食用油中缩水甘油酯的检测方法研究进展

2022-09-11

1 引言

在食用油中具有数量较多的缩水甘油酯, 同时在食用油中对缩水甘油酯进行检测的方法通常为直接检测方法与间接检测方法。直接检测方法主要是不损坏缩水甘油酯自身结构的同时, 先通过或不用进行样品净化流程进行检测。间接检测方法是利用脂交反应将缩水甘油进行脱离, 在利用衍生化实施GC-GM检测。

2 直接检测方法

通常情况下在油脂中含有大量的甘油二酯与甘三酯, 对缩水甘油酯检测具有相应的影响, 直接检测方法通常需求对样品进行净化, 接着在实施相应的色谱分析。

一些研究人员利用科学的方法创建可固相萃取—液相色谱—质谱联用仪 (LC-MS) 对五种缩水甘油酯进行检测的方法。其中固相萃取流程主要为:在离心管中对油样进行精确的称取, 添加甲基氰进行溶解处理并进行离心, 对上清液进行收集, 使用固相萃取柱进行合理萃取处理, 甲基氰洗脱。将洗脱溶液进行收集, 在通过氮气吹干仪处理形成氯仿复溶;在通过硅胶固相萃取柱进行萃取处理。通过氯仿进行洗脱, 并对洗脱液进行收集, 通过氯气吹干, 使用异丙醇与甲醇融合溶业进行复溶, 最终使用液相色谱—质谱联用仪进行分析与检测。这种方法主要是利用外标方法进行定量处理, 定量数值通常为0.045μg/m L至0.12μg/m L。这一方法在对甘三酯样品进行检测期间, 其平均回收率为80%左右, 相对偏差数数值为2.9%至13.1%。在对甘二酯样品检测期间, 其回收率高达95%至104.5%, 相对偏差值为3.5%至13.5%。同时一些研究人员对这种方法进行可创新与优化, 使用常见的高效液相色谱法对三重四级杆进行替换, 使用丙酮氯仿溶液取代了乙腈, 使这种方法获得的较为广泛的运用。接着另一些研究人员等进一步对这种方法进行了优化, 使检测时间从15分钟缩减到5分钟。使用叔丁基甲基醚与乙酸乙酯溶液取到了具有较强毒性的氯仿物质, 在第二次固相萃取过程中, 利用乙酸乙酯与正己烷取代了氯仿进行洗脱处理。在进一步优化后, 这种方法的定量限值为0.082μg/m L至0.11μg/m L。

3 间接检测方法

通常情况下, 间接检测方法主要分为以下方法。

3.1 德国标准方法

一种检测处理方法为:在甲基叔丁基醚 (MTBE) 中将样品进行溶解, 并在样品中添加适量的三氯丙醇为内标物质。同时在使用甲醇钠 (Na OCH3) 溶液使其与样品进行脂水解反应, 将样品中存在的缩水甘油酯与三氯丙醇转变为氯丙醇 (3-MCPD) 与缩水甘油较好的脱离出来, 接着在向反应系统中添加适量的醋酸 (CH3COOH) 使反应停止, 在使用适量的正己烷溶液将不可皂化物质与脂肪酸甲酯等进行清除。并让获得的氯丙醇与苯硼酸进行相应的化学反应, 形成相应的苯基硼酸, 在使用氯化钠溶液进行洗脱处理, 在这一流程中, 可将缩水甘油酯充分定量的转变为三氯丙醇。在通过乙烷 (C6H14) 将三氯丙醇与内标物质进行提纯萃取, 利用气相色谱—质谱联用仪 (GC-MS) 进行分析, 最终获得检测样品中的三氯丙醇与缩水甘油酯的实际含量。

另一种检测处理方法为:在酯水解反应结束后, 使用二甲基甲醇 (IPA) 溶液与获得的样品进行化学反应。在这一过程中, 二甲基甲醇会将缩水甘油酯中存在的环氧进行开环, 并将样品中具有的缩水甘油彻底清除。接着在通过酯交换反应、苯硼酸的衍生化方法以及气相色谱—质谱联用仪分析等实验检测流程可较好获得检测样品中三氯丙醇的实际含量, 在通过科学的计算可最终获得样品中缩水甘油酯的实际含量。

3.2 瑞士通用公证行

工作人员可使全氘代棕榈酸三氯丙醇为内标添加在检测样品中, 在将其混合物溶解在甲基叔丁基醚 (MTBE) 溶液中。接着可在其中添加适量的氢氧化钠或甲醇钠进行化学反应获得缩水甘油与氯丙醇, 并在其反应期间相应的酸性氯化钠溶液停止酯交换反应, 在这一流程中氯离子与缩水甘油发生反应形成氯丙醇与脂肪酸酯。在利用异己烷进行两次双水相萃取, 将非极性物质进行清除。之后在使用乙醚与乙酸乙酯等物质重复进行双水相萃取, 使得分析物质与内标充分结合。合并有机相, 添加适量的苯硼酸物质, 对衍生化方法进行使用。在进行浓缩处理, 使无水硫酸钠较为干燥, 在利用氮气吹干仪等进行相应的处理, 最终使用GC-MS设备进行检测。

3.3 酶催化方法

为了对衍生化方法时间进行科学控制, 一些研究人员通过科学的方法制定了皱褶念珠菌脂肪酶水解并溴化反应方法, 使得水解时间科学的控制在30分钟内。这种衍生化方法流程主要为:在试管中称取相应的样品并添加辛烷进行溶解, 在相试管中加入相应量的皱褶念珠菌溴化钠溶液, 其中溴化钠应使用磷酸氢二钠物质将其酸碱度调整为6.8左右。在进行30分钟的摇床水解, 并在其反应期间添加适量的氯丙醇物质形成内标混合溶液。使用正己烷对反应溶液进行两次清洗, 对水相进行收集, 在通过苯硼酸对衍生化方法进行使用, 接着在利用正己烷进行科学的萃取, 并对有机相进行收集与过滤, 使用GC-MS设备进行分析。