核酸提取流程范文

第一篇：核酸提取流程范文

几种核酸提取方法概述

(1).浓盐法

利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.

也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.

两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.

以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA. (2).阴离子去污剂法:

用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA. (3).苯酚抽提法:

苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 .

第二篇：实验二 植物核酸的提取-教案

授课教师 学生人数 55 课 题 实验二 植物基因组DNA的提取 授课类型 新授课 授课方法 讲授、演示 教学目的 掌握CTAB法提取植物基因组DNA的原理与方法 教学重点 理解每一步实验操作的目的 教学难点 实验操作过程中的一些注意事项 教学过程

一、 背景知识

1.DNA在细胞中存在的位臵?植物细胞DNA存在的位臵和动物细胞有何不同?(图) 教学用具 多媒体

2.DNA的存在形式

双螺旋结构图

双螺旋结构组成

染色体是怎样形成的?

一级结构(核小体=双螺旋+组蛋白)-二级结构(螺线管)-三级结构(超螺线管)-四级结构(染色体)

真核生物基因组DNA是经过四级包装形成了染色体，先是DNA形成双螺旋结构，再与组蛋白形成核小体(一级结构)，压缩7倍，再形成螺旋管(二级结构)，压缩6倍，之后再形成超螺旋管(三级结构)，压缩40倍，最后超螺旋管压缩形成染色体(四级结构)，再压缩5倍，正常细胞中基因组DNA是以染色质(相当于一级结构)形式存在，在细胞分裂的中期以染色体形式存在，真核生物细胞质DNA主要是以裸露的环状DNA形式存在，没有核小体结构。

3.遗传物质核酸除了DNA外还有另外一种，即RNA，它与DNA在结构上的区别?(图)

RNA基本单位中间的五碳糖是核糖，含氮碱基尿嘧啶(U)替代 胸腺嘧啶(T) 4.核酸的理化性质

(1)形状：DNA为白色类似石棉样的纤维状物， RNA的纯品呈白色粉末或结晶。

(2)溶解性：一般都溶于水，不溶于乙醇、异丙醇、氯仿等有机溶剂，它们的钠盐比游离酸易溶于水。 (3)保存：在酸性溶液中，核酸易水解，中性或弱碱性溶液中较稳定。

二、实验目的

1.掌握CTAB法提取植物基因组DNA的原理 2.CTAB法提取植物基因组DNA的实验方法

三、实验原理

1.核酸在细胞中的存在方式，

是以核酸-蛋白质复合物的形式存在，如一级结构核小体(图)：DNA螺旋+组蛋白

2.通过低温研钵破坏植物细胞壁

3.加入CTAB溶解细胞膜，CTAB与核酸形成核酸-CTAB复合物，使核酸与蛋白质分离。

4.加入高盐溶液溶解核酸-CTAB复合物，加入蛋白质变性剂使蛋白质变性沉淀出来，离心除去蛋白质。 5.加入核酸沉淀剂，溶解CTAB，并使和核酸沉淀出来，离心得到核酸沉淀。

四、实验仪器 1.水浴锅

2.离心机(12管)：3台 3.研钵：10个

4.移液枪(包括枪头)：1ml、400ul

五、实验材料与药品

实验材料：新鲜菠菜叶片 1.十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)

作用：溶解细胞膜并与核酸结合，便于分离核酸。 商品信息：瓶装/100g。

理化性质：白色或浅黄色结晶体至粉末状，有刺激气味，易溶于异丙醇，可溶于水,震荡时产生大量泡沫，化学稳定性好，耐热、耐光、耐压、耐强酸强碱。有吸湿性，在酸性溶液中稳定;溶于10份水，溶于热水、乙醇、三氯甲烷,易溶于异丙醇水溶液,微溶于丙酮,不溶于乙醚和苯。

储存：在阴凉，干燥，通风良好的地方，远离不相容的物质。 危害：高毒，对皮肤及粘膜刺激性小，有轻微脱脂作用。 2.1M Tris-HCl PH8.0缓冲液

作用：提供一个缓冲环境，防止核酸被破坏 商品信息：瓶/100ml，无色、澄清溶液

理化性质：Tris中文品名为三羟甲基氨基甲烷，瓶/500g。是一种白色结晶或粉末。溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、苯，不溶于乙醚、四氯化碳，对铜、铝有腐蚀作用，有刺激性的化学物质。

储存：室温保存。

危害：毒性低，可致癌，不要直接接触皮肤。 3.乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)

作用：螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制脱氧核糖核酸酶(DNase)活性，活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。

商品信息：瓶/250g。

理化性质：无味无臭或微咸的白色或乳白色结晶或颗粒状粉末。溶于水，不溶于乙醇、乙醚，其水溶液pH值约为5.3。可由EDTA与氢氧化钠和碳酸钙作用制得。

储存：于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。应与氧化剂分开存放，切忌混储。配备相应品种和数量的消防器材。储区应备有合适的材料收容泄漏物。

危害：对粘膜和上呼吸道有刺激作用。对眼睛、皮肤有刺激作用。本品可燃，具刺激性。 4.Tris饱和酚

作用：强蛋白质变性剂。 商品信息：瓶/250ml。

理化性质：为浅黄色透明液体，上层为Tris-HCl溶液，加有抗氧化的0.25% 8-羟基喹啉和0.1%的β-巯基乙醇。

储存：4℃避光保存。

危害：Tris饱和酚有较强的腐蚀性，应尽量避免皮肤直接接触或吸入体内。如发现变为黄色或棕色，表明发生氧化，不能使用。 5.β-巯基乙醇(2-巯基乙醇)

作用：提供一种还原剂，这样酚类物质(植物材料特别是老的材料中含有大量的酚类物质)就不能被氧化成醌(醌易与DNA发生共价结合，使DNA发生褐变，从而影响你提DNA的实验)。巯基乙醇兼有消除CTAB震荡时产生的泡沫的作用。

商品信息：瓶/100g。

理化性质：无色透明液体，具有少许硫醇气味。易溶于水，乙醇和乙醚等有机溶剂，与苯可以任意比例混溶。水中溶解度：1mg/mL。

储存：对空气敏感，易吸潮。 使容器保持密闭，储存在阴凉、干燥通风处。打开了的容器必须仔细重新封口并保持竖放位臵以防止泄漏。建议贮存温度 2- 8℃。

危害：高毒吸入 、摄入或经皮肤吸收后会中毒。 对环境有危害，对水体可造成污染。 本品可燃。 6.氯化钠(NaCl)

作用：CTAB-核酸复合物在高盐溶液中易溶。 商品信息：瓶/500g，分析纯AR。

理化性质：白色晶体状。易溶于水、甘油，微溶于乙醇、液氨;不溶于浓盐酸。在空气中微有潮解性。稳定性比较好。

储存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。应与氧化剂分开存放，切忌混储。 危害： 7.无水乙醇

作用：DNA沉淀剂、洗涤剂。 商品信息：瓶/500ml，分析纯AR。

理化性质：无色澄清液体。极易从空气中吸收水分，能与水和氯仿、乙醚等多种有机溶剂以任意比例互溶。 储存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过30℃。保持容器密封。应与氧化剂、酸类、碱金属、胺类等分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。

危害：易燃，具刺激性。蒸气与空气能形成爆炸性混合物，爆炸极限3.5%～18.0%(体积)。 8.氯仿(三氯甲烷)

作用：蛋白质变性剂，加速有机相与液相分层，去除核酸溶液中的少量酚(酚易溶于氯仿)。 商品信息：瓶/500ml。

理化性质：无色透明液体，极易挥发，有特殊气味。不溶于水，溶于醇、醚、苯。 储存：保存在密封的棕色瓶中。

危害：麻醉性。有致癌可能性。在光照下遇空气逐渐被氧化生成剧毒的光气。 9.异戊醇

作用：减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

商品信息：瓶/500ml。

理化性质：无色液体，有不愉快的气味。微溶于水，可混溶于醇、醚等有机溶剂。

储存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过30℃。保持容器密封。应与氧化剂、酸类等分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。

危害：吸入、口服或经皮肤吸收有麻醉作用。其蒸气或雾对眼睛、皮肤、粘膜和呼吸道有刺激作用，可引起神经系统功能紊乱，长时间接触有麻醉作用。易燃，其蒸气与空气可形成爆炸性混合物，遇明火、高热能引起燃烧爆炸。 10.异丙醇

作用：DNA沉淀剂，DNA在异丙醇的溶解度更低，所以用异丙醇来沉淀更完全，而后由于异丙醇不易挥发，所以用乙醇洗去异丙醇，乙醇挥发快。用-20度预冷异丙醇沉淀效果较等体积乙醇沉淀好;异丙醇约和2.5倍体积的乙醇效果相当;但DNA微溶于乙醇，使用乙醇沉淀会使部分DNA溶解损失;所以多选用-20度预冷异丙醇。一般6500倍到8000倍重力10分钟就可以将异丙醇沉淀的核酸紧密的离到管底。

商品信息：棕色玻璃瓶/500ml。

理化性质：无色透明具有乙醇气味的可燃性液体。有似乙醇和丙酮混合物的气味，能与醇、醚、氯仿和水混溶，不溶于盐溶液。

储存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过30℃。保持容器密封。应与氧化剂、酸类、卤素等分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。

危害：微毒类，高浓度蒸气具有明显麻醉作用，对眼、呼吸道的黏膜有刺激作用，能损伤视网膜及视神经。常温下可引火燃烧，其蒸汽与空气混合易形成爆炸混合物。 11.PVP-40(聚乙烯吡咯烷酮)

作用：PVP是酚的络合物，能与多酚形成一种不溶的络合物质，有效去除多酚，减少DNA中酚的污染;同时它也能和多糖结合，有效去除多糖。

商品信息：白色塑料瓶/100g。

理化性质：白色或乳白色粉末或颗粒，有微臭。溶于水、碱、酸及极性有机溶剂。 储存：室温干燥保存。 危害： 12.液氮(LN2)

作用：低温导致植物组织冻裂，方便研磨使细胞破碎，使DNA释放完全;低温情况下各酶处于低活性状态，有利于抑制DNAase的作用，保护DNA。 商品信息：分析纯

理化性质：-196℃。液态的氮气。是惰性的，无色，无臭，无腐蚀性，不可燃，温度极低。 储存：储存于阴凉、通风的库房。库温不宜超过30℃。 危害：汽化时大量吸热接触造成冻伤。

六、实验试剂

1.氯仿-异戊醇(24:1)100ml-20ml=80ml {氯仿 96ml + 异戊醇 4ml} = 100ml，4℃保存 2.酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)40ml {氯仿-异戊醇(24:1)20ml + Tris饱和酚20ml} = 40ml，4℃保存 3.TE缓冲液 PH8.0 50ml {10mM Tris-HCl(PH8.0)缓冲液 0.5ml + 0.5M EDTA(PH8.0)0.1ml} → → 定容到50ml → 高压灭菌后冷却4℃保存  【0.5M EDTA(PH8.0)】的配制：100ml {蒸馏水 80ml + EDTA-2Na.2H2O 18.61g} → 用NaOH(约2g)调至PH8.0 → 定容至100ml → → 分装后高压灭菌备用。注：需加入NaOH调至PH8.0才能完全溶解。  【10mM Tris-HCl(PH8.0)缓冲液】的配制：10ml {1M Tris-HCl PH8.0缓冲液100μl + 水9.9ml} → 定容至10ml → 10mM Tris-HCl(PH8.0)缓冲液 4. 2%CTAB抽提液 250ml

{CTAB 4g + 无水乙醇 5ml + 水100ml} → 加入200ml烧杯中 → 加热溶解 → 再依次加入 → → {5M NaCl 56ml + 1M Tris-HCl(PH8.0)20ml + 0.5M EDTA 8ml} → 定容至250ml → 高压灭菌冷却后加入 → {1%β-巯基乙醇(400ul)2ml + PVP-40 5g} → 4℃保存   【5M NaCl溶液】配制：100ml {NaCl 29.22g + 水90ml} → 加热到80℃溶解冷却后 → 定容至100ml → 高压灭菌备用 【1%(v/v)β-巯基乙醇】配制：10ml {β-巯基乙醇 100μl +水9.9ml} → 1%β-巯基乙醇10ml 5.蒸馏水

所有药剂用水都要纯净水经高压灭菌冷却

七、实验步骤

(一)实验前准备

1.研钵、异丙醇-20℃预冷;【研钵10个、异丙醇75ml】

2.将2%CTAB抽提液从4℃冰箱内取出在65℃水浴预热;【CTAB抽提液30ml】 3.称取30份新鲜菠菜叶片，每份1g，称重时去叶脉;【菠菜叶片30g】 4.用蒸馏水冲洗叶片，滤纸吸干水分，将叶片用剪刀剪小。【洗瓶、滤纸、剪刀】

5.实验器材：冰箱、65℃水浴锅、液氮、10ml离心管90个、药匙、移液枪(1ml、100μl、400μl)、离心机(10000r/min)

6.实验药剂：酚-氯仿-异戊醇30ml(每管1ml)、氯仿-异戊醇60ml(每管2ml)、无水乙醇12ml(每管400 μl)、TE缓冲液3ml(每管100μl)

(二)破碎细胞，释放溶解核酸

1.将叶片臵于预冷的研钵(实验前-20℃预冷)中，倒入液氮，尽快研磨成粉末;

 目的：低温导致植物组织冻裂，方便研磨使细胞破碎，使DNA释放完全;低温情况下各酶处于低活性状态，有利于抑制DNase的作用，保护DNA。

2.将粉末加入10ml离心管中，加入 1ml预热的CTAB 抽提缓冲液，轻轻搅动摇匀;  目的：CTAB可以溶解细胞膜并与DNA结合，便于分离DNA。加入β-巯基乙醇和PVP-40的目的是减少植物中酚类物质的影响。EDTA的作用是螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制脱氧核糖核酸酶(DNase)活性，活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。Tris-HCl提供一个缓冲环境，防止DNA被破坏。高盐溶液可以更好的溶解核酸-CTAB复合物。

3.将离心管臵于 65℃的水浴中保温40分钟，期间每隔10分钟轻轻摇晃几次。  目的：水浴使CTAB抽提液和叶片充分反应。

(三)抽提去掉蛋白质

1.将水浴的离心管取出，冷却 2分钟后，加入1ml酚-氯仿-异戊醇，振荡 2分钟，使两者混合均匀，12000 r/min离心10分钟;  目的：第一次离心溶液分3层，上-中-下层：CTAB-核酸-变性蛋白-有机溶剂

2.取上清液(含CTAB-核酸)至新的10 ml离心管中，加入2ml氯仿-异戊醇，轻轻颠倒离心管，混匀，12 000r/min离心10分钟。  目的：第二次离心进一步去掉变性蛋白，去掉多余的酚

(四)沉淀核酸

1.小心取上清液(含CTAB-核酸)臵于一个新的10ml离心管中(尽量避免吸取中间层),加入2.5ml的异丙醇(-20℃预冷)，将离心管慢慢上下摇动30秒，使异丙醇与水层充分混合，室温放臵15分钟至能见到DNA絮状物;  目的：异丙醇为DNA沉淀剂，异丙醇与CTAB互溶，但不与核酸相溶。用-20℃预冷的异丙醇沉淀效果较等体积乙醇沉淀好，异丙醇约和2.5倍体积的乙醇效果相当，但核酸微溶于乙醇，使用乙醇沉淀会使部分核酸溶解损失;所以多选用-20度预冷异丙醇。核酸在异丙醇的溶解度更低，所以用异丙醇来沉淀更完全。异丙醇易溶于CTAB，但不与核酸相溶。 2.10000r/min离心10分钟,小心倒去上清液。  目的：第三次离心使核酸沉淀到管底。

(五)核酸的洗涤

用400ul无水乙醇洗涤核酸沉淀直至无色，10000r/min离心10分钟，倾去上清液晾干。  目的：异丙醇不易挥发，所以用乙醇洗去异丙醇及多余的NaCl，乙醇挥发快。

(六)保存

向下层离心物中加入100μl TE缓冲液进行溶解，臵于-20℃冰箱保存，以便下次课用。  目的：一般长期保存DNA，贮存在TE缓冲液中比较好。TE为含EDTA的Tris-HCl(PH 8.0)缓冲液：其中比较关键的成分是EDTA，日常环境中不可避免的存在DNase，而DNase的活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。TE中含有的EDTA可以螯合金属离子，从而使DNase失活。而Tris-HCl的作用主要是维持一定碱性PH值，有助于DNA的溶解和稳定。不加EDTA也是可以的，而且EDTA会影响下游酶切，连接反应以及质粒转染进细胞的效率，如果接下来要做这些实验是应该避免使用含EDTA的缓冲液的。短期储存DNA也可以使用ddH2O，有助于DNA连接等效果。

八、实验注意事项

1.在整个实验过程中应严格执行无菌操作; 2.部分药品有毒，操作中应注意安全防护;

3.磨样时最好是加液氮，磨样速度要快，使材料处于低温状态; 4.刚投入水浴时可以稍快速的晃动，之后的晃动一定要轻柔; 5.抽提时不要有太力振动，操作也要仔细，尽量避免DNA断裂;

6.将异丙醇吸出时用的枪头一定要剪过的，这点很重要，过尖的枪头会把DNA链弄断。

九、思考题

1.本实验中用到的各种试剂的作用是什么? 2.本实验中进行了几次离心操作，每次的目的?

十、实验安排

全班55人，按照学号分组，每6人一组，共9组，最后一组7人。 每组作3个离心管，共用一个研钵。

每3组(共18人9个离心管)共同进行离心操作。

第三篇：新冠病毒核酸检测流程及注意事项

新冠病毒核酸检测流程及注意事项

2

检测流程:

2

注意事项:

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核酸检测应知应会

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【什么是核酸检测?】

4

【什么是抗体检测?】

4

【谁可以申请核酸检测，个人可以申请吗，费用是多少?】

4

【哪里可以进行核酸检测?】

4

【检测如何进行，检测过程中我有感染风险吗?】

4

【检测呈阳性意味着确诊吗?】

5

【检测前我需要准备什么】

5

新冠病毒核酸检测流程及注意事项

为满足社会各方和群众对新冠病毒核酸检测的需求，进一步落实“外防输入、内防反弹”的总要求，推进核酸检测“应检尽检、愿检尽检”的原则，XX县人民医院面向社会提供新冠病毒核酸检测服务，现将检测流程及注意事项告知如下:

检测流程:

1.请使用电子健康卡就诊;

2.感染楼一楼发热门诊开具检测单;

3.感染楼一楼东大厅检验窗口打印采集条码;

4.感染楼一楼西大厅采集咽拭子;

5.核酸检测一般于当天或第二天出结果。

注:因近日核酸检测人数较多，我院检验科力争在24小时内出具检测结果，如未在上述时间内查询到结果，还请您耐心等待，或拨打电话咨询。检验科咨询电话:XXXXXXXXXXX,XXXXXXXXXXX

注意事项:

1.在做核酸检测前2小时尽量避免进食，以免引起呕吐;

2.在采集口咽拭子时检测者头后仰，张口发出「啊」音，有助于暴露咽喉，但过程中会出现刺激性干咳、恶心、呕吐等症状，检测者可配合采集人员尽量放松、深呼吸;

3.请做好个人防护，注意手卫生，全程戴口罩，只有在核酸检测采样时才能取下口罩，采样完毕请立即戴好口罩;

4.为了您的安全，请自觉排队，尽量减少交谈，保持1米以上的距离;

5.前来检测人员需如实向医生提供自己的既往病史、流行病学史等，这将是后续诊疗的重要依据。

咨询电话:XXXXXXXXXXXX

检测地址:XX县人民医院感染楼一楼

核酸检测应知应会

【什么是核酸检测?】

即采集人体分泌物后，在实验室条件下，通过分析病毒的RNA基因序列，利用PCR扩增的方法进行检测，进行临床病原学的诊断。目前，核酸检测是及早确定病人是否感染病毒，早发现、早治疗最有效的检测方法。

【什么是抗体检测?】

血清抗体检测就是抽血检测人体对病毒的免疫反应，如果近期有感染新冠病毒，人体会及时产生抗体与病毒抗衡。抗体检测操作简单方便，适用于大量疑似病例、既往感染者和无症状感染者检测初步筛查。

【谁可以申请核酸检测，个人可以申请吗，费用是多少?】

可以。除国家规定的新冠肺炎确诊病例、出院病例、疑似病例、密切接触者等人群必须进行核酸检测外，建议有国内外疫区旅居史的居民或曾直接、间接与确诊、疑似病例短暂接触过的市民进行检测。有工作、就医需要的人员也可以自愿自费进行核酸检测。一般费用在150-200元左右。因疫情形势和地区不同，有的地区免费检测!

【哪里可以进行核酸检测?】

目前国内大部分省级、地级城市的三级医疗机构均可提供新冠病毒核酸检测及新冠病毒核酸抗体检测，具体可咨询当地医疗机构。

【检测如何进行，检测过程中我有感染风险吗?】

采样过程，医生会用一根像棉签一样的拭子去擦拭咽部及扁桃体、或是鼻腔周围的分泌物，只要“轻轻一抹”，快捷、无痛苦。医疗机构会针对检测区域消毒，医护人员会也进行手部消毒，避免交叉感染。一般来说，采样过程安全清洁，无需担心感染风险。

【检测呈阳性意味着确诊吗?】

目前核酸检测试剂的灵敏度和特异性还有限，可能出现假阳性或假阴性，一次检测阳性并不就是确诊。根据国家卫健委发布的诊疗方案，需要结合肺部CT诊断和临床症状才能确诊新冠肺炎。

【检测前我需要准备什么】

检测前保持口腔清洁，为避免食物残渣对分泌物采集的影响，应尽量空腹进行检测。待诊期间佩戴口罩，自觉保持一米以上安全距离。

第四篇：住房公积金提取流程

提取业务

住房公积金提取业务缴存人按规定将本人住房公积金账户的存储余额全部或部分取出的行为。

一、住房公积金使用性提取

(一)使用性提取条件 缴存住房公积金职工凡符合下列情况之一的，职工本人或其法定继承人，受遗赠人、被委托单位可提取住房公积金：

1、购买自住住房(包括现房、期房、房改房、集资建房、拆迁建房、经济适用房、二手房)(下同);

2、建造、翻建、大修自住住房;

3、偿还住房贷款本息;

4、房租超过家庭工资收入规定负担比例。

(二)使用性提取政策规定

1、职工购买自住住房提取公积金。

①职工购买首套自住住房，可一次性提取职工夫妻双方公积金，提取之和不得超过该套房房价总额。②职工购买第二套房，可一次性提取夫妻双方公积金账户内余额的50%，但不得超过第二套房房价的50%，购买第三套及以上住房不予提取公积金。

③以上提取时限均在购房一年以内，日期以 “不动产发票”或“契税税票”为准(下同)。

2、职工为子女购买自住住房提取公积金。

①职工为子女购买自住住房视同家庭第二套房，可一次性提取夫妻双方公积金账户余额的50%，但不得超过房价的50%。

②职工为子女购买二套以上住房，则不予提取公积金。

③职工子女购买住房已申请公积金贷款的，不得以此套住房名义提取职工公积金。 以上提取时限均在购房一年以内。

3、职工为拆迁还建房提取公积金。 职工因自住住房拆迁房还建需补偿差额资金的，拆迁协议一年内可提取夫妻双方公积金余额，但提取金额不得超出补偿差额资金总额。

4、职工偿还住房贷款本息提取公积金。

①职工购买自住住房申请公积金贷款或商业贷款，自贷款发放之日起，满一年后可提取夫妻双方账户内公积金用于还贷，每次提取还贷时间间隔需满一年以上(最长不超过5年)，每次提取金额不得超过间隔时间还贷本息之和，直到贷款还清。

②职工提取公积金还贷，自贷款发放之日起满一年以后可提前提取公积金部分还贷和一次性提取还清贷款余额(一次性提取金额不超过贷款余额)。

③职工购买自住住房已提取公积金，又以此套住房申请商业贷款的，不得提取公积金还贷;

5、建造、翻建、大修自住住房提取。 职工建造、翻建、大修自住住房可在主体结构封顶或竣工后一年内提取夫妻双方账户内公积金余额，但提取总额不得超过工程造价总额。

6、房租超过家庭工资收入的规定负担比例提取。 无房户职工年房租支出超过家庭年工资收入40%的，在住房租赁期内每年可提取公积金一次，每次提取不超过年房租支出总额。 住房公积金贷款和购房提取业务同时只能办理一个，不得在申请住房公积金贷款的同时，又以购房名义办理提取业务。

(三)使用性提取所需资料职工提取住房公积金时，由本人领取或下载打印相应的提取住房公积金审批表，单位审核盖章后提供下列资料的原件和复印件。

1、购买自住住房提取

①购买现房的，提供房屋产权证和契税税票;购买期房的，提供购房合同和首付款发票;;购买二手房的，

提供过户后的房屋产权证和契税税票。

②本人身份证;

③住房公积金卡;

④住房公积金提取审批表;

⑤房管局住房套数证明;

⑥提取方为家庭成员时，还须提供本人身份证、结婚证或户口簿。

⑦购买十堰市以外地区住房的，需提供当地房管部门的房产登记证明。

2、拆迁还建房提取

①拆迁协议;

②还建房房产证;

③契税税票;

④本人身份证;

⑤住房公积金卡;

⑥住房公积金提取审批表;

⑦提取方为家庭成员时，还须提供本人身份证、结婚证或户口簿;

3、建造自住住房提取建设中(主体结构封顶)提取：

①建设用地许可证;

②建设工程规划许可证;

③施工许可证;

④工程预算书;

⑤本人身份证;

⑥住房公积金卡;

⑦住房公积金提取审批表;

⑧提取方为家庭成员时，须提供本人身份证、结婚证或户口簿;竣工后提取：

①房产证;

②契税税票;

③工程结算书;

④本人身份证;

⑤住房公积金卡;

⑥住房公积金提取审批表;

⑦提取方为家庭成员时，须提供结婚证、户口簿。

4、翻建、大修自住住房提取

①提供房屋所在地房产管理部门出具的危房鉴定书;

②建委同意翻建、大修批文;

③施工合同及写明本人(或配偶)姓名的购买建筑材料发票;

④工程预算书;

⑤房屋所有权证;

⑥本人身份证;

⑦住房公积金卡;

⑧提取住房公积金审批表;

⑨提取方为家庭成员时，还须提供本人身份证、结婚证或户口簿。

5、偿还贷款本息提取住房公积金贷款：

①住房公积金还贷明细表;

②提取住房公积金审批表;

③本人身份证;

④住房公积金卡;

⑤提取方为家庭成员时，还须提供本人身份证、结婚证或户口簿。

商业银行贷款：

①银行借款合同;

②借款人征信报告;

③近三个月还款记录;

④提取住房公积金审批表;

⑤本人身份证;

⑥住房公积金卡;

⑦提取方为家庭成员时，还须提供本人身份证、结婚证或户口簿。

6、房租超出家庭工资收入规定比例提取

①家庭成员工资收入证明。

②经房产管理部门登记备案的房屋租赁合同;

③房租付款发票或收据

④房管局无房证明;

⑤个人征信报告;

⑥提取住房公积金审批表;

⑦本人身份证;

⑧住房公积金卡;

⑨提取方为家庭成员时，还须提供本人身份证、结婚证或户口簿。

二、住房公积金非使用性(销户)提取 职工及配偶凡符合下列情况之一且尚无未结清住房公积金贷款，可提取本人住房公积金账户内的公积金余额：

(一)非使用性提取条件

1、离休、退休的;

2、因完全丧失劳动能力且与所在单位终止劳动关系又无接受单位的;

3、与单位终止劳动关系，且户口不在本市或者户口迁出十堰市或者出境定居的;

4、与所在单位终止劳动关系，男职工年满55周岁，女职工年满50周岁的;

5、住房公积金账户转入集中托管户满5年或与原单位终止劳动关系满5年仍未重新就业的

6、调离十堰市在外地就业;

7、死亡或者被宣告死亡的;

(二)非使用性提取规定

1、凡符合非使用性提取条件之

1、

2、

3、

4、

5、7种情况的，可一次性提取本人账户内公积金余额;

2、调离十堰市的，其本人账户内住房公积金原则上电汇至外地住房公积金管理中心。

(三)非使用性提取所需资料职工提取住房公积金时，由本人领取或下载打印相应的提取住房公积金审批表，单位审核盖章后提供下列资料的原件和复印件。

1、离休、退休提取

①离休、退休证或批文;

②提取住房公积金审批表;

③本人身份证;

④住房公积金卡。

2、完全丧失劳动能力并与单位终止劳动关系提取

①劳动部门出具的伤残职工劳动能力鉴定书;

②与单位解除劳动关系的协议;

③提取住房公积金审批表;

④本人身份证;

⑤住房公积金卡。

3、与单位终止劳动关系提取

①属外地在十堰从业人员的，需提供户籍证明、《失业证》或《再就业优惠证》;

②户口迁出十堰市的，需提供公安机关出具的户口迁出证明、《失业证》或《再就业优惠证》; ③出境定居的，需提供出境定居批文或移民签证;

④男职工年满55周岁，女职工年满50周岁的，需提供与单位解除劳动关系的协议; ⑤提取住房公积金审批表;

⑥本人身份证;

⑦住房公积金卡;

4、住房公积金账户集中托管满5年或终止劳动关系满5年仍未重新就业提取

①《失业证》或《再就业优惠证》;

②与单位解除劳动关系协议;

③提取住房公积金审批表;

④本人身份证;

⑤住房公积金卡。

5、死亡或被宣告死亡提取

①死亡证明书或派出所的户口死亡注销证明或被宣告死亡的法律文件;

②合法继承人或受遗赠人身份证、结婚证或户口簿;

③公安部门或公证部门出具的继承人或受遗赠人与该职工关系的合法证明、证件;④提取住房公积金审批表;

⑤经办人身份证

6、调离十堰市提取

①调入行政事业单位的需提供调令和调出单位领导签字证明，

②调入企业的需提供与外地用工单位签订的劳动合同和调入单位缴纳的社会保险证明。③提取住房公积金审批表;

④本人身份证;

⑤住房公积金卡。

三、办理期限：3-5个工作日。

第五篇：油田公积金提取流程

油田公积金网址：http://10.66.150.5/index.jsp

服务指南

点击你需要查询的按钮进入 提取例：

支取业务流程--第一步：根据提取条件准备资料

第一步：根据提取条件准备资料

申请人身份证明：

本人申请提取的，提供身份证明;非本人申请提取的，需要有委托书和双方身份证明或其他法定的可以申请提取的证明。

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购买自住住房提取住房公积金提供的材料：

1、购买新建住房的，提供购房合同(协议、成交确认书)和发票(收据)。

2、购买非胜利石油管理局住房交易中心(以下简称交易中心)管理的二手房的，提供买卖合同、契税完税证、交易费票据。

3、购买交易中心管理的二手房，提供成交确认书、交易手续费收据。

4、用于大修自住住房的，提供原房产(地)权证及地市一级房管部门部门房管部门关于房屋大修的有关证明、大修费用结算报告等。

职工销户提取住房公积金提供的材料：

1、离退休的，提供离退休证原件，也可由单位人事部门出具离退休文件或离退休证明。

2、因与单位终止劳动关系的，提供解除劳动合同证明文件。

3、因职工死亡或者被宣告死亡的，其继承人、受遗赠人需提供当地医院或户籍管理部门开具的死亡证明。

偿还贷款本息提取住房公积金提供的材料：

1、偿还油田住房公积金贷款本息的，提供银行扣款证明。

2、偿还商业性自住住房贷款本息的，提供借款合同、银行扣款证明。

非本人购房提取住房公积金还需提供的材料：

1、配偶申请提取的，须同时提供《结婚证书》或《居民户口簿》等有效关系证明。 2.申请提取父母或子女住房公积金的，应提供以下证明材料： (1)按照购买、翻建、大修自住住房的要求提供资料; (2)由单位开具关系证明。

家庭生活严重困难提取住房公积金提供的材料：

1、租赁廉租住房，房租超出家庭工资收入15%的，提供房管部门开具的交纳租金票据。

2、享受城镇最低生活保障的，提供城市居民最低生活保障金领取证明。

3、职工遇有突发事件造成家庭生活严重困难的，应提供以下证明材料： (1)单位工会或有关部门出具的证明材料; (2)个人承担费用的明细发票;

(3)单位劳资部门出具的家庭收入证明。

4、本人、配偶和直系亲属患重大疾病造成家庭生活严重困难的，应提供以下证明材料： (1)县级以上医院的诊断证明及个人承担的药费支出清单;

(2)职工配偶或直系亲属患重大疾病，提供能证明与本人关系的证明材料; (3)职工所在单位工会部门核实后出具的家庭生活困难情况证明。

特殊情况的提取规定：

1、协助法院强制提取，按照中心的要求提供相关材料。

2、判刑人员解除劳动合同的，还需要提供刑事判决书。