乙肝病毒前S1抗原与其病毒复制的相关性分析

乙肝肝炎病毒前S1抗原、前S2抗原和HBeAg三者共同构成乙肝肝炎病毒 (HBV) 外壳大蛋白。前S1抗原除具有增进HBsAg免疫性的作用外, 亦有助于HBV吸附到肝细胞作用。同时前S1抗原刺激机体产生前S1抗体, 共同在HBV感染、复制及疾病转归中起重要作用[1,2]。HBV-DNA PCR检测作为乙肝病毒复制的金标准, 由于受到实验本身对实验条件要求较高等因素制约, 通常临床多以检测乙肝血清标志物中的HBeAg作为反映病毒复制情况的依据。但目前较多的证据显示HBeAg作为反映乙肝病毒复制情况的标志物并不敏感[3,4]。本文对120例临床慢性乙肝病人血清进行了HBV-DNAPCR测定及前S1抗原和HBeAg检测, 比较了后两者对于反映病毒复制情况的敏感性。

1 材料与方法

1.1 标本来源

2008年10月至2009年5月间收集本院慢性乙肝病人血清120例。其中男性86例, 女性34例, 年龄在18～65岁之间。排除患有其他类型肝炎或肝脏其它疾病。血液于采集2h内经1500r/min离心, 于当日完成全部试验。

1.2 方法

(1) 前S1抗原采用酶联免疫双抗体夹心ELISA法, 使用上海阿尔法医药有限公司生产的试剂盒。严格按试剂说明书操作。

(2) HBeAg采用化学发光法测定, 使用郑州安图生物技术的限公司的HERNCT 120半自动免疫分析仪及其配套试剂。严格按试剂说明书操作。

(3) HBV-DNA采用定量PCR, 使用中山大学达安基因股份公司DA7600实时荧光定量PCR扩增仪, 试剂为中山大学达安基因股份公司生产的HBV-DNA PCR试剂盒, 严格按试剂说明书操作。

注:HBV DNA与Pre-S1比, χ2=0.02, P>0.05;HBV DNA与HBeAg比, χ2=20.74, P<0.005

1.3 统计方法

所有数据分析采用SPSS 11.0统计软件包处理, 计数资料的比较采用χ2检验。

2 结果

Pre-S1抗原、HBeAg与HBV DNA关系:120例标本中有61例HBV-DNA PCR阳性;以HBV DNA阳性为标准, HBeAg、Pre-S1抗原的检出率分别为44.2% (27/61) 、78.7% (48/61) ;与HBV-DNA的总符合率分别为71.6% (86/120) 、86.7% (104/120) , 说明在判断HBV复制有无及活跃程度方面, 检测Pre-S1抗原比HBeAg更有意义。经配对计数χ2检验, HBV DNA与HBeAg检出率差异有显著性;HBV DNA与Pre-S1抗原检出率差异无显著性 (表1) , 说明HBeAg阴性并不能除外HBV复制。HBeAg检出率与Pre-S1检出率比差异有显著性 (χ2=15.26, P<0.05) 。

3 讨论

HBV双链DNA含有4个编码蛋白的基因组, 分别是S基因、C基因、P基因、X基因。S基因可分为前S1基因、前S2基因和S基因。由S基因组编码可得到三类乙肝病毒外膜蛋白:226个氨基酸组成的肽段, 即S基因;281个氨基酸组成的肽段, 含S蛋白和前S2蛋白;389个氨基酸组成的肽段, 含S蛋白、前S2蛋白和前S1蛋白。乙肝病人血清中含有3种颗粒, 即:完整的病毒颗粒Dane颗粒、小球型颗粒和管型颗粒。其中只有Dane颗粒含有病毒DNA, 能进行复制, 具有传染性。前S1蛋白主要存在Dane颗粒上[5]。正常人肝细胞膜上存在HBV前S1抗原受体, 能直接吸附HBV, 这种受体与HBV的结合点定位于前S1R 21～47氨基酸序列上[6]。

核酸扩增荧光定量检测法可敏感检测出HBV DNA的含量, 通常将HBV DNA定量>103拷贝/mL判断为HBV DNA阳性。以HBV DNA阳性为标准, Pre-S1抗原的检出率、与HBV DNA的总符合率均较HBeAg阳性者高, 说明判断HBV有无复制及复制活跃程度方面, 检测Pre-S1抗原比HBeAg更有意义[7,8]。

本研究表明, 前S1抗原能较好地反映病毒的复制情况, 且前S1抗原与HBV DNA的相关性优于HBeAg, 可作为更敏感的病毒复制与传染性的标志。前S1抗原检测在乙肝的诊断及疗效观察有很好的临床意义。

摘要：目的 探讨乙型肝炎病毒 (HBV) 前S1抗原 (Pre-S1) 与乙肝病毒DNA (HBV-DNA) 和乙型肝炎e抗原 (HBeAg) 之间的相关性, 为乙型肝炎的诊断、疗效评估提供科学依据。方法 120例临床标本分别采用定量PCR技术检测HBV-DNA载量;采用化学发光法检测HBeAg;采用酶联免疫法 (ELISA) 检测前S1抗原。结果 61例HBV-DNAPCR阳性标本中, 前S1抗原阳性48例, HBeAg阳性27例, 2种检测结果间存在显著差异 (P<0.05) 。结论 血清前S1抗原、HBeAg与HBV复制密切相关。作为反映HBV复制的指标, 前S1抗原优于HBeAg, 前S1抗原在乙肝流行病学调查上和临床诊断及疗效观察方面有重要的临床价值。

关键词：前S1抗原,乙型肝炎e抗原,乙型肝炎病毒

参考文献

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