论文题目：藤龙补中颗粒的药学研究
摘要：目的:藤龙补中颗粒,源于中医临床治疗大肠癌的经验方,本文按照中药、天然药物注册分类中中药六类新药药学研究要求,进行饮片质量、制剂工艺、质量标准、稳定性等系列药学研究工作,并初步探索了该方对TNBS诱导的溃疡性结肠炎大鼠模型的药效作用,将为相关新药申报奠定基础。方法:1.饮片质量研究参照《中国药典》2015年版一部对处方中“半枝莲”、“槲寄生”、“白术”、“茯苓”、“薏苡仁”等饮片进行薄层鉴别、浸出物、含量测定等项目评价;参照《上海市中药饮片炮制规范》2008年版对处方中“藤梨根”、“龙葵”、“蛇莓”项下规定进行薄层鉴别。2.制备工艺优化（1）以野黄芩苷含量（%）、对羟基桂皮酸含量（%）、多糖含量（%）和浸膏得率（%）为指标,采用正交试验对提取工艺进行优化;（2）以颗粒的成型性和溶化性为指标,采用湿法制粒法,分别考察辅料种类、辅料用量、黏合剂种类,确定颗粒的成型工艺;（3）按上述优选的工艺进行中试放大研究,并测定野黄芩苷、对羟基桂皮酸和多糖的含量,计算其转移率,考察工艺的稳定性和可行性。3.质量标准研究对三批中试颗粒剂进行薄层鉴别、溶化性检查、水分检查、粒度检查,并通过建立颗粒中野黄芩苷和对羟基桂皮酸的含量测定方法,初步建立藤龙补中颗粒的质量标准（草案）。4.稳定性研究对三批中试颗粒剂进行影响因素试验、长期试验和加速试验考察,按照建立的质量标准草案对藤龙补中颗粒进行检查与含量测定,考察制剂的稳定性。5.UC模型大鼠的药效研究以疾病活动指数、肠重指数、结肠组织外观、病理组织学和血清中IL-4、IL-6、IL-10、IL-1β及TNF-α的浓度水平为考察指标,初步评价藤龙补中方对UC模型大鼠的药效作用。结果:1.处方中各饮片符合《中国药典》2015年版一部和《上海市中药饮片炮制规范》2008年版相关规定。2.最优制备工艺取处方中的藤梨根、龙葵、蛇莓、半枝莲、薏苡仁、白术、茯苓和槲寄生,以水为溶剂,回流提取2次,第一次加水量为10倍量,第二次加水量为8倍量,每次提取1小时;合并提取液,减压浓缩至稠,60°C真空干燥粉碎后,得到总浸膏提取物。取上述浸膏提取物,粉碎,过80目筛,与糊精以3:2的比例混合,以65%乙醇作为粘合剂,湿法制粒,干燥,整粒,包装,即得。3.质量标准研究（1）对藤龙补中颗粒中藤梨根、蛇莓、白术、茯苓、薏苡仁、槲寄生进行薄层鉴别。（2）建立制剂中野黄芩苷的含量测定方法,结果显示野黄芩苷在12.7~812.0μg/ml范围内线性关系良好,标准曲线为Y=29.954X-89.56,r=0.9999,平均加样回收率为98.69%,RSD为2.87%。经三批中试颗粒样品含量测定,本品每袋含半枝莲以野黄芩苷（C21H18O12）计算,不得少于12.65 mg。（3）建立制剂中对羟基桂皮酸的含量测定方法,结果显示对羟基桂皮酸在0.41~25.95μg/ml范围内线性关系良好,标准曲线为Y=72.632X+1.4206,r=0.9999,平均加样回收率为94.12%,RSD为2.38%。考虑到三批中试颗粒样品中对羟基桂皮酸的含量均较低（＜0.02%）,且具有非特异性,故暂不将该成分列入质量标准正文。（4）按照《中国药典》2015年版四部通则0104颗粒剂项下进行检查,表明制剂符合各项规定。4.稳定性考察经影响因素试验、加速稳定性试验（0、1、2、3、6月）以及长期稳定性试验（0、3、6、9、12、18、24月）考察,结果其各项指标在规定时间内,稳定性均良好。5.UC模型大鼠的药效研究结果显示,藤龙补中方浸膏和芹菜素均有一定的抗UC作用,与模型组相比,藤龙补中方剂量为1.62g浸膏/kg（即14.285g生药/kg）和芹菜素剂量为50mg/kg组的抗UC效果显著（p＜0.01）。结论:实验研究表明,所确定的藤龙补中颗粒的制备工艺操作简单,稳定可行,适用于工业化生产;所制备的颗粒质量可控,制剂稳定性良好,初步完成该制剂的临床前的药学研究工作,为相关新药申报工作奠定了基础。
关键词：藤龙补中颗粒;制备工艺;质量标准;稳定性;溃疡性结肠炎
学科专业：中药学（专业学位）
摘要
ABSTRACT
引言
第1章 饮片质量研究
1.1 仪器与试药
1.1.1 仪器
1.1.2 试药
1.2 饮片的质量研究
1.2.1 藤梨根饮片的质量研究
1.2.2 龙葵饮片的质量研究
1.2.3 蛇莓饮片的质量研究
1.2.4 半枝莲饮片的质量研究
1.2.5 茯苓饮片的质量研究
1.2.6 白术饮片的质量研究
1.2.7 槲寄生饮片的质量研究
1.2.8 薏苡仁饮片的质量研究
1.2.9 饮片多糖的含量测定
1.3 本章小结与讨论
第2章 藤龙补中颗粒制备工艺研究
2.1 仪器与试药
2.1.1 仪器
2.1.2 试药
2.2 提取工艺研究
2.2.1 工艺研究中的药效筛选
2.2.2 指标成分的筛选
2.2.3 浸膏中野黄芩苷含量的HPLC测定方法
2.2.4 浸膏中对羟基桂皮酸含量的HPLC测定方法
2.2.5 浸膏中多糖含量的UV测定方法
2.2.6 提取工艺的正交试验
2.3 成型工艺研究
2.3.1 辅料的筛选
2.3.2 粘合剂的考察
2.3.3 制剂工艺的验证实验
2.4 中试研究
2.4.1 工艺流程图
2.4.2 中试试验结果
2.5 本章结论与小结
第3章 藤龙补中颗粒质量标准研究
3.1 仪器与试药
3.1.1 仪器
3.1.2 试药
3.2 薄层定性鉴别
3.2.1 茯苓薄层鉴别
3.2.2 白术薄层鉴别
3.2.3 槲寄生薄层鉴别
3.2.4 薏苡仁薄层鉴别
3.2.5 藤梨根薄层鉴别
3.2.6 蛇莓薄层鉴别
3.3 藤龙补中颗粒的常规检查
3.3.1 性状
3.3.2 装量差异
3.3.3 粒度
3.3.4 水分检查
3.3.5 溶化性
3.4 藤龙补中颗粒的定量研究
3.4.1 野黄芩苷的含量测定
3.4.2 对羟基桂皮酸的含量测定
3.4.3 多糖的含量测定
3.5 藤龙补中颗粒质量标准(草案)
3.6 本章小结与讨论
第4章 藤龙补中颗粒稳定性研究
4.1 仪器与试药
4.1.1 仪器
4.1.2 试药
4.2 影响因素试验
4.2.1 试验方法
4.2.2 试验结果
4.2.3 结论
4.3 加速试验
4.3.1 试验方法
4.3.2 试验结果
4.3.3 结论
4.4 长期稳定性试验
4.4.1 试验方法
4.4.2 试验结果
4.4.3 结论
4.5 本章小结与讨论
第5章 藤龙补中方对UC模型大鼠的药效研究
5.1 仪器与试药
5.1.1 仪器
5.1.2 试药
5.1.3 动物
5.2 实验方法
5.2.1 TNBS诱导大鼠UC模型的建立
5.2.2 分组及给药
5.2.3 检测指标
5.2.4 统计学方法
5.3 结果与讨论
5.3.1 藤龙补中方对DAI的影响
5.3.2 藤龙补中方对肠重指数的影响
5.3.3 藤龙补中方对结肠外观组织的影响
5.3.4 藤龙补中方对病理组织学的影响
5.3.5 藤龙补中方对血清中IL-4、IL-6、IL-10、IL-1β及TNF-α水平的影响
5.4 本章小结
全文总结
致谢
参考文献
附录 Ⅰ 文献综述 藤梨根的化学成分及其药理作用研究
参考文献