碱液配制工作安排及操作步骤

碱液配制工作安排及操作步骤（精选3篇）

篇1：碱液配制工作安排及操作步骤

碱液配制工作安排及操作步骤

一、碱液配制工作：

1、蒸馏岗位早班操作人员负责将上、下两个碱液桶配制好规定的浓度，保证三个班的正常使用。

2、经常检查储存桶内碱液存量情况，及时把化碱桶的碱液放入储存桶。

3、随时观察储存桶的碱液是否被消化，防止计量泵出故障，影响成品质量。

二、碱液配制步骤：

1、用自来水先将化碱桶装至规定位置，（把氢氧化钠添加管淹完）。

2、开启搅拌器，到楼上把氢氧化钠倒入下碱管，一次加75kg（三袋）。

3、搅拌5分钟后，停止搅拌，静置待用。

4、在加水和倒氢氧化钠时，要特别小心，防止碱对人体造成伤害。

二0一一年六月二日 生产部

篇2：碱液配制工作安排及操作步骤

试剂配制(小量)

1.1M（M代表摩尔浓度即mol∕L）NaOH(400ml): 分子量为40，秤取16g NaOH, 溶于400ml DDW中。

2.2M Tris-HCl(500ml): 分子量为121.14, 秤取121.14g Tris,放入干净的500ml烧杯中，加400 ml DDW，置于搅拌器上搅拌溶解，用HCl调节pH值为8.0（首先直接加12M的浓盐酸约20ml，接近8.0时再用1M HCl 调节）, 定容至500ml，4℃保存。

3.10%SDS(200ml): 称量20gSDS,放入干净的烧杯中，加100 ml DDW，定容到200ml，室温保存。（SDS具有较强的刺激性，称量时一定带好口罩，动作轻柔）。

4.Buffer P1(500ml): 用50ml离心管量取10ml 0.5M的EDTA，然后量取12.5ml 2M 的Tris-HCl，放入干净的烧杯中，加入300ml DDW,置于搅拌器上搅拌溶解，用HCl调节pH值为8.0（大约加12M的浓盐酸1ml），定容至500ml，4℃保存。

5.Buffer P2（100ml）: 20ml 1M NaOH和10ml 10%SDS放入200ml的玻璃瓶中，然后加入70ml DDW，混匀，室温放置过夜，使其自溶，最后室温保存。(注：不需要定容，严格按步骤操作)。

6.Buffer P3(500ml)： 秤取147.21g乙酸钾，溶于300ml DDW中，置于搅拌器上搅拌溶解，用冰醋酸调节pH值为5.5，（约加80–100ml冰醋酸）, 定容至500ml，4℃保存。7.Buffer QBT（500ml）：分别称取NaCl 21.915g, MoPS 5.23g, 放于干净的500ml烧杯中，加入300ml DDW,置于搅拌器上搅拌溶解，用1M NaOH调节pH值为7.0（约加10–15ml NaOH）,然后加入75ml 异丙醇，定容至500ml，4℃保存。

8.Buffer QC（500ml）：分别称取NaCl 29.22g, MoPS 5.23g,放于干净的500ml烧杯中，加入300ml DDW,置于搅拌器上搅拌溶解，用1M NaOH调节pH值为7.0（约加9ml NaOH,然后加入75ml 异丙醇，定容至500ml，4℃保存。9.Buffer QF（500ml）：称取NaCl 36.525g, 量取2M Tris-HCl 12.5ml,放于干净的500ml烧杯中，加入300ml DDW，置于搅拌器上搅拌溶解，用1M NaOH调节pH值为8.5（约加0.1ml NaOH），然后加入75ml异丙醇，定容至500ml，4℃保存。10.配制RNase:

(1)将RNase粉末溶于10mM的乙酸钾（即Buffer P3），配制成浓度为10mg/ml的溶液。

(2)将配好的RNase溶液100℃加热10min, 随后冷却至室温。

(3)用1M 的Tris-HCl调节pH值至7.4，大约需要0.1体积的Tris-HCl。(4)分装RNase溶液于1.5ml EP管中，-20℃保存。

试剂配制(大量)

1.1M NaOH(400ml): 分子量为40，秤取16g NaOH, 溶于400ml DDW中。2.2M Tris-HCl(500ml): 分子量为121.14, 秤取121.14g Tris,溶于400 ml DDW中，用HCl调节pH值为8.0, 定容至500ml。

3.Buffer P2（1000ml）: 称取10g SDS, 放入1000ml的玻璃瓶中，然后加入750ml DDW，最后加入200 ml 1M的NaOH，混匀，室温放置过夜，使其自溶。(注：不需要定容，严格按步骤操作。)4.Buffer P1(1000ml): 用50ml离心管量取20ml 0.5M的EDTA，然后量取25ml 2M 的Tris-HCl，加入700ml DDW, 用HCl调节pH值为8.0，定容至1000ml。

5.Buffer P3(1000ml)： 秤取294.42g乙酸钾，溶于800ml DDW中，用冰醋酸调节pH值为5.5，定容至1000ml。6.Buffer QBT（1000ml）：分别称取NaCl 43.83g, MoPS 10.46g, 加入600ml DDW, 用NaOH调节pH值为7.0，然后加入150ml 异丙醇，定容至1000ml。7.Buffer QC（1000ml）：分别称取NaCl 58.44g, MoPS 10.46g, 加入600ml DDW, 用NaOH调节pH值为7.0，然后加入150ml 异丙醇，定容至1000ml。8.Buffer QF（1000ml）：称取NaCl 73.05g, 量取2M Tris-HCl 25ml, 加入800ml DDW，用NaOH调节pH值为8.5，然后加入150ml 异丙醇，定容至1000ml。9.配制RNase:

(1)将RNase粉末溶于10mM的乙酸钾（即Buffer P3），配制成浓度为10mg/ml的溶液。

(2)将配好的RNase溶液100℃加热10min, 随后冷却至室温。

(3)用1M 的Tris-HCl调节pH值至7.4，大约需要0.1体积的Tris-HCl。(4)分装RNase溶液于1.5ml EP管中，-20℃保存。

操作步骤 准备工作：

• 大提质粒的前两天用50ml离心管摇菌，在5-7ml加有氨苄抗生素AMP的LB液体培养基中挑菌，37℃下摇菌12-16h。

• 大提质粒前一天将50ml离心管摇好的菌液500ml大三角瓶中加入含有氨苄抗生素AMP的LB液体培养基200ml，37℃下摇菌12-16h。

1.沉淀菌液：向离心机配套的50 ml离心管中，加入30 ml菌液，6000 g离心10min, 大约沉淀菌液200 ml。(注意：配平离心管，离心时要在离心管壁和盖上都做好标记，且离心时写字的管壁侧朝向外，以便容易找到沉淀物)。离好一管，取回弃去上液保留沉淀物，再反复离心直到所有200ml菌液全部离完），打开盖倒置吸水纸上控干。2.溶解沉淀: 量取10 ml Buffer P1, 加入100μl RNase A, 混匀后，加入到离心沉淀的菌中，用振荡器充分溶解菌液沉淀（可用15ml离心管量取，Buffer P1 加入沉淀离心管是管口不要接触，以防互相污染）。

3.加入10 ml Buffer P2，液体呈现蓝色，轻轻混匀，使其充分反应，冰上放置2-3min即可。（此步主要是碱裂解细菌，使其中的蛋白质和DNA变性，反应时间不能太长，否则容易使大肠杆菌的基因组DNA断裂成小片段，污染质粒DNA）

4.加入10 ml 预冷的Buffer P3，轻轻颠倒混匀，直到蓝色全部消失，出现白色蛋白沉淀，冰上放置20min。（此步发生酸碱中和反应，pH值降低，使变性的DNA双链结构恢复，其中的SDS可以充分与蛋白质结合，使其析出）

5.20 min后，6000 g 4℃离心25min。同时，向柱子中加入5ml Buffer QBT，使其全部流过柱子，平衡柱子。如果是重复使用的柱子，先使其中的HCl全部流尽，然后加满DDW清洗2遍柱子，最后再加入Buffer QBT平衡柱子。

6.剪一小块纱布，折叠4层，放于柱子上部。将离心后的液体缓慢倒入纱布中，最后挤压纱布使其中的液体全部直接过滤到柱子中，使其充分流过柱子。（如果此步不只1个质粒时，挤压不同质粒的纱布时，一定要换手套，避免污染质粒）

7.清洗柱子: 液体全部流过柱子后，向柱子中直接加满Buffer QC，使其全部流过柱子，清洗2遍，弃去废液。

8.洗脱质粒: 向柱子中加15ml Buffer QF，靠重力作用使其全部通过柱子，收集洗脱液。(注：要收集到一个新的管中)9.沉淀质粒：向收集的液体中，加入0.7倍体积（即10.5 ml）异丙醇，轻轻混匀，6000 g 4℃离心25 min。（异丙醇可以充分沉淀质粒，但同时会沉淀很多盐分）

10.清洗质粒：离心后，注意质粒贴壁的方向，应从其侧面倒掉废液。然后加入10 ml 70%的乙醇，轻轻晃动（不能用枪吹散，否则会损失很多质粒）。

11.沉淀质粒：6000 g 4℃离心10min，轻轻吸弃废液，将质粒开盖晾置，使乙醇充分会发。（质粒中的乙醇会影响后续反应中的酶活性）

12.溶解质粒：用300ulDDW或TE溶解步骤11中的质粒，转移到新的1.5mlEP管中，做好标记，检测浓度。13.柱子回收:

(1)先用自来水冲洗柱子内外；

篇3：浅静脉留置针的操作步骤及护理

【关键词】 静脉留置针 并发症 护理

【中图分类号】R473 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2015）02-0578-01

静脉留置针又称套管针，随着护理科学的发展，静脉留置针被广泛应用于临床护理工作中，脉留置针导管柔软，不易损伤血管。静脉留置针可以减少静脉穿刺带来的心理和生理上痛苦和不适，按药物浓度给予静脉药物治疗，利于随时对危重患者进行抢救。提高护士的工作效率，赢取危重患者的抢救时间。适用于新生儿、儿童、成年人、长期输液及血管穿刺困难的病人。操作[步骤 洗手、准备用物、选择血管、消毒、穿刺、送管、固定、冲管、封管。1具体操作步骤-1.1选择血管进行评估：首选前臂静脉、 粗直、弹性好、血流丰富，避开关节和静脉瓣，为患者选择留置针的适宜型号。1.2洗手，准备用物； 洗手，戴口罩，准备用物。治疗车上应置有治疗盘、静脉留置针、肝素生理盐水1U/ml×50ml，5ml注射器一支，无菌敷料，一 次性敷贴、消毒物品、静脉输液用品等。1。3向患者及家属解释静脉留置注射的重要性。取得配合。检查、核对药物及用法。消毒皮肤 2 次，以穿刺点为中心，消毒直径8×8cm，螺旋消毒，待干。.打开肝素帽包装，备用。.在穿刺点上方，10cm处接扎止血带，一手固定导管座，一手垂直向上轻轻除去护 针帽，旋转松动外套管，绷紧皮肤，以15～30°角度进针，直刺血管。見回血后，降低到 5—10 度角 再进针 0.2cm，；右手持住针柄，左手将留置针套管全部送入静脉；松开止血带，打开调速器 观察穿刺是否成功-撤出针芯，连接肝素帽，肝素帽要高于导管尖端，且与血管平行，左手固定针座，右手撤出针芯，一 旦针芯撤出， 不得再次插入-；.以穿刺点为中心用无菌透明敷妥善固定；；连接输液器，调节静脉输液速度；填写静脉留置针穿刺时间，收拾用物。冲管：生理盐水脉冲式冲管；推一下，停一下。封管：1.只将针尖斜面留在肝素帽内，先脉冲式封管 2.当推注封管液 剩 0.5-1ML 时， 采取边推边拔针头推液速度大于拔针速度， 给予正压。 3.夹紧小夹子：一手持小夹子，一手快速将延长管推至输液夹底部， 夹小夹子的位置尽量靠近穿刺点，以保持封管有效性。

常见的静脉留置针的并发症及其护理；静脉留置针常有穿刺部位感染，液体渗漏、皮下血肿，导管堵塞、静脉炎及静脉血栓形成 等并发症。静脉输液本身是一种侵入性操作，静脉留置针的广泛应用增加了感染的危险性。在进行穿刺或留置针护理前，用肥皂液洗手，选择合适的穿刺部位和静脉，加强自身护理操作技能，提高静脉穿刺率。严格无菌操作，预防感染 穿刺处每天换一次敷料，并用碘酒、酒精消毒穿刺点，盖上无菌干纱，用胶布重新固定好，也可使用无菌胶贴隔日更次一次，用碘伏消毒穿刺部位。妥善固定导管，争取患者及其家属的配合，必要时必要时可适当约束肢体。防止堵塞；造成导管堵塞的原因较为复杂，通常与静脉营养输液后导管冲洗不彻底、封管液种类、用量以及推注速度选择不当、病人的凝血机制异常等有关。在静脉高营养输液后应彻底冲洗管道，每次静脉输液后正确封管；每日治疗结束后用0.9%生理盐水5ml冲管，将残余药液全部冲入血管内。封管：每日用肝素盐水1ml封管一次。肝素盐水浓度为每毫升盐水含100U肝素。封管应采用连续、不间断、边推注边旋转式退出针头的方法，封管液推注速度宜慢，使其充满整个导管。每日仔细观察穿刺点皮肤的情况，同时询问患者有无不适感。如有药液外渗 可给予局部封闭，减轻疼痛，促进吸收，取0.9%生理盐水10ml+2%利多卡因5ml+氢化考地松0.5混合液局部浸润封闭；；取土豆切成片状贴敷于皮肤红肿部位；；局部物理疗法。静脉留置针留置时间不宜过长，留置时间为3 d～5 d为宜，如有液体外渗，穿刺部位红肿等应立即去除。，并注意保护血管，避免在同一部位反复穿刺。