苦水玫瑰中总黄酮提取、含量测定研究

前言

苦水玫瑰是重瓣玫瑰花, 是我国传统玫瑰与钝齿蔷薇的杂交品种, 盛产于甘肃省永登县苦水镇, 通常用于提炼玫瑰油。一般通过玫瑰花蒸汽蒸馏得到, 产量很低, 原料利用率低, 通常仅为花的万分之二到万分之五。为提高玫瑰花总黄酮的产率, 本实验对三种提取工艺做了比较, 以芦丁做为参照, 利用紫外分光光度仪检测玫瑰花中总黄酮的含量, 为苦水玫瑰花更合理、更科学高效的应用提供理论依据。

一、实验部分

1. 材料与试剂

玫瑰花干花蕾:市场上购买;75%乙醇:分析纯;芦丁;5%亚硝酸钠:化学纯;10%硝酸铝:分析纯;4%氢氧化钠:化学纯。

2. 仪器与设备

7200可见分光光度计:尤尼柯 (上海) 仪器有限公司;Ar2140型电子天平:沈阳龙腾电子有限公司;HH-2数显恒温水浴锅:国华电器有限公司;超声波套。

3. 实验方法

(1) 材料处理

市售的玫瑰花干花蕾用万能粉碎机粉碎, 过20目筛, 置于干燥器中备用。

(2) 水浴法提取黄酮

称取2.007g玫瑰花粉末与圆底烧瓶中, 加入75%的乙醇, 于40℃下进行水浴加热一定时间。将烧瓶中的溶液进行过滤, 之后将滤液浓缩至干, 称出提取得到的黄酮质量。

(3) 回流法提取黄酮

称取2.0014g玫瑰花粉末与圆底烧瓶中, 加入75%的乙醇, 于40℃下进行水浴加热一定时间。将烧瓶中的溶液进行过滤, 之后将滤液浓缩至干, 称出提取得到的黄酮质量。

(4) 超声法提取黄酮

称取一定量玫瑰花粉末加于锥形瓶中, 加入75%的乙醇, 用70w功率的超声波萃取一定时间。将锥形瓶中的溶液进行过滤, 之后将滤液浓缩至干, 称出提取得到的黄酮质量。

(5) 总黄酮含量的测定

样品备用液制备:将提取物用乙醇溶解定容于100ml容量中。

绘制芦丁的标准曲线:称取芦丁0.0253g于容量瓶中, 加乙醇溶解并定容。分别准确吸取0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、14.0、16.0ml标准品与50ml容量瓶中, 加亚硝酸钠, 摇匀静置6min, 加硝酸铝, 摇匀静置6min, 加氢氧化钠, 加蒸馏水定容。摇匀静置.以试剂为参照, 在510nm的波长下测出吸光度, 绘制出芦丁的含量—相应吸光度的标准曲线。

样品黄酮总量的测定:取适量样品备用液于50ml容量瓶中, 加入亚硝酸钠, 放置6min, 加硝酸铝, 摇匀静置6min, 加入氢氧化钠。定容 (用蒸馏水) 。与510nm波长下测定吸光度值。

二、结果与讨论

1. 玫瑰花总黄酮提取工艺对比

(1) 试验数据

样品黄酮总量测定数据 (510nm波长)

(2) 通过三种方法的提取率来进行对比, 具体数据如下:水浴法提取率为30.73%;回流法提取率为37.39%;超声法提取率为26.69%。故得出结论:酸性乙醇 (75%) 存在下, 用电热套加热回流、提取时间为4小时, 是提取玫瑰花中总黄酮的最佳条件。

2. 电热套加热回流法与传统玫瑰花油提炼法的对比

传统玫瑰花油提炼法是利用蒸汽蒸馏和溶剂渗透的原理制得玫瑰精油, 该方法耗时长, 需要消耗大量的溶剂, 且产量较小, 对于原料玫瑰花的利用率低。随着社会生活的快速发展, 传统的提炼方法必将被淘汰。采用电热套回流加热的方法提取黄酮的产量较高, 利用率也得以提高, 而且可以避免传统提炼法的缺点, 故该法将成为今后苦水玫瑰花精油提取的主要方法。

3. 提取溶剂的讨论

经过不断的研究表明, 在玫瑰花总黄酮的提取工艺中, 适合的黄铜提取溶剂有水、乙醇、甲醇。苦水玫瑰花中, 总黄酮主要是黄酮醇和黄酮苷, 在选择溶剂时, 选择原则是将两种黄酮化合物都提取出来, 且易于实现提取溶剂与产物的分离, 使产品得以纯化, 故选用乙醇——水体系做溶剂实现玫瑰精油的提取。仅用乙醇作为溶剂时, 对于乙醇用量要求较高, 太多提取出的主要是黄酮醇, 太少又不能很好的提出黄酮苷;而甲醇毒性较大, 一般不采用;故采用乙醇—水溶液作为溶剂, 能够更好地实现玫瑰花总黄酮的提取, 且安全性好、经济效益高。

三、应用

苦水玫瑰花瓣大肉厚, 色艳味浓, 花产量、含油量以及油的质量都很高, 因此该花的应用范围广, 经济效益高。

苦水玫瑰花含有大量的香精物质, 故该花是酿酒、制作糕点等食品的必要原料;玫瑰精油可作为香皂、香水等高级化妆品香料的主体原料;还可作为花茶等饮品直接饮用[1];苦水玫瑰以还具有一定的药用价值。该花含有丰富的维生素、没食子酸及槲皮甙等物质, 性温味甘, 具有益肝健脾、和胃、补肾活血调经等功效。还能够促进循环代谢, 促进消化, 提高人体免疫力。玫瑰花药理作用相当广泛, 在心血管疾病的治疗和抗肿瘤发方面的作用尤为突出, 故在使在临床治疗上得以广泛的应用[2];除此之外, 苦水玫瑰花还具有很好的观赏价值, 可以美化环境。随着苦水玫瑰花应用范围的扩大, 经济效益的不断提高, 对于苦水玫瑰的研究和利用也越来越突出。

摘要：本文探讨了利用水浴加热有机溶剂提取法、超声有机溶剂提取法、回流加热有机溶剂提取法三种方法, 在苦水玫瑰黄酮提取上的应用, 并对他们的提取效果进行比较, 得出了较为合适、经济的总黄酮提取工艺。

关键词：黄酮提取方法,提取效果,提取工艺

参考文献

[1] 赵晓蜂, 吴荣书.玫瑰花综合利用与开发前景叨.保鲜与加工, 2004, 4 (3) :30-31.

[2] 尉芹, 王永红, 胡亚云, 等.玫瑰花渣化学成分与营养成分研究[J].西北林学院学报, 2005, 20 (3) :140—141.