临床基本技术操作规范

2023-01-14

第一篇:临床基本技术操作规范

动脉穿刺临床技术操作规范

一、动脉穿刺置管术

(一)操作目的:

1、直接监测患者血压

2、需采集动脉血液标本或某些特殊检查

3、急救时需加压输血输液

4、用于区域性化疗

(二)适应症

1、体外循环心内直视术、主动脉手术、主动脉反搏者。

2、术中可能出现血流动力学紊乱和需大量输血、输液者。

3、合并有近期心肌梗死、不稳定性心绞痛、严重冠心病及瓣膜疾病、心力衰竭史、COPD、肺动脉高压、代谢紊乱等急需手术治疗者。

4、心肺复苏后期治疗、严重创伤、休克及多器官功能衰竭者。

5、控制性降压或需持续应用血管活性药物者。

6、不能行无创测压者。

(三)禁忌症

局部感染、凝血功能障碍、动脉近端梗阻、雷诺现象(Raynaud’s syndrom)和脉管炎(Buerger’s disease)

(四)操作准备

1、、动脉置管部位:桡动脉(最常用)、股动脉、腋动脉、足背动脉和尺动脉

2、在作桡动脉插管前应测试尺动脉供血是否畅通。清醒病人可用Allen试验法测试。对于不能配合的病人如幼儿、意识不清和全麻后病人,可采用多普勒血流检测仪或手指体积描记图以判断手掌部的血流供应及平行循环供血情况。遇有尺动脉血供不足,应避免作桡动脉插管。

3、治疗盘内放置:无菌持物钳浸于消毒溶液罐内,2-2.5%碘酊,70-75%酒精或安尔碘等消毒液,无菌纱布及罐、消毒棉签,0.1%肾上腺素、笔、砂轮,注射器、针头、抗凝剂、试管、弯盘、注射器针头回收器,需要时备输液或输血用物

(五)操作过程

A、 以最为常用的桡动脉穿刺置管术为例:

1、准备洗手、戴口罩。

2、核对床号、姓名、治疗项目等,向患者或者家属解释动脉穿刺置管的相关内容。

3、常选用左侧桡动脉,成人用20G的Teflon或Vialon外套管穿刺针,长约3.2~4.5cm。

4、穿刺时病人仰卧,左上肢外展于托手架上,腕部垫高使腕背伸,拇指保持外展,消毒铺巾,保持无菌技术。

5、穿刺者右手示、中指与拇指持针,于腕横线桡骨茎突旁桡动脉搏动最清楚处进皮。在左手示、中指摸清桡动脉搏动行踪的引导下向着动脉进针。

6、一般针干与皮肤呈30°~45°角,针尖抵达动脉表面略带冲击的力量将针尖刺入动脉,此时有鲜红的血液喷射至针蒂,表明内针已进入动脉。再进针约2mm,使外套管也进入动脉内,此时一手固定内针,另一手捻转并推进外套管,在无阻力的情况下将外套管送入动脉腔内。

7、拔除内针,有搏动性血流自导管喷出,证实导管位置良好,即可连接测压装置,固定。

8、若外套管推进遇有阻力,常表示导管未进入动脉管腔。穿刺时有突破感,且有少量血液入针蒂,但血流不畅,此时穿刺针可能偏向一侧或已穿透动脉血管后壁。遇此可拔除内针,接上注射器并缓慢拔退外套管,当见有血液喷出时,保持导管与血管行向一致,捻转推进导管,不成功则可再次拔退外套管,见有良好的血液喷、滴出时可经套管内插入细导引钢丝,在导引钢丝引导下推进套管,若均未成功则重新穿刺。 B、股动脉穿刺:

1、基本准备同上,协助病人取仰卧位,下肢伸直略外展外旋。

2、术者消毒铺单,左手中指和食指,在腹股沟韧带下方内侧,左手食

。 指和中指触及股动脉搏动最明显处,右手持穿刺针与皮肤呈30-45角刺入。

3、中空穿刺针斜面向上进针,当持针手感觉到明显的动脉搏动时,即可刺破血管,待搏动性血流从穿刺针喷出,缓慢送入导引钢丝,退出穿刺针,盐水纱布擦拭导引钢丝,沿导引钢丝送入动脉鞘。

4、肝素盐水冲洗鞘管,连接测压装置,固定。

(六)注意事项

1、桡动脉穿刺必须做Allen实验。

2、严格无菌操作,避免反复穿刺。

3、采用持续肝素液冲洗,肝素为2-4U/ml.冲洗速度为2-3ml/h。

4、发现血凝块应吸出,不可注入。

5、置管时间一般为5-7d,如发现远端血液循环不好时应及时更换穿刺置管部位。

第二篇:《临床技术操作规范》消化内镜分册

消化内镜诊疗管理制度

一、内镜室的基本设置

一、人员配置

1,医师

(1)内镜室必须有专职医师(或主任)负责日常工作,在科主任的领导下,全面负责内镜室的各项工作,并参加常规诊疗工作。专职医师须由主治医师以上人员担任。

(2)内镜医师必须有坚实的临床基础,应在工作,年么上的住院医师中择优选拔,培训时间不少于3个月。从事治疗性内镜工作的医师,培训时间应适当延长。

(3)内镜医师必须既有操作技能,又有丰富的临床及理论知识。在有条件的地区,可采取考核上岗制度。

2,护士

(1)内镜室应设有经过培训的专业护士,其护龄至少在3年以上。每个检查台应设置1名护士(按同一时间内开展的台数计算)。3台以上的内镜室可设立护理组或配备护士长。

(2)内镜室护士应经过专门技术培,培训工作应在三级医院内进行,时间不短于2个月。在有条件的地区,可采取考核上岗制度。

3.技术员

对工作量较大的内镜室,尤其是有x线设备的内镜室应配备技术员,技术员应有(或相当于)中专以上学历,经培训后上岗。

二、检查室

1.每一检查室面积不小于20m2 ,室内主要放置内镜检查设备与清洗消毒设施。

2.检查台数与内镜台数应与实际检查人数相适应,检查台过少必然会导致镜消毒不严的后果。

3.不允许将不同类型的内镜(如胃镜与气管镜)安排在同一检查室内进行。

4.胃镜和肠镜检查原则上应分室进行。检查人数不多的单位可分不同时间段进行检查,但严格禁止在同一清洗槽内进行胃镜与肠镜的清洗与消毒。

5.检查室应配有空调、相应的水电设施、稳压电源装置、吸引装置、供氧装置、抢救药品及设备。

三、基本器械

1.内镜数量 内镜室的内镜数量应与本院内镜检查人数相一致。根据国家卫生部有关内镜消毒的规定,每例内镜检查后,内镜清洗及消毒时间不得少于20min。医院应根据检查人数配置相应的内镜与检查台数,以保证内镜消毒质量。

2.内镜的使用与报废制度 各内镜室应建立内镜档案卡,记录内镜购置时间、使用频度、检查人数及维修情况。对不能维修使用的内镜实行报废制度性能 不良的内镜不得用于临床检查。

3.器械购置 对各类辅助器械与治疗器械,购置时须严格检查“三证”,未经医疗卫生行政部门批准的器械不得使用。

4.其他器械 活检钳等器械应每例患者一把,消毒后可重复使用,有条件者可采用一次性活检钳,但一次性器械不得反复使用。

四、其他辅助设施

各内镜室应配备足量的检查用品。包括:

1.内镜检查用品每一内镜检查台必须配有足够数量的弯盘、牙垫、治疗巾、敷料缸、纱布、各类镊子、过滤纸片、标本瓶、消毒手套、消毒用桶等。

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五、内镜室的管理制度

1.内镜室应实施院长领导下的科主任负责制,医护人员必须在有关规章制度下,有条不紊地进行工作。

2.内镜室应设负责医师〔或主任)及护士长(或护理小组负责人),共同管理好内镜室的日常工作。

3.内镜室工作应严格按《规范》的要求及标准进行工作,制定出符合各医院实际情况的内镜室管理制度,使各项工作规范化、科学化。

4.内镜室负责医师的职责

(1)在科主任的领导下,完成内镜室日常诊断与治疗工作;

(2)与护士(或组长)共同组织实施有关内镜室的管理规定与制度;

(3)做好对下级医生和进修医生的带教工作;

(4)负责内镜检查与治疗的质量控制,严格执行预约、消毒制度;

(5)制定各类人员培训计划及业务学习制度,以不断提高自身的业务水平。

5.内镜室护士的职责

(1)做好术前局部麻醉与器械准备工作;

(2)配合医师完成各种内镜检查与治疗工作,检查治疗过程中,应随时观察患者病情的变化,发现异常及时报告并协助医师处理;

(3)负责内镜及附件的清洗、消毒工作;

(4)收发内镜申请报告及检查报告;

(5)交待有关的医疗建议,解答患者的询问。

6.内镜室技术员的职责

(1)负责内镜室全部器械的管理与档案记录,保证器械安全使用;

(2)内镜及附件的报废与添置应上报科主任;

(3)负责内镜室计算机设备的维护与维修;

(4)负责内镜设备的使用与维护。

7.内镜室工作应保持整齐、清洁,工作期间,严禁家属及无关人员人室观看;医护人员在工作时间,应集中精力,做好本职工作,不做、不讲与工作无关的事和话。

8.内镜室应有例会,布里、总结工作。

9.内镜室应保管好各类资料,如内镜检查、治疗申请单,治疗内镜术前同意书,内镜报告,内镜图像,消毒检测报告,器械维护记录等。

10,内镜室应制定仪器维修制度,及时报废陈旧器械,不断补充新器械,以保证日常工作正常进行。

Fu zhou gang tai gang chang yi yuang

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一dianzhiweijing镜检查

上消化道内镜能清晰地观察食管、胃、十二指肠壶腹至降段的粘膜形态及病变,如有病变可作活体组织病理学和细胞学检查以确定诊断。

【适应证】

1.有上消化道症状,包括上腹不适、胀、痛、烧心及反酸、吞咽不适、梗噎、嗳气、呃逆及不明原因食欲不振、体重下降、贫血等。

2.上消化道钡餐造影检查不能确定病变或症状与钡餐检查结果不符者。

3.原因不明的急(慢)性上消化道出血或须做内镜止血治疗者。

4.须随访的病变,如溃疡病、萎缩性胃炎、癌前病变等。

5.高危人群(食管癌、胃癌高发区)的普查。

6.须做内镜治疗者。

【禁忌证】

1.食管、胃、十二指肠急性穿孔。

2.严重心、肺、肾、脑功能不全及多脏器功能衰竭者。

3.精神病及意识明显障碍不能合作者。

【术前准备】

1.器材 内镜、光源主机、活检钳、细胞刷、必要的各种治疗器械、表面麻醉剂、各种急救药品(备用)以及内镜消毒设备。

2.技术准备

(1)了解病史、检查目的、特殊要求、其他检查情况、有无内镜检查禁忌证、有无药物过敏及急、慢性传染病等。

(2)向患者讲明检查目的及配合检查须注意的事项。

(3)术前禁食6~8h。已做钡餐检查者须待钡剂排空后再做胃镜检查。幽门梗阻患者应禁食2~3d,必要时术前洗胃。最好排空大小便。

(4)咽部麻醉:检查前15min用含2%~4%利多卡因的胶浆(内有祛泡剂)或普鲁卡因喷雾或口含,有麻醉药过敏史者可不用麻醉。

(5)不必常规应用镇静剂、解痉剂,对个别精神紧张或胃肠蠕动强者可在检查前15rnin肌内注射阿托品。患者条件许可时可行无痛胃镜检查。

(6)术前常规检查各项器材是否齐备。

【操作方法及程序】

1.患者体位

(1)患者取左侧卧位,头部略向前倾,双腿屈曲。

(2)如患者有活动假牙宜取出,松解领口和裤带,轻轻咬住牙垫。

2.插镜

目前均使用单手法:术者面向患者,左手持内镜操纵部,右手在距离镜端20cm处持镜,使镜面对准患者舌根部,将镜端自牙垫中插至咽后壁,左手调节旋钮方向,使之顺利到达咽喉部。.嘱患者做吞咽动作,顺势轻柔地插人食管。切忌用暴力硬插。

双手法(现已基本不用)

3.胃镜检查次序插镜后,内镜直视下从食管上端开始循腔进镜,依次观察食管、贲门、

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结肠镜检查

结肠镜检查是诊断和治疗大肠疾病的安全、有效、可靠、简便的方法之一,不但可明确钡剂灌肠X线检查未能明确的病变,而且能取活检做病理检查,并对某些大肠疾病进行治疗。广泛开展此项检查,可提高早期大肠癌的发现率,还能对癌前期病变和大肠息肉及时治疗。

【适应证】

1.原因不明的下消化道出血;

2.原因不明的慢性腹泻、便秘、腹痛、腹胀;

3.钡剂灌肠发现有异常;

4.不能排除大肠或末端回肠的肿物;

5.原因不明的低位肠梗阻;

6.某些炎症性肠病须做鉴别和确定累及范围及程度;

7.大肠某些良性病变为除外恶性变;

8.大肠息肉和癌诊断已明确,为了除外其他部位有无伴发性病变;

9.行结肠镜下治疗;

10.大肠某些疾病药物治疗的随访;

11.大肠癌手术后,大肠息肉摘除后随访;

12.大肠肿瘤的普查。

【禁忌证】

1.疑有大肠穿孔、腹膜炎;

2.严重心、肺、肾、肝及精神疾病;

3.多次开腹手术或有肠粘连者,应慎行结肠镜检查; 4.妊娠期可能会导致流产或早产;

5.大肠炎症性疾病急性活动期为相对禁忌证;

6.高热、衰弱、严重腹痛、低血压者,最好待病情稳定后再行结肠镜检查; 7.不合作者及肠道准备不充分者为相对禁忌证。

【术前准备】

.1.收集病史,介绍“患者须知”,争取患者配合;

2.检查前3d少渣饮食,检查前1d流质饮食,检查日上午禁食。检查前晚泻药清肠或清洁灌肠。现在有更简便的清肠方法,可根据不同要求按说明书使用。

3.准备好结肠镜、冷光源、括检钳、注射针、圈套器、高频电发生器、细胞刷、吸 引器、润滑油等。

【操作方法及程序】

分双人操作或单人操作法。

一、双人操作法:

1.患者取左侧卧位,常规做肛门指检,除外肛门狭窄和直肠肿物。

2.循腔进镜是结肠镜操作的基本原则,即视野中见到肠腔才能插镜,否则要退拉一下再找腔。

3.进镜中常有几个急弯肠段,如乙状结肠、降结肠交界处,脾曲、肝曲;找肠腔如有困难,可根据见到的肠腔走行方向行滑行插人,一般滑行插人2}cm左右即现肠腔;如滑进很长距离仍不见肠腔,应该退镜另找方向再插镜。

- 6可。在操作不顺利时,反倒应该多使用空气抽吸法和向后退镜法,或者用手按压腹部和变换患者体位的方法为好。但送气量过少,对整个肠管的弯曲程度和正确的走向是难以判断的。

【注意事项】

1.检查结束后观察患者有无腹痛、腹胀、腹部压痛,若无异常。10min后即可离去。:

2.若有腹痛、腹胀、肝浊音界消失,应立即做腹部X线透视,如肠下有游离气体即为消化道穿孔,应立即外科手术。

3.书写报告单,应详细描述阳性病变的部位、范围、大小、形状等,并解释检查结果。 【并发症】

1.穿孔

发生率为0.11%~0.26%,最常见为乙状结肠穿孔,结肠穿孔一旦确诊应立即手术。腹腔外穿孔一般不须手术,予以禁食补液,抗感染治疗,1~2周后穿孔会自行愈合, 腹膜后及皮下气肿可自行吸收。

2.出血

发生率为0.07%,大部分经镜下止血和保守治疗可获痊愈。

3.浆膜撕裂

也称不完全穿孔,较少见,一般不须特殊治疗,会自行愈合。 4.肠绞痛

一般为检查刺激所致,无特殊意义,能自行缓解。

5.心血管意外

结肠镜检查对心血管影响极其轻微,原有严重冠心病或心律失常者应慎重施行。

6.呼吸抑制

大部分与术前应用镇静或麻醉剂有关,一旦发生应立即复苏治疗。

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- 8起来备用。

【操作方法及程序】

1.患者通常取左侧卧位。根据息肉的具体位置、大小、外形等情况,可酌情改变体位,但应以息肉不倒卧于胃肠壁、不下垂至与对侧胃肠壁贴近和易于观察为原则。

2.用生理盐水浸湿的纱布覆盖于电极板,并紧密捆绑于患者左大腿外侧或与左臀部紧密接触。

3.常规插入内镜,发现息肉,充分确认其位置、大小、形态后,反复冲洗,吸尽息肉表面粘液及周围液体,使其暴露良好,便于息肉电凝电切操作。同时,必须吸净胃肠腔内的气体,尤其在大肠息肉切除时更须注意,必要时置换空气,以防易燃气体在通电时发生爆炸。

4.选择合适的电切圈套器,经内镜活检管道插入胃肠腔。在内镜直视下,在靠近息肉处张开圈套,将息肉套人圈套器内。于息肉根部逐渐拉紧套圈,但切勿用力过度,防止勒断蒂部导致出血。

5.拉紧圈套器后,息肉因血流阻断而顶端变为紫色,启动高频电源,脚踏开关通电,先凝后切。若使用新型高频电发生器,具有ENDO CUT功能,则可自动输出混合电流,自动通以凝、切电流,更易操作和控制,直至息肉被电切成功。

6.仔细观察确认电切部位无出血、穿孔等并发症后,用三爪钳、圈套器或网篮捞取息肉,连同内镜一并退出。

【并发症及处理】

1.出血

在手术操作过程中或手术后均可发生出血,出血可为轻度、中度或大出血。轻度出血仅见创面轻度渗血或缓慢溢出,可自行停止。中度出血:上消化道息肉切除术后可表现为呕血或黑便;大肠息肉切除术后可表现为排出鲜血便,应积极行内镜下止血,多数经内科及内镜治疗可止血。大出血者可出现休克,内科及内镜治疗无效,应紧急外科手术控制出血。

2.穿孔

常由于电流强度过大,通电时间过长,视野不佳或内镜及圈套器位置不恰当,即强行切除息肉或因圈套器破损,机械损伤胃肠壁等所致。

小穿孔可通过禁食、胃肠减压、静脉输液并给予抗生素治疗,内科治疗无效或大的穿孔,应立即转外科手术治疗。

3.灼伤

电切时,若电极或电切圈套器安放位置不当,或圈套器附近有导电的粘液,或息肉较长倒挂,均可引起电流分流烧灼附近正常钻膜组织。电灼伤一般仅表现为浅表溃疡,偶可造成贯穿性电灼伤甚至穿孔,应予以重视。

4.溃疡

息肉摘除术后,切断面为坏死凝固物,形成的溃疡多数在2~4周内俞合。胃息肉大肠息肉电切术后,包含以无渣流质或半流制裁为宜,不宜过多进食及过早活动。适当口服肠道不吸收的抗生素,口服液体石蜡以保持大便通畅。胃肠道息肉电切术后一般常规应用H2受体阻滞药或质子泵抑制药(PPI)及胃粘膜保护药。

5.其他

高频电切治疗贲门部息肉时,可发生左侧膈肌痉挛,并在心电图上出现心肌缺血性改变。此可能为高频电流影响膈神经以及局部高温传至心脏所致。所以贲门区息肉电切时须小时,时予心电监护。大肠息肉电切术偶尔可发生肠道气体爆炸。因此,大肠肉电凝电切术前禁忌口服甘露醇清洁肠道,操作过程中可进行肠道气体置换,即将肠腔内气体尽吸尽并充以隋性气体。

【注意事项】

1.分次电切法

广基隆起、直肠大于2cm的消化道息肉,应分次电凝电切。第一次电切息肉的一部分组织,再进行第二次甚至第三次,直至完全切除。

2.长蒂息肉的切除

圈套器应套在蒂中部或在离根郎3一5mm处紧缩圈套器。宁可将残蒂保留稍长一些,以免引起胃肠穿孔。

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第三篇:口腔牙科临床技术操作规范大全(模版)

美 容 牙 科 临 床 技 术操 作 规 范

第1章

美容牙科的一般性操作规范 第2章 牙齿修复美容技术 第一节 洁治术

第二节 牙齿修形术

第三节 牙齿漂白术

第四节 复合树脂粘结修复技术

第五节瓷贴面修复技术 第六节 桩冠修复技术

第七节 烤瓷熔附金属修复体技术

第八节 全瓷冠技术

第九节 自凝丙烯酸树脂临时冠技术 第十节 可摘局部义齿美容修复技术

第十一节

全口义齿美容修复技术 第十二节

即刻义齿美容修复技术 第十三节

植牙美容修复术

第十四节

粘结铸造固定桥美容修复技术 第十五节

柔性义龈美容修复技术 第十六节

隐形义齿美容修复技术 第十七节

套筒冠义齿美容修复技术 第3章 牙周美容技术操作 第一节 牙龈切除术 第二节 牙龈成形术 第三节 牙冠延长术 第四节 牙周骨手术 第五节 根尖向复位瓣术 第六节 侧向转位瓣术 第七节 双乳头瓣移位术 第八节 冠向复位瓣术

第九节 自体游离龈瓣移植术 第十节 牙周引导组织再生术 第十一节 牙槽骨修整术 第4章 牙牙合 畸形美容矫治技术 第一节 机械性活动矫治器矫治技术 第二节 功能性矫治器矫治技术 第三节 固定矫治技术

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第1章

美容牙科的一般性操作规范

美容牙科技术的目的是增进和改善牙齿的外形和外观。手术实施对象是牙齿及其周围组织。手术所有步骤都是为了矫正患者的畸形,所有治疗都必须考虑美观因素,很多情况下,美观是唯一目标。像口腔医学其他专业一样,在行美容牙科美容手术前,必须有完整的病历、检查、诊断和治疗计划。美学手术的效果有赖于病例选择、手术质量和患者的期望。

美学畸形或对美的需求是非常主观的。许多手术是不可逆的,如果不能满足患者的初始美学目标时不超越患者的生理极限。医患的充分沟通有助于手术的主客观评价和手术的选择,同时也会降低风险/利益比率。

一、 主诉

主诉是患者感觉到的牙及其周围结构的主要畸形,也是就诊的主要原因。但很多时候患者并不能清楚描述自己的主要需求。有时,畸形并不是患者自己感受到的,因此自初诊始医患就应建立良好的关系,医生取得患者的信任。良好的关系对未来的治疗效果的评判也非常重要。而好的言语和非言语的沟通及沟通环境是建立良好关系的一个保证。医生需要花较多的时间倾听患者的问题和需求。初诊时,除听取患者的主诉外,还要清楚了解患者为什么向您求医,而不是其他医生。据此可以得到非常珍贵的信息,如患者的主要担心、需要和期望。

二、 病史

1. 一般病史

(1) 药物治疗史 (2) 药物过敏史 (3) 正常生理改变 (4) 系统性疾病史 (5) 体检情况 2. 口腔病史

(1) 现有牙齿及其周围组织疾病治疗史 (2) 牙齿及其周围组织疾病史 (3) 牙齿及其周围组织功能的改变 (4) 牙齿及其周围组织的检查情况

3、牙齿美容史

牙齿美容史对于医生制定下一步的治疗方案和最后达到预期的效果至关重要。首次就诊,医生可以初步判断病人的“牙齿美容智商”。以前感受到畸形但未求医者,需要知道其未求医的原因。再次就诊,需要了解上次手术失败的原因。如反复美容反复失败,需要考虑患者是否适合美容。患者抱怨所有的美容牙科医师,医师应考虑拒绝患者。

4、心理社会状况

患者的社会心理状况涉及患者最终对医师工作的评价。医生应能理解患者的欲求,知道患者的求美动机。每个患者都是一个个体,有不同的个性。不同的个性需要不同的对待。医生要知道患者对畸形的态度,态度反映了患者的自我形象,而自我形象是患者外表与个性、社会层次和人际关系的总和。医师应能发现将情感或情绪问题引起的焦虑归因于口腔颌面部细微畸形的患者。

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三、口外检查

1.皮肤

2.颞下颌关节检查 3.咀嚼肌和表情肌检查 4.颌面区缺损检查、 5.骨骼分析 6.软组织检查

四、口内检查

1.牙周筛选检查 2.口腔缺损检查 3.牙合分析 4.牙检查 5.软组织检查

五、美学评价

1.一般评价 (1)年龄特征 (2)性别特征 (3)个性特征 (4)种族特征 (5)体形和体型 (6)头发 2.面部评价 (1)面形和面型

(2)面中线及垂直参考线 (3)对称与比例 (4)侧影分析

(5)前额

(6)眼瞳孔连线和口角连线 (7)鼻 (8)颏

3.微笑分析

微笑分析包括病人自我分析和医生分析两方面。 (1)唇形、唇线、上唇曲度与鼻唇构 (2)微笑线 (3)牙形与牙型 (4)牙排列 (5)牙中线

(6)切平面、牙合平面与龈平面 (7)前牙视觉对称与平衡 (8)前牙转位视觉比例

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(9)牙色 (10)暗间隙 4.语音评价

六、资料记录

1.X线检查 (1)根尖片 (2)曲面断层片

(3)头影测量片:头影测量片是牙齿美容中一项非常重要的检查和诊断分析。 2.诊断模型

模型除有助于诊断外,还可进行术后效果模拟和模型外科。 3.影像

(1)光学照像 (2)幻灯片

(3)数码照像:分普通数码影像和口内数码影像。电脑影像系统有助于美容牙诊断、医患沟通、治疗计划的制定和方案陈述。 (4)数码录像 4.图表 5.会诊资料

七、治疗目标

1.外观得到改善。

2.牙齿及周围结构的功能得到改善。 3.积极的心理社会反应。

八、治疗计划

1.牙齿修复美容计划的制定 2.牙周美容计划的制定

3.牙齿正畸治疗计划的制定

九、患者教育和知情同意

1.患者教育 (1)技术优点 (2)技术缺点 (3)生理的局限性

(4)影响手术的风险因素 (5)术后并发症

(6)术后患者自我护理的重要性

2.知情同意

所有不可逆美容手术均应得到患者的同意。在签署手术同意书之前,应告之患者手术的适应证和禁忌证、治疗目标、影响已知风险和并发症的因素、多种手术方法的优缺点、积极自我护理的重要性和将来需要重新替换等。

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十、疗效评估准则

1.有利结果 (1)外观改善

(2)面部高度得到恢复 (3)积极的心理社会反应 (4)患者良好的适应性

(5)牙齿及其周围组织的功能得到改善 2.已知风险和并发症

(1)患者有适应不良的反应 (2)语音的变化 (3)外观无法接受 (4)患者期望值过高 (5)材料的失败 (6)功能受到限制

(7)颞下颌关节和(或)口面肌肉功能异常。 (8)过敏反应

(9)牙疼痛及牙髓的并发症 (10)正畸牙松动度异常 (11)牙周并发症 (12)正畸牙根吸收 (13)正畸牙釉质脱矿 (14)口腔黏膜溃疡或损伤 (15)手术的不可知性 (16)材料寿命的不可知性 (17)需要定期的专业护理

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第2章 牙齿修复美容技术

第一节

洁治术

牙齿表面着色最常见的是因烟、茶或咖啡渍而引起的牙齿染色。口腔中的一些细菌所产生的色素也会沉积在牙面上的窝沟裂隙及表面粗糙处。这些都会严重影响牙齿的美观和牙周组织的健康,因而必须去除。目前临床常用的洁治术有龈上洁治术和龈下刮治术两种。龈上洁治术根据使用器械不同又分为超声波、手用器械和喷粉机洁治术。洁治术最好每半年进行一次。

【适应证】

1、 龈上、龈下牙石沉积

2、 各类牙周病手术的术前准备

3、 茶、咖啡、烟等引起的牙齿表面染色 【禁忌症】

超声洁治不宜用于安装了心脏起搏器的患者。 【操作要点】 1. 超声波洁治术 (1) 术前准备 (2) 常规消毒

(3) 放置工作头,找稳支点 (4) 去除色素和牙石 (5) 检查效果 (6) 磨光 (7) 医嘱

2. 手用器械洁治术

(1) 器械的选择与使用:器械包括前牙及后牙镰形洁治器和锄形洁治器等。 (2) 常规消毒

(3) 刮除色素及牙石 (4) 检查效果

(5) 使用磨光器抛光 (6) 医嘱

3.喷粉洁治术

使用超声波洁治或手用洁治后,可使用喷粉洁治机。也可单独使用喷粉机洁治。主要适用于因烟、茶和咖啡引起的牙齿染色及牙石清除后残留在牙面的细微色素。

(1)术前准备 (2)喷粉 (3)检查效果 (4)医嘱 4.龈下刮治术 (1)术前准备 (2)常规消毒铺巾

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(3)使用匙形器、锄形器和锉等刮除色素及牙石。 (4)检查效果 (5)医嘱

第二节

牙齿修形术

修形术是通过对天然牙的形态改变来达到牙齿美容的目的。牙齿经修形后,除牙齿外观改善外,很多时候功能也得到改善。改变错位牙的形态并对之进行抛光还可以增加其自洁作用并减少牙齿折断的可能性。

【适应证】

1. 需要改变外形的牙齿 2. 畸形牙

3. 配合正畸治疗的牙齿 4. 有表浅色斑的牙齿 5. 影响咬合的高尖牙 6. 引起夜磨牙的牙 【禁忌症】

1. 髓腔大修行易于引起穿髓的牙。 2. 牙釉质薄易易引起过敏的牙。 3. 色斑部位都很深的牙。 4. 引起

干扰的牙。

5. 修行后会引起牙周疾病的牙。 6. 龋齿率高的牙。 7. 心里反应较差者 8. 补物过大的牙齿。 【操作要点】 1. 取研究模型。 2. 模型分析。

3. 拍X片了解牙釉质厚度、牙髓腔的大小和形态。 4. 用铅笔画出样板牙(对侧同名牙)的正面轮廓。 5. 检查相关牙(需要修形的牙齿)以确定其颊舌尺寸。 6. 调磨相关牙的凸度。

7. 在相关牙上面画出样板牙的正面。

8. 调磨相关牙的正面和正面外围的相邻面。 9. 细磨。 10.抛光。

第三节

牙齿漂白术

牙齿漂白术是治疗变色牙的主要方法之一。牙齿漂白分活髓牙和死髓牙两种。活髓牙漂白又分诊所漂白和家庭漂白两种方式。这里只介绍家庭漂白术。

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【优点】

1. 不必磨牙。 2. 见效快。 3. 较安全。 【缺点】

1. 漂白剂可引起牙髓、牙龈组织、牙颈硬组织的病变。 2. 在选择病例中只有75%的成功率。 3. 需要持续治疗。

4. 牙齿漂白后有在着色的想象。 【适应症】

1. 轻、中度四环四素牙。

2. 釉质光泽好、淡黄色的轻度氟牙症。

3. 增龄性牙齿变色以及烟渍、茶渍引起的牙齿变色。 【禁忌症】

1. 儿童牙齿和年轻恒牙。

2. 中度变色或伴有釉质发育不全的变色牙。 【操作要点】 1. 记录色牙。 2. 印模。

3. 制作石膏模型并进行修整。

4. 在模型上美观区唇面均匀涂上一层光固化材料并关照固化。 5. 制作托盘。 6. 修整托盘。 7. 口内试戴托盘。 8. 示教放置漂白凝胶。 9. 医嘱。

第四节

复合树脂粘结修复技术

两个同种或一种的固体物质、与介于两者之间的第3种物质作用而产生牢固结合想象,称为粘结或粘合。采用口腔粘结材料在修复体与口腔软硬组织之间形成连接的方法,成为口腔粘结技术。复合树脂的固化有化学固化和光照固化两种。

【优点】 1. 无痛。

2. 一般不必麻醉。

3. 扩大了牙体修复的适应症。 4. 牙体磨除组织较少。 5. 见效快。

6. 釉质发育不全、四环素牙、氟牙症等的牙齿美容均可采用。 【缺点】

1. 易崩裂或染色

2. 粘结材料的寿命有限

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3. 光照固化复合树脂操作比较复杂。

4. 可见光不能透过金属等阻光材料,使光固化技术的使用范围受到一定的限制。 5. 可见光光线对眼睛有刺激。 6. 在某些光源下呈现荧光色。 【适应证】

1. 牙冠唇面病变及变色牙的唇面美容性覆盖。 2. 牙冠外伤性牙折的对接及缺损部位的修复。 3. 畸形牙的改形治疗

4. 牙列错牙合畸形正畸治疗中粘贴某些附件、关闭前牙间隙及个别牙错牙合正畸性治疗。

5. 作为义齿的修复材料,应用于固定桥及人造冠的修复。 6. 再植牙的固定

7. 其他。用于某些口腔软组织缺损的修复,牙龈萎缩或缺损可用红色材料修复;用于某些修复体的修理材料,如烤瓷(桥)瓷面折裂的修理;用于瓷牙面或塑料牙面的粘结材料等。 【操作要点】 1. 清洁牙齿 2. 牙体制备 3. 选牙色 4. 隔湿

5. 必要时垫底 6. 酸蚀

7. 冲洗、吹干、评价酸蚀效果 8. 涂布树脂粘结剂、固化 9. 必要时涂布遮色剂 10. 充填复合树脂 11. 固化

12. 调牙合和抛光

第五节 瓷贴面修复技术

瓷贴面技术是牙体美容的一项重要技术。瓷贴面技术是根据正常牙齿的解剖形态、颜色及邻接关系等在牙体制备的模型上用瓷粉烧结形成贴面,经酸蚀处理再与牙釉质粘结而达到美容修复目的的一种技术。

【优点】

1. 美观,与光固化贴面相比较耐用、强度高。 2. 边缘完整,与软组织相容性好。 3. 牙体组织磨除少。 【缺点】 1. 费用较高 2. 脆性大 【适应证】 1. 关闭牙间隙

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2. 牙齿变色或被染色 3. 牙釉质缺损

4. 牙齿一定程度的排列不齐或畸形牙。 【禁忌证】

1. 夜磨牙而使牙齿磨损的患者 2. 牙齿太短。 3. 牙釉质不足。

4. 现存修复体很大或做过根管治疗而且剩余牙体组织少的患者。 5. 有不良口腔习惯的患者,如有咬指甲或咬铅笔等不良习惯。 6. 有反牙合或切牙合的患者。 【操作要点】 1. 唇线评价。 2. 选牙色。

3. 必要时施加麻醉。 4. 牙体制备。 5. 印模。

6. 必要时制作临时修复体。 7. 技工室制作瓷贴面。 8. 试戴。

9. 必要时瓷贴面染色。 10. 粘固。

11. 修整、抛光。 12. 医嘱。

第六节

桩冠修复技术

桩冠是利用金属桩冠插入根管内以获得固位的一种全冠修复术。桩冠的长度要足够,一般要求达根长的2/3~3/4,或约与完成后的牙冠等长;桩冠的粗度约为根面横径的1/3。桩冠的外形应为锥形,向根尖部逐渐变细。桩冠的横断面应与牙根的外形一致,有利于固位。

【适应证】

1. 冠大部缺损,无法应用嵌体或一般冠类等修复者。 2. 缺损涉及龈下,牙根有足够长度,牙周组织健康者。 3. 根管治疗后,牙根变色影响美观者。

4. 前牙畸形、错位或扭转,难以应用正畸或其他疗法矫治者。 5. 做固定义齿的固位体。 【禁忌证】

1、18岁以下的青年一般不宜做桩冠修复。

2、有明显尖周感染和临床症状,根管感染未能有效控制,瘘管口未闭且有分泌物者。

3、严重的根尖吸收、牙槽骨吸收超过根长1/3以上者,根管弯曲细小,桩冠无法取得足够长度和直径者。

4、根管壁已有侧穿,且伴有根、骨吸收和根管内感染者。

5、牙槽骨以下的斜行根折,伴断牙牙根松动者。

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6、原有桩冠发生冠钉折断,断桩无法取出,或虽取出但根管壁过薄,抗力形、固力形差者。

7、深覆牙合、咬合紧,牙根长度不足,无法获得足够的固位形、抗力形者。 【操作要点】

1. 残冠修整与切除。 2. 根面预备。 3. 根管预备。 4. 制作桩冠代型。

5. 根管冲洗、消毒、吹干,用暂封材料封闭。 6. 按常规包理、铸造桩冠代型。 7. 桩冠代型的试戴。 8. 桩冠的粘固。 9. 制作临时修复体。 10. 制作全冠。

11. 全冠试戴、粘固。 12. 医嘱。

第七节

烤瓷熔附金属修复体技术

烤瓷熔附金属修复体技术又称金属烤瓷修复体,是将烤瓷附在金属上以修复牙齿形态、大小和异常,牙体缺损和牙齿缺失的一种修复体。它将金属的强度和瓷的美观结合在一起。

【优点】

1. 可用于残冠修整与切除。 2. 硬度高、耐磨损。

3. 可配色且色泽稳定,颜色与天然呀近似。

4. 生物相容性好,化学性能稳定,物理性能良好等。 【缺点】

1. 抗拉和抗剪切强度不足,脆性大。 2. 当修复间隙不够时易出现崩瓷现象。 3. 硬度高,会对牙体组织产生磨损。

4. 对牙龈和牙周产生刺激,出现牙龈颜色改变。 5. 费用较高。 6. 脆性大。 【适应证】

1. 牙体严重龋坏

2. 亚体磨损过度,大范围牙体磨损。 3. 固定义齿的基牙。 4. 畸形牙和错位牙。

5. 牙齿大小、形态、结构和颜色异常。 6. 牙间隙的关闭。 7. 牙龈退缩影响没关者 8. 根管治疗后易折裂牙。

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9. 折裂牙。

10. 大面积冲田后的牙齿 【禁忌证】 1. 松动牙。

2. 基牙根部有病理性改变。

3. 牙根或牙周有病理性改变且牙槽崤出现明显吸收者。 4. 咬合关系异常,如反严重,咬合过紧。 5. 牙冠更组织缺损严重达龈下者。 【操作要点】 1. 术前设计

(1) 固位体的设计。 (2) 桥体的设计。 (3) 连接体的设计。 (4) 个性设计因素。 (5) 年龄设计因素。 (6) 性别的设计因素。 (7) 颜色的设计。

(8) 形态大小的设计与视错觉考虑。 2. 材料选择。 3. 牙体制备。 (1) 麻醉。

(2) 切端与唇侧深度指导沟的制备。 (3) 切端与唇面的制备。 (4) 邻面制备。 (5) 舌侧制备。 (6) 边缘的制备。 (7) 排龈。

(8) 细磨整个制备体,去除所有的锐角。 (9) 印模 (10) 灌模。 4.制作临时冠。 5.咬合记录。 6.选牙色

(1)拍照记录相邻牙的颜色。 (2)确定色相。 (3)确定彩度。 (4)确定明度。

(5)确定参色与异色。 (6)填写颜色技工单。 7.填写技工制作单。 8.技工的设计与制作。 (1)模型准备。

(2)金属支架的制作。 (3)烤瓷。

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(4)修形。

(5)内染色与外染色。 (6)上釉。 9.试戴。 10.粘固。

第八节 全瓷冠技术

烤瓷熔附金属复体的金属部分碍光线的通过,而全冠的透明度和光线的穿透性好,因而在牙美学中的地位不容替代。根据材料的不同,全瓷冠有长石瓷冠、氧化铝合冠、铸造玻璃瓷冠、无收缩氧化铝瓷冠、白榴石增强瓷冠、热压增强瓷冠等。

【适应证】

1. 对牙前美观要求特别高的患者。 2. 对生物相容性要求高的患者。 3. 足够的技工技术支持。 4. 能满足牙体预防要求者。 【禁忌证】

1. 非正常牙功能者。 2. 咬合力大者。 3. 临床牙冠短。 4. 患者需要夹板。

5. 对和牙咬在冠的颈1/5。 6. 牙体预防要求得不到满足。 【操作要点】 1. 术前设计。 2. 材料选择。 3. 牙体制备。 (1) 麻醉。

(2) 切端与唇侧深度指导沟的制备。 (3) 切端与唇面的制备。 (4) 邻面制备。 (5) 舌侧制备。 (6) 肩台的制备。 (7) 排龈。

(8) 细磨整个制备体,去除所有的锐角。 (9) 印模 (10) 灌模。 4. 制作临时冠 5. 咬合记录。 6.选牙色

(1)拍照记录相邻牙的颜色。 (2)确定色相。 (3)确定彩度。

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(4)确定明度。

(5)确定参色与异色。 (6)填写颜色技工单。 7.填写技工制作单。 8.全瓷冠的技工室制作。 9.染色。 10.试戴。 11.粘固。

第九节 自凝丙烯酸树脂临时冠技术

前牙固定义齿的美容修复要获得成功,临时修复体是一个关键。临时冠是最终修复体的镜像,唯一不同的是材料,如果临时冠制作不良,会损害牙周、刺激牙髓、导致吻合功能紊乱,甚至出现最终病人不满意的情况。临床常用自凝丙烯酸树脂制作临时冠。 【适应证】

1. 制备体的牙髓保存和镇静。 2. 用于制备体的评价。

3. 缺失或拔除牙的即刻美容修复。 4. 临时改善美观。

5. 为牙周建立健康的环境。

6. 评价和加强病人自我护理能力。 7. 作为牙周手术的辅助手段。 8. 松动牙的固定。 9. 牙合建立的辅助和评价。

10. 用于评价垂直距离、发音、休止牙合间隙和美观。 【制作要求】

1. 边缘适应性良好。 2. 良好固位。

3. 临时期延长时要求有一定的强度。 4. 无孔而且尺寸稳定。 5. 美观。

6. 生理外形和外展隙。 7. 易于调整。

8. 良好的生物学咬合。 9. 对支持组织的亲和性好。 10.患者易清洁。 11.便于拆除。 【操作要点】 1. 直接法

(1) 牙体制备

(2) 选用树脂牙片或树脂预成冠。 (3) 液态石蜡或硅油保护制备体。

(4) 置丙烯酸树脂调和物于制备体,然后将内面浸润单体的牙片置于制备体的唇面,

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待其凝固;或置丙烯酸树脂调和物于预成冠,并使之在制备体上就位。

(5) 树脂橡皮旗时取出修整,然后再放回至制备体待其凝固。 (6) 必要时内衬和边缘再处理。 (7) 凝固后按常规修整抛光。 (8) 必要时染色。 (9) 粘固。

2. 直接印模备牙法

(1) 备牙前印模,储备印模。 (2) 牙体制备。

(3) 液态石蜡或硅油保护制备体。

(4) 置丙烯酸树脂调和物于印模内,并使之在制备体上就位。 (5) 树脂橡皮期时取出修整,然后再放回印模,待其凝固。 (6) 必要时内衬和边缘再处理。 (7) 凝固后按常规修整抛光。 (8) 必要时染色。 (9) 粘固。 3. 间接法

(1) 牙体制备。 (2) 排龈。

(3) 印模和灌制石膏模型。

(4) 技工在模型上制作临时修复体。 (5) 必要时内衬和边缘再处理。 (6) 抛光。

(7) 必要时染色。 (8) 粘固。

第十节

可摘局部义齿美容修复技术

可摘局部义齿美容修复术是利用可摘局部义齿来恢复缺失牙的形态、功能和美观的一种技术。

【适应证】 1. 发音障碍。

2. 过渡性美观修复。

3. 美观因素,包括因牙周病、外伤或手术造成缺牙和美观缺陷,伴有牙槽骨、颌骨和软组织缺损及美观缺陷者。 4. 面高度降低。 5. 心理原因。

6. 现修复体不美观。

7. 不能耐受因固定义齿美容修复时磨除牙体组织或主动要求做可摘局部义齿美容修复者。 【禁忌证】

1. 缺牙间隙过小,义齿强度不够,恢复美观效果欠佳。

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2. 基牙呈雏形,固位形态过差,义齿不能获得足够固位力。 3. 精神病或生活不能自理的患者易将义齿误吞。 4. 口腔黏膜病经久不愈者。 5. 对丙烯酸树脂过敏者。

6. 对基托的异物感无法克服者。 7. 对发音要求较高的患者。 8. 对美观要求较高的患者。 【术前准备】 1. 工作条件。 2. 患者心理准备。 3. 口腔准备。 【操作要点】 1. 义齿美学设计

(1) 人造牙:人造牙的选择和排列应根据患者的邻牙颜色、年龄、性别、肤色、面形、职业、气质和主观要求等诸因素来综合考虑。

(2) 基托:对修复组织缺损、支持唇颊部软组织和恢复面部外形起重要作用。 (3) 固定体:①卡环型固定位;②套筒冠固定位;③精密附着固定体。 2. 口腔预备。

3. 制取印模和灌制模型。 4. 确定和转移颌位关系。 5. 义齿的模型设计。 6. 铸造或弯制义齿支架。 7. 排牙和完成蜡型。

8. 装盒、去蜡、充填塑料、热处理。 9. 开盒、打磨抛光。 10.试戴、调牙合 。 11.必要时染色处理。 【并发症】 1. 疼痛。 2. 实物嵌塞。

3. 义齿损坏、折断、磨损。 4. 牙齿变色、外观欠佳。 5. 发音不清晰。

第十一节

全口义齿美容修复技术

全口义齿由基托和人工牙组成。全口义齿可以恢复患者咀嚼运动,促进消化功能,增进全身的健康;人造牙代替缺失的自然牙列,恢复了人体的完整性;解除了患者的精神压力,调整心理健康,促进人体美。 【适应证】

全口牙列缺失、上颌或下颌单颌牙列缺失产生以下任何一个问题者。 1. 发音失常。

2. 微笑时无牙齿显露。

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3. 美学因素。 4. 自尊需要。 5. 回归自我需要。 6. 希望容貌年轻。 7. 希望口面肌肉饱满。 8. 旧全口义齿有美观问题。 【禁忌证】

1. 对于牙槽骨严重吸收致低平,黏膜增厚,口干严重的患者应慎重对待。

2. 对于口腔解剖条件不理想,对外修复极其苛刻,求美期望过高者,应慎重对待。 3. 易作呕者或唾液增加者亦应慎重对待。 【操作要点】 1. 口腔检查。

2. 取印模与制作模型。 3. 颌位关系的记录。 4. 颌位关系的转移。

5. 全口义齿人工牙的排列。 6. 全口义齿基托的形成。 7. 牙合 平衡调整。 8. 蜡型外形的形成。 9. 试戴。

10.装盒和去蜡。

11.充填塑料与热处理。 12.出盒和磨光。 13.义齿初戴。 14.选磨。 【并发症】 1. 疼痛。 2. 固位不良。 3. 美观效果欠佳 (1) 中线偏斜。

(2) 对称性处理不当。 (3) 微笑线处理不当。 (4) 上前牙过突。 (5) 下前牙过突。

(6) 上前牙对上唇的衬托不足。 (7) 下前牙舌向位。 4. 垂直距离恢复不当。 5. 发音障碍。 6. 恶心。

7. 咀嚼功能不好。 8. 咬唇颊、咬舌。

9. 不良的社会心理反应。 10.基托折裂和折断。 11.人工牙折断或脱落。

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第十二节

即刻义齿美容修复技术

即刻义齿又称预成义齿,它是一种在患者天然牙尚未拔除前预先做好,牙齿拔出后立即戴入以即刻恢复牙齿排列和面部美观,恢复正常语言和咀嚼功能,免除缺牙痛苦和对面容的影响的一种技术。

【适应症】

1. 由于工作性质,不允许长时间缺牙者。 2. 全身健康状况良好,牙槽嵴情况较正常者。 3. 特别适用于前牙的美容修复。 【禁忌证】

对年老体弱患者,一般不适宜或应慎重对待。 【操作要点】

1. 即刻全口义齿的制作

(1) 拔牙前应去记存印模,灌注模型,作为以后排牙的参考。

(2) 对存在的天然牙应详细检查并记录龈袋深度,X线摄片了解根周牙槽骨情况。 (3) 取印模。

(4) 确定颌位关系。 (5) 上牙合 架将记录的颌位关系固定到牙合 架上。 (6) 排试后牙。 (7) 排试前牙。 (8) 制作义齿。 (9) 拔牙。 (10) 戴牙。

2. 即刻可摘局部义齿的制作 即刻可摘局部义齿一般多应用于前牙或个别后牙须拔除者,其制作与即刻全口义齿大致相同。 3. 戴入义齿后注意事项

(1) 义齿戴入后24h不能取下,以免影响血块形成。 (2) 必要时服用镇痛剂或局部冷敷。

(3) 术后24h内吃流质软食,勿食过热过硬食物,次日复诊。 (4) 复诊时取下义齿,用温盐水洗伤口,比检查修改调牙合 。 (5) 6-8d后拆除缝线,再检查修改义齿。 (6) 预约2-3个月后复查做重垫处理、调牙合 或重新制作常规义齿。 【并发症】

1. 即刻义齿修复术的并发症大致上与相应的常规全口义齿或可摘局部义齿修复术的并发症相同。 2. 拔牙后出血。

3. 义齿不密合和松动脱位。

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第十三节

植牙美容修复术

一、前牙再植术

【适应症】

1. 外伤脱位的牙应即刻再植。 2. 位置不正的扭转牙。

3. 误拔的健康牙,应立即再植。

4. 再植牙一般以年龄小、牙根尚未发育完全、根尖孔呈喇叭状者效果良好。 【禁忌证】

1. 明显缺损折裂或广泛龋齿、牙周或根尖周有病损者。 2. 年龄过大、牙槽骨已有Ⅱ度以上吸收者。 【术前准备】 1. 清洁口腔。

2. 脱位牙浸泡于生理盐水或抗生素盐水中。

3. 扭转牙再植前应拍摄X线片,了解牙根及牙周膜情况。 4. 准备再植后的固定装置和调牙合 器械。 【操作要点】

1. 局部浸润麻醉。

2. 牙处理。清除异物,自抗生素液中取出牙,根尖如已发育完成,则需行牙髓切除及根管填充。

3. 受植区处理。清洁牙槽窝,去尽异物、凝血块、复位牙槽骨,消毒。 4. 植牙。将准备好的牙按一定方向植入牙槽窝;必要时缝合牙龈。 5. 固定和调颌,防止咬合创伤和牙合 力过大。 【术后处理】

1. 检查再植牙的牢固程度,随时加固或调牙合 。 2. 保持口腔清洁。

3. 根据情况可考虑应用抗生素。 4. 术后6-8d拆线。

5. 术后定期拍摄X线检查。 【主要并发症】

1. 牙周炎、深盲袋、骨吸收、牙脱落。 2. 再植牙吸收。 【预后判断标准】

1. 疼痛小时,没有感染,不松动,牙功能正常,牙龈附着正常,X线片示牙根无异常透射影,行使功能5年以上。

2. 再植后1年内X线片上看不到牙根的吸收。

二、牙种植外科手术

种植义齿是由种植体和种植体所支持的上部义齿共同组成的一种修复体,是将人工材料制成的种植体以外科手术方法植入失牙区的颌骨内或骨膜下,然后在穿过牙槽嵴黏膜的种植基桩上制作并完成义齿。种植义齿技术是一种重要的牙齿美容修复技术。

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【适应证】

1. 身体健康、口腔卫生好、要求种植牙美容并能按时检查复诊者。 2. 个别缺牙、部分缺牙种植床骨质及缺牙间隙正常。 3. 全口牙缺失,牙槽嵴严重萎缩吸收。 4. 部分或全颌缺损植骨后。 【禁忌证】

1. 有全身性疾病,如心血管疾病、糖尿病、肾病、代谢障碍等全身情况差,不能耐受拔牙等手术者。

2. 颌骨骨质疏松症或骨硬化症。 3. 颌骨内有病变,有良、恶性肿瘤。 4. 严重错牙合 ,牙重度磨耗,有不良咬合习惯者。 5. 口腔卫生差,吸烟者。

6. 上中切牙间隙不宜选择种植。

7. 牙槽骨严重吸收,剩余骨不足以支持种植体者。

8. 缺牙间隙小,牙间距离短,手术易损伤邻牙及周围组织使种植失败。 9. 精神紧张,不能与医师合作者。

10.心理状况不稳定,或生理及心理压力较重者。 【术前准备】 1. 清洁口腔。 2. 美学设计。

(1) 确定种植部位。 (2) 种植体数目。 (3) 手术方式。 (4) 修复方式。

3. 取口腔诊断模型,在模型上预制定位、定向导板。 4. 选择种植体、种植器械及种植机,消毒备用。 【手术操作要点】 1. 常规消毒铺巾。

2. 局部浸润麻醉或阻滞麻醉,也可采用经鼻气管插管全麻。

3. 切开翻瓣。种植区唇颊侧或舌腭侧黏膜切开翻瓣,暴露牙槽骨,根据引导模板,高速钻控温制备种植窝。 4. 种植体植入。低速钻控温植入种植体,使其稳固就位。多枚种植体植入需互相平行,就位道一致。

5. 二期法第1次手术毕伤口应严密缝合,第2次手术毕可种植体基桩环抱缝合。 【术后处理】

1. 保持口腔清洁。

2. 根据情况可考虑应用抗生素。 3. 术后7-10d拆线。

4. 术后过渡义齿基托组织面需缓冲。

5. 第1次术后4-6个月,拍摄X线片检查证实已完成骨结合才能进行第2次基桩安接术,第2次术后1周方可取模制作义齿。 【主要并发症】 1. 伤口感染。

2. 种植体松动、脱落。

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3. 组织穿孔。 4. 牙龈炎症。

5. 进行性边缘性骨吸收。 6. 种植体折断。

三、牙种植修复术

【操作要点】

1. 种植义齿修复前的检查和准备。

(1) 种植体与周围骨组织发生良好骨性愈合的标准如下: ① 基台与植入体不松动,叩击声清脆。

② X线片检查:种植体周围骨组织完整,骨组织与植入体间无射透层。

③ 临床检查:龈缘无眼症充血,龈袋深度及龈沟液正常,种植体颈部上层组织附着牢固。种植体固位良好,任何方向均未扪及活动度。

④ 种植体在牙弓上的位置正常,不影响义齿的制作、去戴及口内无软组织损伤。 (2) 美学设计。 2. 印模和模型 3. 正中关系记录。 4. 排牙。

5. 制作义齿金属支架。 6. 试支架。

7. 完成种植义齿。

8. 种植义齿的试戴与固定。

【前牙种植义齿的美容修复要点】 1. 前牙人工种植修复前的美容考虑。 2. 骨缺损的处理。

3. 种植体的选择和植入。

4. 软组织的美观修复。进行种植修复美容时,尤其要考虑牙龈的美观问题。很多时候需要增加软组织来获得美观的种植义齿。增加软组织的方法有: (1) 严重的牙龈缺损可采用覆盖移植法。

(2) 中度垂直缺损或水平缺损可应用软组织移植技术。

(3) 如仅为水平缺损,则通过自体表皮下通道进行结缔组织移植。

(4) 对轻中度的软组织缺损,可在种植二期手术时,采用斜向的腭侧水平切口获得皮下组织蒂。

(5) 义齿的美观修复。 【主要并发症】

1. 材料因素造成的失败。 2. 发音受损。 3. 欠美观。

4. 不良的社会心理反应。 5. 现有义齿的作用降低。

6. 患者无法适应种植体支持的义齿。

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第十四节

粘结铸造固定桥美容修复技术

粘结固定桥是利用酸蚀、粘结技术将固定桥直接粘结于基牙上的一种固定义齿,又称马里兰桥,具有磨除牙体组织少、不显露或少显露金属、较美观舒适而且容易改换成其他修复设计等优点,所以是一种较好的美容修复技术。

【适应证】

粘结固定桥的适用范围较广,一般凡可以行常规固定桥修复者均可以制作粘结固定桥。 【禁忌证】

1. 口腔卫生极差而且不能坚持及时复诊者。 2. 龋病活跃性强而且不能坚持定期复诊者。 3. 缺牙间隙过长者。 4. 游离端缺牙者。 5. 深覆牙合 有明显咬合创伤,调牙合 不足以纠正过大牙合 力者。 【操作要点】 1. 术前准备。 2. 基牙预备。 3. 印模。

4. 按常规制作固定体和桥体。 5. 美学试戴。 6. 粘结固定

(1) 基牙牙体表面的特殊处理: ① 清洁基牙牙面。 ② 酸蚀基牙粘结面。

(2) 对固定体粘结处的特殊处理方法: ① 失晶粗化法粗化金属表面。

② 喷砂粗化、化学处理或氧化处理使表面极化。 【影响修复效果的因素】

1. 固位体的粘结面积越大,效果越好。 2. 基牙稳固者,修复效果好。 3. 牙合 力小,咬合关系正常者,修复效果好。 4. 化学偶联剂不相匹配影响修复效果。

5. 基牙、固位体粘结面处理不当影响修复效果。 【并发症】

1. 桥体与基牙粘结面折裂。 2. 基牙冷热过敏。 3. 龈炎。

4. 基牙继发性龋。

5. 桥体唇面磨损或缺损。 6. 金属翼板脱粘。

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第十五节

柔性义龈美容修复技术

柔性义龈是用热固化橡胶材料制作柔性假牙龈来修复因牙龈退缩而造成的牙间隙的一种牙齿美容术。

【适应证】

1. 各种原因所致的牙龈退缩、牙根外露、龈间隙增大者。 2. 龈间隙过大,影响发音者。

3. 种植义齿基桩周围的义龈修复(龈垫)。 4. 能保持良好口腔卫生者。 【禁忌证】

1. 牙周治疗未完成者。 2. 口腔卫生状况较差者。 3. 龋患率较高者。 4. 重度吸烟者。

5. 对硅橡胶类材料过敏者。 【操作要点】 1. 术前准备。

2. 口腔检查及初步设计、选牙色。 3. 取印模。 4. 蜡型制作。 5. 装盒。 6. 冲蜡。 7. 充填硅胶。 8. 热处理。 9. 修整。

10.二次热处理 11.试戴。 【注意事项】

1. 注意适应证的选择。

2. 对称性增减义龈修复范围。 3. 注意印模完好。

4. 义龈完成后注意消除异味。

5. 备用义龈可存放于小瓶或其他容器内。 6. 注意义龈变色问题。

第十六节

隐形义齿美容修复技术

隐形义齿,又称弹性义齿,是利用一种与牙龈颜色协调的弹性树脂代替可摘局部义齿中的金属卡环,以恢复牙齿的功能和美观的一种美容技术。

【优点】

1. 形态逼真。 2. 义齿固位可靠。

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3. 可缓冲缺牙区的咀嚼压力,并有生理性的按摩作用。 4. 利于保护基牙、牙龈和保洁。 【适应证】

1. 个别前牙缺失,临床牙冠长,基牙倒凹大者。 2. 多个牙间隙缺失,并有共同就位道者。 3. 牙列缺失,而牙槽嵴条件较好者。

4. 可用于制作义龈、实物防塞器、牙周夹板、牙合 垫和矫正保持器等。 【禁忌证】

基本上同常规可摘义齿的情况。 【操作要点】

1. 隐形义齿的组件设计 (1) 卡环。 (2) 基托。 (3) 支托。 (4) 人造牙。 2. 隐形义齿的制作 (1) 工作模制备。 (2) 制作蜡型。 (3) 装下层型盒。 (4) 安装注道。 (5) 装上层型盒。 (6) 去蜡。 (7) 灌注树脂。 (8) 打磨抛光。 (9) 试戴调改。 【并发症】

1. 戴牙后疼痛。 2. 义齿固位不良。 3. 义齿咀嚼功能差。 4. 摘戴困难。 5. 实物嵌塞。 6. 发音不清。 7. 咬颊或咬舌。 8. 恶心和唾液增多。

9. 咀嚼肌和颞下颌关节不适。 10.戴义齿后患者美观不满意。 11.人工牙脱落或折断。

第十七节

套筒冠义齿美容修复技术

套筒冠义齿是利用套筒冠固位体固位的一类口腔修复体。套筒冠固位体由内冠和外冠组成,内冠粘固在基牙上,外冠与义齿其他组成部分连接成整体,以恢复牙齿的功能和美观。

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【优缺点】 1. 优点

(1) 固位力可调节。 (2) 固位力能够保持。

(3) 可保护基牙牙体组织健康。 (4) 能保护牙周组织的健康。 (5) 有利于牙槽骨的健康。 (6) 可恢复咬合关系,改善牙合 关系 (7) 有牙周夹板的作用。

(8) 异物感、味觉障碍、发音障碍减少。 (9) 可满足患者的审美心理。 (10) 义齿制作和修理较方便。 2. 缺点

(1) 牙体预备量大

(2) 内冠颈缘处如不注意清洁,容易引起牙周病。 (3) 义齿取下后,内冠金属暴露,影响审美。 (4) 义齿取下后,明显影响咬合、咀嚼、发音。

(5) 前牙区固位体唇颊面颈缘处有一条金属边缘线暴露。 【适应证】

1. 多数牙缺失,少数牙余留的牙列缺损。 2. 牙合 重建修复。

3. 牙周病及牙周病伴牙列缺损修复。 4. 先天性牙列缺损修复。

5. 颌骨部分切除伴牙列缺损修复。 【禁忌证】

1. 牙周病未治疗者。

2. 伸长、倾斜的有活力牙,不宜做该修复的基牙。 3. 年轻的恒牙。

4. 义齿承托区及其周围组织有黏膜疾患或其他疾病,不利于义齿戴入者。 5. 龋患未经治疗者。 【操作要点】

1. 修复前检查、诊断 (1) 余留牙情况。 (2) 基牙的牙周情况。 (3) 基牙牙体组织。

(4) 缺牙区牙槽骨被覆盖的软组织。

(5) 缺牙区牙槽骨的骨质密度,牙槽骨的吸收情况和有否足够的高度,以及牙槽骨的形态。

(6) 咬合情况。 2. 修复前准备

(1) 口腔内准备。

(2) 诊断模型和临时义齿准备。 3. 基牙预备。 4. 临时义齿修复

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5. 制作工作模型。 6. 内冠制作。 7. 内冠的粘固。 8. 临时义齿修整。 9. 修复体制作 (1) 模型准备。

(2) 外冠基底层和支架蜡型制作。 (3) 金属外冠基底层和支架制作。

(4) 外冠唇颊面塑性、人工排列、基托蜡型。 (5) 圆锥形套管冠义齿完成 10.戴入口内,检查义齿。 11.完成修复。 【并发症】 1. 牙面折裂。 2. 义齿折断。 3. 基牙病变。 (1) 基牙疼痛。 (2) 牙周组织炎症。 (3) 牙髓炎症。 (4) 龋病。

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第3章 牙周美容技术操作

第一节

牙龈切除术

牙龈切除术是切除肥大增生的牙龈组织或病理性牙周袋的手术方法。它将牙龈修整,恢复牙龈的生理性外形,以利于菌斑控制和牙龈美观。

【适应证】

1.牙龈肥大或增生,临床牙冠显得矮短,有假性牙周袋存在者,或龈边缘肥厚,龈乳头圆钝,龈边缘不整齐,经基础治疗后,未能恢复正常形态者。 2.制备洞型或冠桥修复时牙龈覆盖过多而影响美容修复者。 【禁忌证】

1. 牙周袋过深,超过膜龈联合时。 2. 伴有骨下袋而需做骨修整时。 【操作要点】

1. 常规消毒麻醉。

2. 标记。根据袋的深度在牙龈表面做出溢血点,然后做出切口标记线。

3. 角形切口,按标记线切开后,切口如发现剩余的软组织以及不整齐的牙龈边缘应剪去,残留的肉芽和牙石要彻底刮除。

4. 修刮创面,将创缘与邻接的牙龈表面刮成过渡的组织面。 5. 用盐水冲洗,压迫止血。 6. 最后做牙周塞治。

牙龈切除术也可采用电刀切龈法。 【术后注意事项】

1. 术后24h内半流质或软食,暂时不刷牙,可含漱。

2. 如术后1周内牙周塞治剂脱落,可用1%过氧化氢和生理盐水清洗创面,并重上塞治剂。

3. 1周后拆除塞治剂,可按摩牙龈3-5d以加速创面愈合。 4. 术后牙根暴露而发生牙本质过敏者,可做脱敏治疗。

第二节

牙龈成形术

牙龈成形术是对牙周炎或其他原因所致的牙龈形态异常的修整与重建。

【适应证】

1. 牙龈形态异常。不规则的增生或退缩。 2. 龈线位置与邻牙不协调。

3. 龈裂、缘突及龈乳头外形不规则。 【禁忌证】

1. 急性炎症期。 2. 重度牙龈退缩。

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3. 牙槽骨的形态异常,须作骨手术者。 【操作要点】

1. 消毒、麻醉同牙龈切除术。

2. 测量牙龈厚度。用牙周刻度探针刺入牙龈,直达骨面,以确定软组织厚度。

3. 修整牙龈。根据牙龈厚度,取30°角或更小的角度,做外斜切口,使龈缘形成斜向外的短斜面,再将龈乳头修整成稍凹状,符合生理外形。

4. 清创和止血。仔细检查每个牙面有无牙石,残留病变组织,进一步修整及刮治后,冲洗,压迫止血。 5. 牙周塞治。 【术后注意事项】 同牙龈切除术。

第三节

牙冠延长术

牙冠延长术是为临床治疗或美观需要而使临床牙冠增长的手术治疗。 【适应证】

1. 龈下龋洞,龈组织覆盖较多,影响美容修复。 2. 根折断而位于龈下,但尚可保留的牙齿。

3. 牙龈增生肥大,形成假性牙周袋,经基础治疗无效者。 4. 临床牙冠过短,影响美观或功能者。 【操作要点】

1. 测量龈沟深度,预测术后临床牙可能增长的长度,并决定手术方法。

(1) 如有假性牙周袋并有足够的附着龈宽度可选做切龈术,外斜切口止于袋底,但有可能复发

(2) 如龈沟不深,牙冠延长术中应去除部分支持骨。

(3) 龈沟不深,且附着龈不宽时应做根向复位瓣术+牙槽嵴去除术。 2. 术中、术后注意事项

(1) 牙龈愈合后的形态应与邻牙协调相近。

(2) 手术暴露了过多的牙体组织后应立即或及时进行牙体治疗和牙冠修复,或先做暂时冠,压缩牙龈组织,防止复发。

第四节 牙周骨手术

牙周骨手术是处理牙周炎症引起的牙槽骨畸形的有效方法。

一、骨整形术

处理因牙槽骨畸形而影响了牙龈的生理外形者,可用骨整形,术后并不降低骨的高度。 【适应证】

1. 骨边缘线断续而且不整齐。

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2. 骨边缘线突出而且形成笔架状。 3. 颊舌骨形成岩石状的骨隆突。 【手术方法】

本术须与龈翻瓣术联合进行。 1. 常规消毒,麻醉。

2. 翻瓣,暴露骨形态,然后去除畸形骨隆突及骨边缘。 3. 磨骨质时,应以冷的生理盐水不断冲洗以免产热。

4. 按规定手术步骤清创,平整根面,酸处理,缝合,盐水贴敷片刻,牙周塞治。

二、骨切除术

骨切除术是审慎地牺牲一些骨质以降低牙槽骨的高度,使牙槽骨形成接近正常的解剖形态,从而有利于龈瓣的贴附及组织再生。

【适应证】

1. 浅的一壁骨袋。

2. 浅的二壁骨袋,即凹坑袋,邻面有颊舌侧2个骨壁剩留,这种骨袋再生的可能性较小,通常可切除小的1个骨壁甚至2个前骨壁,形成骨斜坡以利洁净。 【手术方法】

1. 常规消毒,麻醉。

2. 做内斜切口,翻起龈瓣暴露骨毁坏区。必要时添加纵行切口。 3. 刮除骨袋内的肉芽组织,暴露出骨袋形态。

4. 用砂石或圆钻快速地磨去有碍而无用的浅一壁骨袋。浅二壁凹坑袋可去除二壁,也可去除小的一壁。

5. 磨骨时用冷的生理盐水冲洗,骨切除完成后,再冲洗以去除碎屑。

三、骨移植术

利用骨组织或骨组织替代材料植入牙槽骨缺损区,以修复牙槽骨缺损。 【适应证】

主要适用于两壁及三壁骨袋。 【移植方法】 1. 器械准备。 2. 材料准备。 (1) 冻干骨。 (2) 自体骨。 3. 手术方法

(1) 常规消毒,麻醉。 (2) 受骨区的切口设计。

(3) 翻瓣暴露骨袋,刮净骨袋内的病理性组织及结合上皮,除净龈下牙石,平整根面,明确袋的形态及骨壁数目,根面酸处理,然后将术野冲洗干净。

(4) 准备受骨区。

(5) 将准备好的移植材料送入受骨区的骨袋。

(6) 亦可用自体骨移植,一般选用上颌结节或缺牙区的牙槽嵴或利用两壁骨袋旁的缺牙区域。

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(7) 检查龈瓣,缝合。

(8) 无出血的情况下进行牙周塞治。

4.术后护理 术后5-7d拆线,更换塞治剂至痊愈。

第五节 根尖向复位瓣术

根尖向复位瓣术适用于需做翻瓣术及骨成形术,但术区附着龈过窄,系带附着位置接近龈缘,或根分叉受累而不宜原位复瓣的病例。 【手术操作要点】 1. 常规消毒麻醉。

2. 做内斜切口,去除牙周袋内壁的病变组织。 3. 两侧做垂直切口,切口应延长到牙槽黏膜区,切透骨膜,翻起全厚瓣,露出骨损害。 4. 彻底去除病变肉芽组织,平整根面,修整骨形态。

5. 将粘骨膜推向根尖方向,使前庭沟得到加深,龈瓣的边缘恰恰盖着唇侧骨嵴。 6. 垂直切口处可做间接缝合,龈边缘可根据需要做间断缝合或悬吊缝合,使龈瓣得到固定。

7. 止血后牙周塞治。

第六节 侧向转位瓣术

侧向转位瓣术是用带蒂的软组织瓣修复单个牙的根面裸露区的手术方法。 【适应证】

1. 个别牙的唇侧龈裂,部分牙根暴露但面积较窄者。 2. 有深的单面牙周袋存在,甚至进入牙槽黏膜,牙周袋内壁及上皮已损坏面不能利用,切除后根面又缺乏龈瓣覆盖者。

3. 邻牙的牙周组织良好,可供给龈粘骨膜瓣者。 【手术方法】

1. 常规消毒,麻醉。

2. 收区切口。退缩牙龈边缘做V字形切口,将暴露根面周围的不良龈组织切除,注意接收转来龈瓣的关闭线一定要在健康的组织上。

3. 刮治及根面平整。将V字形切口内侧的龈组织及病变上皮和肉芽组织刮除,并将根面沉积物与病变牙骨质刮净,进行根面平整,形成新鲜的牙骨质表面,冲洗,干燥。 4. 供区切口。在距受区V字形切口1或2牙处,约2倍于受区宽度的唇颊侧的龈组织上,从龈缘想膜龈方向做垂直切口,切口长度以是否能完全覆盖暴露的根面而定,切口深度可达骨膜上火骨面,另外,从V字形切口至垂直切口起端做内斜切口,由龈缘至牙槽嵴顶水平切开。

5. 组织分离。由垂直切口处插入骨膜分离器,翻起黏骨膜瓣。 6. 将已松弛的瓣向侧方受区推动移位,覆盖于暴露的根面。

7. 缝合。将移动瓣的侧缘与受区预备好的龈缘斜面对端缝合固定。 8. 将受瓣区及供瓣区同时做牙周塞治。

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【术后处理】

术后5-7d复诊,拆线,更换塞治剂至痊愈。

第七节 双乳头瓣移位术

当有牙龈退缩、牙根暴露时,利用患区相邻近远中两侧的健康牙龈及龈乳头,使之分别向远近中移动覆盖患牙牙根的手术称双乳头瓣移位术。本法可减少骨的暴露,减轻组织瓣的张力。充分覆盖暴露的牙根。

【手术方法】

1. 受区的切口同侧向转位瓣术,沿退缩龈缘做V字形切除,并形成短的外斜面。 2. 刮去切除的软组织并做根面平整。

3. 供区切口。将术区有龈退缩的相邻两侧含龈乳头部位的牙龈,从龈缘至牙槽黏膜方向垂直切开,直达骨面。从垂直切口的起始部至V形切口间的游离龈,由龈缘至牙槽嵴顶方向做内斜切口。

4. 剥离龈瓣。用骨膜分离器由龈乳头向骨面做全厚瓣的剥离。 5. 清洁供区牙面,修整受区过突的牙根表面。

6. 瓣的移位滑动。将患牙两侧已分离松弛的带蒂的瓣分别向近远中方向滑动,使在患牙根正中拉拢对位缝合固定,最好使两侧瓣的接触缘形成短斜面,龈缘过厚,外形不理想,可以进行形态修整,使之符合正常生理解剖外形。 7. 将对位良好、外形适当的两侧瓣缝合固定,然后上牙周塞治剂。 【术后处理】

术后5-7d复诊,拆线,更换塞治剂,至伤口全院。

第八节 冠向复位瓣术

该手术是利用带蒂瓣向冠方推移,以覆盖或修复前牙的牙龈退缩、牙根暴露的手术方法。 【手术方法】

1. 切口。在退缩区的两侧做垂直切口。其近远中范围应包括全部修复区,在龈缘做袋内切口,直达牙槽嵴顶

2. 翻瓣。用骨膜分离器分离并翻起黏骨膜瓣。

3. 在黏骨膜瓣的根方切断骨膜,以松懈组织,缓解张力。

4. 将分离松解后的瓣向冠推移至牙颈部,靠近釉牙骨质界,覆盖裸露的牙根。 5. 缝合。移位固定后缝合软组织瓣,并上牙周塞治剂。 【术后处理】

术后1周拆线,换敷牙周塞治剂,再坚持1-2周。

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第九节 自体游离龈瓣移植术

自体游离龈瓣移植术是利用患者自身牙龈或黏膜组织进行游离移植,以增加附着龈宽度或修复牙龈退缩的手术。

【适应证】

1. 附着龈宽度不足或消失。 2. 牙龈退缩,牙根裸露。 3. 口腔前庭太浅。

4. 牙周袋过深,接近或达膜龈联合者。 5. 系带附着异常。 【手术方法】 1. 受区准备。在局麻下,准确检查并记录牙周袋的深度、附着龈宽度、牙龈退缩程度、确定受植区范围、部位及牙数。若受区无附着龈,可沿受区两侧做垂直切口,沿龈缘做内斜切口,若受区有附着龈,沿膜龈联合线做水平切口,并向根方做垂直切口。 2. 剥离受区黏膜瓣,保留骨膜于骨面,修整创面组织,黏膜瓣缝合于根方骨膜。 3. 供区取材。通常供瓣区选用上腭前磨牙(双尖牙)及第一磨牙距龈缘2-3mm的硬腭黏膜,或临近无牙区的龈组织。根据受区范围剪一同等大小之消毒锡箔,置于供区,依其大小及形态,在局麻下切去龈瓣或黏膜瓣。瓣的厚度通常为1.0-1.5mm。 4. 移植和固定。将切取并修整好的龈瓣尽快移植到受植区,瓣应略小于受区,准确复位后,将其缝合固定,再上牙周塞治剂。 【术后处理】

1. 术后1周拆线,并重上1次塞治剂。 2. 治疗患者保持口腔清洁卫生。

第十节 牙周引导组织再生术

牙周引导组织再生术(GTR)是利用生物膜阻止龈沟上皮的根面生长,造成空间,诱导具有牙周组织再生潜力的牙周膜细胞冠向移动并生长分化,形成新生的牙周组织。

【适应证】

1. 垂直性骨吸收形成的骨缺损。 2. 根分叉病变。 【操作要点】

GTR并不是用来牙周炎症,而是对牙周炎症造成的牙周组织缺损进行修复的一种治疗方法,因此,在进行GTR手术前,患者必须完成系统的牙周炎基础治疗。

1. 暴露缺损区。沿龈缘或龈沟做水平切口,切透黏骨膜,在缺损区远中或近中至少相隔一个牙的部位做垂直松弛切口,翻开黏骨膜瓣,暴露缺损区。 2. 清创。清除袋内壁上皮、缺损区肉芽组织及进行彻底的根面平整。

3. 放置并固定膜。根据缺损部位的形态、大小修整屏障膜,使膜在牙颈部能很好地与根面贴合,能完全覆盖缺损区并改过牙槽骨边缘至少3mm。一般情况用悬吊缝合固定膜。

4. 黏骨膜的复位与缝合。黏骨膜瓣应盖过膜2-3mm,如有困难,可在黏骨膜瓣的根方

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切断骨膜,使黏骨膜能很好地冠向复位覆盖屏障膜。为了较好地关闭创口,建议在缺损区近远中邻面做垂直褥式缝合。

5. 上塞治剂保护创口。术后给予0.2%氯已定漱口4-6周,口服抗生素1周。术后1周复诊可酌情敷塞治剂1次,拆线可在术后2周进行。术后4周内不要用探针探查牙周袋。

【影响GTR效果的因素】 1. 病人因素。 2. 缺损区的结构。 3. 技术因素。

第十一节 牙槽骨修整术

一、牙槽骨嵴修整术

【适应证】

1. 影响镶牙的尖锐的牙槽骨尖、骨嵴。 2. 前牙根方颌骨前突影响美观。 3. 即刻义齿修复。 4. 上下颌间隙过小。 【禁忌证】

1. 全身情况差,或有器质性病变未愈者。 2. 精神情绪不稳定,有精神心理障碍者。 【操作要点】

1. 一般采用局部浸润麻醉,也可采用阻滞麻醉。 2. 常规消毒铺巾。

3. 切口。牙槽骨局部黏膜做弧形或L形切口,修整范围较大时做梯形切口,骨膜下翻瓣,显露骨隆起。

4. 去除过锐骨尖或骨突起,并修平牙槽骨表面。 5. 龈瓣复位后,缝合切口。 【术后处理】

1. 保持口腔清洁。 2. 术后流食或软食。

3. 骨修整范围广者适当给予抗生素。 4. 术后6-8d拆线。

二、牙槽嵴增高术

【适应证】 1. 无牙牙合 ,牙槽嵴萎缩明显,影响义齿固位者。 2. 牙槽嵴低锐,不能承担咀嚼功能者。 3. 牙槽嵴表面黏膜条件良好。 【术前准备】

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1. 取口内研究模型,制备术后固定护板和夹板。 2. 准备自体骨火人工骨植入材料,并相应塑形。 【操作要点】

1. 局部浸润麻醉或阻滞麻醉。 2. 常规消毒铺巾。

3. 切口。按材料类型大小,可采用前庭沟切口或牙槽嵴隧道切口,骨膜下分离牙槽嵴顶,形成相应腔穴。

4. 植入相应植骨材料,确认无误后,缝合入路切口。 5. 放置树脂护板和夹板。 【术后处理】

1. 注意保持口腔卫生,消毒含漱剂漱口。 2. 全身应用抗生素。 3. 术后6-8d拆线。

4. 术后2-3个月做义齿修复。 【并发症】 1. 伤口裂开。 2. 伤口感染。 3. 牙槽嵴吸收。

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第4章 牙牙合畸形美容矫治技术

第一节 机械性活动矫治器矫治技术

机械性活动矫治器是一种患者可自行摘戴的矫治装置,它可以为产生特定的牙齿移动而进行各种具体设计,是一种较为简单而灵活多变的矫治器。原则上如果利用活动矫治器能达到预定目标,可尽量选用。

【适应证】

1. 纠正口腔不良习惯。

2. 牙齿近远中火颊舌向错位。 3. 个别牙的倾斜或扭转。 4. 前牙反牙合 、后牙反牙合 。

5. 上下牙列轻度拥挤、牙弓狭窄。 6. 深覆牙合 。

7. 下颌后缩、深覆盖。

8. 上前牙唇向位引起的深覆盖,骨性的近远中关系无明显不调者。 9. 与固定矫治器联合使用。 10.矫治后的保持。

11.成人小范围牙移动的正畸治疗。 12.错牙合 伴牙釉质严重发育不良或严重氟斑牙可慎重选用固定矫治器。 【操作要点】

1. 取印模,灌注记存模型和工作模型。 2. 必要时记录牙合 关系。

3. 设计及制作矫治器。按固位、加力和连接3部分进行设计制作。 4. 初戴。检查矫治器质量、医嘱。

5. 复诊。了解待用及遵医嘱情况、检查矫治进展、调整矫治器。 6. 保持。

第二节 功能性矫治器矫治技术

功能性矫治器是一种活动矫治器,本身不产生任何机械力,而是通过调整口面肌肉功能或通过咬合力引导及促进正常的牙合 发育和颅面生长,矫治形成中的错牙合 畸形。

【适应证】

1. 主要适用于口面肌肉功能异常所引起的功能性错牙合 畸形。早期骨性错颌,当促进正常的口面功能活动能为颅面谷骨骼和牙颌发育提供游离环境时也可使用。 2. 从青春期前1-2年开始,并持续整个迸发期。 3. 矫治矢状不调,如安格尔错颌分类的Ⅱ类错牙合 、Ⅲ类错牙合 ;矫治垂直不调,如深覆牙合 、开牙合 ;矫治后牙弓的宽度不调。 【操作要点】

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1. 设计。选择功能性矫治器类型,决定咬合重建标准,对预后进行评估。 2. 取精确印模,灌注记存模型及工作模型。 3. 咬合重建 (1) 矢状方向 ① Ⅱ类错牙合 :下颌前移量以磨牙达中性关系为准,一般为3-5mm。必要时分次前移。 ② Ⅲ类错牙合 :下颌尽量后移至上下前牙对刃。 ③ Ⅰ类错牙合 :下颌少量前移2mm左右。 (2) 垂直方向 ① Ⅱ类错牙合 :下颌垂直打开应超过息止颌间隙。与前移量之和为8-10mm。 ② Ⅲ类错牙合 :垂直打开以解除前牙反牙合 为准。 ③ Ⅰ类错牙合 :下颌垂直打开应超过息止颌间隙 (3) 水平方向:牙合 干扰和不良习惯等功能因素所致下颌偏斜者,应使上下中线保持一致。

4. 技工室制作。模型修整、上牙合 架、铺缓冲蜡、弯制钢丝、铺自凝塑胶、打磨、抛光、矫治器评价。 5. 临床治疗

(1) 初戴。检查矫治器质量、医嘱。

(2) 试戴期。从每日2h逐日增加戴用时间,1-2周复诊,做局部修改调整。 (3) 矫治期。全天或夜间戴用,至少每日12h。 (4) 每月复诊,检查戴用情况及牙合 的改变,调整弓丝及选磨基托牙面。 (5) 保持器。一般不需要保持。颌骨关系严重不调者,可保持3-6个月。

6. 后期治疗。治疗完成后常常使用固定矫治器排齐牙列,完成精细的咬合调整。 【常用的功能矫治器】 1. 肌激动器适应证 (1) Ⅱ类1分类错牙合

(2) Ⅱ类2分类错牙合

(3) Ⅲ类错牙合 非骨性或轻度骨性下颌前突,但下颌能后退者。 2. 生物调节器适应证

(1) 标准型:用于Ⅱ类1分类错牙合 ,矫正舌后位;用于Ⅰ类错牙合 ,扩大牙弓宽度。 (2) Ⅲ类型:用于前牙开牙合 及舌前位。 (3) 开牙合 型:用于前牙开牙合 或后牙开牙合 ,也可用于颞下颌关节功能紊乱症。 3. 双颌垫矫治器适应证

(1) 替牙期和恒牙早期Ⅱ类错牙合 。 (2) 部分Ⅲ类错牙合 。 4. 功能调节器(FR)适应证 (1) FR2:Ⅱ类及Ⅰ类错牙合 。

(2) FR3:Ⅲ类以上颌骨及牙弓发育不足为特征者。

第三节 固定矫治技术

固定矫治技术种类繁多,每种矫治器均包括托槽、磨牙带环、矫治弓丝和附件4部分。此类矫治器患者不能自行取戴,具有固位良好,支持充分,有利于多数牙齿的移动,能有效

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地控制牙齿移动方向等特点。

【适应证】

1. 功能性矫治器治疗完成后的后期治疗。 2. 恒牙早起各类错牙合 畸形的综合性矫治。 3. 成人各类错牙合 畸形的综合性矫治 4. 正颌外科病例术前术后正畸。 【操作要点】

1. 分牙。常用铜丝、分牙簧、弹性塑圈,一般3-7d。

2. 选择并粘着带环。常用磷酸锌粘固剂或玻璃离子粘固剂粘着。

3. 粘着托槽。清洁牙冠表面,酸蚀局部牙面15-20s,冲洗吹干,用釉质粘结剂按各技术要求正确粘着。

4. 选择、弯制及结扎弓丝。常用不锈钢结扎丝或弹力结扎圈结扎。 5. 必要时使用横腭杆或Nance弓。

6. 必要时与口外力如口外唇弓、头帽颏兜、前方牵引矫治器联用。 7. 必要时铺以活动矫治器,如平面导板、牙合 垫式矫治器。

8. 复诊。4-6周复诊1次,了解遵医嘱情况、口腔卫生状况;检查矫治进展;按各阶段治疗目标进行调整。

9. 取印模,做保持器。常用Hawley保持器、前牙舌侧固定保持器、牙齿正位器。 10. 去除全部托槽带环,抛光牙面,戴保持器。 【常用固定矫治技术】 1. 方丝弓矫治技术特点

(1) 使用方型槽沟与方丝有效控制牙齿三维方向的移动。 (2) 弓丝有3个常规序列弯曲。

(3) 常以弓丝上弯制的各种弹簧曲做加力单位。 (4) 按3个阶段进行调整。 ① 排齐牙齿与牙弓平整。

② 关闭拔牙间隙与调整磨牙关系。 ③ 精细调整。

2. 直丝弓矫治技术特点

(1) 强调托槽粘着位置的精确,以临床冠中心确定托槽位置。 (2) 常将第二磨牙包括于矫治器内。

(3) 正确应用高弹性弓丝;很少弯制弓丝;弓丝更换较少。 (4) 使用弱而持久的矫治力。 (5) 强调牙弓完全整平。

(6) 使用尖牙向后结扎和末端弓丝回弯,防止前牙唇倾与覆牙合 加深。 (7) 提倡使用滑动法关闭拔牙间隙。 (8) 按3个阶段进行调整。

① 治疗早期:排齐牙列与整平牙弓。

② 治疗中期:关闭拔牙间隙或牙弓剩余间隙的同时,矫正磨牙关系,建立正常前牙覆盖。

③ 治疗后期:完善牙齿位置与牙合 关系。 3. Begg细丝矫治技术特点

(1) 使用Begg托槽和差动力原理,控制支抗。

(2) 使用细丝轻力,容许牙齿倾斜移动。先倾斜牙冠,后倾斜牙根,避免使用口外

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支抗。

(3) 广泛使用圆形奥丝。 (4) 一般按3期进行调整:

① 第1期:打开咬合,前牙达对刃关系;解除前牙拥挤或关闭前牙间隙;矫正磨牙反牙合 及锁牙合 。

② 第2期:保持第1期取得的矫治效果;关闭后牙间隙;调整磨牙关系至Ⅰ类牙合 关系;矫正旋转的前磨牙;矫正前磨牙垂直向的位置不调。

③ 第3期:保持第

1、2期取得的矫治效果;获得所有牙齿理想的倾斜度和轴倾度。 4. 亚历山大矫治技术特点

(1) 具有直丝弓矫治技术的基本特点。 (2) 根据牙齿的字形调整学说

(3) 使用亚历山大0.018英寸槽沟系统,对不同牙齿设计了不同类型托槽。 (4) 使用亚历山大标准弓形。

(5) 80%的患者需要戴用口外头颈支抗装置。 5. Tweed-Merrifield方丝弓矫治技术特点 (1) 采用0.022系统方丝弓丝。 (2) 弓丝只采用不锈钢方形弓丝。 (3) 有顺序地安装矫治器。 (4) 有顺序地移动牙齿。 (5) 有顺序地预备下颌支抗。 (6) 使用方向性力。

(7) 按4个阶段进行调整: ① 牙列预备。 ② 牙列矫正。 ③ 牙列矫治完成。 ④ 牙列恢复。

6. 生物渐进矫治技术特点

(1) 使用0.018英寸槽沟系统标准方丝弓双翼托槽。 (2) 使用轻力,渐进性治疗。 (3) 牙弓分段,使用片段弓。

(4) 使用多用途弓打开咬合、控制前牙转矩。

(5) 尽量避免使用圆丝,自始至终控制牙齿的转矩。 (6) 合理使用骨皮质支抗。

(7) 下牙弓治疗先于上牙弓完成。 (8) 按4个阶段进行调整:

① 按各牙弓排齐牙齿,整平牙弓。 ② 远中移动尖牙与打开咬合同步进行。 ③ 内收前牙。 ④ 精细调整。

7.“2×4”矫治技术特点

(1) 适用于替牙期或恒牙早期前牙反颌、前牙深覆颌、前牙开颌以及需直立磨牙获得间隙者;0.018英寸槽沟系统标准方丝弓双翼托槽。 (2) 采用0.022英寸槽沟系统标准方丝弓托槽。 (3) 4个切牙和2个磨牙粘结托槽和带环。

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(4) 大多使用圆丝,不使用弹簧曲。 (5) 不使用腭杆舌弓,少用外弓。 8.舌侧矫治器技术特点 (1)相对适应证: ① 中切牙有间隙者。

② Ⅰ类错颌,前牙深覆颌,散在间隙或轻度拥挤者。 ③ Ⅱ类1分类错颌,下颌后缩,不拔牙者。

④ Ⅱ类错颌,上颌拔除第一前磨牙,下颌拔除第二前磨牙者。 ⑤ 轻度Ⅲ类错颌。

⑥ 轻度双颌前突,拔除4个第一前磨牙,不需强支抗控制者。 (2) 禁忌证:

① 前牙严重扭转者。 ② 高角前牙开颌者。 ③ 严重Ⅱ类错颌。 ④ 需严格支抗控制者。 ⑤ 临床牙冠过短者。 ⑥ 前牙多个修复体者。 ⑦ 牙周病者。

⑧ 急性颞颌关节紊乱综合征者。 (3) 特点:

① 托槽粘于牙体舌侧,是最理想的美观矫治器。 ② 采用间接粘结技术,保证托槽粘结的准确性。 ③ 第二磨牙长参与矫治。

④ 多用细而弹性好的弓丝,少用带曲弓丝;较多使用TMA弓丝。 ⑤ 使用牙弓形态模板图,保持正常的牙弓形态,理想弓丝呈蘑菇状。 ⑥ 前牙采用折叠结扎技术。

⑦ 治疗完成后,用正位器完成牙齿精确就位。

⑧ 按4期进行调整:整平跑去、排齐牙列,打开咬合,控制扭转;转矩控制;内收前牙,关闭间隙;完成调整。

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第四篇:临床护理技术操作规范-人工肛门护理

人工肛门护理

【目的】

1.保持人工肛门周围皮肤的清洁。

2.评估病人人工肛门的功能状况及心理接受程度。

3.帮助病人掌握护理人工肛门的方法。【用物准备】

治疗盘内置:造口袋、剪刀、造口尺寸表、纱布或棉球、弯盘、治疗碗及镊子、治疗巾及橡皮治疗巾、无菌生理盐水、手套。

【操作方法及程序】

1.评估病人,准备用物至病人床旁。

2.向病人解释,遮挡病人。

3.暴露造口部位,将所备之物置于易取处。

4.铺橡皮单及治疗巾于造口侧下方。

5.戴手套,将造口袋取下,置于弯盘中。

6.用镊子夹取盐水棉球,将造口处及周围皮肤擦拭干净。

7.以造口尺寸表测量造口大小。

8、在造口袋背面贴纸处依测得造口的尺寸大小剪洞。

9、撕去贴纸,将造口袋对准造口。

10、轻轻将造口袋紧密贴于腹部皮肤。

11.协助病人整理衣服并恢复舒适卧位。整理用物,洗手。

12.观察造口处及周围皮肤是否异常,排泄物性状、颜色、量。

【注意事项 】

1.向病人演示操作过程。

2.造口袋内容物于1/3满或有渗漏时应更换。

3.造口袋背面所剪的洞口尺寸应大于造口,预防造口处摩擦损伤。

4.造口袋紧密贴紧皮肤,以防排泄物渗漏。

5.若造口处肠段有回缩、脱出或皮肤异常等情况,应马上告知医生。

第五篇:《临床技术操作规范 病理学分册》(范文)

《临床技术操作规范•病理学分册》

第1章 总 则

一、为提高病理学诊断质量,促进临床工作,依据《中华人民共和国执 业医师法》精神,结合医院病理科工作的特点,制定本规范。

二、医院病理科和承担医院病理科任务的医学院校病理教研室的主要临 床任务是通过活体组织病理学检查(简称活检)、细胞病理学检查(简 称细胞学检查)和尸体剖检(简称尸检)等作出疾病的病理学诊断(或 称病理诊断)。具有一定规模的病理科,应积极开展教学、培训病理医 师和科学研究等项工作。

三、 病理学诊断是病理医师应用病理学知识、有关技术和个人专业实践 经验,对送检的患者标本(或称检材,包括活体组织、细胞和尸体等) 进行病理学检查,结合有关临床资料,通过分析、综合后,作出的关于 该标本病理变化性质的判断和具体疾病的诊断。病理学诊断为临床医师 确定疾病诊断、制定治疗方案、评估疾病预后和总结诊治疾病经验等提 供重要的、有时是决定性的依据,并在疾病预防,特别是传染病预防中 发挥重要作用。

四、病理学诊断报告书(或称病理诊断报告)是关于疾病诊断的重要医 学文书。当涉及医、患间医疗争议时,相关的病理学诊断报告书具有法 律意义。病理学诊断报告书应由具有执业资格的注册主治医师以上(含 主治医师)的病理医师签发。各医院可酌情准予条件适宜的高年资病理 科住院医师试行签署病理学诊断报告书。低年资病理科住院医师、病理 科进修医师和非病理学专业的医师不得签署病理学诊断报告书。

五、病理学检查是临床医师与病理医师为确立疾病诊断而进行的合作行 为,是有关临床科室与病理科之间特殊形式的会诊。临床医师和病理医 师双方皆应认真履行各自的义务和承担相应的责任。

六、病理学检查申请单是临床医师向病理医师发出的会诊邀请单。病理 学检查申请单的作用是:临床医师向病理医师传递关于患者的主要临床 信息(包括症状、体征、各种辅助检查结果和手术所见等)、诊断意向 和就具体病例对病理学检查提出的某些特殊要求,为进行病理学检查和 病理学诊断提供重要的参考资料或依据。病理学检查申请单是疾病诊治 过程中的有效医学文书,各项信息必须真实,应由主管患者的临床医师 亲自(或指导有关医师)逐项认真填写并签名。

七、临床医师应保证送检标本与相应的病理学检查申请单内容的真实性 和一致性,所送检材应具有病变代表性和可检查性,并应是标本的全 部。

八、患者或患者的授权人应向医师提供有关患者的真实信息(包括姓 名、性别、年龄、病史和可能涉及诊断需要的隐私信息)。病理医师应 尊重和保护患者的隐私。患者或患者的授权人应保证其自送检材的真实 性、完整性和可检查性。

九、病理科应努力为临床、为患者提供优质服务,遵照本规范的要求加 强科室建设,制订完善的科室管理制度,并实施有效的质量监控。

十、病理科工作人员应恪尽职守,做好本职工作。病理医师应及时对标 本进行检查和发出病理学诊断报告书,认真对待临床医师就病理学诊断 提出的咨询,必要时应复查有关的标本和切片,并予以答复。病理科技 术人员应严格执行本规范的技术操作规程,提供合格的病理学常规染色 片、特殊染色片和可靠的其他相关检测结果,并确保经过技术流程处理 的检材真实无误。

第2章 病理学检查常规

第一节 普通活体组织病理学检查常规

一、申请单和标本的验收

(一)病理科应有专人验收普通活体组织病理学检查(常规活检)申 请单和送检的标本。

(二)病理科验收人员必须:

1. 同时接受同一患者的申请单和标本。

2. 认真核对每例申请单与送检标本及其标志(联号条或其他写明患者 姓名、送检单位和送检日期等的标记)是否一致;对于送检的微小标 本,必须认真核对送检容器内或滤纸上是否确有组织及其数量。发现疑 问时,应立即向送检方提出并在申请单上注明情况。

3.认真检查标本的标志是否牢附于放置标本的容器上。

4.认真查阅申请单的各项目是否填写清楚,包括:①患者基本情况[姓 名、性别、年龄,送检单位(医院、科室)、床位、门诊号/住院号、送 检日期、取材部位、标本数量等],②患者临床情况[病史(症状和体 征)、化验/影象学检查结果、手术(包括内镜检查)所见、既往病理学 检查情况(包括原病理号和诊断)和临床诊断等]。 5.在申请单上详细记录患者或患方有关人员的明确地址、邮编及电话号 码,以便必要时进行联络,并有助于随访患者。

(三)验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改动 。

(四)下列情况的申请单和标本不予接收:

1.申请单与相关标本未同时送达病理科;

2.申请单中填写的内容与送检标本不符合;

3.标本上无有关患者姓名、科室等标志;

4.申请单内填写的字迹潦草不清;

5.申请单中漏填重要项目;

6.标本严重自溶、腐败、干涸等;

7.标本过小,不能或难以制做切片;

8.其他可能影响病理检查可行性和诊断准确性的情况。

病理科不能接收的申请单和标本一律当即退回,不予存放。

(五)临床医师采取的标本应尽快置放于盛有固定液(4%中性甲醛,即1 0%中性福尔马林)的容器内,固定液至少为标本体积的5倍。对于需作 特殊项目检查(如微生物、电镜、免疫组织化学、分子生物学等)的标 本,应按相关的技术要求进行固定或预处理。

(六)病理医师只对病理科实际验收标本的病理诊断负责。

(七)病理科应建立与送检方交接申请单和标本的手续制度。具体交接方 法由各医院病理科自行制订。

二、申请单和标本的编号、登记

(一)病理科验收人员应在已验收的申请单上注明验收日期并及时、准确 编号(病理号),并逐项录入活检标本登记簿或计算机内。严防病理号 的错编、错登。

(二)标本的病理号可按年编序,或连续性(不分年度)编序。 (三)同一病例同一次的申请单、活检标本登记簿(包括计算机录入)、 放置标本的容器、组织的石蜡包埋块(简称蜡块)及其切片等的病理号 必须完全一致。

(四)病理科应建立验收人员与组织取材人员之间申请单和标本的交接制度。具体交接方法由各医院病理科自行制订。

(五)在病理科内移送标本时,必须确保安全,严防放置标本的容器倾 覆、破损和标本的散乱、缺失等。

三、标本的预处理

标本验收人员对已验收的标本酌情更换适宜的容器,补充足量的固定 液;对于体积大的标本,值班取材的病理医师在不影响主要病灶定位的 情况下,及时、规范地予以剖开,以便充分固定。

四、标本的巨检、组织学取材和记录

对于核验无误的标本,应按照下列程序进行操作:①肉眼检查标本(巨 检);②切取组织块(简称取材);③将巨检和取材情况记录于活检记 录单上(活检记录单印于活检申请单的背面)。巨检和取材的技术操作 参见第3章第四节。

巨检和取材时的注意事项:

(一)巨检和取材必须由病理医师进行,应配备人员负责记录。

(二)巨检和取材过程中,应严防污染工作人员和周围环境。

(三)标本一般应经适当固定后再行取材。已知具有传染性(例如结核 病、病毒性肝炎等)的标本,应在不污染环境和/或不扩散传染的原则 下,经必要的初步巨检或切开后,立即置于盛有足量固定液的专用容器 内,充分固定后再行常规巨检和取材。

(四)病理医师在对每例标本进行巨检和取材前,应与记录人员认真核对 该例标本及其标志与申请单的相关内容是否一致。若对申请单填写的内 容或/和标本有疑问(例如患者姓名有误,标本内容、数量、病变特征 与申请单填写的情况不符等),应暂行搁置,尽快与送检方联系,查明 原因,确保无误后,再行巨检和取材。必要时,可邀请有关临床医师共 同检查标本和取材。对于有疑问的标本,在消除疑问前不得进行巨检和 取材,应将有关标本连同其申请单一并暂时妥存。

(五)病理医师进行巨检和取材时,记录人员应根据病理申请单内容,向 巨检医师报告患者的基本临床情况、手术所见、标本情况(采取部位、 数量等)和送检医师的特殊要求等,并如实、清楚地将病理医师的口头 描述记录于活检记录单上。必要时,应在活检记录单上(或另附纸)绘 简图显示巨检所见和标示取材部位。取材者应核对记录内容。

(六)具有医学学术价值的标本可摄影存档,并酌情妥为保存。

(七)病理科宜积极推行巨检和取材的录音记录。每次巨检和取材结束 后,应由专人立即对录音内容进行文字整理,记录于活检记录单上(手 录或用计算机录入、打印)。有关的录音资料应保存至病理诊断报告书 发出后两周。

(八)细小标本取材时,可用伊红点染并用软薄纸妥善包裹。

(九)每例标本取材前、后,应用流水彻底清洗取材台面和所有相关器 物,严防检材被无关组织或其他异物污染,严防细小检材被流水冲失。

(十)巨检和取材必须按照本规范的要求进行操作(参见第3章第四 节)。对于由不同部位或不同病变区域切取的组织块,应在其病理号之 后再加编次级号(例如:-1,-2,-3,„„;A,,B,C,„„等)。

(十一)巨检/取材者和记录人员应相互配合、核查,确保所取组织块及 其编号标签准确地置于用于脱水的容器(脱水盒等)内。

(十二)标本巨检和取材后剩余的组织/器官应置入适当容器内,添加适 量4%中性甲醛并附有相关病理号和患者姓名等标志,然后按取材日期有 序地妥为保存。取材剩余的标本一般保存至病理诊断报告书发出后两 周。

(十三)病理医师在每批标本巨检和取材后,应与记录人员共同核对取材 内容,并在活检记录单/取材工作单上签名和签署日期。

(十四)取材后剩余的病理标本属于污染源,应遵照有关规定处理。

(十五)巨检/取材医师或记录人员与制片的技术人员认真办理交接手 续。具体交接方法由各医院病理科自行制订。

五、组织切片制备的基本要求

(一)组织制片过程中,应确保切片号与蜡块号一致。

(二)制片工作一般应在取材后2个工作日内完成(不含需要脱钙、脱脂 等特殊处理的标本)。

(三)制片完成后,技术人员应检查制片质量,并加贴标有本病理科病理 号的标签。常规石蜡-HE染色片的优良率应≥95%, 优秀率不<35%。 不合格切片应立即重做。切片质量的基本标准参见第3章第一节的附 表。

(四)制片过程发生意外情况时,有关技术人员和技术室负责人应及时向 科主任报告,并积极设法予以补救。

(五)制片完成后,技术人员应将所制切片与其相应的活检记录单/取材 工作单等进行认真核对,确认无误后,将切片连同相关的活检申请单/ 活检记录单/取材工作单等一并移交给病理医师。双方经核对无误后, 办理移交签字手续。具体交接方法由各医院病理科自行制订。

(六)常规活检组织切片制备技术的基本要求参见第3章第一节。

六、组织切片的光学显微镜检查和病理诊断

(一)病理医师进行病理诊断时:

1.应认真阅读申请单提供的各项资料,必要时(尤其是疑难病例),应 向有关临床医师了解更多的临床信息。

2.应认真阅读活检记录单中关于标本巨检的描述;负责复检的病理医师 必要时亲自观察标本,补充或订正病变描述,指导或亲自补取组织块。

3.应了解患者既往病理学检查情况(包括切片的病理诊断和有关文字记 录):①由本病理科既往受理者,必须及时调阅相关切片等病理学检查 资料;②非本病理科既往受理者,应积极协助患者从有关病理科商借相 关切片等病理学检查资料参阅。

4.应在活检记录单上签署“医嘱”,告知技术人员进行必要的深切片、 连切片、特殊染色和其他相关技术检测。

5.应全面、细致地阅片,注意各种有意义的病变。

(二)进行初检的病理医师,应提出初诊意见,送交主检病理医师复查。

(三)主检病理医师对难以明确诊断的病例,可以:

1.提请科内上级医师会诊或进行科内读片讨论(会诊);

2.与有关临床医师进行临床-病理会诊;

3.必要时约见患者(尤其门诊患者)或患者亲属(或其他患方相关人 员),了解病情,说明病理诊断的疑难情况和延期签发病理学诊断报告 书的原因等;

4.于签发病理学诊断报告书前进行科外病理会诊(“诊断报告前病理会 诊”),应将各方面会诊意见的原件(或复印件)作为档案资料贴附于有 关患者的活检记录单中备查;

5.必要时,建议临床医师重复活检,或密切随查。

(四)主检病理医师根据常规切片的镜下观察,结合标本巨检、相关技术 检查结果、有关临床资料和参考病理会诊意见等,作出病理诊断或提出 病理诊断意见(意向),清楚地书写于活检记录单的有关栏目中、并亲 笔签名。各方会诊意见不

一、难以明确诊断时,主检医师可参考会诊意 见酌情诊断,或在病理学诊断报告书中将各方会诊意见列出,供临床医 师参考。

(五)对打印的病理学诊断报告书,主检病理医师应与活检记录单上的病 理诊断文字进行核对,并亲笔签名。[参见本节下文:“

八、常规活检 病理学诊断报告书及其签发”]

七、相关诊断技术的选用

病理医师可借助于组织化学染色(包括特殊染色)、免疫组织化学染 色、电子显微镜技术、分子生物学技术、流式细胞技术等相关诊断技术 检查提供的佐证,对某些病例(尤其是疑难病例)进行病理诊断。(参 见第4章)

八、病理学诊断报告书及其签发

(一)病理诊断表述的基本类型

Ⅰ类:检材部位/疾病名称/病变性质明确和基本明确的病理诊断。

Ⅱ类:不能完全肯定疾病名称/病变性质,或是对于拟诊的疾病名称/病 变性质有所保留的病理诊断意向,可在拟诊疾病/病变名称之前冠以诸 如病变可“符合为”、“考虑为”、“倾向为”、“提示为”、“可能 为”、“疑为”、“不能排除(除外)”之类的词语。

Ⅲ类:检材切片所显示的病变不足以诊断为某种疾病(即不能做出Ⅰ类 或

Ⅱ类病理诊断),只能进行病变的形态描述。

Ⅳ类:送检标本因过于细小、破碎、固定不当、自溶、严重受挤压(变 形)、被烧灼、干涸等,无法做出病理诊断。

(二)病理学诊断报告书的基本内容

1.患者的基本情况,包括病理号,姓名,性别,年龄,送检医院/科室 (住院/门诊),住院号/门诊号,送检/收验日期等。

2.巨检病变和镜下病变要点描述(一般性病变和细小标本可酌情简述或 省略)。

3.与病理诊断相关技术的检查结果。

4.病理诊断的表述(参见上文“病理诊断表述的基本类型”)。

5.对于疑难病例或作出Ⅱ、Ⅲ类病理诊断的病例,可酌情就病理诊断及 其相关问题附加:①建议(例如进行其他有关检查、再做活检、科外病 理学会诊、密切随诊/随访等);②注释/讨论。

6.经过本病理科或/和科外病理会诊的病例,可将各方病理会诊 意见列于该例患者的病理学诊断报告书中。

(三)病理学诊断报告书的书写要求

1.病理学诊断报告书的文字表述力求严谨、恰当、精练、条理和层 次清楚。

2.病理学诊断报告书应为一式二份,一份交予送检方,另一份随同患者 的病理学检查申请单/病理学检查记录单一并存档。主检病理医师必须 在每一份病理学诊断报告书上签名,不能以个人印章代替签名,不能由 他人代为签名;主检病理医师签名的字迹应能辨认。

3.手书的病理学诊断报告书必须二联复写,必须文字规范、字迹清楚, 不得潦草、涂改。

4.手书和计算机打印的病理学诊断报告书中的关键性文字,例如

“癌”、“瘤”、“阳性”、“阴性”和数字等,要认真核对,不得有 误。

5.计算机打印的图文病理学诊断报告书提供的病变图象要准确,具有典 型(代表)性,放大倍数适当。

6.患者的基本情况项目必须严格按照送检临床医师填写的文字抄写或用 计算机输录于病理学诊断报告书中,并认真核查无误,签发报告书的病 理医师和病理科的其他人员都不得改动。 7.病理医师不得签发虚假的病理学诊断报告书,不得向临床医师和患方 人员提供有病理医师签名的空白病理学诊断报告书。

(四)病理学诊断报告书的发送

1.病理科自接受送检标本至签发该例病理学诊断报告书的时间,一般情 况下为5个工作日以内;

2.由于某些原因(包括深切片、补取材制片、特殊染色、免疫组 织化学染色、脱钙、疑难病例会诊或传染性标本延长固定时间等)延迟 取材、制片,或是进行其他相关技术检测,不能如期签发病理学诊断报 告书时,应以口头或书面告知有关临床医师或患方,说明迟发病理学诊 断报告书的原因。

3.病理科应有专人发送病理学诊断报告书。住院患者的病理学诊断报告 书应发送至有关临床科室。病理科所在医院门诊患者和外院患者病理学 诊断报告书的发送方法,由各医院病理科自行制订。

4.病理学诊断报告书的经收人员(包括患方人员)必须履行签收手续。

5.病理科已发出的病理学诊断报告书被遗失时,一般不予补发;必要 时,经病理科主任同意可以抄件形式补发。

九、资料管理

普通活体组织病理学检查的资料必须妥善管理,有关规定参见本章第五 节。

十、会 诊

病理学会诊是普通活体组织病理学诊断过程的重要环节,有关规定参见本章第 六节。

第二节 手术中快速活体组织病理学检查常规

一、概 述

(一) 手术中快速活体组织病理学检查(快速活检)是临床医师在实施手术 过程中,就与手术方案有关的疾病诊断问题请求病理医师快速进行的急会诊, 尤其需要临床医师与病理医师间的密切合作。

(二)快速活检要求病理医师在很短时间内,根据对切除标本的巨检和组织块快 速冷冻切片(或快速石蜡切片)的观察,向手术医师提供的参考性病理诊断意 见。与常规石蜡切片的病理诊断相比,快速活检会诊具有更多的局限性和误诊 的可能性。有的病例难以快速诊断,需要等待常规石蜡切片进一步明确诊断。 因此,应向临床医师说明快速活检的:①局限性、②适用范围、③慎用范围和 ④不宜应用范围。

(三)有关临床医师应于手术前向患者和/或患者授权人说明快速活检的意义和 局限性等,取得患者和/或患方的知情和理解。患者和/或患者授权人应在由 医院制定的《手术中快速活检患方知情同意书》签署意见和签名。

(四)主持手术的临床医师应在手术前一天向病理科递交快速活检申请单,填写 患者的病史,重要的影象学、实验室检查结果和提请病理医师特别关注的问题 等。尽可能不在手术进行过程中临时申请快速活检。

(五)手术中快速活检应由经过该项工作训练的主治医师以上的病理医师主持。 尚不具备相应条件的病理科不应勉强开展手术中快速活检。

(六)负责快速活检的主检病理医师应了解患者的①临床情况,②手术所见,③ 既往有关的病理学检查情况。

二、适用范围

(一) 需要确定病变性质(如肿瘤或非肿瘤/良性肿瘤或恶性肿瘤等),以

决定手术方案的标本。

(二) 了解恶性肿瘤的扩散情况,包括肿瘤是否浸润相邻组织、有无区域淋 巴结转移等。

(三)确定肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤组织残留。

(四)确认切除的组织,例如甲状旁腺、输卵管、输精管及异位组织等。

三、慎用范围

涉及截肢和其他会严重致残的根治性手术切除的标本。需要此类手术治疗的患者,其病变性质宜于手术前通过常规活检确定。

四、不宜应用范围

(一)疑为恶性淋巴瘤。

(二)过小的标本(检材长径≤0.2cm者)。 (三)术前易于进行常规活检者。

(四)脂肪组织、骨组织和钙化组织。

(五)需要依据核分裂象计数判断良、恶性的软组织肿瘤。 (六)主要根据肿瘤生物学行为特征而不能依据组织形态判断良、恶性的肿瘤。 (七)已知具有传染性的标本(例如结核病、病毒性肝炎、艾滋病等)。

五、申请单和标本的验收、编号和登记

手术中快速活体组织病理学检查申请单和标本的验收、编号和登记参照本章第一节中“一”至“三”项的有关规定。

六、标本的巨检、取材和记录

(一)病理科验收快速活检申请单和标本后,应参照本章第一节中“四”项的有关规定,立即进行标本的巨检、取材和记录。

(二)主持快速活检的病理医师应亲自参与标本的巨检和取材(或指导取 材)。

(三)通常选取具有代表性的病变组织1~2块,需要时,增加取材块数。

七、组织切片的制备 (一)冷冻切片

1.完成冷冻HE染色切片制备的时间通常应为20~25分钟。

2.恒冷箱切片机制片:至少应于切片前1小时开机预冷,冷室温度一般为-15~-20℃。常规开展冷冻切片快速病理学诊断的病理科,恒冷箱切片机宜处于24小时恒温待机状态。

3.其他方法的冷冻切片制备参见第3章第一节。 (二)快速石蜡切片

1.完成快速石蜡-HE染色切片的时间通常为30分钟。 2.快速石蜡切片的制备方法参见第3章第一节。

(三)制备好的冷冻/快速石蜡-HE染色切片,加贴标有本病理科病理号的 标签后,立即交由主检病理医师进行诊断。

八、手术中快速活检会诊意见及其签发

(一)有条件的病理科宜由两位中/高级称职的病理医师共同签署快速活检的病理诊断意见。对于病变疑难、手术切除范围广泛和会严重致残的手术中快速活检,应由两位高级称职的病理医师共同签署会诊意见。主检病理医师签名的字迹应能辨认。

(二)快速活检诊断意见一般在收到送检标本后40分钟内发出;同一时间段内相继收到的多例患者标本或是同一例患者的多次标本,其发出报告的时间依次类推。对于疑难病变,可酌情延时报告。

(三)对于难以即时快速诊断的病变(例如病变不典型、交界性肿瘤病变或送检组织不足以明确诊断等),主检病理医师应向手术医师说明情况,恰如其分地签发病理诊断意见或告知需要等待常规石蜡切片进一步明确病理诊断。

(四)主检病理医师签署的快速活检病理诊断意见,宜以文字形式报告(具体发出方式由各医院自行决定)。快速活检病理诊断意见报告书发出前应认真核对无误。

九、冷冻切片后剩余组织的处理

(一)冷冻切片后剩余的冷冻组织(简称 “冻对”)和冷冻切片取材后剩余、未曾冷冻的组织(简称“冻剩”),均应保存,用以制备常规石蜡切片,以便与冷冻切片进行对照观察。

(二)“冻对”/“冻剩”组织的蜡块和切片需与同一病例手术后送检的切除标本编为同一病理号,并作出综合性诊断。

(三)当冷冻切片病理诊断意见与其“冻对”组织的常规石蜡-HE片的 病理诊断不一致时,该例的病理诊断一般应以石蜡-HE片诊断为准。

十、资料管理

手术中快速活体组织病理学检查的资料必须妥善管理,有关规定参见本章第五节。

第三节 细胞病理学检查常规

一、申请单和标本的验收、编号和登记

(一) 病理科应参照本章第一节(常规活体组织病理学检查常规)中“一” 和“二”项的规定,进行细胞病理学检查(细胞学检查)申请单和标本的验收、编号和登记。

(二)用于细胞学检查的标本必须新鲜,取材后应尽快送至病理科(或细胞病理学室,下同);病理科核验检材无误后,应尽快进行涂片和染色。

(三)病理科验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改动。

二、细胞涂片、组织印片和压片的基本要求

(一)细胞涂片、组织印片和压片(参见第3章第二节)。 (二)肿物细针穿刺物涂片

1. 应由掌握细针穿刺技术的注册医师或注册助理医师,按照细针穿刺技术操作常规,亲自对确有适应症且无禁忌症的患者采取穿刺物。 2. 适应症:通常为:

(1)浅表肿物:乳腺、甲状腺、涎腺、淋巴结、前列腺、皮下软组织和骨等。 (2)胸腔肿物:肺、胸膜和纵隔等。

(3)腹腔肿物:肝、胰、肾、肾上腺、腹腔内、腹膜后和盆腔内等。 (4)颅内肿物。

3.禁忌症:患者有难以控制的咳嗽、肺动脉高压症、进行性肺气肿、出血 性体质及“晕针史”等。

(三)对于核验无误的送检标本,应立即依序进行:①涂片、印片或 压片,②固定和③染色。

三、细胞病理学诊断报告书及其签发

(一) 细胞病理学诊断可为临床医师诊断疾病(尤其是肿瘤)提供重要参考 依据。

(二)细胞病理学诊断报告书必须由具有主检资格的注册病理医师签署后发出。主检病理医师签名的字迹应能辨认。 (三)细胞病理学诊断表述的基本类型

1.直接表述性诊断:适用于穿刺标本的细胞病理学诊断报告。根据形态学观察的实际情况,对于某种疾病/病变做出肯定性(Ⅰ类)、不同程度意向性(Ⅱ类)细胞学诊断,或是提供形态描述性(Ⅲ类)细胞学诊断,或是告知无法做出(Ⅳ类)细胞学诊断。[参考本章第一节的八(一)项:“病理学诊断表述的基本类型”]

2.间接分级性诊断:用于查找恶性肿瘤细胞的诊断。 Ⅰ级:未见恶性细胞 Ⅱ级:查见核异质细胞 Ⅱa:轻度核异质细胞 Ⅱb:重度核异质细胞 Ⅲ级:查见可疑恶性细胞 Ⅳ级:查见高度可疑恶性细胞 Ⅴ级:查见恶性细胞

(四)细胞病理学诊断的局限性(假阴性或假阳性诊断)

1.假阴性:是指在恶性肿瘤患者的有关标本中未能查见恶性细胞。假阴性

率一般为10%左右。因此,细胞病理学检查的阴性结果并不能否定临床医师的恶性肿瘤诊断。

2.假阳性:是指在非恶性肿瘤患者的有关标本中查见了“恶性细胞”。假阳 性率通常≤1%。因此,细胞病理学诊断应密切结合患者的临床资料,对于临床上未考虑为恶性肿瘤患者的阳性细胞学诊断应持慎重态度。 (五)细胞病理学诊断报告书的基本内容

1.患者的基本情况项目,包括病理号、姓名、性别、年龄、送检医院/科室(住院/门诊)、住院号/门诊号、送检/收验日期等。

2.细胞病理学诊断的表述(参见上项“细胞病理学诊断报告表述的基本类型”)。

3.必要时或条件允许时,可酌情就细胞病理学诊断及其相关问题附加:①

某些建议(例如进行其他有关检查、再做活检、病理科外病理学会诊、密切随查/随访等);②注释/讨论。

4.经过本病理科或/和科外病理会诊的病例,可将各方的细胞病理学诊断意见附于该例的细胞病理学诊断报告书中。 (六)细胞病理学诊断报告书的书写要求

1. 参照本章第一节(“常规活体组织病理学检查常规”)中“八

(二)”项的有关规定。

2.计算机图文打印的细胞病理学诊断报告书提供的细胞学图象应具有典型(代表)性,放大倍数适当。

(七)细胞病理学诊断报告书的发送

1.病理科自接受送检标本至签发细胞病理学诊断报告书的时间,一般情况 下为1~2个工作日。

2.因某些原因(包括特殊染色、免疫组化染色、疑难会诊等)不能如期签发细胞病理学诊断报告书时,应以口头或书面告知有关临床医师或患方,说明迟发报告书的原因。

3.病理科应有专人发送细胞病理学诊断报告书。住院患者的细胞病理学诊 断报告书应发送至有关临床科室;本院门诊患者和外院患者的细胞病理学诊断报告书的发送方法由各医院病理科自行制定。

4.细胞病理学诊断报告书的经收人员(包括患方人员)必须履行病理科规 定的签收手续。

5.已由病理科发出的细胞病理学诊断报告书被遗失时,一般不予补发;必 要时,经病理科主任同意可以抄件形式补发。

四、资料管理

细胞病理学检查的资料必须妥善管理,有关规定参见本章第五节。

五、会 诊

细胞病理学会诊是细胞病理学诊断过程的重要环节,有关规定参见本章第六节。

第四节 尸体剖检(尸检)的诊断常规

一、尸检的受理

(一)必须遵照国家有关规定受理尸检。

(二)受理尸检范围:①普通病理尸检;②涉及医、患争议的尸检(由卫生 行政主管部门指定的尸检机构实施)。

(三)受理尸检部门:具备独立尸检能力的①医院病理科,②医学院校的病理学教研室,③经医政部门注册的病理诊断中心。

(四)主持尸检(主检)人员:应是接受过尸检训练、具有中级以上专业职称的病理学医师或病理学教师。必要时,邀请法医参与尸检。

(五)申请或委托尸检方:①有关医院,②卫生行政部门,③司法机关,④死者的亲属或代理人,或⑤被受理尸检方认可的其他申请或委托方。

(六)申请或委托尸检方必须向受理尸检方递交:①死者的死亡证明,②有申请或委托方当事人签名、负责人签名和加盖委托单位公章的尸检申请书或委托书,③逐项认真填写的尸检申请书(包括死者的临床资料要点和其他需要说明的情况)。

(七)死者亲属或代理人签署说明尸检有关事项的《死者亲属或代理人委托 尸检知情同意书》(由受理尸检方制定),确认以下事项: 1.同意有关受理尸检机构对于死者进行尸检。

2.授权主持尸检人员根据实际需要确定尸检的术式、范围、脏器或组织的取留及其处理方式。

3.主持尸检人员负责遗体尸检后的体表切口缝合,不参与尸检后遗体的其 他安置事项。

4.明确新生儿和围生期胎儿尸检后的尸体处理方式。

5.同意对尸检过程进行必要的摄影、录像,并确认是否同意教学示教。 6.尸检病理学诊断报告书可提供死者所患的主要疾病和死因;难以作出明 确结论时,可仅提交病变描述性尸检报告。 7.尸检病理学诊断报告书发送给委托尸检方。 (八)下列情况的尸检可不受理:

1.委托尸检手续不完备者(包括未按规定交纳尸检费用者);

2.拒签《死者亲属或代理人委托尸检知情同意书》者(包括对于尸检的术 式、范围、脏器或组织的取留及其处理方式等持有异义从而影响尸检实施和尸检结论形成者);

3.委托尸检方与受理尸检方就涉及尸检的某些重要问题未能达成协议者; 4. 死者死亡超过48小时未经冷冻、或冷冻超过7日者;

5.疑因或确因烈性传染病死亡的病例,尸检方不具备相应尸检设施条件者; 6.因其他情况不能受理者。

二、尸检前的准备工作 (一)尸检室环境的准备。

(二)尸检基本器材和工作服的准备。

(三)安排实施尸检的专业人员和技术人员。 (四)将拟行剖验的尸体移送至尸检室。

(五)主持尸检人员确认尸检手续完备(死亡证明、尸检申请书或委托书、 死者的临床资料要点等),并请死者亲属或委托代理人确认尸体。

(六)主持尸检人员认真阅读、熟悉有关死者的临床资料要点(必要时阅读死者的生前病历),了解申请或委托方对于尸检的要求和尸检时需要注意的问题。 (七)进行尸检编号并登录于尸检登记薄上。

(八)尸检过程现场文字(或语音)记录、摄影或录象工作的准备。

三、尸检的卫生管理

(一)制订尸检室卫生管理制度并认真实施。

(二)尸检人员和尸检室内其他人员必须认真做好个人和工作环境的卫生防护。 (三)疑为或确诊为烈性传染病死者的尸检,必须遵照传染病尸检的有关规 定进行操作。

(四)尸检结束后卫生处置

1.认真清洗尸检台和尸检室,并进行环境消毒。 2.认真清洗尸检工作服和器械等,并进行消毒。 3.按照有关规定认真处理尸检污物。 4.尸检人员在专用卫生间内淋浴。

5.进行上述各项卫生处置过程中必须严防污染有关人员和尸检室内、外环境。

四、尸检的技术操作

尸检的技术操作规范参见第3章的第三节。

五、尸检组织的切片制备

尸检组织切片制备的技术操作规范参见第3章第一节。

六、尸检组织的病理学相关技术检查

尸检组织病理学相关技术检查的规范参见第4章。

七、尸检组织切片的光学显微镜检查和病理学诊断

(一) 光镜检查切片,客观地描述和记录各系统、器官的病变要点;

(二)在综合镜检和巨检(肉眼检查)所见的基础上,结合死者生前的临床资料等形成尸检的病理诊断。

(三)有关镜检诊断的其他事项参见本章第一节的一

(六)项(“组织切片的光学显微镜检查和病理学诊断”)。

八、尸检档案资料 (一)基本内容

1. 一般资料:包括死者的尸检号、姓名、性别、年龄、籍贯、民族、出

生地、住址、死亡时间、尸检时间和地点、相关医院(临床科室、住院号/门诊号/急症号)、委托或申请尸检单位及主持尸检人员和助手等。 2. 尸检申请书或委托书。 3. 有关的临床资料。

4. 由死者亲属或代理人签署的《死者亲属或代理人委托尸检知情同意书》。 5. 尸检所见(附有必要的图像资料)。包括: (1)对有关尸体及其死亡征象的确认。 (2)体表检查所见。

(3)体腔(胸腔、心包腔、腹腔)检查所见。

(4)脏器检查所见:依序逐个描述各脏器的肉眼检查和光学显微镜检查所见。 (5)特殊检查结果。例如毒物、病原生物学等检查(附有关检查报告)。

6. 病理学诊断和尸检病理学诊断报告书副本(参见下项“尸检病理学诊断报告书及其签发”)。 7. 死亡原因。 8. 小结。

9.讨论。包括:

(1)主要疾病及其诊断依据、发生和发展特点。

(2)主要疾病/病变之间、主要疾病与继发/伴发疾病之间的相互关系。 (3)从临床与病理相结合的角度,参考有关文献,进行讨论。

10. 其他资料。包括照片及其底片、幻灯片、图表、临床病理讨论记录、参考文献和电子信息资料等。

(二)受理尸检单位,应积极实施尸检档案资料的计算机管理。

九、尸检病理学诊断报告书及其签发

(一)尸检病理学诊断报告书(简称尸检报告书或尸检报告)是关于尸检的正式病理学报告。

(二)尸检病理学诊断报告书的基本内容:①主要疾病(与死亡直接相关的疾病);②继发疾病(与主要疾病密切相关的疾病);③伴发疾病(与主要疾病无密切关系的疾病)。可酌情进行死因分析、小结和讨论。疾病诊断力求使用国际医学规范术语,并按各疾病的致死重要性和因果关系排序。

(三)尸检病理学诊断报告书必须由主检人员签名后发出。主检人员签名的字迹应能辨认。

(四)尸检病理学诊断报告书应一式两份(正本和副本),两份报告书具有

同等效力。报告书的正本随同其他尸检资料一并归档,报告书的副本发给委托尸检方。手书的尸检病理学诊断报告书应二联复写,必须文字规范、字迹清楚,不得涂改。

(五)尸检病理学诊断报告书通常在尸检后45个工作日内发出。由于病变复 杂或其他原因不能按时发出尸检病理学诊断报告书时,可酌情延迟发出并应向委托尸检方说明迟发原因。

十、尸检资料的管理

尸检资料必须妥善管理,有关规定参见本章第五节。

第五节 病理学检查资料的管理

一、概 述

(一)常规活检、手术中快速活检、细胞病理学检查和尸检等的文字资料(含电子信息资料)、非文字资料(组织的石蜡包埋块、切片等)以及其他相关资料均为有价值的医学资料,皆由受理病理学检查的病理科按照本规范规定的期限妥为保存。病理科必须设立病理档案资料室和制订病理档案资料管理制度(包括病理检查资料的归档、借用和归还手续等),并有专人管理。应积极实行病理学检查资料的计算机管理。

(二)各种病理学检查的文字资料应装订成册保存。

(三)据以做出常规活检、快速活检、尸检病理学诊断的原始组织学切片和

查见肿瘤细胞或可疑肿瘤细胞的玻片必须妥善保存。未查见恶性肿瘤细胞的玻片,于诊断报告书发出后保存2周。

二、患者查询病理学检查资料的期限 (一)门诊患者为送检后15年。 (二)住院患者为送检后30年。

三、活检、尸检大体标本的保存期限 (一) 活检:自签发病理学诊断报告书之日起保存2~4周,具体保存期限由 各医院自行规定。 (二)尸检

1. 普通病理尸检:自签发病理学诊断报告书之日起保存3个月。 2. 涉及医、患争议的尸检:按照尸检前有关各方签署的协议办理。

四、病理学检查资料的借用

(一)医院必须制订关于借用病理学检查资料的办法并严格实施。 (二)关于患方借用病理组织学切片,应注意:

1.患方人员申请借用有关患者的活检切片、尸检切片时,应按照医院制定 的有关规定办理手续。

2.申请借用切片的患方人员必须:①出示本人身份证等有效证件并保留其复印件;②填写借片申请单并签名;③支付规定的借片押金(待归还切片时退还)。

3. 病理科据以作出诊断的原始切片一般不外借,通常借出(或售出)相关 病例的复制切片。复制切片借出(或售出)前,应确认该切片的病变与原切片相同或基本相同。

4. 患方借出的切片应妥善保存,必须在规定的期限内归还。患方借出的切 片若有破损、丢失等,应按规定支付赔偿金,并承担相应责任。

5.病理科因故不能向患方出借或出售有关切片时,由双方协商解决病理学会诊问题。病理科可酌情允许患方邀请外院的病理医师前来病理科阅片;有条件的单位可酌情进行远程病理会诊。

(三)关于患方借用细胞病理学玻片

1.一个病例的同一次检查有多张查见恶性肿瘤细胞的“阳性片”或“可疑 阳性片”时,可允许患方借用其中的一张。借用手续参见上项(二)。

2.一个病例仅有一张为查见恶性肿瘤细胞的“阳性片”或“可疑阳性片”时,该阳性片或可疑阳性片原则上不予外借。其会诊问题由双方协商解决。病理科可酌情允许患方邀请外院的病理医师前来病理科阅片。 (四)关于借用检材组织的石蜡包埋块

1. 活检和尸检检材组织的石蜡包埋块(简称蜡块)是无法复制的病理学检 查资料,属于诊断病理学的重要基础档案,原则上不外借。必要时,可由病理科向患方提供未经染色的切片(通称白片)。

3. 患方外借病理切片会诊时,受理会诊的病理科若确实需要有关病例病理 检材的蜡块,可由有关病理科双方协商解决。

第六节 病理学会诊

一、具有一定规模的病理科应定期举行科内病理会诊或读片讨论会。

二、积极推动建立地域性病理会诊中心。

三、加强临床-病理会诊。

四、应由具有高级职称的病理医师接受病理科内、外的病理学会诊。

五、接受外院的病理会诊时,由会诊的病理医师签发《病理学会诊咨询意见书》,并在该《意见书》上写明:“病理医师个人会诊咨询意见,仅供原病理诊断的病理医师参考”。由作出原病理诊断的病理医师自行决定是否采纳病理会诊咨询意见和采纳的程度。做出原诊断的病理科应将《病理会诊咨询意见书》的原件或其复印件贴附于有关患者的病理检查记录单上,一并归档。

六、加做相关技术检测方能作出诊断的会诊病例,会诊医师应在《意见书》中予以说明,并向患方进行适当解释。

七、对病理诊断时间较为长久病例的会诊,应考虑到做出原诊断时期的诊断病理学理论、技术水平、相应病变/疾病的定性诊断标准和原诊断病理科当时的客观条件。

八、有条件的病理科可开展远程病理会诊。

第七节 病理科的基本设施

一、病理科基本设施的指导原则

(一)保证病理科完成基本工作任务。 (二)保护病理工作人员免受污染。 (三)保护环境免受污染。

二、病理科的基本工作空间

(一)病理科的常规工作需要在下列的各自独立的房间内进行:

1.收发室(检材的接收、登记,病理诊断报告书的发放,病理资料查询等) 2.巨检和取材室(检材的肉眼检查和切取组织块,贮存取材后的剩余检材) 3.常规切片前的预处理室(组织块的脱水、透明和浸蜡) 4.制片室(石蜡切片/冷冻切片/细胞学涂片的制做和染色) 5.病理组织学诊断室

6.细胞病理学诊断(酌情附设组织穿刺室) 7.病理会诊室 8.病理档案资料室

9.大体标本制作室和陈列室

10.尸检室及其配套空间(三级医院建立,包括准备室、尸检室、肉眼检查和取材室、更衣/淋浴室、标本储藏室等) 11.储藏室 12.淋浴室 13.办公室

(二) 较高技术层次的病理科还应设置: 1.特殊染色和免疫组织化学染色实验室 2.细胞遗传和分子病理学实验室

3.其他特殊检测实验室(例如超薄切片制备、电镜检测、细胞培养、流式细胞术和其他新技术实验室)

4.图书/电子信息/学术活动室 5.进修病理医师教室。

三、病理科常规活检和快速活检工作的基本设施 (一) 收发室 1. 办公设施

2. 紫外线消毒柜(用于活检申请单等消毒) 3. 合于个人和环境防污染要求的上、下水系统 4. 其他相关设备

(二)病理标本巨检和取材室

1.便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修 2.室内紫外线消毒设备 3.室内高效通风设施

4.封闭式高效能通风柜厨(用于巨检和取材,应便于清洗、消毒,并安装足够照明和紫外线消毒设备) 5.合于个人和环境防污染要求的上、下水系统(包括独立的污水排泄系统和污水处理池)

6.流水冲洗装置

7.冷水和热水供给系统

8.自动录音设备(酌情安装,用于记录医师巨检标本时的语言描述) 9.标本储存柜(安装排风设备) 10.隔离服装(消毒后使用) 11.其他相关设备。

(三)常规切片的预处理室和常规/快速制片室

1.排放有毒物质的室内高效通风设施(用于组织块和石蜡切片的 人工脱水流程)

2.符合个人和环境防污染要求的上、下水系统(包括独立的污水排泄系统和污水处理池)

3.室内紫外线消毒设备

4.封闭式高效能通风柜厨(用于人工脱水流程) 5.实验台

6.脱水设备:①人工脱水器具或/和②半自动或全封闭自动脱水机 7.组织块石蜡包埋机 8.石蜡切片机

*9.恒温冷冻切片机

*10.石蜡快速切片机 [* 9和10:两项皆配备或配备一项] #11.一次性切片刀及其配套部件

#12.切片刀和磨刀机 [# 11和12:两项皆配备或配备一项] 13.冰箱 14.恒温箱 15.烤箱

16.有关试剂和试剂柜 17.天平

18.染色用器具

19.普通光学显微镜(用于染色质量控制) 20.其他相关设备

(四)特殊染色和免疫组织化学染色实验室

1.用于染色的实验室环境设施和染色的常规设备[参见上文:(三)常规切片的预处理室和制片室]

2.微波炉或其他抗原修复设备 3.有关试剂和试剂柜

4.自动免疫组化染色仪(具有一定规模的病理科,酌情) 5.其他相关设备

(五)病理组织学诊断室和病理会诊室

1.双筒显微镜(每名病理医师配备一台)

*2.双头和/或多头显微镜(用于共览会诊和培训示教)

*3.计算机和打印机(酌情连接局域网,用于病理学检查资料的储存和调阅) *4.显微摄影设备,计算机图像分析、电子图像存储和放映设备 [* 2~4:具有一定规模的病理科配置] 5.远程会诊系统(酌情) 6.其他相关设备 (六)病理档案资料室

1.用于储存切片、蜡块和文字资料的柜具

2.计算机和打印机(酌情连接局域网,用于病理学检查资料的储存和调阅) 3.秘书办公设施(具有一定规模的病理科) 4.其他相关设备

(七)必要的专业参考书和基本的专业期刊(具有一定规模的病理科应设立 图书资料室)

(八)病理大体标本制作室和陈列室 1.制作病理大体标本的工具

2.用于陈列病理大体标本的展览柜(配备照明装置) 3.其他相关设备

(九)办公室:必要的办公设备 (十)储藏室:必要设施 (十一)淋浴室:必备设施

四、细胞病理学检查工作的基本设施 (一) 肿物穿刺取材室:

1.便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修 2.室内紫外线消毒设备

3.用于实施穿刺术的检查床、椅 4.穿刺用器械和器械柜

5.穿刺用、急救用药物和药品柜 6.其他相关设备

(二)细胞学涂片制片室:

1.用于染色的实验室环境设施和常规设备[参见本节的三(三)项:“常规切片的预处理室和常规/快速制片室”]) 2.可调速离心机

3.自动细胞病理学检查系统(具有一定规模的病理科,酌情) 4.其他相关设备

(三)细胞病理学诊断室:参见本节的三(五)项(病理组织学诊断室和病理会诊室)。

(四)独立设置(不隶属于病理科)的细胞病理学科室:需要其他必要空间的基本设备(参见本节的 “

三、病理科常规和快速活检工作的基本设备”)。

五、尸检工作的基本设施 (一) 尸检准备室

1. 尸检专用器械和柜具 2. 参与尸检人员用隔离用衣物和消毒器物 3. 办公设施 4. 消毒设施

5. 其他相关设备 (二) 普通尸检室

1.便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修 2.室内紫外线消毒设备 3.室内高效通风设施

4.设计合理、适用的尸检台[具有合于个人和环境防污染要求的上、下水系统(包括独立的污水排泄系统和污水处理池),便于清洗、消毒。] 5.适宜的照明装置 6.冷水和热水供给系统

7.阶梯式看台(示教用) 8.其他相关设备

(三)传染病用尸检室:严格按照关于传染病管理法规的要求建设。 (四)更衣/淋浴室:必备设施

(五)病理标本巨检和取材室[参见本节的三(二)项:“病理标本巨检和取材室”]

(六)常规切片室:隶属于病理科的尸检室可不另设(参见本节的三(三)项:“常规切片的预处理室和常规/快速制片室”) (七)标本储藏室:必要设施

六、病理学相关技术实验室的基本设施

应用特殊染色和组织化学、免疫组织化学、塑料包埋组织切片制备、电子显微镜超微病理诊断检材制备、图像分析、流式细胞分析(FCM)、聚合酶链反应(PCR)、细胞和分子细胞遗传学、病理学摄影技术和其他新开发、引进的病理学相关技术的病理科,应个根据有关技术要求,建立具有必备基本设施的实验室。

《临床技术操作规范•病理学分册》/ 第三章 病理学基本技术规范

第一节 病理组织学诊断检材的制备技术

一、组织的固定

㈠凡需要进行病理组织学检查的标本(器官或组织),于离体(活体或尸体)后,应尽快置放(浸泡)于装有足够量固定液的容器中固定。固定液量应为被固定标本体积的5~10倍。置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定,应适当大一些。临床科室切取的标本置放于容器中固定后,应尽快送交病理科继续固定。未能及时、充分固定的干涸或腐败标本不能再进行固定和用于制做切片。

㈡常规固定液为4%中性甲醛(10%中性福尔马林),应预先多量配制贮存,以备随时使用。小标本的固定时间为4~6小时,大标本为18~24小时或更久。 ㈢根据病理学特殊检查(特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位核酸分子杂交染色、电镜观察等)的需要,应选用其他适宜的固定液进行固定[参见后述的“㈦固定液的常用种类和制备”]。 ㈣器官、组织固定的基本方法 [另参见本章第四节(病理标本的肉眼检查和组织学切片取材技术)]

1.食管、胃、肠、胆囊、膀胱等空腔器官:依规范方法剪开后,按其自然状态平铺于硬纸板上(重点暴露黏膜面或内表面的病变处),并用大头针将标本边缘处固定于纸板上,然后放入4%中性甲醛中固定(黏膜面或内表面朝向容器的液面,并覆盖薄层脱脂棉)。

2.肝、脾:由器官背面,沿其长轴每间隔1.5~2.0cm纵向平行剖开,切成数片。将每片肝或脾轻轻地平放于装有4%中性甲醛的容器中,容器底面衬以脱脂棉。应避免标本弯曲和相互间的叠压。

3.肺叶:放入固定液中的肺叶漂浮于液面,需在肺表面覆盖薄层脱脂棉。必要时从支气管注入适量4%中性甲醛。

4.肾:沿肾外缘中线朝肾门方向作一水平切面(深达于肾盏),再行固定。 5.淋巴结:先用4%中性甲醛固定1小时后,再沿其长轴切成数片(厚2 ~3mm),继续固定。

6.骨组织:先锯成小片(若是长骨应作横向锯片),在4%中性甲醛中固定24小时后,再进行脱钙。

7.微小组织或液体沉淀物:先用拭纸或滤纸妥为包裹(需用大头针扎牢),然后放入专用小盒内进行中性4%甲醛固定,以防检材遗失。

8.凡进入固定程序的标本必须连带其正确无误的病理检验号(病理号)。 ㈤多数固定液对人体有害,需要防护,必须在封闭的通风条件下进行操作。 ㈥组织块的切取和固定:①由较大标本切取用于制作切片的组织块(取材)时,应与标本的断面平行,组织块厚度一般为0.3 cm(不应>0.5cm),面积一般在1~1.5×1~1.5以内。②切取组织块的形状,在充分包括肉眼病变的前提下尽量规则些(例如方形、矩形、三角形等);由一个标本切取的多块组织的形状有所不同,便于蜡块与其相应切片的核对。 ③固定组织块的固定液量,一般应为组织块总体积的5~10倍以上。④室内常温(25℃左右)下的固定时间为3~24小时;低温(4℃)下的固定时间应延长。⑤固定组织块的容器要大一些。⑥组织块固定期间需要间断地轻摇或搅动固定液以利于固定液的渗入。 ㈦常用固定液

1.4%中性甲醛(10%中性福尔马林)固定液

甲醛(40%) 100 ml 无水磷酸氢二钠 6.5g 磷酸二氢钠 4.0g 蒸馏水 900ml 2.乙醇-甲醛(酒精-福尔马林,AF)固定液 甲醛(40%) 100ml 95%乙醇 900ml [说明]一般组织块经乙醇-甲醛固定1~2小时后,即可移入95%乙醇内脱水。

3.Carnoy固定液 无水乙醇 60ml 氯仿 30ml 冰醋酸 10ml [说明]组织化学染色的常用固定液,组织经Carnoy液固定1~2小时后,即可移入无水乙醇中脱水。 4.Zenker固定液 升汞 5.0g 重铬酸钾 2.5g 硫酸钠 1.0g 蒸馏水(加至) 100ml [说明]配制本液时,先将升汞溶于蒸馏水中、加温至40~50℃溶解后,再加入重铬酸钾,最后加入硫酸钠,贮存待用。使用前加入5ml冰醋酸,混合。组织块需固定12~24小时。切片染色前,需进行脱汞沉淀处理。 5.Bouin固定液

饱和苦味酸水溶液(约1.22%) 75ml 甲醛(40%) 25ml 冰醋酸 5ml [说明]本液临用时配制。组织块置于Bouin液固定12~24小时即可(小块组织只需固定数小时)。经Bouin液固定的组织被苦味酸染成黄色,可用水洗涤12小时后进入乙醇脱水(兼脱色)。不必将组织中的黄色除净(残存于组织中的苦味酸无碍染色)

6.过碘酸-赖氨酸-多聚甲醛固定液(PLP) A液:赖氨酸 1.827g 蒸馏水 50ml 0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4) 50ml B液:8%多聚甲醛水溶液 100ml [说明]本液临用时配制:取A液3份、B液1份,混合后,加入过碘酸钠,使液体终浓度为2%。组织块在4℃下固定36~54小时。本液对细胞结构和抗原性保存较好。

7.B5(醋酸钠-升汞-甲醛)固定液 无水醋酸钠 1.25g 升汞 6.0g 蒸馏水 90ml [说明]将以上物质混合、溶解,使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。如不加甲醛称为B4固定液(蒸馏水为100 ml)。

8.丙酮固定液

冷丙酮(4℃)固定液用于酶组织化学染色。细胞标本的免疫组化染色也常用冷丙酮固定10分钟。

二、常规石蜡包埋组织切片(常规切片)的制备

㈠组织块依序进行:①水洗,②脱水,③透明,④浸蜡,⑤包埋和⑥切片。 ㈡组织切片制备及其HE染色过程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡等为 易燃、有毒物,必须专人管理,2m以内不得有明火,局部环境应有良好的通风和消防设施。

㈢常规切片的手工操作(步骤次序和各步骤的持续时间) 1.水洗:用流水冲洗已经固定的组织块30min。 2.脱水(常温下)

(1)乙醇-甲醛(AF)液固定 60~120min (2)80%乙醇 60~120min (3)95%乙醇Ⅰ 60~120min (4)95%乙醇Ⅱ 60~120min (5)无水乙醇Ⅰ 60~120min (6)无水乙醇Ⅱ 60~120min (7)无水乙醇Ⅲ 60min [注意事项]①未经充分固定的组织不得进入脱水程序。②用于脱水的试剂容积应为组织块总体积的5~10倍以上。③自低浓度乙醇向高浓度乙醇逐级移进脱水。④脱水试剂应及时过滤、更换(500ml乙醇可用于500个组织块脱水;加入硫酸铜的无水乙醇变蓝时,提示需要更换)。⑤较大组织块的脱水时间长于较小者,应将两者分开进行脱水。⑥组织置于无水乙醇内的时间不宜过长(以免硬化)。⑦丙酮脱水性能强,会使组织块过缩、硬脆,不宜用以替代无水乙醇。 3.透明

(1)二甲苯Ⅰ 20min (2)二甲苯Ⅱ 20min (3)二甲苯Ⅲ 20min [注意事项]①二甲苯的容积应为组织块总体积的5~10倍以上。②组织块在二甲苯中透明的时间不宜过长(以防组织硬、脆),并依不同种类组织及其大小而异;组织呈现棕黄或暗红色透明即可。③二甲苯应及时过滤、更换。④组织经二甲苯适度处理后不显透明时,常提示该组织的固定或脱水不充分,应查找原因并妥善处理。 4.浸蜡

(1)石蜡Ⅰ(45~50℃) 60min (2)石蜡Ⅱ(56~58℃) 60min (3)石蜡Ⅲ(56~58℃) 60min [注意事项]①熔化石蜡必须有专人负责,必须在熔蜡箱内或水浴中(70 ℃)进行,不得用明火加温。②熔蜡的容积应为组织块总体积的5~10倍以上。③组织块经二甲苯适度透明后方可转入浸蜡过程,应尽可能减少将透明后组织块表面的二甲苯带入熔蜡中。④浸蜡时间适宜,过短时浸蜡不充分(组织过软),过长时组织硬脆。⑤熔蜡应及时过滤、更换。 5.包埋

(1)先将熔化的石蜡倾入包埋模具中,再用加热的弯曲钝头镊子轻轻夹取已经过浸蜡的组织块,使组织块的最大面或被特别指定处的组织面向下埋入熔蜡中;应将组织块平正地置放于包埋模具底面的中央处;包埋于同一蜡块内的多块细小组织应彼此靠近并位于同一平面上;腔壁、皮肤和黏膜组织必须垂直包埋(立埋)。

(2)将与组织块相关的病理号小条置入包埋模具内熔蜡的一侧。

(3)待包埋模具内的熔蜡表面凝固后,即将模具移入冷水中加速凝固。

(4)从包埋模具中取出凝固的包埋蜡块(简称蜡快),用刀片去除组织块周围的过多石蜡(组织块周围保留1~2mm石蜡为宜)。将包埋蜡块修整成为规则的正方形或长方形。

(5)将病理号小条牢固地烙贴在蜡块一侧(编号应清晰可见)。 (6)把修整好的蜡块烙贴在支持器上,以备切片。 (7)使用包埋机的方法按有关厂商的说明书操作。 (8)注意事项

①应将组织块严格分件包埋。包埋时一定要首先认真核对组织块的病理号(包括亚号)、块数和取材医师对包埋面的要求,准确地包入相应的病理号小条。发生包埋差错时,必须立即与取材医师和病理科当班负责人取得联系,及时处置。

②必须严防各种异物污染,勿将无关组织(包括缝线、纸屑或其他异物(尤其是硬质异物)埋入蜡块内。

③包埋过程要操作迅速,以免组织块尚未埋妥前熔蜡凝固。

④包埋用的熔蜡应纯净,熔点适宜。浸蜡Ⅰ用软蜡(熔点为45~50℃),浸蜡Ⅱ、Ⅲ和包埋用蜡均用硬蜡(熔点为56~58℃)。 ⑤包埋用熔蜡使用前应将先静置沉淀、过滤。

⑥熔蜡时不得使用明火,以防燃烧。包埋用熔蜡的温度应<65℃;包埋用的镊子不可加温过高,以免烫伤组织。 6.切片

(1)切片刀或一次性切片刀片必须锋利。使用切片刀时,必须精心磨备(在低倍显微镜下确认刀刃无缺口);使用一次性切片刀片时,应及时更新。 (2)载玻片必须洁净、光亮。

(3)将切片刀或刀片安装在持刀座上(以15°为宜)。

(4)将蜡块固定于持支持器上,并调整蜡块和刀刃至适当位置(刀刃与蜡块表面呈5°夹角)。

(5)细心移动刀座或蜡块支持器,使蜡块与刀刃接触,旋紧刀座和蜡块支持器。

(6)修块(粗切):用右手匀速旋转切片机轮,修切蜡块表面至包埋其中的组织块完整地全部切到。修块粗切片的厚度为15~20μm。[注意:对于医嘱再次深切片(特别是在原切片中发现了有意义病变而进行的深切片),应尽量少修块,以尽量好地获得有关病变的连续性。]

(7)调节切片厚度调节器(一般为4~6μm),进行切片,切出的蜡片应连续成带,完整无缺,厚度适宜(3~5μm)、均匀,无刀痕、颤痕、皱折、开裂、缺损、松解等。

(8)以专用小镊子轻轻夹取完整、无刀痕、厚薄均匀的蜡片,放入伸展器的温水中(45℃左右),使切片全面展开。[注意:必须水温适宜、洁净(尤其是水面);每切完一个蜡块后,必须认真清理水面,不得遗留其它病例的组织碎片,以免污染。]

(9)将蜡片附贴于涂有蛋白甘油或经3-氨丙基-三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxy silane,APES)处理过的载玻片上(HE染色时酌情使用,可省略,必要时)。蜡片应置放在载玻片右(或左)2/3处的中央,留出载玻片左(或右)1/3的位置用于贴附标签。蜡片与载玻片之间无气泡。

(10)必须立即在置放了蜡片的载玻片一端(待贴标签的一端),用优质记号笔或刻号笔准确、清楚标记其相应的病理号(包括亚号)。[注意:必须确保载玻片上的病理号与相关组织石蜡包埋块的病理号完全一致,不得错写或漏写病理号。]

(11)将置放了蜡片的载玻片呈45℃角斜置片刻;待载玻片上的水分流下 后,将其置于烤箱中烘烤(60~62℃,30~60min),然后即可进行染色。 (12)注意事项 ①组织块固定、脱水、透明和浸蜡的质量直接影响切片制备。切片过程中遇到的困难首先应注意从切片前的上述各环节中寻找原因。

②切片机的质量是制备优质切片的重要前提。要使用质量好的切片机,规范地切片,精心维护切片机。

③经由内窥镜、穿刺等获取的细小组织,应间断性连续切片多面(一般至少制备6张蜡片,必要时制备更多张)。需作特殊染色、免疫组化染色等的病例,可预制蜡片备用。

④切片人员应细心操作,防范被切片刀具割伤。

㈣常规切片的自动组织处理机操作(步骤次序和各步骤的持续时间,总计需要14小时)

1.乙醇-甲醛(AF)固定液 2×60min 2.95%乙醇Ⅰ 2×60min 3.95%乙醇Ⅱ 2×60min 4.无水乙醇Ⅰ 60min 5.无水乙醇Ⅱ 60min 6.二甲苯Ⅰ 30min 7.二甲苯Ⅱ 30min 8.石蜡Ⅰ 30min 9.石蜡Ⅱ 60min 10.石蜡Ⅲ 90min 11.包埋

(1)手工常规包埋:参见上述的“㈠手工操作”项。 (2)用组织包埋机时,按有关厂商说明书的规定操作。 13.切片:参见上述的“㈠手工操作”项。 14.注意事项

(1)必须按有关说明书的规定,使用和维护自动组织处理机、包埋机、磨刀机、封盖玻片机等仪器等。

(2)要严防因停电、机械故障等造成的组织块损坏。一旦发生此类事故,必须及时向科主任报告,尽快采取应急措施妥善处置。

(3)使用自动组织处理机时:①合理设定的运行时间(充分利用夜间)。②固定、脱水的环境温度不得>30℃。③乙醇、二甲苯和熔蜡的容积,要大于组织块总体积的5~10倍以上,并应经常过滤,保持清洁;应经常检查试剂的浓度,及时更新。④对于多量组织块,可按其大小分批进行处理;小块组织可适当缩短处理时间。

三、快速石蜡包埋组织切片的制备 ㈠煮沸固定切片法

1.固定:切取大小适宜(厚度<2mm)的组织块,尽快置入装有5~8ml 10%中性4%甲醛的试管中煮沸1min,然后已入冷水中。 2.脱水

(1)将已经煮沸固定的组织块取出,用刀片将其厚度修切至<1.5mm,随 即置入盛有5~8 ml丙酮的试管中,煮沸2 min,然后将丙酮倾弃。

(2)再向该试管中重新加入5~8 ml丙酮并煮沸2min。如此重复3~4次。 3.浸蜡:将已经丙酮脱水的组织块由试管中取出,用吸水纸去除其表面液体,随即置入75~80℃熔化的石蜡中,待组织块下沉、不再出现气泡时(约需30s),即可包埋。 4.包埋、切片和染色。

(1)用热镊子将预制的蜡块表面熔化,埋入已经浸蜡的组织块。

(2)待埋入组织块的蜡块表面凝固后,即用载玻片轻压蜡块表面片刻,使 蜡块表面平整。

(3)将蜡块置入冰水中,使其变硬。

(4)迅速切片,裱片后用吸水纸去除载玻片上的水分。 (5)将载玻片用火焰烘干(勿距火焰太近)。 (6)迅速进行HE染色。 5.注意事项

(1)为了尽量缩短制片时间,必须预先作好有关准备工作,备齐取材用具、试管、固定液、丙酮、酒精灯、火柴(或其他引火器)、包埋用蜡块、载玻片和染色试剂等,放在固定部位待用。

(2)全部制片过程一般在20~25min内完成。

(3)制片后剩余组织块应作常规石蜡包埋切片染色,进一步诊断。 (4)含脂肪较多的组织,须经多次丙酮处理。

(5)用于组织固定、脱水、透明的试剂和浸蜡用的石蜡应及时过滤、更换。 (6)丙酮、乙醇、二甲苯等为易燃物,进行上述各项流程时,2m距离内不得存在明火。加温脱水和浸蜡过程必须应用隔水温箱,不得使用干烤箱操作。 ㈡超声波快速处理仪石蜡切片法(参照有关厂商的说明书操作)。

四、冷冻组织切片的制备

㈠应用恒冷箱切片机制备切片:是目前最适用方法。恒冷箱切片机种类较多,应严格按有关厂商的说明书操作。用于切片的标本必须未曾固定。 ㈡应用开放式冷冻切片机制备切片 1.二氧化碳制冷切片

(1)将组织块放在冷冻台上,滴加OCT或羟甲基纤维素液于组织块周围(将组织块包埋),使固定在切片机上的切片刀接近组织块表面。

(2)间断开放液态二氧化碳桶的开关,喷冻组织块和切片刀,使组织块冻结和切片刀制冷。

(3)迅速移动切片刀进行切片:先将组织块修平,然后调节厚度至8~12μm处进行切片。

(4)用毛笔将切片展开,贴附于载玻片上,稍干后,置于冷冻切片固定液中固定1min,随即进行HE染色。也可用毛笔将切片托入水中,再用玻璃弯针将切片移至染色皿中进行染色。

(5)组织块也可先在4%中性甲醛中煮沸固定1min,水洗后再行冷冻切片。 2.半导体致冷切片

(1)切片刀与持刀器之间要间隔一层云母片或硬纸片。将冷刀致冷器粘在刀面上。

(2)将组织冷冻台安装在半导体切片机上。

(3)将冷冻台和切片刀致冷器上的导线连接在控制台直流电源上(注意:正负电极不可接反)。

(4)连接致冷器的冷却水管并开始放水,然后开启电源;冷却水管中的水流量不宜过大,在使用过程不得断水。

(5)调整冷冻温度调节器,至切片刀和冷冻台呈现霜冻。 (6)将新鲜组织块或已固定的组织放在冷冻台中央,滴加水或OCT,或用水调成糊状的甲基纤维素于组织块周围(将组织块包埋)。 (7)待组织块冷冻适当后,进行切片。

(8)对于未经固定的新鲜组织,用毛笔将制作满意的切片展平,立即裱贴于盖玻片或载玻片上,待冷冻的切片刚要融化时,立即将其置于冷冻切片固定液中固定1min。对于已经固定的组织块,可用毛笔将制作满意的切片托入水中,再用玻璃弯针将切片移至染色皿中进行染色。

(9)切片完毕后,先关闭电源,再关闭冷却水,待冰霜融化后擦干机器,加罩。

3.甲醇致冷切片(按有关厂商的仪器说明书操作)。 4.氯乙烷致冷切片

(1)将新鲜的或已经固定的组织块置于支持器中央,加少许水或OCT。

(2)连续喷射氯乙烷于组织块上,待组织块冻结后,改为间歇喷射,使冻结适度,立即切片。使用氯乙烷时应注意防火、防爆。

(3)进行组织切片的裱贴、固定和染色(与上述方法相同)。 ㈢注意事项

1.制作冷冻切片所需的试剂和设备等应处于随时可供使用状态。

2.切取的组织块大小适宜(厚度<2mm),并尽快置于冷冻组织切片机上制备切片。

3.调节冷冻程度,试切合适时便迅速切片。冷冻不足无法切片,冷冻过度 切片易碎。

4.冷冻切片固定液 (1)乙醚-乙醇液

无水乙醚 1份 95%乙醇 1份

(2)乙醇-冰醋酸液

95%乙醇 100ml 冰醋酸 3~5滴

五、脱钙方法

骨和其他钙化组织,通常需要脱去钙盐后进行切片。骨组织脱钙前需先行固定。

㈠常规脱钙法:

1. 将骨组织锯成薄片(约1×1×0.3cm)。 2. 在AF中或4%中性甲醛中固定6~12h。

3. 将骨片置于5%硝酸(急需时可置于37℃温箱)中脱钙,至用针轻刺可 入时为止,约需12~24h(小块骨组织脱钙仅需2~3h),其间可更新脱钙液2~3次。

4. 流水冲洗1~2h。

5. 移入5%甲明矾液,2~4h。 6. 流水冲洗2~3h。 7. 按常规脱水。 8.石蜡包埋。 ㈡电解脱钙法:

将骨片置于装有8%硝酸和10%甲酸混合液的电泳槽(有盖的方形玻璃标本 缸或烧杯)内的阳极处,6V直流电源下持续电解30min~3h,至用针轻刺可入时为止。

㈢骨髓组织脱钙:可浸泡于苦味酸乙醇饱和液(占85%)、甲醛(占10%)和冰醋酸(占5%)的混合液中(同时进行固定和脱钙)。 ㈣注意事项

1.骨片等脱钙组织的厚度适宜。

2.脱钙组织与脱钙液的体积比>1:30。

3.脱钙过程中应不时摇动,多次更换脱钙液。 4.脱钙时间不可过长。

5.微波处理可加速脱钙过程。

6.脱钙后的组织必须用流水充分冲洗。

7.用于包埋的石蜡硬度适中(不要过软或过硬)。

六、苏木素-伊红(HE)染色

HE染色是应用最广泛的组织病理学常规染色技术。 ㈠染色程序

1.石蜡切片HE染色(常规HE染色)

(1)二甲苯Ⅰ 5~10min (2)二甲苯Ⅱ 5~10min (3)无水乙醇Ⅰ 1~3min (4)无水乙醇Ⅱ 1~3min (5)95%乙醇Ⅰ 1~3min (6)95%乙醇Ⅱ 1~3min (7)80%乙醇 1min (8)蒸馏水 1min (9)苏木素液染色 5~10min (10)流水洗去苏木素液 1min (11)1%盐酸-乙醇 1~3s (12)稍水洗 1~2s (13)返蓝(用温水或1%氨水等) 5~10s (14)流水冲洗 1~2min (15)蒸馏水洗 1~2min (16)0.5%伊红液染色 1~3min (17)蒸馏水稍洗 1~2s (18)80%乙醇 1~2s (19)95%乙醇Ⅰ 2~3min (20)95%乙醇Ⅱ 2~3min (21)无水乙醇Ⅰ 3~5min (22)无水乙醇Ⅱ 3~5min (23)石炭酸-二甲苯 3~5min (24)二甲苯Ⅰ 3~5min (25)二甲苯Ⅱ 3~5min (26)二甲苯Ⅲ 3~5min (27)中性树胶封固

注:①(12)和(13)项可省去,但(14)的冲水时间需延长至10~15min(细胞核显示更清晰)。

②(23)项可用无水乙醇代替;北方地区可省略。 2.冰冻切片HE染色

(1)冰冻切片固定 10~30s (2)稍水洗 1~2s (3)苏木素液染色(60℃) 30~60s (4)流水洗去苏木素液 5~10s (5)1%盐酸-乙醇 1~3s (6)稍水洗 1~2min (7)返蓝(用温水或1%氨水等) 5~10s (8)流水冲洗 15~30s (9)0.5%伊红液染色 1~2min (10)蒸馏水稍洗 1~2min (11)80%乙醇 1~2min (12)95%乙醇 1~2min (13)无水乙醇Ⅰ 1~2min (14)无水乙醇Ⅱ 1~2min (15)石炭酸-二甲苯 2~3min (16)二甲苯Ⅰ 2~3min (17)二甲苯Ⅱ 2~3min (18)中性树胶封固

注:①(7)和(8)项可省去,但(9)的冲水时间需延长至10~15min(细胞核显示更清晰)。

②(15)项可用无水乙醇代替;北方地区可省略。

㈡染色结果:细胞核呈蓝色,细胞浆、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色。钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色。 ㈢染色注意事项

1.切片染色前,应彻底脱蜡。

2.用含有升汞液体固定的组织,其切片染色前应先脱去汞盐: (1)石蜡切片脱蜡至水洗

(2)Lugol液 20min (3)流水冲洗 5min (4)95%乙醇 10min (5)水洗 1min (6)5%次亚硫酸钠水溶液 5min (7)流水冲洗 5min (8)显微镜观察除汞满意后,转入HE染色 3.脱除福尔马林色素(必要时): (1)石蜡切片脱蜡至水洗

(2)1%NaOH(1ml)与80%乙醇(99ml)混合液 10min (3)流水冲洗 5min (4)转入HE染色

4.严格执行HE染色流程,用显微镜控制细胞核的苏木素染色质量。HE染片应着色鲜艳,红、蓝分明,对比清晰。 5.载玻片自二甲苯中取出后,应立即用洁净、光亮的盖玻片和稠度适宜的中性树胶湿封载玻片。封盖处内无气泡,外无溢胶。封片时必须进行操作人员和局部环境的二甲苯污染防护。不应将组织切片烤干或风干后再行封片。

6.必须在载玻片的一端牢贴标签。标签上应印有病理科所在的医院名称。标签上应清楚显示有关的病理号及其亚号;标签上的病理号应准确无误,无涂改。 7.制片完成后,技术人员应对切片与其相应的病理学检查记录单或取材工作记录单认真进行核对;确认无误后,将制备好的切片连同相关的活检申请单/活检记录单以及取材工作单等一并移交给有关的病理医师;交接双方经核对无误后,办理移交签字手续。

8.石蜡切片-HE染色的优良率(甲、乙级切片所占的比率)应≥85%。石蜡切片-HE染色质量的基本标准列于附表。

9.制片工作一般应在取材后2个工作日内完成(不含进行脱钙、脱脂等需要特殊处理的标本)。

10.制片过程出现意外情况时,技术室人员应及时向病理医师和科主任报告,设法予以补救。

附表 常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准

优 质 标 准

满 分 质 量 缺 陷 减 分

⒈组织切面完整, ①组织稍不完整:减1~3分 ②不完整:减4~10分

内镜咬检、穿刺标本切面数 10 ③未达到规定面数:减5分

⒉切片薄(3~5μm),厚薄均匀 10 ①切片厚(细胞重叠),影响诊断:减6~10分

②厚薄不均匀:减3~5分

⒊切片无刀痕、裂隙、颤痕 10 ①有刀痕、裂隙、颤痕,尚不影响诊断:减2分

②有刀痕、裂隙、颤痕,影响诊断:减5分

⒋切片平坦,无皱褶、折叠 10 ①有皱褶或折叠,尚不影响诊断:各减2分

②有皱褶折或折叠,影响诊断:各减5分

⒌切片无污染 10 有污染:减10分

⒍无气泡(切片与载玻片间/ 10 ①有气泡:减3分 盖片与切片、载玻片间), ②胶液外溢:减3分

盖片周围无胶液外溢

⒎透明度好 10 ①透明度差:减1~3分

②组织结构模糊:减5~7分

⒏细胞核与细胞浆染色对比清晰 10 ①细胞核着色灰淡或过蓝:减5分

②红(细胞浆)与蓝(细胞核)对比不清晰:减5分

⒐切片无松散,裱贴位置适当 10 ①切片松散:减5分

②切片裱贴位置不当:减5分

⒑切片整洁, ①切片不整洁:减3分

标签端正粘牢,编号清晰 10 ②标签粘贴不牢:减3分

③编号不清晰:减4分

合 计 100

切片质量分级标准: ①甲级片: ≥90分 (优)

②乙级片:75~89分(良)

③丙级片:60~74分(基本合格)

④丁级片: ≤59分 (不合格)

㈣HE染色试剂的配制 1.苏木素染液

(1)Harri苏木素染液

苏木素 1g 无水乙醇 10ml 硫酸铝钾 20g 蒸馏水 200ml 氧化汞 0.5g 冰醋酸 8ml 先用无水乙醇溶解苏木素,用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾;然后将该两液合并煮沸,加入氧化汞,继续加热和搅拌溶液至深紫色,随即用冰水冷却,恢复至室温后过滤备用。使用前加入冰醋酸并混匀、过滤。

(2)Gill改良苏木素液

苏木素 2g 无水乙醇 250ml 硫酸铝钾 17g 蒸馏水 750ml 碘酸钠 0.2g 冰醋酸 20ml 先用无水乙醇溶解苏木素,用蒸馏水溶解硫酸铝钾;然后将该两液混合,再依次加入碘酸钠和冰醋酸。使用前过滤。

(3)Mayer改良苏木素液

A液:苏木素 2g 无水乙醇 40ml B液:硫酸铝钾 100g 蒸馏水 600ml 将苏木素溶于无水乙醇中(A液);稍加热,使硫酸铝钾溶于蒸馏水中(B液)。将A液与B液混合后煮沸2min,再用蒸馏水补足至600 ml,加入400mg碘化钠充分混匀。染液呈紫红色。 2. 盐酸-乙醇分化液

浓盐酸 1 ml 70%乙醇 99 ml 3.伊红液

(1)0.25~0.5%伊红Y水溶液

伊红Y 0.25~0.5 g 蒸馏水 100 ml 冰醋酸 1滴

(2)0.5%伊红Y-氯化钙水溶液

伊红Y 0.5 g 蒸馏水 100 ml 无水氯化钙 0.5 g (3)0.25~0.5%伊红Y-乙醇溶液。

伊红Y 0.25~0.5 g 80%乙醇 100 ml 4.石炭酸-二甲苯混合液

石炭酸 1份 二甲苯 3份 第二节 细胞学诊断检材的制备技术

一、细胞涂片、组织印片和压片的制备

(一)涂片质量的基本要求

1.将检材涂布于载玻片的右(或左)2/3处,另1/3部位粘贴标签。 2.单向涂布检材,避免细胞变形。 3.均匀涂布检材,涂片厚薄适当。

4.红细胞过多的涂片,可酌情进行溶解红细胞处理。

(二)涂片方法

1.涂抹法:用棉签或针头将标本单向、均匀地涂抹于载玻片上。 2.拉片法:将一滴检材置于一张载玻片上,再用另一张载玻片叠加其 上并予轻压,再将该两张载玻片朝反向拉动,从而获得两张涂片。 3.推片法:将一滴检液置于载玻片的右端,再用另一张窄边光滑的载

玻片作为推片,并以与滴液载玻片成40°夹角、自右向左匀力推动检液,形成涂片。

(三)痰涂片的制作

1.送检的痰液应是由肺内咳出,最好是清晨空腹时自肺内深咳出的痰液。 2.核查无误的收验痰液,应立即制作涂片(通常为2~3张)。 3.用细签或无钩镊子挑取痰液置于载玻片上,并左右往复薄涂,随即投入固定液中。

4.痰液中呈现下列性状的成分可能含有癌细胞,应注意挑取制作涂片:①血丝;②灰白色痰丝(形如白色细线,微细螺旋状,牵引时可伸长);③透明痰液(可拉成较长细丝)。[及时在细胞学检查申请单上记录痰液性状] 5.检查痰液中的肿瘤细胞,一般应连续送检3次。

(四)黏膜、皮肤表面刮取(刷取、拉取)物和分泌物的涂片的制作

1.阴道排出物、子宫颈刮取物涂片:通常由妇产科医师将已制作、固定后的涂片送交病理科检查。[注意由子宫颈外口上皮移行带刮取细胞涂片]

2.支气管镜、胃镜等内腔镜的黏膜刷取物涂片(黏膜刷片):刷片通常由内腔镜医师制作、固定后送交病理科检查。

3.食管、胃拉网涂片:由食管拉出的套网气囊适量放气后,将气囊套网在载玻片滚动涂片,尤应将套囊上血丝、灰白色物制作涂片;涂片通常由有关临床医师将已制作、固定后的刷片送交病理科检查。套网中的小块组织可用来制作石蜡包埋切片。

4.眼、耳、鼻、咽、口腔、皮肤等处病变(溃疡性病变等)的分泌物涂片。

(五)液体涂片的制作

液体标本(检材)包括乳头溢液、胸水、腹水、尿液、胃液、脑脊液、穿

刺液、冲洗液、灌注液等。除乳头溢液外,其他液体检材一般均应先行离心(2000r/min,10~20min)后,取其沉淀物制作涂片;液体检材也可用细胞涂片离心机(cytospin)直接制作细胞涂片。制作好的涂片应立即固定和染色。[及时在细胞学检查申请单上记录液体标本的性状和数量]

液体标本的离心沉淀物较多时,将制作涂片后剩余的沉淀物固定于4%中性甲醛中1h,然后用檫镜纸或绸布将其包裹,制作石蜡包埋切片。 1.乳头溢液:直接滴于载玻片上制作涂片。

(1)患者乳腺触及肿物时:用手指自肿物远方沿乳腺导管引流方向轻力按 模挤压,获取溢液,宜取中段溢液和血性溢液涂片。

(2)患者乳腺未触及肿物时:可自乳晕周围向乳腺外周轻力按模挤压,获取溢液。

2.胸水和腹水

(1)由患者体内抽取的胸水或腹水应尽快送交病理科验收,检液量以200~500ml为宜。因故(例如远途)延时送达时,需在标本中加入40%的甲醛(加入量为送检胸水、腹水量的1/5),或加入等量的50%乙醇-生理盐水。

(2)胸水、腹水的离心:采取容器底部的液体10ml(包括可能存在的沉淀物),移入离心管内进行离心。

(3)离心后,倾去全部上清液,将离心管底部含有沉淀物的液体摇匀并用吸管吸出适量,滴注于载玻片上,制作涂片。 3.尿液

(1)制作方法同胸、腹水。

(2)尿液含有胶状物时,应先将其除去。清除方法:用0.5ml/L氢氧化钠调节尿液Ph至6.0;离心后,倾去上清液,再向沉淀物中加入95%乙醇5~10ml/L(固定细胞),静置5min后加入蒸馏水并轻摇(溶去胶状物);再次离心后,取沉淀物制作涂片。检查尿液中的肿瘤细胞,一般应连续送检3次。 4.胃液、胃冲洗液:制作方法同胸、腹水。 5.脑脊液

(1)制作方法同胸、腹水。

(2)脑脊液内细胞一般较少,可用微孔滤膜过滤法、沉淀法或纤维捕捉法收集细胞,制作涂片。

6.冲洗液、灌洗液、穿刺液涂片的制作:参见上述的胸水、腹水项。

二、肿物细针穿刺物涂片的制备

(一)实施细针穿刺术前的准备工作

1.实施细针穿刺术的病理医师应先了解患者临床情况,向患者和/或患者授权人说明实施穿刺术的意义、局限性和其他相关问题等,取得患者和/或患方的知情和理解,并签署由各医院制订的《申请实施细针穿刺术细胞病理学诊断患方知情同意书》。

2.合格的手术操作环境。

3.必备的适用手术器械和其他相关设施。

(二)肿物穿刺术的操作要点:

1.确认肿物部位并估计其大小、与皮表距离和质地(实/囊性、硬度等),以指导穿刺的方向、深度和用力程度。 2.必须严格实行无菌操作。

3.根据肿物大小及其血供情况选择适用型号的穿刺用针头。穿刺用针头的外径为0.6~0.9mm,安置在2ml或10ml的一次性空注射器上。 4.针吸法穿刺术操作要点

(1)进行穿刺前,先将安装了穿刺用针头的空注射器管芯外拉2cm;然后,用手固定肿物,将安装在空注射器上的穿刺用针头刺入肿物(注射器内无空气)。

(2)迅速上下提插注射器管芯10~20次(其间变换针头方向3~4次),遂使肿物不同部位的多较内容吸进入针头和注射器内。

(3)将注射器与针头分离(管内负压因而解除);随后,再将该注射器与仍插于肿物内的针头相接,拔出针头,穿刺结束。

(4)迅速推动注射器的管芯,尽快地将位于穿刺针头内的少量吸出物排射在2~3张清洁的载玻片上,进行涂片。

5.涂片方法:用针头将载玻片上的吸出物轻轻均匀拨开,或用推片法朝一个方向展开(不可双向往返推移)。

6.吸出物过少时,可用向离心管内冲洗穿刺针头;再将冲洗液离心,然后取其沉淀物涂片[参见上述一

(五)项“液体涂片的制作”]。

7.吸出物较多时,可适量50%乙醇-生理盐水液将涂片后注射器和针头内剩余的吸出物冲洗至离心管中,离心后,取其沉淀物制作常规石蜡包埋切片。 8.吸出物中含有细小组织块时,应将其制作常规石蜡包埋切片。

9.内脏肿物穿刺时,必须在影象学检查的引导下用较长细针进行穿刺。 10.穿刺操作完成后,即在细胞病理学检查单上书写穿刺记录。

三、组织印片、压片的制备

(一) 组织印片:

1.用锋利刀片剖开刚切取的新鲜肿瘤组织或淋巴结等,然后用清洁载玻片轻压于组织剖面处,将组织表面的细胞成分印在玻片上。用稍微加温的载玻片制备印片时,可印得较多细胞。

2.制作淋巴结印片前,应先用滤纸吸去淋巴结切面上的血液、组织液。

(二)压片:

1.选取微小薄片组织平铺于一张载玻片上,再用另一张载玻片叠加其上并予轻压。

2.脑组织质软,易于制作压片;稍硬的组织需切成细碎薄片制作压片。

四、涂片的固定

(一)用于HE染色和巴氏染色的涂片必须湿固定,即涂片后立即进行固定。乳头溢液涂片和液体标本离心沉淀物涂片,应待涂膜潮干(即周膜稍干而其中央区域未干)时进行固定。用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆萨染色和免疫细胞化学染色的涂片,必须干固定,即待涂片稍干后再进行固定。

(二)固定液

1.乙醇-冰醋酸液:95%乙醇∶冰醋酸=99∶1。常用。

2.乙醇-乙醚液:95%乙醇49.5ml, 乙醚49.5ml, 冰醋酸1ml。较常用。 3.甲醇:滴加在干燥涂片上,用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆萨染色 和免疫细胞化学染色。

4.丙酮:适用于酶类染色。

5.Carnoy液:由无水乙醇、氯仿、冰醋酸按6:3:1比例混成,适用于显

示核酸、糖原、黏液染色。涂片在Carnoy液固定3~5min后,应移入95%乙醇中继续固定。

6.对于液体标本的离心沉淀物、食管拉网获取的小块组织或吸出物中的细小组织块等,固定于4%中性甲醛液中1h,然后制作常规石蜡包埋切片。

(三)固定方法 1.浸入法:

(1)将稍为干燥(不能完全干燥)的涂片直接浸泡于固定液内至少15 ~ 30min。

(2)因细胞容易脱落,宜以一个盛有固定液的容器只固定一例标本的涂片;一个容器固定多例涂片时,有可能造成的肿瘤细胞交叉污染。 (3)必要时可将标本涂在硅化载玻片上,以防脱落。 (4)固定液重复使用时,应先用滤纸过滤。

(5)95%乙醇固定液多次重复使用时,需测定其浓度比重,乙醇浓度低于90%时应予弃用。

2.滴加法:将固定液滴加于平放的干燥涂片上,应避免因固定液挥发造成沉淀。

(四)固定后未染色涂片的保存或邮寄:涂片固定15min后取出,立即滴加数滴甘油于涂膜上。对该涂片进行染色前,应先将其置于95%乙醇中溶去甘油。

五、涂片的染色

最常用于细胞病理学涂片检查的是苏木素-伊红(HE)染色和巴氏染色。 一些特殊染色、组织化学染色和免疫组织化学染色也用于细胞病理学的涂片检查(参见第4章第

一、二节)。

(一)苏木素-伊红(HE)染色(参见本章第一节的“六”项)。

(二)巴氏(Papanicolaou)染色

巴氏染色时,细胞透明度好,细胞结构清晰,色彩丰富而鲜艳,主要用于妇科细胞学涂片、痰涂片和富含鳞状上皮细胞的涂片检查。 1.试剂配制

(1)Harri苏木素液(参见本章第一节的“六”项) (2)盐酸-乙醇液

浓盐酸 1ml 70%乙醇 99ml (3)橙黄G6液

橙黄G6 0.5g 蒸馏水 5ml 无水乙醇 95ml 磷钨酸 0.015g 先将橙黄G溶于蒸馏水中,再加入无水乙醇,然后加入磷钨酸。

(4)EA36染液

①EA36储备液

A液:亮绿0.5g,溶于5ml蒸馏水中,溶解后加入无水乙醇至100ml。 B液:伊红0.5g,溶于5ml蒸馏水中,溶解后加入无水乙醇至100ml。 C液:俾士麦棕0.5g,溶于5ml蒸馏水中,溶解后加入无水乙醇至100ml。

②EA36工作液

EA36储备液的A液 45 ml EA36储备液的B液 45 ml EA36储备液的C 液 10 ml 磷钨酸 0.2 g 碳酸锂饱和水溶液 1 滴 2.染色程序

(1)将已经固定的涂片置于80%乙醇中2 min。

(2)蒸馏水洗2 min。

(3)苏木素液染核10~12 min,自来水洗。

(4)盐酸-乙醇液分化约20~30s,至涂片呈淡橙红色。

(5)流水冲洗10~15min,蒸馏水洗。

(6)依次用80%、95%乙醇脱水,各2min。

(7)橙黄G6液染色3~5min。

(8)95%乙醇洗2~3次,洗去多余染液。

(9)EA36工作液染色3~5 min。

(10)95%乙醇洗2~3次,洗去多余染液。

(11)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。

3.染色结果:细胞核呈深蓝色,核仁呈红色;不同分化类型的鳞状上皮细胞,其胞浆颜色各异:角化细胞呈粉红色,不全角化细胞呈橙黄色,角化前细胞呈淡蓝或淡绿色;红细胞呈橙红或鲜红色,白细胞的胞浆呈淡蓝绿色;粘液呈淡蓝或粉红色。

(三)瑞氏(Wright)染色

瑞氏染色一般用于血液涂片,也可用于检查肿瘤细胞。 1.试剂配制

(1)瑞氏染液

瑞氏染料 1g 甲醇 600ml 将瑞氏染料放入研钵内,加入适量甲醇与之混合研磨,使染料逐渐溶解。将溶解的染液倾入另一玻璃瓶内,然后再加入适量甲醇继续研磨;未溶解的染料如此反复多次,直至染料完全溶解、甲醇用完为止。染液避光保存备用。

(2)磷酸盐缓冲液

无水磷酸氢二钠 6.5g 磷酸二氢钠 4g 蒸馏水 1 000ml pH:6.5~7.0 2. 染色程序

(1) 涂片自然干燥。

(2)滴加瑞氏液染色1min。

(2) 滴加等量的磷酸缓冲液,轻轻摇荡玻片或用洗耳胶球在玻片上轻轻吹 气,使两液体混合均匀,持续10~15min。 (4)流水洗去染液。

(5)涂片风干后,二甲苯透明,中性树胶封片。

3. 染色结果:胞核呈紫红色,胞浆呈紫蓝色,粘液呈粉红色或淡蓝色。

(四)May-Grünwald-姬姆萨(Giemsa)染色

May-Grünwald-姬姆萨染色适用于造血系统的细胞涂片和鉴别恶型淋巴瘤的类型。May-Grünwald原液和姬姆萨原液配制繁琐,可直接购买。 1.试剂配制

(1) May-Grünwald工作液

May-Grünwald原液 1份

蒸馏水 6~10份

使用前配制。

(2)姬姆萨工作液

姬姆萨原液 1份 蒸馏水 6~10份

使用前配制。 2.染色程序

(1)涂片自然干燥,蒸馏水洗1~2min。 (2)May-Grünwald工作液染15~30min。

(3)自来水冲洗,洗去载玻片上的染液,蒸馏水稍洗。

(4)姬姆萨工作液染15~30min。

(5)自来水冲洗,洗去载玻片上的染液。

(6)涂片风干后,二甲苯透明,中性树胶封片。 3.染色结果:胞核呈紫红色,胞浆和核仁呈蓝紫色。

(五)Rakoff染色

Rakoff染色用于阴道细胞学涂片快速测定雌激素水平。 1. 试剂配制

(1)5%淡绿水溶液 83ml (2)1%伊红水溶液 17ml 将两液混合后使用。 2.染色程序

(1)用细胞刷沿阴道侧壁刷取黏膜鳞状上皮细胞,放入装有1~2ml生理盐水的试管内。 (2)在试管内滴入3滴Rakoff染液,用细胞刷在染液中轻摇混合。

(3)将1~2滴混合液滴于载玻片上,制成涂片。 (4)待涂片干燥后,用中性树胶封片。

染色结果:鳞状上皮细胞的嗜酸性和嗜碱性胞浆区分明显。角化前细胞的核呈网状,角化细胞的固缩核呈基本不着色的空泡状。

(六)猩红-固绿染色

猩红-固绿染色用于显示性染色体。 1.试剂配制 (1) 猩红染液

水溶性比布里西猩红 1.0g 磷钨酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%酒精 100ml (2)固绿染液: 固绿 0.5g 磷钼酸 0.3g 磷钨酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%乙醇 100ml 2. 染色步骤

(1)涂片经95%乙醇固定后,置于70%乙醇中2min。

(2)猩红染液中5min。 (3)50%乙醇中漂清多余染液。

(4)固绿染液中分化2~5h。每小时在显微镜下观察胞浆和网状核膜是否呈现绿色;如果绿色满意,立即取出涂片(一般约需4h)。固缩核呈鲜红色。

(5)50%乙醇中5min。

(6)依次置于70%、95%和无水乙醇中各2min。

(7)置于二甲苯溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中透明,各2min。

(8)中性树胶封片。

染色结果:胞核呈淡绿色;性染色质呈粉红色、V字形或贴着于细胞膜呈三角形。在性染色质周围可见空泡。

(七)Fouchet染色

Fouchet染色用于显示胆色素。 1.染液配制 Fouchet染液

A液:25%三氯醋酸水溶液 B液:10%三氯化铁水溶液

A、B液皆小量新鲜配制为宜。 使用时,取A、B液各30ml混匀(当天使用)。

2.染色步骤

(1)涂片经95%酒精固定后,置于蒸镏水中漂洗。

(2)Fouchet液中染5min。

(3)蒸镏水Ⅰ、Ⅱ中各1min。

(4)苦味品红溶液中染5min。 (5)95%乙醇Ⅰ、Ⅱ中漂洗。

(6)无水乙醇Ⅰ、Ⅱ中脱水。

(7)二甲苯Ⅰ、Ⅱ中透明,中性树胶封片。

3.染色结果:胆色素呈橄榄绿色,胶原纤维呈红色,涂片背景呈黄色。

(八)硫酸亚铁染色

硫酸亚铁染色用于显示黑色素。 1.试剂配制

(1)2.5%硫酸亚铁水溶液 (2)铁氰化钾醋酸液 铁氰化钾 1g 蒸馏水 99ml 冰醋酸 1ml (3)1%冰醋酸水溶液

(4)核固红液[参见第4章第一节的八

(三)项(爱先蓝法)] 2.染色程序

(1)涂片经95%酒精固定后,置于蒸镏水中漂洗1~2min。 (2)2.5%硫酸亚铁溶液中1h。

(3)蒸镏水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中漂洗,各1min。 (4)铁氰化钾醋酸液中30min。 (5)1%冰醋酸液中1min。 (6)蒸镏水漂洗。

(7)核固红液中染1~2min。 (8)蒸镏水漂洗。

(9)依次95%乙醇、无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。 3.染色结果:黑色素呈深绿或深蓝色,涂片背景呈红色或粉红色。

(九)快速硝酸银染色

快速硝酸银染色用于显示卡氏肺囊虫和真菌。 1.试剂配制

(1) 硝酸银乌洛托品

常备液:3%乌洛托品溶液100ml与5%的硝酸银溶液5ml充分混合。

工作液:常备液25ml、蒸镏水25ml与5%硼酸钠2ml充分混合。 (2) 固绿

常备液:固绿0.2g充分溶解于0.2%冰醋酸液100ml中。

工作液:常备液10ml与蒸镏水40ml混合

(3)5%铬酸溶液

1%亚硫酸氢钠溶液 0.2%氯化金溶液 2%硫代硫酸钠溶液 2.染色步骤

(1)涂片经95%乙醇固定后,置于蒸镏水中漂洗1min。 (2)5%铬酸溶液(43℃水浴)中2min。 (3)5%铬酸溶液(58℃水浴)中15min。 (4)自来水漂洗。

(5)1%亚硫酸氢钠溶液中30s。 (6)自来水冲洗15s。

(7)蒸镏水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗各1min。 (8)硝酸银工作液(43℃水浴)中2min。 (9)硝酸银工作液(58℃水浴)中23min。 (10)蒸镏水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗。 (11)0.2%氯化金溶液中30s。 (12)蒸镏水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

(13)2%硫代硫酸钠溶液中1min。 (14)自来水冲洗15s。 (15)固绿工作液中染30s。 (16)自来水冲洗15s。 (17)蒸镏水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

(18)95%酒精、无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。

3.染色结果:卡氏肺囊虫和真菌皆呈黑色,形状清晰;糖原和黏蛋白呈玫瑰色或灰色;涂片背景呈淡绿色。

(十)高碘酸-无色品红(PAS)染色

PAS染色用于显示多糖(糖原及黏蛋白等)。[参见第4章第一节的八

(一) 项(高碘酸-无色品红法)]

[《临床技术操作规范•病理学分册》/第四章 病理学相关技术规范] 第九节 病理学摄影技术

一、概 述

(一)病理医师根据病理学诊断、教学和研究的需要确定病理学摄影的内容,进行客观、准确的图像记录。

(二)病理学摄影的客体包括:①患者体表病征,②大体标本(手术切除和尸检标本的肉眼病变),③组织学切片(光学显微镜下病变),④超薄切片(透射电子显微镜下超微病变),⑤冷冻蚀刻标本(扫描电子显微镜下超微病变),⑥细胞培养标本,⑦细胞和分子细胞遗传学检测结果,⑧尸检过程,⑨动物实验标本和⑩文字、图像资料翻拍等。

二、普通摄影

(一)普通摄影是应用普通照相机拍摄客体的图像,包括患者体表病征,大体标本的肉眼病变,尸检过程,动物实验标本和文字、图像资料等。摄影时应注意病征或病变显示、光照、角度等,适度调节距离、光圈、速度。

(二)患者体表病征摄影

1.需征得患者或患方有关人员同意。 2.应遮盖患者的面容和隐私部位。

(三)大体标本摄影

1.于标本下面铺垫色泽反差鲜明、协调的平整背景(纸或布),并需置放标尺和相关标本的病理号,必要时添加箭头等符号标志指示重点部位。 2.因照相机固定于翻拍机上,宜选用较慢的快门速度,以增加景深。

(四)尸检过程摄影

1.宜用28~135mm变焦镜头的135相机进行摄影。

2.重要病变的原位摄影:应包括局部肉眼病变特征(“近拍”)及其与毗邻结构的解剖关系(“全景”),突出重要病变,兼顾显示全貌。 3.离体标本摄影[参见上文:“

(二)大体标本摄影”]

(五)文字、图像资料翻拍 1.应用翻拍机进行摄影。

2.在翻拍相机的两侧一般至少安装2~4盏100W灯光,与照明直线呈45º角,以使光线均匀。摄影条件可用测光表确定。

(六)底片的选择

1.黑白摄影:扩印照片者,可用ASA100速度底片;制作幻灯片者可用ASA25~50速度底片。 2.彩色摄影:

(1)用日光型彩色底片摄影时,需用雷登80系列平衡滤色片把色温调到5600ºK状态;用灯光照射者,无需平衡滤色片。

(2)用灯光型彩色底片在日光下摄影时,需用平衡滤色片把色温调到3200ºK状态。

三、光学显微镜(光镜)摄影

(一)光镜显微摄影是应用显微照相机拍摄通过光学显微镜放大40~1000倍的客体图像。

(二)摄影用显微镜性能要求 1.具有摄影目镜筒。

2.能通过目镜筒对图像进行对焦。 3.具有光镜选择移动杆。

4.物镜具有分辨率良好平视场象。

5.聚光镜具有孔径光阑和调节光轴中心的机构。 6.具有视场光阑。

7.光源亮度足够,电压可以调节。 8.具有插入滤色镜的槽口。

(三)显微摄影的基本装置

1.具有自动输片机构的35mm照相机背。

2.具有对不同光照条件进行光路调节的调节杆。 3.具有能对不同标本面积进行自动测光的装置。

4.具有与显微镜相连接的接圈、平场消色差物镜(Splan,Dplan)和聚光镜。 5.具有显微摄影控制台。目前较常用的有日产Olympus PM-10及PM-20等显微摄影装置。常用参数项目包括:①快门按钮(EXPOSE),②底片类型选择键(FORMAT),③感光度旋钮(ASA/ISO),④倒易律失效的补偿旋钮(RECIPROCITY),⑤曝光增减旋钮(EXPOSURE ADJ),⑥快门速度调节旋钮(MODE/EXPOSURE TIME),⑦卷片按钮(OFF/MINDING),⑧停片进片按钮(NO WINDING),⑨自动曝光锁按钮(AEOCK),⑩时间回忆按钮(TIME RECALL)。

(四)显微摄影要点

1.显微照相机必须安放稳定,具有一定防震性,室内光线应暗些以避免散射光进入目镜。

2.选择适当的彩色或黑白底片装入照相机身(暗盒)。拍摄常规HE染色、特殊染色、免疫组化染色切片的病变,宜用感光度ASA为100的彩色或黑白底片;拍摄培养细胞和免疫荧光染色标本,宜用感光度ASA为400的彩色或黑白底片。

3.调节照明和光照

(1)打开电源,调节电压(约在9伏)。 (2)视场光阑收缩到取景框边缘外。

(3)孔径光阑调到物镜孔径数值的60%~80%,例如孔径为0.25的10×物镜,聚光镜上光阑应调到:0.25×60%~80%=0.15~0.2。 (4)光通路调节

①常规摄影:先将视野与照明合轴、再将聚光镜调中,使光线同时调到①观察目镜和②取景目镜的视野之中,以便于边观察边曝光摄影。如图像分布均匀,将曝光增减旋钮(EXPOSURE ADJ)调至“1”处。

②暗视野、荧光和偏振光摄影:将光线100%调到取景目镜的视野之中,用调焦镜观察视野中的标本图像,进行摄影。如图像分布不均匀,应将曝光增减旋钮调于0.25~4之间。

4.调节和校准取景目镜于标准状态:旋转调焦镜镜筒上的圆环,使取景框中央的双十字线达到最清晰。

5.将切片等标本放置在载物台上,先用观察目镜选定摄影图像,再用取景目镜调整摄影图像,并转动微调旋钮,同时使图像与取景框中的双十字线像达到最清晰。

6.用彩色底片摄影时,必须用色温计调节色温:①将光通路100%到达色温计上(由调焦镜中看不到光线);②观察色温指示表,用平衡滤色镜(使用日光型底片时用雷登80系列)和灯光亮度将色温调至最佳色温点(日光型底片的色温点为5600K左右,灯光型底片的色温点定为3200K左右)

7.用黑白底片摄影时,必须按下列对应关系选择滤色片以提高图像反差和清晰度:

标本颜色 红 橙 黄 绿 深蓝 滤 色 镜 蓝、绿 蓝、绿 蓝 红、蓝 深绿、橙

8.检查光线可达到底片的位置,确定正确的曝光时间和进行曝光;或用自动摄影控制台上的按键曝光。

9.记录图像的摄影日期、摄影编号、样品编号、放大倍数、内容、摄影条件和备注等。

10.将已全部摄影过的底片退回底片暗盒内,取出底片并进行暗室冲洗等后期处理。

四、电子显微镜(电镜)摄影

(一)透射电镜摄影

1.检查电镜工作状态,确认样本无漂移现象,选择好曝光条件。 2.调节好灯丝像,消正像散。 3.选择视野,确定放大倍数。

4.调整物镜光阑:样品反差较强时,使用较大的物镜光阑孔,直至反差适中为止;反差小时,宜用较小的光阑孔。

5.样本聚焦在低倍电镜(<1500倍)图像时,可采用摇摆聚焦法用肉眼定位;样品聚焦在高倍电镜(>1500倍)图像时,除用肉眼观察定位外,还需采用系列拍照法:于确定焦点后,用细调钮聚焦,增加物镜电流,每调动一级最小钮拍摄一张底片,总计拍摄4~5张,从中选择最佳底片。 6.放平荧光屏,传送底片使之进入摄影位置。

7.调定曝光亮度和速度,然后启动快门进行曝光;曝光结束后,将底片送入储存盒内。将底片全部摄影的储存盒取出,进行暗室冲洗等后期处理。

8.用于透射电镜摄影的底片一般为色盲片(对红光不感光),曝光时间为2~4s,ASA[中文?]为8~25s。

(二)扫描电镜摄影 1.检查电镜工作状态

(1)加速电压强度的选择:取决于样品的性质、图像反差和放大倍率。高倍观察时一般需要较高的加速电压,低倍观察时需要较低的加速电压。

(2)聚光镜电流的选择:在保证图像亮度和反差要求前提下,尽可能加大聚光镜电流,以提高照片分辨力,加大景深。

(3)物镜光阑孔的选择:对于表面结构高低差异大的样本可用较小的光阑孔,以获较大景深;低倍镜下观察时,可选用较大光阑孔,以增加视野内的信号强度。

(4)选择摄影扫描速度。

(5)视野选择:与透射电镜相同。

2.确定曝光时间。在扫描电镜照相机处于光关?F8或F11情况下,照片的曝光时间在50~100s之间。

3.样品的聚焦程度主要依靠操作人员的肉眼观察。拍摄较低放大倍数(<1000倍)的图像,以调节粗聚焦钮为主;拍摄较高放大倍数(>1000倍)图像,应先调节粗聚焦钮,再调节细聚焦钮。

4.图像消像散:①先调节X方向旋钮,消除X方向的像散;②再调节Y方向旋钮,消除Y方向的像散;③最后再调节细聚焦钮,直到图像最清晰为止。

5.调节高度和反差:扫描电镜一般装有亮度和反差自动调节按钮,按动该钮即可得到反差适当的图像。

6.拍摄:将照相机中的底片调至摄影位置,按动面板上的摄影快门钮,荧光屏上便由上而下自动扫描图像;扫描结束后,即完成一幅照片拍摄。

7.底片选择:扫描电镜装有120或135照相机,故一般选择感光速度为ASA100的120或135胶卷,;装有Polaroid后背相机的扫描电镜,可进行一次成像。

8.记录图像的摄影日期、摄影编号、样本编号、放大倍数、内容、摄影条件和备注等。

五、暗室技术

(一)暗室技术用于:①普通摄影、显微镜摄影和电镜摄影底片的冲洗,及其照片的洗印和放大;②幻灯片的制作等。

(二)摄影底片的冲洗操作程序

①于完全黑暗中取出全色底片(色盲片或电镜底片可在红灯下取出)→ ②将底片卷入螺旋形的槽内或显影架上 → ③清水湿润2min → ④显影3~12min(20℃)→ ⑤定影10~20min(20℃)→ ⑥水洗30min → ⑦凉干底片 → ⑧分类装入底片袋内,并做好记录。

(三)试剂配制

1. 显影液:有多种配方,组成成分大同小异。下列的D‐11配方兼用于冲洗底片和照片的洗印和放大显影: 水(50℃) 500ml 米吐尔 1.0g 无水亚硫酸钠 75 g 对苯二酚 9.0g 无水碳酸钠 25 g 溴化钾 5 g 加水至1 000ml 冲洗电镜底片、色盲片和制做幻灯片、显影照片等,需要极强反差,可用以上配方的原液显影。普通摄影用的全色底片对反差要求不很高,可将原液用清水稀释成1:2~1:4的工作液。 2.停影液

水 750ml 28%醋酸 48ml 加水至1000ml 3. 定影液:较常用下列的F‐5酸性坚膜定影液 水(50℃) 600ml 硫代硫酸钠 240g 无水亚硫酸钠 15g 28%醋酸 48ml 硼砂(结晶) 7.5g 硫酸铝钾 15 g 加水至1000ml

(四)照片的洗印和放大

洗印和放大照片一般使用黑白放大相纸。这类相纸根据反差分为特软性、软性、中性、硬性和特硬性等5种,即0、

1、

2、

3、4号相纸。较常用者为3号相纸。

1. 洗印:在印相箱中操作(一般装有自动定时曝光控制器),主要用于制做透射电镜摄影的照片。已经曝光的像纸进入冲洗操作程序(同底片的冲洗程序)。

2. 放大:在放大机上操作,主要用于制做显微镜摄影的照片。 (1)操作程序

①放大镜头焦距的选择参见下表:

底片规格 135 120 120 120 120 (16张) (12张) (10张) (8张) 负 片 负 片 负 片 底片尺寸

(mm×mm) 24×36 45×60 60×50 60×70 60×90 80×105 90×120 108×125 镜头焦距

(mm) 50 75 75~80 80~90 90~105 135 150 175

②装入底片:将底片的乳剂面向下,目测聚焦,使放大的图像结构清晰。 ③选择相纸:常用3号放大纸。

④确定镜头光圈和曝光时间:对于正常反差的底片,将镜头光圈缩小到f/5.6至f/8之间,曝光时间控制在8~20s为宜。 ⑤将曝光后放大纸进入显影、定影程序中。

六、数码摄影技术

数码摄影通常包括:①拍摄、②下载(将所拍摄的照片由数码相机下载到电脑中)、③修饰(加工处理等后期制作)和④分享(将经过修饰的照片输出,例如打印等)4个步骤。

(一)选择适当的照片质量要求

数码相机的照片质量(解像度)分为①精细、②正常、③经济等档次。图像质量越好,每张照片占用的存储空间越大,在相同内存的情况下,解存储的照片数量越小。因此,在拍摄之前,应先根据需要,设定对于照片的质量要求,即设定压缩比。

设定压缩比的原则是:①对照片质量要求越低,压缩比可越高;②只在监视器或电视机上观察图像而不打印时,压缩比可高些,可选择“正常”甚至“经济”档拍摄储存量小的图像。③需要打印照片(尤其欲获大幅彩色照片)时,压缩比越低越好,应选择“精细”档,最好选择不压缩的拍摄存储方式。

(二)力求曝光准确

1.数码相机的感光度最低为ISO60,最高为ISO6400,多在ISO100左右。ISO额定值较低时,解像度高、色调范围宽和反差低;ISO额定值较高时,解像度低、色调范围宽和反差高。 2.选择感光度的原则: (1)检查光线是否足够。

(2)尽量用较低的感光度拍摄。

(3)曝光时间不要过长。照度低时,应尽量利用闪光拍摄。避免进行高感光度的长时间曝光。

(4)曝光准确与否决定于对照片质量的要求。

(三)注意对焦条件。

(四)注意用光。

(五)准确使用快门和光圈:宜用自动模式(Auto)拍摄。使用手动相机或将自动相机设置于手动模式时,需要随时进行调整。

(六)正确设定白平衡:拍摄前设定自动白平衡,或是将白平衡调整设定在与拍摄光照条件一致的档上。

(七)正确使用存储媒介:向数码相机内插入移动式存储卡时,一定要到位;从相机中取出存储卡时,要防止滑落到坚硬的物面上,以免不能读取照片的某些数据,甚至损坏存储卡。

(八)勿距摄影客体过远:适当拍摄距离为5~15尺。拍摄小物体、文件等时 ,应启动数码相机的近摄功能。

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