象,进行二氧化硫的日均值监测,每天监测时间为20 h。对所获得的数据进行统计分析,采用t检验来分析两种结果的差异性是否显著,并对两种监测方法进行了Pearson相关性分析。

1.6 相对标准偏差测定试验

对同一个样品进行5次以上测量,然后计算其相对标准偏差。

2 结果与讨论

要检验自动监测和手工监测这两个样本是否存在显著差异,可采用配对试验的检验方法[4],因为自动监测和手工监测试验结果并不是互相独立的样本,见表1。因此我们构造一个新的样本:差值Z=X-Y,而Z符合正态分布N (μ,σ2)的,这里要检验假设H0:μ=0⇔H1:μ≠0。

计算得Z=0.45,S*=3.456,由一个正态总体均值的t检验得:

t=0.5823,对α=0.01,由t检验表查得tα/2(19)=2.86,而|t|=0.5823<2.86=tα/2(19),故接受H0,即认为两种监测方法没有显著差异。

除了显著性检验外,为了更好地考察自动监测的可行性,我们采用SPSS Statistics软件对两种监测方法进行了Pearson相关性分析,分析结果如表2所示。由表2可以看出,自动监测与手工监测相关系数达到0.910,属于极强相关性,显著性(双侧)为0.000<0.005,说明在0.01水平(双侧)上显著相关。

由表3可看出,自动监测方法的相对偏差在3.45%~11.0%之间。而且样品浓度越小相对标准偏差越大,浓度越大相对标准偏差越小。

3 结论

由试验结果及统计分析结果可看出,使用化学发光法自动监测系统来对产地环境空气中二氧化硫的监测非常可靠,监测结果与现行国家标准手工监测结果没有显著差异,并呈现极强相关性,相对标准偏差较小。因此,该方法可作为产地环境空气中二氧化硫的快速监测方法。

摘要:在GB 3095—2012《环境空气质量标准》中,二氧化硫的自动监测方法只允许使用紫外荧光法和差分吸收光谱法。为了考察化学发光法二氧化硫监测仪的性能,文章选取南宁地区某产地作为研究对象,使用化学发光法二氧化硫监测仪检测产地环境空气中二氧化硫浓度,并与现行国家标准手工监测方法进行对比,采用t检验来分析两种结果的差异性是否显著,并对两种监测方法进行了Pearson相关性分析。t检验结果为|t|=0.582 3<2.86=tα/2(19),表明两种检验结果没有显著性差异。Pearson相关系数达到0.910,属于极强相关性,显著性(双侧)为0.000<0.005,说明在0.01水平(双侧)上显著相关。通过对4个不同浓度样品进行试验,相对标准偏差在3.45%11.0%之间。因此,化学发光法二氧化硫监测仪完全满足于产地环境空气中二氧化硫的监测要求,而且具有快速便捷、准确等优点。

关键词:产地环境空气,二氧化硫,化学发光法

参考文献

[1]满世志,邓珍带.作物烟害投诉的查处和事后补救措施[J].种子世界,2010(4):12-13.

[2]HJ 482-2009,环境空气二氧化硫的测定甲醛吸收一副玫瑰苯胺分光光度法[S].

[3]国家环境保护总局空气和废气监测分析方法编委会.空气和废气监测分析方法(第四版)[J].北京:中国环境科学出版社,2003.

篇6:化学发光法在水分析、大气监测中的应用

关键词:数轴法;化学教学;应用

初中是我们最早正式接触化学这门学科的时段。很多学生对这门新的学科既感到新鲜又感到忐忑。因化学具有繁杂抽象的特点,所以教师在教学的时候一定要努力使繁杂抽象的问题变得简单直观,方便学生的理解记忆。下面,本文就通过介绍在数学教学中常用的方法——数轴法与化学教学相结合的实例来阐述这一方法在实际应用中的情况。

一、数轴法在溶液酸碱度教学中的应用

众所周知,溶液酸碱度的表示方式是pH,它的取值范围为0~14。碱性溶液的pH取值范围是pH>7,且数值越大碱性越强;酸性溶液pH值的取值范围为pH<7,且数值越小酸性越强;当pH值等于7时,溶液为中性。利用数轴法可以更加直观地将这个问题展现给学生,方便学生的理解与记忆。首先,我们需要画一条直线,并将其命名为pH,而后将直线均匀分割成十四等份并画好刻度,将0~14这15个数字从左向右依次标注到相应的刻度之上。将标注数字是“7”的刻度点重点表示出来,并标注为中性;小于7的范围标注为酸性;大于7的范围标注为碱性。通过这一数轴,无论是有化学基础的学生还是没有化学基础的学生,都可以很直观地了解到溶液酸碱度这一问题。既方便了教师的教学,也提高了教学效率和质量,使得学生的知识掌握得更加牢固。

二、利用数轴法介绍金属活动性

在初中化学教学中,金属的活动性强弱是比较抽象的问题之一。单凭教师的口头讲解很难让学生从根本上理解这一问题,更不可能应用到实际中去。通过数轴教学法则可以很好地解决这一问题。首先,还是先要画一条直线,将直线的左侧端点命名为“强”右侧端点命名为“弱”,以此来表明直线两端的强弱关系,而后再根据各个金属活动性的强弱,依次由左向右书写金属名称。这样,一条表示金属活动性强弱关系的数轴就建立好了。在教学中,老师根据数轴配以相应的实验或者实验情况介绍,就可以很轻松地让学生了解金属活动强弱的情况,有效地使学生去理解记忆而不是依靠死记硬背来掌握这一知识点。

三、利用数轴法帮助学生学习元素化合价

化合价是元素在形成化合物的时候所表现出来的性质,这一性质可以用化合价数值来表示。化合价有正价和负价两种情况,单质中元素的化合价是零。化合价知识的学习是初中化学学习的一个重点,同时也是一个难点。很多学生不能够理解这部分知识,只能单纯地依靠死记硬背来让自己掌握这项知识,学习效率和学习质量都大打折扣。针对这种情况,优秀教师要切合实际地想出解决对策。数轴法就是很好的解决方法。将一条直线根据实际需要均匀分成若干等份并画好刻度,然后从左向右、从小到大依次在刻度上标注好所需数值,并将数值对应的元素名称写在上面。

四、数轴法在“物质溶解性”教学中的应用

物质的溶解性问题是初中化学学习中常常要面对的问题,很多题目和试验都会涉及这方面的知识。学生能否熟练地掌握这方面的知识与很多方面都有着密不可分的联系。例如,习题是否能正确高效地解决,试验是否能够安全顺利地进行等。数轴法在这一知识内容的讲解上也有着很好的应用。根据物质的溶解度在温度为20°C时呈现的溶解性不同可以分为难容、微溶、可溶和易溶四种情况。将一条直线命名为“20°C时的溶解度”,均匀分成四个等份并依次写上物质的溶解情况,然后依据物质的溶解性情况,依次将物质的名称写在对应区域内。这条数轴使物质溶解度的特点得以直观地展现,方便学生理解应用这一知识点。

五、应用在“混合物中元素质量比”的数轴法

因为反应物之间的搭配比例或者反应时的条件不同,所以产生的产物也是不相同的。此外,还常常会涉及混合物中元素质量比以及元素质量分数的计算。这类计算都十分困难,对于初中学生来说,更是难理解、难应用。初中教师在向学生讲解这方面知识时,必须结合学生的实际情况,将数轴法更好地运用到实际教学中去,使这一初中化学教学的难点变成易学点,使学生无论化学基础好坏都能够掌握这个知识点并能够将其熟练应用到实际操作中去。

所以,初中化学教学的工作应该突破学科限制,将其他学科中可以利用的优秀教学方法借鉴过来,优化自己的教学质量,提高自己的教学水平。数轴法正是这一做法的良好体现。通过数轴法的应用,初中化学学习将变得更加简单,一些难点、易混淆点可以更加简单清晰地展现给学生,使学生真正依靠理解来记忆知识点,为日后高中的化学学习打下了坚实的基础。

参考文献:

[1]蔡贤金.简析初中化学教学中数学方法的巧用[J].才智,2009.

[2]陆春华.谈如何学好初中化学[J].文理导航:上旬,2012.

篇7:化学发光法在水分析、大气监测中的应用

为了控制梅毒的院内感染, 卫生部已规定凡是手术、输血及各种创伤性检查的患者, 均需进行梅毒特异性抗体的血清学检测。自2011年以来, 该院检验科开始使用化学发光微粒子法 (CMIA) 进行梅毒特异性抗体筛查。CMIA具有特异性好、敏感度高、可定量、全自动操作、重复性好等优点。但在长期的工作中, 也发现CMIA法在检测中尤其是低值标本中具有一定的假阳性, 因此, 为了更好的指导临床的诊断和治疗, 避免误诊。该实验将自2013年12月—2014年6月间的住院病人5673人份标本分别使用用化学发光微粒子法 (CMIA) 、梅毒螺旋体明胶凝集试验 (TPPA) 和TRUST (甲苯胺红不加热血清凝集实验) 分别进行了检测。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

该院住院和门诊病人常规免疫学检测标本5673例, 其中男3125例, 女2548例。年龄16~86岁, 平均年龄39岁。

1.2 仪器与试剂

CMIA检测是采用郑州安图生物公司A2000化学发光仪器以及配套试剂。TPPA是采用日本瑞必欧株式会社试剂。TRUST采用上海荣盛生物药业有限公司生产的试剂。

1.3 检测方法

使用CMIA法对5673份标本进行筛查, 测得结果在S/CO值在1.0以上的为阳性。然后, 阳性标本使用TPPA和TRUST进行检测。以上方法均严格按照仪器和试剂说明书进行。

1.4 统计方法

使用SPSS11.5软件进行对数据统计学分析, 计数资料进行χ2检验, P<0.05具有统计学差异。

2 结果

2.1使用CMIA法检测5673份标本中, 阳性标本为347例, 占总标本数6.11%。其中S/CO值大于10的标本为204例、S/CO值5~10的标本81例、S/CO值1~5的标本62例。在347例CMIA法阳性标本中, TPPA检测为阳性的305例 (87.8%) , TRUST检测为阳性的130例 (37.5%) 。经统计学检验, P<0.005具有统计学差异。

2.2 CMIA法筛查阳性标本347例 (S/CO值>10、5~10和1~5三种浓度) , 使用TPPA和TRUST方法进行对比检测结果, 见表1。

3 讨论

随着社会的发展和对外交流的增多, 我国近年来梅毒螺旋体感染人群日益增长。因此, 梅毒抗体的检查也成为各个实验室的一个重要项目。化学发光微粒子法 (CMIA) 是近年来开始应用的新型检测技术, 由于CMIA使用全自动重组TP抗原 (TPN15、TPN17、TPN47) 包被微粒子检测血清抗体[1]。使用两步骤免疫检测, 避免了钩状效应的产生。有报道称CMIA检测各期梅毒患者梅毒抗体的敏感性为98.7%~100%, 特异性为99.9%[2]。从该试验中也可以看出, 化学发光微粒子法 (CMIA) 与TPPA法相比较, 敏感性较高, 在低值标本中, 差异性更加明显。CMIA法另外具有快速、高通量等优点。

梅毒螺旋体明胶凝集试验 (TPPA) 是目前梅毒检测中比较常用的确认实验方法。TPPA是将经过提纯处理的梅毒螺旋体特异性抗原包, 使用明胶颗粒为载体, 当抗原和血清中抗体发生特异性反应时就会出现颗粒凝集现象, 凝集的强度与抗体浓度成正相关。除对I期梅毒敏感性稍低外, 对其余各期梅毒的敏感性和特异性均较高[3]。

TRUST (甲苯胺红不加热血清凝集实验) 主要应用于梅毒非特异性抗体的检测, 梅毒非特异性抗体相比特异性抗体出现时间晚二周左右, 非活动期或在治疗期间的梅毒患者非特异抗体浓度会下降或转阴, 晚期梅毒患者非特异性抗体有可能转阴等原因[4], 因此, 对于Ⅱ期梅毒TRUST具有很高的临床诊断价值, 但对于I、Ⅲ期梅毒则检出率较低。治疗期或处于非活动期的梅毒非特异性抗体检出率也较低, 易出现假阴性。

该试验结果表明, CMIA检测梅毒特异性抗体浓度在1~5S/CO值时, TPPA的检出率仅为56.45%。主要原因是: (1) CMIA法的分子抗原主要选自梅毒螺旋体外膜的脂蛋白, 多肽抗原是使用基因重组表达而获得。再用血清清蛋白与之相连接, 试剂抗原所使用的合成多肽不做提纯, 可能造成非特异性反应升高, 从而导致CMIA法包含引起不符合的序列使检测结果出现不符合。 (2) 自身免疫性疾病和恶性肿瘤患者的标本中, 含有一些干扰免疫检测的抗体而造成假阳性。 (3) 部分老年人由于生理的改变和免疫功能的异常, 产生的一些抗体和蛋白质, 从而导致结果出现假阳性。有报道认为使用CMIA法测定梅毒特异性抗体的最佳筛查Cutoff值为3.125。这样, CMIA法的特异性有显著的升高, 并保留了原有的高敏感性[5]。

根据有关资料, TPPA在检测梅毒特异性抗体中, Ig G型抗体反应性与Ig M型抗体相比较弱, 而在一些感染性人群中, 却主要以Ig G型抗体为主。因此, 这部分人群在TPPA检测中, 常常出现低滴度的反应, 甚至出现假阴性[6]。在该试验中, CMIA检测梅毒浓度在1~5S/CO值时, TPPA的阳性率为56.45%, 对于这部分低浓度的人群, 有进一步发展的可能, 最好进行观察监控。

TRUST (甲苯胺红不加热血清凝集实验) 是检测非特异性抗体常用的方法, 梅毒非特异性抗体是患者被梅毒螺旋体感染后释放出的物质而产生的自身抗体, 称为反应素。非特异性抗体比特异性抗体出现要晚两周左右。因此, 在患者被梅毒螺旋体感染的初期, 非特异性抗体在检测中常常显示为阴性。在经过治疗后, 梅毒非特异性抗体会渐渐转阴, 这也是I期和晚期梅毒非特异性抗体阳性率较低的原因[7]。非特异性抗体也受多种疾病的影响, 例如一些感染性疾病和自身免疫性疾病。而此时, 实验室检测中, 假阳性的几率也较高。该试验结果显示, CMIA检测梅毒浓度在1~5S/CO值时, TRUST阳性率仅为9.67%, 与有关文献数据相吻合[8]。

在该实验结果中, 表明使用CMIA法检测梅毒抗体中, 对于低值结果的标本, 尤其是S/CO值1~5时, 应采用多种方法进行复检, 有条件的实验室最好能使用TPPA或免疫印迹法进行复检, 并与临床诊断相结合。避免出现假阳性而导致临床误诊, 消除医疗纠纷的隐患。

参考文献

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篇8:化学发光法在水分析、大气监测中的应用

[关键词] 化学发光免疫分析技术;研究进展;应用

章编号:1004-7484(2014)-03-1787-01

化学发光免疫分析起源于1977年,化学发光免疫分析主要利用了化学发光测定技术和免疫反应,化学发光测定技术有着非常高的灵敏性同时免疫反应有着非常高的特异性,通过两者的结合使得化学发光免疫技术成为现今最新的免疫分析技术。化学发光免疫分析技术较其他免疫分析技术而言拥有着高灵敏度、价格低以及操作简便等多种优点,正因为这些优点使得化学发光免疫分析技术被广泛的运用。

1 化学发光免疫分析技术的基本原理

化学发光免疫分析最关键的步骤就是化学发光以及免疫,免疫分析技术就是对分析的抗原进行标记,而化学发光分析技术就是对所产生的微观反应进行检测,以此来达到分析的目的。免疫分析就是利用抗原与抗体之间的特异性结合所产生的明显现象来检测所检测物质,而采用标记免疫分析就是通过对抗原进行放射性的标记,这样就能够更好的检测微观物质所发生的化学反应[1]。化学发光技术则是化学反应中的一种现象,化学反应必然伴随着能量的迁移,而具备能量的分子为了達到稳定的状态就要释放多余的能量,能量则是通过光形式释放出来,对所发出的光和能量迁移进行分析便可以知道内部所发生的化学变化。

2 化学发光免疫分析技术的应用

由于化学发光免疫分析技术不仅拥有较好的灵敏度以及较高的自动化程度,而且其还有较高的精密程度,所以得到了较多的应用。化学发光免疫分析技术在兽医学、临床医学以及食品分析中都得到了相当多的应用,下面将进行详细介绍。

2.1 化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用 化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用还处于早期阶段,因此没有得到较多的应用。主要原因则是化学发光免疫分析技术在兽医学的应用中会跨越化学、兽医以及生物学科方面的知识,而这样加大了化学发光免疫分析技术的应用难度,因此没有在兽医学中得到较多的应用。但是化学发光免疫分析技术仍然是兽医学中一项疾病快速检测的方法,即通过化学发光免疫分析技术可以精准快速的判定动物所发生疾病的原因,而且通过这项技术的运用还可以监测动物体内的疾病发生概率[2]。化学发光免疫分析技术在我国没有较多的应用到兽医学中,而且技术也没有国外先进,这进一步制约了化学发光免疫分析技术在我国的应用。国外化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用较多,比如国外利用化学发光免疫分析技术来进行动物肠道病毒检测试验、猪肉中沙门菌抗体检测以及评价胰岛素浓度对奶牛繁殖性能的影响,并且取得了较好的成果。

2.2 化学发光免疫分析技术在临床医学中的应用 化学发光免疫分析技术在临床医学中有较多的应用,比在兽医学中的应用要更加广泛,而且在临床医学的应用中非常重要。美国通过对化学发光免疫分析技术进行改进,使得其具备更好的灵敏性以及精准性,现今化学发光免疫分析技术在临床医学中主要用来检测甲状腺系统、性腺系统、血液系统以及心血管系统中激素浓度。后来有科学家利用金刚烷衍生物在碱性磷酸酶的条件下可产生长时间辉光的特性将其运用到化学发光免疫分析技术中,即通过碱性磷酸酶来作为标记物,完善后的化学发光免疫分析技术科用来检测心脏病、传染病、糖尿病以及过敏症状,另外还可以用于血液系统和胰岛素的检测中。现今将化学发光免疫分析技术运用的最好的就是Roche公司,其所创造的ECL分析系统可以检测到及其细微的反应信号,并且特异性反应极为强烈,操作过程也非常快捷。

2.3 化学发光免疫分析技术在食品分析上中的应用 现今食品安全已成为人们越来越关注的问题,检测食品中含有的违规成分也有一定的难度。但是通过化学发光免疫分析技术的运用可以快速精确的测定食品中违规成分的含量,使得食品检测部门可以更好的测定食品中含有成分的含量。化学发光免疫分析技术可以用于鸡肉样品中CAP的检测以及牛奶中黄曲霉毒素的检测,国外科学家还利用化学发光免疫分析技术来测定牛奶、牛肉以及鸡蛋中肉毒梭菌毒素A的含量,由于化学发光免疫分析技术有着较高的灵敏度,所以所测定的结果非常准确,而且极大的节省了测试所需要的时间[3]。Yang M等科学家将增强型化学发光免疫检测技术以及电荷耦合器件结合起来创造了检测食品中葡萄球菌肠毒素B的技术,其灵敏度非常高、方法实用而且检测成本非常低。

3 化学发光免疫分析技术的新研究进展

3.1 新的标记物 化学发光免疫分析技术运用的重点就是检测内部微观化学反应的情况,而为了达到更好的检测效果就需要发光物质发光时间更加持久发光更加明亮,而这可以通过标记新的标记物来得以实现。各国科学家都致力于研究标记物的发光时间以及发光强度,标记物发光需要特定酶的催化,这需要科学家通过长时间的实践才能够证明哪一种标记物在哪一种酶的催化下才能够达到长时间的发光以及高强度的发光,另外对于标记物发光过程还需要较高的稳定性。目前科学家通过大量实验得到luminol-H2O2在HRP2A的催化下可以发出高强度而且长时间的光,而且发光的稳定性非常好。化学发光免疫分析技术能够快速、灵敏、精准的测定非常细微的物质含量,对于医学检测以及食品安全检测都有着较多的应用,通过不断的研究会使得该技术得到更广泛的运用。

参考文献

[1] 魏光伟,余永鹏,魏文康.化学发光免疫分析技术及其应用研究进展[J].动物医学进展,2010-03-20.

[2] 农天雷.常用化学发光免疫分析技术及其特点[J].现代医药卫生,2011-07-30.

[3] 吴建伟.化学发光免疫分析技术的临床应用及研究进展[J].中国实用医药,2010-12-10.

篇9:化学发光法在水分析、大气监测中的应用

1衍生气相色谱法的优缺点

虽然衍生气相色谱法被广泛的应用于环境监测中, 但是其也有自己的优缺点, 主要的优点为:a.改善样品的热稳定性和挥发性。将一些热不稳定或高沸点的化合物进行衍生化处理之后, 可以生成热稳定或汽化的衍生物。b.提高分离检测的灵敏度和准确性。例如衍生气相色谱中的电子捕获检测器可以提高对含卤素化合物的灵敏度, 此外还可以借助衍生化反应将卤素基团引入到一些化合物中, 从而提高了化合物的检出灵敏度。c.改善样品的峰形, 提高分离性能。对于一些包含极性基团的待测物, 借助普通检测方法获得的色谱柱中一般不会出现谱峰, 或者谱峰存在明显的拖尾现象。而通过衍生气相色谱检测后, 可以有效改善目标化合物的色谱性质, 从而获得比较理想的分离效果。而对于分离比较困难的物质, 可选择与之对应的衍生化试剂, 从而达到分离的目的。d.具有绿色环保的优点。对于不挥发或高沸点的化合物借助衍生化可以转化成易挥发的物质, 这样该类物质就能够更好的适应吹扫或顶空捕集方法, 有效的取代了传统的液 - 液萃取方法, 提高了有机溶剂的使用率。

衍生气相色谱存在的缺点主要有:a. 无法直接根据色谱峰来得出相应的结论。b.需要已知物的色谱数据作为参照, 然后才可以得出最终的结果。

2衍生气相色谱在环境监测中的应用

2.1多环芳烃。研究发现, 多环芳香烃类化合物具有致癌性、突变性等特点, 此外还有一些多环芳香烃可以与其它化合物发生叠加效果, 从而加重了病情的变化, 因此需要引起政府和国家相关部门的重视。目前, 一般采用高效液相色谱法、衍生气相色谱对多环芳烃进行分析。吴俐等借助苯萃取浓缩煤焦油的方法得到了废水中的菲和联苯, 随后通过薄涂柱气相色谱法进行鉴定。结果发现, 该方法具有快速、准确、色谱柱温低等特点, 该方法的加标回收率为99%~100%, 相对标准偏差为0.61%~1.90%, 菲的最小检测量为2.01μg, 联苯的最小检测量为0.23μg。而将衍生气相色谱应用到工业废水检测中, 可以有效检测出联苯及菲的含量。该方法具有柱温低, 分离效果好, 固定液用量少, 分折速度快等特点, 提高了水样检测的准确度。

2.2酚类化合物。酚类化合物属于有机物, 具有半挥发性的特点, 其中氯酚是一类生物降解困难、毒性强、有潜在致癌性的污染物。在衍生气相色谱中酚类化合物挥发性较差, 对于水溶性好的苯酚一般无法从水中萃取出来。酚类的衍生化反应通常是对苯环上的羟基进行修饰, 而酸酐酰化和硅烷化是常用的衍生化方法。a.酰化衍生法。酰化衍生化试剂价格比较低廉, 而且酸酐在酚类和酸类酰化反应中一般是自身变成羧酸, 此过程需要添加碱 (如KHCO3、Na OH、Na2HPO4等) 来对其中的酸进行中和, 从而推动反应朝着酰基化方向进行。余益军等构建了质谱联用和原位顶空固相 - 乙酰化微萃取气相色谱测定水中氯酚类及酚类化合物的方法, 实际检测结果发现, 其相对标准偏差≤13.7%, 回收率为86.4%, 满足水体中痕量酚类化合物的质量要求, 图1表示的是衍生化原理。b.硅烷化衍生法。其是处理衍生气相色谱最常用的衍生化试剂种类, 不仅可以用于酚类的衍生, 而且在酸类、胺类化合物中都具有很好的效果。硅烷化试剂一般是通过与目标化合物的活性氢原子发生反应, 所以不需要选择带活性氢原子的物质作为溶剂。

2.3醛酮类羰基化合物。醛类化合物对人体的黏膜和皮肤有刺激作用, 严重的时候还会导致人类致癌。在水中这些化合物具有较大的溶解性, 所以直接用气相色谱法分析效果不理想, 目前一般采用高效液相色谱和分光光度法等来测定。醛结构中羰基比较活泼, 可以与亲核性试剂发生缩合反应, 转化成分子量较大、较为稳定的化合物, 为衍生气相色谱创造了条件, 可以提高分析结果的准确度和精密度。

2.4羧酸。饮用水中卤乙酸对人类健康造成了较大的危害, 具有较高的致癌风险。羧酸具备有机酸的水溶性和强极性等特点, 而直接进行衍生气相色谱检测可能无法达到灵敏度需求, 而且峰形存在明显的拖尾现象, 影响分离结果的准确性。目前衍生法已经成为测定酸类的主要手段, 最常用的衍生法有重氮甲烷衍生法和醇酸衍生法。重氮甲烷衍生法可以与多种羧酸作用, 从而生成比较理想的甲酯, 并且不存在副产物。重氮甲烷极易与水发生反应, 所以可以在无水的条件下进行。醇酸衍生法可以避免重氮甲烷的易爆性和毒性, 可以有效提高检测结果的准确性。

2.5肼类。在对水中肼进行测定时, 一般会选择二甲氨基苯甲醛分光光度法, 但是该方法很容易受到本身样品的颜色和浊度影响, 因此存在一定局限性。而衍生气相色谱有效的解决了上述不足, 如缩合衍生法和酰化衍生法。缩合衍生法多用于肼衍生分析, 借助肼和醛之间发生的缩合反应可以生成腙, 然后通过有机溶剂进行萃取, 即可以实现衍生气相色谱分析。肼和醛的衍生化原理如图2所示。而酰化衍生法。与缩合反应存在一定的不同之处, 其一般需要在碱性条件下进行。而且卤酰化剂属于较强的酰化剂, 其需要在室温下进行, 有的时候也可以应用在双官能团试样的衍生。

结束语

综上所述, 衍生气相色谱已经被广泛的应用于环境监测之中, 在对其进行分析时, 衍生气相色谱有其独特的特点, 具有简便、灵敏、快速、准确的特点, 而且还能够对多组分进行准确测定。这样一来可以为环境监测提供准确的数据, 对于我国环境可持续发展具有重要意义。

摘要:随着人类生活水平的提升, 人类对环境质量提出了更高的要求, 因此需要加强对环境的监测工作。而衍生气相色谱法主要是借助化学反应来转化目标化合物分子中的官能团或原子团, 然后对新生产物进行定性和定量分析, 其具有分离效果好、灵敏度高、绿色环保等优点。将其应用到环境监测中, 可以有效的检测出醛酮类、酸类、酚类化合物及其衍生物, 为环境的改善提供借鉴。

关键词:衍生气相色谱法,环境监测,应用效果

参考文献

[1]周民锋, 徐小平, 顾海东.衍生气相色谱法在环境监测中的应用[J].中国环境监测, 2014, 5 (2) :90-91.

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