冬虫夏草

2024-04-14

冬虫夏草(共16篇)

篇1:冬虫夏草

问题:什么是冬虫夏草?冬虫夏草是什么意思?

冬虫夏草是一种中药材,又名冬虫草或虫草,

什么是冬虫夏草

是冬季真菌寄生于虫草蛾幼虫体内,到了夏季发育而成。冬虫夏草因此得名。

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篇2:冬虫夏草

一般食用方法

服用冬虫夏草补虚,要因人因病而异,或单药服用,或配合他药同用。可以煎水、炖汤、做成药膳服食,也可泡酒、泡茶等。例如有腰痛虚弱、梦遗滑精、阳痿早泄、耳鸣健忘及神思恍惚诸症,可单用冬虫夏草每次2克,研末,空腹送服,每日早晚各一次;也可用冬虫夏草5克,配杜仲、川断等,煎汤饮服。属病后体虚,或平素体虚容易感冒、畏寒自汗者,可常用虫草与鸡、鸭、牛、猪、羊肉等炖服。如用冬虫夏草5~10枚,老公鸭一只,去除肚杂,加少许黄酒,煮烂食用,可增强体质。或每天用虫草4枚,煎汤后空腹服用。

虫草炖汤做法:

虫草炖乌龟:

取约250克重的龟一只,去硬壳、内脏,洗净,切作块,放沸水里氽透;捞出放锅内,加入冬虫夏草30克、火腿片30克、瘦猪肉120克,同时放入调料葱段、生姜片、黄酒、盐适量。盖好,用文火炖至肉烂,调入味精,即可食用。此两物一并炖制食用,有助于肺结核阴精亏虚,低热,咳嗽,咳血,心烦,失眠,道汗,腰漆酸痛等病症的治疗康复。健康人食之,亦有强身健体、延年益寿的作用。

虫草红枣炖甲鱼:

由甲鱼重500--1000克一只、冬虫夏草10克、红枣30克加适量配料炖制而成。将红枣洗净,用清水浸涨;冬虫夏草洗净,用温水发。宰杀甲鱼,挖去内脏,用沸水烫去皮上膜,切成四块,放锅中煮沸后捞出,洗净。将甲鱼、红枣、冬虫夏草一并放碗内,加料酒、精盐、葱、生浆、大蒜瓣及鸡汤,上笼蒸二小时,出笼,拣去葱、生姜,加味精调味,分数次佐餐食用。甲鱼同红枣、冬虫夏草一并炖食,营养丰富,滋补力强,常食之,能有效的增强体质,增进健康,振奋精神。

虫草鸭块汤:

由冬虫夏草与雄鸭肉炖煮而成,局有补虚助阳的作用。先在碗中加适量清水、黄酒、葱、生姜、胡椒粉及精盐调好味,将鸭切好块,装盆,用竹签将鸭块插若干小孔。每空内插入洗净冬虫夏草1根,然后加调好的汤料,盖好上笼蒸1--2小时,加味精调味,吃冬虫夏草、鸭肉,喝汤。

汽锅乌骨鸡:

篇3:冬虫夏草

小虫活动 的天空是 如此高阔,土地是如此辽远,小虫更是如此之多,何以冬虫夏草菌偏要选择蝙蝠蛾幼虫的身体为寄生体呢?选菜青虫就不行吗?当然,其形象并不怎么高雅,但毕竟还是虫 ,还能够化蝶 ,翩翩然上下,亦虚亦实,恍兮惚兮,饶有诗意的。蝙蝠蛾幼虫作为冬虫夏草菌的“培养体”,难道是被宠幸? 被选美?是命运的安排吗?

也不是任何真菌都能生长在蝙蝠蛾幼虫的身体里。

我们比较 熟悉的真 菌如蘑菇、霉菌,还有酵母菌等,谁也不会想到要深入如此逼仄、窄小的“虫体环境”。冬虫夏草菌寄生入蝙蝠蛾幼虫体内,也不一定是出于什么冤家路窄。我想,一开始可能也只是一种偶然事件,只是这种偶然多了,才逐渐养成一种习惯,最后形成如此特定的自然选择。这种 自然选择 ,与《诗经》里的“窈窕淑女,君子好逑”的情理,该是相似的。

寒冬是萌 生冬虫夏 草的季节。雪野洁白,四野寂静。千山鸟飞绝。野渡雪自白。这样的日子,蝙蝠蛾幼虫只能躲藏在寒冷的泥土里,体质已下降,终于抵抗不了冬虫夏草菌强行钻入自己的玉体,吸取体内的营养,在体内萌发菌丝体。经过隆冬到初夏漫长的日子,可怜的幼虫终于被吃得只剩下一袭皮,皮中全是密密实实的菌丝体 (菌核)。入盛夏,菌核茁壮成长,不久,便从“虫”嘴巴那头伸出一根中间肥两头略尖、表面上生着一些小球体、里面隐藏着不少冬虫夏草后代 (子囊孢子) 的棒子。这棒子窜出泥土以后,怎么看都像夏天的草叶。

也不是任何地方都能生长冬虫夏草。

江南烟雨,天潮潮地湿湿,不适合冬虫夏草的生长。岭南天气,风热温湿,也不适合冬虫夏草的生长。根据科学考察,冬虫夏草只适合生长在我国四川、西藏、云南、贵州、青海、甘肃一带森林中潮湿的地方。想来,这真使经济至上的尘世短了不少冬虫夏草的产量。

冬虫夏草是幸运的吗?已无法看见白云回望合,无法像蝴蝶一样舞入菜花无处寻,陷入如此的境况,能是虫的 幸运吗 ?虫啊,要怪就只怪自己的命运吧!你何以要躲藏在冬的泥土里呢?何以要鬼使神差遇上什么菌呢?何以不固守好自己最后的防线,让人家钻入自己的玉体呢?……更何以年年岁岁、一代又一代总要被重复吃掉呢?

成为冬虫夏草绝不是菌的美德,而是菌的鸠占鹊巢,菌的侵略行径,菌的霸权主义;是冬天开始的弱肉强食,冬天里的强奸作为,生物界的罪恶逻辑;是菌将自己的幸福生活乃至未来建筑在其他生物的死亡之上。谁能想象得出虫的死亡过程有多痛苦?

冬虫夏草 是虫与草 的流血“整合”,是虫的死亡式异化。我想,这种异化的过程不但是慢慢的,更是悄悄的过程,是绿血在流淌的过程。这种异化无疑可以上溯到农业文明出现以前,甚至上溯到人类还 没有出现之前 。是“伟大”的冬虫夏草将一种菌的习惯、行为,乃至思想,让虫壳包裹了,包装了,甚至连名字也“去真菌化”了。

世上不是 有“披着 羊皮的狼”吗?我以为冬虫夏草不折不扣就是“披着虫皮的狼”。友人从西藏归来,带给我一小包冬虫夏草,说是世界上最好的冬虫夏草,因为是从生态环境最好的西藏出产的。我想,迄今为止人类的所谓生态学观念,本质上仍然是人类中心主义的。对于蝙蝠蛾幼虫来说,即便生活在西藏那样的土地上,生态环境也未必能说是好。

冬虫夏草使菌的身价得了道升了天。冬虫夏草入药,性温味甘,极具补肺益肾功能。煲一锅鸡汤,投四五条冬虫夏草即可。优质的冬虫夏草,药店已售数万余元一斤。

在地球村,新的冬虫夏草依然在产生……

篇4:解密“冬虫夏草”

药用价值:中国传统医学认为冬虫夏草是一种滋补强壮药,其性味甘、平,入肺、肾经,具有益肺肾、止咳嗽、补虚损、益精气的功能。主要用于治肺肾两虚、精气不足、咳嗽、虚喘、劳嗽咯血、阳痿遗精、自汗盗汗、腰膝酸痛等症,又因其性平力缓,能平补阴阳,为中老年体衰、病后体弱、产后体虚者的调补药食佳品。药理试验证实:冬虫夏草具有调节机体免疫力、增强身体素质、延缓衰老、增强常压耐缺氧能力、抗肾损伤、抗病原微生物、平喘祛痰等作用,尤其是在抗肿瘤作用方面效果更为显著。

服用方法:虫草可单独研末服,亦可与其他中药配伍使用,每次用量1.5~3克。冬虫夏草的食用方法很多,除配伍中药煎服、作丸剂、研末吞服或装入胶囊服用外,还可采用蒸、炖、煮、泡酒等方法服用。如果想通过服用一两次虫草就医治百病、身强体壮,是不可能的。另外,冬虫夏草属甘温之品,凡外感发热、湿热内盛者不宜服用。

去伪存真:1地蚕,为唇形科植物地蚕的干燥块茎。呈棱形或长棱形,略弯曲,似幼虫体,一端有残存的细长匍匐枝。表皮淡黄至灰黑色,有根痕,环节2~11个。无足和子座,味甜、有黏性。

2草石蚕,为唇科植物草石蚕的根茎,俗称土虫草。呈纺锤形,两端略尖。表面黄白色至棕黄色,有螺纹丝或串珠状,环节2~10个,无足和子座,味甘微辛。

3地笋,为唇形科植物地瓜苗的干燥根状茎。主要特征:呈纺锤形而略扁弯,一端呈褐色,无足和子座,气香、味甘。

篇5:冬虫夏草小学作文

有一种植物,超级稀有,这就是神奇的冬虫夏草。

关于冬虫夏草的来历是这样的:有一种小蛾子,叫“绿蝙蝠蛾”,这种蛾子每到秋天就生下自己的幼虫,并在土地里过冬,但是如果有一颗特殊的种子——虫草菌,落在了绿蝙蝠蛾的旁边、身上,或是那只绿蝙蝠蛾吃了这颗种子的话,种子就会在绿蝙蝠蛾的身上生根、发芽,看上去是普通的植物,但是它是吸收绿蝙蝠蛾的养料生存的,这种奇特的植物,便是冬虫夏草。冬虫夏草只有很巧合才可以生长发芽,不过它一旦发芽了,它的意志力就会很强,不管是狂风暴雨,还是什么严寒酷暑,冬虫夏草都不会放弃自己的成长,因为它知道生命是来之不易的,不管生长在悬崖峭壁上,还是又潮又冷的地方它都不会放弃成长。春季来临,冬虫夏草从土地中钻了出来,面对温暖的阳光,它感到一丝欣慰,也许,它还会觉得开心,因为它终于成功了。

它这种顽强拼搏的精神,值得我们学习!

篇6:冬虫夏草养殖方法

1、菌种:冬虫夏草的栽培首先要有医`学教育网搜集整理优良的纯菌种,目前全国的品种很多,一是要选择纯度高、无杂菌、无老化的菌种;二是要选择感染力强,菌种有较强的生命力,能对昆虫迅速感染得病死亡的品种;三是要选择适应范围广,特别是对环境湿度变化和其它杂菌感染要有一定的抵抗能力的品种。

2、昆虫:昆虫主要利用蝙蝠蛾幼虫作为冬虫夏草的寄主,也可利用桑蚕、柞蚕作寄主,幼虫要求必须是活的,个体大、肥胖的较好,数量多少根据自已的栽培而定,一般每平方米需幼虫1000克,母种一支,细沙土50公升。

3、环境:冬虫夏草的人工栽培无论海拔高低都可以,关键决定于温度。冬虫夏草是一种中、低温型菌类,菌丝生长繁殖适宜温度是5~32℃,最适宜12~18℃,菌核和子座形成10~25℃为宜,只要能满足这个温度范围,就可以栽培。

4、栽培季节:利用自然气温,一年可栽两季,春季3-5月,秋季9-11月,若在室内人工控温一年四季均可栽培,而且还可缩短生长期,充分利用自然气温,撑握好栽培季节,可降低生产成本。

二、栽培方式冬虫夏草的栽培方式很多,一种是利用昆虫栽培出医`学教育网搜集整理与野生一样的冬虫夏草,另一种是用米饭、PDA培养基或其它固体培养基直接培养草,这种草与虫草功能相同。栽培时可进行室内瓶栽、箱栽、床栽、露地栽培等方式,根据自已的条件任意选择,无论哪种方式,在栽培前都必须培养菌虫,使昆虫在入土之前先感染上这种带“病毒”性的菌液,到入土时已重病在身,不宜乱爬,有利于早死、快出、生长均匀。

菌虫培养方法是将已制好的液体菌种用喷雾器喷在幼虫身上,也可将菌液喷在桑叶上,吃后感染病菌,喷量每次见湿为宜,每天喷二次,三天后这种菌液浸染虫体内部感染病菌,使幼虫出现行动迟缓,处于昏迷状态,即可进行栽培。

1、瓶栽:瓶栽适合于家庭栽培,采用普通罐头瓶洗净后,在瓶内先垫2.5-3cm的细沙土,土质含水量达60%,然后将感染菌液的幼虫放在上面,每瓶放两只为宜,要求两只幼虫之间不要靠拢,腹面向下,放伸,上面再盖细沙土3cm,稍压平表面,为了保持湿润,再用塑料薄膜封口,放入室内外适宜的温度下进行管理,避免阳光直晒。

2、箱栽:箱栽也适合于家庭栽培,可利用大小木箱、木盆、塑料盆进行栽培。木箱底部和四周要有塑料薄膜防止水份散失,先将细沙土铺5-7cm厚,再均匀地放入菌虫,每只虫之间相隔2-3cm,上面再盖沙土3-5cm,表面用塑料薄膜拱起保湿,为了节约场地,还可将木箱重叠起来。

3、床栽:床架栽培是进行大批生产的发展方式,这种方式一般适宜室内,可充分利用室内室外进行层架栽培,节约场地,床架宽1米,长根据自已的房间设计,采用竹、木制作,每层四边高12cm用于挡土,栽培时先铺一层塑料薄膜,再倒细沙土5-7cm,放入菌虫,距离按箱栽,上面盖沙土3-5cm,然后覆盖塑料薄膜,保持相应的空间。

4、露地栽:露地栽是指室外栽培,室外栽培关键要选好场地,首先要避免阳光直射和雨水冲刷,做到能遮阴、能排水、能防旱、能保温、能防人畜践踏的环境。栽培方法可进行平地式或畦式两种方法;平地式栽培是将一般平地、坡地、荒地铲出表土15cm,宽1米,长不限,然后填上5cm厚的沙土,按上述方法放入菌虫,再盖细沙土5-7cm外用塑料薄膜覆盖,四周要有排水沟,上面要有树林或阴棚遮阴。

5、畦式栽培:畦式栽培可避免阳光和高温,既防旱又保湿,适宜广大农村栽培,畦式宽100cm,深50cm,长不限,四周同样能排水,栽培时在畦部先铺5cm厚的细沙土,再按述方法放入菌虫,然后又盖细沙土5cm,畦旁用竹拱弓,最后覆盖塑料薄膜两端通风,上再盖草莲遮阴和降温。

三、管理技术冬虫夏草栽培后的管理技术非常简单,主要是温度、湿度、光照、空气方面的管理。

1、温度:冬虫夏草对温度的要求比较高,一般是先低后高,但宁愿过低、生长慢,不能过高受影响,菌丝生长12~18℃为好,温度低长势慢,但杂菌少,成活率高。一般在零下40℃都冻不死,但高于32℃就死亡,在后期子座生长阶段需要20~25℃有利生长。

2、湿度:湿度管理是冬虫夏草生长发育的关键,虫体内的营养和湿度基本能满足它的生长要求,它不需要外来的营养和湿度。只需要外界物能保持虫体本身的湿度不易干燥,因此随时保持沙土的湿润,要求含水达60%为宜,如果干燥可喷少量的清水保持相应的湿润。

3、光照:冬虫夏草栽培不需很强的光照,以避光为好,后期子座发育时以散射光为好,但不能让太阳直晒,特别是室外栽培应采用阴林、人工搭阴棚、草莲覆盖等方式遮阴。

4、空气:冬虫夏草菌丝生长阶段对空气不重要,子座快要出土时应即揭去塑料薄膜,增加空气,以利子座的生长,并保持空气相对湿度75~95%左右

,出土后10-20天就生长成熟。

四、采收加工在自然条件下,冬虫夏草生长期一般为9个月,若今年9-11月栽培的明年5-6月可长出子座,也有在室内3-4月栽培的,当年9-10月长出子座,生长快慢决定品种性质和环境温度,冬虫夏草成熟标准是子座出土伸高3-5cm,顶端以发育成子囊果“毛笔尖”即可采收。

采收方法:用竹、木杆轻轻刨开沙土,将冬虫夏草拣出来,放在筐内,注意不要把虫体与子座弄断,更不要把虫体或子座刨伤,采收后用水冲净泥沙,及时放在太阳下晒干或烘干。

保存:冬虫夏草易受潮,必须充分干燥,干燥后立即装入塑料袋或瓶中封闭,防潮保存销售。

篇7:冬虫夏草人工种植方法

2、跟肉类产品炖着吃,此法为传统虫草宴吃法,结合不同的肉类品种,功效有一定的差别,缺点是不适合每日坚持长期食用。

3、使用研磨机将冬虫夏草磨成粉,装进胶囊盒中随身携带,每日定时服用。此法在卫生方面有隐患,若不是每日定期服用,不推荐使用。

篇8:趣说冬虫夏草

冬虫夏草究竟是虫还是草?多年从事冬虫夏草研究的专家介绍说, 从它的形成过程来看, 通俗地讲, 就是蝙蝠科中的蝙蝠蛾为繁衍后代, 产卵于土壤中, 卵转变为幼虫, 在此前后, 冬虫夏草菌侵入幼虫体内, 吸收幼虫体内的物质作为生存的营养条件, 并在幼虫体内不断繁殖, 致使幼虫体内充满菌丝, 在来年的5-7月天气转暖时, 自幼虫头部长出黄或浅褐色的菌座, 生长后冒出地面呈草梗状, 就形成我们平时见到的冬虫夏草。虽然它兼有虫和草的外形, 却非虫非草, 属于菌藻类生物。冬虫夏草生长的寄主昆虫———蝙蝠蛾的一生需要经过虫卵期 (约45-72天) 、幼虫期 (约680-940天) 、蛹期 (约42-58天) 、蝙蝠蛾成虫期 (约3-12天) , 也就是说虫草蝙蝠蛾一生需要2至3年的生长周期。

冬虫夏草有极高的药用价值, 史书上记载, “冬虫夏草全鸭汤”救了武则天。公元690年, 晚年武则天 (624-705年) 体衰多病, 咳嗽不止, 稍感风寒便病情加重, 尤其冬季, 不敢轻易地走出寝宫。太医为治疗她的病, 什么贵重的药品都用过, 但是不见多少疗效。跟随武则天多年的御膳房康师傅, 看在眼里, 急在心上。他记得在家乡时, 老年人用冬虫夏草炖鸡滋补身体, 想给武则天做一道试试看。鸡是“发物”, 有可能引起老病复发, 于是康师傅改用鸭子取而代之。鸭子炖好后, 康师傅端给武则天品尝。不料武则天见汤里有黑乎乎的似虫非虫的东西, 疑惑不解, 认定是康师傅要害她, 欲以谋杀罪处之。但念其以往没有过失, 将其打入了大牢, 没有当即问斩。御膳房的李师傅与康师傅是同乡好友, 非常同情康师傅的遭遇。他想只有用冬虫夏草治好武则天的病, 才能还康师傅的清白。一天, 李师傅一边拔鸭子身上的毛, 一边琢磨着怎样用冬虫夏草炖鸭子, 怎样才能使武则天看不见那黑乎乎的东西呢?他想来想去, 终于想出一个好办法———他扒开鸭子的嘴, 将60根冬虫夏草塞进鸭肚里, 再将其放进锅里炖起来。武则天吃了以后, 觉得鸭汤味道鲜美, 一天两次, 此后每天便喝两盅冬虫夏草炖的鸭汤。一个多月后, 武则天的气色好转, 不再咳嗽了, 宫廷上下都为她的健康高兴。一天, 武则天心情愉悦, 邀请监察御史吃饭。李师傅端上了冬虫夏草炖鸭汤, 武则天说:“我的身体恢复得很好, 得益于这道汤。”监察御史尝了一勺, 果然味道极佳。席间, 武则天问监察御史如何处理康师傅谋杀案, 这时李师傅斗胆抢说了几句话:“康师傅炖的鸭汤里面黑乎乎的东西是冬虫夏草。康师傅之所以这样做, 全是为了给武皇补身子……”李师傅把制作冬虫夏草炖鸭汤的整个过程, 原原本本地向武则天和监察御史做了讲述, 之后, 从鸭肚子里取出了黑乎乎的冬虫夏草。武则天见此情景, 马上吩咐把康师傅放出来, 专门为她做冬虫夏草全鸭汤。从此, 冬虫夏草全鸭汤这道既能佐餐, 又能治病的名菜身价百倍, 成了御膳房的一道名菜, 后来传到民间, 1000多年来, 盛行不衰。

篇9:闲话冬虫夏草

冬虫夏草出产在我国西南高寒地区,其名始见于吴仪洛《本草从新》(1757年)和赵学敏《本草纲目拾遗》(1765年)。在明、清两代笔记体小说中,更是充满了传奇性的描述:“冬虫夏草,一物也。冬则为虫,夏则为草,虫形似蚕,色微黄,草形似韭,叶较细。入夏,虫以头入地,尾自成草,杂错于蔓草间,不知其为虫也;交冬,草渐萎黄,乃出地蠕蠕而动,其尾犹簌簌然带草而行。盖随气化转移,理有然者。”

1723年,法国人巴拉南在中国采集生物标本,发现了冬虫夏草,把它带回巴黎,以后又由英国人利维当作世外珍奇带往伦敦。直到1842年,经过真菌学家伯克利的研究,才发现所谓的“冬虫夏草”,乃是一种叫虫草菌的子囊菌寄生于蝙蝠蛾的幼虫上所形成的,这才初步弄清虫草菌的庐山真面目。

在青藏高原海拔3800米以上的雪线地带,阳春三月,蝙蝠蛾便在草丛间翩翩起舞,寻求配偶,并把卵产在土块中。高寒地区的隆冬,寒冷异常,孵化出来的蝙蝠蛾幼虫便蛰伏在潮湿而温暖的土壤内越冬。好在满山遍野都生长着头花蓼、珠芽蓼、小叶杜鹃和蒿草之类植物,它们的嫩根多汁而富于营养,为幼虫的越冬准备了充足的粮食。然而,这里并非蝙蝠蛾幼虫的“天堂”,随时都会遭到它的宿敌——虫草菌的袭击。

说来颇也奇怪,尽管在土壤里有各种各样的幼虫,虫草菌可以让它们在那里安享“童年”之乐,对于蝙蝠蛾的幼虫则不然,一旦在土壤中相遇,便粘附到它们的表皮之上,并钻进体腔内,以幼虫的内脏为养料,滋生出无数新菌丝。有的新菌丝萌生在体表之外,看上去就像虫身披着白毛。当幼虫死亡后,体腔内的五脏六腑都被菌丝消耗殆尽,只留下一具被菌丝所充满的皮壳,虫草菌断绝了食源,便安然进入休眠期。待到来年春晖转发,幼虫尸体的头部长出一根像圆棒的东西,就是古人所说的“草”,并认为是“虫腹精液”所化,也不无道理。不过与其称之为“草”,倒不如说它是从菌丝上结出的“果实”更为恰当,真菌学家便称之为“子囊果”。这种“果实”上就长着数以亿万计的种子——“子囊孢子”。因为“草”的形状颇似中国古代兵器中的狼牙棒,真菌学家就命名为“中国棒头菌”,不过人们习惯上还是把它称为冬虫夏草或虫草。

《红楼梦》第五十回中说道,住在大观园的姑娘们聚在一起猜灯谜,李绮出了个灯谜,谜面是“萤”字,谜底是“花”。黛玉笑道:“妙得很!萤可不是草化的?”众人会意,都笑了说“好”。这“腐草化萤”指的就是冬虫夏草。蒲松龄《聊斋志异外集》对其有形象的描述:“冬虫夏草名符实,变化生成一气通,一物竟能兼动植,世间物理信难穷。”

中医认为,冬虫夏草性平味甘,归肺、肾经,有补肾助阳、止血化痰之功,适用于肾气亏虚所致的阳痿、遗精、腰膝酸软及肺气亏虚或肺肾两虚所致的久咳、虚喘、痨嗽、咯血等症。现代药理研究表明,本品含虫草酸、冬虫夏草素、脂肪、粗蛋白、维生素B等,能抑制结核杆菌、肺炎球菌;有降低血脂,抑制动脉粥样硬化形成的作用,适用于老年高脂血症。

篇10:冬虫夏草的养殖技术

2、箱栽:箱栽也适合于家庭栽培,可利用大小木箱、木盆、塑料盆进行栽培。木箱底部和四周要有塑料薄膜防止水份散失,先将细沙土铺5-7cm厚,再均匀地放入菌虫,每只虫之间相隔2-3cm,上面再盖沙土3-5cm,表面用塑料薄膜拱起保湿,为了节约场地,还可将木箱重叠起来。

3、床栽:床架栽培是进行大批生产的发展方式,这种方式一般适宜室内,可充分利用室内室外进行层架栽培,节约场地,床架宽1米,长根据自已的房间设计,采用竹、木制作,每层四边高12cm用于挡土,栽培时先铺一层塑料薄膜,再倒细沙土5-7cm,放入菌虫,距离按箱栽,上面盖沙土3-5cm,然后覆盖塑料薄膜,保持相应的空间。

4、露地栽:露地栽是指室外栽培,室外栽培关键要选好场地,首先要避免阳光直射和雨水冲刷,做到能遮阴、能排水、能防旱、能保温、能防人畜践踏的环境。栽培方法可进行平地式或畦式两种方法;平地式栽培是将一般平地、坡地、荒地铲出表土15cm,宽1米,长不限,然后填上5cm厚的沙土,按上述方法放入菌虫,再盖细沙土5-7cm外用塑料薄膜覆盖,四周要有排水沟,上面要有树林或阴棚遮阴。

篇11:[中药鉴别]教您挑选冬虫夏草

真伪虫草的鉴别

1.真虫草虫体各部位无缺陷,被草根覆贴的虫眼、虫口红褐色,角质莹片十分明显,伪虫无此特征。伪虫草多为细泥加细木灰掺入黏合剂,以虫草小模压拓而成,晒干后与真虫草相似。其虫体纹理不清晰,全虫有缺陷,置手中有坠重感。2.真虫草放口中咀嚼如咀青毛豆,愈咀愈香,满口鸡肉甜香味。伪虫草

咀之则硬碎顶牙,湿透后则满口泥粉,无肉香味,土味很浓。3.真虫草之夏草尾表面青黑,断开的后断面空白,伪虫草无此特征。4.真虫草表面附生油润泥膜,伪虫草无此膜。

篇12:川西冬虫夏草资源如何可持续利用

川西冬虫夏草资源如何可持续利用

冬虫夏草是特有的珍稀名贵药材,目前市场上散货售价每公斤10万~12万元,通过不同包装后在大城市药店售价每公斤高达20万~30万元,由于货源少、供不应求,价格每年在不断上升.

作 者:朱斗锡 何荣华 吴朝德 赵佳 何丽娟  作者单位:四川省绵阳市食用茵研究所,绵阳,621000 刊 名:农业科技通讯 英文刊名:BULLETIN OF AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY 年,卷(期):2009 “”(5) 分类号:S5 关键词: 

篇13:冬虫夏草的真伪鉴别

1正品冬虫夏草

1.1 冬虫夏草的性状鉴别

本品由虫体及从虫体头部长出的真菌子座相连而成。虫体似蚕, 长3~5 cm, 直径0.3~0.8 cm, 表面土黄至黄棕色, 偶棕褐色, 有环纹20~30个, 近头部的环纹较密。头部黄红色, 足八对, 近头部3对, 中部四对较明显, 近尾部1对, 尾如蚕尾。质脆, 易折断, 断面略平坦, 淡黄色或黄白色, 中央有明显的暗棕色“V”形纹。子座为细长圆柱型, 形似“金针”, 长4~8 cm, 直径约0.3 cm, 表面深棕色至棕褐色, 有细纵皱纹, 顶端稍膨大;质柔韧, 不易折断, 断面类白色呈丝状。气微腥, 味微苦, 有草菇样香味。老药工有“草似金针虫似蚕”的形象比喻来形容冬虫夏草的鉴别特点。本品以虫体肥壮、完整、坚实、外表亮黄色、内玉白、子座短者为佳。

1.2 冬虫夏草的显微鉴别

虫体横切面:不规则形, 四周为虫体的躯壳, 其上着生长短不一的锐刺毛和长绒毛, 有的似分枝状。躯壳内为大量菌丝, 其间有裂隙。

子座横切面:周围由子囊壳组成, 子囊壳卵形至椭圆形, 下半部埋于凹陷的子座内。子囊壳内有多数线形子囊。每个子囊内又有2~8个线形的子囊孢子。中央充满菌丝, 其间有裂隙, 不育部分则完全见不到子囊壳。

2混淆品的鉴别

2.1 凉山虫草[2]

2.1.1 定义

为麦角菌科真菌凉山虫草Cordyceps Liangshanensis Zang, Liu et Hu寄生在鳞翅目昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的干燥复合体。

2.1.2 鉴别要点

虫体细而长, 表面棕褐色, 或黑褐色, 有众多环纹, 外披棕色绒毛, 足9~10对, 不明显。子座有明显皱纹, 外端不膨大。质脆, 易折断, 断面呈白色, 周边呈棕褐色, 味淡, 无草菇样香气。在四川曾混作冬虫夏草药用。

2.2 亚香棒虫草[3]

2.2.1 定义

为麦角菌科真菌亚香棒虫草菌Cordyceps hawkesii Gray寄生在鳞翅目昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的干燥复合体。

2.2.2 鉴别要点

虫体似蚕, 外表灰黄色或灰褐色, 头部为棕褐色。虫体有20~30个环节, 足8对, 近头部3对, 中部4对, 尾部1对。子座体灰褐色, 单生或偶有分枝, 长5~8 cm, 柄多弯曲, 黑色, 有纵皱纹或棱, 上部光滑, 下部有细绒毛, 断面外层饱满, 子囊壳呈辐射状, 埋于子座内, 无不孕顶端。气微腥, 味微苦, 无草菇样香气。在湖南、安徽、湖北等地曾混作冬虫夏草药用。据湖南药检部门报道, 本品日服4.5 g 普遍出现不良反应, 以头昏、恶心、呕吐最为突出, 连服2个月则出现白细胞和中性粒细胞减少的趋势[3]。

2.3 香棒虫草[3]

2.3.1 定义

为麦角菌科真菌香棒虫草Cordyceps barnesii Thwaites寄生在鞘翅目昆虫金龟子钝卑的子座及幼虫尸体的复合体。

2.3.2 鉴别要点

本品虫体呈弯曲的扁肾形, 似小蛴螬短粗, 长1.5~2 cm, 直径约0.5 cm。表面棕黄色, 头较小, 棕红色, 体部有密环纹, 胸部有足3对。子座呈线状, 长2~6 cm, 直径约0.2 cm。头部稍膨大, 表面灰褐色, 有细纵皱纹, 棕褐色, 质柔韧。气微臭。在河南曾混作冬虫夏草药用。

2.4 北虫草[4]

2.4.1 为蛹草Cordyceps militaris (L) Link的干燥子座及虫体, 习称北虫草。

2.4.2 其主要区别为子座头部为椭圆形, 顶端钝圆, 橙黄或橙红色, 柄细长, 圆柱形。寄主为夜蛾科幼虫, 常能发育成蛹后才死, 所以虫体呈椭圆形的蛹。发现在吉林、河北、陕西、安徽、广西、云南等省区混充。

3伪品的鉴别

3.1 机制虫草

3.1.1 定义 为面粉、石膏、黄花菜等为原料的人工模压制造的虫体。

3.1.2 鉴别要点 本品外观轮廓和正品冬虫草相似, 但色泽, 纹理极不自然。质脆, 易折断, 断面颗粒状, 黄白色, 无组织结构。味淡, 嚼之有粘牙感, 粉末遇碘试液显蓝色。

3.2 唇形科植物草石蚕Stachys sieboldii MIq.的干燥根茎[5], 制假者常将其全草及根茎揉搓晒干, 洒上石灰粉或滑石粉制成。

其外形呈纺缍形, 两端略尖, 表面黄白色至棕黄色, 具2~10个环节, 略似老蚕, 节上可见点状芽痕及根痕, 无子实体, 无足, 无头尾之分, 质坚脆, 易折断, 断面粉性, 白色, 浅棕色, 形成层环清晰可见, 环内有4个棕色小点, 气微, 味甘。

3.3 由唇形科植物地蚕Stachys geohmbyeis cbyeis C.YWu的干燥地下块茎仿制的。

伪品呈纺缍形, 表面黄白色至灰黑色, 有4~15个环节, 腹部无足及气门, 无子座, 水浸膨胀后环节明显, 节上有明显突起的芽及根痕, 气无, 味微甜。

3.4 由鳞翅目昆虫幼虫在头部粘以紫菀的干燥根而制成。

其外形酷似正品, 表面较光滑, 深黄色至黄棕色, 有20~30个细密环纹, 足8对, 中部4对较明显, 断面淡黄白色, 头部以棕褐色粘合剂粘接有假子座 (水浸后假子座脱落) , 假子座为长圆柱形, 绝大部分上下粗细相等, 先端平齐, 极少部分上部渐细或略有膨大, 表面棕红色或灰红色, 有纵皱纹, 质较柔软, 气微香, 味甜微苦。

紫苑根茎表皮有腺毛, 皮层散在石细胞及厚壁细胞, 根及根茎薄壁细胞含菊糖, 有的含草酸钙簇晶。

3.5 伪品用“酥油藏粑”为原料制成[6]。酥油藏粑是藏族主食之一, 藏民也用它来制作各种敬神的花卉, 雕成藏粑花。以制作花卉之技, 伪制条条虫草, 易如反掌。本伪品与正品外形接近, 每条虫草之间多少有点形态及大小上的差异, 它们或较直, 或略弯曲, 或有断节;色泽也不尽相同, 有棕褐、棕、淡棕之分。

鉴别:断面明显可见粉质, 或略显油润, 呈浸白色。将本伪品用手搓捏即散, 入水煮之则化成糊状, 并可见水面有油滴漂浮。粉末淡黄棕色, 有酥油香气。

4掺杂品的鉴别

4.1 在冬虫夏草采收后, 晒至6~7成干, 从虫体头部或中部切开把竹签、铁丝插入虫体内, 晒干后, 虫体外观与真虫草一致[7]。

鉴别可见虫体头部或中部有折断痕, 断面部位皱缩, 沿断面折断可见插入虫体中的竹签, 药商以此增加冬虫夏草的整体质量量。

4.2 用酒浸泡制取冬虫夏草浸泡液后, 不法药商常把晒干后已失去药效的冬虫夏草返销市场。

鉴别可见虫体表面呈现淡黄色, 头部呈棕色, 体轻, 头部环纹不清晰, 咀嚼则有酒味。

4.3 用稀明矾水浸泡

4.3.1 明矾水浸泡过再凉干的虫草, 既可以增加重量, 又可以防腐。

4.3.2 虽然从外观上可通过虫体是否发硬, 嚼之是否有涩味, 来判断虫草是否加明矾水浸泡过, 但是如果明矾用量少, 则从外观和气味上均不易鉴别, 必须通过硫酸盐和铝盐方可鉴别。具体鉴别方法如下:取样品2 g, 加10 ml蒸馏水超声提取, 过滤, 滤液加25%的氯化钡3~5滴, 则发现掺有明矾样品的溶液迅速产生白色沉淀, 而且加盐酸不溶解。另取供试品溶液加NaOH数滴, 则发现掺有明矾的样品溶液迅速产生白色胶状沉淀, 而且加盐酸不溶解, 但加过量NaOH可溶解[8]。

4.4 填注少量铅粉 在虫草中混入铅粉, 用肉眼观察无任何异常, 由于加入铅粉量少, 密度增大也不容易被发现。但是样品一旦经过金属探测器或用X光照射, 则即可发现异常。

参考文献

[1]李家实.中药鉴定学.上海科学技术出版社, 1996:536.

[2]陈世昆, 马君涛.冬虫夏草与其三种伪品的鉴别.中草药, 1997, 28 (2) :113.

[3]倪进利.冬虫夏草及其伪品的鉴别.中药研究, 2007, 9:5.

[4]李家实.中药鉴定学.上海科学技术出版社, 1996:538.

[5]黄青萍.冬虫夏草及其掺伪品的鉴别.黑龙江医药, 2001, 2:14.

[6]陈俊华.又一种伪品冬虫夏草.基层中药杂志, 1994, 8 (3) :9.

[7]王琳, 吴俊.冬虫夏草伪劣品种的鉴别.时珍国医国药, 2005, 16 (2) :132.

篇14:冬虫夏草巧入口

然而,如同美玉中的“微疵”,冬虫夏草有一个不大不小的缺点:有一股特殊的腥臭味。用一般的炖汤、煎煮、研粉冲服等方法,有的病人难以下咽,有的勉强吞下,不一会儿就吐出来。

我们发现,如果能将冬虫夏草做成胶囊,可以很好地解决这个问题。大家可到医药器材商店购买一些空胶囊。空胶囊有0、1、2、3、4型号,不同型号表示不同的容量,购买时可根据自己的需要选择。然后,用粉碎机将冬虫夏草研成粉末,装入空胶囊。根据我们的经验,以此法服用,还能较炖汤、煎煮等方法减少用量,不失为既去腥又省钱的好办法。治疗不同的疾病,用量也不同,以下用法可供大家参考:

1.慢性支气管炎及支气管哮喘:每天4~5克,分2次服,连服2个月。

2.慢性活动性肝炎、肝硬化:每天2~5克,分3次服,连服3个月。

3.高脂血症:每天3克,分3次服。

4.性功能低下:每天3~6克,分3次服,连服40天左右。

5.心律失常:每天1~2克,分3次服,连服2个星期。

6.体虚易感冒:每天2次,每次0.5克,连服2个星期。

7.过敏性鼻炎:每次3~6克,每天3次。

篇15:冬虫夏草

国家食品药品监督管理局印发《冬虫夏草用于保健食品试点工作方案》

2012年08月20日 发布

为在合理保护冬虫夏草资源的前提下,高效开发利用冬虫夏草资源,推动高端科技含量保健食品的研发,研究建立珍稀原料用于保健食品的有效监管办法,依据《食品安全法》、《野生植物保护条例》等法律法规,国家食品药品监督管理局组织制定了《冬虫夏草用于保健食品试点工作方案》,对试点工作目的、原则、试点企业基本条件、试点内容、试点工作步骤和试点期限进行了明确。

国家食品药品监督管理局要求各省(区、市)食品药品监督管理部门根据本行政区域内保健食品生产企业的实际,按照试点工作方案的要求,组织做好试点相关工作。

国家食品药品监督管理局关于印发冬虫夏草用于保健食品试点

工作方案的通知

国食药监保化[2012]225号

各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局(药品监督管理局),国家食品药品监督管理局保健食品审评中心:

为在合理保护冬虫夏草资源的前提下,高效开发利用冬虫夏草资源,推动高端科技含量保健食品的研发,研究建立珍稀原料用于保健食品的有效监管办法,依据《中华人民共和国食品安全法》、《中华人民共和国野生植物保护条例》等法律法规,国家食品药品监督管理局组织制定了《冬虫夏草用于保健食品试点工作方案》。请各省(区、市)食品药品监督管理部门根据本行政区域内保健食品生产企业的实际,按照试点工作方案的要求,组织做好试点相关工作。

国家食品药品监督管理局

2012年8月15日

冬虫夏草用于保健食品试点工作方案

为妥善开展冬虫夏草用于保健食品试点工作,研究建立珍稀资源用于保健食品的有效监管办法,制定本试点工作方案。

一、工作目的

通过本试点工作,科学、严格设置准入门槛,积极引导符合条件的保健食品生产企业在冬虫夏草资源得到合理保护的前提下,高效开发利用冬虫夏草资源,推动高端科技含量保健食品的研发,促进保健食品质量安全控制水平的提高。同时,为建立珍稀资源用于保健食品的监管模式奠定基础。

二、工作原则

(一)依法开展工作。严格按照国务院发布的《中华人民共和国野生植物保护条例》、农业部《甘草和麻黄草采集管理办法》等有关法规规章和《卫生部办公厅关于冬虫夏草作为保健食品原料有关问题的复函》(卫办监督函〔2012〕39号)要求开展相关工作。

(二)合理利用珍稀资源。加强冬虫夏草资源使用的可控性,严格监控冬虫夏草原料来源,加强对加工、使用全过程的监管,保护冬虫夏草资源和草原生态环境。

(三)严格准入标准。制定严格的试点企业准入条件,明确相关要求,注重冬虫夏草的高水平研发和深加工,实现冬虫夏草有限资源的科学合理开发利用。

三、试点企业基本条件

(一)具有稳定合法的冬虫夏草来源。能够提供与资源省份有关单位签定合法且能够保障规模生产的购销合同,产品生产规模与获得的冬虫夏草资源相适应,能够保障生产可持续性。

(二)具有良好的保健食品研发能力。试点企业近两年曾承担食品药品领域国家级技术研究或者国家级重大科技创新项目,具有明确的创新发展战略和研发团队,具备良好的研发设备、实验室等条件和能力,获得国家技术专利。

(三)具有显著技术优势。围绕以冬虫夏草为原料试点生产的产品,已开展大量基础性研究验证工作,有充分的科学依据支撑(文献依据、权威专家认可),研发的产品具有市场发展潜力。

(四)具有良好的保健食品生产能力。试点企业保健食品工业产品年销售额10亿元以上(原产地保健食品生产企业可适当放宽)。具有先进的生产水平和完备的检验检测能力,拥有良好的产品质量安全过程控制能力。

(五)具有行业带动性。试点企业有关产品市场占有率在全国位居前列,具有较大的影响力,拥有中国驰名商标。试点企业应具备良好的社会认可度和影响力,诚实守信,社会责任感强,两年内无质量安全等相关负面报道,无重大质量安全责任事故,无制假售假记录,经营状况良好。

四、试点内容

(一)规范冬虫夏草原料采购管理。研究冬虫夏草采购管理办法,严格控制冬虫夏草来源;研究冬虫夏草原料技术要求和相应检测方法,严格控制冬虫夏草原料质量。

(二)提高产品质量安全控制水平。加强高科技手段应用,严格产品质量安全保障措施,强化全过程管理,探索建立产品质量安全过程控制的有效途径。建立保障产品质量安全的生产经营全过程追溯体系,覆盖原料采购、投料、中间体控制、成品检验、销售全过程。

(三)开展上市后产品功效性监测和验证工作。制定售出产品功效性跟踪监测的措施,积累评价数据,完成评价报告,研究建立产品功效性验证的有效办法。

五、试点工作步骤

(一)企业在国家食品药品监督管理局相关通知发布之日起1年内,根据试点企业基本条件,在规定时间内到生产企业所在地省级食品药品监管部门提出试点申请,并提交相关资料。

(二)省级食品药品监管部门受理企业申请后,对相关资料进行审核,提出审核意见。符合要求的,报送国家食品药品监督管理局。

(三)国家食品药品监督管理局组织对省级食品药品监管部门报送的相关资料进行审核,符合要求的,同意企业参加试点工作并反馈相关省级食品药品监管部门。

(四)相关企业按照产品注册申报程序及有关要求开展产品研发和相关试验验证等工作,准备相关申报资料,提出产品注册申请。国家食品药品监督管理局按照“程序不减、标准不降”的原则,加快开展产品审评审批工作。符合要求的,准予注册,发给保健食品批准证书。具有以冬虫夏草替代品为原料的保健食品批准证书的,申请人可以按照变更程序及有关要求开展相关申报工作。

(五)相关企业按照国家食品药品监督管理局批准的内容组织产品生产,并于产品批准每届满1年,按照试点内容向国家食品药品监督管理局提交试点工作报告。同时,还应提交冬虫夏草原料采购的证明文件、冬虫夏草的使用流向及相关产品销售额等资料。

(六)国家食品药品监督管理局组织对企业提供的试点工作报告进行审核。符合要求的,相关企业继续开展试点工作。不符合要求的,国家食品药品监督管理局可要求相关企业停止试点工作,注销相关保健食品批准文号。

(七)试点期间,对于试点企业出现产品质量安全等相关负面报道、发生重大质量安全责任事故或者出现制假售假行为的,一经查实,国家食品药品监督管理局将责令相关企业停止试点工作,注销相关保健食品批准文号并依法严肃处理。

六、试点期限

篇16:冬虫夏草

摘要:为了得到多糖收率较高的冬虫夏草菌株,从西藏那曲地五高山草甸中采集的新鲜冬虫夏草子实体初步分离得到50株菌株,并对其进行形态观察和18S rDNA-ITS序列分析鉴定,采用超声辅助热水浸提法进行冬虫夏草多糖的提取。结果表明,CC-3菌株Cladosporium sp.的模式菌株JN084020的18S rDNA-ITS同源相似性为100%,初步确定为冬虫夏草的无性型,经过超声辅助热水浸提后多糖收率最高为6.619%。

关键词:冬虫夏草;真菌;筛选;rDNA-ITS序列;Cladosporium sp.中图分类号: S182 文献标志码: A

文章编号:1002-1302(2015)03-0240-03

冬虫夏草(Ophiocordyceps sinensis)是中国传统的名贵中药材,系麦角菌科虫草属真菌寄生于蝙蝠蛾的幼虫所形成的的菌虫复合体[1]。2001年统计,全球冬虫夏草种类已有400种,其中中国记载有105种左右[2]。

冬虫夏草在中国传统医学里已经流传1 300多年,最早记载冬虫夏草的文献始于唐朝前期公元710年的《月王药诊》,记载冬虫夏草能治疗肺部疾病。公元780年《藏本草》记载的冬虫夏草具有润肺、补肾的作用;1765年,赵学敏在《本草纲目拾遗》中记载冬虫夏草的作用是润肺、补肾、益精气,理诸虚百损;1757年,吴仪洛所著《本草从新》中指出冬虫夏草保肺益肾,止血化痰。其后,《黔囊》《文房肆考》《四川通志》《本草图说》等100多部古书都记载了冬虫夏草名贵药材[3]。

目前,研究证实冬虫夏草有降血糖、免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗纤维化、抗炎等功效,对肺脏、肾脏、中枢神经系统、免疫系统、心脏、肝脏等均有较好的临床保护作用[4]。由于冬虫夏草的生长环境及人们过于采挖,冬虫夏草已经远远不能满足医疗的需求,人们开始研究冬虫夏草成分与功能的关系,冬虫夏草多糖作为冬虫夏草的重要活性成分,具有抗疲劳、抗衰老、提高免疫力的作用[5-6]。表明冬虫夏草多糖在新药开发方面有广阔的前景。

已报道的冬虫夏草的无性型菌株涉及13个属,22个种名[7],包括细脚拟青霉(Paecilomyces tenuipes)、虫草蚧霉属(Lecanicilliuum sp.)、轮枝孢属(Verticillium sp.)、被毛孢属(Hirsutella)、头孢属(Cephalosporium sp.)等,其中部分冬虫夏草的无性型还有待进一步确定[8]。冬虫夏草的无性型研究已成为研究热点。

本研究分离筛选了50株能够产多糖的菌株,分子生物学鉴定分别为虫草蚧霉属、枝孢菌属、黑粉菌属。超声辅助热水浸提法提取冬虫夏草多糖,CC-3菌株的多糖得率最高为6.619%。研究结果为应用发酵方法生产冬虫夏草多糖替代冬虫夏草应用于医疗,以及进一步确定冬虫夏草多糖的功能奠定基础。材料与方法

1.1 材料

新鲜冬虫夏草采自西藏那曲地五高山草甸。

1.2 培养基及试剂

PDA加富培养基:土豆200 g/L、葡萄糖20 g/L、酵母膏 1 g/L、蛋白胨1 g/L、KH2PO4 1g /L、琼脂240 g/L、MgSO4 0.5 g/L、蚕蛹粉1 g/L。pH值6.7,121 ℃蒸汽灭菌30 min。

种子瓶液体培养基:KH2PO4 3 g/L、MgSO4 1.5 g/L、蛋白胨10 g/L、葡萄糖20 g/L。pH值6.7,121 ℃蒸汽灭菌30 min。

发酵培养基:葡萄糖9 g/L、麦芽糖19 g/L、蛋白胨 10 g/L、KH2PO4 0.5 g/L、MgSO4 1 g/L、MnSO4 0.5 g/L。pH值6.7,121 ℃蒸汽灭菌30 min。

CTAB提取液:NaCl 1.4 mol/L、EDTA 20 mmol/L、CTAB 20 g/L、Tris-Cl 100 mmol/L、巯基乙醇2 g/L、pH值8.0。

苯酚 ∶氯仿 ∶异戊醇溶液=25 ∶24 ∶1。

RNA酶:1 mg/mL。

真菌通用引物:ITS1和ITS4。

1.3 试验方法

1.3.1 冬虫夏草菌株的分离纯化

无菌条件下将新鲜的冬虫夏草用1%HgCl2溶液消毒,用无菌水冲洗干净,并用无菌的滤纸吸干表面的水分,分离冬虫夏草的蛹体和子座部分,分别研磨成粉,用无菌湿棉签蘸取粉末涂于加入氯霉素1 g/L 的PDA加富平板上,倒置于28 ℃培养箱中培养至单菌落出现。挑选菌丝色泽洁白、生长健壮、无杂菌污染的菌株,转接加入氯霉素1 g/L 的PDA加富试管斜面中,28 ℃培养箱中培养7~10 d,直至整个斜面都长满菌丝,选取生长健壮,无杂菌的菌株即为分离得到的菌株。

1.3.2 菌种的鉴定

1.3.2.1 菌体形态观察

将分离得到的菌株梯度划线接种于PDA平板中,用无菌镊子取无菌盖玻片,斜插入培养基中,每天观察并记录菌落生长情况,7 d后,拔出插片,显微镜下观察菌丝形态及产孢形式。

1.3.2.2 菌株的ITS序列测定

(1)基因组DNA的提取。采用CTAB法[9]提取基因组DNA。

(2)ITS序列分析。

ITS序列引物为真菌通用引物,ITS1和ITS4[10]。ITS1:5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′;

ITS4:5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′。

PCR扩增反应体系(25 μL):DNA 2 μL、TaqDNA聚合酶0.3 μL、10×TaqBuffer(含Mg2+)2.5 μL、ITS1 2 μL、ITS4 2 μL、dNTP 2 μL、ddH2O 14.2 μL。

PCR扩增程序:95 ℃预变性10 min,94 ℃变性30 s、55 ℃ 退火30 s、72 ℃ 延伸50 s,35个循环;72 ℃延伸10 min。

(3)琼脂糖凝胶电泳及测序。

PCR产物扩增后进行琼脂糖凝胶电泳,条带清晰,用蛋白核酸测定仪测定后无蛋白和核酸残留,送北京宝锐通生物技术有限公司测序。

(4)ITS测序数据分析。

在NCBI中对菌株的ITS序列进行BLAST分析,然后用MEGA5进行系统发育树的构建。

1.3.3 提取冬虫夏草多糖

1.3.3.1 冬虫夏草菌丝体的制备

在无菌条件下挖取1 cm2的分离菌株的培养菌苔接种于装有100 mL种子培养基的三角瓶(容量500 mL)中,180 r/min、28 ℃摇床培养7 d。

按10%的接种量,接种于装有100 mL发酵培养基的三角瓶(容量500 mL)中,180 r/min、28 ℃摇床培养7 d。

发酵液 8 000 r/min 离心10 min。收菌丝体、80 ℃烘干、粉碎、过80目筛,备用。

将烘干的冬虫夏草菌丝体粉碎,过40目筛,备用。

1.3.3.2 超声辅助热水浸提法提取冬虫夏草多糖

取干燥恒重的冬虫夏草菌丝粉10 g,提取溶液为去离子水(首次加量料液比为1 g ∶20 mL,浸泡30 min之后,加水量料液比按前加量的75%递减)。提取条件:温度90 ℃、提取4次、每次浸提时间90 min,超声功率150 W。

1.3.4 冬虫夏草多糖含量测定

采用苯酚-硫酸比色法[11-12]测定。

1.3.4.1 绘制葡萄糖标准曲线

取烘干至恒重的葡萄糖标准品配置成最终浓度为0.1 mg/mL的标准液,取9支试管分别取葡萄糖标准液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 mL,各补加蒸馏水至1.0 mL,然后加入5%苯酚1.0 mL,迅速加入浓硫酸5.0 mL,摇匀,静置10 min。于40 ℃水浴中加热 30 min,以蒸馏水替代葡萄糖标准液为空白对照,于D490 nm波长处测吸光度。

1.3.4.2 冬虫夏草多糖含量的测定

取冬虫夏草多糖提取滤液,稀释一定的倍数,取1 mL稀释液,加入5%苯酚溶液 1 mL,摇匀、迅速加入5mL浓硫酸,摇匀、静置10 min。于 40 ℃ 水浴中加热30 min,以蒸馏水作空白对照,在D490 nm处测定吸光度。按回归方程计算稀释液多糖含量。按下式计算多糖含量:多糖含量(mg/g)=待测液中多糖浓度(mg/mL)×溶液体积(mL)×稀释倍数/原料质量(g)。结果与分析

2.1 冬虫夏草菌株的分离纯化

对分离出的50株生长健壮、无杂菌、菌丝洁白的菌株进行多糖的提取,并测定多糖含量,根据葡萄糖标准曲线得到的回归方程,计算虫草多糖得率。回归方程为y=10.399x-0019 5,r=0.998 7。根据计算得到,CC-3菌株的多糖得率最高,达6.619%。不同菌株的多糖含量结果见表1。讨论与结论

冬虫夏草的生活史分为有性型的子囊孢子阶段和无性型的分生孢子阶段。而人工培养、液体发酵菌丝体的冬虫夏草均为无性型阶段,因此,冬虫夏草无性型及菌种的鉴定至关重要。

最早人们判定冬虫夏草有性型和无性型的关系,依据假定无性型与虫草有性型子实体有相关性,用人工诱导虫草子实体的形成。人工诱导方法在人工诱发子实体长出子囊孢子非常困难,培养出的虫草子实体寥寥无几,人工诱导方法只能为虫草有性型和无性型的鉴定提供依据。

刘作易等从云南收集的新鲜冬虫夏草(Cordyceps sinensis),利用微循环对其子囊孢子的产孢结构进行了观察,并与组织和子囊孢子分离的菌株的产孢结构进行比对,还与中国被毛孢(Hirsutella sinensis)的产孢结构进行比较。结果显示微循环的产孢结构与分离菌株和中国被毛孢的产孢结构相似,由此确定冬虫夏草的无性型为中国被毛孢[13]。该方法虽操作简单,但必须要先明确此菌株的种属关系,该方法在冬虫夏草无性型的鉴定上也还是一种辅助手段。

随着分子生物学的发展,RAPD-PCR技术为确定虫草的无性型提供了可靠的分子生物学证据,但该方法不能很好地确定菌株的种和亚种。ITS序列分析的发展,为菌株无性型与有性型关系及菌株的近缘关系方面提供了可靠证据。Kang等报道,甘肃虫草和冬虫夏草具有相同的 ITS序列,并认为甘肃虫草可能是冬虫夏草的分类异名[14]。张泽文对古尼拟青霉菌种的完整的 rDNA的ITS 区进行序列测定并进行比对,结果表明,分离到菌种为古尼虫草的无性型,即古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii)[15]。

本研究从采摘的新鲜冬虫夏草子实体中分离得到CC-3菌株,运用插片法对该菌株的菌丝形态和孢子结构进行显微观察,初步判断菌株的菌属关系,通过RAPD-PCR技术,用通用引物ITS1 和ITS4扩增出18S rDNA片段,进行序列比对,最后确定该菌株的种属关系。

多糖提取方法很多,如水提醇沉方法提取多糖,在醇沉过程中会损失大量多糖;酶解法提取多糖,条件温和、质量好,但是经济价值高;热水浸提法提取多糖,方法简单易行,但效率较低。超声波产生的强烈振动和空化效应,使细胞破碎程度增大,加速了多糖的溶出,有利于多糖的提取。本试验采取超声波辅助热水浸提法提取虫草多糖。

多糖测定方法也很多,通常采用硫酸-蒽酮法、苯酚-硫酸法测定多糖的含量。硫酸-蒽酮法由于糖与蒽酮试剂的显色深度不同,糖混合时,常因不同糖类比例造成一定的误差。而苯酚-硫酸法测定多糖,方法简单、灵敏度高、不受蛋白质存在的影响,产生的颜色稳定。

从西藏新鲜的冬虫夏草中初步分离得到50株菌株,经过多糖含量测定,CC-3菌株多糖得率最高,为6.619%,多糖含量高达6.619 mg/g。对CC-3菌株进行形态学观察、分子生物学18S rDNA序列分析,初步鉴定CC-3菌株为Cladosporium sp.菌株。

参考文献:

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