酒精鉴定胎儿性别（精选8篇）
篇1：酒精鉴定胎儿性别
酒精鉴定胎儿性别
胎儿性别早知道的临床方法：
1、B型超声显象法显示出男性胎儿的外生殖器：一般在妊娠5个月后用此方法。
2、羊水细胞性染色体检查：在妊娠16-20周时用此方法。由于男性胎儿的羊水细胞可显示出Y体，女性则显示X体，通过标本上X小体和Y小体出现的频率判断胎儿的性别;
3、绒毛细胞性染色体检查：在妊娠两个月内，通过检查胎儿的绒毛细胞不定期判断胎儿性别;
4、孕妇外周血基因分析：由于胎儿的血细胞等也会混入母体外周血中，通过检查外周血的淋巴细胞的性染色体或中性粒细胞的鼓槌体出现的频率可判断胎儿的性别。
篇2：酒精鉴定胎儿性别
胎儿性别早知道的临床方法：
1、B型超声显象法显示出男性胎儿的外生殖器：一般在妊娠5个月后用此方法。
2、羊水细胞性染色体检查：在妊娠16-20周时用此方法。由于男性胎儿的羊水细胞可显示出Y体，女性则显示X体，通过标本上X小体和Y小体出现的频率判断胎儿的性别;
3、绒毛细胞性染色体检查：在妊娠两个月内，通过检查胎儿的绒毛细胞不定期判断胎儿性别;
4、孕妇外周血基因分析：由于胎儿的血细胞等也会混入母体外周血中，通过检查外周血的淋巴细胞的性染色体或中性粒细胞的鼓槌体出现的频率可判断胎儿的性别。
酒精鉴定胎儿性别的方法：
孕妇晨尿(取中间那段的尿液)与95%医用酒精(医院和药房都有卖的)1：1的比例混合起来，一半一半，最好准确点，在透明杯子里看反应：
1、如果混合后有浑浊的水，跟开水瓶底的渣滓一样，有沉淀，没分层，浑浊表示是女孩子。
2、如果有一团一团猫丝状悬浮在杯子中，或上下分层明显，下面有象白云一样成团状摇也摇不散，悬浮在中间的.成一团一团，表示是男孩子。
pS：3个小时之后才可以看变化，再放置2、3小时之后看也可以看得很清楚。
以上就是胎儿性别早知道的介绍了，不管是医学方法还是酒精鉴定胎儿性别都不是十分准确的，不可太过认真。
没有一点科学根据.现在通常对孕妇胎儿的性别鉴定是B超.但是.即便是最有经验的影像学专家也的在妊娠三个半月或者三个月以上.准确率也不能达到100%.另有一项检查.就是利用孕妇末梢血.也就是毛细血管血.从孕妇耳垂上采血几滴.制成血涂片.经过特殊染色.利用细胞形态学的技术.来鉴定胎儿的性别.此项检查比较安全.准确率都在95%以上.要求条件.妊娠45天以上即可.孕妇晨尿(取中间那段的尿液)与95%医用酒精(医院和药房都有卖的)1：1的比例混合起来，一半一半，最好准确点，在透明杯子里看反应：
1.如果混合后有浑浊的水，跟开水瓶底的渣滓一样，有沉淀，没分层，浑浊表示是女孩子，性别鉴定《酒精鉴定胎儿性别》。
2.如果有一团一团猫丝状悬浮在杯子中，或上下分层明显，下面有象白云一样成团状摇也摇不散，悬浮在中间的.成一团一团，表示是男孩子。
pS:3个小时之后才可以看变化，再放置2、3小时之后看也可以看得很清楚.这是我在家做的实验图片，手机拍的不清楚
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最后我的实验结果是：一团一团猫丝状悬浮在杯子中，或上下分层明显，下面有象白云一样成团状摇也摇不散，悬浮在中间成一团一团。
还有哪位JMM做完实验后，可与我交流??
凡是已经做过实验的JMM，可不可以把实验结果也拍成照片，发给我们瞧瞧??给大家参考参考???
如果 不会发照片，可以向我咨询，我会告诉你的，我的QQ：450182106商道的空间。
小爱妈妈做了实验后感觉挺准的：
“嘿嘿!我今天早上试了 结果是跟我的BC结果一样的 男宝宝 但是我用的是75%的酒精 因为药店只有这个，下面是我做实验拍的照片!”
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44楼的CYHWGC 说：
“好像挺准的，我的测出来好像是女宝，B超也是。所以应该是挺准的。”
63楼的jhy 说：“我按照LZ的方法做的，结果才几分钟就上下分层了，而且很明显，那是男孩吗? 下面是我做实验拍的照片!”
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89楼的勾手指 做了实验后说：“看看我的，不是很清楚的，比较像暖瓶的底底，我觉得，侧面的看不清楚，明天我重新找个杯子看看哈 ”下面是她的实验照片
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116楼honey9 做的实验结果
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第117楼 zengxiaofang 的实验结果如下：我帮她传上来了
篇3：酒精鉴定胎儿性别
研究旨在从牛胎儿耳组织中分离到成纤维细胞, 并用组织贴附培养法进行原代培养, 在传代培养过程中观察总结了体外培养成纤维细胞的生长特征, 用PCR法鉴定了性别, 找到一种简单、实用的胎儿体细胞系早期性别鉴定方法, 为后续牛体细胞克隆与胚胎移植奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
牛胎儿、阳性对照与阴性对照牛血液, 取自黑龙江八一农垦大学农场;DMEM/F12, 购自Gibco公司;胰蛋白酶, Sigma公司产品;标准胎牛血清, TBD公司产品;细胞培养板与培养瓶, Costar公司产品;PCR 引物, 由上海生工生物工程技术服务有限公司合成;Taq酶、细胞基因组DNA提取试剂盒, 购于天根生化科技有限公司。
1.2 牛胎儿成纤维细胞的分离培养
采用组织块贴附法:取胎龄为40 d的胎牛, 在无菌条件下用手术剪在PBS液中剥除胎膜, 剪下分离出的牛胎儿 (体长约2.1 cm) 耳朵放入37 ℃灭菌生理盐水中;将胎儿耳尖剪下一小块, PBS洗3遍后用酒精消毒30 s, 再用PBS洗3遍;将清洗好的牛胎儿耳尖用含10%血清的DMEM/F12培养液洗2次, 放入培养皿中用眼科剪剪成1 mm2左右的小块, 用镊子将剪碎的组织块转移到35 mm的3个卡氏培养瓶中, 用牙科探针将组织块铺展, 并使组织块内侧贴壁;将已加好血清、双抗的DMEM/F12预热, 在每个培养瓶中加入5 mL预热好的培养基, 做好标记, 把培养瓶放入37 ℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养, 使组织块贴壁, 5 h后轻轻翻瓶, 培养2 d后换液, 培养至第3天观察细胞生长情况。待细胞长到80%～90%汇合时, 将一部分细胞冷冻起来, 一部分按照1∶2 的比例传代培养。
1.3 牛胎儿成纤维细胞生长曲线的测定
将牛胎儿成纤维细胞消化收集后, 按相同的密度 (2.3×104/mL) 接种于一个24孔培养板中, 37 ℃、5% CO2、饱和湿度恒温培养;每隔2 d换液, 每隔1 d消化收集2孔细胞, 用血细胞计数板分别计数3孔的细胞数, 每孔计数3次求平均值。连续计数10 d, 绘制生长曲线。
1.4 细胞DNA的提取
用细胞基因组DNA提取试剂盒提取牛胎儿成纤维细胞的基因组DNA, 用血液基因组DNA提取试剂盒提取阳性对照与阴性对照牛基因组DNA, 作为PCR反应的模板。
1.5 PCR 反应的引物序列及反应条件
根据GenBank数据库中牛SRY基因序列设计PCR引物:P1 5′-CCAGGGAACTGCTTGGGTA-3′, P2 5′-TGCTTCTCCACTTAGGCTCAA-3′, 预计产物为255 bp ;根据牛β-珠蛋白基因序列设计合成1对内标引物[2]: P3 5′-TATCCCACTTACAAGGCAGGTT-3′;P4 5′-GCAGACAACAGAGAACAAGAATGA-3′, 预计产物为405 bp 。
采用20 μL反应体系, 以牛基因组DNA为模板, 反应条件为 94 ℃预变性5 min;94 ℃变性50 s , 59 ℃退火30 s, 72 ℃延伸1 min, 30个循环;72 ℃延伸10 min。
2 结果
2.1 牛成纤维细胞的培养结果
组织块培养12 h后在倒置显微镜下观察, 可见组织块贴壁, 有少量细胞开始沿组织块周围向外生长;培养第2天, 组织块边缘游离出许多单个细胞, 大多数为上皮样细胞及一些颗粒物质, 并呈晕状, 只有少部分游离出个别成纤维细胞;培养第4天, 组织块周围仍有大量上皮样细胞, 但大部分组织已游离出成纤维细胞 (见图1) ;培养第6天上皮样细胞比例减少, 成纤维细胞已占多数, 成梭状延伸 (见图2) ;培养第8天成纤维细胞生长旺盛, 已基本铺满瓶底, 但组织块间仍有间隙 (见图3) ;培养第10天后组织块间隙消失, 细胞汇合连生, 密密地铺满瓶底 (见图4) 。
2.2 牛成纤维细胞的生长曲线
牛胎儿成纤维细胞以2.3×104个/mL接种于24孔细胞培养板中, 6～10 d长满细胞。每隔2 d换液, 隔1 d计数3孔细胞数, 取平均值, 连续计数10 d, 绘制生长曲线 (见图5) 。由图5可见, 牛胎儿成纤维细胞生长增殖的滞留期为 0～1 d, 对数生长期为 2～6 d, 平台期为7～10 d, 第10天开始有下降趋势。
2.3 牛基因组DNA的提取结果
从牛胎儿成纤维细胞、牛血液中提取牛基因组DNA, 经0.8%琼脂糖凝胶电泳, 得到的条带大小为20 kb左右 (结果见图6) , 这与GenBank中的一致。
M. λDNA/HindⅢ Marker;1.公牛血液基因组;2.母牛血液基因组;3.牛胎儿成纤维细胞基因组。
2.4 PCR扩增结果
分别以公牛、母牛血液基因组DNA和牛胎儿成纤维细胞基因组DNA为模板进行PCR反应, 反应后各取10 μL, 用1%琼脂糖凝胶电泳检测, 结果见图7。由图7可见:以阳性对照公牛血液基因组DNA为模板扩增得到403 bp的β-珠蛋白基因和255 bp的SRY 基因2条扩增带 (1泳道) ;以阴性对照母牛血液基因组DNA为模板扩增得到403 bp 的1条扩增带 (2泳道) 。以牛胎儿成纤维细胞基因组DNA为模板扩增结果见3, 4, 6泳道 , 第3号泳道 (第1牛胎儿成纤维细胞系) 有403 bp的β-珠蛋白基因和255 bp的SRY 基因2条扩增带, 第4, 6号 (第2, 3牛胎儿成纤维细胞系) 只有β-珠蛋白基因基因扩增带而没有SRY基因条带, 故可确定第1牛胎儿成纤维细胞系的供体胎牛为公牛, 第2, 3牛胎儿成纤维细胞系的供体胎牛为母牛。
M. pUC18 DNA/Msp Ⅰ Marker;1.阳性对照;2.阴性对照;3, 4, 6.第1, 2, 3细胞系;5, 7.空白对照。
3 讨论
当前对牛胎儿成纤维细胞培养比较常用的方法有组织块贴附法和酶消化法。组织块贴附法简便易行, 得到的细胞均质性好, 易于操作, 而且不用胰蛋白酶消化, 避免对细胞造成伤害[3]。所以, 试验选用组织块贴附法培养细胞。
用组织块贴附法培养牛胎儿成纤维细胞时, 细胞呈贴附型生长, 原代和早期传代细胞是上皮样和成纤维样细胞的混合物, 从发育生物学角度来看, 二者来源不同, 上皮样细胞来源于外胚层, 成纤维细胞来源于中胚层[4]。组织块培养初期, 由于细胞仍基于原组织生长, 所以首先移出生长的主要是上皮样细胞, 成纤维样细胞由于母细胞数量少而显得增加数量较慢。但随着细胞在体外传代次数的增加上皮样细胞逐步被淘汰。成纤维细胞对消化液比上皮细胞更敏感, 通过控制适宜的消化时间可以使成纤维细胞脱壁, 而上皮细胞仍保持贴壁, 经过3～5 次传代纯化后, 就可以得到比较纯的成纤维细胞[5]。本试验细胞生长曲线呈“S”型, 表现为潜伏期、对数生长期和平台期, 接种第1天细胞刚刚贴壁, 处于恢复期, 细胞数量基本保持不变;从第2天进入对数生长期;3～6 d为增殖高峰期, 6 d后进入平台期, 细胞逐渐长满, 10 d后由于接触抑制开始走向衰亡。
试验通过PCR扩增反应扩增出公牛的一段近255 bp的SRY基因特异性片段和403 bp的β-珠蛋白基因特异性片段, 而牛胎儿成纤维细胞、阴性对照母牛和空白对照只有403 bp的β-珠蛋白基因特异性片段。故判定有255 bp扩增带的母体为公牛, 而无此带的为母牛。这一结论为转基因克隆动物研究中转染目的基因以及保存和扩增性别已知的胎儿成纤维细胞系提供了可靠的依据, 也进一步说明PCR法对细胞系性别进行早期鉴定, 在家畜体细胞克隆与胚胎移植中具有很大的应用价值。
参考文献
[1]司徒镇强, 吴军正.细胞培养[M].西安:世界图书出版社, 1997.
[2]陈红星, 程萱, 杨晓, 等.牛β-乳球蛋白基因调控序列指导组织纤溶酶原激活剂在小鼠乳腺中的表达[J].生物工程学报, 2000, 17 (2) :135-139.
[3]杨东山, 杜晨光, 高飞, 等.牛胎儿成纤维细胞的组织块贴附法分离培养与电穿孔法基因转染[J].动物学研究, 2006, 27 (1) :41-47.
[4]李扬, 郭继彤, 吴凯峰, 等.牛胎儿成纤维细胞的分离与体外培养[J].细胞生物学杂志, 2002, 24 (4) :254-255.
篇4：胎儿性别鉴定大揭秘
一种不安全的鉴定方法 有一种判断胎儿性别的方法很准但很暴力，这就是“羊膜腔穿刺法”。一看到“穿刺”二字，大家就知道这是一种有创伤有危险的检查方法，而且有可能造成诸如羊水栓塞、感染、出血、伤及胎儿的危险。胎儿到15周大时，如果能把这些羊水细胞取出来，进行染色体分析，就能确定宝宝的性别了。若羊水细胞的性染色体组成是XX，就是女孩。如果发现性染色体为XY的细胞，那就是男孩。除了胎儿细胞，羊水里的睾丸酮（一种性激素）也暗藏着胎儿性别的秘密，这种激素在男胎女胎的羊水中含量很不一样。从妊娠4个月起，如果检测发现羊水里的睾丸酮水平高，则很有可能怀上了男孩。不过，羊膜腔穿刺的风险不能小看，要穿透准妈妈的身体，偶尔的失败在所难免，几率一般为0.5%～1%。有时因为位置没找准确，可能抽出尿液；一旦误伤孕妇的血管，则会导致腹部血肿或休克。如果不慎穿刺在胎盘上，可能导致羊水栓塞，短时间内危及母亲的生命；若运气极差刺伤了胎儿致命部位，那孩子可能是保不住了……若非医学需要，千万不要尝试。
不可小觑的绒毛 想过没有？胎盘上肉眼几乎无法看清的绒毛，也可以用来判断胎儿的性别。用绒毛鉴定胎儿性别，是因为绒毛细胞的染色体核型与胚胎一致。当一个受精卵逐步发育形成胚囊，接触子宫内膜的胚囊表面会出现一层滋养细胞，滋养细胞表面又会形成许多的绒毛状突起，这便是绒毛。它们在怀孕第7～9周时会非常发达。若能采集到绒毛，进行细胞核型分析便能轻松弄清胎儿的性别。
篇5：如何鉴定胎儿性别
人体内有22对常染色体及两条性染色体。女性的性染色体为两条X染色体，而男性的性染色体就分别为一条X染色体及一条Y染色体。男性的Y染色体遗传自亲生父亲，而胚体是否会发展成男婴的关键，在于Y染色体的存在。由于Y染色体是唯一一种具有男性直系承袭的特质，因此Y-DNA（男性DNA）数据是追踪亲生父系的极有效工具。研究结果清晰显示，已能检测到微量但显着的胎儿DNA数量，为非入侵性产前诊断的应用揭开新的一页。
胎儿Y-DNA（男性DNA）检测程序是在妇女怀孕期间，鉴定孕妇血液中是否有Y染色体DNA存在。多项临床研究的结果证明，孕妇在怀孕期第7周时，Y-DNA（男性DNA）已能可靠地被检测到。这个非入侵性检测，除了能够为胎儿的DNA中是否存在男性DNA提供有效证明外，亦可作为检测与性染色体有关的基因缺陷的第一步（例如：与X染色体有关的智力迟钝等）。
测试优点
1.无须禁食
2.不受药物或健康状况所影响
3.即使极微量的Y-DNA也能检测出来
4.准确度高达99.4%
5.减少不必要的侵入性胎儿检查
注意事项
进行检测前应先了解自己是否符合这些条件：
1）必须B超确定可见胎心及胎龄满7周以上
2）一年内没有分娩过男胎。
3）半年内没有进行过输血、重大手术、器官移植。
篇6：胎儿性别鉴定方法
想知道生男生女这个问题怎么办呢?其实也不用着急，女性健康网小编下面就给大家介绍八个胎儿性别鉴定方法，这中间有些人说准，也有人说不准，当然这些方法只能是自己当娱乐玩玩，最好不要太过认真就好，必竟生男生女都一样。
1神医开秘方生男生女“随意愿”
神医开出了“五大秘方”：“第一，叫孕妇睡觉的时候身体往左侧，因为孕期3个月时小孩子还没落在子宫壁上，这个方法非常有必要，男左女右你知道吧，就是说往左侧睡生男孩，往右侧睡生女孩。”“第二，在孕妇的床底下放一把斧头，记住，斧头口朝上，放好后千万不要碰它。这个我们是做过试验的，qq个性签名原来我们在一个鸡窝下放了一块铁，结果孵出来的全是公鸡。”“第三，找只公鸡，把尾巴上最长的三根毛拔下来，和丈夫的指甲、头发一起，用红布包着，放在孕妇床单下。”“第四，不能吃肉，只能吃粗茶淡饭。吃素食生儿子，吃荤腥生女儿，自古都是这样，你仔细想想是不是这个道理。”“第五，睡觉时床头的朝向也很重要。
生男生女是染色体决定的孕妇一怀孕，胎儿的性别就决定了，哪是可以随意改变的?这完全有违科学!”
2、孕妇下怀(下腹部大)是男孩，上怀(上腹部大)是女孩
专家说法：如果孕妇是上怀，那可能是第一次怀孕或孕妇的体形好。当孕妇怀过一次孕以后，腹部肌肉松弛，再次怀胎时自然也就“下垂“了。
3、乳头发黑是男孩
专家说法：乳头颜色受到体内激素的影响，孕期体内黄体酮和刺激黑色素细胞的激素水平的增加，导致体表面某些原本发黑的部位更黑，当生完孩子后就会很快恢复，这种现象与胎儿性别毫无关系，性别鉴定《胎儿性别鉴定方法》。
4、吃酸吃碱与生男生女的关系
专家说法：有人仅凭味道来确定食物是酸性还是碱性，这本身就是一种错误认识。需要强调的是，人体出现酸碱不平衡的状态，通常是患病所致。
5、早上害喜生女孩?!
专家说法：针对5900位因为怀孕初期严重害喜而入院的孕妇进行调查，结果发现，这些孕妇生下女宝宝的比例是56%、男宝宝是44%。
但是在怀孕中后期严重害喜的孕妇来说，其宝宝的性别比例又与正常分配比例相似。
6、早孕反应便爱食酸辣“酸儿辣女”
专家说法：“酸儿辣女”的说法是没有科学根据的。从医学上说，生男生女主要是由染色体决定的，母体中的卵子都是带X染色体的，而精子中是含有X或Y的染色体，如果进入卵子的精子是带X染色体的，就是女孩;如果进入卵子的精子是带Y染色体的，就是男孩。所以说生男还是生女其实是由父亲决定的。从一定意义上说，生男生女跟受精卵的受孕环境有关系，也就说跟输卵管周围的环境有关系。
7、胎儿心率低于140次/分，则所怀胎儿是男孩
专家说法：女孩心率比男孩高，这只是在刚出生时是对的，胎儿的心率就男孩和女孩之间没有任何差别。心率的快慢只是随胎龄的不同而变化。在约孕5周时，胎儿的心率与妈妈的心率接近，即80~85次/分。然后到孕9周这段时间内心率逐渐加快至170~200次/分。尔后到孕中期这段时间内又逐渐放慢至120~160次/分。
8、孕妇腹部突出过大是女孩，腹部不太突出或下腹部突出为男孩
篇7：科学鉴定胎儿性别
昨天B超结果显示小牛一切都正常，已经是25周了，也符合我之前推算的孕期。排除了健康问题，接下来最关心的必然是小牛的性别了。医生肯定能看明白，但不会随意说。而我们觉得男娃女娃都是宝，只要健康可爱聪明活泼就行。但是对这个神秘问题还是颇感新奇，并略带小小紧张。
晚上小牛二舅妈电话来问询检查情况，并问了胎心率。小牛这次胎心率是145，好象上次检查是150。而舅妈说一般140以上的是女娃，以下的是男娃。这个说法还真是头一次听说，性别鉴定《科学鉴定胎儿性别》。不过却更让我们充满了好奇。今天在网上搜索胎心率与性别的关系，还真有此说法。只不过是一两次的不能说明问题，连续5次以上在140左右或以下的男娃几率大，连续5次以上在150或以上的女娃几率大(不过140-150之间的说法就比较模糊)，越到快生产时这个规律越准确。因为女婴出生时的心跳速度比男婴要更快。
这个规律我我还是相信的，等之后继续留意胎心率的规律吧，最后就能验证这个说法是否真的可靠啦~~~
昨日在小牛爸的陪伴下做了二维彩超，并且有幸将整个检查过程录了下来。回到家后，我们又再次回味了录象，可以看到小牛的轮廓，头部，身体以及跳动的心脏。还是蛮有趣味的。二维彩超功能上能排查大畸形，但是图象还很模糊。而据说三维的可以看清胎儿脸部，四维的更是立体，可以直接录影。可惜做完这次检查才知道这些，否则一定做个四维B超，给宝宝录影。不知孕晚期时还可否有机会做一次四维B超呢?
昨天B超结果显示小牛一切都正常，已经是25周了，也符合我之前推算的孕期。排除了健康问题，接下来最关心的必然是小牛的性别了。医生肯定能看明白，但不会随意说。而我们觉得男娃女娃都是宝，只要健康可爱聪明活泼就行。但是对这个神秘问题还是颇感新奇，并略带小小紧张。
晚上小牛二舅妈电话来问询检查情况，并问了胎心率。小牛这次胎心率是145，好象上次检查是150。而舅妈说一般140以上的是女娃，以下的是男娃。这个说法还真是头一次听说。不过却更让我们充满了好奇。今天在网上搜索胎心率与性别的关系，还真有此说法。只不过是一两次的不能说明问题，连续5次以上在140左右或以下的男娃几率大，连续5次以上在150或以上的女娃几率大(不过140-150之间的说法就比较模糊)，越到快生产时这个规律越准确。因为女婴出生时的心跳速度比男婴要更快。
篇8：酒精鉴定胎儿性别
1 材料与方法
1.1 模板DNA片段提取
从20名孕妇及其丈夫抽取外周血5 m L,EDTA-K2抗凝,4℃低温离心分离血浆,以蔗糖为介质进行密度梯度离心,然后纯化DNA并配成一定浓度范围。
1.2 实时荧光PCR检测Y染色体特异短串联重复系列
扩增的特异短串联重复系列见表1,引物及探针由美国Promega公司生产提供。总反应体积为25μL,含有1×PCR缓冲液(10 mmol/L Tris-HCl,50 mmol/L KCl),100μmol/L d NTP,1.5 mmol/L Mg Cl2,0.4μmol/L引物,和5U Taq DNA聚合酶,每个反应里有提取DNA 5μL,在Gene Amp 9700进行热循环,条件如下:起始变性温度T为90℃10 min,接下来进行30个循环,90℃30 s,58℃15 min,和72℃15 s,最终60℃延伸1 min。每个血浆样本进行测试2次,双蒸水作为空白对照。
2 结果
20例孕妇标本查出有DYS19产物9例,DYS389产物12例,DYS390产物12例,DYS393产物10例,孕妇中扩增到的短串联重复系列在丈夫标本内都检测到。根据检测到其中一种系列者为男性标准,20例孕妇有13例怀男性胎儿,其结果与产后随访完全一致。见表2。
3 讨论
目前有200多种伴性遗传病,杜绝或减少遗传病患儿的出生是关系到家庭幸福与社会人口质量的重要问题。对胎儿进行早期性别鉴定,对有患病风险者进行人工终止妊娠是减少此类患儿发生重要手段。目前关于胎儿性别鉴定的方法有多种。它们存在各种各样的缺陷,有的要求妊娠时间过长,实行终止妊娠手术给孕妇带来身体上和精神上负担过大;有的标本取材较难有一定的风险,或实验时间过长不方便患者;有的准确度尚不能达到临床要求。笔者以孕妇和其丈夫外周血浆为标本,采用实时荧光PCR技术进行Y染色体特异重复序列分析,基本克服了以上诸多缺点。
注:“+”表示扩增到相应短串联重复系列产物,“-”表示未扩增到相应短串联重复系列产物。诊断标准:只要扩增到一种短串联重复系列即判断妊娠的胎儿为男性。
现已有研究发现,母-胎之间存在微量血液交换,母亲体内存在极少的胎儿红细胞和核酸片段,胎儿来源的核酸片段较母亲自身的片段短[3,4]。所以,通过密度梯离心技术可以浓集核酸的同时也可以区分不同来源的核酸,可以得到更纯的胎儿DNA模板。实时荧光PCR技术操作简便,封闭操作污染少,背景干扰小,结果判断客观。Y染色体短串联重复系列只能由父传给儿子,所以本方法特异性好,同时串联重复系列备份多,所以较其他系列更易得到扩增产物,加之测定多个短串联重复序列,使得方法灵敏度较高。以父亲血浆标本扩增结果作为对照,防止亲代不存在所选特异短串联重复系列所致假阴性的可能。本研究结果显示,怀男性胎儿孕妇查出Y染色体短串联重系列数平均为3.31±0.63,4种或任何3种组合短串联重复系列至少检出其中一种的概率为100%(13/13),即准确度为100%。这说明孕妇外周血中确实存在胎儿核酸片断,以此模板扩增性别决定基因进行胎儿性别鉴定是完全可行。但不同个体检出的系列有微小差别,这可能是因为短串联系列在群体间存在突变[5],此突变对性别判断的影响可被多重PCR检测多个短串联重复系列所克服。所以,以孕妇外周血血浆为材料,实时荧光PCR技术检测Y染色体短串联重复系列应用于胎儿早期性别鉴定的方法值得探索参考。
摘要：目的 探索一种灵敏、可靠、安全的胎儿性别鉴定方法。方法 采集20例妊娠8周以上夫妇的外周血浆,采用密度梯度离心法浓缩核酸片段,并以此为模板,以实时荧光PCR(polymerase chain reaction)技术进行扩增Y染色体DYS19,DYS389,DYS390,DYS393上特异的短串联重复系列。结果 20例孕妇标本查出有DYS19产物9例,DYS389产物12例,DYS390产物12例,DYS393产物10例,孕妇中扩增到的短串联重复系列在丈夫标本内都检测到。根据PCR结果判断13例男性胎儿,与随访结果完全相同。结论 以孕妇及其丈夫外周血浆为标本,实时荧光PCR技术扩增Y染色体短串联重复系列可用于早期胎儿性别鉴定。
关键词：短串联重复系列,实时荧光PCR,性别鉴定
参考文献
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