猪流感的最新研究进展

猪流感的最新研究进展（共8篇）

篇1：猪流感的最新研究进展

附甲型H1N1流感宣传材料

国家质检总局关于甲型H1N1流感相关知识问答

什么是猪流感？

猪流感是由A型流感病毒引起的猪的呼吸道疾病，是一种感染率高而死亡率低的动物传染病。猪流感通常只引起猪发病，但有时也能突破种间屏障而感染人。人感染猪流感，通常与接触猪有关，但目前墨西哥、美国发生的人感染猪流感已证实人与人之间可传播。

目前猪流感主要有几种亚型？墨西哥、美国发生的人感染猪流感属于哪个型？

目前在全球养猪业中主要流行的亚型有H1N1、H1N2和H3N1、H3N2，同时猪也能感染禽流感和人流感。墨西哥、美国发生的人感染猪流感病例属于H1N1亚型。

猪流感全球流行状况如何？

猪流感是世界上最常见的猪传染病之一，1918年首次在美国发现，目前已传播到世界各地；人感染猪流感很少，2005年以来只有美国和西班牙有报告。

目前美国哪些地方发生人猪流感？

截至2009年4月25日，美国的加利福利亚、得克萨斯、肯萨斯州发生了人感染猪流感情况。目前墨西哥哪些地方发生了人猪流感？

截至2009年4月25日，墨西哥有14个州发生人感染猪流感，主要分布在墨西哥首都、中部的圣路易斯波托西（San Luis Potosi）和与美国接壤的北部地区。

猪流感具有人之间的传染性吗？

最近墨西哥和美国出现的人感染猪流感的情况，美国疾病控制中心确定，猪流感具有传染性，能够在人与人之间传播，但是目前尚不清楚传播机制。

人感染猪流感有哪些临床症状？

人感染猪流感病毒的症状与人流感的症状十分相似，包括发热、咳嗽、咽痛、头痛、全身痛、寒颤和疲劳等。另据报道，有的人也会有腹泻和呕吐的症状。严重者可以出现肺炎、呼吸衰竭和甚至死亡。

人如何感染猪流感：

两种途径证实可以传播猪流感病毒

——与病猪密切接触或者接触被猪流感病毒污染的环境。——与感染猪流感病毒的人密切接触，主要是经感染人的咳嗽和喷嚏等飞沫传播。

感染猪流感的后果会非常严重吗？ 与其他流感一样，人感染猪流感后表现也不同，有些温和，有些严重。美国疾病控制中心公布的数据显示，美国从2005年到2009年1月检测有12人感染猪流感，但没有出现死亡情况；1976年在新泽西州爆发的猪流感，200多人感染，只有1人死亡；2009年1月到4月26日，美国感染猪流感的人员11人，没有人死亡情况。但是，感染猪流感也可能会出现比较严重后果，1988年9月美国威斯康辛州的一位32岁怀孕妇女感染猪流感8天后死亡；墨西哥近期发生的猪流感，到4月24日已经造成60多人死亡。

目前有治疗人感染猪流感的药物吗？

抗病毒药物达菲(奥塞米韦，Oseltamivir)和扎那米韦来治疗或者预防猪流感病毒感染，主要是通过防止病毒在体内复制来预防的，得病以后，也可以减轻症状，加速康复。在出现症状两天内使用抗病毒药物效果最佳。但病毒对金刚烷胺(Amantadine)和金刚乙胺(Rimantadine)有抗药性。

如何预防猪流感？

目前还没有供人使用的预防猪流感的疫苗。应当注意个人的日常卫生，采取自我保护措施，包括：

——当咳嗽或者打喷嚏时应当用纸巾，不要随地吐痰； ——常用肥皂洗手，使用酒精擦手更加有效； ——避免近距离接触病人； ——如果感染流感，应当尽快就医，并最大程度地避免感染其他人。

感染猪流感后应采取何种措施？

如果旅游前往猪流感疫区，并出现了流感样症状，包括发烧、肌肉酸痛、流鼻涕、喉咙痛、呕吐、腹泻等，应当及时就医，向医生说明旅行史，并避免与其他人员接触。

吃猪肉能感染猪流感吗？

目前没有任何证据能够证明，吃经过适当处理的猪肉、猪肉制品会感染猪流感。70度以上温度处理能够杀死猪流感病毒，吃熟制猪肉是安全的。

篇2：猪流感的最新研究进展

猪流感的诊断

据通报,墨西哥和美国近日相继发生人感染A/H1N1猪流感疫情.目前,世界卫生组织已进入高度戒备状态,总于事陈冯富珍表示,猪流感病毒有在全球广泛暴发的可能性,情况严重,须严密监控.为了搞好猪流感疫病防控,笔者从流行病学、临床学、微生物学等几方面论述了猪流感的诊断方法,以期能对猪流感的`预防和诊断有所裨益.

作 者：陈东来 李湃 作者单位：刊 名：兽医导刊英文刊名：VETERINARY ORIENTATION年，卷(期)：“”(5)分类号：S8关键词：

篇3：猪流感的最新研究进展

关键词：猪流感病毒 (SIV) ,类禽H1N1亚型,遗传演化分析,抗原性分析

猪流感病毒 (Swine influenza virus, SIV) 属于正黏病毒科A型流感病毒属, 为单股负链分节段RNA病毒, 其基因组由8个独立节段构成, 大小约为13.6 kb。猪流感表现为急性、高度接触性、传染性的呼吸道疾病症状, SIV不但威胁世界各国养猪业, 还严重威胁人类, 有重要的公共卫生意义。

目前, 在猪群中流行的SIV主要有H1N1、H3N2和H1N2三种亚型。H1N1亚型SIV主要包括经典和禽源H1N1亚型SIV, 在我国南部分离到20世纪90年代早期在猪群中共同流行的类禽型H1N1病毒和经典H1N1病毒。流感病毒具有严格的宿主特异性, 一般病毒很少跨越种间屏障在另外的宿主群内建立稳定的谱系。猪的呼吸道上皮细胞存在唾液酸ɑ2, 6受体和ɑ2, 3受体, 因此猪被认为是禽流感病毒 (AIV) 对人适应过程的中间宿主或作为遗传学上重配病毒的混合器。具有跨种间传播能力的病毒特性一直是流感病毒研究中的热点[1,2]。本研究对分离的1株禽源SIV进行遗传演化、抗原性分析, 以期进一步阐明猪流感的流行病学, 为猪流感的防治提供病原学相关的理论基础。

1 材料

2013年从山西某猪场采集疑似流感症状猪的鼻拭子10份, 采用常规方法接种10日龄SPF鸡胚, 72小时时收获尿囊液, 用0.75%鸡红细胞鉴定其血凝性, 有血凝性的尿囊液用PBS稀释为1×10-3~1×10-6后再接种10日龄SPF鸡胚进行病毒增殖。试验所用鸡胚均购自新兴大华农禽蛋有限公司。

2 方法

2.1 病毒亚型的鉴定

利用RNA纯化试剂盒[购自宝生物工程 (大连) 有限公司]提取病毒RNA, 并以Unin-12为引物, 按照反转录酶AMV试剂盒 (购自Invitrogen公司) 说明书反转录合成c DNA。用特异性亚型鉴定引物 (由华南动物疫病检测中心设计, 上海生工生物工程技术服务有限公司合成) 通过PCR扩增鉴定病毒亚型。

2.2 全基因序列测定与分析

2.2.1 全基因序列测定

取待检病毒尿囊液样品250μL, 以反转录合成的c DNA为模板, 采用SIV H1N1亚型各节段特异性PCR引物 (由华南动物疫病检测中心保存) 扩增8个基因片段, 胶回收PCR产物, 连接转化后送上海生工生物工程技术有限公司测序。

2.2.2 病毒分子特征与遗传演化分析

利用DNAS-tar软件中的Seqman程序拼接所有序列, 应用NCBI检索同源性, 采用MEGA 5.0软件进行分析并绘制进化树, 同时对HA1、NA、M和PB2氨基酸序列进行流感病毒分子特征分析。

3 结果

3.1 病毒分离鉴定

经血凝试验和特异性PCR鉴定, 分离得到1株H1N1亚型流感病毒, 进行全序列测定和生物学特性分析, 将其命名为A/swine/Shanxi/02/2013 (H1N1) , 简称SW/SX/02/13。

3.2 核苷酸同源性

通过Gen Bank中BLAST程序对该病毒的全基因序列比较发现, 其中PB2、PA、HA和M 4个节段与A/swine/Jiangsu/40/2011 (H1N1) 同源性最高, PB1基因和A/swine/Jiangsu/zg15/2011 (H1N1) 同源性最高, NP基因和NA基因与A/swine/Jiangsu/zg7/2010 (H1N1) 同源性最高, NS基因和A/swine/Jiangsu/zg17/2011 (H1N1) 同源性最高, 具体结果见表1。3个相关毒株均为2010—2011年江苏地区流行的类禽型H1N1亚型SIV。

3.3 病毒序列分子特征分析

全基因测序结果表明:SW/SX/02/13的HA基因编码区由1 701个核苷酸组成, 编码566个氨基酸;NA基因编码区由1 413个核苷酸组成, 编码470个氨基酸。根据血凝素蛋白氨基酸序列和分子构象可推测:HA蛋白除前17个氨基酸为信号肽外, 其余分为HA1 (326 aa) 和HA2 (222 aa) 2个亚基, 二者通过1个碱性氨基酸R连接, 裂解位点的氨基酸序列为PSIQSR↓G, 只含1个碱性氨基酸, 不具有高致病性流感病毒特征。在HA1结构域中, H1N1流感病毒的受体结合位点 (RBS) 由2个环和1个螺旋组成[3]。与经典型和2009年流行的甲型H1N1 SIV的HA氨基酸序列比较, SW/SX/02/13在HA1上的4个抗原表位 (Cb、Sa、Sb、Ca) 高度易变, 每个抗原位点都有多个氨基酸的差异 (见表2) , HA2的抗原表位相对保守。表面蛋白的糖基化位点对流感病毒的外在抗原特性和受体结合特性具有很大影响, 糖基化位点数目的不同、位置的不同均可能影响蛋白质的折叠、聚集和转移[4]。SW/SX/02/13的HA肽链上有8个潜在糖基化位点, 其中6个分别位于HA1区氨基酸的27, 28, 40, 71, 212, 291位, 2个位于HA2区氨基酸的497, 556位。SW/SX/02/13主要的4个抗原表位及潜在糖基化位点与参考毒株A/swine/Jiangsu40/2011 (H1N1) 一致。NA蛋白糖基化位点的增加可能不仅降低了流感病毒与宿主受体的亲和力, 而且减少了病毒颗粒的释放[5]。在本研究中, SW/SX02/13毒株与各参考毒株中的NA蛋白均具有7个糖基化位点, 其中4个 (N44、N58、N63和N68) 在NA链接区, 3个 (N88、N146和N235) 在NA结构域。PB2-701位置的Asn替换为Asp, 将会降低病毒对小鼠的致病性, 反之将会增强病毒对小鼠的致病性[6]。研究发现, SW/SX/02/13毒株和类禽型参考毒株在该位点为Asn, 这可能表明类禽型SIV是因为该位点的存在而有利于其在猪体内的长期存在。离子通道M2蛋白上的30位 (A) 和31位 (S) 氨基酸变异会导致病毒对金刚烷胺类药物产生耐药性[7], 经序列比对, SW/SX/02/13毒株未发生这2种基因突变, 预示该毒株对金刚烷胺类药物敏感。

3.4 病毒HA基因和NA基因核苷酸系统进化分析

通过HA基因的系统进化分析可以将猪和人的H1N1病毒分为3个亚群, 包括经典H1N1、类禽H1N1和2009年流行的甲型H1N1流感病毒。序列分析结果显示:SW/SX/02/13的8个基因均位于类禽型亚群当中, 没有发生重组, 并与2011年江苏地区流行的流感毒株A/swine/Jiangsu/40/2011 (H1N1) 进化关系最近, 见图1, 对于流感病毒另外一个表面基因———NA基因的进化分析也显示了类似特征, 见图2。

4 讨论

猪的呼吸道上皮细胞同时拥有唾液酸α2, 6受体和α2, 3受体, 因此猪被认为是禽流感病毒跨种间传播到人的中间宿主或是作为遗传学上重配病毒的混合器。1957年和1968年爆发的人流感大流行均是由重配病毒引起的, 后者含有来源于禽流感和人流感病毒的内部基因节段[8]。1998年, 1株禽和人流感病毒的重组体在美国猪群中引起了流感的大爆发;2009年3月份起源于墨西哥的甲型H1N1流感病毒, 造成了巨大的经济和生命损失, 其流行株病毒基因片段由禽源、人源及猪源流感病毒基因重组而成。在中国, 最近几年相继报道了人流感、禽流感和猪流感的重组体, 这是由于多基因型SIV在猪群中共存, 提供了更多的病毒重组机会[9]。由于人群和猪群缺少相应的抗体, 这些重组病毒往往造成巨大的危害。

篇4：猪流感病毒分子检测技术研究进展

关键词：猪流感；流行现状；分子检测

中图分类号： S858.28；S852.65+1文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）09-0059-02

收稿日期：2013-12-09

基金项目：国家科技支撑计划（编号：2012BAD04B01-5）。

作者简介：张文慧（1977—），女，吉林桦甸人，博士，副教授，从事微生物学研究。E-mail：215267612@qq.com。

通信作者：钱爱东，从事微生物学研究。Tel：（0431）84533426；E-mail：qianaidongO115@163.com。猪流感（swine influenza，SI）是由猪流感病毒（swine influenza virus，SIV）引起的一种急性、高度接触传染性猪传染病。1918年，美国首次报道了SI。1930年，Shope分离并鉴定了第一株猪流感病毒SIV A/Swine/Iowa/15/30（H1N1），该病毒被认为是美国20世纪初发生的SI病原[1]。该病传播迅速，往往2～3 d内波及全群。康复猪、隐性感染猪是猪流感病毒的主要储存宿主，也是猪流感的主要传染源[2]。该病一年四季都可发生，在规模化养猪场难以根除，对养猪业危害极大。另外，SIV的HA受体结合位点具有与人流感病毒、禽流感病毒2种流感病毒受体相同的结合特异性，这决定了SIV不仅可以感染猪，同时也可感染人类[3]。历史上SIV感染人的报道并不罕见。1976年美国新泽西州一名士兵死于古典H1N1 SIV感染，这是人类历史上首例SIV致死人的报道，之后在其他地区也出现SIV感染人并致死的报告[4-5]。迄今为止，猪流感已遍及世界各地，已经分离出H1N1、H1N2、 H2N3、H3N1、H1N7、H3N3、H4N6、H5N1等多种血清型，其中在猪群中广泛流行的猪流感病毒主要有古典猪H1N1毒株、类禽H1N1毒株、类人H3N2毒株[6]。本研究对猪流感病毒的分子检测技术以及猪流感在我国的流行现状进行综述，旨在为开展猪流感研究提供参考。

1猪流感病毒分子检测技术研究进展

1.1反转录聚合酶链式反应

反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）是目前发展最成熟的分子诊断技术，可以从基因水平检测SIV的RNA，大大缩短了SI病原的检出时间，为猪流感的快速诊断提供了更敏感、更快速的方法。该方法具有省时、省力、灵敏度高、特异性强、诊断速度快等优点，已在猪流感病毒检测中得到广泛应用[7]。Lee等利用RT-PCR方法分别在临床样本中鉴定出H1、H3、N1、N2亚型猪流感病毒[8]。杨焕良等建立了猪流感病毒H1N1、H1N2、H3N2亚型多重RT-PCR诊断方法，可以在2个反应体系中对猪流感HA、NA基因进行亚型鉴定，极大地节约了人力与时间[9]。特异性试验检测多重RT-PCR不能扩增其他猪病毒核酸，核酸最低检测量达2 ng。

1.2实时荧光定量PCR

實时荧光定量PCR（real-tmie flurescent quantitive polymerase chain reaction）是将荧光基团加入PCR反应体系中，利用荧光信号积累对整个PCR进程进行实时监测，敏感性远远高于普通的RT-PCR。实时PCR/RT-PCR技术是将PCR、核酸杂交、信号放大相结合的实时、在线检测的定量PCR技术，比常规PCR更灵敏、特异性更强。目前已被广泛应用于基因表达研究、转基因研究、药物疗效分析、病原体检测等诸多领域。此方法已被用于A型、B型流感病毒检测，检测流感病毒的M 基因、HA基因来区别A型、B型流感病毒，或是用于区别A型流感病毒的亚型[10-11]。段廷云等建立了实时荧光定量PCR检测H1N1亚型猪流感病毒，以NP基因的阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线。对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度、退火温度进行优化，建立最佳荧光定量PCR反应体系、扩增程序[12]。荧光定量PCR的建立为早期诊断猪流感病毒、定量分析猪流感病毒感染程度奠定了基础。张太翔等选取猪流感病毒的NP基因序列设计引物、探针，建立了检测SIV的TaqMan实时荧光定量PCR方法[13]。张鹏超等建立的猪流感病毒SYBR Green Ⅰ定量RT-PCR 检测方法对SIV核酸检测灵敏度达30 TCID[14]。陈艳等建立了H3N2亚型猪流感病毒实时荧光定量PCR快速检测方法[15]。徐敏等建立了以RNA为反应模板的一步法荧光定量RT-PCR诊断方法，该方法操作简单，可以用RNA作为模板直接检测，节省时间，特异性好，灵敏度高[16]。张春明等根据猪流感病毒（SIV） M 基因的保守序列，设计并合成1对特异性引物及TaqMan MGB 探针，建立了SIV M 基因实时荧光定量PCR 检测方法，结果表明，该方法样品检测与病毒滴定及病毒分离结果的符合率均达到100%，特异性强，重复性好[17]。Real-Time PCR技术能精确检测样品中SIV的含量，对SI临床检测诊断具有较强的实用价值[18]。

1.3基因芯片

基因芯片技术指将大量探针分子固定于支持物后，与标记的样品分子进行杂交，通过检测杂交信号强度而获取样品分子的数量、序列信息。通过设计不同的探针阵列，使用特定的分析方法，可将该技术用于基因表达检测、突变检测、多态性分析、基因文库作图、杂交测序、微生物检测等领域[19]。陈红军等根据流感病毒血凝素、神经氨酸酶、亚型基因序列间的差异性，分别设计H1、H3、H9、N1、N2的特异分型引物，根据M基因设计A型流感病毒的通用引物制成基因芯片，并对217 份不同地区的样品进行检测，结果表明，该芯片可以同时检测待检样品中5种亚型A型流感病毒，并显示了较高的灵敏度、特异性，灵敏度比PCR 高1个稀释度，比病毒分离高2个稀释度[20]。杨林等根据猪流感病毒的M基因序列设计了1对特异性引物，通过将单链PCR产物与芯片杂交实现对SIV的检测[21]。高淑霞等制备了检测H1N1、H3N2、H5N1、H9N2 4种亚型猪流感病毒的基因芯片技术，与PCR方法相比，该基因芯片技术显示了较高的灵敏度[22]。王慧煜等建立了能同时鉴别甲型H1N1及猪流感病毒常见亚型的新型基因芯片检测方法[23]。

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2我國猪流感流行现状

近年来，我国很多学者分离到不同亚型的SIV[24]。李海燕等对黑龙江省、吉林省、辽宁省等地猪群进行了猪流感血清学、病原学调查研究，从1 306份猪鼻棉拭子样品及死亡猪肺、气管样品中分离到39株H3N2 亚型猪流感病毒、12株H1亚型猪流感病毒及其他亚型猪流感病毒[25]。辛晓光等进行了黑龙江省猪流感病原学及血清学调查，1997—2002年共采集到414份猪血清样品，经猪流感血清学检查出猪流感阳性血清57份，平均阳性率为14%；采集到猪的病毒材料275例，经技术处理后接鸡胚，分离出猪流感病毒26株，表明有些猪场污染情况比较严重，直接影响猪场的生存及发展[26]。王隆柏等于2005年8—12月对福建省猪群猪流感病毒感染情况进行调查，猪流感H1亚型抗体检测的平均阳性率为530%，猪流感H3亚型抗体检测的平均阳性率为23.7%，由此可知，福建省猪群不仅存在不同程度的H1、H3亚型SIV感染，而且感染较为普遍[27]。康文彪等在甘肃省11个市州的猪群中检出猪流感H3N2抗体阳性118份，平均阳性率为2789%，其中健康猪血清检出阳性42份，阳性率为2234%；患病猪血清检出阳性76份，阳性率为32.34%[28]。朱善德等对浙江省宁波市10个县（市、区）5个猪场的457份血清进行猪流感H3N2抗体检测，结果表明，猪场阳性率为2593%，全市猪群平均阳性率为16.41%；检测健康猪血清373份，阳性率达11%；检测发病猪血清84份，阳性率达4048%[29]。姚敬明等2010年6月至2011年11月在山西省采集了1 018份血样，用ELISA试剂盒检测猪流感血清抗体，阳性率为0.98%[30]。禹思宇等2010年6月采用间接ELISA及实时荧光RT-PCR技术，对湖南省规模化猪场采集的 1 065 份猪血清、16 796份猪棉拭子、360份肺脏样品进行检测，结果显示，SIV H1N1抗体阳性率达37.84%，H1N1猪流感病毒抗原阳性率为0.12%[31]。由此可知，SIV在我国不同地区均呈现地方性流行趋势，猪群普遍受H1亚型、H3亚型SIV感染。

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王丹，吕小红，付立东，等. 不同收获期对水稻茎秆抗倒伏性状的影响[J]. 江苏农业科学，2014，42（9）：61-63.

篇5：猪流感的搞笑短信

八戒在天上患了感冒，于是请了病假来人间游玩几天，但他却意外的发现人们手机里到处都是拿他开涮的短信，大为恼火，之后更令他恼火的是，他还发现人们都在吃着他的猪兄猪弟们，为了惩罚人类，他便将流感病毒传给了猪以威吓人类，于是便有了“猪流感”。以后记得，不要再拿八戒开玩笑了噢！

悟空：三师弟，发现没有，最近路上妖怪少了，肯定是我威名远震，妖怪闻风丧胆！沙僧：拉倒吧，那都是在躲二师兄，不知道流行猪流感啊。

亲爱的朋友，你现在还好吗。记得要多穿衣服哦，得了感冒就会有猪流感了；记得要少吃牛肉哦，吃多了就会有疯牛病了。最好是不吃饭来不喝粥，不吃荤来不吃素，过不了多久，你就可以逛逛天堂，和上帝平起平坐了。

有一头小猪，它有一点顽皮，它还有一些可爱，有一头小猪，它有一些冤枉，它还有一些无奈。啊～流感其实与你无关！

地震让你脚跑软，流感让你手洗软，危机让你碗端软，有你让我心太软！无论发生什么，世界上的路不软，你我的心不远，紧握双手，我们一起走！

愿阳光替我深深地祝福，愿月光为我默默地祈祷，当繁星闪烁的时候，每一颗星都乘载我这个心愿：愿正在看短信的人远离流感，全家健康幸福！

天蓝蓝，草青青，流感疫情撼人心。毋害怕，莫担心，开开心心就没病。多锻炼，勤保洁，健康快乐就会永远伴着你！

阳光照耀的地方有我默默的祝福，月光洒向地球的时候有我默默的祈祷，流星划过的刹那我许了个愿：祝愿正在看短信的你远离猪流感病毒。

常摇扇子防中风，绿豆熬粥降署温。吃只鸭子去心火，番茄烧汤营养多。香醋杀菌肠胃好，大蒜能撵流感跑。

出汗不迎风，跑步莫凹胸，若要百病不生，常带饥饿三分，若要身体壮，饭菜嚼成浆，常常晒阳光，身体健如钢，冷饭不入口，晚饭减三口，少吃多餐，益寿延年，甲型流感全球流行，我用短信寄送深情，祝福你身体健康，幸福永远。

篇6：市猪流感预防方案的通知

1、引种

2、加强饲养管理

3、加强养殖场生物安全

4、疫情报告

5、加强监测工作

6、免疫

7、任何单位和个人不得随意处置及转运、屠宰、加工、经营、食用病(死)畜及产品;未经动物防疫监督机构允许，不得随意采样;不得在未经国家确认的实验室剖检、分离、鉴定、保存病毒。

新郑市畜牧局

篇7：猪流感应急预案

甲型H1N1流感（猪流感）应急预案

猪流感(SwineInfluenza)是甲型(A型)流感病毒引起的猪或人的一种急性、人畜共患呼吸道传染性疾病。卫生部于4月30日猪流感命名为将甲型H1N1流感，纳入传染病防治法规定管理的乙类传染病，并采取甲类传染病的预防、控制措施。为了积极应对国内可能发生的疫情传播和紧急情况，有效地控制疫情蔓延扩散，保障参建员工的身体健康和生命安全，结合我项目部特点，特制定本应急预案。

一、指导思想

为确保在发生人甲型H1N1流感疫情时，能够及时、迅速、高效、有序地处理疫情，根据《传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》、《突发公共卫生事件与传染病疫情监测信息报告管理办法》等有关法律法规，本着“早发现、早报告、早隔离、早治疗”的工作原则，周密计划，精心安排，实现对甲型H1N1流感的可持续控制。

二、组织领导机构

1、成立预防与控制甲型H1N1流感领导小组

组 长：

副组长： 组 员：

职责：根据病情预测和变化情况，及时召开会议，研究制定防控工作的制度、措施，检查、督导各部门防控工作的开展和落实。负责项目部传传染病的组织管理和协调指挥，以有效应对甲型H1N1流感。

2、日常管理机构

由办公室具体负责日常防突发病工作的业务指导、组织管理与监督检查及病情报告、信息沟通与组织协调工作。

三、预防措施

1、控制传染源。

跟流感传播有类似，甲型H1N1流感可以通过咳嗽或喷嚏中的小液滴传播。小液滴可被直接吸入呼吸道，或者通过握手，接触物件等方式，经手将病毒带至呼吸道。而且，病毒可以在笔，书本，茶杯乃至键盘上存活数小时之久，直至人通过接触这些物件而最终受到感染。与患者近距离接触也有可能导致新的感染或发病。

一旦发现猪类或其它动物感染甲型H1N1流感病毒，应按照《动物检疫法》有关规定，对疫源地进行彻底消毒，对病人及疑似病人进行隔离。

2、切断传播途经。

对传染病病人、病原携带者、疑似传染病病人污染的场所、物品和密切接触的人员，实施必要的卫生处理和预防措施。对疑似病人立即送至卫生机构隔离，采取医学观察七天以上。

3、保护健康人群。

养成良好的个人卫生习惯，充足睡眠、勤于锻炼、减少压力、足够营养；避免接触流感样症状（发热，咳嗽，流涕等）或肺炎等呼吸道病人；注意个人卫生，经常使用肥皂和清水洗手，尤其在咳嗽或打喷嚏后；避免接触生猪或前往有猪的场所；避免前往人群拥挤场所；咳嗽或打喷嚏时用纸巾遮住口鼻，然后将纸巾丢进垃圾桶。

4、加强院感控制措施。

对于疑似病人或确诊病人进行隔离并佩戴外科口罩；医务人员要做好个人防护，加强手卫生，使用快速手消毒剂进行手消毒；发热门诊和感染性疾病科等重点部门的医务人员应佩戴外科口罩，必要时佩戴护目镜或防护口罩；对发热门诊和感染性疾病科等重点部门应当加强室内通风。

四、宣传教育 通过网络、电视、报纸等多种形式收集甲型H1N1流感疫情情况，掌握本地区疫情动态。并对参建员工进行传授针对性较强的甲型H1N1流感预防知识，切实增强卫生防病意识；教育员工主动维护环境卫生、养成良好的个人卫生习惯。

五、疫情应急响应

如果项目部所在地发生疫情，根据预警情况，我项目部分别启动相应的应急响应。

1、三级响应

保持正常的工作、生活秩序。在坚持日常防控措施的基础上，适时采取以下措施：

⑴办公室严格执行传染病报告制度；加强空气流通和消毒防护工作；严格执行《中华人民共和国传染病法》，做好对项全体目部人员感染控制工作。

⑵食堂、办公室等公共场所加强通风换气，并采取必要的消毒措施。各部门对管辖的工作和生活场地进行定期消毒。

⑶对集体活动进行控制，举行集体活动要经过领导小组审批。⑷严格执行出入管理制。

2、二级响应

除对密切接触者实施控制外，项目部保持正常的工作、生活秩序。在坚持三级疫情的防控措施的基础上，适时采取以下措施：

⑴员工外出和在公共场所要采取必要的防护措施，并定时对居所进行消毒，搞好楼道卫生。

⑵定时对办公室、食堂和宿舍等公共场所进行消毒。⑶加大门卫管理力度，控制外来人员进入工作和生活区域。⑷根据情况，及时向参建员工通报防控工作。

3、一级响应 在坚持二级疫情的防控措施的基础上，适时采取以下措施： ⑴贯彻落实《中华人民共和国传染病法》，严格落实和检查各项预防措施。所有参建员工均有义务和责任及时报告传染病患者及其密切接触者情况。

⑵实行封闭式管理，所有员工不离开项目部，严格控制外来人员进入项目部生活、工作区域。

⑶患者送定点医院集中收治，严格实行传染病病人急救转运程序，防止病人自行求诊中造成传染。

4、应急状态处理

发现我单位有疑似病例，有关当事人必须在发现的第一时间内向项目部领导报告，领导小组负责向建设单位及卫生防疫部门报告。

中铁二十局四公司吉怀项目部

篇8：猪流感的最新研究进展

流感病毒不同HA亚型和NA亚型可以随机组合成多种流感病毒血清型。在这些血清型中,猪流感病毒至少有H1N1、H1N2、H1N7、H3N1、H3N2、H3N6、H4N6、H5N1、H9N2共9种不同的血清型[1],在这9种不同的血清型中,H1N1和H3N2亚型猪流感病毒是我国猪群中流行的主要亚型[2]。为了解近年猪流感在我国的流行情况,哈药集团生物疫苗有限公司在黑龙江、吉林、辽宁、河南、河北、江西、江苏、广东、湖南等省超过30个疑似猪流感发病的猪场进行了鼻拭子采集和病毒分离鉴定工作,旨在筛选猪流感诊断和疫苗用种毒,亦为猪流感病毒分子流行病学和遗传演化研究提供可靠的生物学依据。其间在湖南省某猪场分离到1株H3N2亚型猪流感病毒,并对其进行了血清学鉴定和特性研究,现报道如下。

1 材料

鼻拭子:共69份,采集于湖南省某疑似猪流感发病猪场,放入含30%甘油的生理盐水保存液中,加双抗(含青霉素2 000 IU/m L,链霉素2 000μg/m L),放入液氮中保存备用。

SPF鸡胚:购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司,由哈药集团生物疫苗有限公司研发中心实验室孵育至10日龄备用。

标准血清:抗新城疫(ND)阳性血清,购自中国兽医药品监察所;抗猪流感病毒H1、H3阳性血清及N1、N2标准阳性血清,购自哈尔滨兽医研究所流行病学研究中心。

试验动物:8周龄健康仔猪6头,购自哈尔滨市某生态种猪场,经HI试验鉴定为抗H3亚型流感病毒抗体阴性,饲养于哈药集团生物疫苗有限公司实验动物中心。

2 方法

2.1 病毒的分离、增殖及纯化

将采集的鼻拭子按照常规方法离心处理后取上清液,按0.2 m L/枚经尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚3枚,然后在35℃下培养72 h,弃去24 h内死亡的鸡胚。将24 h后死亡和72 h未死亡的鸡胚置于4℃冰箱中保存12 h,收集鸡胚的尿囊液。将有血凝性的鸡胚尿囊液按参考文献[3]中的方法进行3次有限稀释克隆纯化,纯化后的病毒用于各项检验和鉴定。

2.2 病毒的鉴定及命名

2.2.1 微量红细胞凝集(HA)试验

按常规微量法[3]进行。

2.2.2 红细胞凝集抑制(HI)试验和神经氨酸酶抑制(NI)试验

将纯化的HA阳性鸡胚尿囊液先与ND标准阳性血清进行HI试验,ND阴性的样品再与流感病毒H1、H3及N1、N2标准阳性血清进行HI和NI试验,具体的试验操作按照参考文献[4,5]中的方法进行。

2.2.3 病毒命名

根据1980年世界卫生组织公布的流感病毒通用命名系统进行命名。

2.3 病毒的部分特性测定

2.3.1 鸡胚半数感染量(EID50)测定

参照参考文献[6]中的方法进行,按Reed-Muench方法计算其EID50。

2.3.2 血凝素热稳定性测定

按照参考文献[7]中的方法进行。根据在56℃下5 min和30 min血凝素能否下降2个效价值将血凝素热稳定性分为3个类型,即热不稳定型(56℃下5 min下降2个血凝效价)、热稳定型(56℃下30 min以上下降2个血凝效价)和中等耐热型(介于两者之间)。

2.3.3 耐热性

按照参考文献[8]中的方法进行。

2.3.4 对乙醚、氯仿、酸的敏感性试验

按照参考文献[8]中的方法进行。

2.4 猪体回归试验

用无菌收获的鸡胚尿囊液经气管接种8周龄仔猪3头,4.0 m L/头。接种后每天进行临床症状观察、体温测定和采集鼻拭子进行病毒分离。攻毒后第5天连同3头对照猪一起进行大体解剖,取肺脏,经10%福尔马林溶液固定后进行病理组织切片观察。

3 结果

3.1 病毒的分离、增殖及纯化结果

69份鼻拭子中仅有1份样品的鸡胚尿囊液对鸡红细胞有凝集活性,经鸡胚传至第3代时,HA效价可达9 lb。将第3代鸡胚尿囊液按参考文献[3]中的方法进行3次有限稀释法克隆纯化,然后进行大量扩繁,记作分离株F7代。

3.2 病毒的鉴定及命名

用微量血凝法对分离株F7代进行HA效价测定,测定结果为8 lb;HI试验结果表明:与抗NDV阳性血清的HI试验为阴性;猪流感HI及NI试验结果表明:分离株为H3N2亚型。根据流感病毒通用命名法则,命名为A/Swine/Hunan/1/2014(H3N2)(简称猪流感病毒Hu N株)。

3.3 病毒的部分特性测定结果

3.3.1 对鸡胚的半数感染量

第7代猪流感病毒分离株用含毒鸡胚尿囊液适当稀释后接种于10日龄SPF鸡胚,按Reed-Muench法计算各毒株EID50,结果为106.63EID50/m L。

3.3.2 血凝素热稳定性

将该猪流感病毒分离株56℃水浴5 min,其血凝下降2个效价值,表明该毒株为血凝素热不稳定型毒株。

3.3.3 耐热性

猪流感病毒毒株在4℃放置60 min,对鸡胚的感染性不变;经50℃处理30 min,接种的鸡胚尿囊液已检测不到血凝效价;60℃处理10 min,接种鸡胚尿囊液则完全测不到血凝效价,说明该毒株对热敏感。

3.3.4 对氯仿、乙醚及酸的敏感性

按照参考文献[8]中的方法进行病毒对氯仿、乙醚及酸的敏感性试验,结果见表1。结果表明分离毒株对氯仿、乙醚及酸均敏感。

3.4 猪体回归试验结果

3头8周龄仔猪经气管内接种猪流感病毒Hu N株后,24 h均出现明显的临床症状,表现为体温升高(均超过40.2℃,并持续2 d以上)、精神不振、食欲降低、喜卧并聚在一隅、气喘、咳嗽、偶尔打喷嚏等症状,攻毒后72~96 h,临床症状逐渐减轻;在攻毒后第1,2,3天采集的鼻拭子中均分离到猪流感病毒;攻毒后第5天进行大体剖检,剖检病变主要在肺脏的心叶、膈叶或尖叶,出现斑点状或斑块样病变,正常肺脏组织与病变肺脏组织界线明显。3头对照猪均未出现临床症状,在采集的鼻拭子中未分离到病毒,大体剖检肺部未见病变。取对照组和攻毒组的肺脏,经10%福尔马林溶液固定后进行病理切片观察,对照组未见异常(见297页彩图1A),攻毒组切片表现为间质性肺炎(见297页彩图1B)。

lb

4 讨论

分离的病毒对氯仿、乙醚、酸均敏感,表明分离的病毒粒子具有囊膜,与猪流感病毒粒子具有囊膜的特性一致。病毒分离、HA试验、HI试验、NI试验鉴定结果表明:从湖南某疑似猪流感爆发的猪场采集的鼻拭子中分离到的毒株是H3N2亚型猪流感病毒,命名为A/Swine/Hunan/1/2014(H3N2)(简称猪流感病毒Hu N株)。该毒株对热敏感,血凝素热稳定性测定结果为对热不稳定型毒株。根据以往的研究结果,即血凝素热稳定性强的毒株在自然条件下存活的能力相对较强,会有更多的机会通过不同途径在同一宿主或不同宿主间传播,能引起猪流感病的大规模流行[3],结合猪体回归试验中攻毒猪均出现明显的流感症状、在采集的鼻拭子中分离到病毒以及出现肺部病变但未至猪只死亡的结果,推断该毒株可能为中等毒力的毒株,对猪的致病性为非高致病性。

H3N2亚型猪流感病毒于1969年在我国台湾首次被分离,并证实这种亚型基因重排病毒具有向人传播的能力[2],并且在2004年从猪体分离到的H3N2亚型流感病毒和A/Moscow/10/99有最近的亲缘关系[9],因而为“猪是早期人流感病毒的储存宿主”[10]提供了新的证据,而在不同时间、不同地点对H3N2亚型猪流感病毒的流行病学及遗传进化的分析能进一步为此提供新的证据,同时还能对H3N2亚型猪流感疫情的防控提供一些指导意见。本研究分离到的H3N2亚型猪流感病毒,极有可能是湖南省乃至整个华中地区的H3N2亚型猪流感病毒的优势毒株,但该分离株的遗传变异特点以及与H3N2人流感病毒的关系则需要更进一步的研究。

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